導(dǎo)語(yǔ)：高效液相色譜法測(cè)定論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

DeterminationofMatrineOxgmatrinecontentinKangfulingcapsulesbyHPLC

【Abstractobjective】TosetupamethodforqualitycontrolofFuyankangtablets.METHOD：HPLCmethodwasdevelopedtoquantitativedetermination.TheseparationwasperformedonAgilentTechnologiesZORBAXExtend-C184.6×250mm,5μm.Themobilephasewasacetonitrile-methanol-phosphatebuffer(pH=6.8)(16：16：68).Theflowratewas1.0ml·min-1.TheUVdetectionwavelengthwas220nm.Thecolumntemperaturewas30℃.RESULTS：ThelinearrangeofMatrineandOxgmatrinewereat0.02～0.40mg·ml-1(r=0.9995)and0.01～0.20mg·ml-1(r=0.9997)respectively,theaveragerecoveries(n=6)were98.2%and97.6%withRSD1.4%and2.2%.CONCLUSIONThemethodissimpleandaccurate,itcanbeusedforqualitycontrolofKangfulingcapsules.

【Keywords】HPLC；Kangfulingcapsules；Matrine；Oxgmatrine；Determination

康婦靈膠囊為《國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）》收載的品種，由苦參、杠板歸、黃柏、益母草、雞血藤、紅花龍膽、土茯苓、當(dāng)歸等8種中藥組成。具有清熱燥濕、活血化瘀、調(diào)經(jīng)止帶的功效，為婦科常用中藥[1]。苦參含有苦參堿、氧化苦參堿等成分，我們采用高效液相色譜法測(cè)定制劑中苦參堿、氧化苦參堿的含量，該項(xiàng)方法操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確可靠，可用于康婦靈膠囊的質(zhì)量控制論文。

1儀器與試藥

1.1儀器LC-2010A高效液相色譜儀，CLASS-VP色譜工作站。

1.2試藥苦參堿對(duì)照品（批號(hào)：100078-200414），氧化苦參堿對(duì)照品（批號(hào)：110780-200004），由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用；康婦靈膠囊為市售樣品（貴州和仁堂藥業(yè)有限公司，規(guī)格：0.4g·粒－1，批號(hào)：20061108，20061202，20061216）。乙腈、甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱：AgilentTechnologiesZORBAXExtend-C184.6×250mm，5μm，流動(dòng)相：乙腈-甲醇-磷酸鹽緩沖液（PH6.8）（16:16:68），檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm，流速：1.0ml/min，柱溫：30℃。

2.2溶液配制

2.2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥12小時(shí)以上的苦參堿對(duì)照品和氧化苦參堿對(duì)照品各適量，分別加甲醇制成每1ml各含0.4mg的對(duì)照品貯備液；再精密量取苦參堿對(duì)照品貯備液和氧化苦參堿對(duì)照品貯備液各適量，加甲醇制成每1ml含苦參堿0.2mg、氧化苦參堿0.1mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2樣品溶液的制備取康婦靈膠囊10粒內(nèi)容物，研細(xì)，取約1.0g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，加濃氨溶液2ml使?jié)駶?rùn)，再加三氯甲烷（CHCl3）30ml，超聲處理（功率250W，頻率33KH2）20分鐘，濾過(guò)，取濾液，再用三氯甲烷洗滌殘?jiān)?、容器及濾器4次，每次5ml，濾過(guò)，濾液合并，置水浴上蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3陰性對(duì)照溶液的制備取除苦參以外的處方中其余藥材的十分之一量，按法制成片，再按樣品制備方法，制成陰性對(duì)照溶液。

2.3專(zhuān)屬性試驗(yàn)

分別精密吸取樣品溶液、陰性對(duì)照溶液及對(duì)照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖（圖1）。由圖1可見(jiàn)，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，有相同保留時(shí)間（1氧化苦參堿：6.866min；2苦參堿：15.422min）的色譜峰，陰性試驗(yàn)無(wú)干擾，證明本法可行。

2.4線性范圍考察

精密吸取對(duì)照品貯備液各適量，分別加甲醇配成濃度分別為苦參堿：0.02、0.05、0.10、0.20、0.30、0.40mg·ml－1，氧化苦參堿：0.01、0.03、0.05、0.10、0.15、0.20mg·ml－1的溶液，搖勻，濾過(guò)，精密吸取續(xù)濾液各10μl，注入液相色譜儀，記錄峰面積。以峰面積（A）為縱坐標(biāo)，其濃度（C）為橫坐標(biāo)，線性回歸，苦參堿回歸方程為：A=4.34×105C＋3.87×102，r=0.9995；氧化苦參堿回歸方程為：A=1.21×104C＋8.07×102，r=0.9997。結(jié)果表明，苦參堿在0.02～0.04mg·ml－1范圍內(nèi)峰面積與其濃度呈良好線性關(guān)系；氧化苦參堿在0.01～0.20mg·ml－1范圍內(nèi)峰面積與其濃度呈良好線性關(guān)系。

2.5精密度

取樣品（貴州和仁堂藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20061108）按“2.2樣品溶液的制備”方法制備樣品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，進(jìn)樣量10μl，在上述色譜條件下求得苦參堿峰面積RSD為0.9%，氧化苦參堿峰面積RSD為1.2%，表明精密度較好。

2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)

取樣品（貴州和仁堂藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20061108）溶液，在0、2、4、8、24h分別進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明樣品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定，苦參堿峰面積

的RSD為1.1%，氧化苦參堿峰面積的RSD為0.8%。

2.7重復(fù)性試驗(yàn)

取樣品（批號(hào)：20061108）共6份，分別按“2.2樣品溶液的制備”方法制備樣品溶液，進(jìn)行測(cè)定，求得苦參堿含量的RSD為0.7%，氧化苦參堿含量的RSD為1.6%，表明重復(fù)性較好。

2.8加樣回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取已知含量的樣品（貴州和仁堂藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20061108，苦參堿含量3.01mg·g－1，氧化苦參堿含量2.42mg·g－1，平均裝量0.3916g·粒－1）適量，共6份，分別置具塞錐形瓶中，分別精密加入苦參堿對(duì)照品溶液（0.2001mg·ml－1）、氧化苦參堿對(duì)照品貯備液（0.1000mg·ml－1）各適量，揮去甲醇，按“2.2樣品溶液的制備“方法操作，得回收率試驗(yàn)溶液，依法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.9樣品含量測(cè)定

分別精密吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定三批樣品中苦參堿、氧化苦參堿峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算其含量（n=5），結(jié)果見(jiàn)表2。根據(jù)三批樣品所測(cè)結(jié)果，暫定每?？祴D靈膠囊的苦參堿含量質(zhì)控定量限為1.8mg，氧化苦參堿含量質(zhì)控定量限為0.5mg。表1苦參堿、氧化苦參堿加樣回收率試驗(yàn)表2三批樣品含量測(cè)定結(jié)果

3討論

3.1流動(dòng)相的選擇筆者選擇了三種流動(dòng)相：①乙腈-0.1%磷酸溶液（20:80）（三乙胺調(diào)節(jié)PH值至8.0）[2]；②乙腈-甲醇-磷酸鹽緩沖液（PH6.8）-三乙胺（18:18:70:0.1）[2]；③乙腈-甲醇-磷酸鹽緩沖液（PH6.8）（16:16:68）。經(jīng)多次測(cè)試結(jié)果表明，前兩種流動(dòng)相所得峰形較寬，含雜質(zhì)多，而采用③乙腈-甲醇-磷酸鹽緩沖液（PH6.8）為流動(dòng)相所得樣品峰形好，干擾成分少，故選此做為含量測(cè)定的流動(dòng)相。

3.2溶劑的確定筆者比較了用甲醇溶解供試品及用流動(dòng)相溶解供試品，結(jié)果以甲醇為溶劑分離效果好，且保留時(shí)間短。

3.3通過(guò)對(duì)3批樣品中苦參堿、氧化苦參堿的測(cè)定，結(jié)果表明苦參堿最高含量為1.38mg·粒－1，最低為1.18mg·粒－1；氧化苦參堿最高含量為1.08mg·粒－1，最低為0.94mg·粒－1。綜合考慮確定限量，每粒含苦參堿不得低于1.8mg，含氧化苦參堿不得低于0.5mg。

本方法結(jié)果準(zhǔn)確，方法簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性及回收率均理想，可以有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量。

【參考文獻(xiàn)】

[1]《國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）》[S]．2002．

[2]中國(guó)藥典[S]．2005，497～498．