血清學(xué)檢測范文
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篇1
【關(guān)鍵詞】受血者;血清學(xué);醫(yī)療糾紛
【文章編號】1004-7484(2014)07-4097-01
【Abstract】Objective:To analyze serum markers of transfusiontransmitted infections in pretransfusion patients and investigate the cause of clinical transfusion related infections.Methods:HbsAg,Syphilis antibody,AntiHCV,and AntiHIV were detected by ELISA in4700 Cases.Results:Among 4700 patients detected,HBV positive, USR positive,HCV positive and HIV positive were 664 cases(11.5%),97 cases91.70%),59 cases(1.82%)and 4 cases(0.08%),respectively. Conclusion:Through the serology detections in patients before transfusion,We can identify the patient’s health state,avoid the medical dispute resulted from the iatrogenic dissemination diseases and eventually protect the benefits between patients and medical personnnels.
【Key words】Blood recipient; Serology; Medical dispute
輸血作為一種行之有效的治療手段挽救了眾多生命垂危者,但同時也存在著傳播輸血感染性疾病的高度風(fēng)險。為了減少病毒的輸血傳播,有關(guān)部門采取了成分血、無償獻(xiàn)血等措施,大大降低了病毒的傳播機(jī)率。但由于病毒檢測的“窗口期”問題,輸血導(dǎo)致的血源性傳播仍不可避免。病毒性疾病的感染途徑多樣,是輸血和醫(yī)院性感染所致,還是受血者接受輸血治療或入院前已被感染,需要獲得受血者術(shù)前和輸血前檢查的資料進(jìn)行區(qū)別。因此,了解受血者在術(shù)前、輸血前的狀況,對避免和預(yù)防受血者醫(yī)院內(nèi)感染、醫(yī)務(wù)人員的職業(yè)感染以及防止出現(xiàn)醫(yī)療糾紛都具有重要意義。按照國家衛(wèi)生部2000年頒布的《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》附件要求,受血者輸血前須進(jìn)行九項(xiàng)血液傳播性疾病相關(guān)指標(biāo)的檢測。為了探討對受血者輸血前血清感染性指標(biāo)檢測的意義,筆者對本院2006年6月至2007年6月住院的預(yù)輸血者進(jìn)行ALT、HBsAg、抗-HCV,抗-H IV及梅毒抗體等指標(biāo)的檢測和
1.1 資料來源 我院2006年6月至2007年6月住院的預(yù)輸血者,共計4700例,其中男2445例,女2255例,年齡4歲~86歲。手術(shù)前或輸血前送檢空腹靜脈血液標(biāo)本3 ml。
1.2 儀器與試劑 雷勃Accent酶標(biāo)儀, well wash 4洗板機(jī)。檢測試劑由上??迫A生物工程股份有限公司提供,均為有效期內(nèi)的批檢合格產(chǎn)品。
1.3 檢測項(xiàng)目及方法 檢測項(xiàng)目為乙肝五項(xiàng)、丙肝抗體、艾滋病抗體和梅毒螺旋體抗體。實(shí)驗(yàn)均采用酶聯(lián)免疫法(ELISA法),嚴(yán)格按儀器和試劑盒說明書要求操作,結(jié)果判定以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。對抗HIV ELlSA初次陽性者進(jìn)行雙孔復(fù)測,復(fù)查仍陽性者送艾滋病初篩中心實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢。最后,由省艾滋病監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室確診抗HIV陽性。
2 結(jié)果
4700例患者血清學(xué)檢測陽性者為1100例(20.91%),其中HBsAg陽性664例(11.5%),梅毒螺旋體抗體陽性80例(1.70%),丙肝抗體陽性39例(1.82%),艾滋病抗體初篩試驗(yàn)陽性4例(0.08%),初篩陽性經(jīng)雙孔復(fù)檢后送初篩中心實(shí)驗(yàn)室檢測,后經(jīng)省艾滋病監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室確診為陽性。
3 討論
通過分析4700例受血者輸血前血清學(xué)檢測結(jié)果表明,受血者8項(xiàng)指標(biāo)總異常率高達(dá)20.91%。其中乙肝陽性率總計為11.5%,,梅毒螺旋體抗體陽性為1.70%,丙肝抗體陽性為1.82%,艾滋病抗體初篩試驗(yàn)陽性為0.08%。從檢測結(jié)果看,乙肝患者占相當(dāng)大一部分。乙肝五項(xiàng)陽性結(jié)果中HBsAg陽性占11.5%,而單純HBeAg陽性為12例(1.22%),單純HBeAb陽性為221例(4.7%),HBeAb、HBcAb二者都為陽性的有25例(0.53%),而這些患者(共258例)可能正處于窗口期,即實(shí)驗(yàn)室檢測不出HBsAg,但患者此時可能已具有傳染性[2]。因此對比以前只檢測HBsAg一項(xiàng)而言,檢驗(yàn)乙肝五項(xiàng)能較準(zhǔn)確的了解患者病情,也可作為醫(yī)療證據(jù)、減少醫(yī)患糾紛。輸血并不是肝炎、艾滋病、梅毒等疾病惟一傳染途徑。性接觸、家庭成員密切接觸、母嬰垂直傳播、血液傳播、靜脈注射以及醫(yī)源性感染,均可造成此類疾病的傳染。病毒感染疾病的途徑是多種多樣,是輸血感染還是入院前已經(jīng)感染?通過患者輸血前血清學(xué)檢查,不僅可以了解受血者輸血前情況,同時對陽性患者在手術(shù)、護(hù)理、用藥等治療手段上就有針對性的治療和預(yù)防。避免誤診、漏診或成為新的傳染源。它還可以提示醫(yī)務(wù)人員特別是臨床一線人員加強(qiáng)自我保護(hù),在各項(xiàng)治療及手術(shù)過程中,注意操作規(guī)程,減少醫(yī)療損傷,避免引起院內(nèi)感染。對被陽性患者血液污染的器械及各種物品,應(yīng)嚴(yán)格消毒滅菌,避免院內(nèi)感染。醫(yī)院可保存患者檢驗(yàn)資料,以便在發(fā)生糾紛時,為舉證倒置提供依據(jù)。在這里我們要注意一點(diǎn),因?yàn)榇翱谄诘拇嬖谝约俺R?guī)檢測方法的局限性,即使以上檢測結(jié)果均為陰性,也不能完全排除感染已存在的可能性。與輸血相關(guān)病毒的檢測“窗口期”如下:艾滋病抗體22 d,丙型肝炎抗體72 d,HBsAg 50 d。另外,目前按國家標(biāo)準(zhǔn)檢測試劑盒尚不能達(dá)到100%的檢測出血液中的病毒[3]。因此,醫(yī)生很有必要向患者及家屬交代清楚。明示輸血的風(fēng)險性,即目前醫(yī)學(xué)水平有限,難以杜絕輸血后病毒感染的發(fā)生,了解輸血的必要性和傳染疾病的可能性。雙方簽定《輸血同意書》,保障受血者及家屬對輸血的知情權(quán)、避險權(quán)和選擇權(quán)。檢驗(yàn)科最好能保存受檢者輸血前血清,以備日后發(fā)生醫(yī)療糾紛時提供證據(jù)。綜上所述,隨著輸血法的實(shí)施,公民法律意識和自我保護(hù)意識增強(qiáng),為避免院內(nèi)感染,防止因輸血而引起醫(yī)療糾紛,對受血者進(jìn)行輸血前血清學(xué)檢查是必要的也是非常重要的。
參考文獻(xiàn)
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篇2
[關(guān)鍵詞]產(chǎn)前篩查;梅毒;血清學(xué)檢測;診斷
梅毒是一種傳染性較強(qiáng)的人類性傳播疾病,其病原體主要為梅毒螺旋體,傳染性較強(qiáng),危害性較為嚴(yán)重。梅毒通常可分為先天性梅毒和獲得性梅毒,其中先天性梅毒主要傳播方式為母嬰傳播,母體攜帶的梅毒螺旋體通過胎盤組織傳染給宮內(nèi)胎兒,可能會導(dǎo)致胎兒早產(chǎn)、流產(chǎn)等妊娠不利結(jié)局。因此,有必要在產(chǎn)前對孕婦進(jìn)行梅毒篩查,以便于及時采取相應(yīng)的干預(yù)措施,以減少梅毒的傳播,改善妊娠結(jié)局。本次研究為了探討不同梅毒血清檢測方法在產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查中的應(yīng)用效果,特于2014年1月~2015年6月選取500例進(jìn)行梅毒篩查的孕婦進(jìn)行研究,分別采取梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA法)、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST法)進(jìn)行檢測。現(xiàn)將研究結(jié)果分析如下。
1資料與方法
1.1一般資料
于2014年1月~2015年6月,選取在我院進(jìn)行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的500例孕婦進(jìn)行研究,所有孕婦均進(jìn)行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查,孕婦的年齡分布于20~37歲之間,平均為(29.67±6.34)歲,孕周為12~32周,平均孕周為(21.94±9.57)周,其中有427例初產(chǎn)婦、73例經(jīng)產(chǎn)婦。在進(jìn)行研究前,孕婦及其家屬均對研究方法和目的進(jìn)行了詳細(xì)的了解,并簽署知情同意書。此次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會許可通過。
1.2研究方法
分別采用梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA法)、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST法)對孕婦進(jìn)行梅毒血清學(xué)檢測,每例孕婦均于清晨空腹?fàn)顟B(tài)時采集5mL的靜脈血液,以3000r/min的速度進(jìn)行離心處理,取血清進(jìn)行檢測。具體檢測方法如下:(1)TPPA法:使用微量滴管將血清稀釋液依次滴入微量反應(yīng)板的第1~4孔中,每孔均滴入25μL血清稀釋液,使用移液管將25μL血清稀釋液轉(zhuǎn)移到微量反應(yīng)板的第1孔中,再以2倍遞增的量依次轉(zhuǎn)移到第4孔,未致敏粒子滴入至第3孔中,將致敏粒子滴入至第4孔中,并使用平板振蕩器進(jìn)行30s的振蕩,使其混合,加蓋,放置于室溫中,2h后觀察并記錄結(jié)果。當(dāng)粒子環(huán)增大且外周邊緣不規(guī)則,或有均勻的凝集形成且呈膜狀延伸,表示檢測結(jié)果為陽性。(2)免疫膠體金法:將血清和膠體金試紙放置于室溫中,將試紙帶有箭頭的一端放置入血清容器中,待10s后,將其平放,15min后觀察并記錄結(jié)果。當(dāng)試紙的檢測線和對照線位置均出現(xiàn)1條反應(yīng)線時,表示檢測結(jié)果為陽性。(3)TRUST法:在室溫環(huán)境中,取0.05mL血清,置入試驗(yàn)卡圈中,均勻涂抹,滴入1滴TRUST試劑液,以每分鐘100r的速度輕輕搖晃,8min后觀察并記錄結(jié)果。當(dāng)試驗(yàn)卡圈中出現(xiàn)粉紅色的凝集物質(zhì)時,表示檢測結(jié)果為陽性。
1.3觀察指標(biāo)
對比三種單一的梅毒血清學(xué)檢測方法、三種方法聯(lián)合檢測的敏感度、特異度、準(zhǔn)確性、陽性預(yù)測值以及陰性預(yù)測值。
以暗視野顯微鏡檢查和VDRL非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)作為診斷金標(biāo)準(zhǔn),顯微鏡下可見梅毒螺旋體,且非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)結(jié)果為陰性,即確診為梅毒。敏感度=真陽性/(真陽性+假陰性);特異度=真陰性/(真陰性+假陽性);準(zhǔn)確性=(真陽性+真陰性)/總例數(shù);陽性預(yù)測值=真陽性/(真陽性+假陽性);陰性預(yù)測值=真陰性/(真陰性+假陰性)。
1.4統(tǒng)計學(xué)方法
在SPSS17.0軟件中錄入數(shù)據(jù),并進(jìn)行處理。計數(shù)資料表示為[n(%)],進(jìn)行x2檢驗(yàn)。三組之間的敏感度、特異度等數(shù)據(jù)采用2×3卡方表格檢驗(yàn),三組與三組聯(lián)合檢測之間的數(shù)據(jù)采用2×4卡方表格檢驗(yàn)。當(dāng)P
2結(jié)果
500例進(jìn)行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的孕婦中,有448例孕婦被確診為梅毒陽性,52例孕婦為陰性。三種梅毒血清學(xué)檢測方法的敏感度、特異度、準(zhǔn)確性、陽性預(yù)測值以及陰性預(yù)測值均不存在顯著差異(x2=0.674、0.400、0.254、0.104、0.085,P=0.714、0.819、0.881、0.949、0.959),但三種檢測方法聯(lián)合檢測的敏感度、特異度、準(zhǔn)確性、陽性預(yù)測值以及陰性預(yù)測值均明顯高于單一的檢測方法(x2=35.953、14.484、50.323、26.975、50.381,P=0.000、0.002、0.000、0.000、0.000)。見表1~2。
3討論
梅毒是一種由梅毒螺旋體入侵機(jī)體引發(fā)的感染性疾病,是一種較為常見的性傳播疾病,其臨床表現(xiàn)以生殖器官潰瘍?yōu)橹?。一般情況下,梅毒可分為先天性梅毒和獲得性梅毒,獲得性梅毒是指通過傳播的梅毒,先天性梅毒是指妊娠期孕婦體內(nèi)的梅毒經(jīng)胎盤組織進(jìn)入宮內(nèi)胎兒體內(nèi)引發(fā)的梅毒。近年來,隨著生活方式和觀念的轉(zhuǎn)變,梅毒的發(fā)病率逐漸增高,通常表現(xiàn)為潛伏性的梅毒,如孕婦攜帶有梅毒螺旋體,很可能會傳染給其宮內(nèi)胎兒,導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)死亡、胎兒畸形等妊娠不利結(jié)局的發(fā)生。因此,有必要對妊娠期孕婦進(jìn)行產(chǎn)前梅毒篩查,以盡早發(fā)現(xiàn)孕婦的梅毒攜帶情況,并采取相應(yīng)的干預(yù)措施,能夠有效具有十分重要的意義。
目前,臨床上檢測梅毒螺旋體的方法主要有梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA法)、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST法),其中TPPA法主要是通過對梅毒病原體進(jìn)行分包處理,采用致敏粒子和未致敏粒子進(jìn)行對比,觀察其凝集反應(yīng),以檢測梅毒螺旋體,這種檢測方法相對較為簡單,檢測所需時間較少,可在2h內(nèi)對結(jié)果進(jìn)行判斷,通常被應(yīng)用于大規(guī)模的梅毒篩查;膠體金法主要是通過試紙在血清中放置后的反應(yīng)線出現(xiàn)數(shù)目進(jìn)行判斷,操作相對簡單,檢測較為快速,但容易受到其他因素的干擾,容易出現(xiàn)漏診;TRUST法主要是通過特制的TRUST試劑液對血清中的反應(yīng)素進(jìn)行檢測,操作簡單,但容易受到機(jī)體其它免疫性病變的影響,容易出現(xiàn)假陽性情況。
篇3
【中圖分類號】R737.31
【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A
【文章編號】 1673-7555[2007]01-0045-03
卵巢惡性腫瘤是女性生殖器三大惡性腫瘤之一,因卵巢位于盆腔內(nèi),癌早期無癥狀,一旦出現(xiàn)臨床癥狀,常失去治療時機(jī),故急需尋找一種早期正確診斷的方法。近年研究發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者血清中含有腫瘤相關(guān)因子,來源于原發(fā)腫瘤的DNA。由于血清標(biāo)本來源方便和非侵入性等優(yōu)點(diǎn)逐步替代組織學(xué)腫瘤標(biāo)記的檢測。腫瘤的發(fā)生是由遺傳因素及環(huán)境因素兩方面決定,可以檢測卵巢癌患者血清中遺傳學(xué)改變,為卵巢癌早期診斷及預(yù)后監(jiān)測提供新依據(jù)。
1腫瘤患者血清中基因改變的研究
1.1血清游離DNA的來源 上世紀(jì)60年代,首次在紅斑狼瘡患者血漿中發(fā)現(xiàn)游離DNA及其抗體,近年研究發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤患者血清及血漿中DNA含量明顯高于良性疾患,并在惡性實(shí)體腫瘤患者血清DNA中檢測到與相應(yīng)的原發(fā)腫瘤相一致的細(xì)胞遺傳學(xué)改變,從而使外周血DNA的研究受到了前所未有的重視。關(guān)于腫瘤外周血DNA的來源及其發(fā)生機(jī)制主要有以下四種假說。①循環(huán)腫瘤細(xì)胞或微轉(zhuǎn)移灶的裂解:據(jù)推算,在胰腺癌患者血清中如果能測及DNA時,每毫升血液中至少含有1000~10000個腫瘤細(xì)胞,顯然外周血中沒有足夠的腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生如此高水平的DNA,故這種假說不能完全解釋腫瘤患者外周血中DNA的來源。②腫瘤細(xì)胞的壞死;有證據(jù)表明在瘤體較大的患者或發(fā)生轉(zhuǎn)移的晚期患者的血漿中可以檢測到高水平的外周血DNA,因此推測外周血DNA有可能來源于腫瘤細(xì)胞的壞死。可是有些早期腫瘤患者能檢測到外周血DNA,而且腫瘤患者在接受化療時外周血DNA不因腫瘤細(xì)胞壞死而增加,有時反而明顯降低,故腫瘤細(xì)胞的壞死亦不是外周血DNA的惟一來源。③腫瘤細(xì)胞的凋亡:由于血漿DNA電泳后表現(xiàn)出凋亡細(xì)胞所特有的梯度條帶,一些學(xué)者提出了外周血DNA來源于腫瘤細(xì)胞凋亡的觀點(diǎn)。④細(xì)胞自發(fā)性釋放DNA:淋巴細(xì)胞或離體培養(yǎng)的器官能通過一種自我平衡機(jī)制自發(fā)釋放白復(fù)合物,并優(yōu)先釋放細(xì)胞內(nèi)新合成的DNA。據(jù)此有學(xué)者推測腫瘤循環(huán)DNA可能也會以同樣方式釋放人血。目前,關(guān)于腫瘤患者外周血DNA的來源還不能具體確定,具體來源及機(jī)制還有待于今后的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步證實(shí)。
1.2卵巢癌患者血清游離DNA微衛(wèi)星變化的研究近年研究表明,血清中游離DNA存在著微衛(wèi)星變化,微衛(wèi)星變化包括微衛(wèi)星位點(diǎn)雜合性丟失(Lossof-Heterozy2gosity,LOH)和微衛(wèi)星不穩(wěn)定(mierosate insta-biliry,MS1),微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MS1)是近來發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤普遍存在的現(xiàn)象[2,3],是繼癌基因激活和抑癌基因失活后又一新的腫瘤發(fā)生機(jī)制。微衛(wèi)星(mierosat-ellite,MS)是短串核苷酸的簡單重復(fù)序列,重復(fù)單位為2~6個核苷酸,重復(fù)次數(shù)在20~100左右。MSI是在DIMA復(fù)制過程中,由于刪A鏈的滑動,導(dǎo)致MS中重復(fù)單位的插入和缺失,引起任何MS長度的改變,出現(xiàn)新的微衛(wèi)星等位基因。MSI是人類錯配修復(fù)基因變異導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定的重要表現(xiàn)形式。近年來,大量文獻(xiàn)提示了卵巢瘤組織的3p、6q、8 q、9q、13q、X染色體微衛(wèi)星位點(diǎn)均有頻繁的等位基因雜合性丟失(LOH),且該類染色體特定或附近區(qū)域可能存在著某些與卵巢癌相關(guān)的候選抑癌基因?,F(xiàn)將其部分研究結(jié)果總結(jié)敘述如下:
1.2.1卵巢癌患者血清DNA與腫瘤組織DNA3號染色體(3p14.25)變化 腫瘤分子生物學(xué)的深入研究表明,卵巢癌組織中出現(xiàn)高頻率的3號染色體短臂(3p14,25)等位基因缺失,提示該區(qū)域可能存在與卵巢癌相關(guān)的抑癌基因[7,8 3]。張華等[9]研究以卵巢癌患者血清標(biāo)本為DNA來源并結(jié)合相應(yīng)的癌組織標(biāo)本,分別對3p14,25的4個微衛(wèi)星位點(diǎn),(D3S1029、D3S1228、D3S1300、D3S1481)進(jìn)行雜合性丟失檢測,其研究結(jié)果表明:卵巢癌的發(fā)生與卵巢癌患者血清DNA與腫瘤組織DNA3p14,25出現(xiàn)雜合性丟失密切相關(guān),血清3p14,25出現(xiàn)雜合性丟失率與卵巢癌惡性程度有關(guān)。在3014-21區(qū)域存在著SEMA3B、RASSF1A等抑癌基因。Xiang R及Tsc等[10]。研究發(fā)現(xiàn)在多種惡性腫瘤包括腎瘤、肺癌、等惡性腫瘤中均出現(xiàn)該區(qū)域多個微衛(wèi)星位點(diǎn)的LOH。徐軍等研究3號染色體(3p14)等位基因的LOH,他們選擇3014上的3個微衛(wèi)星位點(diǎn)(D3S1234、D3S1300、D3S1312),結(jié)果在所檢測的樣本中發(fā)生至少1個位點(diǎn)缺失的百分率為67.7%,發(fā)生2個微衛(wèi)星位點(diǎn)缺失的為35.5%。
1.2.2卵巢癌組織17號染色體(17p13.1,17 q211)的微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MSl)梁惠琪、關(guān)明等利用新鮮卵巢癌組織及癌旁正常組織的DNA中,用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增17號染色體上5個微衛(wèi)星位點(diǎn),它們都是(cA)n二核苷酸重復(fù)序列,D17S513、TP53、D17S855、D17S806和D17S579,分布于17號染色體不同位置。D17S513位于17號染色體端粒處,TP53定位于17013.1,在p53附近,D17S855、D17S806和17S579定位于17q21.1,在BRCA 1附近。用單鏈構(gòu)象多態(tài)性(Single St rand Confo rmat ion Po lymo rphism,SSCP)分析法檢測微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MSl),并用銀染方法顯示結(jié)果。其結(jié)果表明17號染色體定位于抑癌基因BRCA 1附近的3個微衛(wèi)星位點(diǎn)以及p53附近的微衛(wèi)星位點(diǎn)均頻繁地出現(xiàn)MSI。證實(shí)了頻繁發(fā)生微衛(wèi)星不穩(wěn)定的染色體區(qū)域附近,可能存在抑癌基因,并且有可能引起抑癌基因功能的喪失。
1.2.3卵巢癌患者血清DNA抑癌基因BRCAI/TP53基因雜合性丟失LOH) 高海峰、傅士龍等選用了位于17號染色體上的兩個抑癌基因BRCAI及TPP3中四個微衛(wèi)星位點(diǎn)對卵巢癌患者血清DNA及其相應(yīng)腫瘤組織DNA的BRCA1/TP53等位基因雜合性丟失(Loss of Heterozy 2 gosity,LOH)的研究,結(jié)果提示卵巢癌患者血清DNA與腫瘤組織DNA中BRCM及TP53基因LOH密切相關(guān),從而證實(shí)了卵巢癌患者血清DNA主要來源于原發(fā)腫瘤組織。近年來的研究表明腫瘤患者血液NA濃度顯著高于正常人群,并提示體液包括血清、血漿及腹水。DNA中高頻率遺傳學(xué)標(biāo)志變異的檢測對于監(jiān)控疾病具有一定的臨床意義,因此血清DNA微衛(wèi)星變異分析被人們認(rèn)為是一種具有潛在性臨床應(yīng)用價值的分子檢測方法。
2卵巢癌患者血清蛋白質(zhì)類改變的研究
卵巢癌患者血清中蛋白類異常改變主要為促進(jìn)
細(xì)胞增殖因子、促進(jìn)新血管形成的因子及各種酶類異常表達(dá)。實(shí)體腫瘤是依賴血管性腫瘤,血管為腫瘤提供營養(yǎng)和轉(zhuǎn)移途徑,在沒有新生血管之前,腫瘤只能生長到1~2mm,不能發(fā)生轉(zhuǎn)移,在新生血管后,腫瘤會呈指數(shù)倍增長,轉(zhuǎn)移機(jī)會也隨之增加?,F(xiàn)就與實(shí)體腫瘤血管形成密切相關(guān)的兩個因子進(jìn)行敘述,即血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF):
2.1血管內(nèi)皮生長因子(VEGF) VEGF是已知的作用最強(qiáng)、最專一的血管生成促進(jìn)因子之一。Pdlar等[16]分析了68例臨床Ⅰ、Ⅱ期的卵巢癌患者的VEGF表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)VEGF陽性者平均生存期為22個月,而陰性者的平均生存期大于108個月,兩者的平均生存期限有著極顯著性差異(P
2.2堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF) 堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basicfibroblasffactor,bFGF)是一種具有促進(jìn)有絲分裂,能夠促進(jìn)包括內(nèi)胚層、中胚層和神經(jīng)內(nèi)胚層來源的多種細(xì)胞和組織生長、分化,同時具有促進(jìn)傷口愈合、組織修復(fù)和血細(xì)胞生成等生理功能。bFGP可能通過下面兩種主要機(jī)制參與腫瘤的形成和發(fā)展:①通過過表達(dá)bFGP,而以自分泌和旁分泌方式促進(jìn)細(xì)胞過渡增殖和腫瘤生長。②通過促進(jìn)新生血管形,為腫瘤細(xì)胞生長提供豐富營養(yǎng)。李萍、李新鳴等研究發(fā)現(xiàn)卵巢癌CAOV3細(xì)胞經(jīng)bFGF處理,細(xì)胞增殖比明顯增加,且與bF6P水平呈劑量依賴關(guān)系。
3卵巢癌患者血清檢測的意義及前景
篇4
【關(guān)鍵詞】 孕婦;梅毒;血清學(xué)檢測
梅毒是蒼白螺旋體所引起的一種慢性經(jīng)典的性傳播疾病, 幾乎可以侵犯全身各器官, 病程和表現(xiàn)多樣化, 顯性和隱性期交替出現(xiàn)。梅毒主要通過性接觸傳播, 其次可通過胎盤傳播, 染病母親通過胎盤將疾病傳播給下一代而發(fā)生胎傳梅毒。為了了解本縣妊娠孕婦感染梅毒的現(xiàn)狀, 從2012年9月~2013年9月, 收集河南省羅山縣人民醫(yī)院門診就診孕婦血清進(jìn)行梅毒血清學(xué)檢驗(yàn), 現(xiàn)將檢驗(yàn)結(jié)果作如下分析。
1 資料與方法
1. 1 一般資料 河南省羅山縣婦產(chǎn)科門診1247例孕婦。
1. 2 檢驗(yàn)方法 包括:①暗視野鏡檢。②鍍銀染色檢查和直接熒光抗體試驗(yàn)找梅毒螺旋體。③梅毒血清學(xué)試驗(yàn)。因梅毒血清學(xué)試驗(yàn)(RPR)為臨床檢驗(yàn)科常做試驗(yàn), 所以本文只作此論述。它分為定性和定量兩種。定性試驗(yàn):①吸取孕婦0.05 ml血清放在卡片圈上, 并均勻地涂滿整個圈內(nèi)。②將抗原溶液搖均, 用標(biāo)準(zhǔn)針頭吸取抗原, 每個標(biāo)本中加一滴抗原。③放入旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)8 min, (100±5)轉(zhuǎn)/min。④立刻在強(qiáng)光下觀察結(jié)果。⑤結(jié)果判定:A.卡片圓圈中出現(xiàn)黑色絮狀物即為RPR試驗(yàn)陽性;B.卡片圓圈僅見一點(diǎn)的炭顆粒為陰性。
陽性孕婦要進(jìn)一步作血清學(xué)定量試驗(yàn)。步驟:①在卡片5個圈內(nèi)先加入0.85%鹽水, 勿將鹽水涂開。②吸取0.05 ml血清作倍比稀釋, 稀釋到最后應(yīng)棄去0.05 ml。③滴加抗原, 旋轉(zhuǎn)時間、速度和觀察同定性試驗(yàn)。④如為陽性, 滴度應(yīng)大于1:16。
1. 3 梅毒定性陽性孕婦的治療原則 ①治療越早開始越好。②治療劑量必須正規(guī)、足量、足療程。③治療后應(yīng)作2~3年的隨訪, 治療后一年內(nèi)每3個月復(fù)查一次, 以后每半年復(fù)查一次。治療常應(yīng)用青霉素。對青霉素過敏者, 可用紅霉素或四環(huán)素、或多西環(huán)素, 孕婦性伴陽性者也應(yīng)治療。
2 結(jié)果
門診1247例孕婦中, 檢出梅毒陽性8例, 檢出率0.64%(8/1247)。其中20~26歲5例, 26~35歲3例。8例梅毒孕婦的血清反應(yīng)素定量試驗(yàn)的滴度≤1:8的2例, 1:16的3例, 1:32的2例, 1:64的1例。8例梅毒孕婦中, 5例是一期梅毒, 占梅毒孕婦的63%,3例是二期梅毒, 占梅毒孕婦的37%。另有4例RPR試驗(yàn)定性陽性, 但定量試驗(yàn)在1:8以下為陰性。
3 討論
梅毒發(fā)病的過程一般是從一期到四期。孕婦梅毒的檢測一般是從孕婦的潰瘍部位取材作暗視野鏡檢, 鏡檢能發(fā)現(xiàn)梅毒螺旋體。這種方法應(yīng)該作為梅毒檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”。由于孕婦機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的抗體時間通常得2~4周, 此時檢驗(yàn)科作血清學(xué)試驗(yàn)常常為陰性。因此時孕婦尚無臨床癥狀或臨床癥狀不明顯, 抗體尚未產(chǎn)生而成“假陰性”。建議對懷孕的婦女, 前6個月內(nèi), 應(yīng)多次進(jìn)行梅毒血清學(xué)試驗(yàn), 以免造成漏診。提倡早期對所有孕婦進(jìn)行產(chǎn)前保健, 門診普遍多次對孕婦進(jìn)行梅毒血清學(xué)篩查。以便早發(fā)現(xiàn), 早治療, 減少嬰兒先天性梅毒的發(fā)生。因先天性梅毒是由染病的母親通過胎盤感染其胎兒的。本院門診檢測1247例孕婦有4例是生物學(xué)假陽性, 其滴度都≤1:8, 與相關(guān)報道符合[1]。一般母親的感染狀態(tài)決定了胎兒感染的嚴(yán)重程度, 一期、二期梅毒孕婦, 可導(dǎo)致死胎。先天梅毒無一期梅毒表現(xiàn), 嬰兒可能在出生時不會出現(xiàn)梅毒癥狀, 但出生后3~8周就會出現(xiàn)梅毒癥狀?;純浩つw及黏膜損害部位可發(fā)現(xiàn)梅毒螺旋體, 其梅毒血清學(xué)試驗(yàn)陽性。建議醫(yī)院檢驗(yàn)科做梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)定性陽性時, 必須做定量試驗(yàn), 因定性為陽性的孕婦, 可出現(xiàn)假陽性。只有梅毒定量試驗(yàn)陽性, 才能診斷為梅毒[2]。近年來, 隨著本院“滅酶”工作的深入, 本院門診就診的孕婦, 截至目前, 基本沒有梅毒血清學(xué)試驗(yàn)陽性的。最后需要指出的是:縣級醫(yī)療機(jī)構(gòu)在給孕婦作梅毒血清學(xué)試驗(yàn)時, 完整的服務(wù)除尊重患者的隱私權(quán), 不歧視患者, 為她們保密外, 還應(yīng)該包括勸說患者遵醫(yī)囑完成治療, 向孕婦提供梅毒防治的知識咨詢, 孕婦的追蹤, 及建議孕婦過夫妻生活時使用等, 為我國公共衛(wèi)生服務(wù), 控制住性病, 作出自己應(yīng)有的貢獻(xiàn)。
參考文獻(xiàn)
篇5
[關(guān)鍵詞] 乳腺癌;癌胚抗原;糖類抗原;TNM分期
[中圖分類號] R737.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 2095-0616(2013)23-139-02
乳腺癌是女性最為常見的惡性腫瘤,但是受限于篩查技術(shù),早期發(fā)現(xiàn)和診斷的情況并不理想。血清學(xué)指標(biāo)是近年來的研究熱點(diǎn),在下列研究中,我分析了血清學(xué)指標(biāo)聯(lián)合檢測在乳腺癌早期診斷中的價值,現(xiàn)將結(jié)果報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
將2010年10月~2012年12月期間120例乳腺癌患者納入觀察組,納入標(biāo)準(zhǔn):(1)通過臨床癥狀、輔助檢查明確乳腺癌的診斷;(2)收住院后行乳腺癌根治術(shù);(3)取得患者知情同意。將同期收治的乳腺良性疾病患者納入良性對照組、健康體檢者納入健康對照組,每組各120例。觀察組患者年齡42~58歲、平均(51.8±7.3)歲;良性對照組患者年齡40~57歲,平均(50.7±6.7)歲;健康對照組年齡40~60歲,平均(51.8±5.7)歲。三組受試者基線資料的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
1.2 觀察指標(biāo)
觀察組和良性對照組患者均在入院當(dāng)天采集靜脈外周血5mL、健康對照組在體檢當(dāng)天采集靜脈外周血5mL,離心后收集血清檢測CA153、CA125、CA199、CEA含量。檢測方法:電化學(xué)發(fā)光法;檢測儀器:Roche Elecsys 2010全自動電化學(xué)發(fā)光儀;檢測試劑:Roche公司購買。按照下列標(biāo)準(zhǔn)判斷檢查結(jié)果為陽性:CA153>25U/mL、CEA>5ng/mL、CA125>35U/mL、CA199>35U/mL。靈敏度=真陽性人數(shù)/(真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù))×100%,特異度=真陰性人數(shù)/(真陰性人數(shù)+假陽性人數(shù))×100%。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件對觀察所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計和分析,計量資料采用完全隨機(jī)設(shè)計的方差分析;相關(guān)性分析采用以TNM分期情況為應(yīng)變量的單因素回歸分析,檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn):P
2 結(jié)果
2.1 三組待檢者血清學(xué)指標(biāo)
觀察組患者CEA、CA125、CA153、CA199水平明顯高于良性對照組和健康對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P
2.2 乳腺癌患者TNM分期與血清學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性
以TNM分期情況為應(yīng)變量進(jìn)行單因素回歸分析可知:CEA、CA125、CA153、CA199水平與TNM分期呈正相關(guān)關(guān)系,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P
3 討論
乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤,具有發(fā)病率高、死亡率高的特點(diǎn),會對患者的生活質(zhì)量和生命安全造成極大影響。乳腺癌的臨床特點(diǎn)為發(fā)病率增加快、死亡率居高不下,是臨床診療工作中的難點(diǎn)和重點(diǎn)[1]。近年來,隨著我國醫(yī)療衛(wèi)生水平的不斷進(jìn)步和國民整體健康意識的逐步增強(qiáng),乳腺癌也受到了越來越多的關(guān)注,相應(yīng)的篩查手段也在各級醫(yī)院得到了普及和推廣。但是,常規(guī)的篩查手段B超和鉬靶檢查僅能夠檢出直徑超過5mm的腫瘤,對于早期較小乳腺病灶并不敏感。因此,常規(guī)的篩查手段對于乳腺癌早期發(fā)現(xiàn)和診斷的價值并不理想[2]。
惡性腫瘤最大的生物學(xué)特征是局部浸潤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,在起浸潤和轉(zhuǎn)移的過程中可生成并分泌大量的蛋白類、糖類等腫瘤標(biāo)志物,這也是近年來乳腺癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題[3]。腫瘤標(biāo)志物既包括由癌細(xì)胞合成和分泌進(jìn)入血液循環(huán)的物質(zhì),也包括由宿主對腫瘤細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)[4]。目前的研究表明,癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖類抗原(carbohydrate antigen,CA)在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用,且與腫瘤分期具有密切關(guān)系[5]。這就提示癌胚抗原、糖類抗原兩類血清學(xué)指標(biāo)有助于乳腺癌的早期診斷。
為了驗(yàn)證這一假設(shè),我在上述研究中分析了血清學(xué)指標(biāo)聯(lián)合檢測在乳腺癌早期診斷中的價值。通過比較乳腺癌患者、乳腺良性疾病患者以及健康者血清中CEA、CA125、CA153、CA199含量可知,觀察組中上述四種血清學(xué)指標(biāo)均高于良性對照組和健康對照組,這就說明CEA、CA125、CA153、CA199的含量在乳腺癌患者中的確存在異常。進(jìn)一步通過單因素回歸分析的方法比較腫瘤分期與腫瘤標(biāo)志物的相關(guān)性可知,CEA、CA125、CA153、CA199水平與TNM分期呈正相關(guān)關(guān)系。這就進(jìn)一步明確了上述腫瘤標(biāo)志物與乳腺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
CEA和CA199均最早在結(jié)腸癌患者血清中發(fā)現(xiàn),多用于消化道或乳腺腫瘤的診斷,但是部分吸煙者、急性心血管疾病患者、非特異性結(jié)腸炎患者血清中CEA的含量也會發(fā)生升高;CA125最初被作為診斷卵巢癌的特異性標(biāo)志物,但近年來的研究同樣發(fā)現(xiàn)其含量升高還可見于胰腺癌、肺癌等患者[6]。上述三項(xiàng)指標(biāo)用于診斷乳腺癌時特異性不佳。CA153則是乳腺細(xì)胞上皮表面糖蛋白的變異體,針對乳腺癌的診斷具有較好的特異性,但是在疾病早期時升高并不明顯,難以檢出,因此敏感性不理想[7]。通過分析四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測時的診斷價值可知:CEA、CA125、CA153、CA199四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢查的靈敏度、特異度均高于四項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測。
通過以上分析和討論可以得出如下結(jié)論:CEA、CA125、CA153和CA199含量與腫瘤的TNM分期相關(guān),聯(lián)合檢查能提高診斷的靈敏度和特異度,在乳腺癌的早期診斷中具有積極的臨床價值。
[參考文獻(xiàn)]
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篇6
關(guān)鍵詞 β-HCG β-HCG檢測試紙(膠體金法) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) β-HCG(化學(xué)發(fā)光法)
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.02.273
Abstract Objective:ββ-HCG test strip(colloidal gold) and β-HCG chemiluminescence detection methods to compare the sensitivity and specificity.Methods: β-HCG(AFP)test strip(colloidal gold method)with β-HCG chemiluminescence method for the simultaneous pregnancy of 100 women and serum samples β-HCG mole detection.Results:β-HCG test strip(colloidal gold method)detected 37 cases of positive samples,β-HCG chemiluminescence detection method is also detected positive in 38 cases,sensitivity of 94.29%;ELISA detected positive in 20 cases,sensitivity 57.14%.β-HCG test strip colloidal gold method detected 37 cases were positive in 1 case confirmed as negative,the specificity was 99.9%;ELISA detected 22 positive cases,2 cases confirmed as negative,a specificity of 99.32% two methods in 38 cases with positive specimens were positive by confirmed there 1 case was confirmed as positive samples for the β-HCG chemiluminescence detection and β-HCG test strip(colloidal gold method)method failed inspection,Conclusion:β-HCG chemiluminescence method sensitivity is far greater than β-HCG test strip(colloidal gold method)method,while the specificity is not very different,β-HCG test strip(colloidal gold)is more suitable for blood β-HCG screening.
Key Words β-HCG;Enzyme-linked;Immunosorbent assay
資料與方法
2009年1月~2011年3月對100份早孕婦女和葡萄胎患者血清標(biāo)本進(jìn)行β-HCG檢測。
試劑:ELISA試劑盒,膠體金試紙,發(fā)光試劑盒,質(zhì)控血清由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。
方法:嚴(yán)格按照試劑盒內(nèi)說明書操作。50例篩查患者的血清標(biāo)本同時酶聯(lián)采用法和β-HCG檢測試紙,膠體金法法進(jìn)行檢測,對其中一種或兩種試劑檢測陽性的標(biāo)本采用β-HCG化學(xué)發(fā)光法。
結(jié) 果
敏感性與特異性,見表1。
討 論
一般正常人β-HCG放免測定值<3.1,如果>5就可以考慮受孕可能,如果>10基本可以確定懷孕。宮外孕的早期診斷主要是檢測血HCG(絨毛膜促性腺激素)。因HCG是妊娠時所分泌的特異性激素,所以β-HCG可用于協(xié)助宮外孕早期未破裂的診斷。正常發(fā)育的絨毛所分泌的HCG量很大,每天的滴度不斷的快速上升,每48小上升66%以上。即如果β-HCG每2天增加的量>66%,可以診斷為宮內(nèi)妊娠;而如果增加的量<66%,則宮外孕或?qū)m內(nèi)孕發(fā)育不良的可能性很大。對于宮外孕,由于輸卵管肌層菲薄,血供不良,HCG分泌量很低。每天升值較少。48小時上升
機(jī)體β-HCG含量正常情況下應(yīng)該<4mIU/ml,酶聯(lián)免疫法檢測最低下線6mIU/ml,化學(xué)發(fā)光法法可以檢測到0.5mIU/ml,膠體金法可以檢測到5mIU/ml根據(jù)臨床上的經(jīng)驗(yàn)β-HCG增高幅度,早孕婦女和葡萄胎患者都會增高,但增高的幅度不同,持續(xù)增長時間不同,葡萄胎患者可以從幾十~幾萬mIU/ml,但可以隨病情的好轉(zhuǎn)β-HCG可以從術(shù)后1個月下降到1000~2000mIU/ml并很快恢復(fù)正常,而葡萄胎患者患者從發(fā)現(xiàn)β-HCG增高并不及時治療,可以從幾十到上千并且迅速發(fā)展,很快從發(fā)現(xiàn)到2個月內(nèi)就可以上萬,并且隨時間延長β-HCG持續(xù)增高并不降低直到死亡,為了早發(fā)現(xiàn)性葡萄胎患者,如早期對葡萄胎患者進(jìn)行手術(shù)治療其預(yù)后一般都很好,為了早期發(fā)現(xiàn)葡萄胎患者所以應(yīng)每年對建康人群進(jìn)行β-HCG檢查,而酶聯(lián)法費(fèi)時且敏感度較差,化學(xué)發(fā)光法法敏感度高但成本高并需專用設(shè)備度,化學(xué)發(fā)光法法和膠體金法的敏感無顯著性差異,而膠體金法具備操作簡便價格便宜的優(yōu)點(diǎn)完全可以用著β-HCG的篩查。
篇7
【關(guān)鍵詞】 血型血清學(xué) 抗體特異性鑒定 自身免疫性溶血性貧血
自身免疫性溶血性貧血(autoimune hemolytic anemi, AIHA)為自身抗體引起紅細(xì)胞破壞的一種溶血性貧血。AIHA患者在多次輸血免疫刺激后, 可產(chǎn)生同種免疫性抗體, 此類抗體由于患者體內(nèi)同時存在的自身抗體的掩蓋作用而不易被發(fā)現(xiàn)。研究AIHA患者自身抗體的類型及其血型同種抗體的特異性, 對確保輸血安全有重要的臨床意義。我們采用抗人球蛋白試驗(yàn)和吸收放散試驗(yàn), 對54例AIHA患者自身抗體的類型及同種抗體的特異性進(jìn)行了鑒定, 選擇不含相應(yīng)抗原及交叉配血試驗(yàn)相合的血液進(jìn)行輸注, 避免了溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。
1 材料和方法
1.1 材料 抗A、 抗B、 抗D、 抗C、 抗c、 抗E、 抗e、 廣譜抗人球蛋白血清、 抗人IgG血清、 抗人C3血清、 抗體篩選細(xì)胞(Ⅰ、 Ⅱ、 Ⅲ號)及抗體特異性鑒定譜細(xì)胞(1~10號)均購自上海市血液中心; 凝聚胺試劑盒購自臺灣貝索公司; 微柱凝膠卡及其配套設(shè)備購自瑞士達(dá)亞美公司; 磷酸氯奎、 乙醚(分析純)系西安化學(xué)試劑廠生產(chǎn); ABO血型反定型試劑紅細(xì)胞系3名獻(xiàn)血員的血液洗滌后混合而成, 由第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院輸血科制備。在第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院就診的AIHA患者54例(男20例, 女34例, 年齡10~58歲), 均經(jīng)抗人球蛋白試驗(yàn)及結(jié)合臨床表現(xiàn)確診。
1.2 方法
1.2.1 抗人球蛋白試驗(yàn) 抽取患者靜脈血6 mL(ACD保存液抗凝), 2 000 r/min離心10 min, 分離血清與紅細(xì)胞, 紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次, 配成30 mL/L的紅細(xì)胞懸液備用。(1)直接抗人球蛋白試驗(yàn)(Direct antiglobulin test, DAT): 取30 mL/L的紅細(xì)胞懸液1滴加入試管中, 再加入抗人球蛋白血清1滴, 搖勻3 000 r/min離心15 s觀察結(jié)果, 若為陽性, 再用抗IgG和抗C3抗體進(jìn)行分型; (2)間接抗人球蛋白試驗(yàn)(Indirect antiglobulin test, IAT): 取患者血清(或血漿)2滴加入試管中, 再加入30 mL/L O型RhD陽性紅細(xì)胞懸液1滴, 搖勻放37℃水浴30 min, 用生理鹽水洗滌3次, 加入抗人球蛋白血清1滴, 3 000 r/min離心15 s觀察結(jié)果, 陰、 陽性對照參照文獻(xiàn)[1]。
1.2.2 同種抗體檢測 (1)氯奎放散試驗(yàn): 將AIHA患者DAT為陽性的紅細(xì)胞, 用生理鹽水洗滌3次, 取壓積紅細(xì)胞0.2 mL, 加入200 mL/L氯奎生理鹽水溶液0.8 mL, 在37℃水浴震搖5 min, 再用生理鹽水洗滌3次, 取1滴配成50 mL/L 的懸液作DAT, 乙醚放散試驗(yàn)參照文獻(xiàn)[2]。(2)自身溫抗體吸收試驗(yàn): 將IAT陽性患者的紅細(xì)胞用37℃生理鹽水洗滌3次, 取1 mL壓積紅細(xì)胞, 加10 mL/L菠蘿酶1 mL, 混勻1 000 r/min離心洗滌3次, 將壓積紅細(xì)胞分成2等份, 1份壓積紅細(xì)胞加2 mL患者血清, 混合放37℃水浴30 min, 1 000 r/min 離心2 min, 將血清移到第2份壓積紅細(xì)胞中, 混勻放37℃水浴30 min, 1 000 r/min離心2 min, 吸出自身紅細(xì)胞吸收后的血清, 用IAT進(jìn)行同種抗體的檢測與特異性鑒定。
1.2.3 ABO、 RhD血型鑒定與交叉配血試驗(yàn) 對血型鑒定困難及交叉配血試驗(yàn)不合的患者血液標(biāo)本, 采用經(jīng)吸收放散后的血清及紅細(xì)胞進(jìn)行血型鑒定與交叉配血試驗(yàn)。ABO血型鑒定采用鹽水法進(jìn)行正反定型; 疑難ABO、 Rh血型鑒定及交叉配血試驗(yàn)采用微柱凝膠法(microtubes gel technology, MGT)及手工凝聚胺法(manual polybrene test, MPT)進(jìn)行檢測[3]。
2 結(jié)果
2.1 抗人球蛋白試驗(yàn) 54例AIHA患者的DAT和IAT均顯示陽性反應(yīng), 凝集強(qiáng)度DAT ~, IAT ~。將患者紅細(xì)胞檢測結(jié)果(即DAT陽性)分為3組: (1)廣譜抗人球蛋白組; (2)抗IgG組; (3)抗C3組。(1)、 (2)組抗人球蛋白試驗(yàn)陽性為IgG型; (1)、 (3)組陽性為C3型; (1)、 (2)、 (3)組均陽性為IgG+C3型(表1)。
2.2 ABO、 RhD血型鑒定及交叉配血試驗(yàn) 患者原血清及未洗滌紅細(xì)胞, ABO血型鑒定正反定型不符、 交叉配血試驗(yàn)不合及抗體篩選陽性者54例, RhD定型均為陽性, Rh血型其他抗原誤定者10例; 吸收后的血清及洗滌后的紅細(xì)胞, ABO血型正反定型相符、 交叉配血試驗(yàn)相合及抗體篩查陰性者50例。同時將AIHA患者原血清及自身紅細(xì)胞吸收后的血清進(jìn)行自身抗體和同種抗體的檢測, 結(jié)果所有原血清與抗體篩查細(xì)胞在鹽水法、 IAT、 MPT及MGT法中均發(fā)生凝集反應(yīng); 而經(jīng)患者自身紅細(xì)胞吸收后的血清有50例與抗體篩查細(xì)胞不再發(fā)生凝集反應(yīng), 有4例患者血清仍與抗體篩查細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)(表2)。
表1 54例AIHA患者抗體類型的分布(略)
表2 54例AIHA患者血清吸收前后與抗體篩查細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果(略)
*受檢血清與譜細(xì)胞均呈非特異性凝集反應(yīng).
2.3 同種抗體的特異性鑒定 采用譜細(xì)胞對仍與抗體篩查細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)的患者血清, 分別在4℃、 22℃及37℃用鹽水法、 抗人球蛋白試驗(yàn)、 MPT及MGT法進(jìn)行抗體特異性的鑒定。結(jié)果檢出抗C抗體1例(與CCDee細(xì)胞凝集, 與ccDEE細(xì)胞不凝集), 抗E抗體2例(與ccDEE細(xì)胞凝集, 與Ccdee細(xì)胞不凝集), 抗e抗體1例(與ccEee及ccdee細(xì)胞凝集, 與CcDEE細(xì)胞不凝集), 從而證實(shí)了患者血清中存在具有Rh血型特異性的同種抗體。根據(jù)患者Rh血型及自身抗體的血型特異性, 選擇相容或交叉配血試驗(yàn)相合的洗滌紅細(xì)胞懸液輸注后, 檢測結(jié)果顯示患者血紅蛋白上升, 未發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)。
3 討論
本研究在對75例疑似AIHA患者的檢測中, 發(fā)現(xiàn)抗人球蛋白試驗(yàn)陽性者54例, 女性的陽性率(62.96%)高于男性(37.04%)??贵w類型以IgG+C3型最多(62.96%), 其次為IgG型(20.37%)及C3型(16.67%)。IgG+C3型的臨床癥狀、 溶血及貧血程度均較嚴(yán)重, 發(fā)生溶血危象者較多, 而IgG型、 C3型者貧血及臨床癥狀較輕。AIHA患者因體內(nèi)免疫系統(tǒng)功能的紊亂, 除產(chǎn)生自身抗體而引起溶血性貧血以外, 還可對輸入血型不相合的紅細(xì)胞產(chǎn)生同種免疫性抗體, 本組檢出具有Rh特異性的同種抗體4例。因此, 對AIHA患者尤其是有妊娠史和輸血史的患者, 在輸血前進(jìn)行同種抗體的檢測具有非常重要的臨床意義。由于AIHA患者存在自身抗體的干擾, 難以檢測或排除血清中同種抗體的存在。目前檢測同種抗體的最好方法, 是應(yīng)用酶處理細(xì)胞或用患者自身紅細(xì)胞對自身血清作抗體吸收, 排除自身抗體的干擾, 然后再用譜細(xì)胞對吸收后的血清進(jìn)行抗體檢測, 90%以上的AIHA病例可檢出同種抗體[2]。
AIHA患者因血清中存在自身抗體, 而且部分患者還同時存在同種抗體, 因自身抗體能凝集患者及他人紅細(xì)胞而導(dǎo)致ABO血型尤其是Rh血型鑒定困難[4], 同時又能干擾對同種抗體的檢測, 要為這些患者找到完全相配合的血液是相當(dāng)困難的, 極易造成誤輸異型血而發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)。因此AIHA患者能不輸血者盡可能不輸血, 采用激素與免疫抑制劑治療, 大多數(shù)患者可獲得良好的效果。對出現(xiàn)溶血危象而必須輸血的患者, 如果無輸血史或生育史, 選擇輸入交叉配血試驗(yàn)?zāi)瘡?qiáng)度最弱的供血者的洗滌紅細(xì)胞懸液, 或根據(jù)自身抗體顯示出的Rh等相關(guān)特異性, 輸注缺乏相應(yīng)抗原的血液是較為安全的。但AIHA患者如果有輸血史或生育史, 則應(yīng)在輸血前進(jìn)行同種抗體的檢測并鑒定其特異性, 如發(fā)現(xiàn)有臨床意義的同種抗體則必須選擇與同種抗體相容的洗滌紅細(xì)胞懸液進(jìn)行輸注, 才能確保輸血治療的安全和有效。
參考文獻(xiàn)
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[2] 肖星甫. 輸血技術(shù)手冊[M]. 成都: 四川省科學(xué)技術(shù)出版社, 1992: 89-98.
篇8
目的 通過對3 470例呼吸道感染患兒血清肺炎支原體(MP)特異性抗體IgM的檢測,協(xié)助臨床早期診斷MP感染。方法 運(yùn)用微粒凝集試驗(yàn),進(jìn)行血清MP特異性抗體IgM檢測。結(jié)果 3 470例患兒中檢測出1 054例MP-IgM呈陽性,檢出率為30.37%,其中男622例,女432例,0~2歲組、3~6歲組和6~14歲組MP-IgM陽性檢出率分別為19.60%、43.16%和50.79%;男女陽性檢出率之間和各年齡組陽性檢出率之間,差異均有高度顯著性(P
【關(guān)鍵詞】 支原體 肺炎 凝集試驗(yàn) 免疫球蛋白M
肺炎支原體(myeoplasma pneumoniae,MP)是兒童急性呼吸道感染的主要病原體之一,臨床上大多數(shù)表現(xiàn)為呼吸道感染綜合征,僅根據(jù)臨床表現(xiàn)常難與病毒、細(xì)菌和結(jié)核感染鑒別,給臨床治療帶來一定的困難。我們對2007年1月~11月3 470例門診和住院患兒采用明膠微粒凝集試驗(yàn)檢出肺炎支原體抗體-IgM(MP-IgM),進(jìn)一步提高M(jìn)P感染診斷的準(zhǔn)確性,現(xiàn)報道如下。
1 對象與方法
1.1 對象
收集2007年1月~11月我院門診和住院患兒共3 470例,其中男2 280例,女1 190例。年齡0~14歲,其中0~2歲1 985例,2~6歲1 170例,6~14歲315例。
1.2 方法
取患兒靜脈血2 ml,取血清作為待檢樣本,采用明膠微粒凝集試驗(yàn)檢測MP-IgM,Serodia MycoⅡ(MycoⅡ)診斷試劑盒由日本瑞比歐株式會社生產(chǎn)。操作過程嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行,血清稀釋度≥1∶40為陽性。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
各年齡組間病例的陽性率比較運(yùn)用SPSS 10.0軟件包行χ2檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
2.1 不同年齡患兒MP-IgM陽性率比較
1 054例MP-IgM陽性患兒中,6~14歲陽性率高于2~6歲組和0~2歲組,見表1。表1 各年齡組MP-IgM檢測結(jié)果(略)注:與6~14歲組比較,a:χ2=145.60,P
2.2 不同性別間MP-IgM陽性檢出率對比
女性患兒MP-IgM陽性率高于男性,見表2。表2 不同性別之間MP-IgM檢測結(jié)果(略)注:與女性比較,a:χ2=30.09,P
3 討論
由于MP感染的臨床表現(xiàn)常無特異性,尤其是肺外并發(fā)癥使病情復(fù)雜化,且一般在給予青霉素或頭孢類抗生素治療一定時間效果不佳時,才考慮是否為MP感染,易導(dǎo)致誤診誤治[1],因此MP的早期診斷具有重要意義。目前,MP感染的實(shí)驗(yàn)室診斷方法較多,主要包括MP培養(yǎng)法、PCR法和MP-Ab的檢測。MP快速培養(yǎng)法利用MP生長代謝產(chǎn)物使培養(yǎng)基液體中指示劑顏色發(fā)生改變來判斷MP生長,但假陽性較高,細(xì)菌和真菌的培養(yǎng)陽性率已達(dá)到了7.9%,其中真菌所占比例最大(主要為念珠菌),已達(dá)到71.1%[2];而分離培養(yǎng)時間長且檢出率低,達(dá)不到早期診斷的目的。目前,定量PCR檢測MP-DNA因其高敏感性和特異性被認(rèn)為是診斷MP感染的金標(biāo)準(zhǔn)[3],可以達(dá)到早期診斷的目的;但需要特殊儀器設(shè)備,且價格較高而不適宜臨床推廣。MP-Ab主要是檢測MP-IgM,因抗MP-IgM是機(jī)體受MP感染時最早出現(xiàn)的抗體,于發(fā)病1周左右即可檢出,10~30天后達(dá)高峰,12~16周轉(zhuǎn)陰[4]。這對于1周的病程易造成漏診,故若檢測出現(xiàn)陰性,而臨床高度懷疑MP感染者,應(yīng)動態(tài)檢查,以免延誤診治。另有報道[5]認(rèn)為測定MP-IgA抗體可能更有價值,兩者同時測定,可提高M(jìn)P感染的早期診斷,但目前尚未普及。
MP主要通過含有支原體的呼吸道飛沫或長時間密切接觸傳播,感染周期大約為4年,潛伏期2~3周,其感染可發(fā)生于任何年齡,但以青少年為易感人群。從本組結(jié)果可以看出,3~14歲組MP陽性檢出率(44.78%)明顯高于0~2歲組(χ2=254.76,P
參考文獻(xiàn)
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篇9
【關(guān)鍵詞】 受血者;輸血前血清檢測
輸血在臨床搶救和治療中發(fā)揮了重要作用,但隨著由輸血后傳染病引起的醫(yī)患糾紛也逐年增加[1]。《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定受血者輸血前常規(guī)檢測血清學(xué)九項(xiàng)指標(biāo)。筆者對住院患者輸血前血清學(xué)九項(xiàng)指標(biāo)的檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析,現(xiàn)報告如下:
1資料與方法
1.1一般資料
本院2008年11月~2010年11月在我院輸血科接受配血試驗(yàn)并在臨床進(jìn)行輸血者的輸血前血清標(biāo)本2656份,男1620例,女1036例,年齡2個月~89歲,平均(40.5±30.6)歲。
1.2檢測項(xiàng)目及方法
采集輸血前患者的血液標(biāo)本,分離血清,做輸血前項(xiàng)目檢測。ALT采用IFCC推薦方法(試劑由四川新成公司生產(chǎn));乙肝5項(xiàng)采用ELISA法(試劑由上??迫A公司生產(chǎn));抗-HCV(試劑由上海科華公司生產(chǎn));梅毒采用TURST法(試劑由上??迫A公司生產(chǎn));抗-HIV采用ELISA法(試劑由北京金豪公司生產(chǎn))。所用試劑均經(jīng)過衛(wèi)生部生檢所批批檢定合格,并在有效期內(nèi)使用。
2結(jié)果
2656例患者輸血前血清檢測結(jié)果顯示,總異常率為29%(771/2 656)。其中,ALT升高(以>40U/L判為異常)258例(9.7%);HBsAg陽性206例(7.8%),HBsAg和HBeAg雙陽性49例(1.8%),HBsAg和HBeAg及抗-HBc陽性25例(0.94%),HBeAg和抗-HBc及抗-HBs陽性21例(0.79%),抗-HBc陽性29例(1.1%),抗-HBc和抗-HBe陽性18例(0.67%),抗-HCV陽性103例(3.9%);抗-HIV初篩試驗(yàn)陽性3例(0.11%),報疾病預(yù)防中心確證實(shí)驗(yàn)室確證陽性3例;梅毒陽性6例(0.22%);HBsAg陽性和抗-HCV陽性2例(0.075%);HBsAg陽性和ALT升高35例(1.3%);抗-HCV陽性和ALT升高16例(0.6%)。
3討論
3.1本次檢測結(jié)果表明,受血者輸血前血清學(xué)九項(xiàng)指標(biāo)的總異常率相當(dāng)高。盡管輸血在臨床治療中是不可替代的方法,但輸血引起的血源性傳播疾病也時有發(fā)生,并由此引起醫(yī)療糾紛[2]。因此,一旦受血患者因輸血引起醫(yī)療糾紛,輸血前的檢測結(jié)果就顯得十分重要,這不僅對患者負(fù)責(zé),而且為患者的輸血安全起到監(jiān)控作用。另一方面,輸血并非是HBV、HIV、TP、HCV傳播的唯一途徑,能否明確是否為血源性感染顯得日趨重要,由此體現(xiàn)了受血者在輸血前做血清學(xué)檢測的重大意義。
3.2輸血前血液結(jié)果指標(biāo)檢測已被列入我國制定的《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》中,可使醫(yī)院掌握并保留患者有關(guān)資料作為依據(jù),以備以后信息反饋和臨床需要。通過輸血前檢測不但能幫助患者及早發(fā)現(xiàn)疾病,及時治療,又可提示醫(yī)務(wù)人員在診療過程中嚴(yán)格消毒措施[3]。醫(yī)務(wù)人員可針對血清病毒標(biāo)志物陽性患者加強(qiáng)防護(hù)和消毒處理工作,特別是實(shí)施穿刺、注射、手術(shù)等治療和護(hù)理過程中,應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,減少和避免醫(yī)療損傷,對血液污染的醫(yī)療器械及其他物品嚴(yán)格消毒,以防交叉感染。工作過程中要細(xì)心謹(jǐn)慎,思想高度集中,養(yǎng)成有秩序的良好工作習(xí)慣,防止差錯發(fā)生。要逐項(xiàng)核對輸血申請單、受血者及供血者的血樣,交叉配血前應(yīng)復(fù)檢受血者、供血者的ABO血型(正反定型),并常規(guī)檢查患者的Rh(D)血型。正、反定型可發(fā)現(xiàn)亞型或血型抗原減弱,對可疑血型還必須進(jìn)一步做其他血清學(xué)檢查。
綜上所述,筆者認(rèn)為,血型鑒定及交叉配血是輸血科最關(guān)鍵的工作,進(jìn)行血清學(xué)檢測,對患者而言,有利于疾病的早期發(fā)現(xiàn),并得到及時治療;對醫(yī)務(wù)人員而言,發(fā)現(xiàn)潛在的傳染源,有助于在診療和護(hù)理時加強(qiáng)自我保護(hù),避免感染;同時,也有利于明確醫(yī)療責(zé)任,避免因輸血而引起的醫(yī)療糾紛。對患者、醫(yī)院和供血單位都有重要意義。
參考文獻(xiàn)
[1]馬洪亮,趙俊杰,徐志新等.1008名受血患者輸血前血液5項(xiàng)標(biāo)志檢測的調(diào)查.中國輸血雜志,2006,13(3):204.
篇10
【關(guān)鍵詞】前白蛋白;腹部腫瘤;血清學(xué)診斷
血清前清蛋白(PA)由肝細(xì)胞合成,因在電泳分離(pH=8.6)中移動速度比清蛋白快而得名。其半壽期很短,僅約12h,測定其在血漿中的濃度對于了解蛋白質(zhì)的營養(yǎng)不良和肝功能不全具有較高的敏感性[1]。有研究顯示,PA的檢測對于某些癌癥診斷也有極其重要的價值[2]。為探討PA測定在腹部惡性腫瘤中的臨床應(yīng)用價值,本研究選取59例腹部惡性腫瘤患者和30例腹部良性腫瘤患者作為研究對象進(jìn)行PA測定,并與60例健康體檢者進(jìn)行比較?,F(xiàn)報道如下。
1資料與方法
1.1一般資料選取2014年10月至2015年10月在本院住院治療的腹部惡性腫瘤患者59例為腹部惡性腫瘤組,所有患者均經(jīng)臨床病史、體征、CT、B超、組織病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)等綜合診斷確診,其中男31例,年齡41~69歲;女28例,年齡41~69歲;膽囊癌5例、直腸癌5例、結(jié)腸癌7例、胃癌21例、胰腺癌11例、肝癌10例。腹部良性腫瘤組(30例)均為住院患者,其中男14例,女16例,年齡41~59歲,子宮肌瘤14例、結(jié)腸腺瘤7例、直腸腺瘤9例。健康對照組(60例)均為本院體檢中心提供的健康體檢結(jié)論正常者,其中男31例,女29例,年齡38~66歲。三組受試者一般資料比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。1.2試劑與方法采集受試者清晨空腹靜脈血3mL,置于速凝真空管,3500r/min離心3min,分離血清,并且要確保所采集的標(biāo)本無脂血和溶血現(xiàn)象。PA測定方法為免疫透射比濁法,測試儀器為日立7600全自動生化分析儀,試劑盒由德賽公司提供。操作時嚴(yán)格按照試劑說明書要求設(shè)定參數(shù),隨機(jī)與質(zhì)控血清同批檢測,并詳細(xì)記錄檢測結(jié)果。1.3統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計量資料以x±s表示,采用t檢驗(yàn),計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1三組受試者PA含量比較腹部惡性腫瘤組PA含量[(156.1±44.7)mg/L]與健康對照組[(320.4±52.6)mg/L]比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),腹部良性腫瘤組PA含量[(301.2±50.5)mg/L]與健康對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。2.2腹部惡性腫瘤組不同病種PA含量與健康對照組比較腹部惡性腫瘤各組的PA含量與健康對照組比較均有不同程度的下降,其中肝癌組PA含量與其他腹部惡性腫瘤各組比較含量降低,與健康對照組比較降低明顯,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。
3討論
PA是一種富含色氨酸、相對分子質(zhì)量為55×103的蛋白質(zhì),由肝細(xì)胞合成,其血清濃度可反映肝臟合成和分解蛋白的功能,其除了作為組織修補(bǔ)的材料外,還可作為一種運(yùn)載蛋白,可結(jié)合T3和T4,而對T3的親和力更大[3]。PA與維生素結(jié)合蛋白形成復(fù)合物,具有運(yùn)載維生素A的作用,并具有胸腺激素活性,可通過促進(jìn)淋巴細(xì)胞的成熟來增加機(jī)體的免疫力。PA是一種負(fù)急性時相反應(yīng)蛋白,也是非特異宿主防御物質(zhì),在惡性疾病和炎癥時水平下降[4]。有研究報道,PA可及時清除機(jī)體感染過程中釋放于血液循環(huán)中的有毒代謝產(chǎn)物,同時消耗自身[5],所以當(dāng)營養(yǎng)嚴(yán)重不足、蛋白質(zhì)消耗過多和丟失過多時,血清PA水平即迅速下降,而當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)能量攝取增加時,3d可明顯回升[6]。本研究結(jié)果顯示,腹部惡性腫瘤組PA含量明顯低于健康對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而健康對照組與良性腫瘤組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。在腹部惡性腫瘤患者中,不同病種PA含量與健康對照組比較都有不同程度的下降,其中以肝癌患者血清中PA水平降低最明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。由此可見,血清PA的測定對腹部良、惡性腫瘤的鑒別診斷有一定的臨床價值,且由于肝癌患者PA水平下降明顯,所以可作為肝癌區(qū)別于其他腹部惡性腫瘤的血清學(xué)標(biāo)志物[7-8]。隨著科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展,人們的生活水平不斷提高,但是人類賴以生存的環(huán)境卻越來越惡劣,加之食品安全、空氣質(zhì)量、生活習(xí)慣等問題的出現(xiàn)也導(dǎo)致一些慢性消耗性疾病的滋長[9]。這些患者的血清PA水平往往下降明顯,主要有以下幾點(diǎn)原因:(1)由于腫瘤病變引起機(jī)體疼痛,影響患者營養(yǎng)攝入,因此,導(dǎo)致合成PA的物質(zhì)嚴(yán)重匱乏,從而使肝細(xì)胞合成PA減少[10];(2)慢性消耗性疾病患者體內(nèi)惡性腫瘤細(xì)胞生長迅速,消耗了機(jī)體內(nèi)大量的營養(yǎng)物質(zhì),最終導(dǎo)致PA含量下降;(3)癌癥患者體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞壞死后,會產(chǎn)生大量的毒性物質(zhì),從而引起機(jī)體代謝發(fā)生紊亂,影響血清PA的合成。因此,如果能早期給予慢性消耗性疾病及營養(yǎng)不良患者營養(yǎng)支持療法,可能會增加PA的合成量,增強(qiáng)機(jī)體的免疫力[11-12],從而延長患者生命,提高其生活質(zhì)量。目前,隨著檢驗(yàn)科技不斷發(fā)展與各類大型檢驗(yàn)儀器的不斷推廣,血清PA檢測技術(shù)已在各級醫(yī)院檢驗(yàn)科普及,并且能為臨床診斷工作提供便利、準(zhǔn)確、快捷的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。臨床醫(yī)生在腹部腫瘤臨床診斷中,可考慮將血清PA測定作為腹部惡性腫瘤的篩選指標(biāo)之一。更值得注意的是,如果將血清PA與甲胎蛋白聯(lián)合檢測,可以更及時、早期地篩查肝癌病例,做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療,從而也可以減輕患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
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