環(huán)保的標(biāo)語范文

時(shí)間:2023-03-27 11:12:18

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環(huán)保的標(biāo)語

篇1

廁所環(huán)保標(biāo)語【經(jīng)典篇】

1. 如廁后請(qǐng)勿忘關(guān)閉水龍頭。

2. 不需要“涌泉”相報(bào),只需止水之恩。

3. 向前一小步。文明一大步(男)。

4. 前進(jìn)一小步,文明一大步。

5. 情不在切,貼心就行;“紙”不在多,夠用就行。

6. 一紙一屑煞文明,一舉一動(dòng)顯文明。

7. 請(qǐng)您”方便”后記得要沖洗。

8. 如廁后請(qǐng)沖水,不要亂丟雜物。

9. 衛(wèi)生用品包好再扔,體諒打掃者的辛勞。

10. 對(duì)準(zhǔn)了位置解決內(nèi)急,你好,我好,大家好!

11. 只需舉手之勞,便可清潔一新。

12. 文明向前看一小步。文明一大步。

13. 沖刷精神,一切為用戶著想。

14. 今天你沖了嗎?

15. 請(qǐng)不要在小便池內(nèi)拉屎。

廁所溫馨提示標(biāo)語【精選篇】

1. 克服不良習(xí)慣,養(yǎng)成文明行為。

2. 來也匆匆,去也沖沖。

3. 沖一沖,你好,我也好。

4. 當(dāng)我們心情愉快的時(shí)候,也別忘了讓廁所的心情和我們一樣愉快喲!

5. 上前一小步,文明一小步,用完快沖水,衛(wèi)生你我他。

6. 輕輕按一下,清新你我他。

7. 按下這里,你會(huì)有一個(gè)驚喜。

8. 手紙請(qǐng)放紙簍里便后請(qǐng)用水沖洗洗。

9. 設(shè)備真可貴,公德不可退。

10. 若您如廁功告成,順手沖水了無痕。

11. 你清潔,我衛(wèi)生,齊齊健身心。

12. 同志們,沖啊!

13. 如果你不給別人方便,你將不能”方便”。

14. 您瞅準(zhǔn)了,按這里沖。一般人我不告訴他。

15. 如果你不沖刷廁所,你將是歷史的罪人。

廁所宣傳標(biāo)語【集錦篇】

1. 干干凈凈牌沖刷器,用過就知道。

2. 拉屎不沖,天理難容!

3. 誰按誰精神,您瞅準(zhǔn)了,就按這里。

4. 文明手底下方便你我他。

5. 請(qǐng)您”方便”后一定要:洗刷刷洗刷刷,洗刷刷洗刷刷。

6. 隨手沖一沖,干凈又輕松!

7. 同志們請(qǐng)沖一沖啊!

8. 文明生活從小做起。

9. 飛流直下一兩尺,記得沖水大拇指。

10. 愛護(hù)公共設(shè)施,是你我應(yīng)盡的責(zé)任。

11. 大環(huán)境,小環(huán)境,干凈才有好心情。

12. 貼近文明,靠近方便。

13. 如廁沖水了無痕,道德水準(zhǔn)功告成。

14. 今天,你沖了嗎?

15. 起身沖一沖,大家都輕松。

16. 廁所衛(wèi)生要注意,干凈清潔要保持。

17. 廁所衛(wèi)生要注意,干凈清潔常保持。

18. 匆匆走?別!沖沖再走!

19. 按一按,清潔又流暢。

20. 高高興興方便,輕輕松松沖刷。

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2.衛(wèi)生間環(huán)境標(biāo)語

3.創(chuàng)意衛(wèi)生環(huán)保標(biāo)語

篇2

有關(guān)環(huán)保方面的警示標(biāo)語欣賞1、與自然重建和諧,與地球重修舊好。

2、你的星球需要你,聯(lián)合起來應(yīng)對(duì)氣候變化!

3、保護(hù)戈壁植被,防止沙塵污染,保護(hù)大氣環(huán)境。

4、沒有地球的健康就沒有人類的健康與自然重建和諧,與地球重修舊好垃圾混置是垃圾,垃圾分類是資源。

5、保護(hù)環(huán)境,保存希望。

6、加強(qiáng)環(huán)境宣傳教育,提高全民環(huán)境意識(shí)。

7、揀回垃圾分類老傳統(tǒng),倡導(dǎo)綠色文明新時(shí)尚。

8、破壞環(huán)境,就是破壞我們賴以生存的家園。

9、土壤不能再生,防止土壤污染和沙化,減少水土流失。

10、保護(hù)環(huán)境是一項(xiàng)必須長期堅(jiān)持的基本國策。

11、拯救地球,一起動(dòng)手。

12、不要旁觀,請(qǐng)加入行動(dòng)者的行列。

13、保護(hù)水環(huán)境,節(jié)約水資源。

14、追求綠色時(shí)尚,擁抱綠色生活。

15、垃圾回收,保護(hù)地球,舉手之勞,參與環(huán)保。

16、今天節(jié)約一滴水,留給后人一滴血。

17、善待地球就是善待自己。

18、讓經(jīng)濟(jì)發(fā)展的浪潮進(jìn)入綠色的河道。

19、建設(shè)美麗的邊疆,愛護(hù)我們的家園。

20、破壞環(huán)境,禍及千古,保護(hù)環(huán)境,功蓋千秋。

21、把消費(fèi)限制在生態(tài)圈可以承受的范圍內(nèi)破壞環(huán)境,禍及千古,保護(hù)環(huán)境,功蓋千秋。

22、人類若不能與其他物種共存,便不能與這個(gè)星球共存。

23、環(huán)境與人類共存,資源開發(fā)與環(huán)境保護(hù)協(xié)調(diào)。

24、促綠色消費(fèi),做綠色選民。

25、地球是我們從后代手中借來的、環(huán)保不分民族,生態(tài)沒有國界不要旁觀,請(qǐng)加入行動(dòng)者的行列今天節(jié)約一滴水,留給后人一滴血。

有關(guān)環(huán)保方面的警示標(biāo)語分享1. 熱帶雨林——地球的肺

2. 愛護(hù)我們的地球從點(diǎn)點(diǎn)滴滴做起

3. 花草叢中笑,園外賞其貌

4. 酸雨是地球萬物的共同敵人

5. 水-----20億人生命之所系

6. 索取資源力求簡單,利用資源轉(zhuǎn)化完全

7. 合理利用自然資源,有效保護(hù)生態(tài)平衡

8. 欲攬春*入自家,無可奈何成落花

9. 保護(hù)生物多樣性

10. 小草對(duì)您微微笑,請(qǐng)您把路繞一繞

11. 積極推展減廢運(yùn)動(dòng),落實(shí)做好廢棄管理

12. 保護(hù)環(huán)境是責(zé)任,愛護(hù)環(huán)境是美德

13. 遵守法律法規(guī),防治環(huán)境污染

14. 人人提案創(chuàng)新,成本自然降低

15. 種樹種草,有利環(huán)保

16. 環(huán)境與人類共存,開發(fā)與保護(hù)同步

17. 草兒可愛,大家愛

18. 購買尾氣排放達(dá)標(biāo)的汽車

19. 水是生命之源,節(jié)約用水就是保護(hù)環(huán)境

20. 地球是我家,綠化靠大家

21. 提高環(huán)境保護(hù)意識(shí),愛護(hù)我們共有家園

22. 距離產(chǎn)生美,謝絕親密接觸

23. 綠色——生命之源

24. 建設(shè)綠色企業(yè),堅(jiān)持綠色經(jīng)營

25. 種一棵樹,種一枝花,世界會(huì)更美好

有關(guān)環(huán)保方面的警示標(biāo)語推薦1. 多栽一棵樹,就給人類多增添一絲生存的希望。

2. 朋友,請(qǐng)給鳥兒多一片溫暖的天空,請(qǐng)給魚兒多一點(diǎn)娛樂的天地。

3. 含一滴水,還一份真情!

4. 地球不僅僅是人類的家園,更是所有生物的家園。

5. 用我們的雙手,保護(hù)我們的地球。

6. 讓我們?yōu)榈厍驄寢尮餐瑩纹鹨话丫G傘。

7. 我們?yōu)樘烊毁Y源越來越少而傷心,地球?yàn)槲覀兤茐馁Y源而哭泣。

8. 利用地球資源是為了人類更好地生存,保護(hù)地球環(huán)境是人類為了生存得更久。

9. 保護(hù)我們的家園,讓地球充滿綠色。

10. 保護(hù)環(huán)境,有益健康。

11. 沒有綠色,生命就沒有希望。

12. 你是否聽見,地球媽媽在哭泣。

13. 把綠色還給地球。

篇3

1、有了您的真心呵護(hù),學(xué)校才會(huì)更加美麗!

2、學(xué)校是我家,人人都愛它。

3、踏破青氈可惜,多行數(shù)步無妨。

4、建設(shè)綠色校園,增強(qiáng)環(huán)保意識(shí)。

5、給我一片綠,還你一片蔭。

6、請(qǐng)您愛護(hù)綠色,綠是生命之源。

7、手上留情花自香,腳下留意草如茵。

8、花木有情報(bào)春暉,同學(xué)愛護(hù)喜心扉。

9、樹木擁有綠色,地球才有脈搏。

10、美化生活,凈化心靈。

11、只要給予一些愛,就能給你帶來郁郁蔥蔥的綠蔭。

12、少一個(gè)腳印,多一份芳香。

13、小草給我一片綠,我給小草一份愛。

14、綠色是我們的家園。

15、輕輕地我走了,正如我輕輕地來。(圖書館)

16、綠色明亮了我們的眼睛,是為了讓我們看清足下綠的生命。

17、當(dāng)你不要我時(shí),請(qǐng)把我送回家。

18、小草對(duì)您微微笑,請(qǐng)您把路讓一讓。

19、別在綠色消失時(shí),我們才去后悔。

20、青青小草有生命,請(qǐng)君足下留情。

21、保護(hù)學(xué)校環(huán)境,共創(chuàng)學(xué)生圣地!

22、除了足跡,什么都不能遺留;除了回憶,什么都不要拎走。

23、多一聲謝謝,多一個(gè)朋友,多一聲抱歉,多一份寬容。

24、請(qǐng)您足下繞一繞,草兒向您笑一笑。

25、你來繞一繞,我來笑一笑。

26、繞行三五步,留得芳草綠。

27、草兒綠、花兒香,環(huán)境優(yōu)美人健康!

28、芳草依依,大家憐惜。

29、創(chuàng)造綠色時(shí)尚,擁抱綠色生活。

30、輕輕抬起你的小腳,我在你的腳下微笑。

31、人人都來愛護(hù)它,世界才會(huì)更美妙。

32、小花小草傳芳香,請(qǐng)你把路繞一繞。

33、愛無限,綠無邊。

34、編織愛心,保護(hù)環(huán)境。

35、你珍惜我的生命,我還你一片綠蔭。

36、注意了,每個(gè)人都看見你在這里的一舉一動(dòng)。(走廊)

37、小草青青,花香飄飄;青草鮮花,應(yīng)當(dāng)愛惜。

38、我愛花,我愛草,我愛青青小樹苗。

39、我很怕羞,請(qǐng)別碰我!

40、拯救地球,一起動(dòng)手。

41、心中有情,腳下留情。

42、創(chuàng)建綠色校園,從你我做起。

43、心動(dòng)不如行動(dòng),去怨不如去干。

44、人類只有好好地對(duì)待大自然,大自然才能無限地回報(bào)人類。

45、花香陣陣,鳥鳴聲聲。瑯瑯書聲,濃濃情深。

46、小草正睡覺,請(qǐng)你勿打擾。

47、環(huán)境好,生活就好。

48、用愛心呵護(hù)每一片綠色。

49、請(qǐng)讓我們的腰桿永遠(yuǎn)挺直!

50、少一串腳印,多一份綠意。

51、它失去了保護(hù),我們就失去了健康。

52、綠色校園,綠色生活。

53、鮮花還需綠葉扶,學(xué)校更需同學(xué)護(hù)!

54、問壇哪得綠如許,為有大家來愛護(hù)!

55、天是藍(lán)的,草是綠的,心是純粹的。

56、如果沒有樹木,世界將會(huì)暗淡無光。

57、保護(hù)環(huán)境,從我做起。

58、你揮一揮袖,不帶走一片云彩。我動(dòng)一動(dòng)手,不留下任何紙屑。

59、請(qǐng)讓我們的校園永遠(yuǎn)充滿綠色。

60、手下留情花更艷,腳下留情草更翠。

61、一花一草皆生命,一枝一葉總關(guān)情。

62、花草樹木都是寶,沒它我就不行了。

63、保護(hù)環(huán)境,少說多做,讓校園成為綠色的殿堂。

64、茵茵綠草地,腳下請(qǐng)留情。

65、勸君多走幾步路,莫把草坪當(dāng)馬路。

66、喝潔凈的水,呼吸新鮮的空氣,這需要您每時(shí)每刻愛護(hù)環(huán)境!

67、追求綠色時(shí)尚,擁抱綠色生活。

68、小草青青,腳下留情。

69、走一走,看一看,花紅柳綠美無限。

70、多一份綠色,多一份健康。

71、花草是我的朋友,請(qǐng)多一份愛護(hù)!

72、人人參與環(huán)境保護(hù),個(gè)個(gè)爭當(dāng)綠色天使。

73、大路隨你走,別踩在我頭。

74、少一個(gè)腳印,多一個(gè)生命,不銹鋼水箱。

75、創(chuàng)建環(huán)保模范城市建設(shè)環(huán)保綠色家園

76、不要讓白色的面紗罩在我綠色的笑顏上。

77、小草青青,腳步輕輕。

78、綠色象征生命,珍惜生命,環(huán)保第一。

79、水孕育和維持著地球上的生命,誰來關(guān)愛水的生命!

80、保護(hù)環(huán)境從我做起,愛護(hù)學(xué)校從學(xué)生做起。

81、青青綠葉紅花,豈能肆意踐踏(請(qǐng)勿踐踏草坪)

82、改善民生,共享水利發(fā)展成果

83、綠色,永恒的美;校園,永遠(yuǎn)的家!

84、珍惜資源永續(xù)利用,綠化環(huán)境凈化心靈。

85、讓綠色看得見,讓綠色聽得見。

86、青山清我目,流水靜我耳。

87、賞花愛花花更美,觀景惜景景更幽。

88、追求綠色時(shí)尚、走向綠色文明。

89、給我一份愛,送你一片綠

90、保障飲水安全,維護(hù)生命健康

91、8.節(jié)約為本,治污優(yōu)先

92、你的行動(dòng)代表花的未來。

93、當(dāng)你昂首闊步時(shí),我在你腳下。

94、一草一木皆生命,一枝一葉總關(guān)情。

95、堅(jiān)持團(tuán)結(jié)治水,構(gòu)建和諧流域

96、垃圾箱:請(qǐng)你近距離投籃。

97、全面規(guī)劃,統(tǒng)籌兼顧,推進(jìn)水利協(xié)調(diào)發(fā)展

98、讓校園陽光普照,讓綠色神圣美妙。

99、讓花兒含笑,讓草兒傳情,讓心兒綻放。

100、鳥兒渴望潔凈的天空,人類渴望綠色的家園。

101、小草微微笑,請(qǐng)你繞一繞。

102、人重臉,樹重皮,請(qǐng)勿墻上留痕跡。

103、今天節(jié)約一滴水,留給后人一滴血。

104、撿起片片紙,傳遞深深情。

105、邁步留意地下草,撣指莫折枝頭花。

106、要想校園凈又美,健康文明記心里。

107、節(jié)約用水就是珍惜生命。

108、堅(jiān)持人水和諧,建設(shè)生態(tài)文明

109、花兒以花香回報(bào)我們,我們只需腳下留情。

110、環(huán)境你不愛,美景不常在。

111、建環(huán)保模范城市創(chuàng)美好幸福生活

112、節(jié)電環(huán)保標(biāo)語:節(jié)約能源,大有可為,功在當(dāng)代、利在千秋

113、保護(hù)綠地標(biāo)語:不要踩我啊。我也會(huì)疼的……

114、保護(hù)生態(tài)環(huán)境,就是愛護(hù)自己。

115、保護(hù)環(huán)境,保護(hù)自然就是保護(hù)人類自己。

116、我們是幼苗,我們都需要呵護(hù)。

117、乘陰靠綠樹,美化靠大家。

118、水資源是有限的,生命之河是無限的。

119、同建綠色校園,共享鳥語花香。

120、珍惜水,保護(hù)水,讓水造福人類。

121、珍惜水資源,保護(hù)水環(huán)境,防治水污染

122、樹環(huán)保之風(fēng),迎美好明天。

123、珍愛生靈、節(jié)約資源、抵制污染、植樹護(hù)綠。

124、學(xué)校一片綠,學(xué)生心中一片春。

125、為了美麗家園,請(qǐng)從小事做起。

126、同花兒一起開放,和小樹一起成長。

127、鳥語花香,愛賞共享。

128、幸福生活不只在于豐衣足食,也在于碧水藍(lán)天。

129、愛護(hù)小草吧,它是春天的信使!

130、保護(hù)水環(huán)境,節(jié)約水資源。

131、實(shí)施科教興國與可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略。

132、學(xué)校是我家,保護(hù)環(huán)境靠大家。校園是我家,衛(wèi)生靠大家。

133、加強(qiáng)環(huán)境宣傳教育,提高全民環(huán)境意識(shí)。

134、伸出你的手,伸出我的手,讓紙屑遠(yuǎn)離我們的校園。

135、美好的校園環(huán)境,需要大家共同建設(shè)和創(chuàng)造。

136、為了校園更美,請(qǐng)勿摘花。

137、拯救地球就是拯救未來。

138、用我們的愛心,迎來校園的一片綠。

139、自然不可改良、生活可以選擇選擇綠色生活、健康適度消費(fèi)

140、愛花、愛草、愛樹、愛校園。

141、青草綠樹你我他咱們同住一家

142、學(xué)校是我家,綠化靠大家。

143、你栽一棵樹,我栽一棵樹,我們共同為校園添綠。

144、少生孩子多種樹【有點(diǎn)搞笑…】

145、青山清我目、流水靜我耳

146、讓校園成為綠色殿堂。

147、保護(hù)環(huán)境就是保護(hù)我們自己。

148、除了足跡,我們什么也沒有留下;除了攝影,我們什么也沒有帶走為了子孫后代,請(qǐng)留下一片凈土

149、萬人齊參與,共建‘綠色生命樹’

150、讓綠色的希望從校園萌芽。

151、贊化天地、道法自然

152、保護(hù)樹木,就是保護(hù)我們?nèi)祟?/p>

153、學(xué)校是我家,美化靠大家。

154、讓校園變成綠色家園,讓祖國變成綠色寶庫。

155、珍惜自然資源,共營生命綠色。

156、保護(hù)環(huán)境是一項(xiàng)必須長期堅(jiān)持的基本國策。

157、家園由我來保護(hù)。

158、保護(hù)樹木是第一。

159、保護(hù)地球,就從美化校園開始吧!

160、保護(hù)環(huán)境,造福人民。

161、校園整潔,大家開心。

162、綠色——永恒的美;學(xué)校——永遠(yuǎn)的家。

163、但存方寸地,留與子孫耕。

164、保護(hù)藍(lán)天碧水。

165、土壤不能再生,防止土壤污染和沙化,減少水土流失。

166、美好校園需要我們共同建設(shè)。

167、美麗的校園,美麗的家,永遠(yuǎn)的美麗靠大家

168、學(xué)校是我家,環(huán)??看蠹摇?/p>

169、郁郁蔥蔥,創(chuàng)新州

170、草木無情皆愿翠行人有情多愛惜

171、環(huán)境與人類共存,資源開發(fā)與環(huán)境保護(hù)協(xié)調(diào)。

172、人間知音難覓,校園草坪難培。

173、建設(shè)美麗的邊疆,愛護(hù)我們的家園。

174、校園是我家,美麗靠大家。

175、保護(hù)環(huán)境系各人,美化校園靠大家。

176、尊崇自然、敬畏生命

177、環(huán)境保護(hù),人人有責(zé)。

178、把綠色帶入校園。

179、美我校園重在每一舉動(dòng)。

180、環(huán)境保護(hù)從我身邊做起。

181、花草樹木對(duì)人笑,因?yàn)槿祟悙郗h(huán)保。

182、我是有生命的軀干,你是有德行的賢君

183、人類離不開花草,就像嬰兒離不開母親的懷抱。

184、1998年6月5日世界環(huán)境日主題是:"為了地壞上的生命-拯救我們的海洋"。

185、破壞環(huán)境,就是破壞我們賴以生存的家園。

186、有限的資源,無限的循環(huán)。

187、保護(hù)環(huán)境是每一位公民應(yīng)盡的責(zé)任。

188、舉手之勞,美化校園。

189、多種一棵樹,世界上就多一片綠色

篇4

關(guān)鍵詞 .net環(huán)境 報(bào)表應(yīng)用與管理 工作效率 優(yōu)化與改進(jìn) 現(xiàn)實(shí)意義

中圖分類號(hào):TP3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

0前言

目前.net環(huán)境下報(bào)表的應(yīng)用研究主要是針對(duì)水晶報(bào)表設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)來進(jìn)行,因此本次研究工作選取了水晶報(bào)表作為研究對(duì)象,依據(jù).net環(huán)境下對(duì)報(bào)表的需求來深入分析報(bào)表設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn),以此來推動(dòng)相關(guān)研究工作進(jìn)一步發(fā)展,提高實(shí)際報(bào)表管理與應(yīng)用工作效率做出應(yīng)有的貢獻(xiàn)。

1 基于.net環(huán)境下報(bào)表應(yīng)用需求研究

互聯(lián)網(wǎng)是一個(gè)開放性平臺(tái),人們可以隨時(shí)隨地通過訪問網(wǎng)絡(luò)來搜集感興趣的信息以滿足工作需要,在很大程度上提高了實(shí)際工作效率,促進(jìn)了生活工作方式變革。.net環(huán)境下報(bào)表的應(yīng)用與管理將不再局限于某一個(gè)領(lǐng)域,而是通過網(wǎng)絡(luò)信息資源的共享與交流來滿足全面具體的應(yīng)用需求。因此針對(duì)報(bào)表的應(yīng)用與開發(fā)對(duì)滿足工作需要,推進(jìn)社會(huì)經(jīng)濟(jì)進(jìn)一步發(fā)展具有重要的促進(jìn)作用和現(xiàn)實(shí)意義。報(bào)表開發(fā)與應(yīng)用也將會(huì)朝著多元化發(fā)展,需要在實(shí)際工作中不斷研發(fā)與改進(jìn),以提高報(bào)表的實(shí)用性。因此基于.net環(huán)境下報(bào)表開發(fā)與應(yīng)用需要投入較多的精力來給予支持,以確保報(bào)表能夠緊隨時(shí)展要求,為社會(huì)輸出更多優(yōu)質(zhì)服務(wù)。

2 水晶報(bào)表概述

2.1水晶報(bào)表含義

Crystal Reports(水晶報(bào)表)是一款具有良好實(shí)用性的商務(wù)智能應(yīng)用軟件,主要用于日常工作中設(shè)計(jì)以及產(chǎn)生報(bào)表。水晶報(bào)表是目前世界范圍內(nèi)最專業(yè)、功能最全、操作性較高的報(bào)表應(yīng)用管理系統(tǒng),除了能夠滿足日常企事業(yè)單位生產(chǎn)所需之外,還能夠與絕大多數(shù)主流應(yīng)用工具實(shí)現(xiàn)無縫對(duì)接,從而延伸了報(bào)表的使用范圍,進(jìn)一步推動(dòng)了社會(huì)無紙化辦公進(jìn)程,有力的促進(jìn)了相關(guān)行業(yè)發(fā)展,具有重要的推動(dòng)作用與現(xiàn)實(shí)意義。

2.2水晶報(bào)表特點(diǎn)

2.2.1操作簡便、快捷

水晶報(bào)表相較于傳統(tǒng)報(bào)表應(yīng)用與管理方式具有明顯的優(yōu)勢(shì),在報(bào)表數(shù)據(jù)計(jì)算與整理過程中不需要將繁雜的數(shù)據(jù)進(jìn)行捆綁操作,從而有效節(jié)約了工作時(shí)間,很大程度上提高了工作效率。同時(shí)報(bào)表在進(jìn)行編輯過程中可以通過簡單操作就能夠輕松實(shí)現(xiàn),降低了報(bào)表操作與應(yīng)用難度,使得報(bào)表能夠成為日常辦公軟件之一得到有效推廣使用。目前水晶報(bào)表應(yīng)用已經(jīng)進(jìn)入了一個(gè)高峰階段,所帶來的社會(huì)效益與經(jīng)濟(jì)收益在很大程度上推動(dòng)了社會(huì)經(jīng)濟(jì)進(jìn)一步發(fā)展,日常辦公無紙化進(jìn)程進(jìn)一步加快,實(shí)現(xiàn)了經(jīng)濟(jì)社會(huì)可持續(xù)發(fā)展的總體社會(huì)目標(biāo)。

2.2.2水晶報(bào)表程序控制能夠滿足實(shí)際所需

水晶報(bào)表程序控制程序目前主要有拉(PULL)模式和推(OUSH)模式,根據(jù)實(shí)際工作需要選取科學(xué)合理的報(bào)表控制模式不僅能夠有效節(jié)約工作時(shí)間,還能夠在很大程度上促進(jìn)報(bào)表得到優(yōu)化和完善,具有較高的使用價(jià)值。在.net環(huán)境下,通過使用水晶報(bào)表不同程序控制模式可以有效降低數(shù)據(jù)庫連接消耗程度,提高系統(tǒng)自身的運(yùn)行性能具有重要的影響作用。隨著計(jì)算機(jī)不斷普及應(yīng)用,數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)也將隨之普及,因此為了能夠有效提高數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)運(yùn)行效率與使用價(jià)值,就需要針對(duì)報(bào)表連接消耗問題進(jìn)行有效解決,而實(shí)際研究也證實(shí)了水晶報(bào)表程序控制模式確實(shí)能夠?qū)崿F(xiàn)降低連接消耗的目的。

3 .net環(huán)境下報(bào)表應(yīng)用研究

3.1利用向?qū)е谱鲌?bào)表

利用向?qū)碇谱鲌?bào)表是實(shí)際工作中利用程度最高、應(yīng)用范圍最廣泛的報(bào)表生成方法,其主要是通過向?qū)У囊龑?dǎo)來完成所需要報(bào)表的設(shè)計(jì)與生成工作。具體步驟為:根據(jù)向?qū)е敢陆ㄒ粋€(gè)網(wǎng)站來添加報(bào)表,之后利用已經(jīng)存在的數(shù)據(jù)源來進(jìn)行報(bào)表內(nèi)容的進(jìn)一步加工工作。在報(bào)表設(shè)計(jì)器中通過選取合適的報(bào)表以及相應(yīng)數(shù)據(jù)來進(jìn)行內(nèi)容豐富,之后將報(bào)表進(jìn)行導(dǎo)出,如此一來就可以生成一個(gè)簡單實(shí)用、內(nèi)容豐富翔實(shí)的報(bào)表。

3.2動(dòng)態(tài)生成報(bào)表

由于實(shí)際工作需要,報(bào)表的應(yīng)用不可能一直沿用固定報(bào)表生成模式,往往會(huì)因?yàn)閷?shí)際數(shù)據(jù)變動(dòng)而需要進(jìn)行編輯改進(jìn),如果能夠動(dòng)態(tài)生成報(bào)表將會(huì)在很大程度上簡化報(bào)表應(yīng)用管理流程,提高工作效率。因此通過利用ReportViewer,根據(jù)實(shí)際所需報(bào)表需求來指定顯示報(bào)表,自動(dòng)生成Object Data Source文件,該文件會(huì)根據(jù)生成數(shù)據(jù)源時(shí)默認(rèn)定義方法來獲取數(shù)據(jù)庫中已經(jīng)存在了的數(shù)據(jù)。打開Name="DataSet1_DEPARTMENT"/>,通過重新命名Name就可以針對(duì)已有報(bào)表按照正常方式來加載數(shù)據(jù)源以及將生成的數(shù)據(jù)添加到報(bào)表之中,從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)報(bào)表的動(dòng)態(tài)加載與編輯,生成的報(bào)表能夠符合實(shí)際動(dòng)態(tài)需求,具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

4總結(jié)

綜上所述,.net環(huán)境下報(bào)表的應(yīng)用需要緊隨時(shí)展需求,力爭做到與時(shí)俱進(jìn)來滿足工作需要,從而改變傳統(tǒng)辦公模式,將現(xiàn)代化無紙化辦公理念和方式運(yùn)用在工作生活中,促使社會(huì)經(jīng)濟(jì)實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的總體社會(huì)目標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1] 孫惠娟,高瑞華.NET環(huán)境下幾種報(bào)表解決方案的對(duì)比分析[J].河南財(cái)政稅務(wù)高等??茖W(xué)校學(xué)報(bào),2011,12(03):90-92.

篇5

關(guān)鍵詞:簡潔;重點(diǎn);阻止;感情;思維

中圖分類號(hào):G648文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):1672-1578(2017)04-0005-02

"人們運(yùn)用語言這一社會(huì)交際工具,準(zhǔn)確、鮮明而生動(dòng)地表達(dá)思想感情,傳遞信息,達(dá)到相互了解,從而產(chǎn)生出一定的政治、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)、宣傳、教育和藝術(shù)效益,這就是語言的效果。語言效果是無法估量的,有關(guān)專家指出:'語言的力量能征服世界上最復(fù)雜的東西--人的心靈'"[1]正因如此,我們就要充分利用環(huán)保警示語為我們的環(huán)保服務(wù)。

環(huán)保警示語宣傳和倡導(dǎo)的是環(huán)保理念,借助于警示語的形式,達(dá)到警示心靈,制約行為的目的,圍繞共同的目的,雖是簡短的一句話,但表達(dá)上各顯神通,因而在環(huán)保工作中卻起到舉足輕重的作用。

1.簡潔的語言標(biāo)示在萬綠叢中或人來人往的公共場(chǎng)所,可以引起人們的關(guān)注

(1) 請(qǐng)勿吸煙。

(2)人類只有一個(gè)可生息的村莊--地球,保護(hù)環(huán)境是每個(gè)地球村民的責(zé)任。

這些話語簡單明了,但又有明確的意義,禁止做什么,倡導(dǎo)做什么,在不難理解的句子中讓人一目了然,表達(dá)的效果顯著。

2.直接阻止與間接阻止某種行為運(yùn)用在環(huán)保警示語中,能起到詞必達(dá)意的效果

有些是間接阻止某種行為的發(fā)生,例(3)破折號(hào)后面是"垃圾筒"的呼告,"我不想'失業(yè)'",連"垃圾筒"都在努力為環(huán)保做奉獻(xiàn),何況是有思維能力的人,而"垃圾筒"不"失業(yè)"的方法是要?jiǎng)e人去做某事,人們只有自覺地把垃圾放入"垃圾筒"里,才能讓"垃圾筒"不"下崗",間接阻止了亂吐、亂丟、亂扔、亂放、亂拋垃圾的現(xiàn)象發(fā)生,達(dá)到凈化環(huán)境的目的。環(huán)保警示語的語用的最終目的就是要實(shí)現(xiàn)保護(hù)環(huán)境的目的。

(3)垃圾筒--我不想"失業(yè)"?。。?/p>

一般這種間接阻止的行為不是人對(duì)人的講述,它是從另一個(gè)角度來說話,人們也許聽不進(jìn)別人的話,或是聽人說話已聽麻木了,"失業(yè)"的頻率太高了,而現(xiàn)在有存在的第三方有話要說,這是要人們傾聽第三方的聲音,要我們聽聽它們對(duì)人類的訴求,易引起人們的共鳴,從而引起人們的同情;同時(shí)也讓我們想到,如果連它們都失業(yè)的話,那將是人類的災(zāi)難,我們還不趕緊行動(dòng)起來嗎?

這種間接阻止實(shí)際采用了言此意彼的委婉的方式,讓人耳目一新,大大提高了"吸睛"率,起到很好的語言效果。

3.環(huán)保警示語有感情,拉近了人與物之間的距離,增強(qiáng)了表達(dá)的效果

環(huán)保警示語中修辭格的運(yùn)用,使環(huán)保警示語帶上了豐富的感情,更好發(fā)揮它的傳情達(dá)意的作用,使人類與異類的溝通與交流也就更密切了,看下面的一些語句:

(4)小草在沉睡,請(qǐng)勿打擾他!

(5)小草有生命,承蒙多關(guān)照。

(6)愛花的人心靈美如花!

(7)滿園飄香,邀您共賞!

(8)封山育林,造福子孫!

一是用了擬人的辭格,把物當(dāng)人來寫,把植物的世界人性化,使人與物能互相交流與了解。如"小草在沉睡",從第三人稱的角度來描情狀物,使小草富有人的情態(tài),小草就像一個(gè)弱小的、正在沉睡中的嬰兒,他就像是你自己的孩子,他的成長需要人們的關(guān)愛與保護(hù),這也勾起人們保護(hù)弱者的心理,而人類對(duì)弱小的生命一向都有愛心,這就傳達(dá)了小草需要保護(hù)的意愿。再如"邀您共賞"中用的"邀"是有方向性的動(dòng)詞,把綠色領(lǐng)域中的植物當(dāng)作人來描寫,有一方存在的同時(shí)還希望有他方的加盟,從而達(dá)到香飄四方,美化環(huán)境的目的,同時(shí)也慰勞你對(duì)花草世界的愛護(hù):"他"今天有最美一面的展示,有你的功勞,所以請(qǐng)你欣賞。還有就是"小草有生命",在這句話里省略了喻詞與喻體,完整的一句話為"小草就像是有生命的嬰兒",何況人類對(duì)有生命的東西歷來都關(guān)愛與尊重,"承蒙多關(guān)照"中的"承蒙"是謙詞,小草的卑微與謙恭易勾起人們的同情心,從而得到更好的關(guān)愛與保護(hù)。

還有就是對(duì)偶的使用,把"結(jié)構(gòu)相同或基本相同、字?jǐn)?shù)相等、意義上密切相連的兩個(gè)短語或句子,對(duì)稱地排列","從形式上看,音節(jié)整齊勻稱,節(jié)律感強(qiáng)"[3]。像第(9)句中前后句的最后一個(gè)字的讀音都押"i"韻;第(10)句"環(huán)保"與"環(huán)境","感動(dòng)"與"牽動(dòng)"意義是相近、相連的;第(11)句前后兩句話的最后一個(gè)字都押"ān"韻。而且句式中的用詞,詞性是相對(duì)的,使"句式富有表現(xiàn)力,便于人們記誦"[4]。這樣可以使相似、相近的內(nèi)容進(jìn)行比照,使其更好的襯托和突出語義。

(9)草木無言皆青翠, 行人有情多愛惜。

(10)環(huán)保感動(dòng)中國, 環(huán)境牽動(dòng)心靈。

(11)綠色與生命時(shí)時(shí)相伴, 環(huán)境與健康息息相關(guān) 。

此外,頂真的運(yùn)用,例(12),使"連貫的思索之間的遞相依存的內(nèi)在聯(lián)系作了清楚的闡述,"[5]讓語句的"說理周密謹(jǐn)嚴(yán),表達(dá)如行云流水,氣勢(shì)貫通"[6];還有排比修辭格的運(yùn)用,如例(13),突出了句意,使語言氣勢(shì)得到了加強(qiáng),豐富了環(huán)保警示Z的表情達(dá)意的效果,延伸了環(huán)保的廣度,增強(qiáng)了環(huán)保的力度。

(12)垃圾混置是垃圾,垃圾分類是資源。

(13)地球怎么長成,我不知,你不知,他不知.地球怎么滅絕,我知,你知,他知。

還有就是使用婉曲,"即不是直接明白而是含蓄曲折地把自己的意思表達(dá)出來。修辭學(xué)上把這種方法叫婉曲。運(yùn)用婉曲手法,可以接近雙方感情上的距離。"[7]如,

(14)除了回憶,請(qǐng)你什么也別帶走。

(15)除了足跡,請(qǐng)你什么也別留下。

(16)當(dāng)你想丟點(diǎn)什么的時(shí)候,請(qǐng)想一想,可千萬別丟臉。

這些話語都沒有嚴(yán)厲的制止和訓(xùn)斥,沒有刺目的、語氣強(qiáng)硬的字眼,如"不準(zhǔn)"、"嚴(yán)禁"、"罰款"等。有的只是委婉的告誡與和藹的提示,但觀者不難讀懂它要提醒游人要自覺愛護(hù)自然景觀,不要采摘花果,不要丟棄任何垃圾,這些引人思考的話語,不難明白它的潛臺(tái)詞。通過這些委婉含蓄的話語,催人警醒,激人自律,當(dāng)看到景區(qū)這些文明的警示語時(shí),誰還忍心摘花采果,亂扔垃圾,損壞這里美麗無比的環(huán)境呢?這種既熱情誠懇,又婉轉(zhuǎn)含蓄的話語不僅僅起到警示語的作用了,更是文明用語的典范。因?yàn)樗晒Φ剡\(yùn)用婉曲手法,得體,準(zhǔn)確地傳達(dá)出環(huán)保者的意圖。

總之,在環(huán)境保護(hù)的警示語中運(yùn)用了修辭格,彰顯了環(huán)保領(lǐng)域以人為本的宗旨,它的人性化的一面,向人們傳播了人文關(guān)懷,構(gòu)建了人文生態(tài),使人類更容易融入周遭的自然環(huán)境的世界,達(dá)到善待、保護(hù)、開發(fā)、利用的目的。

4.環(huán)保警示語有思維,使環(huán)境保護(hù)領(lǐng)域中的語義更符合人類思維的規(guī)律,達(dá)到人與物的交融

語言是思維的載體,根據(jù)語用學(xué)"我們用預(yù)設(shè)來解釋一些語義中的邏輯現(xiàn)象"[8]如果用形象的數(shù)學(xué)公式來表示就是"語言學(xué)+邏輯推理=預(yù)設(shè)",在公式中有邏輯推理的存在,根據(jù)邏輯推理的三段論,那就說明語用預(yù)設(shè)存在著隱藏起來的前提。而且這個(gè)前提具有可推知性的特點(diǎn),下面以(17)――(21)句為例來例舉這種預(yù)設(shè):

通過上面的例舉,我們看到這里主要用了解釋性的預(yù)設(shè),它主要是對(duì)某種做法做出解釋進(jìn)行了預(yù)設(shè),從而達(dá)到告知的目的,而這種預(yù)設(shè)往往是讓人容易知曉的,如果我們聽不出或看不出那層暗設(shè)的前提,那就是語用預(yù)設(shè)的失誤。我們通過對(duì)語義預(yù)設(shè)的分析,可以了解環(huán)境保護(hù)領(lǐng)域中的警示語的使用必須符合邏輯,也就是符合人腦思維的規(guī)律性,真正的讓植物的世界成為人類世界不可或缺的部分。人們才會(huì)倍感珍惜這種和睦共處的氛圍,珍愛提供給人類生存的這份綠色環(huán)境,從而讓人類更好的保護(hù)地球環(huán)境資源。

5.用"意合法"來鮮明地表明立場(chǎng)、觀點(diǎn)和態(tài)度,講清楚道理,從而讓人接受

這就使有些句子的語義是不需要預(yù)設(shè)的,不需要回味無窮的,只是為了讓人一看就懂,達(dá)到明白曉暢的目的。從語用學(xué)的角度看,"有一些復(fù)句不用任何關(guān)聯(lián)詞語,完全依靠語序以及前后分句的語義制約構(gòu)成,這就叫'意合法'"[9] 。這類句子的語義一般講環(huán)境保護(hù)的意義和作用的為多。如:

(22)綠化環(huán)境,保護(hù)家園。

(23)保護(hù)綠化環(huán)境,熱愛人類自己的家園。

(24)人類靠綠色環(huán)境生存 ,綠色環(huán)境靠人類保護(hù)。

它的表達(dá)效果符合人們閱讀審美的習(xí)慣,無須過度的思考就可達(dá)到人們思想,從而指導(dǎo)人們的行為。像(17)就是如此,首先做"綠化"工作,第二步才是"保護(hù)"的工作,語句本身就有符合人們行為習(xí)慣的語序,前一句的"綠化"的動(dòng)作是后一句"保護(hù)"的前提條件,后一句動(dòng)作"保護(hù)"是前一句"綠化"的行為結(jié)果,也就是說,有"綠化"緊接著為鞏固勞動(dòng)成果就要實(shí)施"保護(hù)"。這些詞語的使用,頻率也是很高的,296句中占了1/3強(qiáng),符合人們的性情,講明白話,做明白事,直接警示"綠化"、"保護(hù)"的主題,使人易于接受。(23)、(24)也是如此,其他就不一一例說,總之,這種句子表達(dá)出來的語義就是要明白曉暢,達(dá)到植入人們心尖的效果。

在h境保護(hù)領(lǐng)域中,我們對(duì)環(huán)保警示語在表達(dá)效果上進(jìn)行探究,能更好地通過對(duì)環(huán)保警示語的運(yùn)用,把大家的積極性調(diào)動(dòng)起來,只有讓大家積極的行動(dòng)起來,才能真正起到保護(hù)環(huán)境,凈化環(huán)境,美化環(huán)境的目的,這也為優(yōu)化我們的生活質(zhì)量奠定了環(huán)境基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn):

[1]晁金泉編著《語言表達(dá)技巧--加強(qiáng)語言效果100法》,北京:金盾出版社,2006.9,P28頁。

[2]《現(xiàn)代漢語?下刪》黃伯榮,廖序東主編.-4版-北京:高等教育出版社,2007.6(2010重印).P184頁

[3]、[4]同上.P206頁

[5] [6]《現(xiàn)代漢語?下刪》黃伯榮,廖序東主編.-4版-北京:高等教育出版社,2007.6(2010重?。?P212頁

[7]傅炳民 汪欣著《說寫辨賞學(xué)語文》-武漢:武漢大學(xué)出版社,2006.6.P3頁

篇6

【關(guān)鍵詞】 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞; 弱精癥; 免疫破壞; 免疫抑制細(xì)胞因子

【Abstract】 Objective: To observe the change pattern of CD4+CD25+ regulatory T cells (Treg) in asthenospermia infertile patients and the correlation with sperm quality.Method: The peripheral blood and prostatic fluid specimens were collected from 60 asthenospermia infertile patients as the observation group and 36 healthy volunteers as the control group. The flow cytometry was used to determine the volume of Treg, intracellular transforming growth factor β1 (TGF-β1) and interleukin 10 (IL-10) in the peripheral blood and prostatic fluid.The correlation of the above three substances of sperm viability and motility rate were analysed.Result:Compared with control group,the observation group patients of Treg, IL-10 and TGF-β1 asthenospermia infertile had significantly lower volume in their peripheral blood and prostate massage fluid,the differences were statistically significant(P0.075,P

【Key words】 Regulatory T cells; Asthenospermia; Immunity damage; Immunosuppressive cytokines

First-author’s address:Shantou Chaoyang District Dafeng Hospital,Shantou 515100,China

doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2015.09.009

近年報(bào)道弱精癥導(dǎo)致不育的案例越來越多,該類患者甚至連慢性前列腺炎的病史都不具備,其機(jī)制不明,因此給治療帶來困難。有研究表明免疫因素可能是弱精癥的重要發(fā)病機(jī)制[1]。國外有報(bào)道CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)與不育癥相關(guān),但目前國內(nèi)關(guān)于弱精癥患者Treg變化的研究不多。因此筆者以此為切入點(diǎn),重點(diǎn)觀察了弱精癥與健康成年男性外周血Treg及血常規(guī)的變化,發(fā)現(xiàn)弱精癥患者Treg數(shù)量明顯降低,且與Treg功能密切相關(guān)的細(xì)胞因子IL-10及TGF-β1亦表現(xiàn)為數(shù)量不足。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究以2013年1月-2014年12月本院泌尿外科門診及病房接診的60例弱癥患者為觀察組,平均年齡(35.3±9.3)歲,平均病程(5.6±1.5)年。入選標(biāo)準(zhǔn)如下:所有患者均為婚后性生活正常,未采取任何避孕措施而不育1年以上,女方生育力檢查正常,男方無生殖系統(tǒng)發(fā)育異常、無生殖系統(tǒng)感染、無精索靜脈曲張、精道梗阻、逆行或不等疾??;參數(shù)中前向運(yùn)動(dòng)的(a和b級(jí))

1.2 實(shí)驗(yàn)材料 鼠抗人CD4-FITC單抗,CD25-PE單抗及同型對(duì)照IgGI-FITC,IgG -PE,均為B&D公司產(chǎn)品。流式細(xì)胞儀為Beckman公司產(chǎn)品(型號(hào):EPICS-XL)。IL-10及人TGF-β1的血清及前列腺液ELISA試劑盒購自南京建成生物工程研究所。淋巴細(xì)胞分離液(AXIS-SHIELD公司)、RT-PCR試劑盒及Tregizol RNA提取試劑盒均購自武漢博士得生物科技有限公司,PE9600型PCR擴(kuò)增儀(美國PE公司)[2]。

1.3 標(biāo)本采集 外周血:清晨采集以上觀察對(duì)象的靜脈血約2.0 mL,采用肝素鈉抗凝;:采用法采集約1~3 mL,采用肝素鈉抗凝;前列腺液:采用前列腺按摩法,采集前列腺液約0.5~1.0 mL,采用肝素鈉抗凝[4-7]。

1.4 檢測(cè)方法 外周血:采用淋巴細(xì)胞分離液常規(guī)分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),用含10%小牛血清的RPMI-1640調(diào)細(xì)胞至106/mL,取200 μL細(xì)胞分別加入抗CD4-FITC、抗CD25-PE的單克隆抗體各20 μL,同型對(duì)照分別為IgG1-FITC、IgG-1-PE,混勻后避光孵育25~30 min,PBS洗滌2次。將細(xì)胞懸浮于0.5 mL PBS洗滌液中,振蕩混勻后上機(jī)檢測(cè)[3]。同法檢測(cè)前列腺液及外周血IL-10、及TGF-β1的含量。:使用質(zhì)量分析儀檢測(cè)存活率、平均運(yùn)動(dòng)速度、活力指數(shù)等指標(biāo)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件包SAS 8.1對(duì)本研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),計(jì)量資料采用(x±s)表示,符合正態(tài)分布及方差齊者采用t檢驗(yàn)比較組間差異,不符合正態(tài)分布者采用秩和檢驗(yàn),指標(biāo)之間的相關(guān)性分析采用Pearson參數(shù)法,以P

2 結(jié)果

2.1 兩組患者Treg及細(xì)胞因子比較 觀察組患者外周血CD4+CD25+ Treg、外周血及前列腺液的TGF-β1和IL-10均顯著低于對(duì)照組,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

2.2 兩組常規(guī)比較 兩組量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);觀察組活率、運(yùn)動(dòng)速度和ATP含量指標(biāo)均顯著低于對(duì)照組,兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

2.3 相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson檢驗(yàn),CD4+CD25+ Treg、TGF-β1和IL-10與活率、畸形率、運(yùn)動(dòng)速度、ATP指標(biāo)之間均呈正相關(guān)性(r>0.075,P

3 討論

弱癥占所有男性不育致病因素的半數(shù)以上,引發(fā)弱癥的原因很多,主要有生殖道感染、免疫因素、精索靜脈曲張、內(nèi)分泌因素以及先天性疾病等[4-9]。目前弱癥的免疫發(fā)病機(jī)制尚未明確,是其治療效果欠佳的主要原因之一。Treg細(xì)胞是近年發(fā)現(xiàn)的一群具有獨(dú)特免疫調(diào)節(jié)作用的抑制性T細(xì)胞[4]。本研究從T細(xì)胞免疫學(xué)角度研究弱癥患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及其細(xì)胞因子的表達(dá),總結(jié)弱癥患者Treg及其細(xì)胞因子的變化規(guī)律,以及弱癥患者CD4+CD25+ Treg及其細(xì)胞因子含量與質(zhì)量的相關(guān)性[10]。研究結(jié)果表明,觀察組外周血CD4+CD25+ Treg的含量顯著低于對(duì)照組,外周血的TGF-β1和IL-10顯著低于對(duì)照組;觀察組前列腺液的TGF-β1和IL-10顯著低于對(duì)照組;外周血的TGF-β1和IL-10均顯著高于前列腺液;兩組量比較差異無顯著性;觀察組活率、運(yùn)動(dòng)速度和ATP含量指標(biāo)均顯著低于對(duì)照組;經(jīng)Pearson檢驗(yàn),CD4+CD25+ Treg、TGF-β1和IL-10與活率、畸形率、運(yùn)動(dòng)速度、ATP指標(biāo)之間均呈正相關(guān)性。

CD4+CD25+ Treg在前列腺的免疫失衡中起到重要作用[11]。Treg活化后不僅能抑制CD4+和CD8+ T細(xì)胞的活化和增殖,還可抑制組織內(nèi)由于T細(xì)胞免疫殺傷過度所致的免疫性損傷,因此Treg具有下調(diào)及抑制免疫的功能[12]。Foxp3是一個(gè)重要的蛋白,其可促使初始(未成熟)T細(xì)胞向Treg轉(zhuǎn)化,因此Foxp3是Treg的主要功能因子,前者的減少可導(dǎo)致Treg功能的缺陷[5]。在Treg所分泌的細(xì)胞因子中,IL-10與TGF-β1所占的位置最為重要:TGF-β1可促進(jìn)Foxp3基因的克隆表達(dá),而后者是發(fā)揮免疫抑制功能的主要功能因子[13-14]。除TGF-β1外,作為白介素家族重要成員的IL-10,具有抑制炎性反應(yīng)、預(yù)防自身免疫現(xiàn)象出現(xiàn)的生物學(xué)作用,因此缺乏IL-10可導(dǎo)致一系列自身免疫病如腸炎或腦脊髓膜炎(EAE)的發(fā)生[15]。

本文以上述背景為理論依據(jù),從免疫調(diào)節(jié)的角度觀察弱精癥的發(fā)病機(jī)制,通過直接檢測(cè)外周血Treg數(shù)量發(fā)現(xiàn)該T細(xì)胞在弱精癥患者的表達(dá)明顯降低,且發(fā)現(xiàn)外周血及前列腺液當(dāng)中該細(xì)胞的功能因子TGF-β1及IL-10均顯著降低,這進(jìn)一步印證了不論在全身抑或前列腺組織局部,都表現(xiàn)為Treg數(shù)量的減少及功能的不足。其原因可能是:弱精癥患者降低使IL-10不足以抑制單核細(xì)胞的活化與增值,導(dǎo)致單核細(xì)胞過度執(zhí)行抗原提呈功能,后者致使外周血及前列腺局部的免疫反應(yīng)過強(qiáng),使前列腺導(dǎo)管和腺泡不斷受到免疫損害而導(dǎo)致生精功能減退等臨床表現(xiàn)[14]。

綜上所述,對(duì)于弱癥患者而言,CD4+CD25+ Treg含量和功能的異常,導(dǎo)致TGF-β1和IL-10細(xì)胞因子減少進(jìn)而引發(fā)免疫抑制功能下降,導(dǎo)致了前列腺的免疫反應(yīng)過強(qiáng)產(chǎn)生了抗抗體,影響的活動(dòng)能力、運(yùn)動(dòng)能力以及穿透能力。因此,CD4+CD25+ Treg免疫異常是弱癥發(fā)病的重要影響因素。

參考文獻(xiàn)

[1] Cinar C,Beyazyurek C,Ekmekci C G,et al.Sperm fluorescence in situ hybridization analysis reveals normal sperm cells for 14;14 homologous male Robertsonian translocation carrier[J].Fertil Steril,2011,95(1):e5-9.

[2] Zhang H,Su D,Yang Y,et al.Some single-nucleotide polymorphisms of the TSSK2 gene may be associated with human spermatogenesis impairment[J].J Androl,2010,31(4):388-392.

[3] Prasad A S.Zinc in human health: effect of zinc on immune cells[J].Mol Med,2008,14(5-6):353-357.

[4] Zhang C,Yeh S,Chen Y T,et al.Oligozoospermia with normal fertility in male mice lacking the androgen receptor in testis peritubular myoid cells[J].Proc Natl Acad Sci U.S.A,2006,103(47):17 718-17 723.

[5]李繼清,馮國生,秦儉.老年前列腺癌手術(shù)前后外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞變化的臨床意義[J].中國老年學(xué)雜志,2010,30(7):904-905.

[6] Maloy K J,Salaunl,Cahill R,et al.CD4+CD25+ T(R) cells suppress innate immune pathology through cytokine dependent mechanisms[J].J Exp Med,2003,197(1):111-119.

[7] Jacobo P,Pérez C V,Theas M S,et al.CD4+ and CD8+ T cells producing Th1 and Th17 cytokines are involved in the pathogenesis of autoimmune orchitis[J].Reproduction,2011,141(2):249-258.

[8]曾春花,熊承良,官黃濤,等.少、弱癥患者精漿、和血清中鋅及性激素水平的相關(guān)分析[J].中國計(jì)劃生育學(xué)雜志,2007,140(6):352-355.

[9]梁明,孫偉,張斌.少癥、弱癥的病因及治療[J].中國性科學(xué),2009,18(7):20-23.

[10] Gondek D C,Olive A J,Stary G,et al.CD4+ T cells are necessary and sufficient to confer protection against Chlamydia trachomatis infection in the murine upper genital tract[J].J Immunol,2012,189(5):2441-2449.

[11] Setiady Y Y,Ohno K,Samy E T,et al.Physiologic self antigens rapidly capacitate autoimmune disease-specific polyclonal CD4+CD25+ Regulatory T cells[J].Blood,2006,107(3):1056-1062.

[12]劉群龍,蔡志明.無精及少弱癥研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代診斷與治療,2008,19(2):84-87.

[13]荊結(jié)線,喬麗娟,郭愛芝,等.卵巢癌患者外周血CD4+CD25hi CD127lo調(diào)節(jié)性T細(xì)胞格局變化及臨床意義[J].中國免疫學(xué)雜志,2012,28(1):49-53.

[14] Suri-Payer E,F(xiàn)ritzsching B.Regulatory T cells in experimental autoimmune disease[J].Springer Semin Immunnopathol,2006,28(1):3-16.

篇7

關(guān)鍵詞: 癌,肝細(xì)胞;β-連環(huán)蛋白;免疫組織化學(xué)

摘 要:目的 研究β-連環(huán)蛋白在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與原發(fā)性肝細(xì)胞癌分化、侵襲轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系. 方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對(duì)63例原發(fā)性肝細(xì)胞癌石蠟包埋標(biāo)本進(jìn)行β-連環(huán)蛋白半定量檢測(cè). 結(jié)果 有49例(78%)原發(fā)性肝細(xì)胞癌β-連環(huán)蛋白陽性表達(dá),低分化癌的β-連環(huán)蛋白陽性率明顯高于高分化癌(P

Keywords:carcinoma,hepatocellular;β-Catenin;immuno-histochemistry

Abstract:AIM To investigate theβ-Catenin expression in primary hepatocellular carcinoma and its relation ship with tumor differentiation,AFP level,invasion,metastasis and prognosis.METHODS β-Catenin expression was detected in63cases of primary hepatocellular carcinoma by using im-munohistochemical technique(DAB method).RESULTS Expression ofβ-Catenin in77.89%cases of primary hepato-cellular carcinoma and15%cases of liver cirrhosis was stronger than that in the surrounding normal liver tissue.The positivity rate ofβ-Catenin was higher in poorly differen-tiated carcinoma group than that in well differentiated group(P

0 引言

原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌(HCC)是我國最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病機(jī)制和發(fā)病原因至今未明.已有報(bào)道,一些細(xì)胞因子在正常細(xì)胞中異常表達(dá),或正常細(xì)胞內(nèi)不應(yīng)出現(xiàn)的某些因子反而出現(xiàn)聚集狀態(tài),將啟動(dòng)不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,直接或間接地影響核內(nèi)某些基因的表達(dá),導(dǎo)致細(xì)胞增殖過度,引發(fā)腫瘤[1,2] .

β-連環(huán)蛋白(β-Catenin)作為細(xì)胞內(nèi)的一種蛋白質(zhì),既是Wnt信號(hào)傳導(dǎo)途徑中關(guān)鍵調(diào)控因子,又與細(xì)胞間粘附作用有關(guān),而這兩種作用與腫瘤發(fā)生、發(fā)展均有密切關(guān)系[3] .已有報(bào)道稱在大腸癌、肺癌、腎癌等腫瘤的研究中發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)β-Catenin表達(dá)增加[4-6] ,但其在肝癌中的表達(dá)及其臨床意義的報(bào)道在國內(nèi)還很少.我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)63例原發(fā)性肝細(xì)胞癌石蠟包埋標(biāo)本中β-連環(huán)蛋白的表達(dá),并探討其臨床意義,為防治提供依據(jù).

1 材料和方法

1.1 材料 1988/2001第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院普外科手術(shù)切除的原發(fā)性肝細(xì)胞癌病例標(biāo)本63(男46,女17)例,年齡36~72(平均55)歲.按1991年WHO病理分類標(biāo)準(zhǔn),肝細(xì)胞肝癌63例,其中Ⅰ級(jí)14例,Ⅱ級(jí)16例,Ⅲ級(jí)33例,其中手術(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn)肝外淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移16例.另取肝硬化20例,正常肝組織10例.

1.2 試劑 兔抗人β-catenin多克隆抗體(附陽性對(duì)照片)、SABC試劑盒、DAB顯色試劑盒均為武漢博士德生物制品公司產(chǎn)品.

1.3 方法 標(biāo)本均經(jīng)40g?L-1 多聚甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,5μm連續(xù)切片,分別進(jìn)行HE染色及免疫組化染色,切片常規(guī)脫蠟至水,H2 O

2 滅活內(nèi)源性過氧化物酶,微波修復(fù)抗原,正常山羊血清封閉,分別滴加β-catenin一抗,4°C過夜,滴加生物素化二抗,DAB顯色,蘇木精復(fù)染,脫水透明封片,將β-catenin染色陽性的肝癌組織作為陽性對(duì)照,空白對(duì)照選擇PBS代替一抗.

1.4 βCatenin染色結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 按腫瘤細(xì)胞著色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞分布范圍分為3個(gè)等級(jí):全片未見著色或極少量細(xì)胞散在著色為(-),胞質(zhì)和胞膜棕黃色著色為陽性,10%~30%細(xì)胞著色但鏡下易觀察到為(+),大于30%細(xì)胞清晰著色為().

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:免疫反應(yīng)結(jié)果及其臨床病理參數(shù)的關(guān)系采用χ2 檢驗(yàn),生存率計(jì)采用壽命表法,不同分組間生存率差異使用時(shí)序檢驗(yàn).

2 結(jié)果

2.1 βCatenin在HCC中表達(dá)的臨床病理學(xué)特點(diǎn) β-Catenin以膜定位為主,在10例正常肝組織中無1例陽性表達(dá);20例肝硬化組織中僅3例(15%)呈(+),且主要定位于肝細(xì)胞膜的接觸面和膽小管面,未見肝細(xì)胞的血竇面和胞質(zhì)著色;而63例HCC中有49例(78%)標(biāo)本β-Catenin呈陽性表達(dá),且36例為()表達(dá),主要定位于肝癌細(xì)胞的外周胞質(zhì)、血竇面、接觸面和腺腔面.胞質(zhì)β-Catenin陽性著色為點(diǎn)狀著色或片狀淺著色,胞膜β-Catenin陽性著色為不規(guī)則線狀或顆粒狀著色.在靠近毛細(xì)胞膽管腔面和小膽管腔面常見肝癌細(xì)胞陽性深著色.β-Catenin的分布呈異質(zhì)性:有大片細(xì)胞廣泛表達(dá),小片細(xì)胞區(qū)域表達(dá),散在表達(dá)或大片細(xì)胞中僅數(shù)個(gè)細(xì)胞表達(dá)(Fig1,2).肝癌組織和非肝癌組織的β-Catenin表達(dá)亦呈異質(zhì)性:肝癌組織β-Catenin表達(dá)為外周胞質(zhì)點(diǎn)狀或片狀淺著色,粗大的胞膜不規(guī)則線狀、點(diǎn)狀著色,偶見胞核深染;而非肝癌組織大都陰性表達(dá),或少量的胞膜線狀、點(diǎn)狀著色.β-Catenin的表達(dá)與腫瘤的分化程度呈反比,即分化差時(shí)β-Catenin的表達(dá)趨于增多.Ⅰ級(jí)中(-)8例、(+)表達(dá)1例、()表達(dá)5例;Ⅱ級(jí)中(-)2例、(+)表達(dá)5例、()表達(dá)9例;Ⅲ級(jí)中(-)4例、(+)表達(dá)7例、()表達(dá)22例.3組比較,差異有顯著性(P

2.2 βCatenin與患者AFP水平及預(yù)后的關(guān)系 β-Catenin的陽性表達(dá)與HCC患者AFP水平呈正比,即AFP水平越高者β-Catenin陽性表達(dá)越強(qiáng),AFP400μg?L-1 組分別為3,8,23例.二組之間存在顯著性差異(P

3 討論

HCC的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多基因參與、多因素影響、牽涉多條信號(hào)傳導(dǎo)途徑的復(fù)雜過程.Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑異常是目前研究腫瘤發(fā)生機(jī)制的一個(gè)熱點(diǎn).而β-Catenin正是這一傳導(dǎo)通路的關(guān)鍵調(diào)控點(diǎn)[7] .本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,49/63的HCC標(biāo)本中β-Catenin呈陽性表達(dá),且表達(dá)程度與HCC的病理分級(jí)、術(shù)后存活時(shí)間呈負(fù)相關(guān),與患者AFP水平,有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān).表明β-Catenin在HCC發(fā)生、發(fā)展過程中的作用不容忽視.β-Catenin被發(fā)現(xiàn)是一種與跨膜粘附分子鈣粘著素(Cadherin)相連的胞內(nèi)特異蛋白,以復(fù)合體形式存在于各類上皮和某些實(shí)質(zhì)細(xì)胞中,介導(dǎo)細(xì)胞間連接,近幾年研究發(fā)現(xiàn),β-Catenin作為一種關(guān)鍵Wnt蛋白,與APC,GSK-3β復(fù)合、解離、胞質(zhì)積累、入核,作用于核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子TCF/LEF家族,促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄[8-11] ,或刺激增殖,或抑制凋亡,從而認(rèn)為β-Catenin是一種癌基因[12] .其致癌機(jī)制可能是發(fā)生在氨基端的突變使變異的β-Catenin大量積累而激活了轉(zhuǎn)錄因子.Yi等[13] 報(bào)道β-Catenin/APC介導(dǎo)的Wnt途徑的突變占肝癌發(fā)生的30%.關(guān)于癌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)β-Catenin表達(dá)增加的原因,目前的看法主要是其降解減緩,而非生成增加.影響β-Catenin降解的因素有Wnt信號(hào)的增強(qiáng),APC的突變以及β-Catenin本身的突變等.在Rubinfeld等[14] 對(duì)黑色素瘤細(xì)胞系的研究中,發(fā)現(xiàn)β-Ccatenin的增加主要與其本身的突變有關(guān),β-Catenin突變后可增加其穩(wěn)定性,使其不被降解.Wnt信號(hào)的增強(qiáng)可以抑制APC對(duì)β-Catenin的降解作用.此外,也有報(bào)道發(fā)現(xiàn),3個(gè)大腸癌細(xì)胞系中均有β-Catenin表達(dá)的增強(qiáng),認(rèn)為大腸癌癌細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)化與β-Catenin靶基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄關(guān)系密切,β-Catenin的靶基因可能就是大腸癌的癌基因

[15] .

本研究結(jié)果顯示,β-Catenin在腫瘤較靠近血竇、毛細(xì)膽管處表達(dá)較強(qiáng),同時(shí)與腫瘤病理分級(jí)負(fù)相關(guān),提示可以將β-Catenin作為分化差、易浸潤轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物;β-Catenin表達(dá)與AFP表達(dá)相關(guān),可以協(xié)同原發(fā)性肝癌的臨床診斷;手術(shù)標(biāo)本中β-Catenin的表達(dá)情況可以作為判斷患者預(yù)后的一個(gè)指標(biāo).

參考文獻(xiàn)

[1]Yang LJ,Wang WL.Expression of Bcl-2and Bax proteins in hepatocellular carcinoma tissue [J].Di-si Junyi Daxue Xuebao(J Fourth Mil Med Univ),2002;23(4):337-340.

[2]Pennisi E.How a growth control path takes a wrong turn to cancer [J].Science,1998;281(5382):1438-1441.

[3]Resnik E.β-Catenin-one player,two genes [J].Nat Genet,1997;16(1):9-11.

[4]Korinek V,Barker N,Morin PJ,Wichen D,Weger R,Kinzler KW,Vogelstein B,Cleverst H.Constitutive transcriptional ac-tivation by aβ-Catenin-Tcf complex in APC-/-colon carcinoma [J].Science,1997;275(5307):1784-1787.

[5]Cadigan K,Nusse R.Wnt signaling:A common theme in ani-mal development [J].Genes Dev,1997;11(3286):167-172.

[6]Alman BA,Catherine L,pajerski ME,Diaz-Cano S,Wolfe HJ.Increasedβ-Catenin protein and somatic APC mutation in spo-radic aggressive fibromatoses [J].Am J Pathol,1997;151(2):329-334.

[7]Ozawa M,Baribanlt H,Kemler R.The cytoplasmic domain of the cell adhesion molecute unomorulin associates with three in-dependent proteins structually related in different species [J].Eur Mol Biol Org,1989;83(357):1711-1717.

[8]Beherens J,Kries JP,Kuhl M,Bruhn L,Wedlich D Grosschedl R,Birchmeier W.Functional interaction ofβ-Catenin with the transcription factor LEF-1[J].Nature,1996;382(6592):638-642.

[9]Tetsu O,McCormick F.β-Catenin regulates expression of cyclin D1in colon carcinoma cells [J].Nature,1999;398(6726):422-426.

[10]Peifer M.β-Catenin as Oncogene:The smoking Gun [J].Sci-ence,1997;275(5307):1752-1753.

[11]Wang ZL,Wang WL,Guo SP,Zeng JX.Expression of PTEN protein in human hepatocellular carcinoma and its significance [J].Di-si Junyi Daxue Xuebao(J Fourth Mil Med Univ),2001;22(20):1862-1865.

[12]Molenaar M,van de Wetering M,Oosterwegol M,Peterson-Maduro J,Godsave S,Korinek V,Roose J,Destree O,Clevers H.XTcf-3transcripition factor mediatesβ-catenin-induced axis formation in Xenopus embryos [J].Cell,1996;86(3):391-399.

[13]Yi Sun.The molecular pathogenesis of hepatocellular carcinoma [J].Foreign Med Sci,2001;21(2):108-110.

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環(huán)境影響報(bào)告表的批復(fù)

                    

江蘇興聯(lián)電子科技有限公司:

你公司委托蘇州品潤環(huán)境評(píng)價(jià)有限公司環(huán)評(píng)工程師吳媛(資格證書編號(hào):2014035320350000003512320748)主持編制的《江蘇興聯(lián)電子科技有限公司年產(chǎn)新能源及各種電線100萬公里、各種空氣源熱泵機(jī)組1萬臺(tái)、各種線束產(chǎn)品350萬套、汽車配件200萬套、銅材制品6000噸項(xiàng)目環(huán)境影響報(bào)告表》(以下簡稱《報(bào)告表》)收悉。經(jīng)研究,批復(fù)如下:

一、根據(jù)《報(bào)告表》評(píng)價(jià)結(jié)論及寺巷街道預(yù)審意見,在落實(shí)《報(bào)告表》中提出的各項(xiàng)污染防治和環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)防范措施的前提下,從生態(tài)環(huán)境角度考慮,同意該項(xiàng)目在泰州經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)振興西路666號(hào)公司現(xiàn)有廠區(qū)內(nèi)建設(shè),總投資15000萬元,在預(yù)留空地內(nèi)新建生產(chǎn)車間33000m2,購置高速放線機(jī)、高速印字機(jī)、高速收線機(jī)、束絲機(jī)、剪板機(jī)、折彎機(jī)、卷板機(jī)、焊接機(jī)、自動(dòng)焊接機(jī)等加工設(shè)備180臺(tái)(套)。建成后形成年產(chǎn)新能源及各種電線100萬公里、各種空氣源熱泵機(jī)組1萬臺(tái)、各種線束產(chǎn)品350萬套、汽車配件200萬套、銅材制品6000噸。具體產(chǎn)品方案詳見《報(bào)告表》,你公司不得擅自擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模、改變生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品方案。

二、在項(xiàng)目工程設(shè)計(jì)、建設(shè)和運(yùn)行管理中,你公司須認(rèn)真落實(shí)《報(bào)告表》中提出的各項(xiàng)環(huán)保要求,嚴(yán)格執(zhí)行環(huán)保“三同時(shí)”制度,確保各類污染物達(dá)標(biāo)排放,并須著重做好以下工作:

(一)施工期必須采取有效措施減緩環(huán)境影響,切實(shí)做好施工噪聲、揚(yáng)塵、固體廢棄物和廢水的污染控制及治理。

(二)排水系統(tǒng)嚴(yán)格實(shí)施雨污分流、清污分流。項(xiàng)目無生產(chǎn)廢水;生活污水經(jīng)化糞池預(yù)處理后,接入市政管網(wǎng)送亞同環(huán)保水處理有限公司集中處理;冷卻水定期補(bǔ)充損耗,不外排。

(三)強(qiáng)化廢氣收集措施,落實(shí)各類廢氣凈化技術(shù),確保治理設(shè)施正常運(yùn)行,處理效率及排氣筒高度應(yīng)達(dá)到《報(bào)告表》提出的要求,加強(qiáng)車間、危廢暫存間等區(qū)域的無組織廢氣控制。浸錫、押出和印字廢氣均有效收集,經(jīng)“二級(jí)串聯(lián)活性吸附”裝置處理后,分別通過15米高排氣筒(1#、2#、3#、4#)排放;危廢暫存間廢氣有效收集,經(jīng)“活性炭吸附”裝置處理后通過15米高排氣筒(5#)排放。

廢氣排放執(zhí)行《大氣污染物綜合排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB16297-1996)、《惡臭污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB14554-93)、《《揮發(fā)性有機(jī)物無組織排放控制標(biāo)準(zhǔn)》(GB37822-2019)相關(guān)要求。

(四)項(xiàng)目設(shè)計(jì)、施工和建設(shè)中應(yīng)選用低噪聲設(shè)備,合理布局設(shè)備,采取有效的減振、隔聲等降噪措施。運(yùn)營期廠界噪聲執(zhí)行《工業(yè)企業(yè)廠界環(huán)境噪聲排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB12348-2008)中 3類標(biāo)準(zhǔn),施工期噪聲應(yīng)符合《建筑施工場(chǎng)界環(huán)境噪聲排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB12523-2011)要求。

(五)一般固體廢物、生活垃圾、危險(xiǎn)廢物須分類收集、分類處理處置。按照“資源化、減量化、無害化”的原則和環(huán)保管理要求,落實(shí)各類固廢的收集處理處置和綜合利用措施,實(shí)現(xiàn)固廢全部綜合利用或安全處置。廢拉絲液(HW09/900-007-09)、拉絲污泥(HW09/900-007-09)、廢膠塞(HW49/900-041-49)、廢活性炭(HW49/900-039-49)、廢油(HW08/900-217-08)、廢包裝桶(HW49/900-041-49)等危險(xiǎn)廢物,須委托具備危險(xiǎn)廢物處置資質(zhì)的單位安全處置;廢邊角料、不合格品、廢錫渣、廢包裝材料出售綜合利用;生活垃圾委托環(huán)衛(wèi)部門定期清運(yùn)處置。危險(xiǎn)廢物暫存場(chǎng)所應(yīng)按《省生態(tài)環(huán)境廳關(guān)于進(jìn)一步加強(qiáng)危險(xiǎn)廢物污染防治工作的實(shí)施意見》(蘇環(huán)辦〔2019〕327號(hào))、《危險(xiǎn)廢物貯存污染控制標(biāo)準(zhǔn)》(GB18597-2001)及修改單要求設(shè)置,一般廢物暫存場(chǎng)所應(yīng)按《一般工業(yè)固體廢物貯存和填埋污染控制標(biāo)準(zhǔn)》(GB18599-2020)及修改單要求設(shè)置。

(六)做好土壤和地下水污染防治工作。落實(shí)《報(bào)告表》中提出的源頭控制、分區(qū)防滲要求,危廢暫存間、拉絲液池等區(qū)域采取重點(diǎn)防滲措施,制定地下水監(jiān)控和應(yīng)急方案。

(七)按照《江蘇省排污口設(shè)置及規(guī)范化整治管理辦法》的要求,完善各類排污口和標(biāo)志設(shè)置。本項(xiàng)目依托現(xiàn)有1個(gè)污水接管口和1個(gè)雨水接管口及1個(gè)廢氣排放口,新增4個(gè)廢氣排放口。

三、本項(xiàng)目VOCs排放量經(jīng)泰州市生態(tài)環(huán)境局醫(yī)藥高新區(qū)分局審核同意。本項(xiàng)目建成后,污染物年排放量不得突破《報(bào)告表》中核定的排放量。

四、按照《關(guān)于做好生態(tài)環(huán)境和應(yīng)急管理部門聯(lián)動(dòng)工作的意見》(蘇環(huán)辦〔2020〕101號(hào))的相關(guān)要求,對(duì)環(huán)境治理設(shè)施開展安全風(fēng)險(xiǎn)辨識(shí)管控,健全內(nèi)部污染防治設(shè)施穩(wěn)定運(yùn)行和管理責(zé)任制度,嚴(yán)格依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范建設(shè)環(huán)境治理設(shè)施,確保環(huán)境治理設(shè)施安全、穩(wěn)定、有效運(yùn)行。

五、本項(xiàng)目應(yīng)當(dāng)在啟動(dòng)生產(chǎn)設(shè)施或者在實(shí)際排污之前申領(lǐng)排污許可證,未取得排污許可證的,不得排放污染物。項(xiàng)目建設(shè)必須嚴(yán)格執(zhí)行配套建設(shè)的環(huán)境保護(hù)設(shè)施與主體工程同時(shí)設(shè)計(jì)、同時(shí)施工、同時(shí)投產(chǎn)使用的環(huán)境保護(hù)“三同時(shí)”制度。主體工程和環(huán)保設(shè)施建成后,你公司須按規(guī)定程序?qū)嵤┛⒐きh(huán)境保護(hù)驗(yàn)收。

六、請(qǐng)?zhí)┲菔猩鷳B(tài)環(huán)境局醫(yī)藥高新區(qū)分局負(fù)責(zé)該項(xiàng)目相關(guān)管理工作,泰州市生態(tài)環(huán)境綜合行政執(zhí)法局負(fù)責(zé)該項(xiàng)目的現(xiàn)場(chǎng)執(zhí)法監(jiān)督檢查工作。

七、項(xiàng)目的性質(zhì)、規(guī)模、地點(diǎn)、采用的生產(chǎn)工藝或者防治污染、防止生態(tài)破壞的措施發(fā)生重大變動(dòng)的,應(yīng)當(dāng)重新報(bào)批項(xiàng)目的環(huán)境影響評(píng)價(jià)文件。自本批復(fù)文件批準(zhǔn)之日起,如超過5年方?jīng)Q定工程開工建設(shè)的,環(huán)境影響報(bào)告書應(yīng)當(dāng)報(bào)我局重新審核。

 

 

泰州醫(yī)藥高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)管理委員會(huì)

                    2021年6月22日

 

 

篇9

【關(guān)鍵詞】 銀屑??;淋巴細(xì)胞;受體CXCR3;趨化因子,CXC

Expression of CXCR3 mRNA in peripheral blood lymphocytes and neutrophils in patients with psoriasis

【Abstract】 AIM: To investigate the expression of chemokine receptor CXCR3 mRNA in peripheral blood lymphocytes and neutrophils in patients with progressive plaque psoriasis and its correlation with Psoriasis Area and Severity Index (PASI). METHODS: Reverse transcriptasepolymerase chain reaction (RTPCR) was applied to semiquantitatively analyze CXCR3 mRNA expression in peripheral blood

lymphocytes and neutrophils from 33 psoriatic cases, 16 cases with about 70% remission of the 33 patients after treatment and 30 healthy controls. The correlation between CXCR3 mRNA expression and PASI was evaluated. RESULTS: CXCR3 mRNA level in lymphocytes from psoriatic patients was 1.12±0.81, markedly higher than that in normal controls (0.28±0.28, P

【Keywords】 psoriasis; lymphocytes; receptor CXCR3, chemokines, CXC

【摘要】 目的: 了解銀屑病患者外周血淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞中CXC型趨化因子受體CXCR3 mRNA的表達(dá)水平及其與銀屑病皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)(PASI)之間的關(guān)系. 方法: 應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)法檢測(cè)進(jìn)行期斑塊型銀屑病患者33例及其中16例患者治療后外周血淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞中CXCR3 mRNA的表達(dá)水平,設(shè)30例健康人作為正常對(duì)照,并將檢測(cè)結(jié)果與PASI進(jìn)行了相關(guān)性分析. 結(jié)果: 斑塊型銀屑病患者外周血淋巴細(xì)胞中CXCR3 mRNA表達(dá)水平為1.12±0.81,明顯高于健康對(duì)照組(0.28±0.28, P

【關(guān)鍵詞】 銀屑??;淋巴細(xì)胞;受體CXCR3;趨化因子,CXC

0引言

銀屑病的病理特征之一為表皮和真皮中白細(xì)胞浸潤,其中主要為中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞. 趨化因子是主要使細(xì)胞發(fā)生趨化作用的細(xì)胞因子,分為CXC, CC, XC及CX3C四型. 趨化因子通過與其特異性受體結(jié)合發(fā)揮作用,相應(yīng)的趨化因子受體也分為CXC, CC, XC及CX3C四型. 大量研究結(jié)果顯示趨化因子及其受體系統(tǒng)參與了炎癥的發(fā)病機(jī)制,尤其與炎癥細(xì)胞向皮損局部的移行關(guān)系密切. 銀屑病患者外周血中性粒細(xì)胞中趨化因子受體CXCR1與CXCR2 mRNA的表達(dá)增高,可能參與了中性粒細(xì)胞的活化及其向皮損部位的趨化[1]. CXCR3為CXC型趨化因子干擾素誘導(dǎo)的單核因子(Mig)及干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP10)的特異性受體,有報(bào)道Mig mRNA在銀屑病皮損部位真皮上部高表達(dá)[2]. 目前對(duì)銀屑病患者外周血淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞中CXCR3的表達(dá)情況仍不明確.

1材料和方法

1.1材料明確診斷的中、重度進(jìn)行期斑塊狀銀屑病患者33例,均為200203/200212在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病醫(yī)院就診的門診或住院患者,其中男19例,女14例,年齡18~65歲,病程4 mo~40 a. 用銀屑病皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)( psoriasis area and severity index, PASI)來評(píng)估患者的疾病嚴(yán)重程度. 入選標(biāo)準(zhǔn): 年齡在18周歲以上,臨床診斷明確,PASI評(píng)分在8.4以上;近3 mo內(nèi)未用過維甲酸制劑、皮質(zhì)類固醇激素及免疫抑制劑,1 mo內(nèi)未用過治療銀屑病的內(nèi)服及外用藥物,無其他系統(tǒng)性疾病或皮膚疾病;女性患者排除懷孕、哺乳及月經(jīng)期. 健康對(duì)照30例,均來自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病研究所研究生、體檢職工及皮膚外科整形美容的患者,男17例,女13例,年齡18~50歲( 經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,年齡、性別與銀屑病患者組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 ). 對(duì)符合上述入選標(biāo)準(zhǔn)的患者詳細(xì)記錄病史資料,進(jìn)行血常規(guī)檢查,征得患者本人同意后自肘靜脈取血8mL加入肝素抗凝管備分離,標(biāo)本收集完畢后根據(jù)患者病情給予相應(yīng)的抗銀屑病藥物治療[1]至皮損消退70%以上時(shí)再次進(jìn)行血常規(guī)檢查,取療后血,并再次記錄患者的PASI評(píng)分,共收集到治療后患者16例(男9例,女7例,年齡22~58歲).

Hema 480基因擴(kuò)增儀(珠海黑馬醫(yī)學(xué)儀器有限公司),TFX20M紫外檢測(cè)儀(Vilber lourmat法國),CS9000雙波長飛點(diǎn)薄層掃描儀(日本島津),TRIzol (GIBICO/BRL), SuperScriptTM FirstStrand Synthesis System for RTPCR( Invitrogen ). 特異性引物CXCR3 5′ TCCTTGAGGTGAGTGACCACAAA3′, 5′CTCGTCGTGGTGGGCCGACAG3′,擴(kuò)增片段為584 bp;β肌動(dòng)蛋白5′CAACTCCATCATGAAGTGGTAAC3′,5′CCACACGGAGTACTTGCGCGCCTC3′,擴(kuò)增片段為180 bp. 由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成.

1.2方法用RTPCR方法檢測(cè)淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞中CXCR3的基因表達(dá)水平. 用60 g/L葡聚糖溶液沉降紅細(xì)胞,淋巴細(xì)胞分層液分離淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞,顯微鏡下記數(shù)2×106個(gè)細(xì)胞. 總RNA提取試劑TRIzolTM提取淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞總RNA. 紫外分光法檢測(cè)RNA純度,TBE/瓊脂糖電泳檢測(cè)RNA的完整性. 嚴(yán)格按照Invitrogen的試劑盒說明書進(jìn)行操作反轉(zhuǎn)錄合成cDNA. 以cDNA為模板建立PCR反應(yīng)體系:反應(yīng)總體積為25 μL,反應(yīng)程序?yàn)椋?94℃變性45 s, 57℃退火45s, 72℃延伸1 min,首次循環(huán)94℃預(yù)變性5 min,共進(jìn)行35個(gè)循環(huán),最后72℃延伸7 min. 以β肌動(dòng)蛋白作為內(nèi)參照進(jìn)行半定量,CXCR3與β肌動(dòng)蛋白同管擴(kuò)增. PCR產(chǎn)物用20 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),以每厘米膠長5 V的電壓進(jìn)行電泳,50 min后在紫外檢測(cè)儀上觀察結(jié)果并進(jìn)行近距離攝影,用薄層掃描儀掃描膠片,基因表達(dá)水平以內(nèi)參照β肌動(dòng)蛋白基因?yàn)榛鶞?zhǔn)校正后獲得.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理: 采用SPSS10.0軟件處理,數(shù)據(jù)以x±s表示,治療前后數(shù)據(jù)用配對(duì)資料t檢驗(yàn)分析,基因表達(dá)量用OneWay ANOVA (單因素方差分析)方法,兩兩比較用最小顯著差數(shù)法(Leastsignificant difference)檢驗(yàn). 相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān). P

2結(jié)果

治療前患者的PASI評(píng)分為8.4~47.2(27.3±8.8). 所收集到的治療后患者的PASI評(píng)分為1.2~15.3(5.0±3.9),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比相應(yīng)患者治療前的PASI評(píng)分(10.8~47.2, 25.6±10.8)下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

進(jìn)行期斑塊狀銀屑病患者淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞中CXCR3 mRNA的平均表達(dá)水平見表1及圖1. 銀屑病患者治療前外周血淋巴細(xì)胞中CXCR3 mRNA表達(dá)水平明顯高于健康對(duì)照組(P

表1外周血淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞中CXCR3 mRNA的表達(dá)水平(略)

aP

A: 淋巴細(xì)胞;B: 中性粒細(xì)胞. M: 100 bp marker; 1~2: 銀屑病患者治療前; 3~4: 健康對(duì)照; 5~6: 銀屑病患者治療后. 180 bp: 內(nèi)參照β肌動(dòng)蛋白; 584 bp: CXCR3.

圖1淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞中CXCR3 mRNA的電泳圖(略)

3討論

銀屑病是一種在多基因遺傳背景下、受多種內(nèi)外環(huán)境因素刺激和誘導(dǎo)的自身免疫性慢性炎癥性皮膚病. 免疫異常在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中起到核心作用,參與銀屑病皮損部位免疫反應(yīng)的細(xì)胞主要涉及淋巴細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞等,而細(xì)胞因子是各種免疫細(xì)胞之間相互作用的樞紐[3-4].

現(xiàn)認(rèn)為銀屑病是一種T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病. 在體外,銀屑病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞具有促進(jìn)自身角質(zhì)形成細(xì)胞生長的作用[5],提示銀屑病表皮的病理變化也與淋巴細(xì)胞的過度活化有關(guān);細(xì)菌超抗原介導(dǎo)的銀屑病發(fā)病機(jī)制與T淋巴細(xì)胞活化有關(guān),有研究[6]顯示極微量的鏈球菌M6蛋白可引起點(diǎn)滴狀銀屑病患者外周血單一核細(xì)胞明顯增殖,導(dǎo)致Th1型細(xì)胞因子IFNγ明顯增加. T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫異常在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中起到核心作用,T細(xì)胞不只局限于真皮,而且進(jìn)入表皮諸層,參與銀屑病發(fā)病的T細(xì)胞主要為活化的I型T細(xì)胞,表皮主要為Tc1細(xì)胞,真皮主要為Th1細(xì)胞. 細(xì)胞因子是細(xì)胞之間相互作用的主要介質(zhì),在銀屑病皮損部位,T細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞等通過細(xì)胞因子、趨化因子發(fā)生相互作用,而且其間的關(guān)系變得復(fù)雜而紊亂[7]. 隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)由抗原提呈細(xì)胞與自然殺傷細(xì)胞介導(dǎo)的天然免疫及由T細(xì)胞介導(dǎo)的獲得性免疫在銀屑病患者中發(fā)生紊亂,二者相互作用,導(dǎo)致細(xì)胞因子、趨化因子及生長因子產(chǎn)生,進(jìn)而導(dǎo)致皮損部位炎癥細(xì)胞浸潤及炎癥網(wǎng)絡(luò)的逐級(jí)放大,最終導(dǎo)致銀屑病特有的浸潤性鱗屑性紅斑發(fā)生[8].

趨化因子及其受體系統(tǒng)在炎癥細(xì)胞自毛細(xì)血管向皮損部位的遷移過程中起到至關(guān)重要的作用. Goebeler等[2]的研究結(jié)果顯示趨化因子Mig mRNA在銀屑病皮損部位真皮上部高表達(dá)并在真皮頂端呈簇集分布,與T細(xì)胞及巨噬細(xì)胞在銀屑病皮損頂部的浸潤模式相一致, 由于Mig具有活化及趨化T細(xì)胞的能力,推測(cè)真皮頂端是T細(xì)胞外滲繼而移入表皮的首選部位,由于某一時(shí)段中只有部分皮損部位的真皮表達(dá)Mig,提示T細(xì)胞的外滲和遷移受時(shí)間的限制并呈周期性. Mig的特異性受體為CXCR3, CXCR3主要表達(dá)于Th1細(xì)胞亞群,這與銀屑病皮損部位浸潤的主要T細(xì)胞亞群相一致. 有報(bào)道CXCR3在銀屑病皮損部位皮膚中升高,主要表達(dá)于真皮CD3+淋巴細(xì)胞[9].

我們的研究結(jié)果表明趨化因子受體CXCR3在銀屑病外周血淋巴細(xì)胞中的表達(dá)增高并與PASI呈正相關(guān),并且隨著病情的好轉(zhuǎn)而下降,結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道,推測(cè)CXCR3可能通過與其特異性配體Mig結(jié)合,參與了淋巴細(xì)胞向皮損部位的移行及皮損炎癥狀態(tài)的維持,其機(jī)制可能涉及包括參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在內(nèi)的多環(huán)節(jié)調(diào)節(jié),使細(xì)胞之間及細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而更加符合炎癥細(xì)胞遷移的需要,從而在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用.

參考文獻(xiàn)

[1] 楊桂蘭,陳志強(qiáng),鄭家潤,等. 銀屑病患者中性粒細(xì)胞中CXC型趨化因子受體CXCR1, CXCR2 mRAN的表達(dá)[J]. 中華皮膚科雜志, 2003,36(9):516-518.

[2] Goebeler M, Toksoy A, Spandau U, et al. The CXC chemokine Mig is highly expressed in the papillae of psoriatic lesions[J]. J Pathol, 1998,184(1):89-95.

[3] RoussakiSchulze AV, Kouskoukis C, Petinaki E, et al. Evaluation of cytokine serum levels in patients with plaquetype psoriasis[J]. Int J Clin Pharmacol Res, 2005,25(4):169-173.

[4] Boniface K, Lecron JC, Bernard FX, et al. Keratinocytes as targets for interleukin10related cytokines: A putative role in the pathogenesis of psoriasis[J]. Eur Cytokine Netw, 2005,16(4):309-319.

[5] 王剛,劉玉峰. 銀屑病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞對(duì)自身角質(zhì)形成細(xì)胞的促生長作用[J]. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào), 2001,22( 24):2297-2299.

[6] 劉雯,趙廣,劉玉峰. 銀屑病患者外周血單一核細(xì)胞對(duì)鏈球菌M6蛋白的反應(yīng)[J]. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào), 2003,24( 13):1213-1215.

[7] Bos WE, Thio HB, Neumann HA, et al. The pathogenesis of inflammatory dermatoses, especially psoriasis[J]. Ned Tijdschr Geneeskd, 2006,150(4):179-183.

篇10

【關(guān)鍵詞】 系膜增生性腎小球腎炎;腎病綜合征;外周血淋巴細(xì)胞;Bax;凋亡

)Abstract: Ojective To investigate the relationship between expression of Bax protein and apoptosis in peripheral blood lymphocytes (PBLs) in children with primary nephrotic syndrome (NS) with the pathology type of mesangial proliferative glomerulonephritis (MsPGN), so to further explore the mechanism of glucocorticoid-resistance in children. Methods The PBLs in MsPGN-NS and normal children were isolated with Ficoll-Hypaque gradient centrifugation. Then they were treated with phytohemagglutinin (PHA) or PHA plus dexamethasone (Dex). At the 24th and 48th hour of culture, the expression levels of Bax protein and apoptosis proportion were measured by flow cytometric analysis. Results The Bax protein levels in PBLs of Dex in the control group were much higher than those in both the MsPGN-NS group and normal children (P24 h). However, at each time point the Bax protein levels of Dex group in MsPGN-NS children were all lower than those in normal children (P

Key words:mesangial proliferative glomerulonephritis (MsPGN); nephrotic syndrome; peripheral blood lymphocytes (PBLs); Bax; apoptosis已換

糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid,GC)是治療腎病綜合征(nephrotic syndrome,NS)的首選藥物,但臨床上部分NS患兒由于對(duì)GC抵抗,致使反復(fù)應(yīng)用GC和免疫抑制劑,從而出現(xiàn)很多藥物不良反應(yīng)和(或)并發(fā)癥,加重了原有的病理損害。因此NS患兒GC抵抗的原因一直是研究的熱點(diǎn)[1-5]。系膜增生性腎小球腎炎(mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)是兒童原發(fā)性NS較常見的病理類型之一,也是最常見的對(duì)GC不敏感的病理類型,臨床治療較為困難。免疫功能紊亂可能在MsPGN患兒發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。本實(shí)驗(yàn)采用Bax蛋白表達(dá)及外周血淋巴細(xì)胞(PBLs)凋亡率來觀察系膜增生型NS中GC抵抗的可能機(jī)制。

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象 本實(shí)驗(yàn)所選患者為門診隨訪和定期住院進(jìn)行環(huán)磷酰胺沖擊治療(3個(gè)月和半年一次)的原發(fā)性NS患兒,他們均是初治時(shí)對(duì)GC不敏感,而行腎活檢術(shù),病理類型證實(shí)為MsPGN,36例,其中男23例,女13例,平均年齡10.6歲,所有入選兒童近期無感染性疾病,部分患兒已停用GC 3個(gè)月以上或現(xiàn)口服強(qiáng)的松最大量為5 mg,隔日1次。正常兒童(無感染性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、外傷等)30例,男18例,女12例,平均年齡11.6歲。于2004年8月—2005年2月采血,檢測(cè)地塞米松(Dex)處理不同時(shí)間(24 h、48 h)后Bax蛋白表達(dá)水平與PBLs凋亡情況。

1.2 試劑 小鼠抗人Bax單抗購自北京萊博生物技術(shù)研究所;AnnexinⅤ/PI凋亡檢測(cè)試劑盒購自北京寶賽生物技術(shù)有限公司;RPMI1640、植物血凝素(PHA)、新生牛血清、地塞米松等均為北京華美生物工程公司進(jìn)口分裝。

1.3 主要儀器 二氧化碳培養(yǎng)箱為美國UVP公司產(chǎn)品,流式細(xì)胞儀(FCM)由美國Calibur公司生產(chǎn)。

1.4 方法

1.4.1 淋巴細(xì)胞分離與培養(yǎng) 密度梯度離心法常規(guī)分離淋巴細(xì)胞,調(diào)備細(xì)胞數(shù)為1×109/L,用含10%小牛血清和雙抗的RPMI1640完全培養(yǎng)基分組進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。對(duì)照組為細(xì)胞懸液+PHA,處理組為細(xì)胞懸液+PHA+Dex,置37℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48 h。

1.4.2 Bax蛋白表達(dá)的檢測(cè) 取PBS調(diào)備的濃度為1×109/L的細(xì)胞懸液1 ml,用4%多聚甲醛固定15~20 min,1000 r/min離心10 min, 棄上清,沉淀用含0.1%Triton100和10%小牛血清的完全培養(yǎng)基洗滌1次,條件為1000 r/min離心10 min,而后加入Bax單抗(濃度均為1∶100)100 μl,混勻后室溫放置30 min,完全培養(yǎng)基洗滌2次,加入FITC-山羊抗鼠IgG(濃度為1∶100)100 μl,混勻后室溫避光放置30 min,完全培養(yǎng)基洗滌2次;沉淀用完全培養(yǎng)基0.5 ml重懸,送流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

1.4.3 淋巴細(xì)胞凋亡的檢測(cè) 取PBS調(diào)備的濃度為1×109/L的細(xì)胞懸液1 ml,1 000r/min、4℃離心10 min,棄上清,加入1 ml冷的PBS,輕輕震蕩,使細(xì)胞懸浮,1000 r/min、4℃離心10 min,棄上清,再用冷PBS洗滌2次;將細(xì)胞重懸于200 μl結(jié)合緩沖液,加入10 μl AnnexinⅤ-FITC和5 μl PI,輕輕混勻,避光室溫反應(yīng)15 min、4℃反應(yīng)30 min,加入300 μl結(jié)合緩沖液,1 h內(nèi)上機(jī)檢測(cè)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,Bax蛋白表達(dá)水平以及凋亡率均以±s表示,兩組之間的比較用t檢驗(yàn),Bax蛋白表達(dá)量與凋亡率之間的關(guān)系應(yīng)用相關(guān)分析,P

2 結(jié) 果

2.1 MsPGN-NS患兒與正常兒童PBLs Bax蛋白的表達(dá) ①M(fèi)sPGN-NS患兒與正常兒童空白對(duì)照組PBLs經(jīng)體外培養(yǎng)24和48 h后Bax的表達(dá)有所升高,Dex組Bax的表達(dá)則顯著增加(48 h>24 h);Dex組各時(shí)間點(diǎn)Bax蛋白的表達(dá)均顯著高于空白對(duì)照組(P0.05),而Dex組Bax蛋白的表達(dá)則顯著低于正常兒童(P

2.2 MsPGN-NS患兒與正常兒童PBLs凋亡率 ①M(fèi)sPGN-NS患兒與正常兒童空白對(duì)照組PBLs經(jīng)體外培養(yǎng)24和48 h后凋亡率有所升高,Dex組凋亡率則顯著增加(P24 h);Dex組各時(shí)間點(diǎn)凋亡率均顯著高于空白對(duì)照組(P0.05),而48 h凋亡率明顯低于正常兒童(P

地塞米松

作用時(shí)間腎病綜合征患兒組(n=36)對(duì)照組Dex組 正常兒童對(duì)照組表2 腎病綜合征患兒與正常兒童淋巴細(xì)胞凋亡百分比的比較與組內(nèi)對(duì)照組比較:P

2.3 MsPGN-NS患兒與正常兒童PBLs凋亡率與Bax蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析 MsPGN-NS患兒與正常兒童PBLs凋亡率與Bax蛋白的表達(dá)水平均呈明顯正相關(guān)(P

3 討 論

NS是一種免疫相關(guān)性疾病,按病理類型可分為微小病變和非微小病變2種類型。GC目前是治療NS的首選藥物,然而MsPGN-NS患兒大多表現(xiàn)為GC不敏感或耐藥,病情容易遷延反復(fù)。至今對(duì)于MsPGN-NS患兒GC治療的反應(yīng)差異性仍沒有比較滿意的解釋。研究發(fā)現(xiàn),不同病理類型的GC抵抗型NS患兒幾乎都存在PBLs凋亡受抑的情況。因此,本研究選擇MsPGN的GC抵抗型NS患兒為研究對(duì)象,以炎癥-免疫性疾病發(fā)病中淋巴細(xì)胞過度活化、增殖及凋亡不足等一系列免疫失衡機(jī)制為理論基礎(chǔ),探討MsPGN-NS患兒GC抵抗的部分可能機(jī)制。

我們采用AnnexinⅤ/PI雙染法,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡,此法的優(yōu)點(diǎn)是既可以檢測(cè)早期凋亡,又可將凋亡和壞死區(qū)分開來,較PI單染法具有更高的靈敏性和特異性,提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。研究結(jié)果顯示:MsPGN-NS患兒與正常兒童相比,體外培養(yǎng)淋巴細(xì)胞的自然凋亡率24 h無明顯差異(P>0.05),而48 h MsPGN-NS患兒則低于正常兒童,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

Bax是Bcl-2基因家族中重要的凋亡調(diào)控基因,也是Bcl-2家族中研究最廣泛的促凋亡蛋白。Bax定位于細(xì)胞質(zhì),作用于線粒體, Bax蛋白本身可以形成同二聚體,也可與Bcl-2、Bcl-Xl蛋白等形成異二聚體,對(duì)細(xì)胞凋亡起促進(jìn)作用。Bax和 Bcl-2蛋白的比例決定了細(xì)胞接受凋亡信號(hào)后的命運(yùn),當(dāng)Bax蛋白占優(yōu)勢(shì)時(shí)細(xì)胞發(fā)生凋亡,反之當(dāng)Bcl-2蛋白表達(dá)增強(qiáng)時(shí)細(xì)胞繼續(xù)生存。

Bax在免疫系統(tǒng)發(fā)育與免疫調(diào)節(jié)中起著重要作用。許多自身免疫性疾病的發(fā)生都與Bax有關(guān)。Ogawa等[6]對(duì)干燥綜合征患者淋巴細(xì)胞凋亡與凋亡相關(guān)基因表達(dá)的研究結(jié)果表明干燥綜合征患者PBLs體外培養(yǎng)后T淋巴細(xì)胞凋亡數(shù)顯著增加,并且發(fā)現(xiàn)這與Bax表達(dá)增加、Bcl-2表達(dá)減少有關(guān)。崔玉芳等[7]用γ射線照射小鼠,觀察照射不同時(shí)間小鼠PBLs凋亡情況,從而探討其發(fā)生機(jī)制,結(jié)果發(fā)現(xiàn)照射早期小鼠PBLs凋亡率顯著升高,PBLs Bax蛋白表達(dá)水平也明顯增加,而后期隨著凋亡率的降低,Bax蛋白的表達(dá)也明顯下降。其他免疫相關(guān)性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、B細(xì)胞淋巴瘤、骨髓異常增生綜合征等淋巴細(xì)胞凋亡也與Bax表達(dá)水平有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示:Dex可使MsPGN-NS患兒與正常兒童PHA刺激活化的PBLs Bax蛋白表達(dá)增加,與同一時(shí)間點(diǎn)空白對(duì)照組的自然表達(dá)相比有明顯差異(P24 h),說明GC可誘導(dǎo)人PBLs Bax蛋白的表達(dá)。比較MsPGN-NS患兒與正常兒童Bax蛋白的表達(dá),我們發(fā)現(xiàn)空白對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)Bax蛋白的表達(dá)無明顯差異(P>0.05),但Dex組各時(shí)間點(diǎn)MsPGN-NS患兒Bax的表達(dá)均低于正常兒童(P

綜上所述,我們通過對(duì)MsPGN-NS患兒和正常兒童PBLs Bax蛋白的表達(dá)水平與凋亡率進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明MsPGN-NS患兒存在PBLs凋亡受抑的情況,這與MsPGN-NS患兒Bax蛋白低表達(dá)有一定關(guān)系。提示Bax蛋白低表達(dá)是MsPGN-NS患兒GC抵抗的可能因素之一。

參考文獻(xiàn)

1] Duclos M, Gouarne C, Bonnemaison D. Acute and chronic effects of exercise on tissue sensitivity to glucocorticoids [J]. J Appl Physiol, 2003,94(3):869-875.

[2] Kikham BW, Corkill MM,Davison SC, et al. Response to glucocorticoid treatment in rheumatoid arthritis: in vitro cell mediated immune assay predicts in vivo responses [J]. J Rheumatol, 1991,18(6): 821-825.

[3] Goleva E, Kisich KO, Leung DY. A role for STAT5 in the pathogenesis of IL-2-induced glucocorticoid resistance [J]. J Immunol,2002,169(10):5934-5940.

[4] Boussiotis VA, Lee BJ, Freeman GJ, et al. Induction of T cell clonal anergy results in resistance, whereas CD28-mediated costimulation primes for susceptibility to Fas- and Bax-mediated programmed cell death [J]. J Immunol,1997,159(7):3156-3167.

[5] Wiley RE, Cwiartka M, Alvarez D, et al. Transient corticosteroid treatment permanently amplifies the Th2 response in a murine model of asthma [J]. J Immunol,2004,172(8):4995-5005.