【摘要】概述國內(nèi)有關(guān)生脈制劑的含量測定研究進(jìn)展，為提高和完善生脈制劑的質(zhì)量控制體系提供依據(jù)，同時便于藥學(xué)工作者根據(jù)各種實際情況加以選擇應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】生脈；含量測定；研究進(jìn)展

“生脈散”之方名首載于金元時期張元素所著《醫(yī)學(xué)啟源》(1186年)，定型于《內(nèi)外傷辨惑論》，完善于《醫(yī)方考》［1，2］?！夺t(yī)學(xué)啟源》中記載，該方由人參、麥冬、北五味子組成。主治熱傷元氣、陰液虧耗的氣陰兩虛癥。在現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的推動下，生脈散也研制為一些現(xiàn)代新劑型，其組方也發(fā)生了改變。例如，由紅參替代人參，和麥冬、五味子組成生脈注射液［3］；去掉五味子，僅以人參和麥冬組成的參麥注射液等［4］。各種劑型的涌現(xiàn)對生脈制劑的質(zhì)量有了更高的要求，而生脈飲在藥典中并無含量測定項［3，5］。因此筆者對近年的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行了追蹤、整理和分類，希望有助于生脈制劑的研究與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制，特別是含量測定的提高和完善?，F(xiàn)將生脈制劑的含量測定研究情況綜述如下。

1高效液相色譜法

1.1人參皂苷類李杰等［6］采用HPLC法測定了生脈飲中人參皂苷Rb1、Rb2、Re的含量。方法：采用LC-4A高效液相色譜儀，YWG-C18(5μm，4.6mm×250mm)色譜柱，流動相：甲醇-水(72∶28)，流速0.8ml·min-1，柱溫47℃。

1.2人參二醇和人參三醇李章萬等［7］考慮人參皂苷及其水解產(chǎn)物均無特征紫外吸收，常規(guī)方法在靈敏度或分離度等方面都不盡人意，采用3，5-二硝基苯甲酰氯為衍生化劑，反相HPLC法對生脈注射液中人參二醇和人參三醇含量測定方法進(jìn)行了研究。用3，5-二硝基苯甲酰氯(3，5-DNB)為衍生化劑、高效液相色譜法測定了紅參和生脈注射液中人參二醇及人參三醇的含量。以C18硅烷鍵合相為填料，甲醇-水(95∶5)為流動相，檢測波長230nm，進(jìn)行反相高效液相色譜法測定。

【摘要】目的選擇適宜的對照品，建立能夠準(zhǔn)確測定甘草中總黃酮含量的方法。方法針對甘草苷、柚皮苷、蘆丁3種對照品分別使用紫外分光光度法，通過全波長掃描，比較不同對照品和樣品與顯色前后的最大吸收波長，從而確定適合的對照品。結(jié)果甘草苷對照品和樣品液經(jīng)過堿處理后最大吸收波長分別為334，334.5nm且全波長掃描后得到峰形基本一致，而柚皮苷對照品經(jīng)過相同處理后最大吸收波長在419.5nm，蘆丁對照品和樣品分別經(jīng)過Al2（NO3）3-NaOH-NaNO2顯色后最大吸收波長在510nm和363nm。通過對3種方法的測定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，以甘草苷為對照品的測定結(jié)果分別與另外兩種方法差異顯著。結(jié)論選用甘草苷為對照品應(yīng)用于紫外分光光度法測定甘草總黃酮成分準(zhǔn)確度較高，是切實可行的含量測定方法。

【關(guān)鍵詞】甘草黃酮紫外分光光度法

Abstract:ObjectiveToselecttheappropriatestandardfordeterminationofflavonoidsinGlycyrrhiza.MethodsTocomparethelargestabsorptionwavelengthbywavelengthscanningofultravioletspectrophotometry.ResultsStandardLiquiritinandsamplesprocessedbyalkalihadthelargestabsorptionatthe334nmand334.5nmwavelength,andstandardNaringinatthe419.5nmwavelength.ConclusionTodeterminecontentofflavonoidsinglycyrrhizawithultravioletspectrophotometrybystandardLiquiritinisapracticalmethodwithhigheraccuracy.

Keywords:Glycyrrhiza;Flavonoids;Ultravioletspectrophotometry

甘草中的黃酮類成分包括黃酮類、二氫黃酮類、黃酮醇類、異黃酮類、查爾酮類和雙黃酮類［1］化合物，其中以二氫黃酮類和查爾酮類含量較高［2］。二氫黃酮類包括：甘草苷(liquiritin)、甘草苷元(liquiritigenin)、新甘草苷(neoliquiritin)、甘草素（liquiritigenin）等，查爾酮類包括：異甘草苷(isoliquiritin)、異甘草素（isoliquiritigenin）、異甘草苷元(isoliquiritigenin)、新異甘草苷(neoisoliquiritin)等［3～7］。而其中比例較大的成分以甘草苷為主［8］。

甘草總黃酮的測定常用蘆丁［9～10］、柚皮苷［11～13］為對照品通過紫外分光光度法進(jìn)行測定，而《中國藥典》中甘草項下沒有規(guī)范總黃酮成分含量的測定方法［14］，導(dǎo)致甘草總黃酮成分有多種不同的測定方法。本實驗研究通過對不同測定方法進(jìn)行考察，比較不同對照品和樣品采用相應(yīng)方法顯色后的最大吸收波長，對3種對照品相應(yīng)測定結(jié)果分析，確定最適宜甘草總黃酮含量測定的對照品和測定方法。

1材料與儀器

海帶采自青島沙子口，經(jīng)鑒定為Laminariajaponica；95％乙醇、濃硫酸、六水合氯化鎂、氫氧化鈉、三氟乙酸、鹽酸羥胺等均為國產(chǎn)分析純；5%苯酚（現(xiàn)配）；L－褐藻糖（Sigma公司）；D-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-木糖、D-甘露糖、L-鼠李糖、D-果糖、葡萄糖、蔗糖等均購自于上海試劑二廠；肌醇（無錫默克爾精細(xì)化學(xué)品有限公司）。高壓鍋（山東新華醫(yī)療器械股份有限公司）；FA1004電子天平（上海天平儀器廠）；722型分光光度計（上海菁華科技儀器有限公司）；瑞士BüCHIR－114型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；東京理化EYELAFD－5N型真空冷凍干燥機；電熱恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器有限公司）；TDL－40B離心機（上海飛鴿系列離心機廠）；HP5890Ⅱ氣相色譜儀（美國惠普公司），氫火焰離子化檢測器（FID）。

【摘要】目的探索正確測定海帶多糖含量的方法。方法采用苯酚-硫酸法，按照不同糖溶液配制標(biāo)準(zhǔn)液在485nm處測定多糖含量。結(jié)果按照多糖中褐藻糖與半乳糖比例為標(biāo)準(zhǔn)測得多糖含量為60.42%，介于兩種組成單糖測定結(jié)果之間。結(jié)論按照多糖中單糖組成比例為標(biāo)準(zhǔn)測定多糖含量具有可比性，可用于海帶多糖含量測定。

【關(guān)鍵詞】海帶多糖苯酚硫酸法

Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentofpolysaccharidesinLaminariajaponica.MethodsWeusedthemethodofvitriliccolorimetry,anddetectionwavelengthwas485nm.ResultsThecontentofpolysaccharideswiththemethodwhichwasaccordingtothecomposingsugarswas60.42%.ConclusionThismethodcanbeusedtodeterminethecontentofpolysaccharidesinLaminariajaponica.

Keywords：Laminariajaponica;Polysaccharides;Phenol-vitrioliccolorimetry

［摘要］目的建立反相高效液相色譜法測定婦血康膠囊中原兒茶酸的含量。方法采用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱，流動相為甲醇∶水∶磷酸（13∶87∶0.2）；檢測波長為256nm。結(jié)果原兒茶酸在0.103~0.7725μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系；平均回收率為97.76%，RSD=1.01%。結(jié)論該方法不僅操作簡單、準(zhǔn)確，且重復(fù)性好，可用于婦血康膠囊的質(zhì)量控制。

［關(guān)鍵詞］反相高效液相色譜法；婦血康膠囊；原兒茶酸；含量測定

ContentdeterminationofprotocatechuicacidinFuxuekangJiaonang

YANGYin-zhi，WANGShang-shu.HunanSanjinPharmaceuticalCo.，TDL，Changde415001，China

［Abstract］ObjectiveTostudyaRP-HPLCmethodsthatdeterminedtheprotocatechuicacidcontentinFuxuekangJiaonang.MethodsFuxuekangJiaonangwasseparatedcompletelyonanC18column，usingamixtureofmethanol，phosphateacidandwater（13∶87∶0.2）asmobilephase，withUVdetectionat256nm.ResultsProtocatechuicacidhasbetterlinearcorrelationbetween0.103μgand0.7725μg，theresultsalsohaveshowntherecoveryratewas97.76%，RSD1.01%.ConclusionThemethodsisverystableandaccurate，andhasgoodreappearance.ItcanbeusedforqualitycontrolofFuxuekangJiaonang.

［Keywords］RP-HPLC;protocatechuicacid;FuxuekangJiaonang;contentdetermination

【摘要】目的探討外標(biāo)四點法的可行性。方法HPLC法，色譜柱：ALLTECHC18(4.6mm×250mm，5μm)，流動相：正丙醇-四氫呋喃-水(1：15：85)，流速1.0ml/min，ELSD參數(shù)：漂移管溫度108.0℃；載氣(壓縮空氣)流速3.10L/min。結(jié)果外標(biāo)四點法得出回歸方程，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)方法證明成立，且相關(guān)系數(shù)r顯著。結(jié)論外標(biāo)四點法可以用于銀杏萜類內(nèi)酯的含量測定。

【關(guān)鍵詞】銀杏葉萜類內(nèi)酯；含量測定；HPLC-ELSD；外標(biāo)四點法

StudyonreliabilityofESMoffourpointstodeterminetheassayforGinkgoTerpeneLactones

【Abstract】ObjectiveStudyonthereliabilityofESMoffourpoints.MethodsHPLCsystemconsistingofanAlltechC18column(4.6mm×250mm，5μm)，andthemobilephasewasn-Propylalchol，tetrahydrofuranandwater(1:15:84)atflowrateof1.0ml/min.Thedetectortemperaturewas108.0℃andthedrygasflowratewas3.10L/min.ResultsTheESMoffourpointshasbeenestablished.ConclusionTheESMoffourpointscanbeusedondeterminetheassayforGinkgoTerpeneLactones.

【Keywords】ginkgoterpenelactones；assay；HPLC-ELSD；ESMoffourpoints

有關(guān)銀杏葉中萜類內(nèi)酯的含量測定方法的報道較多，目前銀杏葉制劑的萜類內(nèi)酯含量測定方法采用的多為HPLC法［1～3］。我們亦采用2005版中國藥典收錄的HPLC法［4］，蒸發(fā)光散射檢測器進(jìn)行測定。HPLC-ELSD使用外標(biāo)兩點法對數(shù)方程分別計算白果內(nèi)酯、銀杏葉內(nèi)酯A、銀杏葉內(nèi)酯B和銀杏葉內(nèi)酯C的含量，四種銀杏內(nèi)酯的含量之和為萜類內(nèi)酯含量。我們在實際工作中使用外標(biāo)兩點法時，直接從數(shù)值上難以判斷對照溶液的配制是否準(zhǔn)確，及其外標(biāo)兩點法對應(yīng)的工作曲線(n＝2)是否可靠。因此，同時配制兩份對照溶液各自分別測定5μl、10μl兩點，將四個濃度和相應(yīng)峰面積一條標(biāo)準(zhǔn)曲線（n＝4），得出回歸方程及相關(guān)系數(shù)r，通過統(tǒng)計學(xué)方法考察曲線和回歸方程是否成立［5］。

【摘要】目的研究溪黃草多糖含量及其對羥自由基的清除作用和抑菌作用。方法從溪黃草中提取精制多糖，測定出溪黃草多糖對葡萄糖的換算因子，用蒽酮硫酸法比色測定計算多糖的含量；采用Fenton反應(yīng)體系為模型，研究多糖對羥自由基的抑制作用；采用濾紙片法研究多糖的體外抑菌作用。結(jié)果溪黃草多糖含量為4.18%，重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和回收率較好；活性測試結(jié)果表明溪黃草多糖對羥自由基有較好的清除作用，對金黃色葡萄球菌和枯草桿菌有一定的抑菌效果。結(jié)論溪黃草多糖含量測定方法簡單可行，具有一定清除自由基和抑菌活性。

【關(guān)鍵詞】溪黃草；多糖；含量測定；羥自由基；抑菌作用

Abstract：ObjectiveTostudythecontentofpolysaccharidefromRabdosiaserra(Maxim.)Haraanditseffectonhydroxylfreeradicalandantibacteriostaticeffect.MethodsPolysaccharidewasextractedfromRabdosiaserra(Maxim.)Hara,anditscontentwasmeasuredbywayofanthronesulphuricacid.ItsinhibitoryeffectonhydroxylfreeradicalwasstudiedbyFentonreactionsystemasamodel.Itsantibacteriostaticeffectwasalsostudied.ResultsTheresearchshowedthatpolysaccharidecontentofRabdosiaserra(Maxim.)Harareached4.18%.Ithadinhibitoryeffectonhydroxylfreeradical，staphylococcusaureusandB.subtili.ConclusionThemethodofmeasuringpolysaccharidecontentissimpleandreliable.Thepolysaccharidehassomeactivities.

Keywords：Rabdosiaserra(Maxim.)Hara；Polysaccharide；Contentdetermination;Hydroxylfreeradical；Antibacteriostaticeffect

溪黃草Rabdosiaserra(Maxim.)Hara為唇形科香茶菜屬植物，是一種多年生小草本。具有清熱袪濕、涼血散淤之功效，民間用于治療急性肝炎、急性膽囊炎、跌打淤腫等癥［1］。多糖是一類免疫活性物質(zhì)，具有抗菌、抗病毒、抗寄生蟲、抗腫瘤、抗輻射、抗衰老等作用［2～5］。目前對溪黃草多糖的研究未見報道。本文建立石油醚去脂80%乙醇去雜熱水提取氯仿、正丁醇去蛋白質(zhì)活性炭去色素乙醇沉淀的提取工藝，從溪黃草中提取多糖，測得溪黃草多糖對葡萄糖的換算因子，用蒽酮硫酸比色法測定并計算出溪黃草多糖含量，根據(jù)實驗條件研究了其對羥自由基的清除作用和體外抑菌作用，期望為肇慶山區(qū)中藥材的綜合開發(fā)利用提供一些參考。

1器材

黃芪為常用中藥，素有“補藥之長”之稱，具有益氣固表，利尿托毒等功效.黃芪藥用價值很高，臨床上常用來治療非特異性免疫功能低下、乙肝和心血管系統(tǒng)疾病.黃芪甲苷作為黃芪成分之一，它具有降壓、抗炎、穩(wěn)定紅細(xì)胞膜、提高血漿CAMP含量，促進(jìn)小鼠再生肝DNA合成和增強免疫功能等多種作用.因此在研究黃芪過程中，我們對其成分黃芪甲苷進(jìn)行了含量測定方法研究，本文用HPLC法測定黃芪甲苷的含量，其樣品濃度的范圍在0.01～0.2mg/ml之間與峰面積呈線性，該法靈敏度高，重現(xiàn)性好，可準(zhǔn)確地測定黃芪甲苷的含量。

1儀器與試劑

Waters高效液相色譜儀：包括510型泵，991光電二極管陣列型檢測器，U6K型進(jìn)樣器；NECPowerMate型計算機，黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品購自遼寧省藥品檢驗所。甲醇、正丁醇為分析純，乙腈為色譜純、水為去離子水。試驗用黃芪葉6月份采自沈陽醫(yī)學(xué)院草藥園。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱為NucleosilC18柱(4.6mm×250mm，5μm);流動相為乙腈-水＝1∶2；流速為0.8ml/min；檢測波長為205nm；速度為0.4mm/min。

2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線制作精密稱取黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品2.128mg，加流動相定容至2ml，配制成1.064mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別以10、20、30、40、50μl進(jìn)樣測定，以峰面積對進(jìn)樣量作線性回歸，得回歸方程為Y＝－5.6×10-5＋6.9365×10-4X(Y為峰面積，X為黃芪甲苷量)，r＝0.9994，黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品在10.64～53.20μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

【關(guān)鍵詞】甘草

甘草為豆科植物甘草(glycyrrhizauralensisfisch)、脹果甘草（glycyrrhizainflatabat）或光果甘草(glycyrrhizaglabral)的干燥根及根莖，始載于《本經(jīng)》，藥用歷史悠久。其功能補脾益氣、潤肺止咳、緩急止痛、清熱解毒、緩和藥性。主要含有甘草酸及甘草苷類成分，其中甘草酸為現(xiàn)代藥理應(yīng)用研究證實具有抗纖維化、抗炎、抗病毒和保肝解毒及增強免疫功能等作用［1］。目前針對甘草的內(nèi)在質(zhì)量控制，主要圍繞甘草酸成分進(jìn)行定性、定量一類的檢查。2005版《中國藥典》收載了RP-HPLC三元等度洗脫法測定甘草酸的方法，規(guī)定甘草酸含量不得低于2%［2］。本實驗依托2005版《中國藥典》一部甘草酸含量測定（附錄VID）項下操作主線，采用RP-HPLC法測定甘草酸的含量，方法簡便、快速，重現(xiàn)性好，結(jié)果穩(wěn)定，用于甘草酸的檢測專屬性強，

1儀器與試劑

1.1儀器

Agilend1100系列液相色譜儀、四元泵、在線真空脫氣、DAD檢測器、化學(xué)工作站、1200型自動進(jìn)樣器。

1.2試劑

【摘要】目的:測定冠心病患者與健康對照者血漿中MBL含量,分析其變化情況,從固有免疫的角度探討冠心病的可能致病機制。方法:采集100例冠心病(CHD)患者空腹靜脈血,健康對照者60例,采用ELISA法對血漿中MBL含量進(jìn)行檢測。結(jié)果:100例冠心病人血漿MBL含量的平均值為3900μg/L,標(biāo)準(zhǔn)差為3209;60例健康對照組血漿MBL含量的平均值為2056μg/L,標(biāo)準(zhǔn)差為1824。冠心病組血漿MBL含量高于健康對照組,經(jīng)t檢驗,t=4071,P<001,差別有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:冠心病組血漿MBL水平高于健康對照組,二者均值比較差別有統(tǒng)計學(xué)意義,血漿MBL參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展過程。

【關(guān)鍵詞】冠心病;MBL;ELISA;含量

【ABSTRACT】Objective:ThemainpurposeofthisstudyistomeasuretheMBLlevelinplasmawithcoronaryheartdiseaseandtrytoanalyzethepossiblemechanismofCHDsdevelopmentfromtheviewofinnateimmune.Methods:100bloodsamplesofCHDpatientsand60thatofhealthcontrolswerecollectedandtestedbyELISA.Results:TheplasmalevelofMBLwere3900μg/L,SD3209incases,while2056μg/L,SD1824incontrols.TheplasmalevelofMBLincasesishigherthanthatofcontrols(t=4071,P<001).Conclusion:TheplasmalevelofMBLishigherinCHDpatientsthanthatincontrols.

【KEYWORDS】CHD;MBL;ELISA;Plasmalevel

冠心病(coronaryheartdisease,CHD)是一種嚴(yán)重危害人類健康的疾病,其發(fā)病率和死亡率居首位,尤其在發(fā)達(dá)國家更為嚴(yán)重,而在我國也呈逐年上升趨勢[1]。其病因和發(fā)病機制尚未完全闡明,近年來,冠心病發(fā)病的炎癥學(xué)說越來越得到重視[2],對一些炎性因子和急性期蛋白的研究也越來越深入。甘露聚糖結(jié)合凝集素(mannanbindinglectin,MBL)是一種兼有調(diào)理素和直接激活補體功能的免疫分子,參與構(gòu)成抗感染的第一道防線[3]。國外有些學(xué)者報道MBL與動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展有關(guān)[4~7],但國內(nèi)尚無報道,因此本研究主要測定冠心病患者血漿中MBL含量,并對其變化進(jìn)行分析,從天然免疫的角度探討冠心病的可能致病機制,為其輔助診斷和治療提供資料。

1材料與方法

1器材與方法

1.1材料

正己烷（A.R），天津化學(xué)試劑廠產(chǎn)品；無水乙醇（A.R），天津化學(xué)試劑廠產(chǎn)品；氫氧化鈉（A.R），河北辛集化工廠產(chǎn)品；染料木素對照品（含量約為98%），Sigma公司產(chǎn)品。淡豆豉（SemenSojaePraeparatum）購自石家莊市樂仁堂藥店，經(jīng)河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院藥用植物教研室嚴(yán)玉平副教授鑒定為正品，留樣憑證存放于河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院藥用植物教研室。

1.2儀器

λ-2紫外分光光度儀（美國PE公司）、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）、BS223S電子天平（德國賽多利斯公司）。

1.3樣品溶液制備［6］取符合實驗要求的淡豆豉，粉碎，過10目篩，精密稱取5g。加正己烷40ml超聲振蕩脫脂25min，棄去正己烷，重復(fù)1次。殘渣加入50ml70%乙醇溶液，85℃熱回流提取3次，1h/次，收集提取液。減壓回收溶劑至干，加NaOH（0.01mol/L）溶液溶解，定容為250ml，作為供試品液。精密移取供試品液2ml置100ml量瓶中，加NaOH（0.01mol/L）溶液定容至刻度，搖勻。平行操作3份。