環(huán)保的標語范文
時間:2023-03-27 11:12:18
導語:如何才能寫好一篇環(huán)保的標語,這就需要搜集整理更多的資料和文獻,歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文,供你借鑒。
篇1
1. 如廁后請勿忘關閉水龍頭。
2. 不需要“涌泉”相報,只需止水之恩。
3. 向前一小步。文明一大步(男)。
4. 前進一小步,文明一大步。
5. 情不在切,貼心就行;“紙”不在多,夠用就行。
6. 一紙一屑煞文明,一舉一動顯文明。
7. 請您”方便”后記得要沖洗。
8. 如廁后請沖水,不要亂丟雜物。
9. 衛(wèi)生用品包好再扔,體諒打掃者的辛勞。
10. 對準了位置解決內急,你好,我好,大家好!
11. 只需舉手之勞,便可清潔一新。
12. 文明向前看一小步。文明一大步。
13. 沖刷精神,一切為用戶著想。
14. 今天你沖了嗎?
15. 請不要在小便池內拉屎。
廁所溫馨提示標語【精選篇】
1. 克服不良習慣,養(yǎng)成文明行為。
2. 來也匆匆,去也沖沖。
3. 沖一沖,你好,我也好。
4. 當我們心情愉快的時候,也別忘了讓廁所的心情和我們一樣愉快喲!
5. 上前一小步,文明一小步,用完快沖水,衛(wèi)生你我他。
6. 輕輕按一下,清新你我他。
7. 按下這里,你會有一個驚喜。
8. 手紙請放紙簍里便后請用水沖洗洗。
9. 設備真可貴,公德不可退。
10. 若您如廁功告成,順手沖水了無痕。
11. 你清潔,我衛(wèi)生,齊齊健身心。
12. 同志們,沖啊!
13. 如果你不給別人方便,你將不能”方便”。
14. 您瞅準了,按這里沖。一般人我不告訴他。
15. 如果你不沖刷廁所,你將是歷史的罪人。
廁所宣傳標語【集錦篇】
1. 干干凈凈牌沖刷器,用過就知道。
2. 拉屎不沖,天理難容!
3. 誰按誰精神,您瞅準了,就按這里。
4. 文明手底下方便你我他。
5. 請您”方便”后一定要:洗刷刷洗刷刷,洗刷刷洗刷刷。
6. 隨手沖一沖,干凈又輕松!
7. 同志們請沖一沖啊!
8. 文明生活從小做起。
9. 飛流直下一兩尺,記得沖水大拇指。
10. 愛護公共設施,是你我應盡的責任。
11. 大環(huán)境,小環(huán)境,干凈才有好心情。
12. 貼近文明,靠近方便。
13. 如廁沖水了無痕,道德水準功告成。
14. 今天,你沖了嗎?
15. 起身沖一沖,大家都輕松。
16. 廁所衛(wèi)生要注意,干凈清潔要保持。
17. 廁所衛(wèi)生要注意,干凈清潔常保持。
18. 匆匆走?別!沖沖再走!
19. 按一按,清潔又流暢。
20. 高高興興方便,輕輕松松沖刷。
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1.衛(wèi)生間環(huán)境衛(wèi)生標語
2.衛(wèi)生間環(huán)境標語
3.創(chuàng)意衛(wèi)生環(huán)保標語
篇2
有關環(huán)保方面的警示標語欣賞1、與自然重建和諧,與地球重修舊好。
2、你的星球需要你,聯(lián)合起來應對氣候變化!
3、保護戈壁植被,防止沙塵污染,保護大氣環(huán)境。
4、沒有地球的健康就沒有人類的健康與自然重建和諧,與地球重修舊好垃圾混置是垃圾,垃圾分類是資源。
5、保護環(huán)境,保存希望。
6、加強環(huán)境宣傳教育,提高全民環(huán)境意識。
7、揀回垃圾分類老傳統(tǒng),倡導綠色文明新時尚。
8、破壞環(huán)境,就是破壞我們賴以生存的家園。
9、土壤不能再生,防止土壤污染和沙化,減少水土流失。
10、保護環(huán)境是一項必須長期堅持的基本國策。
11、拯救地球,一起動手。
12、不要旁觀,請加入行動者的行列。
13、保護水環(huán)境,節(jié)約水資源。
14、追求綠色時尚,擁抱綠色生活。
15、垃圾回收,保護地球,舉手之勞,參與環(huán)保。
16、今天節(jié)約一滴水,留給后人一滴血。
17、善待地球就是善待自己。
18、讓經濟發(fā)展的浪潮進入綠色的河道。
19、建設美麗的邊疆,愛護我們的家園。
20、破壞環(huán)境,禍及千古,保護環(huán)境,功蓋千秋。
21、把消費限制在生態(tài)圈可以承受的范圍內破壞環(huán)境,禍及千古,保護環(huán)境,功蓋千秋。
22、人類若不能與其他物種共存,便不能與這個星球共存。
23、環(huán)境與人類共存,資源開發(fā)與環(huán)境保護協(xié)調。
24、促綠色消費,做綠色選民。
25、地球是我們從后代手中借來的、環(huán)保不分民族,生態(tài)沒有國界不要旁觀,請加入行動者的行列今天節(jié)約一滴水,留給后人一滴血。
有關環(huán)保方面的警示標語分享1. 熱帶雨林——地球的肺
2. 愛護我們的地球從點點滴滴做起
3. 花草叢中笑,園外賞其貌
4. 酸雨是地球萬物的共同敵人
5. 水-----20億人生命之所系
6. 索取資源力求簡單,利用資源轉化完全
7. 合理利用自然資源,有效保護生態(tài)平衡
8. 欲攬春*入自家,無可奈何成落花
9. 保護生物多樣性
10. 小草對您微微笑,請您把路繞一繞
11. 積極推展減廢運動,落實做好廢棄管理
12. 保護環(huán)境是責任,愛護環(huán)境是美德
13. 遵守法律法規(guī),防治環(huán)境污染
14. 人人提案創(chuàng)新,成本自然降低
15. 種樹種草,有利環(huán)保
16. 環(huán)境與人類共存,開發(fā)與保護同步
17. 草兒可愛,大家愛
18. 購買尾氣排放達標的汽車
19. 水是生命之源,節(jié)約用水就是保護環(huán)境
20. 地球是我家,綠化靠大家
21. 提高環(huán)境保護意識,愛護我們共有家園
22. 距離產生美,謝絕親密接觸
23. 綠色——生命之源
24. 建設綠色企業(yè),堅持綠色經營
25. 種一棵樹,種一枝花,世界會更美好
有關環(huán)保方面的警示標語推薦1. 多栽一棵樹,就給人類多增添一絲生存的希望。
2. 朋友,請給鳥兒多一片溫暖的天空,請給魚兒多一點娛樂的天地。
3. 含一滴水,還一份真情!
4. 地球不僅僅是人類的家園,更是所有生物的家園。
5. 用我們的雙手,保護我們的地球。
6. 讓我們?yōu)榈厍驄寢尮餐瑩纹鹨话丫G傘。
7. 我們?yōu)樘烊毁Y源越來越少而傷心,地球為我們破壞資源而哭泣。
8. 利用地球資源是為了人類更好地生存,保護地球環(huán)境是人類為了生存得更久。
9. 保護我們的家園,讓地球充滿綠色。
10. 保護環(huán)境,有益健康。
11. 沒有綠色,生命就沒有希望。
12. 你是否聽見,地球媽媽在哭泣。
13. 把綠色還給地球。
篇3
1、有了您的真心呵護,學校才會更加美麗!
2、學校是我家,人人都愛它。
3、踏破青氈可惜,多行數步無妨。
4、建設綠色校園,增強環(huán)保意識。
5、給我一片綠,還你一片蔭。
6、請您愛護綠色,綠是生命之源。
7、手上留情花自香,腳下留意草如茵。
8、花木有情報春暉,同學愛護喜心扉。
9、樹木擁有綠色,地球才有脈搏。
10、美化生活,凈化心靈。
11、只要給予一些愛,就能給你帶來郁郁蔥蔥的綠蔭。
12、少一個腳印,多一份芳香。
13、小草給我一片綠,我給小草一份愛。
14、綠色是我們的家園。
15、輕輕地我走了,正如我輕輕地來。(圖書館)
16、綠色明亮了我們的眼睛,是為了讓我們看清足下綠的生命。
17、當你不要我時,請把我送回家。
18、小草對您微微笑,請您把路讓一讓。
19、別在綠色消失時,我們才去后悔。
20、青青小草有生命,請君足下留情。
21、保護學校環(huán)境,共創(chuàng)學生圣地!
22、除了足跡,什么都不能遺留;除了回憶,什么都不要拎走。
23、多一聲謝謝,多一個朋友,多一聲抱歉,多一份寬容。
24、請您足下繞一繞,草兒向您笑一笑。
25、你來繞一繞,我來笑一笑。
26、繞行三五步,留得芳草綠。
27、草兒綠、花兒香,環(huán)境優(yōu)美人健康!
28、芳草依依,大家憐惜。
29、創(chuàng)造綠色時尚,擁抱綠色生活。
30、輕輕抬起你的小腳,我在你的腳下微笑。
31、人人都來愛護它,世界才會更美妙。
32、小花小草傳芳香,請你把路繞一繞。
33、愛無限,綠無邊。
34、編織愛心,保護環(huán)境。
35、你珍惜我的生命,我還你一片綠蔭。
36、注意了,每個人都看見你在這里的一舉一動。(走廊)
37、小草青青,花香飄飄;青草鮮花,應當愛惜。
38、我愛花,我愛草,我愛青青小樹苗。
39、我很怕羞,請別碰我!
40、拯救地球,一起動手。
41、心中有情,腳下留情。
42、創(chuàng)建綠色校園,從你我做起。
43、心動不如行動,去怨不如去干。
44、人類只有好好地對待大自然,大自然才能無限地回報人類。
45、花香陣陣,鳥鳴聲聲。瑯瑯書聲,濃濃情深。
46、小草正睡覺,請你勿打擾。
47、環(huán)境好,生活就好。
48、用愛心呵護每一片綠色。
49、請讓我們的腰桿永遠挺直!
50、少一串腳印,多一份綠意。
51、它失去了保護,我們就失去了健康。
52、綠色校園,綠色生活。
53、鮮花還需綠葉扶,學校更需同學護!
54、問壇哪得綠如許,為有大家來愛護!
55、天是藍的,草是綠的,心是純粹的。
56、如果沒有樹木,世界將會暗淡無光。
57、保護環(huán)境,從我做起。
58、你揮一揮袖,不帶走一片云彩。我動一動手,不留下任何紙屑。
59、請讓我們的校園永遠充滿綠色。
60、手下留情花更艷,腳下留情草更翠。
61、一花一草皆生命,一枝一葉總關情。
62、花草樹木都是寶,沒它我就不行了。
63、保護環(huán)境,少說多做,讓校園成為綠色的殿堂。
64、茵茵綠草地,腳下請留情。
65、勸君多走幾步路,莫把草坪當馬路。
66、喝潔凈的水,呼吸新鮮的空氣,這需要您每時每刻愛護環(huán)境!
67、追求綠色時尚,擁抱綠色生活。
68、小草青青,腳下留情。
69、走一走,看一看,花紅柳綠美無限。
70、多一份綠色,多一份健康。
71、花草是我的朋友,請多一份愛護!
72、人人參與環(huán)境保護,個個爭當綠色天使。
73、大路隨你走,別踩在我頭。
74、少一個腳印,多一個生命,不銹鋼水箱。
75、創(chuàng)建環(huán)保模范城市建設環(huán)保綠色家園
76、不要讓白色的面紗罩在我綠色的笑顏上。
77、小草青青,腳步輕輕。
78、綠色象征生命,珍惜生命,環(huán)保第一。
79、水孕育和維持著地球上的生命,誰來關愛水的生命!
80、保護環(huán)境從我做起,愛護學校從學生做起。
81、青青綠葉紅花,豈能肆意踐踏(請勿踐踏草坪)
82、改善民生,共享水利發(fā)展成果
83、綠色,永恒的美;校園,永遠的家!
84、珍惜資源永續(xù)利用,綠化環(huán)境凈化心靈。
85、讓綠色看得見,讓綠色聽得見。
86、青山清我目,流水靜我耳。
87、賞花愛花花更美,觀景惜景景更幽。
88、追求綠色時尚、走向綠色文明。
89、給我一份愛,送你一片綠
90、保障飲水安全,維護生命健康
91、8.節(jié)約為本,治污優(yōu)先
92、你的行動代表花的未來。
93、當你昂首闊步時,我在你腳下。
94、一草一木皆生命,一枝一葉總關情。
95、堅持團結治水,構建和諧流域
96、垃圾箱:請你近距離投籃。
97、全面規(guī)劃,統(tǒng)籌兼顧,推進水利協(xié)調發(fā)展
98、讓校園陽光普照,讓綠色神圣美妙。
99、讓花兒含笑,讓草兒傳情,讓心兒綻放。
100、鳥兒渴望潔凈的天空,人類渴望綠色的家園。
101、小草微微笑,請你繞一繞。
102、人重臉,樹重皮,請勿墻上留痕跡。
103、今天節(jié)約一滴水,留給后人一滴血。
104、撿起片片紙,傳遞深深情。
105、邁步留意地下草,撣指莫折枝頭花。
106、要想校園凈又美,健康文明記心里。
107、節(jié)約用水就是珍惜生命。
108、堅持人水和諧,建設生態(tài)文明
109、花兒以花香回報我們,我們只需腳下留情。
110、環(huán)境你不愛,美景不常在。
111、建環(huán)保模范城市創(chuàng)美好幸福生活
112、節(jié)電環(huán)保標語:節(jié)約能源,大有可為,功在當代、利在千秋
113、保護綠地標語:不要踩我啊。我也會疼的……
114、保護生態(tài)環(huán)境,就是愛護自己。
115、保護環(huán)境,保護自然就是保護人類自己。
116、我們是幼苗,我們都需要呵護。
117、乘陰靠綠樹,美化靠大家。
118、水資源是有限的,生命之河是無限的。
119、同建綠色校園,共享鳥語花香。
120、珍惜水,保護水,讓水造福人類。
121、珍惜水資源,保護水環(huán)境,防治水污染
122、樹環(huán)保之風,迎美好明天。
123、珍愛生靈、節(jié)約資源、抵制污染、植樹護綠。
124、學校一片綠,學生心中一片春。
125、為了美麗家園,請從小事做起。
126、同花兒一起開放,和小樹一起成長。
127、鳥語花香,愛賞共享。
128、幸福生活不只在于豐衣足食,也在于碧水藍天。
129、愛護小草吧,它是春天的信使!
130、保護水環(huán)境,節(jié)約水資源。
131、實施科教興國與可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略。
132、學校是我家,保護環(huán)境靠大家。校園是我家,衛(wèi)生靠大家。
133、加強環(huán)境宣傳教育,提高全民環(huán)境意識。
134、伸出你的手,伸出我的手,讓紙屑遠離我們的校園。
135、美好的校園環(huán)境,需要大家共同建設和創(chuàng)造。
136、為了校園更美,請勿摘花。
137、拯救地球就是拯救未來。
138、用我們的愛心,迎來校園的一片綠。
139、自然不可改良、生活可以選擇選擇綠色生活、健康適度消費
140、愛花、愛草、愛樹、愛校園。
141、青草綠樹你我他咱們同住一家
142、學校是我家,綠化靠大家。
143、你栽一棵樹,我栽一棵樹,我們共同為校園添綠。
144、少生孩子多種樹【有點搞笑…】
145、青山清我目、流水靜我耳
146、讓校園成為綠色殿堂。
147、保護環(huán)境就是保護我們自己。
148、除了足跡,我們什么也沒有留下;除了攝影,我們什么也沒有帶走為了子孫后代,請留下一片凈土
149、萬人齊參與,共建‘綠色生命樹’
150、讓綠色的希望從校園萌芽。
151、贊化天地、道法自然
152、保護樹木,就是保護我們人類
153、學校是我家,美化靠大家。
154、讓校園變成綠色家園,讓祖國變成綠色寶庫。
155、珍惜自然資源,共營生命綠色。
156、保護環(huán)境是一項必須長期堅持的基本國策。
157、家園由我來保護。
158、保護樹木是第一。
159、保護地球,就從美化校園開始吧!
160、保護環(huán)境,造福人民。
161、校園整潔,大家開心。
162、綠色——永恒的美;學校——永遠的家。
163、但存方寸地,留與子孫耕。
164、保護藍天碧水。
165、土壤不能再生,防止土壤污染和沙化,減少水土流失。
166、美好校園需要我們共同建設。
167、美麗的校園,美麗的家,永遠的美麗靠大家
168、學校是我家,環(huán)??看蠹?。
169、郁郁蔥蔥,創(chuàng)新州
170、草木無情皆愿翠行人有情多愛惜
171、環(huán)境與人類共存,資源開發(fā)與環(huán)境保護協(xié)調。
172、人間知音難覓,校園草坪難培。
173、建設美麗的邊疆,愛護我們的家園。
174、校園是我家,美麗靠大家。
175、保護環(huán)境系各人,美化校園靠大家。
176、尊崇自然、敬畏生命
177、環(huán)境保護,人人有責。
178、把綠色帶入校園。
179、美我校園重在每一舉動。
180、環(huán)境保護從我身邊做起。
181、花草樹木對人笑,因為人類愛環(huán)保。
182、我是有生命的軀干,你是有德行的賢君
183、人類離不開花草,就像嬰兒離不開母親的懷抱。
184、1998年6月5日世界環(huán)境日主題是:"為了地壞上的生命-拯救我們的海洋"。
185、破壞環(huán)境,就是破壞我們賴以生存的家園。
186、有限的資源,無限的循環(huán)。
187、保護環(huán)境是每一位公民應盡的責任。
188、舉手之勞,美化校園。
189、多種一棵樹,世界上就多一片綠色
篇4
關鍵詞 .net環(huán)境 報表應用與管理 工作效率 優(yōu)化與改進 現(xiàn)實意義
中圖分類號:TP3 文獻標識碼:A
0前言
目前.net環(huán)境下報表的應用研究主要是針對水晶報表設計與實現(xiàn)來進行,因此本次研究工作選取了水晶報表作為研究對象,依據.net環(huán)境下對報表的需求來深入分析報表設計與實現(xiàn),以此來推動相關研究工作進一步發(fā)展,提高實際報表管理與應用工作效率做出應有的貢獻。
1 基于.net環(huán)境下報表應用需求研究
互聯(lián)網是一個開放性平臺,人們可以隨時隨地通過訪問網絡來搜集感興趣的信息以滿足工作需要,在很大程度上提高了實際工作效率,促進了生活工作方式變革。.net環(huán)境下報表的應用與管理將不再局限于某一個領域,而是通過網絡信息資源的共享與交流來滿足全面具體的應用需求。因此針對報表的應用與開發(fā)對滿足工作需要,推進社會經濟進一步發(fā)展具有重要的促進作用和現(xiàn)實意義。報表開發(fā)與應用也將會朝著多元化發(fā)展,需要在實際工作中不斷研發(fā)與改進,以提高報表的實用性。因此基于.net環(huán)境下報表開發(fā)與應用需要投入較多的精力來給予支持,以確保報表能夠緊隨時展要求,為社會輸出更多優(yōu)質服務。
2 水晶報表概述
2.1水晶報表含義
Crystal Reports(水晶報表)是一款具有良好實用性的商務智能應用軟件,主要用于日常工作中設計以及產生報表。水晶報表是目前世界范圍內最專業(yè)、功能最全、操作性較高的報表應用管理系統(tǒng),除了能夠滿足日常企事業(yè)單位生產所需之外,還能夠與絕大多數主流應用工具實現(xiàn)無縫對接,從而延伸了報表的使用范圍,進一步推動了社會無紙化辦公進程,有力的促進了相關行業(yè)發(fā)展,具有重要的推動作用與現(xiàn)實意義。
2.2水晶報表特點
2.2.1操作簡便、快捷
水晶報表相較于傳統(tǒng)報表應用與管理方式具有明顯的優(yōu)勢,在報表數據計算與整理過程中不需要將繁雜的數據進行捆綁操作,從而有效節(jié)約了工作時間,很大程度上提高了工作效率。同時報表在進行編輯過程中可以通過簡單操作就能夠輕松實現(xiàn),降低了報表操作與應用難度,使得報表能夠成為日常辦公軟件之一得到有效推廣使用。目前水晶報表應用已經進入了一個高峰階段,所帶來的社會效益與經濟收益在很大程度上推動了社會經濟進一步發(fā)展,日常辦公無紙化進程進一步加快,實現(xiàn)了經濟社會可持續(xù)發(fā)展的總體社會目標。
2.2.2水晶報表程序控制能夠滿足實際所需
水晶報表程序控制程序目前主要有拉(PULL)模式和推(OUSH)模式,根據實際工作需要選取科學合理的報表控制模式不僅能夠有效節(jié)約工作時間,還能夠在很大程度上促進報表得到優(yōu)化和完善,具有較高的使用價值。在.net環(huán)境下,通過使用水晶報表不同程序控制模式可以有效降低數據庫連接消耗程度,提高系統(tǒng)自身的運行性能具有重要的影響作用。隨著計算機不斷普及應用,數據庫系統(tǒng)也將隨之普及,因此為了能夠有效提高數據庫系統(tǒng)運行效率與使用價值,就需要針對報表連接消耗問題進行有效解決,而實際研究也證實了水晶報表程序控制模式確實能夠實現(xiàn)降低連接消耗的目的。
3 .net環(huán)境下報表應用研究
3.1利用向導制作報表
利用向導來制作報表是實際工作中利用程度最高、應用范圍最廣泛的報表生成方法,其主要是通過向導的引導來完成所需要報表的設計與生成工作。具體步驟為:根據向導指引新建一個網站來添加報表,之后利用已經存在的數據源來進行報表內容的進一步加工工作。在報表設計器中通過選取合適的報表以及相應數據來進行內容豐富,之后將報表進行導出,如此一來就可以生成一個簡單實用、內容豐富翔實的報表。
3.2動態(tài)生成報表
由于實際工作需要,報表的應用不可能一直沿用固定報表生成模式,往往會因為實際數據變動而需要進行編輯改進,如果能夠動態(tài)生成報表將會在很大程度上簡化報表應用管理流程,提高工作效率。因此通過利用ReportViewer,根據實際所需報表需求來指定顯示報表,自動生成Object Data Source文件,該文件會根據生成數據源時默認定義方法來獲取數據庫中已經存在了的數據。打開Name="DataSet1_DEPARTMENT"/>,通過重新命名Name就可以針對已有報表按照正常方式來加載數據源以及將生成的數據添加到報表之中,從而實現(xiàn)了對報表的動態(tài)加載與編輯,生成的報表能夠符合實際動態(tài)需求,具有較高的應用價值。
4總結
綜上所述,.net環(huán)境下報表的應用需要緊隨時展需求,力爭做到與時俱進來滿足工作需要,從而改變傳統(tǒng)辦公模式,將現(xiàn)代化無紙化辦公理念和方式運用在工作生活中,促使社會經濟實現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的總體社會目標。
參考文獻
[1] 孫惠娟,高瑞華.NET環(huán)境下幾種報表解決方案的對比分析[J].河南財政稅務高等??茖W校學報,2011,12(03):90-92.
篇5
關鍵詞:簡潔;重點;阻止;感情;思維
中圖分類號:G648文獻標識碼:B文章編號:1672-1578(2017)04-0005-02
"人們運用語言這一社會交際工具,準確、鮮明而生動地表達思想感情,傳遞信息,達到相互了解,從而產生出一定的政治、經濟、社會、宣傳、教育和藝術效益,這就是語言的效果。語言效果是無法估量的,有關專家指出:'語言的力量能征服世界上最復雜的東西--人的心靈'"[1]正因如此,我們就要充分利用環(huán)保警示語為我們的環(huán)保服務。
環(huán)保警示語宣傳和倡導的是環(huán)保理念,借助于警示語的形式,達到警示心靈,制約行為的目的,圍繞共同的目的,雖是簡短的一句話,但表達上各顯神通,因而在環(huán)保工作中卻起到舉足輕重的作用。
1.簡潔的語言標示在萬綠叢中或人來人往的公共場所,可以引起人們的關注
(1) 請勿吸煙。
(2)人類只有一個可生息的村莊--地球,保護環(huán)境是每個地球村民的責任。
這些話語簡單明了,但又有明確的意義,禁止做什么,倡導做什么,在不難理解的句子中讓人一目了然,表達的效果顯著。
2.直接阻止與間接阻止某種行為運用在環(huán)保警示語中,能起到詞必達意的效果
有些是間接阻止某種行為的發(fā)生,例(3)破折號后面是"垃圾筒"的呼告,"我不想'失業(yè)'",連"垃圾筒"都在努力為環(huán)保做奉獻,何況是有思維能力的人,而"垃圾筒"不"失業(yè)"的方法是要別人去做某事,人們只有自覺地把垃圾放入"垃圾筒"里,才能讓"垃圾筒"不"下崗",間接阻止了亂吐、亂丟、亂扔、亂放、亂拋垃圾的現(xiàn)象發(fā)生,達到凈化環(huán)境的目的。環(huán)保警示語的語用的最終目的就是要實現(xiàn)保護環(huán)境的目的。
(3)垃圾筒--我不想"失業(yè)"?。?!
一般這種間接阻止的行為不是人對人的講述,它是從另一個角度來說話,人們也許聽不進別人的話,或是聽人說話已聽麻木了,"失業(yè)"的頻率太高了,而現(xiàn)在有存在的第三方有話要說,這是要人們傾聽第三方的聲音,要我們聽聽它們對人類的訴求,易引起人們的共鳴,從而引起人們的同情;同時也讓我們想到,如果連它們都失業(yè)的話,那將是人類的災難,我們還不趕緊行動起來嗎?
這種間接阻止實際采用了言此意彼的委婉的方式,讓人耳目一新,大大提高了"吸睛"率,起到很好的語言效果。
3.環(huán)保警示語有感情,拉近了人與物之間的距離,增強了表達的效果
環(huán)保警示語中修辭格的運用,使環(huán)保警示語帶上了豐富的感情,更好發(fā)揮它的傳情達意的作用,使人類與異類的溝通與交流也就更密切了,看下面的一些語句:
(4)小草在沉睡,請勿打擾他!
(5)小草有生命,承蒙多關照。
(6)愛花的人心靈美如花!
(7)滿園飄香,邀您共賞!
(8)封山育林,造福子孫!
一是用了擬人的辭格,把物當人來寫,把植物的世界人性化,使人與物能互相交流與了解。如"小草在沉睡",從第三人稱的角度來描情狀物,使小草富有人的情態(tài),小草就像一個弱小的、正在沉睡中的嬰兒,他就像是你自己的孩子,他的成長需要人們的關愛與保護,這也勾起人們保護弱者的心理,而人類對弱小的生命一向都有愛心,這就傳達了小草需要保護的意愿。再如"邀您共賞"中用的"邀"是有方向性的動詞,把綠色領域中的植物當作人來描寫,有一方存在的同時還希望有他方的加盟,從而達到香飄四方,美化環(huán)境的目的,同時也慰勞你對花草世界的愛護:"他"今天有最美一面的展示,有你的功勞,所以請你欣賞。還有就是"小草有生命",在這句話里省略了喻詞與喻體,完整的一句話為"小草就像是有生命的嬰兒",何況人類對有生命的東西歷來都關愛與尊重,"承蒙多關照"中的"承蒙"是謙詞,小草的卑微與謙恭易勾起人們的同情心,從而得到更好的關愛與保護。
還有就是對偶的使用,把"結構相同或基本相同、字數相等、意義上密切相連的兩個短語或句子,對稱地排列","從形式上看,音節(jié)整齊勻稱,節(jié)律感強"[3]。像第(9)句中前后句的最后一個字的讀音都押"i"韻;第(10)句"環(huán)保"與"環(huán)境","感動"與"牽動"意義是相近、相連的;第(11)句前后兩句話的最后一個字都押"ān"韻。而且句式中的用詞,詞性是相對的,使"句式富有表現(xiàn)力,便于人們記誦"[4]。這樣可以使相似、相近的內容進行比照,使其更好的襯托和突出語義。
(9)草木無言皆青翠, 行人有情多愛惜。
(10)環(huán)保感動中國, 環(huán)境牽動心靈。
(11)綠色與生命時時相伴, 環(huán)境與健康息息相關 。
此外,頂真的運用,例(12),使"連貫的思索之間的遞相依存的內在聯(lián)系作了清楚的闡述,"[5]讓語句的"說理周密謹嚴,表達如行云流水,氣勢貫通"[6];還有排比修辭格的運用,如例(13),突出了句意,使語言氣勢得到了加強,豐富了環(huán)保警示Z的表情達意的效果,延伸了環(huán)保的廣度,增強了環(huán)保的力度。
(12)垃圾混置是垃圾,垃圾分類是資源。
(13)地球怎么長成,我不知,你不知,他不知.地球怎么滅絕,我知,你知,他知。
還有就是使用婉曲,"即不是直接明白而是含蓄曲折地把自己的意思表達出來。修辭學上把這種方法叫婉曲。運用婉曲手法,可以接近雙方感情上的距離。"[7]如,
(14)除了回憶,請你什么也別帶走。
(15)除了足跡,請你什么也別留下。
(16)當你想丟點什么的時候,請想一想,可千萬別丟臉。
這些話語都沒有嚴厲的制止和訓斥,沒有刺目的、語氣強硬的字眼,如"不準"、"嚴禁"、"罰款"等。有的只是委婉的告誡與和藹的提示,但觀者不難讀懂它要提醒游人要自覺愛護自然景觀,不要采摘花果,不要丟棄任何垃圾,這些引人思考的話語,不難明白它的潛臺詞。通過這些委婉含蓄的話語,催人警醒,激人自律,當看到景區(qū)這些文明的警示語時,誰還忍心摘花采果,亂扔垃圾,損壞這里美麗無比的環(huán)境呢?這種既熱情誠懇,又婉轉含蓄的話語不僅僅起到警示語的作用了,更是文明用語的典范。因為它成功地運用婉曲手法,得體,準確地傳達出環(huán)保者的意圖。
總之,在環(huán)境保護的警示語中運用了修辭格,彰顯了環(huán)保領域以人為本的宗旨,它的人性化的一面,向人們傳播了人文關懷,構建了人文生態(tài),使人類更容易融入周遭的自然環(huán)境的世界,達到善待、保護、開發(fā)、利用的目的。
4.環(huán)保警示語有思維,使環(huán)境保護領域中的語義更符合人類思維的規(guī)律,達到人與物的交融
語言是思維的載體,根據語用學"我們用預設來解釋一些語義中的邏輯現(xiàn)象"[8]如果用形象的數學公式來表示就是"語言學+邏輯推理=預設",在公式中有邏輯推理的存在,根據邏輯推理的三段論,那就說明語用預設存在著隱藏起來的前提。而且這個前提具有可推知性的特點,下面以(17)――(21)句為例來例舉這種預設:
通過上面的例舉,我們看到這里主要用了解釋性的預設,它主要是對某種做法做出解釋進行了預設,從而達到告知的目的,而這種預設往往是讓人容易知曉的,如果我們聽不出或看不出那層暗設的前提,那就是語用預設的失誤。我們通過對語義預設的分析,可以了解環(huán)境保護領域中的警示語的使用必須符合邏輯,也就是符合人腦思維的規(guī)律性,真正的讓植物的世界成為人類世界不可或缺的部分。人們才會倍感珍惜這種和睦共處的氛圍,珍愛提供給人類生存的這份綠色環(huán)境,從而讓人類更好的保護地球環(huán)境資源。
5.用"意合法"來鮮明地表明立場、觀點和態(tài)度,講清楚道理,從而讓人接受
這就使有些句子的語義是不需要預設的,不需要回味無窮的,只是為了讓人一看就懂,達到明白曉暢的目的。從語用學的角度看,"有一些復句不用任何關聯(lián)詞語,完全依靠語序以及前后分句的語義制約構成,這就叫'意合法'"[9] 。這類句子的語義一般講環(huán)境保護的意義和作用的為多。如:
(22)綠化環(huán)境,保護家園。
(23)保護綠化環(huán)境,熱愛人類自己的家園。
(24)人類靠綠色環(huán)境生存 ,綠色環(huán)境靠人類保護。
它的表達效果符合人們閱讀審美的習慣,無須過度的思考就可達到人們思想,從而指導人們的行為。像(17)就是如此,首先做"綠化"工作,第二步才是"保護"的工作,語句本身就有符合人們行為習慣的語序,前一句的"綠化"的動作是后一句"保護"的前提條件,后一句動作"保護"是前一句"綠化"的行為結果,也就是說,有"綠化"緊接著為鞏固勞動成果就要實施"保護"。這些詞語的使用,頻率也是很高的,296句中占了1/3強,符合人們的性情,講明白話,做明白事,直接警示"綠化"、"保護"的主題,使人易于接受。(23)、(24)也是如此,其他就不一一例說,總之,這種句子表達出來的語義就是要明白曉暢,達到植入人們心尖的效果。
在h境保護領域中,我們對環(huán)保警示語在表達效果上進行探究,能更好地通過對環(huán)保警示語的運用,把大家的積極性調動起來,只有讓大家積極的行動起來,才能真正起到保護環(huán)境,凈化環(huán)境,美化環(huán)境的目的,這也為優(yōu)化我們的生活質量奠定了環(huán)境基礎。
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篇6
【關鍵詞】 調節(jié)性T細胞; 弱精癥; 免疫破壞; 免疫抑制細胞因子
【Abstract】 Objective: To observe the change pattern of CD4+CD25+ regulatory T cells (Treg) in asthenospermia infertile patients and the correlation with sperm quality.Method: The peripheral blood and prostatic fluid specimens were collected from 60 asthenospermia infertile patients as the observation group and 36 healthy volunteers as the control group. The flow cytometry was used to determine the volume of Treg, intracellular transforming growth factor β1 (TGF-β1) and interleukin 10 (IL-10) in the peripheral blood and prostatic fluid.The correlation of the above three substances of sperm viability and motility rate were analysed.Result:Compared with control group,the observation group patients of Treg, IL-10 and TGF-β1 asthenospermia infertile had significantly lower volume in their peripheral blood and prostate massage fluid,the differences were statistically significant(P0.075,P
【Key words】 Regulatory T cells; Asthenospermia; Immunity damage; Immunosuppressive cytokines
First-author’s address:Shantou Chaoyang District Dafeng Hospital,Shantou 515100,China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2015.09.009
近年報道弱精癥導致不育的案例越來越多,該類患者甚至連慢性前列腺炎的病史都不具備,其機制不明,因此給治療帶來困難。有研究表明免疫因素可能是弱精癥的重要發(fā)病機制[1]。國外有報道CD4+CD25+調節(jié)性T細胞(Treg)與不育癥相關,但目前國內關于弱精癥患者Treg變化的研究不多。因此筆者以此為切入點,重點觀察了弱精癥與健康成年男性外周血Treg及血常規(guī)的變化,發(fā)現(xiàn)弱精癥患者Treg數量明顯降低,且與Treg功能密切相關的細胞因子IL-10及TGF-β1亦表現(xiàn)為數量不足。
1 資料與方法
1.1 一般資料 本研究以2013年1月-2014年12月本院泌尿外科門診及病房接診的60例弱癥患者為觀察組,平均年齡(35.3±9.3)歲,平均病程(5.6±1.5)年。入選標準如下:所有患者均為婚后性生活正常,未采取任何避孕措施而不育1年以上,女方生育力檢查正常,男方無生殖系統(tǒng)發(fā)育異常、無生殖系統(tǒng)感染、無精索靜脈曲張、精道梗阻、逆行或不等疾??;參數中前向運動的(a和b級)
1.2 實驗材料 鼠抗人CD4-FITC單抗,CD25-PE單抗及同型對照IgGI-FITC,IgG -PE,均為B&D公司產品。流式細胞儀為Beckman公司產品(型號:EPICS-XL)。IL-10及人TGF-β1的血清及前列腺液ELISA試劑盒購自南京建成生物工程研究所。淋巴細胞分離液(AXIS-SHIELD公司)、RT-PCR試劑盒及Tregizol RNA提取試劑盒均購自武漢博士得生物科技有限公司,PE9600型PCR擴增儀(美國PE公司)[2]。
1.3 標本采集 外周血:清晨采集以上觀察對象的靜脈血約2.0 mL,采用肝素鈉抗凝;:采用法采集約1~3 mL,采用肝素鈉抗凝;前列腺液:采用前列腺按摩法,采集前列腺液約0.5~1.0 mL,采用肝素鈉抗凝[4-7]。
1.4 檢測方法 外周血:采用淋巴細胞分離液常規(guī)分離外周血單個核細胞(PBMC),用含10%小牛血清的RPMI-1640調細胞至106/mL,取200 μL細胞分別加入抗CD4-FITC、抗CD25-PE的單克隆抗體各20 μL,同型對照分別為IgG1-FITC、IgG-1-PE,混勻后避光孵育25~30 min,PBS洗滌2次。將細胞懸浮于0.5 mL PBS洗滌液中,振蕩混勻后上機檢測[3]。同法檢測前列腺液及外周血IL-10、及TGF-β1的含量。:使用質量分析儀檢測存活率、平均運動速度、活力指數等指標。
1.5 統(tǒng)計學處理 運用統(tǒng)計軟件包SAS 8.1對本研究數據進行統(tǒng)計,計量資料采用(x±s)表示,符合正態(tài)分布及方差齊者采用t檢驗比較組間差異,不符合正態(tài)分布者采用秩和檢驗,指標之間的相關性分析采用Pearson參數法,以P
2 結果
2.1 兩組患者Treg及細胞因子比較 觀察組患者外周血CD4+CD25+ Treg、外周血及前列腺液的TGF-β1和IL-10均顯著低于對照組,兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P
2.2 兩組常規(guī)比較 兩組量比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);觀察組活率、運動速度和ATP含量指標均顯著低于對照組,兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P
2.3 相關性分析 經Pearson檢驗,CD4+CD25+ Treg、TGF-β1和IL-10與活率、畸形率、運動速度、ATP指標之間均呈正相關性(r>0.075,P
3 討論
弱癥占所有男性不育致病因素的半數以上,引發(fā)弱癥的原因很多,主要有生殖道感染、免疫因素、精索靜脈曲張、內分泌因素以及先天性疾病等[4-9]。目前弱癥的免疫發(fā)病機制尚未明確,是其治療效果欠佳的主要原因之一。Treg細胞是近年發(fā)現(xiàn)的一群具有獨特免疫調節(jié)作用的抑制性T細胞[4]。本研究從T細胞免疫學角度研究弱癥患者調節(jié)性T細胞及其細胞因子的表達,總結弱癥患者Treg及其細胞因子的變化規(guī)律,以及弱癥患者CD4+CD25+ Treg及其細胞因子含量與質量的相關性[10]。研究結果表明,觀察組外周血CD4+CD25+ Treg的含量顯著低于對照組,外周血的TGF-β1和IL-10顯著低于對照組;觀察組前列腺液的TGF-β1和IL-10顯著低于對照組;外周血的TGF-β1和IL-10均顯著高于前列腺液;兩組量比較差異無顯著性;觀察組活率、運動速度和ATP含量指標均顯著低于對照組;經Pearson檢驗,CD4+CD25+ Treg、TGF-β1和IL-10與活率、畸形率、運動速度、ATP指標之間均呈正相關性。
CD4+CD25+ Treg在前列腺的免疫失衡中起到重要作用[11]。Treg活化后不僅能抑制CD4+和CD8+ T細胞的活化和增殖,還可抑制組織內由于T細胞免疫殺傷過度所致的免疫性損傷,因此Treg具有下調及抑制免疫的功能[12]。Foxp3是一個重要的蛋白,其可促使初始(未成熟)T細胞向Treg轉化,因此Foxp3是Treg的主要功能因子,前者的減少可導致Treg功能的缺陷[5]。在Treg所分泌的細胞因子中,IL-10與TGF-β1所占的位置最為重要:TGF-β1可促進Foxp3基因的克隆表達,而后者是發(fā)揮免疫抑制功能的主要功能因子[13-14]。除TGF-β1外,作為白介素家族重要成員的IL-10,具有抑制炎性反應、預防自身免疫現(xiàn)象出現(xiàn)的生物學作用,因此缺乏IL-10可導致一系列自身免疫病如腸炎或腦脊髓膜炎(EAE)的發(fā)生[15]。
本文以上述背景為理論依據,從免疫調節(jié)的角度觀察弱精癥的發(fā)病機制,通過直接檢測外周血Treg數量發(fā)現(xiàn)該T細胞在弱精癥患者的表達明顯降低,且發(fā)現(xiàn)外周血及前列腺液當中該細胞的功能因子TGF-β1及IL-10均顯著降低,這進一步印證了不論在全身抑或前列腺組織局部,都表現(xiàn)為Treg數量的減少及功能的不足。其原因可能是:弱精癥患者降低使IL-10不足以抑制單核細胞的活化與增值,導致單核細胞過度執(zhí)行抗原提呈功能,后者致使外周血及前列腺局部的免疫反應過強,使前列腺導管和腺泡不斷受到免疫損害而導致生精功能減退等臨床表現(xiàn)[14]。
綜上所述,對于弱癥患者而言,CD4+CD25+ Treg含量和功能的異常,導致TGF-β1和IL-10細胞因子減少進而引發(fā)免疫抑制功能下降,導致了前列腺的免疫反應過強產生了抗抗體,影響的活動能力、運動能力以及穿透能力。因此,CD4+CD25+ Treg免疫異常是弱癥發(fā)病的重要影響因素。
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篇7
關鍵詞 大豆苷元;氨基修飾β環(huán)糊精;固體包合物;包合行為;水溶性
1 引 言
大豆苷元,即7,4′二羥基異黃酮(Daidzein,圖1) ,又名黃豆苷元、大豆黃酮、大豆素等,是一種重要的異黃酮類化合物,主要存在于豆科類植物如大豆和葛根中。研究表明,大豆苷元具有多種重要的藥理作用,主要包括抗血栓和動脈粥樣硬化的形成[1]、抗糖尿病[2,3]、抗氧化[4,5]、骨骼保護[6,7]及抗腫瘤等作用[8,9],同時,大豆苷元還通過在腸道中代謝為Sequol而具有雌激素樣的作用[10,11]。但是,大豆苷元溶解性差,穩(wěn)定性低,口服吸收差,致使其生物利用度低,體內吸收量少,大大阻礙了其藥理作用的有效發(fā)揮[12,13]?;瘜W修飾手段,如成酸[14,15]、成鹽[16,17]和糖苷化[18,19]等,是近年來報道的提高大豆苷元的水溶性最為常見的途徑。但是,這些方法常存在制備困難、水溶性提高程度有限及大豆苷元活性受到影響等不利因素。因此,改善大豆苷元的水溶性,對提高其生物利用度、開發(fā)其藥用價值等均具有重要意義。
環(huán)糊精(Cyclodextrin, CD) 是直鏈淀粉在環(huán)糊精糖基轉移酶作用下生成的一系列環(huán)狀寡糖的總稱,通常含有6~8個D(+)吡喃葡萄糖單元,分別稱為α, β和γ環(huán)糊精。環(huán)糊精具有“內疏水、外親水”的截錐狀分子結構,能與眾多有機/無機分子通過多種非共價相互作用,如范德華力、氫鍵作用、疏水作用等形成水溶性的主客體包合物或組裝成復雜的超分子體系。當將環(huán)糊精作為超分子主體應用于難溶藥物或生物活性分子時,可大大提升其水溶性、穩(wěn)定性和生物利用度等性質[20~22]。
本實驗室近年致力于以環(huán)糊精為主體的天然藥物超分子體系研究[23~27],發(fā)現(xiàn)用氨基等基團修飾β環(huán)糊精后,可極大地提升其水溶性。本研究以兩種氨基修飾的β環(huán)糊精衍生物(ACD) ,即單6氨基β環(huán)糊精(NCD) 和單6乙二胺基β環(huán)糊精(ENCD) 為主體,采用飽和水溶液法分別制備了它們與大豆苷元的固體包合物,優(yōu)化了包合條件,通過X射線粉末衍射(XRD) 和熱重(TG) 分析等手段對它們進行了表征,采用熒光光譜法確定了包合平衡常數和包合比,同時對包合物的水溶性進行測試。
2 實驗部分
2.1 儀器與試劑
Shimadzu RF5301PC熒光分光光度計(日本島津公司); D/Max3B X射線衍射儀(日本理光公司); NETZSCH STA449F3同步熱分析儀(德國耐馳公司) 。
大豆苷元(純度>98%,阿拉丁試劑) 、β環(huán)糊精(食品級,98%,孟州華興) 為直接購買使用,NCD和ENCD為參考本實驗室已有方法[28,29]自制。其它試劑均為分析純,實驗用水為二次蒸餾水。
2.2 實驗方法
2.2.1 大豆苷元與氨基修飾β環(huán)糊精固體包合物的制備 在室溫(25℃) 及避光條件下,取大豆苷元76 mg(0.3 mmol) 溶于5 mL無水乙醇中,同時按一定比例取氨基修飾β環(huán)糊精溶于20 mL蒸餾水(pH≈7.0) 中,混合兩種溶液。室溫避光攪拌一定時間之后,減壓蒸去體系中的溶劑,再加少量水溶解。過濾除去其中的不溶固體,并用0.45 μm微孔濾膜過濾,得到澄清濾液。減壓蒸干后, 于40℃真空干燥24 h,即得到固體包合物。通過對大豆苷元與氨基修飾β環(huán)糊精的投料比及攪拌時間的優(yōu)化,以固體包合物的產率為指標獲取兩種固體包合物形成的最佳條件。
2.2.2 XRD分析 分別取大豆苷元、NCD、ENCD及它們的固體包合物作X射線粉末衍射分析。測試條件為:Cu靶,Kα輻射源(k=1.5460 ) ,電壓為40 kV,電流為100 mA,掃描速率為5°/min。
2.2.3 熱力學性能測試 對大豆苷元、NCD、ENCD及它們的包合物進行了熱性質研究。熱分析條件為:氮氣流速為70 mL/min,升溫速率為10℃/min,并由室溫升到400℃。
2.2.4 熒光光譜滴定 采用熒光光譜滴定法測定大豆苷元與β環(huán)糊精衍生物的包合穩(wěn)定常數KS。首先,配制Na2CO3NaHCO3緩沖溶液(pH 10.5) ,并用其配制0.01 mol/L氨基修飾β環(huán)糊精溶液及3.0×105 mol/L大豆苷元溶液。取8支10 mL比色管,分別加入大豆苷元溶液1.0 mL,然后依次加入氨基修飾β環(huán)糊精溶液0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.2, 1.5和2.0 mL。所有待測比色管均用緩沖溶液定容至10 mL,室溫下超聲30 min后,在λex/λem = 385/468 nm波長下測定。
2.2.5 水溶性測試 采用飽和水溶液稱重法來進行包合物的水溶性測試。分別在2 mL蒸餾水(pH≈7.0) 中加入過量固體包合物,25℃避光劇烈攪拌1 h。濾紙過濾除去不溶固體后,再用0.45 μm微孔濾膜過濾,濾液減壓蒸干,稱重,以此計算包合物在水中的溶解度。
3 結果與討論
3.1 大豆苷元/NCD固體包合物的制備
在大豆苷元/NCD固體包合物的制備過程中,大豆苷元與NCD的投料比(大豆苷元∶NCD,摩爾比) 及包合攪拌時間對生成包合物的收率有一定的影響。 實驗結果表明:隨著攪拌時間延長,收率隨之提高,且至72 h時基本達到平衡,此時繼續(xù)延長攪拌時間對提高收率不再起作用,這時包合脫包的可逆過程基本達到平衡。此外,隨著投料比的增加,收率也隨之增加。當大豆苷元與NCD的投料比為3∶1時,收率基本趨于平衡,此時繼續(xù)提高投料比也不會導致收率的明顯變化。因此,經篩選確定該包合物制備的最佳條件為:大豆苷元與NCD的投料比為3∶1,包合時間為72 h,此時收率為83%。具體的投料比和攪拌時間對包合物回收率所產生的影響如表1所示。
3.2 大豆苷元/ENCD固體包合物的制備
與大豆苷元/NCD固體包合物的制備過程相似,包合攪拌時間和投料比這兩個因素同樣對大豆苷元/ENCD固體包合物的收率產生明顯影響。實驗結果表明,隨著攪拌時間的延長,產率隨之提高,且當攪拌時間為72 h時,收率達到最大;隨著投料比的增加,收率也隨之增大。當大豆苷元與ENCD的投料比為3∶1(n/n) 時,收率達到最大。因此確定包合物制備的最佳條件為:大豆苷元與環(huán)糊精投料比為3∶1(n/n) ,包合時間為72 h時,產率為67%。具體的條件篩選過程如表2所示。
3.3 XRD分析
采用XRD分析對大豆苷元在形成包合物前后的晶體/非晶體形態(tài)進行了表征。圖2為大豆苷元、NCD、ENCD及它們之間的兩種固體包合物的XRD圖譜。從圖2可見,大豆苷元本身呈現(xiàn)典型的晶體形態(tài)(a) ,而兩種氨基修飾β環(huán)糊精NCD和ENCD均為無定形態(tài)粉末(b和d) 。而在形成包合后,兩種包合物均不再表現(xiàn)出大豆苷元的晶體形態(tài)特征,而是更多地呈現(xiàn)與其主體(NCD和ENCD) 相似的無定形態(tài)特征。通常,環(huán)糊精如與另一組分只形成簡單的物理混合物時,其XRD分析結果將呈現(xiàn)兩者圖譜的簡單加合。因此,該變化可初步證明大豆苷元與氨基修飾β環(huán)糊精之間形成了主客體包合物,而非物理混合物。
3.4 包合物的熱力學性能
通過熱重(TG) 分析對大豆苷元形成包合物前后的熱力學性質的改變進行了探討。圖3記錄了大豆苷元、NCD、ENCD及兩種固體包合物的TG曲線,大豆苷元在308.82℃開始分解(曲線a) ,NCD在303.25℃開始分解(曲線b) ,而大豆苷元/NCD包合物在296.83℃開始分解(曲線c) ,即形成包合物后分解溫度較大豆苷元和NCD均有所降低。另一方面,ENCD的分解溫度為272.91℃(曲線d) (其中向上的尖峰應為儀器誤差) ,而與大豆苷元形成包合后,包合物的分解溫度降至245.04℃(曲線e) 。從包合前后主、客體及包合物之間熱重曲線的明顯區(qū)別可進一步證實大豆苷元與兩種氨基修飾β環(huán)糊精均形成了包合物。
3.5 包合比的確定
以Na2CO3NaHCO3緩沖溶液(pH 10.5) 配制大豆苷元分別與NCD和ENCD的混合溶液。保持大豆苷元與氨基修飾β環(huán)糊精的總濃度不變(3.0 × 105 mol/L) ,使大豆苷元在其中的物質的量的比率在0.1~0.9變化。通過測定它們的熒光強度變化獲得Job′s曲線(圖4) ,進而得到大豆苷元的兩種包合物的包合比。由圖4可見,從曲線中最高點所對應的橫坐標(0.5) 可知,大豆苷元與兩種氨基修飾β環(huán)糊精的包合化學計量比均為1∶1,此結果與本研究組之前的研究結果[30]一致。
3.6 包合穩(wěn)定常數的測定
NCD和ENCD與大豆苷元的混合溶液的熒光光譜曲線如圖5所示。熒光光譜曲線均是以Na2CO3NaHCO3緩沖溶液(pH 10.5) 為介質而測得,檢測波長為:λex/λem=385/468 nm。
由于大豆苷元與NCD和ENCD的包合比均為1∶1,所以其包合穩(wěn)定常數Ks滿足公式(1) :
KS: 包合穩(wěn)定常數(L/mol);[CD]0和[CD]分別為環(huán)糊精的初始濃度及環(huán)糊精濃度(mol/L); [Daidzein]0和[Daidzein]分別為大豆苷元的初始濃度及大豆苷元濃度(mol/L); [CD?daidzein]:環(huán)糊精/大豆苷元包合物的濃度(mol/L);ΔF: 大豆苷元熒光強度的變化;Δε: 有無環(huán)糊精時大豆苷元的摩爾消光系數差值。
由此可推出公式(2) :
其中,ΔF可以根據實驗中環(huán)糊精濃度改變測得的熒光強度差值計算得到,然后根據非線性最小二乘法計算得到包合物的KS值。表3給出了兩種包合物包合穩(wěn)定常數KS及吉布斯自由能變化ΔG,兩種氨基修飾β環(huán)糊精對大豆苷元的包結能力NCD>ENCD,這與兩者在同一條件下的包合收率大小一致(83%和67%) ,表明包合能力的強弱可能影響氨基修飾β環(huán)糊精與同一客體形成包合物的收率。
3.7 包合物的水溶性
通過飽和水溶液法測試表明,大豆苷元與NCD及ENCD形成包合物后,在水中的溶解度分別提高至15.2和13.2 mg/mL(以大豆苷元的質量計算) ,相對于同樣條件下大豆苷元本身的溶解度(8.31 μg/mL) 分別提高了約1800和1500倍。與此同時,與文獻報道的β環(huán)糊精常見衍生物如2羥丙基β環(huán)糊精(HPβCD) [30,32]、磺丁基醚β環(huán)糊精(SBEβCD) [31]以及β環(huán)糊精[32]等相比,本研究所使用的兩種氨基修飾β環(huán)糊精對大豆苷元具有更強的增溶能力(見表4) 。
實驗結果表明,利用飽和水溶液法制備的大豆苷元與兩種氨基修飾β環(huán)糊精NCD和ENCD的固體包合物,均可明顯提高大豆苷元的水溶性,形成包合物后,大豆苷元在水中的溶解度分e提高了約1800和1500倍,對大豆苷元的增溶能力強于已報道的環(huán)糊精及其衍生物。這些實驗結果可為設計和開發(fā)新的大豆苷元的水溶性制劑提供新的研究思路。
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篇8
關于對江蘇興聯(lián)電子科技有限公司
年產新能源及各種電線100萬公里、各種空氣源熱泵機組1萬臺、各種線束產品350萬套、汽車配件200萬套、銅材制品6000噸項目
環(huán)境影響報告表的批復
江蘇興聯(lián)電子科技有限公司:
你公司委托蘇州品潤環(huán)境評價有限公司環(huán)評工程師吳媛(資格證書編號:2014035320350000003512320748)主持編制的《江蘇興聯(lián)電子科技有限公司年產新能源及各種電線100萬公里、各種空氣源熱泵機組1萬臺、各種線束產品350萬套、汽車配件200萬套、銅材制品6000噸項目環(huán)境影響報告表》(以下簡稱《報告表》)收悉。經研究,批復如下:
一、根據《報告表》評價結論及寺巷街道預審意見,在落實《報告表》中提出的各項污染防治和環(huán)境風險防范措施的前提下,從生態(tài)環(huán)境角度考慮,同意該項目在泰州經濟開發(fā)區(qū)振興西路666號公司現(xiàn)有廠區(qū)內建設,總投資15000萬元,在預留空地內新建生產車間33000m2,購置高速放線機、高速印字機、高速收線機、束絲機、剪板機、折彎機、卷板機、焊接機、自動焊接機等加工設備180臺(套)。建成后形成年產新能源及各種電線100萬公里、各種空氣源熱泵機組1萬臺、各種線束產品350萬套、汽車配件200萬套、銅材制品6000噸。具體產品方案詳見《報告表》,你公司不得擅自擴大生產規(guī)模、改變生產工藝和產品方案。
二、在項目工程設計、建設和運行管理中,你公司須認真落實《報告表》中提出的各項環(huán)保要求,嚴格執(zhí)行環(huán)保“三同時”制度,確保各類污染物達標排放,并須著重做好以下工作:
(一)施工期必須采取有效措施減緩環(huán)境影響,切實做好施工噪聲、揚塵、固體廢棄物和廢水的污染控制及治理。
(二)排水系統(tǒng)嚴格實施雨污分流、清污分流。項目無生產廢水;生活污水經化糞池預處理后,接入市政管網送亞同環(huán)保水處理有限公司集中處理;冷卻水定期補充損耗,不外排。
(三)強化廢氣收集措施,落實各類廢氣凈化技術,確保治理設施正常運行,處理效率及排氣筒高度應達到《報告表》提出的要求,加強車間、危廢暫存間等區(qū)域的無組織廢氣控制。浸錫、押出和印字廢氣均有效收集,經“二級串聯(lián)活性吸附”裝置處理后,分別通過15米高排氣筒(1#、2#、3#、4#)排放;危廢暫存間廢氣有效收集,經“活性炭吸附”裝置處理后通過15米高排氣筒(5#)排放。
廢氣排放執(zhí)行《大氣污染物綜合排放標準》(GB16297-1996)、《惡臭污染物排放標準》(GB14554-93)、《《揮發(fā)性有機物無組織排放控制標準》(GB37822-2019)相關要求。
(四)項目設計、施工和建設中應選用低噪聲設備,合理布局設備,采取有效的減振、隔聲等降噪措施。運營期廠界噪聲執(zhí)行《工業(yè)企業(yè)廠界環(huán)境噪聲排放標準》(GB12348-2008)中 3類標準,施工期噪聲應符合《建筑施工場界環(huán)境噪聲排放標準》(GB12523-2011)要求。
(五)一般固體廢物、生活垃圾、危險廢物須分類收集、分類處理處置。按照“資源化、減量化、無害化”的原則和環(huán)保管理要求,落實各類固廢的收集處理處置和綜合利用措施,實現(xiàn)固廢全部綜合利用或安全處置。廢拉絲液(HW09/900-007-09)、拉絲污泥(HW09/900-007-09)、廢膠塞(HW49/900-041-49)、廢活性炭(HW49/900-039-49)、廢油(HW08/900-217-08)、廢包裝桶(HW49/900-041-49)等危險廢物,須委托具備危險廢物處置資質的單位安全處置;廢邊角料、不合格品、廢錫渣、廢包裝材料出售綜合利用;生活垃圾委托環(huán)衛(wèi)部門定期清運處置。危險廢物暫存場所應按《省生態(tài)環(huán)境廳關于進一步加強危險廢物污染防治工作的實施意見》(蘇環(huán)辦〔2019〕327號)、《危險廢物貯存污染控制標準》(GB18597-2001)及修改單要求設置,一般廢物暫存場所應按《一般工業(yè)固體廢物貯存和填埋污染控制標準》(GB18599-2020)及修改單要求設置。
(六)做好土壤和地下水污染防治工作。落實《報告表》中提出的源頭控制、分區(qū)防滲要求,危廢暫存間、拉絲液池等區(qū)域采取重點防滲措施,制定地下水監(jiān)控和應急方案。
(七)按照《江蘇省排污口設置及規(guī)范化整治管理辦法》的要求,完善各類排污口和標志設置。本項目依托現(xiàn)有1個污水接管口和1個雨水接管口及1個廢氣排放口,新增4個廢氣排放口。
三、本項目VOCs排放量經泰州市生態(tài)環(huán)境局醫(yī)藥高新區(qū)分局審核同意。本項目建成后,污染物年排放量不得突破《報告表》中核定的排放量。
四、按照《關于做好生態(tài)環(huán)境和應急管理部門聯(lián)動工作的意見》(蘇環(huán)辦〔2020〕101號)的相關要求,對環(huán)境治理設施開展安全風險辨識管控,健全內部污染防治設施穩(wěn)定運行和管理責任制度,嚴格依據標準規(guī)范建設環(huán)境治理設施,確保環(huán)境治理設施安全、穩(wěn)定、有效運行。
五、本項目應當在啟動生產設施或者在實際排污之前申領排污許可證,未取得排污許可證的,不得排放污染物。項目建設必須嚴格執(zhí)行配套建設的環(huán)境保護設施與主體工程同時設計、同時施工、同時投產使用的環(huán)境保護“三同時”制度。主體工程和環(huán)保設施建成后,你公司須按規(guī)定程序實施竣工環(huán)境保護驗收。
六、請?zhí)┲菔猩鷳B(tài)環(huán)境局醫(yī)藥高新區(qū)分局負責該項目相關管理工作,泰州市生態(tài)環(huán)境綜合行政執(zhí)法局負責該項目的現(xiàn)場執(zhí)法監(jiān)督檢查工作。
七、項目的性質、規(guī)模、地點、采用的生產工藝或者防治污染、防止生態(tài)破壞的措施發(fā)生重大變動的,應當重新報批項目的環(huán)境影響評價文件。自本批復文件批準之日起,如超過5年方決定工程開工建設的,環(huán)境影響報告書應當報我局重新審核。
泰州醫(yī)藥高新技術產業(yè)開發(fā)區(qū)管理委員會
2021年6月22日
篇9
【關鍵詞】 銀屑病;淋巴細胞;受體CXCR3;趨化因子,CXC
Expression of CXCR3 mRNA in peripheral blood lymphocytes and neutrophils in patients with psoriasis
【Abstract】 AIM: To investigate the expression of chemokine receptor CXCR3 mRNA in peripheral blood lymphocytes and neutrophils in patients with progressive plaque psoriasis and its correlation with Psoriasis Area and Severity Index (PASI). METHODS: Reverse transcriptasepolymerase chain reaction (RTPCR) was applied to semiquantitatively analyze CXCR3 mRNA expression in peripheral blood
lymphocytes and neutrophils from 33 psoriatic cases, 16 cases with about 70% remission of the 33 patients after treatment and 30 healthy controls. The correlation between CXCR3 mRNA expression and PASI was evaluated. RESULTS: CXCR3 mRNA level in lymphocytes from psoriatic patients was 1.12±0.81, markedly higher than that in normal controls (0.28±0.28, P
【Keywords】 psoriasis; lymphocytes; receptor CXCR3, chemokines, CXC
【摘要】 目的: 了解銀屑病患者外周血淋巴細胞與中性粒細胞中CXC型趨化因子受體CXCR3 mRNA的表達水平及其與銀屑病皮損面積和嚴重程度指數(PASI)之間的關系. 方法: 應用逆轉錄聚合酶鏈反應(RTPCR)法檢測進行期斑塊型銀屑病患者33例及其中16例患者治療后外周血淋巴細胞及中性粒細胞中CXCR3 mRNA的表達水平,設30例健康人作為正常對照,并將檢測結果與PASI進行了相關性分析. 結果: 斑塊型銀屑病患者外周血淋巴細胞中CXCR3 mRNA表達水平為1.12±0.81,明顯高于健康對照組(0.28±0.28, P
【關鍵詞】 銀屑病;淋巴細胞;受體CXCR3;趨化因子,CXC
0引言
銀屑病的病理特征之一為表皮和真皮中白細胞浸潤,其中主要為中性粒細胞及淋巴細胞. 趨化因子是主要使細胞發(fā)生趨化作用的細胞因子,分為CXC, CC, XC及CX3C四型. 趨化因子通過與其特異性受體結合發(fā)揮作用,相應的趨化因子受體也分為CXC, CC, XC及CX3C四型. 大量研究結果顯示趨化因子及其受體系統(tǒng)參與了炎癥的發(fā)病機制,尤其與炎癥細胞向皮損局部的移行關系密切. 銀屑病患者外周血中性粒細胞中趨化因子受體CXCR1與CXCR2 mRNA的表達增高,可能參與了中性粒細胞的活化及其向皮損部位的趨化[1]. CXCR3為CXC型趨化因子干擾素誘導的單核因子(Mig)及干擾素誘導蛋白10(IP10)的特異性受體,有報道Mig mRNA在銀屑病皮損部位真皮上部高表達[2]. 目前對銀屑病患者外周血淋巴細胞與中性粒細胞中CXCR3的表達情況仍不明確.
1材料和方法
1.1材料明確診斷的中、重度進行期斑塊狀銀屑病患者33例,均為200203/200212在中國醫(yī)學科學院皮膚病醫(yī)院就診的門診或住院患者,其中男19例,女14例,年齡18~65歲,病程4 mo~40 a. 用銀屑病皮損面積和嚴重程度指數( psoriasis area and severity index, PASI)來評估患者的疾病嚴重程度. 入選標準: 年齡在18周歲以上,臨床診斷明確,PASI評分在8.4以上;近3 mo內未用過維甲酸制劑、皮質類固醇激素及免疫抑制劑,1 mo內未用過治療銀屑病的內服及外用藥物,無其他系統(tǒng)性疾病或皮膚疾病;女性患者排除懷孕、哺乳及月經期. 健康對照30例,均來自中國醫(yī)學科學院皮膚病研究所研究生、體檢職工及皮膚外科整形美容的患者,男17例,女13例,年齡18~50歲( 經統(tǒng)計學處理,年齡、性別與銀屑病患者組無統(tǒng)計學差異 ). 對符合上述入選標準的患者詳細記錄病史資料,進行血常規(guī)檢查,征得患者本人同意后自肘靜脈取血8mL加入肝素抗凝管備分離,標本收集完畢后根據患者病情給予相應的抗銀屑病藥物治療[1]至皮損消退70%以上時再次進行血常規(guī)檢查,取療后血,并再次記錄患者的PASI評分,共收集到治療后患者16例(男9例,女7例,年齡22~58歲).
Hema 480基因擴增儀(珠海黑馬醫(yī)學儀器有限公司),TFX20M紫外檢測儀(Vilber lourmat法國),CS9000雙波長飛點薄層掃描儀(日本島津),TRIzol (GIBICO/BRL), SuperScriptTM FirstStrand Synthesis System for RTPCR( Invitrogen ). 特異性引物CXCR3 5′ TCCTTGAGGTGAGTGACCACAAA3′, 5′CTCGTCGTGGTGGGCCGACAG3′,擴增片段為584 bp;β肌動蛋白5′CAACTCCATCATGAAGTGGTAAC3′,5′CCACACGGAGTACTTGCGCGCCTC3′,擴增片段為180 bp. 由上海生工生物工程技術服務有限公司合成.
1.2方法用RTPCR方法檢測淋巴細胞與中性粒細胞中CXCR3的基因表達水平. 用60 g/L葡聚糖溶液沉降紅細胞,淋巴細胞分層液分離淋巴細胞與中性粒細胞,顯微鏡下記數2×106個細胞. 總RNA提取試劑TRIzolTM提取淋巴細胞與中性粒細胞總RNA. 紫外分光法檢測RNA純度,TBE/瓊脂糖電泳檢測RNA的完整性. 嚴格按照Invitrogen的試劑盒說明書進行操作反轉錄合成cDNA. 以cDNA為模板建立PCR反應體系:反應總體積為25 μL,反應程序為: 94℃變性45 s, 57℃退火45s, 72℃延伸1 min,首次循環(huán)94℃預變性5 min,共進行35個循環(huán),最后72℃延伸7 min. 以β肌動蛋白作為內參照進行半定量,CXCR3與β肌動蛋白同管擴增. PCR產物用20 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測,以每厘米膠長5 V的電壓進行電泳,50 min后在紫外檢測儀上觀察結果并進行近距離攝影,用薄層掃描儀掃描膠片,基因表達水平以內參照β肌動蛋白基因為基準校正后獲得.
統(tǒng)計學處理: 采用SPSS10.0軟件處理,數據以x±s表示,治療前后數據用配對資料t檢驗分析,基因表達量用OneWay ANOVA (單因素方差分析)方法,兩兩比較用最小顯著差數法(Leastsignificant difference)檢驗. 相關性分析采用Pearson線性相關. P
2結果
治療前患者的PASI評分為8.4~47.2(27.3±8.8). 所收集到的治療后患者的PASI評分為1.2~15.3(5.0±3.9),經統(tǒng)計學分析,比相應患者治療前的PASI評分(10.8~47.2, 25.6±10.8)下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P
進行期斑塊狀銀屑病患者淋巴細胞及中性粒細胞中CXCR3 mRNA的平均表達水平見表1及圖1. 銀屑病患者治療前外周血淋巴細胞中CXCR3 mRNA表達水平明顯高于健康對照組(P
表1外周血淋巴細胞及中性粒細胞中CXCR3 mRNA的表達水平(略)
aP
A: 淋巴細胞;B: 中性粒細胞. M: 100 bp marker; 1~2: 銀屑病患者治療前; 3~4: 健康對照; 5~6: 銀屑病患者治療后. 180 bp: 內參照β肌動蛋白; 584 bp: CXCR3.
圖1淋巴細胞與中性粒細胞中CXCR3 mRNA的電泳圖(略)
3討論
銀屑病是一種在多基因遺傳背景下、受多種內外環(huán)境因素刺激和誘導的自身免疫性慢性炎癥性皮膚病. 免疫異常在銀屑病的發(fā)病機制中起到核心作用,參與銀屑病皮損部位免疫反應的細胞主要涉及淋巴細胞、角質形成細胞、抗原提呈細胞等,而細胞因子是各種免疫細胞之間相互作用的樞紐[3-4].
現(xiàn)認為銀屑病是一種T細胞介導的自身免疫性疾病. 在體外,銀屑病患者外周血單個核細胞具有促進自身角質形成細胞生長的作用[5],提示銀屑病表皮的病理變化也與淋巴細胞的過度活化有關;細菌超抗原介導的銀屑病發(fā)病機制與T淋巴細胞活化有關,有研究[6]顯示極微量的鏈球菌M6蛋白可引起點滴狀銀屑病患者外周血單一核細胞明顯增殖,導致Th1型細胞因子IFNγ明顯增加. T細胞介導的免疫異常在銀屑病的發(fā)病機制中起到核心作用,T細胞不只局限于真皮,而且進入表皮諸層,參與銀屑病發(fā)病的T細胞主要為活化的I型T細胞,表皮主要為Tc1細胞,真皮主要為Th1細胞. 細胞因子是細胞之間相互作用的主要介質,在銀屑病皮損部位,T細胞、抗原提呈細胞、角質形成細胞等通過細胞因子、趨化因子發(fā)生相互作用,而且其間的關系變得復雜而紊亂[7]. 隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)由抗原提呈細胞與自然殺傷細胞介導的天然免疫及由T細胞介導的獲得性免疫在銀屑病患者中發(fā)生紊亂,二者相互作用,導致細胞因子、趨化因子及生長因子產生,進而導致皮損部位炎癥細胞浸潤及炎癥網絡的逐級放大,最終導致銀屑病特有的浸潤性鱗屑性紅斑發(fā)生[8].
趨化因子及其受體系統(tǒng)在炎癥細胞自毛細血管向皮損部位的遷移過程中起到至關重要的作用. Goebeler等[2]的研究結果顯示趨化因子Mig mRNA在銀屑病皮損部位真皮上部高表達并在真皮頂端呈簇集分布,與T細胞及巨噬細胞在銀屑病皮損頂部的浸潤模式相一致, 由于Mig具有活化及趨化T細胞的能力,推測真皮頂端是T細胞外滲繼而移入表皮的首選部位,由于某一時段中只有部分皮損部位的真皮表達Mig,提示T細胞的外滲和遷移受時間的限制并呈周期性. Mig的特異性受體為CXCR3, CXCR3主要表達于Th1細胞亞群,這與銀屑病皮損部位浸潤的主要T細胞亞群相一致. 有報道CXCR3在銀屑病皮損部位皮膚中升高,主要表達于真皮CD3+淋巴細胞[9].
我們的研究結果表明趨化因子受體CXCR3在銀屑病外周血淋巴細胞中的表達增高并與PASI呈正相關,并且隨著病情的好轉而下降,結合文獻報道,推測CXCR3可能通過與其特異性配體Mig結合,參與了淋巴細胞向皮損部位的移行及皮損炎癥狀態(tài)的維持,其機制可能涉及包括參與細胞信號轉導途徑在內的多環(huán)節(jié)調節(jié),使細胞之間及細胞與細胞外基質之間的結構發(fā)生改變而更加符合炎癥細胞遷移的需要,從而在銀屑病的發(fā)病機制中起著重要作用.
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篇10
【關鍵詞】 高壓氧;重型閉合性顱腦損傷;補體受體;氧自由基;紅細胞免疫粘附
重型顱腦損傷患者由于傷后出現(xiàn)腦缺血、缺氧、水腫等,往往出現(xiàn)能量代謝障礙,無氧代謝增加,導致腦組織中酸性代謝產物增加,出現(xiàn)酸中毒及微循環(huán)障礙,反過來加重腦組織缺氧,形成惡性循環(huán)。要打斷這一惡性循環(huán),提高腦組織供氧是有效的措施之一。氧自由基是機體需氧代謝的中間產物,氧化能力強,對各種細胞膜都有不同程度的損害,可破壞細胞膜的結構,并影響其功能。為了探討高壓氧對重型閉合性顱腦損傷患者臨床治療價值,我們觀察了重型閉合性顱腦損傷患者高壓氧(HBO)治療前、后氧自由基水平變化及紅細胞膜補體受體1型分子(CR1)數量表達(即活性變化),并探討了紅細胞膜CR1分子數量表達與氧自由基二者之間的相關性,以期進一步了解氧自由基對紅細胞免疫粘附(RCIA)功能影響的機制。
1 對象與方法
1.1 研究對象 重型閉合性顱腦損傷患者58例,均經CT或MRI確診。顱腦損傷原因主要以交通事故居多,其次為高處墜落,無其它部位重要損傷,傷前無心、腎、肝等臟器急慢性病及糖尿病史等,全部有昏迷史。①高壓氧治療組(HBO組):31例,男20例,女11例,年齡9~68歲,平均397歲。行HBO和其他常規(guī)治療。②對照組:27例,男17例,女10例,年齡10~67歲,平均391歲。單純常規(guī)治療。③正常組:本院同期健康體檢者30名,男21例,女9例,年齡10歲~66歲,平均385歲。以上各組2周內均未使用類固醇激素及免疫抑制劑。HBO組和對照組患者年齡、傷情、顱內血腫及腦挫傷程度、手術治療等臨床指標無統(tǒng)計學差異,并均在傷后24 h內入院。
1.2 治療方法 兩組患者均住重癥監(jiān)護病房,生命體征及顱內壓均用儀器24 h連續(xù)監(jiān)測,定期抽血查血氣、血糖和電解質,常規(guī)使用激素、脫水劑、能量合劑、止血藥及腦細胞激活劑。根據適應證進行血腫清除術或顱內外減壓術,術后對中、重度昏迷者做氣管切開術和呼吸機輔助呼吸。HBO組的HBO治療在入院后或手術后7 d左右開始,治療壓力02 MPa,升壓15 min,穩(wěn)壓,戴面罩吸氧30 min 2次,中間吸空氣10 min,減壓20 min出艙。每日1次,10次為1個療程,分別治療2~3個療程。
1.3 檢測方法 治療前(均為住院次日)、治療后(HBO組HBO治療平均15個療程,對照組均在住院15 d)晨抽取靜脈血4~5 ml,分別用EDTANa2、肝素抗凝。
1.3.1 紅細胞上CR1分子的測定:根據文獻[1]建立的ELISA法檢測紅細胞上CR1分子的表達。抽取靜脈血2 ml,以EDTA抗凝,經PBS洗滌3次、戊二醛固定后,以PBS配成2%的紅細胞懸液,取25 μl紅細胞懸液加入V形板各孔中,依次加入抗CR1單抗mAb、堿性磷酸酶標記的羊抗鼠IgG和底物單磷酸酚酞(PMP)(以上試劑均購自第二軍醫(yī)大學長海醫(yī)院免疫室)。離心,吸取上層顯色液,加入到另一個干凈的U形板中測定A405值。實驗中以一抗的稀釋液(PBS/BSA)作為空白對照,用綿羊紅細胞(無CR1分子)作為陰性對照。檢測結構以實驗組的A405值與空白對照A405值之差作為測定值。主要儀器為芬蘭產Multiskan MK3酶標儀、Wellwash 4 MK2洗板機。
1.3.2 血漿SOD、MDA和GSHPX的測定:均采用化學比色法(試劑盒購自南京建成生物工程研究所),操作按說明書進行。GSHPX以新單位表示酶活力(8 μl全血在37 ℃反應5 min使GSH降低μmol數[2])。主要儀器為美國Backman CX7全自動生化分析儀。
1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS統(tǒng)計學軟件,計量資料均以x±s表示,多組間顯著性比較采用F檢驗,兩組間顯著性比較采用q檢驗,相關性分析采用統(tǒng)計學直線相關分析處理,求出r值。
2 結果
2.1 治療前外周血紅細胞CR1分子數量表達及SOD、MDA和GSHPX水平差異 見表1。
表1 治療前外周血紅細胞CR1分子表達及SOD、MDA和GSHPX的檢測結果(略)
注:vs HBO組, P>005;vs 正常組,P<001
表1顯示,①對照組、HBO組患者細胞CR1分子數量表達顯著低于正常組(P<001);SOD和GSHPX的水平顯著下降,MDA的水平顯著上升。②SOD、GSHPX、MDA的水平及紅細胞CR1分子數量表達差異無顯著性(P>005)。提示紅細胞CR1分子數量表達、血漿SOD、MDA和GSHPX水平與病情相關。患者外周血紅細胞CR1分子數量表達與氧自由基的相關性分析:紅細胞CR1分子數量表達與SOD和HSHPX的水平呈顯著的正相關(r=0504,P<001;r=0538,P<001);與MDA的水平呈顯著的負相關(r=-0660,P<001)。
2.2 治療后外周血紅細胞CR1分子數量表達及SOD、MDA和GSHPX水平差異 見表2。
表2 治療后外周血紅細胞CR1分子數量表達及SOD、MDA和GSHPX的檢測結果(略)
表2顯示,兩組患者紅細胞CR1分子數量表達、血漿SOD、MDA和GSHPX水平相差顯著(P<001),HBO組紅細胞CR1分子數量表達、SOD和GSHPX的水平顯著上升,MDA的水平顯著下降。
3 討論
紅細胞有許多與免疫有關的物質,如CR1、CR3、CD58、CD59、IL8受體和SOD酶等,紅細胞表面的CR1,是RCIA功能的物質基礎。C3b一方面與CIC結合,另一方面又作為配體與CR1相結合觸發(fā)免疫細胞對異物及抗原的粘附和消除。此外,C3b作為替代途徑的C3等轉化酶的組成要素,發(fā)揮著活化補體系統(tǒng),放大補體功能的主要作用。在血循環(huán)中C3b受體總數的90%~95%存在于紅細胞膜上即CR1,因此,紅細胞在消除CIC中起主要作用。幾乎所有經補體調理過的抗原和IC,都由紅細胞結合運至肝脾消除[3]。紅細胞膜由脂類和蛋白質組成,膜蛋白質以糖蛋白或糖脂蛋白形式存在,膜的結構和功能的完整性對決定膜上CRI功能有決定性作用,由于紅細胞膜直接接觸高分壓氧,易導致膜的脂質過氧化,機體則主要通過抗氧化劑和抗氧化酶(如SOD、GSHPX等)的作用來抗衡自由基的膜毒性[4]。而紅細胞上的SOD酶等抗氧化物質,除參與清除吞噬細胞產生的氧自由基,增加吞噬功能外,還可使巨噬細胞產生IL1和TNF的能力增強[5]。本研究結果顯示,重型閉合性顱腦損傷患者紅細胞CR1分子數量表達顯著低于對照組,說明重型閉合性顱腦損傷患者紅細胞CR1分子活性降低,RCIA功能也降低,則患者紅細胞攜帶IC至網狀內皮系統(tǒng)的能力下降,致使IC沉積于血管壁,激活補體系統(tǒng),一方面激活凝血系統(tǒng),導致DIC;另一方面至使血管內皮細胞損傷,引起血小板粘附聚集,進而釋放組織胺等血管活性物質,進一步造成全身小動脈痙攣,引起重型閉合性顱腦損傷患者一系列癥狀和體征。急性顱腦損傷后的應激反應及下丘腦損傷,可導致神經內分泌免疫系統(tǒng)具有廣泛抑制作用的內分泌激素,特別是阿片肽類物質升高,可能使細胞表面的CR1分子結構、數目及功能受到一定的影響。為了進一步探討患者細胞CR1分子數量表達及RCIA功能低下的原因,我們檢測了患者血漿SOD、MDA和GSHPX水平,發(fā)現(xiàn)MDA水平升高,SOD和GSHPX水平降低??赡芑颊叽嬖诮M織缺血/缺氧、感染和應激等因素,可使體內自由基的含量增加。紅細胞膜CR1分子數量表達與SOD和GSHPX的水平呈顯著的正相關,與MDA的水平呈顯著的負相關。這就提示,患者紅細胞CR1分子數量表達與脂質過氧化反應增強密切相關。患者增加的自由基可直接影響紅細胞膜的功能,降低了膜上CR1的含量及SOD酶的活性,致紅細胞膜CR1分子數量表達降低,清除IC的功能減低?;颊呒t細胞膜受損,機體的抗氧化能力下降及自由基水平升高,均可導致機體細胞免疫功能下降。高壓氧治療對機體的影響主要是高濃度氧和高氣壓的雙重作用。文獻報道[6],HBO治療能通過調節(jié)細胞黏附分子,降低缺血灶炎癥反應的程度。本研究HBO組經高壓氧治療后,紅細胞CR1分子數量表達、SOD和GSHPX的水平顯著上升,MDA的水平顯著下降,與常規(guī)治療組相比具有顯著性差異。證明了高壓氧治療不僅使脂質過氧化反應降低,而且還可以使機體清除高壓氧環(huán)境下機體產生的氧自由基及疾患所產生的氧自由基的能力提高。SOD活性的增高還表明機體有很大潛能適應間歇性高壓氧環(huán)境的自由基改變[7]。在高壓氧條件下,紅細胞變形能力及屈曲性的恢復,通透指數下降和電泳時間加快,改變了紅細胞膜的液晶狀結構使CR1分子數量和構型發(fā)生變化。說明高壓氧能夠減少或抑制自由基的產生,可提高患者的細胞免疫功能。因此,高壓氧對患者及阻止氧自由基產生,對提高患者的紅細胞膜CR1分子數量表達即RCIA功能,促進病情好轉,具有重要意義。綜上所述,重型閉合性顱腦損傷患者存在機體的抗氧化能力下降,自由基水平升高及紅細胞CR1分子數量表達下降[3],兩者具有相關性。高壓氧能顯著影響患者SOD、GSHPX、MDA的水平及紅細胞CR1分子數量表達,其治療效果可能是通過減少或抑制自由基的產生促進紅細胞膜CR1分子數量表達而實現(xiàn)的,為臨床上高壓氧治療在自由基方面及提高RCIA功能提供了理論基礎,并可能作為調整HBO治療方案的依據。
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