導(dǎo)語：如何才能寫好一篇細(xì)胞免疫治療，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

【關(guān)鍵詞】 自然流產(chǎn);死胎;封閉抗體;淋巴細(xì)胞免疫治療

自然流產(chǎn)的發(fā)生與母體缺乏封閉抗體有關(guān),流產(chǎn)次數(shù)越多的患者,其體內(nèi)封閉抗體缺乏的可能性越大,80%～90%封閉抗體陰性,封閉抗體的產(chǎn)生不足,母體對胎兒產(chǎn)生強(qiáng)烈的排斥現(xiàn)象,發(fā)生于孕早期可出現(xiàn)反復(fù)自然流產(chǎn),孕晚期則可出現(xiàn)妊娠高血壓疾病、胎兒宮內(nèi)生長受限、甚至出現(xiàn)胎死宮內(nèi)。淋巴細(xì)胞免疫治療亦稱淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫,是從丈夫或無血緣關(guān)系的健康第三者血液中提取少量淋巴細(xì)胞,注射給妻子,這種異體血液制品可刺激妻子體內(nèi)產(chǎn)生一種保護(hù)性抗體,保護(hù)胎兒免受母體的免疫攻擊。廣東省茂名市婦幼保健院婦產(chǎn)科自2009年6月至2010年2月共收治封閉抗體陰性,曾有自然流產(chǎn)史或死胎史患者49例,其中19例已妊娠,均給予淋巴細(xì)胞免疫治療,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009年6月至2010年2月在本院就診,月經(jīng)規(guī)則,夫妻雙方染色體核型分析正常,夫妻身體健康,乙肝表面抗原陰性,肝功能正常,沒有血液傳染性疾病,妻子內(nèi)分泌檢查正常,無生殖器畸形,沒有婦科合并癥,無感染,妻子封閉抗體陰性,血液IgG抗體正常,封閉抗體檢測陰性有自然流產(chǎn)或死胎,未懷孕30例,早孕19例;年齡20～41歲,平均28.1歲。

1.2 方法

1.2.1 一般情況了解 詳細(xì)詢問患者過去史,現(xiàn)病史,月經(jīng)生育史,家族史及配偶的一般情況。

1.2.2 常規(guī)檢查 行夫妻雙方染色體婦科,妻子盆腔B型超聲,宮腔鏡檢查,丈夫檢查未見異常。RT、BC,細(xì)菌培養(yǎng)+藥敏,支原體培養(yǎng)+藥敏,衣原體檢查,淋病奈瑟氏菌PCR,性激素六項(xiàng)及甲狀腺功能測定等,排除原因明確流產(chǎn)或死胎。

1.2.3 49例患者均在實(shí)施免疫治療前及27例未妊娠患者治療后1療程或2療程后2周,各行1次封閉抗體檢測,觀察并記錄妊娠情況,新生兒出生時(shí)情況,(如孕周,體質(zhì)量,有無畸形等)

1.2.4 免疫治療 采用無菌法,取丈夫或(若丈夫血液不適宜,無血源關(guān)系,無血液性傳染病的健康第三者)靜脈血20 ml加入肝素鈉抗凝,按1:1取淋巴分離液20 ml,將分離液放于試管下,將血液置于淋巴分離液上方,第一次離心,2000 r/min,離心30 min,離心后離心管由上至下細(xì)胞分四層: 一層:血漿或漿液層;二層為環(huán)狀棉絮樣乳白色細(xì)胞層;三層為透明分離液層;四層為紅細(xì)胞層。用無菌吸管吸出第二層細(xì)胞,置入另一管,加入0.9% 氯化鈉注射液至12 ml,用無菌吸管混勻,第二次離心,1800 r/min,離心20 min,離心后倒掉上清液,加入0.9%氯化鈉注射液12 ml用無菌吸管混勻,第三次離心,1800 r/min,離心10 min,離心后倒掉上清液,加入0.9%氯化鈉注射液12 ml用無菌吸管混勻,第四次離心,1800 r/min,離心10 min,離心后倒掉上清液,加入0.9%氯化鈉注射液2 ml洗滌,分別注入1 ml注射器2個(gè),于妻子兩側(cè)上臂皮下注射,每側(cè)注射三個(gè)點(diǎn),每4周1次,連續(xù)3次,2周后復(fù)查封閉抗體,若封閉抗體仍陰性,再重復(fù)1個(gè)療程(為每4周1次,共3次),陽性后懷孕,妊娠后再同法免疫治療3次。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 所有資料均采用χ2檢驗(yàn)

2 結(jié)果

2.1 免疫治療后封閉抗體陽性情況 30例未懷孕者,26例陽性,3例無復(fù)查;19例妊娠者無復(fù)查,陽性率80%。

2.2 30例未妊娠患者免疫治療后, 8例再次妊娠,現(xiàn)無流產(chǎn)征象,繼續(xù)免疫治療。

2.3 19例妊娠者,免疫治療后,16例妊娠成功,3例自然流產(chǎn),3例已孕足月順產(chǎn),新生兒體質(zhì)量正常,無畸形,13例繼續(xù)妊娠,定期產(chǎn)檢,無早產(chǎn)征象,B超監(jiān)測胎兒無異常,妊娠成功率84.2%,無妊娠并發(fā)癥。

2.4 免疫治療后49例均無不良反應(yīng)。

3 討論

未行免疫治療前,患者由于封閉抗體陰性,使胎兒易受母體細(xì)胞免疫應(yīng)答,發(fā)生母體免疫系統(tǒng)排斥胎兒的反應(yīng),導(dǎo)致流產(chǎn),用丈夫或健康第三者的淋巴細(xì)胞抗原,對妻子進(jìn)行主動(dòng)免疫治療3個(gè)月后,患者封閉抗體陽性率明顯提高,使胎兒不易受母體免疫系統(tǒng)排斥,胎兒形成耐受,因而可在母體環(huán)境中存活下來,使妊娠成功率提高,主動(dòng)免疫治療后無FGR,無低出生體質(zhì)量兒及畸形兒,母親亦無因治療后發(fā)生一些新的免疫系統(tǒng)方面及傳染病方面的疾病,副反應(yīng)小。已有大量臨床資料證實(shí),淋巴細(xì)胞免疫治療可減少流產(chǎn)率及免疫排斥反應(yīng),提高妊娠成功率,此法安全可行。免疫治療技術(shù)安全、痛苦小、療效確切,有效地避免了傳統(tǒng)淋巴免疫治療母親對輸入的紅細(xì)胞或血小板抗原致敏感的危險(xiǎn),減少了并發(fā)癥。成功受孕率可以達(dá)95%以上。自1981年Taytor和Beer等創(chuàng)立了自然流產(chǎn)淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫療法,經(jīng)過20余年的臨床研究表明,免疫治療確能有效阻止封閉抗體缺乏性自然流產(chǎn)。國內(nèi)外不同學(xué)者對原因不明性反復(fù)自然流產(chǎn)患者進(jìn)行淋巴細(xì)胞免疫治療后,妊娠成功率達(dá)72.73%～86.2%,且未發(fā)現(xiàn)對母、兒的副反應(yīng),封閉抗體的陽性率明顯高于治療前,而封閉抗體陽性者再次妊娠的成功率明顯高于陰性者。大量研究證實(shí)淋巴細(xì)胞免疫治療自然流產(chǎn)有效安全,并且封閉抗體對再次妊娠結(jié)局有良好價(jià)值。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 樂杰.自然流產(chǎn),婦產(chǎn)科學(xué).人民衛(wèi)生出版社,2008:83.

[2] 廖丹,李鳳英,譚秋慧.淋巴細(xì)胞免疫治療反復(fù)早期自然流產(chǎn)53例.臨床醫(yī)學(xué)院,2009,29(1):75-76.

[3] 孟慶勇,林萍,王鳴,等.配偶淋巴細(xì)胞免疫治療反復(fù)自然流產(chǎn)91例分析.中國優(yōu)生與遺傳雜志,2005(12).

[4] 徐嵐,張新能,張永鳳,鄭燕鑾 .細(xì)胞免疫功能的變化與原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)的關(guān)系.中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2006(5).

篇2

目前，腫瘤生物治療是繼手術(shù)、化療、放療等傳統(tǒng)手段之后的第四大腫瘤治療模式。傳統(tǒng)治療手段側(cè)重于腫瘤本身的生物學(xué)特性，如采用手術(shù)、放療局部控制腫瘤，通過化療控制復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，但手術(shù)不能解決腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移問題，而放化療是一把“雙刃劍”，在殺傷腫瘤細(xì)胞同時(shí)，對正常細(xì)胞特別是對機(jī)體的免疫、造血功能有嚴(yán)重?fù)p害。近年來，腫瘤的細(xì)胞免疫治療在延長患者生存時(shí)間、改善患者生存質(zhì)量和降低復(fù)發(fā)率方面起著重要作用，已經(jīng)得到越來越多的認(rèn)可和重視。國際最新研制的自體高效CIK細(xì)胞免疫治療技術(shù)，主要是在體外活化和擴(kuò)增患者或供者免疫細(xì)胞回輸機(jī)體后，以期達(dá)到利于殺滅腫瘤的免疫平衡狀態(tài)，通過與手術(shù)、放化療結(jié)合應(yīng)用，具有清除殘留病灶、防止腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移以及增加放化療的耐受性、敏感性和治療效果有重要作用。

1 自體高效CIK殺傷腫瘤的機(jī)理

細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（即Cytokine induced kiiller，CIK）是外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外無菌環(huán)境下，經(jīng)過IFN-y，CD3mAb、IL-2等多種細(xì)胞因子刺激誘導(dǎo)下，經(jīng)過2周左右的培養(yǎng)擴(kuò)增，細(xì)胞數(shù)量可擴(kuò)增上千倍，擴(kuò)增的細(xì)胞中CD3+CD8+T細(xì)胞平均占30%以上，是CIK細(xì)胞中抗腫瘤活性最強(qiáng)的細(xì)胞群，CD3+CD8+T細(xì)胞平均占70%以上，它們也是抗腫瘤作用的主要細(xì)胞亞群。

2 自體高效CIK細(xì)胞治療的特點(diǎn)

CIK細(xì)胞選擇性的殺傷腫瘤細(xì)胞，而對正常細(xì)胞沒有毒性；CIK細(xì)胞抗瘤譜廣，對惡性腫瘤細(xì)胞殺傷效率高，對化療耐藥腫瘤同樣敏感；CIK細(xì)胞體外增殖能力強(qiáng)，對腫瘤殺傷活性強(qiáng)而持久，還能使機(jī)體免疫能力提高，從而對腫瘤治療施以雙重作用；CIK細(xì)胞回輸后在體內(nèi)可產(chǎn)生大量內(nèi)源性細(xì)胞因子，可減少外源性細(xì)胞因子的輸入而引起的一系列嚴(yán)重副作用；CIK細(xì)胞對控制惡性胸水、腹水，殺傷胸腹水中的癌細(xì)胞有良好的效果；CIK細(xì)胞應(yīng)用非常安全，不良反應(yīng)少，一般只限于低熱（約37.5℃）；CIK細(xì)胞不能直接殺傷腫瘤細(xì)胞，但能通過識(shí)別腫瘤細(xì)胞特異性抗原，將其信號(hào)呈遞給具殺傷效應(yīng)的T細(xì)胞來達(dá)到監(jiān)測、殺滅腫瘤的功能。誘導(dǎo)產(chǎn)生大量效應(yīng)T細(xì)胞，啟動(dòng)效應(yīng)T細(xì)胞遷移至腫瘤部位，保持效應(yīng)T細(xì)胞在腫瘤部位的長期存在，抑制腫瘤血管的生成，并具有一定的免疫特性。由于該細(xì)胞同時(shí)表達(dá) CD3 和 CD56 兩種膜蛋白分子，故又稱為NK 細(xì)胞（自然殺傷細(xì)胞）樣 T 淋巴細(xì)胞，兼具有 T 淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性，和 NK 細(xì)胞的非 MHC 限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn)。該細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的識(shí)別能力很強(qiáng)，如同“細(xì)胞導(dǎo)彈”，能精確“點(diǎn)射”腫瘤細(xì)胞，但不會(huì)傷及“ 無辜”的正常細(xì)胞，尤其對手術(shù)后或放化療后患者效果顯著，能消除殘留微小的轉(zhuǎn)移病灶，防止癌細(xì)胞擴(kuò)散和復(fù)發(fā)，提高機(jī)體免疫力。

3 自體高效CIK細(xì)胞治療的適應(yīng)癥和禁忌癥

3.1適應(yīng)癥：適用于多種實(shí)體腫瘤，包括惡性黑色素瘤、前列腺腫瘤、腎腫瘤、膀胱腫瘤、卵巢腫瘤、結(jié)腸腫瘤、直腸腫瘤、乳腺腫瘤、宮頸腫瘤、肺腫瘤、喉腫瘤、鼻咽腫瘤、胰腺腫瘤、肝腫瘤、胃腫瘤等實(shí)體瘤手術(shù)后防止復(fù)發(fā)，也可以用于多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤和白血病等血液系統(tǒng)惡性腫瘤的復(fù)發(fā)，還可以用于上述腫瘤的進(jìn)一步鞏固治療。

3.2禁忌癥：患T細(xì)胞淋巴瘤的病人，器官移植后長期使用免疫抑制藥物的病人，正在使用免疫抑制藥物的自身免疫病病人；器官功能衰竭者；臟器移植者；嚴(yán)重自身免疫性疾病者；不可控制的糖尿病患病人；有敗血癥或其他難以控制感染的病人；對IL-2過敏者、妊娠及哺乳期婦女；HIV感染者。

4 自體高效CIK細(xì)胞制備的基本流程

外周血采集分離單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增檢測評估預(yù)約回輸。

通過采取少量患者或其直系家屬的外周血50-100ml，分離單個(gè)核細(xì)胞或用血細(xì)胞分離機(jī)單采約1×10的8次方個(gè)淋巴細(xì)胞，在體外經(jīng)過特殊細(xì)胞因子及抗體刺激活化后，大量擴(kuò)增殺傷性淋巴細(xì)胞，經(jīng)過約2周左右的擴(kuò)增后，CIK細(xì)胞一般可達(dá)到1.5×10的10次方以上，然后經(jīng)過微生物檢測和活化程度評估后，分10次回輸。

5 自體高效CIK使用說明

5.1 培養(yǎng)后的CIK細(xì)胞約在1.5×10的10次方左右開始回輸，培養(yǎng)結(jié)束后，用含有人血白蛋白的生理鹽水洗滌并懸浮淋巴細(xì)胞，最后約100ml體積，置于輸血袋中回輸。

5.2 CIK細(xì)胞回輸方法：先用0.9%氯化鈉連接輸血器建立靜脈通路，輸入氯化鈉3-5分鐘，無異常后開始回輸CIK細(xì)胞懸液?；剌敃r(shí)間取決于回輸細(xì)胞的體積和細(xì)胞數(shù)，一般為0.5-1小時(shí)。有惡性胸、腹水的患者也可以進(jìn)行胸腔、腹腔注射，或腫瘤局部注射。

6 自體高效CIK細(xì)胞治療可能出現(xiàn)的副作用及預(yù)防

體高效CIK細(xì)胞是在體外誘導(dǎo)、活化的自身免疫細(xì)胞，這種治療很安全，極少數(shù)患者在細(xì)胞回輸過程中或回輸后2-10小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)寒戰(zhàn)、發(fā)熱、乏力、頭痛、全身不適等現(xiàn)象，一般持續(xù)時(shí)間2-6小時(shí)，可自行緩解。也可由醫(yī)生按照用藥指征和終止條件積極對癥處理。高熱患者一般使用解熱藥就可完全緩解。目前尚未見有報(bào)道由于進(jìn)行CIK治療導(dǎo)致嚴(yán)重副作用的病例。

篇3

通訊作者：陳素平

【摘要】 目的 誘導(dǎo)母體以胚胎抗原或相關(guān)同種異體抗原母體產(chǎn)生免疫反應(yīng)性，即通過封閉抗體產(chǎn)生，阻止胚胎遭受母體免疫攻擊而流產(chǎn)，并隨訪妊娠結(jié)局。方法 從配偶靜脈血提取淋巴細(xì)胞在患者前臂進(jìn)行多處皮內(nèi)注射。結(jié)果 經(jīng)過1個(gè)療程的治療，80%以上的患者封閉抗體都會(huì)從陰性轉(zhuǎn)為陽性，此時(shí)再受孕可大大減少流產(chǎn)的機(jī)會(huì)。結(jié)論 從孕前至懷孕4個(gè)月期間，要定期進(jìn)行淋巴細(xì)胞皮內(nèi)注射，注射方法和部位都要求很嚴(yán)格，有效的心理護(hù)理及科學(xué)的生活方式在預(yù)防流產(chǎn)中起了關(guān)鍵的作用。

【關(guān)鍵詞】 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)； 封閉抗體； 皮內(nèi)注射； 護(hù)理

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.06.038

世界衛(wèi)生組織將不孕癥定義為有正常性生活的夫婦，未經(jīng)避孕在1年以上未懷孕者。據(jù)權(quán)威機(jī)構(gòu)統(tǒng)計(jì)，免疫性因素在不孕癥的發(fā)生因素中占10％以上。免疫因素中女性患者血中和宮頸中的抗抗體、抗透明帶抗體陽性，封閉抗體陰性等，都能使患者受孕困難。自然流產(chǎn)連續(xù)發(fā)生2次或以上者稱為復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，是婦科常見病。近代生殖免疫學(xué)研究表明，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)除常見的染色體異常、生殖道畸形、內(nèi)分泌異常、感染因素外，還有相當(dāng)一部分與免疫因素有關(guān)。正常成功妊娠對胎兒抗原反應(yīng)起免疫保護(hù)、營養(yǎng)的作用，孕婦對胎兒抗原呈免疫耐受。當(dāng)胎兒母親免疫系統(tǒng)平衡被打破，可引起免疫排斥，繼而引起流產(chǎn)。封閉抗體能刺激母體免疫抗原產(chǎn)生IgG，是特異性抗體，起封閉效應(yīng)。其作用機(jī)理為封閉抗體與母體的淋巴毒性細(xì)胞結(jié)合，封閉其細(xì)胞作用，保護(hù)胎兒免受傷害。其次，封閉抗體與胚胎上的抗原結(jié)合，切斷母體淋巴細(xì)胞流向胚胎，從而免疫保護(hù)胎兒。原因除一部分與自身抗體有關(guān)外，另一部分被認(rèn)為是母嬰雙方免疫不適應(yīng)，其中封閉抗體缺乏是主要原因。采用淋巴細(xì)胞進(jìn)行免疫治療的目的是誘導(dǎo)母體以胚胎抗原或相關(guān)同種異體抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)，即通過封閉抗體產(chǎn)生，阻止胚胎遭受母體免疫攻擊，而避免流產(chǎn)［1］。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象為2010年9月～2011年11月在本院生殖中心發(fā)生連續(xù)2次以上復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的34例患者，經(jīng)檢查均為體內(nèi)缺乏封閉抗體，在配偶檢查排除有傳染病后運(yùn)用配偶淋巴細(xì)胞進(jìn)行治療。34例患者年齡23～43歲，平均31歲。流產(chǎn)次數(shù)：2次流產(chǎn)15例、3次流產(chǎn)8例、4次流產(chǎn)7例、5次以上流產(chǎn)4例。孕3個(gè)月自然流產(chǎn)28例，孕3個(gè)月以上流產(chǎn)6例。經(jīng)篩查排除遺傳性疾病、生殖器官異常、嚴(yán)重內(nèi)分泌異常和感染性疾病。所有病例既往曾有黃體酮、HCG治療保胎無效。

1.2 方法 抽取配偶空腹外周抗凝全血30 ml，經(jīng)淋巴細(xì)胞分離液分離出淋巴細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞數(shù)為（2～2.5）×107/ml，每隔3周在患者前臂皮內(nèi)多點(diǎn)進(jìn)行注射，5次為一療程。進(jìn)行1個(gè)療程后復(fù)查封閉抗體是否轉(zhuǎn)陽性，如陽性后可指導(dǎo)懷孕，懷孕后治療間隔時(shí)間由3周改為2周，并持續(xù)治療到懷孕4個(gè)月。

1.3 封閉抗體檢測方法 清晨取患者靜脈血3 ml統(tǒng)一送廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，采用ELISA（酶聯(lián)免疫法）檢測。

2 護(hù)理

2.1 心理護(hù)理 不孕夫婦由于多年不孕，容易產(chǎn)生焦慮、緊張、恐懼、懷疑心理，還有些會(huì)出現(xiàn)急于求成、立竿見影的思想。另外，不孕癥患者承受著巨大的心理壓力，同時(shí)患者對這項(xiàng)技術(shù)缺乏了解，擔(dān)心該項(xiàng)技術(shù)會(huì)對胎兒的發(fā)育有影響、容易引起流產(chǎn)、胎兒出生后會(huì)有什么后遺癥等等，這些都容易引起患者身體內(nèi)分泌的改變，影響胎兒的發(fā)育。因此，護(hù)理人員對就診的患者應(yīng)熱情接待，真誠地與患者溝通，幫助患者解除思想包袱，盡量減輕患者的擔(dān)憂及焦慮情緒。耐心解答患者及家屬所提出的問題，尊重患者的隱私，使她們有安全感。護(hù)理人員應(yīng)以真誠的態(tài)度主動(dòng)和患者溝通，向其介紹治療的目的、效果及治療的過程，使患者對此項(xiàng)治療有正確的認(rèn)識(shí)，消除恐懼、緊張心理，使其在整個(gè)治療過程中保持良好的精神狀態(tài)。

2.2 皮膚護(hù)理 第一次進(jìn)行皮內(nèi)注射時(shí)，絕大多數(shù)患者局部皮膚會(huì)出現(xiàn)紅潤硬結(jié)，直徑一般小于2 cm，個(gè)別反應(yīng)大者會(huì)出現(xiàn)硬結(jié)直徑大于2 cm，并伴隨紅腫及瘙癢，囑患者勿用手抓撓，防止皮膚被抓破。注射時(shí)嚴(yán)格行無菌操作，防止皮膚感染。囑患者2 h內(nèi)暫不清洗注射部位，并告知其硬結(jié)會(huì)在幾天后逐漸消退，以后再進(jìn)行注射時(shí)反應(yīng)也會(huì)逐漸減輕。

2.3 生活護(hù)理 囑患者懷孕后宜穿寬松、柔軟的棉質(zhì)衣服，不宜穿高跟鞋，避免著涼，防感冒。飲食清淡、富含蛋白質(zhì)、維生素的食物。保持個(gè)人清潔衛(wèi)生，不盆浴。懷孕頭3個(gè)月內(nèi)不能同房，以免引起流產(chǎn)。

2.4 療效觀察與隨訪記錄 將進(jìn)行免疫治療的患者用專用記錄本登記，詳細(xì)記錄患者的個(gè)人信息、妊娠史、流產(chǎn)史、通訊方式等，每次做完免疫治療后需觀察半小時(shí)，無不適方可讓患者離院，并交待下次治療時(shí)間。治療期間嚴(yán)密觀察有無腹痛、腰痛、陰道流血情況，整個(gè)孕期定期檢查，不適隨診。

2.5 評定標(biāo)準(zhǔn) 將妊娠超過7個(gè)月、B超檢查未見異常或分娩活嬰視為妊娠成功。

3 結(jié)果

34例患者中1例已分娩，15例在孕14～28周，8例在9～12周流產(chǎn)，5例在12～14周流產(chǎn)，5例生化妊娠。

4 討論

利用丈夫血淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治療法治療母體封閉抗體缺乏所致的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，首先，其免疫反應(yīng)強(qiáng)，持續(xù)時(shí)間短，無明顯不良反應(yīng)，是一種簡單可行、經(jīng)濟(jì)的方法，患者樂于接受，具有臨床應(yīng)用價(jià)值及較好的發(fā)展前景［2］。其次，進(jìn)行皮內(nèi)注射時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，防止感染。第一次做免疫治療反應(yīng)強(qiáng)烈，以后反應(yīng)逐漸減輕的患者妊娠效果優(yōu)于其他患者。隨訪工作做得好能密切護(hù)患關(guān)系，良好的護(hù)患關(guān)系使患者遵從醫(yī)囑性強(qiáng)，極大提高了治療的成功率。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 李尚為,黃仲英.原因不明反復(fù)自然流產(chǎn)患者免疫治療結(jié)局的探討［J］.實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2001,17(2):105.

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關(guān)鍵詞： CIK細(xì)胞 免疫治療 惡性腫瘤

繼手術(shù)、放化療之后，細(xì)胞免疫治療腫瘤已受到人們越來越多的關(guān)注，而輸注細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量是保證臨床療效的關(guān)鍵[1]，因此，如何在體外培養(yǎng)出高增殖高活性的抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞成為大家關(guān)注的焦點(diǎn)[2]。CIK細(xì)胞是一種免疫殺傷細(xì)胞，具有高增殖和高細(xì)胞毒性，能特異性殺傷腫瘤細(xì)胞?，F(xiàn)將本院應(yīng)用CIK細(xì)胞治療85例腫瘤患者的近期療效報(bào)告如下。

1、材料與方法

1.1臨床資料

我院在2012年到2013年，對85例惡性腫瘤病人行CIK細(xì)胞回輸，其中男53例，女32例；年齡26歲到75歲，其中肝癌10例，胃癌19例，乳腺癌18例，肺癌31例，食道癌7例。

1.2試劑與儀器

淋巴細(xì)胞分離液：中國科學(xué)院生物工程研究所；RPMI1640培養(yǎng)基：美國wigma公司；IL-2：英國pepro tech公司；IFN-γ：英國pepro tech公司；CD3：美國 Ancell Corporation公司。低溫高速離心機(jī)：英國Beck man公司；HF212 UV CO2恒溫培養(yǎng)箱：上海力申科技有限公司；倒置相差顯微鏡：日本Olympus公司。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

采用淋巴細(xì)胞分離液分離患者外周血單個(gè)核細(xì)胞，懸浮于1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，第一天加入IFN-γ（1000U/ml）20μl，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中；24 小時(shí)后，加CD3 單抗（ 100mg/mL）100μl，IL-2（500μ/mL）40μl；72 小時(shí)后，補(bǔ)加培養(yǎng)液和IL-2。培養(yǎng)第3天時(shí)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)果陰性后，洗滌注入100mL生理鹽水回輸給患者。

2、結(jié)果

患者接受CIK細(xì)胞免疫過繼治療后，T細(xì)胞亞群百分?jǐn)?shù)和絕對值均明顯提高，經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測CD3、CD8、CD56與輸注前對比，70%患者有所提高，20%患者無改變，10%患者降低。絕大部分患者食欲得到改善，睡眠障礙減輕，疼痛得到緩解。

3、討論

我院自體CIK細(xì)胞回輸治療85例惡性腫瘤患者，絕大部分患者治療有效，患者回輸CIK細(xì)胞后感覺明顯好轉(zhuǎn)。通過流式細(xì)胞儀分析發(fā)現(xiàn)患者體內(nèi)T細(xì)胞亞群百分?jǐn)?shù)和絕對值提高者達(dá)70%，有效改善了患者的生命體征，提高了患者的生活質(zhì)量，延長了患者的生存時(shí)間，為腫瘤患者提供了更加有效的治療手段。

CIK細(xì)胞在醫(yī)學(xué)上被稱為腫瘤的細(xì)胞導(dǎo)彈，它識(shí)別腫瘤的能力強(qiáng)，且不會(huì)殺傷人體的正常免疫細(xì)胞[3]。CIK細(xì)胞作為目前生物治療的新手段，其殺瘤活性強(qiáng)，且無明顯的毒副作用，已經(jīng)越來越受到人們的重視，給越來越多的患者帶來福音[4]。

參考文獻(xiàn)：

[1]李敏， 鄧海峰， 陸明洋， 等. CIK治療前后腫瘤患者外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞變化研究. 中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)， 2011，6（15）：1051-1053.

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篇5

【關(guān)鍵詞】樹突細(xì)胞 惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤 免疫療法 DC疫苗

中圖分類號(hào)：R739.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1005-0515（2011）11-407-02

惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤定植在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，這一特殊的解剖學(xué)位置導(dǎo)致人體自身對于腫瘤的抗擊能力極低。這也是導(dǎo)致其預(yù)后差的主要原因。由于其高死亡率，惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤曾一度被人們稱為絕癥。因此，尋找新的治療方法也成為醫(yī)學(xué)界的研究熱點(diǎn)。免疫療法逐漸被發(fā)現(xiàn)，并在不斷壯大的分子生物學(xué)和基因工程學(xué)的技術(shù)支持下得以快速成長。在多種免疫治療方案中樹突細(xì)胞腫瘤疫苗激發(fā)患者產(chǎn)生主動(dòng)免疫效果最佳，此種疫苗的開發(fā)與優(yōu)化已成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。

1 神經(jīng)膠質(zhì)瘤免疫治療的難點(diǎn)

首先腦實(shí)質(zhì)有血腦屏障的保護(hù)，且缺乏淋巴組織和樹突細(xì)胞，導(dǎo)致其不能與中樞神經(jīng)系統(tǒng)以外的組織一樣可以將外來的抗原吞噬并呈遞給周邊的淋巴器官產(chǎn)生相應(yīng)的免疫反應(yīng)[1]。其次腫瘤組織可以營造出免疫抑制的環(huán)境以利于繼續(xù)增長。腫瘤細(xì)胞不但可以分泌一些免疫抑制因子，如白介素10、前列腺素E2、腫瘤生長因子α等，還可以低表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體和共刺激因子B7逃避免疫提呈[2]。

2 樹突細(xì)胞在神經(jīng)膠質(zhì)瘤免疫治療中的作用特點(diǎn)

就像上段所描述的，如不克服中樞系統(tǒng)這種免疫妥協(xié)的狀態(tài)，免疫治療的效果是無法達(dá)到的。因此在體外培養(yǎng)致敏細(xì)胞，再回輸病人體內(nèi)以達(dá)到治療效果是必要的。在細(xì)胞免疫療法中常被用到的有淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）、DC承載膠質(zhì)瘤抗原激活的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，在MTT法分別對它們殺傷腫瘤效果的測試中可以看到DC誘導(dǎo)的CTL明顯強(qiáng)于其他[3]。

通常有兩種途徑來激活T細(xì)胞。一是直接的方式，其中腫瘤抗原直接提交，隨后激活T細(xì)胞和抗原特異性T細(xì)胞。另一種是間接的途徑，利用專屬的抗原提呈細(xì)胞去提呈抗原和激活T細(xì)胞。DC是迄今已知的最有力的抗原提呈細(xì)胞，當(dāng)炎癥介質(zhì)和病原體的刺激下，定植在周邊組織的未成熟DC有效地識(shí)別和處理抗原，將其呈遞給淋巴器官中的T細(xì)胞區(qū)并且發(fā)育成熟。成熟的DC會(huì)失去抗原捕獲能力只能以人白細(xì)胞抗原（HLA）限制的方式將內(nèi)源性和外源性抗原呈遞給幼稚的T細(xì)胞。CTL被認(rèn)為是在腫瘤抑制過程中發(fā)揮主要效應(yīng)的細(xì)胞。DC的注入已成為延長患者生命，減小腫瘤體積的重要措施[4]。

DC為基礎(chǔ)的癌癥免疫療法是指接種攜帶各種腫瘤抗原的DC疫苗。理論上，DC和共刺激分子或DC生長因子的同步注射不僅會(huì)刺激各免疫效應(yīng)細(xì)胞，而且還提高抗原對DC的提呈[5]。大量證據(jù)表明，利用DC的免疫療法似乎能夠克服，至少部分克服，處于免疫抑制狀態(tài)的原發(fā)惡性膠質(zhì)瘤患者治療的難題。DC治療在動(dòng)物模型和臨床試驗(yàn)中的安全性已被證實(shí)。到目前為止，尚無嚴(yán)重的副作用，也沒有自身免疫毒性的發(fā)生。因此，此種療法得到了越來越廣泛的關(guān)注[6]。

3 神經(jīng)膠質(zhì)瘤DC疫苗的制備

理論上已知和未知的腫瘤抗原都可以與DC結(jié)合，在體外特定的環(huán)境下培養(yǎng)DC使之致敏，并且促進(jìn)其分化成熟，具有抗原提呈功能。目前部分技術(shù)已應(yīng)用于臨床，更加成熟的技術(shù)尚在研發(fā)中[7]。

3.1 膠質(zhì)瘤全細(xì)胞抗原致敏DC

其優(yōu)點(diǎn)在于不必苛求具體的抗原識(shí)別表位，因而，適用范圍較廣泛，并可避免變異株或缺陷株的免疫逃逸和轉(zhuǎn)移擴(kuò)散。更重要的是其制備方法較簡單適合大量生產(chǎn)，可應(yīng)用反復(fù)放射線照射等物理方法獲取腫瘤細(xì)胞抗原，然后致敏DC制備的疫苗。有專家已通過此法制備好疫苗后實(shí)行有對照的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明疫苗的療效顯著，孟慶海等以反復(fù)凍融的C6細(xì)胞裂解物致敏DC制備疫苗,設(shè)立疫苗實(shí)驗(yàn)組和鹽水對照組，再分別以頸內(nèi)動(dòng)脈，尾靜脈和皮下三種不同注射途徑回輸荷C6膠質(zhì)瘤大鼠，發(fā)現(xiàn)大鼠生存期和腫瘤壞死面積，均是實(shí)驗(yàn)組大于對照組，而與給藥途徑無關(guān)[8]。相關(guān)臨床實(shí)驗(yàn)也正在籌劃中[9]。

3.2 膠質(zhì)瘤抗原多肽負(fù)載DC

利用腫瘤抗原多肽在體外沖擊致敏DC，然后回輸患者體內(nèi)可以激活CTL，產(chǎn)生免疫反應(yīng)。此法靶向性較好，而且腫瘤抗原肽可人工合成，或弱酸洗脫腫瘤表面的MHC-I類抗原肽獲得。有專家已在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中證明此法的有效性，更有I期臨床實(shí)驗(yàn)證明實(shí)驗(yàn)組的患者中位生存期顯著延長[10]。

3.3 膠質(zhì)瘤細(xì)胞DNA或RNA負(fù)載DC

此法可有效的避免自身免疫反應(yīng)，并無需明確腫瘤特異性抗原，但技術(shù)要求較高。有國外專家嘗試將人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因插入質(zhì)粒和腺病毒然后轉(zhuǎn)染DC并成功激起了T細(xì)胞反應(yīng)。國內(nèi)專家又將腫瘤RNA與DC混合，使之致敏，未致敏的DC為對照組，將DC與外周血T細(xì)胞共培養(yǎng)，采用MTT比色法檢測T細(xì)胞抗腫瘤活性差異，結(jié)果是實(shí)驗(yàn)組膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長受到抑制，并最終死亡，殺傷率與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

3.4 膠質(zhì)瘤細(xì)胞與DC融合體疫苗

理論上此法可滿足具有腫瘤細(xì)胞的全部抗原性又具有激活T細(xì)胞的功能。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)證明融合技術(shù)目前電融合的效率較化學(xué)融合高。多名專家實(shí)驗(yàn)證明DC腫瘤融合疫苗治療腦膠質(zhì)瘤的技術(shù)是可行的[12]。王東海等采用PEG化學(xué)融合方法制備融合瘤苗，制備大鼠顱內(nèi)C6腫瘤模型，經(jīng)尾靜脈注射融合瘤苗、DC以及PBS，證明融合瘤苗能夠有效地發(fā)揮抗腫瘤效果[13]。付玉等在PEG作用下將DC與膠質(zhì)瘤細(xì)胞BT325融合，結(jié)果是DC/膠質(zhì)瘤融合細(xì)胞激活的CTL對膠質(zhì)瘤的殺傷作用，顯著高于DC與膠質(zhì)瘤細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)DC組(P

3.5 Exsomes負(fù)載DC

Exsomes是一種由致敏DC分泌的具有抗原呈遞能力的物質(zhì)，其表面可表達(dá)共刺激分子、勃附分子和MHC分子等，并能引起強(qiáng)烈的腫瘤特異性免疫反應(yīng)。已有相關(guān)實(shí)驗(yàn)證明其有效性[15]。

4 展望

有分子生物學(xué)和基因工程學(xué)的成熟技術(shù)支持，DC研究的深入已成為一種趨勢，以DC為主體的神經(jīng)膠質(zhì)瘤的免疫治療取得了長足的進(jìn)步，對于不同病人采取不同制備特異性DC疫苗的個(gè)體化研究已經(jīng)進(jìn)人臨床試驗(yàn)。目前，免疫治療仍為以手術(shù)治療為主的綜合治療的補(bǔ)充治療措施。手術(shù)、放療、化療、免疫治療綜合治療已成共識(shí)，相信隨著此項(xiàng)技術(shù)的成熟，及相關(guān)實(shí)驗(yàn)的不斷完善，免疫療法終將占據(jù)更加重要的地位。此項(xiàng)治療方法的迅猛發(fā)展，終究會(huì)為人類有朝一日徹底攻克免疫原性低、侵襲性強(qiáng)、易復(fù)發(fā)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤的治療帶來希望。但DC疫苗的研究時(shí)間畢竟很短，在臨床推廣應(yīng)用之前還有許多工作等著我們?nèi)ネ瓿?，其中最重要的是安全性和療效問題，因此尋找規(guī)范化的合理的經(jīng)濟(jì)的DC疫苗制備方法必將成為重中之重，需待臨床及科研工作者去開發(fā)和研究。

參考文獻(xiàn)

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[關(guān)鍵詞] 胃癌；化療；DC-CIK細(xì)胞；循環(huán)腫瘤細(xì)胞

[中圖分類號(hào)] R735 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2017）12-0025-03

[Abstract] Objective To investigate the effect of chemotherapy and bioimmune therapy on gastric cancer and its effect on circulating tumor cells（CTC）. Methods Eighty patients with gastric cancer diagnosed by postoperative pathology were divided into control group and observation group. The control group was treated with chemotherapy only. The observation group was treated with DC-CIK biological immunotherapy. The effect and the CTC levels of two groups before and after treatment were compared. Results （1）The total clinical remission rate in the observation group was significantly higher than that in the control group（P

[Key words] Gastric cancer； Chemotherapy； DC-CIK cells； Circulating tumor cells

胃癌早期R床診斷率較低，常無任何癥狀或癥狀輕微，確診時(shí)多為晚期[1]。化療為常用治療胃癌的方法之一，可以顯著改善患者的預(yù)后[2]。近年來，生物免疫治療已經(jīng)逐漸發(fā)展成為臨床治療惡性腫瘤的主要方法之一，研究證實(shí)，生物免疫療法能夠顯著增強(qiáng)患者的機(jī)體免疫力及抑制腫瘤細(xì)胞的繁殖，降低化療毒副反應(yīng)的發(fā)生率[3]。本研究主要采用化療聯(lián)合生物免疫治療方法即樹突狀細(xì)胞（DC）、細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞（CIK）治療胃癌，探討該方案治療的療效及其對CTC水平的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2012年1月～2016年12月期間入住本院的80例胃癌患者隨機(jī)分為對照組與觀察組，每組各40例。對照組：男23例，女17例；年齡54～79歲，平均（67.92±10.21）歲；TNM分期：Ⅲ B期25例，Ⅳ期15例；病理類型：低分化腺癌、管狀腺癌、黏液腺癌及印戒細(xì)胞癌分別為12例、9例、11例及8例。觀察組：男25例，女15例；年齡56～78歲，平均（67.10±10.18）歲；TNM分期：ⅢB期27例，Ⅳ期13例；病理類型：低分化腺癌、管狀腺癌、黏液腺癌及印戒細(xì)胞癌分別為11例、11例、10例及8例。兩組患者的性別、年齡、TNM分期及病理類型等基線資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

兩組患者均實(shí)施常規(guī)手術(shù)治療。術(shù)后第3周，對照組采用奧沙利鉑（L-OHP）+亞葉酸鈣A及氟尿嘧啶（5-FU）組成的FOLFOX化療方案。觀察組患者在上述治療基礎(chǔ)上聯(lián)合生物免疫療法進(jìn)行治療：采血分離，抽血前皮下注射150 μg的GM-CSF，將PBMC與GM-CSF、IL-4混合置于溫度條件為37℃的恒溫箱之中培育，3 d后完成抗原沖擊培育，2 d后生成成熟的致敏DC，經(jīng)2周后再將其回輸；在外周血液之中將單個(gè)核細(xì)胞分離之后，對CIK細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)培育，1周后再經(jīng)細(xì)胞培育呈陰性，再使用0.9%的NaCl溶液洗滌2～3次，同rhIL-2一起加入自身血漿之中，于2 h以內(nèi)進(jìn)行回輸。上述生物制劑每個(gè)療程回輸2次，每隔5天后進(jìn)行化療。

1.3 臨床療效評價(jià)

參考世界衛(wèi)生組織關(guān)于癌癥患者臨床療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，主要分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、無變化（NC）及進(jìn)展（PD）。臨床總緩解率（%）=（CR例數(shù)+PR例數(shù)）/總例數(shù)×100%[4]。

1.4 CTC檢測

（1）主要材料 激光共聚焦掃描顯微鏡（Laser scanning confocal microscope，LSC）（美國CompuCyte公司），濾器（德國SARTORIUS公司），8 μm孔徑的聚碳酸酯濾膜（英國Whatman公司），異硫氰酸熒光素-兔抗人細(xì)胞角蛋白抗體（英國Abcam公司）、藻紅蛋白（PE）-鼠抗人CD45抗體（美國e-Bioscience公司），CK8抗體（上海瑞齊生物科技有限公司）；4，6-二米基苯基吲哚（DAPI），MCF-7胃癌細(xì)胞株（中科院上海細(xì)胞研究所）。

（2）標(biāo)本采集 首先將標(biāo)本采集裝置進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，使用真空采血針采集受檢者肘靜脈血10 mL，將穿刺后的2 mL肘靜脈血棄去。肝素抗凝，4℃中保存，待檢。選擇SGC-7901人胃癌細(xì)胞株建模擬胃癌患者血樣，這樣做的目的就是為了與上述采集標(biāo)本進(jìn)行對照，使用膜濾過的方法對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行富集。

（3）LSC自動(dòng)掃描和形態(tài)學(xué)觀察 以CK8抗體（上海瑞齊生物科技有限公司）和CD45分別對SGC-7901進(jìn)行篩選，陽性細(xì)胞為CK8（+）CD45（-）。經(jīng)LSC掃描計(jì)數(shù)腫瘤細(xì)胞水平。

（4）典型CTC判定標(biāo)準(zhǔn) ①CTC細(xì)胞體積比周圍白細(xì)胞大；②CTC細(xì)胞核經(jīng)DAPI染色，比較明亮，細(xì)胞核較大，核漿所占比例較大，核分裂程度較大，且呈病理性核分裂；③經(jīng)標(biāo)志物熒光染色，胞漿抗CK19（+）與CD45（-），顯示存在較為明顯的細(xì)胞形態(tài)，且具有較為清楚的細(xì)胞界限；④細(xì)胞核面積與相應(yīng)胞漿抗原染色部位面積接近。本研究中，將CK19（+）以及細(xì)胞數(shù)大于1個(gè)視為CTC陽性[5]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較

經(jīng)治療后，觀察組CR、PR、NC及PD例數(shù)分別為5例、13例、15例及7例，臨床總緩解率為45.00%（18/40）；對照組分別為1例、10例、12例及17例，臨床總緩解率為27.50%（11/40）。觀察組臨床總緩解率顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.2 兩組患者治療前后CTC檢測結(jié)果比較

觀察組治療后CTC檢出率顯著低于治療前及對照組治療后，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

3 討論

胃癌是我國最為常見的一種惡性腫瘤，早期診斷率非常低，大部分患者確診時(shí)已為晚期，失去了手術(shù)根治的良好機(jī)會(huì)，即使可以采取手術(shù)治療，但是其術(shù)后復(fù)發(fā)率也非常高[6-8]。因此，對于晚期胃癌患者而言，選擇藥物治療非常關(guān)鍵。臨床治療胃癌的主要方法有外科手術(shù)、放化療等，但是上述幾種常見治療方法療效并不十分理想。隨著臨床治療胃癌的技術(shù)手段的不斷更新與變革，生物免疫治療技術(shù)越來越多地應(yīng)用于臨床疾病的治療之中，取得了非常理想的效果[9-10]。對于腫瘤的治療而言，近年來也開始越來越多地將該新型技術(shù)用于臨床治療各種類型的腫瘤，該方法治療腫瘤的重要原理為對機(jī)體免疫功能加以調(diào)節(jié)，不斷增強(qiáng)患者機(jī)體免疫力，從而殺死腫瘤細(xì)胞。

目前，臨床上常采用化療方法對胃癌患者進(jìn)行治療，然而化療治療存在著諸多缺陷，如患者耐受度差、不良反應(yīng)發(fā)生率高以及終止治療率較高等方面的缺點(diǎn)，對臨床療效產(chǎn)生極大的影響。此外，化療在遏制腫瘤細(xì)胞生長的情況下，會(huì)對機(jī)體的免疫功能產(chǎn)生抑制性作用，降低機(jī)體自身對腫瘤細(xì)胞的殺傷力，同時(shí)普通化療方案只對部分腫瘤細(xì)胞具有殺傷性作用，對微小病灶的殺傷，卻需要機(jī)體自身免疫力來完成。對此，僅憑單純的化療方案對胃癌患者實(shí)施治療，其療效無法達(dá)到滿意程度。本研究觀察組在化療的基礎(chǔ)上采用生物免疫治療[11-13]。在生物免疫治療方案中，DC細(xì)胞是目前已知的抗原提呈細(xì)胞中功能最強(qiáng)大，且能夠激活處于靜止?fàn)顟B(tài)的T淋巴細(xì)胞，并促使免疫應(yīng)答反應(yīng)得以最大程度啟動(dòng)，其在機(jī)體免疫反應(yīng)之中具有非常明顯的調(diào)節(jié)效果。通過將DC對抗原的攝取能力制作疫苗在體外負(fù)載腫瘤相關(guān)抗原，疫苗回輸時(shí)可將腫瘤抗原帶回至機(jī)體之中，從而激活自身的免疫系統(tǒng)，從而有效提高了抗腫瘤及提高免疫水平的作用。近年來，DC細(xì)胞生物治療已在臨床腫瘤治療中得到了較為廣泛的應(yīng)用，然而也存在著一定的問題，如具體的培養(yǎng)過程、培養(yǎng)劑量、接種方法以及疫苗培養(yǎng)時(shí)機(jī)等方面，均存在較大的爭議。CIK細(xì)胞屬于一種全新的非主要組織相容性復(fù)合物免疫活性細(xì)胞，其繁殖能力以及細(xì)胞殺傷活性水平均較高，是該細(xì)胞與諸多細(xì)胞因子共同在機(jī)體之外進(jìn)行培養(yǎng)而獲取的異質(zhì)性細(xì)胞，不會(huì)被T細(xì)胞受體所限制，所以其臨床抗腫瘤的優(yōu)點(diǎn)十分顯著[14]。本研究觀察組采用DC-CIK生物免疫治療方案對患者進(jìn)行治療，效果十分明顯，觀察組的臨床總緩解率顯著高于對照組（P

CTC檢測是臨床上一項(xiàng)較為先進(jìn)的檢驗(yàn)技術(shù)，其優(yōu)勢主要表現(xiàn)在僅需要通過抽取患者靜脈血，便能夠?qū)颊唧w內(nèi)的CTC的變化情況進(jìn)行監(jiān)測。而且通過多年實(shí)驗(yàn)室以及臨床實(shí)踐研究表明，學(xué)術(shù)界對于CTC在與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移等存在的聯(lián)系，以及CTC在預(yù)測預(yù)后、指導(dǎo)個(gè)體化治療方面的作用等方面均得到了認(rèn)可[15]。很長一段時(shí)間以來，由于實(shí)驗(yàn)技術(shù)存在一定的局限性，臨床上對CTC的檢測一直無合適的檢測方法，這在很大程度上限制了CTC研究的深入。近年來隨著臨床檢驗(yàn)技術(shù)的快速發(fā)展，某些CTC檢測方法已獲得了穩(wěn)定性、敏感性以及特異性均處于較高水平的結(jié)果。目前用于檢測CTC的方法有IMS法、密度梯度離心法以及ISET檢測法等，有關(guān)CTC臨床價(jià)值的研究也取得了令人鼓舞的結(jié)果。由此可以得知，CTC可作為臨床判定胃癌患病程度的一個(gè)重要指標(biāo)。

綜上所述，化療聯(lián)合生物免疫治療胃癌的臨床療效顯著，可有效降低CTC水平，應(yīng)在臨床中進(jìn)行推廣。

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篇7

【關(guān)鍵詞】周圍性面癱；珍寶丸；扎沖十三味丸；蒙醫(yī)；針灸；蜈蚣牽正散

doi：103969/jissn1004-7484（x）201309033文章編號(hào)：1004-7484（2013）-09-4880-01

周圍性面癱，是以面部表情肌群運(yùn)動(dòng)功能障礙為主要特征的一種臨床常見病，表現(xiàn)為口眼歪斜、額紋消失、眼瞼不能完全閉合、鼻唇溝消失、不能鼓氣、眼部干燥、味覺減退等，亦稱“歪嘴巴”、“面神經(jīng)麻痹”。約75%-90%患者可治愈，其余則會(huì)留有不同程度的面神經(jīng)功能障礙，嚴(yán)重影響著患者的面容及身心健康[1]。近年來筆者采用中蒙西醫(yī)相結(jié)合治療本病，取得較好療效，現(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。

1資料與方法

11臨床資料

111病例選擇①年齡18-65歲；②符合周圍性面癱的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2-3]；③符合中醫(yī)風(fēng)邪入絡(luò)證的臨床特征[4]：以突發(fā)口眼歪斜為主癥，伴有額紋消失、眼瞼不能完全閉合、鼻唇溝變淺等癥狀，舌淡紅苔薄白，脈浮；④病程≤15天；⑤單側(cè)面癱。

112排除標(biāo)準(zhǔn)①繼發(fā)于其他疾病引起的周圍性面癱者；②急性感染性多發(fā)性神經(jīng)根炎、腮腺炎、腮腺腫瘤、顱窩后病變等患者；③嚴(yán)重心肝腎功能不全和內(nèi)分泌系統(tǒng)、造血系統(tǒng)嚴(yán)重原發(fā)性疾病者；④精神疾病患者；⑤妊娠期和哺乳期婦女；⑥對本類藥物過敏者；⑦不配合治療、治療結(jié)束前失訪者。

113一般資料68例病例均為2011年9月至2013年5月我院收治的患者，按半隨機(jī)法分為2組。觀察組30例，男17例，女13例；年齡28-61歲，平均（4235±529）歲。對照組38例，男21例，女17例；年齡25-62歲，平均（4458±617）歲。2組患者一般資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異無顯著性意義（P>005），具有可比性。

12治療方法

121對照組予以健康教育和心理疏導(dǎo)，采取常規(guī)西醫(yī)治療，包括維生素B1注射液100mg+維生素B12注射液500ug混合肌肉注射以營養(yǎng)神經(jīng)；口服強(qiáng)的松片10mg/d以抗炎、減輕神經(jīng)水腫；口服阿昔洛韋片1000mg/d以抗病毒。連續(xù)治療2-3周后統(tǒng)計(jì)療效。通過以上綜合治療無效的患者，病程超過3個(gè)月的建議手術(shù)治療。

122觀察組在對照組的基礎(chǔ)上加用中醫(yī)和蒙醫(yī)治療，包括：①蒙成藥：珍寶丸（國藥準(zhǔn)字Z20083349，烏蘭浩特中蒙制藥有限公司）13丸，早餐后口服，1日1次；扎沖十三味丸（國藥準(zhǔn)字Z20093203，赤峰天奇制藥有限責(zé)任公司）9丸，晚上睡前口服；②中藥：以蜈蚣牽正散祛風(fēng)化痰，活血通絡(luò)，攻毒止痙，具體處方：蜈蚣30條、全蝎30g、天麻30g、禹白附30g、僵蠶30g，研碎為末，于午12時(shí)和晚6時(shí)各服2g；③針灸治療：選患側(cè)風(fēng)池、地倉、下關(guān)、印堂、百會(huì)、合谷、太沖等穴位，行平補(bǔ)平瀉法，每次留針35分鐘，并配合電針儀、紅外線燈治療，1日1次；④患側(cè)耳背、耳尖放血，藥物外洗外敷，貼敷膏藥。連續(xù)治療2-3周后統(tǒng)計(jì)療效。

13觀察項(xiàng)目與統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

131觀察項(xiàng)目觀察患者臨床癥狀、體征改變情況和不良反應(yīng)發(fā)生情況。

132統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS150統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)。

2療效標(biāo)準(zhǔn)與治療結(jié)果

21療效標(biāo)準(zhǔn)參考相關(guān)文獻(xiàn)[5]擬定。治愈：治療后無主觀癥狀和客觀體征，恢復(fù)正常的面神經(jīng)功能，顏面外形正常；好轉(zhuǎn)：治療后無明顯癥狀和體征，作拙嘴等動(dòng)作不如常人反應(yīng)快。無效：治療后主觀癥狀和客觀癥狀無改善。

22臨床療效比較結(jié)果如表1所示。觀察組治愈22例，治愈率7333%，總有效率9333%；對照組治愈20例，治愈率5263%，總有效率7895%。2組比較，顯效率和總有效率差異均有顯著性意義（P

3討論

周圍性面癱是臨床常見病和多發(fā)病之一，發(fā)病原因尚不完全明確，可能與血運(yùn)障礙、病毒感染、免疫異常等因素有關(guān)[6]，近年來研究發(fā)現(xiàn)，心理因素亦可引發(fā)面癱，有相當(dāng)一部分病人發(fā)病前存在身體疲勞、睡眠不足、精神緊張及身體不適，受涼等情況。治療的重點(diǎn)在于控制炎癥和水腫，減少神經(jīng)受壓。筆者在臨床工作中多采取中蒙西醫(yī)多種方法進(jìn)行綜合治療，如2013年5月11日接診一女性患者，38歲，達(dá)拉特旗紀(jì)檢委干部，因洗澡受涼后口眼歪斜1小時(shí)就診，查體示生命體征穩(wěn)定、左側(cè)額紋消失、左側(cè)眼瞼不能完全閉合、左側(cè)鼻唇溝消失，診斷為急性周圍性面癱，予上述觀察組綜合治療方案，內(nèi)服中蒙藥2周，配合針灸治療2周后完全康復(fù)。

蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為，周圍性面癱是由白脈損傷，風(fēng)寒之邪乘虛侵襲而引起的顏面部、嘴、唇等歪斜的突發(fā)性病癥。其多因夜間汗時(shí)正氣內(nèi)虛，外衛(wèi)不固，經(jīng)絡(luò)痹阻，氣血失調(diào)，靜脈失于濡養(yǎng)，筋肉遲緩不收斂，致使其面部向正常的一側(cè)歪斜而發(fā)此病。珍寶丸和扎沖十三味丸均為根據(jù)蒙醫(yī)經(jīng)典理論創(chuàng)制的蒙成藥，均有很好的去除“協(xié)日烏素”之功。珍寶丸由麝香、珍珠、石膏、土木香、木香、丁香、檀香、人工牛黃、水牛角濃縮粉、沉香、地錦草、紅花等二十九味蒙藥組成，可清熱安神，舒筋活絡(luò)，常用于治療“白脈病”。扎沖十三味丸由訶子、制草烏、石菖蒲、木香、麝香、珊瑚、珍珠、丁香、沉香、禹糧土、磁石、甘草、肉豆蔻等組成，可祛風(fēng)通竅，舒筋活血，鎮(zhèn)靜安神，常用于治療神經(jīng)麻痹，風(fēng)濕，關(guān)節(jié)疼痛。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為本病多由外受風(fēng)邪，或夾有痰瘀，內(nèi)存陽明、少陽經(jīng)絡(luò)空虛，致面部經(jīng)絡(luò)阻滯、氣血不和、經(jīng)脈失養(yǎng)而為病。蜈蚣牽正散由牽正散加蜈蚣和天麻組成，方中蜈蚣和全蝎祛風(fēng)止痙、通絡(luò)止痛、攻毒散結(jié)，蜈蚣可治“驚厥風(fēng)搐，臍風(fēng)口噤”（《本草綱目》），全蝎可“療諸風(fēng)癮疹，及中風(fēng)半身不遂，口眼斜”（《開寶本草》）；天麻息風(fēng)止痙，祛風(fēng)通絡(luò)，“最能祛外束之邪，逐內(nèi)避之痰”（《本草新編》）；禹白附祛風(fēng)化痰，“善散面口風(fēng)”（《本草匯言》）；僵蠶祛風(fēng)解痙，化痰散結(jié)，“能入皮膚經(jīng)絡(luò)，發(fā)散諸邪熱氣”（《藥性論》）。諸藥合用，共奏祛風(fēng)化痰，活血通絡(luò)之功。針灸治療周圍性面癱的療效肯定，已被廣泛用于臨床并為患者所接受，主要選取陽明經(jīng)和太陽經(jīng)穴為主，以疏通面部氣血經(jīng)絡(luò)，調(diào)整經(jīng)筋為原則[4-7]。放血療法是刺破皮膚，強(qiáng)迫惡血外出，即“菀陳則除之者，去血脈也”（《黃帝內(nèi)經(jīng)》）。刺絡(luò)放血有瀉熱逐瘀，使毒邪外出，瘀去新生之功，從而達(dá)到暢通經(jīng)絡(luò)，恢復(fù)技能的作用，配合針灸治療本病，具有簡便廉驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)[8]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組的治愈率和總有效率分別為7333%、9333%，均優(yōu)于對照組（P

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篇8

[關(guān)鍵詞] 胸腺肽；新稀寶；反復(fù)呼吸道感染；療效；免疫功能

[中圖分類號(hào)] R563.1[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1673-7210（2012）03（a）-0059-03

反復(fù)呼吸道感染（recurrent respiratory infection，RRI）是兒童常見的呼吸道疾病，它包括反復(fù)上呼吸道感染和反復(fù)下呼吸道感染。其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，與多種因素有關(guān)，臨床治療難度也較大。許多研究表明其發(fā)生與小兒血清鋅、硒等多種微量元素的缺乏或不足有關(guān)[1]。2005年3月～2010年3月筆者采用胸腺肽聯(lián)合含有多種微量元素的新稀寶治療RRI 110例，療效顯著，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

2005年3月～2010年3月我院兒科所有診斷為RRI患兒110例，均符合《反復(fù)呼吸道感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》[2]。將患兒分為治療組（60例）和對照組（50例），兩組均無貧血、佝僂病、營養(yǎng)不良及先天性肺、氣管、心臟疾患。兩組在性別、年齡、病程、前一年發(fā)病次數(shù)、病種方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05），具有可比性。見表1。

1.2 治療方法

兩組均給予一般綜合治療，即抗感染、支持對癥治療。治療組再此基礎(chǔ)上，加用胸腺肽片（北京四環(huán)制藥公司生產(chǎn)），≤3歲，每次1片（3 mg/片），＞3歲，每次1片（5 mg/次），連用3個(gè)月；新稀寶[又名鋅硒寶，濟(jì)南體恒健生物工程有限公司生產(chǎn)，每片（0.25 g）含蛋白鋅（元素鋅）40～80 μg/g、蛋白硒（元素硒）1.0～2.0 μg/g、蛋白碘（元素碘）20～30 μg/g]，1～3歲0.25 g/次，4～7歲0.5 g/次，8～12歲0.75 g/次，3次/d，連用3個(gè)月。3個(gè)月后隨訪觀察，隨訪1年以上。

1.3 觀察指標(biāo)

所有患者分別在用藥前及治療結(jié)束后12個(gè)月采集靜脈血，進(jìn)行免疫功能檢查。空腹抽取靜脈血5 mL，取3 mL置于不抗凝的無菌試管中，離心后收集血清，采用免疫散射比濁法檢測免疫球蛋白IgG、IgA、IgM。另2 mL置于裝有EDTA抗凝劑的試管中，用流式細(xì)胞儀測定CD3、CD4、CD8。所有患者采血前6個(gè)月均未使用過激素、丙種球蛋白、輸血等影響免疫功能的藥物。

1.4 療效判定標(biāo)準(zhǔn)

療程結(jié)束后判定療效，由專人隨訪觀察1年以上。治愈：1年內(nèi)呼吸道感染未再復(fù)發(fā)或偶有上感，或不治自愈；顯效：觀察期發(fā)作次數(shù)減少，＜3次/年，癥狀顯著減輕；有效：發(fā)作較前減少，≥3次/年而＜5次/年，癥狀減輕；無效：發(fā)作無減少，病情無改變[3]?？傆行?（治愈+顯效+有效）/總例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒治療效果比較

治療組總有效率為93.3%，對照組總有效率為72.0%，兩者總有效率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 = 9.06，P ＜ 0.05）。見表2。

2.2 治療前后免疫指標(biāo)比較

治療組在應(yīng)用胸腺肽、新稀寶前，與對照組的免疫球蛋白（Ig）和T淋巴細(xì)胞亞群（CD）值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）；治療結(jié)束后，治療組的Ig和CD值明顯升高，治療組和對照組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.01）。見表2、3。

2.3 兩組不良反應(yīng)比較

治療組僅有1例應(yīng)用胸腺肽后出現(xiàn)輕度皮疹，停藥1 d后自行消失。兩組均未出現(xiàn)其他嚴(yán)重的不良反應(yīng)。

3 討論

反復(fù)呼吸道感染是有不同病源微生物引起的一組反復(fù)發(fā)作的呼吸道疾病的總稱，其發(fā)病涉及小兒營養(yǎng)、免疫等內(nèi)部因素及病原微生物、環(huán)境等外部因素兩大方面，兩者相互作用決定了RRI的發(fā)生[4-5]。研究表明，反復(fù)呼吸道感染的患兒多存在特異性和非特異性免疫功能低下，常伴有血清免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）減少和T淋巴細(xì)胞（CD3、CD4、CD8）降低，導(dǎo)致呼吸道的反復(fù)感染[6-7]。而細(xì)胞免疫功能的強(qiáng)弱在反復(fù)呼吸道感染的發(fā)病中起著重要作用，低下的免疫狀態(tài)使機(jī)體再次成為易感者，形成惡性循環(huán)[8]。許多研究已證明微量元素鋅、硒可提高機(jī)體的免疫功能[9-11]。當(dāng)機(jī)體缺鋅時(shí)，不僅能引起患兒體格及智能發(fā)育遲緩，消化功能障礙，更重要的是可引起免疫器官（胸腺，淋巴腺）萎縮，細(xì)胞免疫受到抑制。鋅是機(jī)體大多數(shù)酶類的輔酶，參與體內(nèi)100多種酶的合成，可促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖分化。硒是人體谷胱甘肽過氧化酶的重要組成部分，參與輔酶A和輔酶Q10的合成，保護(hù)生物膜，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞發(fā)育成熟。而胸腺肽可誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞分化成熟為具有免疫活性的T淋巴細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)，提高機(jī)體對感染的免疫能力，其治療效果已得到臨床證實(shí)[12-13]。

本文資料表明，反復(fù)呼吸道感染患兒在綜合治療的基礎(chǔ)上加用胸腺肽、新稀寶，總有效率為93.3%，而對照組總有效率為72.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05），同時(shí)可使機(jī)體低下的免疫水平逐漸恢復(fù)正常范圍。治療結(jié)束后，治療組血清Ig值和CD值明顯高于對照組，治療組和對照組的Ig值和CD值對比差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.01）。本資料中未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)。兩者均為片劑，避免了患兒肌內(nèi)注射或靜脈應(yīng)用，極大減輕了患兒的痛苦，且新稀寶為純天然生物制劑，不含激素，香酥可口，患兒易于接受。

綜上所述，胸腺肽聯(lián)合新稀寶治療小兒反復(fù)呼吸道感染，確能改善患兒免疫功能，減少RRI的發(fā)作，值得臨床推廣應(yīng)用。

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篇9

【關(guān)鍵詞】 eae bmscs 分化 細(xì)胞因子

study on treatment of experimental autoimmune encephalomyelitis by bone marrow stromal cells

li hulun,sun bo, mu lili, liu xijun, wang dandan, zhao kai, jin lianhong.

department of neurobiology,affiliated hospital of tongji medical college,huazhong university of science and technology,wuhan 430000,china

［abstract］objective:to investigate the therapeutic effects of adoptive transfering bone marrow stem cells(bmscs)for the experimental autoimmune encephalomyelitis(eae)and the related mechanisms underlying,and to investigate the differentiation of bmscs under oligodendroglial cell microenvironment induction both in vivo and vitro.methods:establishing the microenvironment and stimulating bmscs in vitro. immunizing lewis rats to establish eae. in the treatment group, marked bmscs were injected into the rat tail vein 6 days after immunization. evaluating the corresponding indexes of eae by clinical assessment, immunohistochemistry, elisa and so on, thoroughly discussing the pathogenesis and the therapeutic effects of bmscs to eae.results:72 hours after stimulating with cytokine in vitro, there were no bmscs to differentiate to oligodendrocyte. then 4 days later,45% bmscs differentiated to oligodendrocytes. bmscs could also migrate to the spinal cord where demyelination occurred. by injecting bmscs into the rat tail vein,patholoqical demyelination of central nerve system and inflammatory infiltration were lighten to some extent.the amount of cd4+ and cd8+t cells and the concentrations of ifnγ and tnfα in the sera significantly decreased（p<0.05）, while that of il4 increased significantly（p<0.05）.conclusion:bmscs have the capacity to migrate to the injured tissues and differentiate into oligodendrocyte. bmscs may reverse the disbalance of th1/th2 cells by regulating the cytokines production to take an important part in treatment of eae.

［key words］eae；bmscs；differentiation；cytokines

多發(fā)性硬化(mutiple sclerosis，ms)是一種常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘性疾病，發(fā)病原因尚不清楚［1］。wWw.133229.cOM目前認(rèn)為ms是由cd4+t細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)自身免疫性疾病，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)失衡是導(dǎo)致疾病的關(guān)鍵因素。eae（experimental autoimmune encephalomyelitis）是公認(rèn)的多發(fā)性硬化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，其臨床癥狀、神經(jīng)電生理和組織病理上與ms非常相似，是研究多發(fā)性硬化的良好模型。骨髓基質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow stem cells，bmscs）是一種具有很強(qiáng)的自我更新能力和分化潛能的成體干細(xì)胞，能分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞等［2，3］。既然ms累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘，破壞少突膠質(zhì)細(xì)胞，我們能否通過將bmscs回輸?shù)絜ae大鼠體內(nèi)，使其分化成受損的細(xì)胞，修復(fù)組織損傷，以達(dá)到緩解疾病的目的？為了探討以上問題，我們進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。

在本實(shí)驗(yàn)中，我們建立eae動(dòng)物模型，同時(shí)分離、純化、標(biāo)記同品系大鼠bmscs, 通過尾靜脈回輸bmscs，對bmscs進(jìn)行示蹤，并檢測其是否存在分化，對eae發(fā)病情況進(jìn)行評估，同時(shí)在體外檢測bmscs分化成少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力，探討治療機(jī)制，為ms的治療提供新的思路和方法。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雌性lewis大鼠20只，體重150～160 g，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司；mbp6886多肽合成于北京博奧森生物技術(shù)有限公司；pkh26、lfb購自sigma公司；n2購自gibco公司；fgf、bdnf購自pepro tech公司；mouse antirat cd4、mouse antirat cd8購自biolegend公司；mouse anti oligodendrocyte marker o4 monoclonal antibody購自chemicon 公司；antimousetric購自北京中山金橋生物公司；goat antimousehrp、fitc標(biāo)記山羊抗小鼠igg購自中杉金橋公司；ifnγ、tnfα、il4 elisa試劑盒購自北京晶美生物工程有限公司。

1.2 方法

1.2.1 bmscs的分離、純化及培養(yǎng)

無菌取lewis大鼠股骨和脛骨骨髓，制備細(xì)胞懸液，37℃、5%co2原代培養(yǎng)。3天后換液，待細(xì)胞長成集落后消化分散，以后細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶底80%～90%時(shí)傳代，3代后，純度達(dá)到95%。

1.2.2 體外誘導(dǎo)bmscs向少突膠質(zhì)細(xì)胞分化及鑒定

將未成層bmscs（約5×105）用dmem、10%fbs、1 mmol/l βme的培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時(shí)后，換成dmem、2%dmso、200 μmol/l bha的培養(yǎng)基培養(yǎng)2天。此時(shí)細(xì)胞呈球形，懸浮于培養(yǎng)液中。收集懸浮細(xì)胞于nb培養(yǎng)基中，加入n2和fgf(40 ng/ml)進(jìn)行培養(yǎng)，每天更換fgf。培養(yǎng)7～15天后收集形成的神經(jīng)球，上板置于nb培養(yǎng)基中，同時(shí)加入n2及fgf(20 ng/ml)，培養(yǎng)2天。更換刺激因子bdnf(20 ng/ml)培養(yǎng)72小時(shí)或4天后，固定，進(jìn)行組化鑒定：pbs洗3遍后，滴加1∶50稀釋的mouse monoclonal antibody o4，37℃作用30分鐘，pbs洗后滴加1∶50稀釋的antimousetric igg，37℃ 30分鐘，pbs洗3次，晾干，熒光顯微鏡觀察、照相、分析。

1.2.3 eae動(dòng)物模型的建立

每只大鼠尾根部皮下注射含有25 μg mbp6886的混合免疫乳劑200 μl，隔天稱重，觀察發(fā)病情況，按照如下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行臨床評分：0級(jí)：無異常；1級(jí)：尾部張力降低，尾尖上翹；2級(jí)：尾癱，翻正反射部分缺失；3級(jí)：翻正反射缺失；4級(jí)：步態(tài)失調(diào)、姿態(tài)異常；5級(jí)：后肢輕癱；6級(jí)：后肢中度癱瘓；7級(jí)：后肢嚴(yán)重癱瘓；8級(jí)：四肢癱瘓；9級(jí)：瀕死；10級(jí)：死亡。

1.2.4 bmscs標(biāo)記、回輸

按照說明書步驟，用pkh26標(biāo)記bmscs，于免疫后第6天，從尾靜脈給lewis大鼠回輸（約2×106個(gè)細(xì)胞/大鼠）。

1.2.5 組織取材

于發(fā)病高峰期處死大鼠，取出血、脊髓和淋巴結(jié)。將血離心，取出上清，-30℃冷凍保存。脊髓固定，分別截取頸段、腰段和骶段制備冰凍切片和石蠟切片。淋巴結(jié)制成單細(xì)胞懸液。

1.2.6 免疫組化檢測中樞神經(jīng)cd4+和cd8+的t細(xì)胞

取脊髓冰凍切片，冷丙酮固定20分鐘，3%h2o2作用15分鐘，0.1%triton x100溶液中作用20分鐘，馬血清封閉，室溫1小時(shí)。加一抗：mouse antirat cd4（7 μg/ml）；mouse antirat cd8（7 μg/ml），4℃孵育過夜。加1∶250稀釋goat antimousehrp，室溫孵育2小時(shí)。dab顯色，蘇木素復(fù)染，梯度酒精脫水，二甲苯透明后封片，鏡檢。

1.2.7 elisa檢測血清中ifnγ、tnfα、il4分泌水平

按照elisa試劑盒說明書步驟，將血清進(jìn)行1∶10、1∶5和1∶1稀釋、上板，分別檢測ifnγ、tnfα和il4。

1.2.8 he染色及l(fā)fb染色檢測中樞神經(jīng)的炎細(xì)胞浸潤和病理改變

脊髓的石蠟切片脫蠟至水，進(jìn)行常規(guī)he染色，檢測炎細(xì)胞浸潤情況。同時(shí)進(jìn)行l(wèi)fb染色檢測脊髓的脫髓鞘情況：將切片浸入lfb溶液中染色37℃過夜；0.005%碳酸鋰分化10秒；70%酒精分化30～60秒；蘇木素復(fù)染；脫水脫酒精，封片。

1.2.9 bmscs示蹤和o4免疫組化雙熒光標(biāo)記

熒光顯微鏡檢查脊髓冰凍切片標(biāo)記紅色熒光的bmscs，在同一張玻片上用少突膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志o4進(jìn)行免疫熒光組化染色，方法同1.2.2。熒光顯微鏡照相，疊加、分析。

1.2.10 t淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)

將淋巴細(xì)胞（調(diào)整細(xì)胞濃度為2×106）培養(yǎng)到96孔板上，200 μl/孔。同時(shí)加入mbp6886（10 μg/ml）或cona（5 μg/ml），37℃、5%co2培養(yǎng)60小時(shí)，加入3hmethylthymidine(1 μci/孔)。37℃、5%co2培養(yǎng)24小時(shí)，收集細(xì)胞于玻璃纖維濾紙上，用βcounter檢測。

1.2.11 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

統(tǒng)計(jì)結(jié)果采用x±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，用p<0.05、p<0.01或p<0.001表示差異的顯著性。

2 結(jié)果

2.1 bmscs在體外經(jīng)化學(xué)誘導(dǎo)分化成少突膠質(zhì)細(xì)胞

體外化學(xué)誘導(dǎo)72小時(shí)后沒有bmscs發(fā)生分化，少突膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志o4免疫熒光組化檢測陰性（圖1a）；而4天后部分bmscs發(fā)生分化，o4免疫熒光組化檢測發(fā)出紅色熒光，約有45%的bmscs發(fā)生了轉(zhuǎn)化（圖1b）。

2.2 bmscs在體內(nèi)能向神經(jīng)損傷部位游走，并部分向少突膠質(zhì)細(xì)胞分化

用紅色熒光標(biāo)記bmscs，回輸?shù)絜ae大鼠體內(nèi)，在發(fā)病高峰期處死大鼠，取出脊髓組織制作冰凍切片，熒光顯微鏡觀察，可以觀察到部分bmscs向脫髓鞘神經(jīng)組織周圍遷移游走（圖2b）；在同一張切片上作o4的免疫熒光組化，發(fā)現(xiàn)部分bmscs可以表達(dá)o4而呈現(xiàn)綠色熒光（圖2a）。經(jīng)分析疊加，pkh26標(biāo)記的o4+ bmscs呈現(xiàn)出紅色、綠色的疊加色——黃色熒光（image pro plus軟件，media cybernetics 美國）（圖2c）。

2.3 bmscs對eae的發(fā)病起治療作用

bmscs回輸組大鼠eae發(fā)病時(shí)間晚，癥狀輕，疾病最高平均得分與對照組比較有顯著性差異（1.3±0.6 vs 6.7±

2.6, p<0.05），見圖3。

2.4 eae的病理改變與炎性細(xì)胞的浸潤

發(fā)病高峰期取出大鼠脊髓進(jìn)行he及l(fā)fb染色，結(jié)果顯示對照組大鼠脊髓中有較多炎性細(xì)胞浸潤，脫髓鞘改變嚴(yán)重；而bmscs回輸組大鼠體內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤較對照組明顯減少，脫髓鞘程度減輕，見圖4。

2.5 免疫組化檢測eae的cd4+t和cd8+t淋巴細(xì)胞的表達(dá)

發(fā)病高峰取中樞神經(jīng)脊髓作cd4+t和cd8+t淋巴細(xì)胞免疫組化檢測，并在100×顯微鏡下計(jì)數(shù)整個(gè)脊髓組織面積的陽性細(xì)胞數(shù)（單位：陽性細(xì)胞數(shù)/mm2），結(jié)果顯示cd4+t、cd8+t細(xì)胞在回輸組中的表達(dá)明顯低于對照組，且均具有顯著性差異（p<0.05）。在回輸組中cd4+t/cd8+t細(xì)胞的值為1.23，低于對照組的1.53，見表1、圖5和圖6。表1 脊髓神經(jīng)cd4+和cd8+t淋巴細(xì)胞的表達(dá)（略）

2.6 elisa檢測外周血清和淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子的分泌水平 用elisa法檢測血清ifnγ、tnfα、il4的分泌水平。結(jié)果顯示，回輸組的ifnγ、tnfα的分泌水平較對照組低，而il4的分泌則高于對照組，且與對照組比較ifnγ、tnfα和il4的分泌水平均具有顯著性差異（p<0.05），見表2和圖7。表2 ifnγ、tnfα、il4在血清中的分泌水平（略）

2.7 t淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn) 于發(fā)病高峰取淋巴結(jié)制成單細(xì)胞懸液，進(jìn)行t淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測，結(jié)果顯示：對照組的cpm值明顯高于回輸組(p<0.05)，見表3和圖8。表3 t淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)（略）

3 討論

bmscs作為一種具有多種分化潛能的干細(xì)胞，經(jīng)許多研究證實(shí)，在體內(nèi)或特定的體外培養(yǎng)條件下，可以分化為各種神經(jīng)細(xì)胞，充分顯示出其治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的潛能［4，5］。

最新研究表明將人bmscs靜脈回輸給eae小鼠，能夠顯著降低小鼠的死亡率及發(fā)病的嚴(yán)重程度。bmscs可以通過促進(jìn)分泌神經(jīng)生長因子（nerve growth factor, ngf）以及腦源性神經(jīng)生長因子（brainderived neurotrophic factor, bdnf)恢復(fù)eae小鼠受損的神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)功能。在長期觀察中，bmscs回輸組與非回輸組小鼠相比，發(fā)病率和臨床評分均有顯著性差異［6，7］。但是，這些研究僅從bmscs促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞功能恢復(fù)角度探討bmscs治療eae, 沒有涉及bmscs作為免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)因子，對eae的免疫調(diào)節(jié)作用。

為探討bmscs對eae的治療作用及其機(jī)制，我們尾靜脈給eae大鼠回輸bmscs，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，回輸組與對照組相比，在疾病的發(fā)生過程中，臨床癥狀較輕，體重下降的趨勢較緩，臨床評分具有顯著性差異（p<0.05）。在病理改變上，回輸組中樞神經(jīng)脊髓炎細(xì)胞浸潤較少，髓鞘脫失程度較輕。這表明bmscs的回輸，延遲了疾病的發(fā)生，同時(shí)降低了疾病的反應(yīng)性。

在體外實(shí)驗(yàn)中能夠檢測到部分bmscs通過化學(xué)誘導(dǎo)可以轉(zhuǎn)化成為少突膠質(zhì)細(xì)胞；在體內(nèi)，通過熒光標(biāo)記示蹤發(fā)現(xiàn)bmscs能夠向受損部位遷移，并部分分化成少突膠質(zhì)細(xì)胞。體內(nèi)和體外的實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明bmscs可以通過向損傷組織遷移并分化成少突膠質(zhì)細(xì)胞修復(fù)受損髓鞘，降低eae發(fā)病。

cd4+t細(xì)胞在調(diào)節(jié)自身免疫性疾病中起了重要作用，在ms的急性發(fā)作期患者的腦脊液和血液中cd4+t細(xì)胞的數(shù)量明顯上升，而cd8+t細(xì)胞的數(shù)量則明顯下降［8］。本實(shí)驗(yàn)的cd4+t和cd8+t細(xì)胞免疫組化結(jié)果顯示，回輸組中cd4+t和cd8+t細(xì)胞的數(shù)量均低于對照組，有顯著性差異（p<0.05）；對照組cd4+/cd8+值高于回輸組。這提示我們bmscs還可能通過下調(diào)致敏的淋巴細(xì)胞的數(shù)量，降低機(jī)體的免疫反應(yīng)，恢復(fù)cd4+/cd8+之間的平衡。雖然目前對cd8+t細(xì)胞在eae和ms的致病機(jī)制的研究中尚無確切的定論，但從本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果可以看出，cd8+t細(xì)胞可以調(diào)節(jié)cd4+與cd8+之間的比例，降低機(jī)體的免疫反應(yīng)，促進(jìn)機(jī)體向平衡狀態(tài)恢復(fù)。

cd4+t細(xì)胞可分為th1和th2兩大類，相互作用, 彼此調(diào)節(jié)［9］。在eae及ms的研究中發(fā)現(xiàn)th1細(xì)胞所分泌ifnγ、tnfα等促炎性細(xì)胞因子的增加及th2細(xì)胞所分泌il4等抑炎性細(xì)胞因子減少，導(dǎo)致了th1/ th2細(xì)胞比例的失衡，這可能是ms及eae發(fā)病過程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)［1012］。eae時(shí)，活化的t細(xì)胞進(jìn)入cns產(chǎn)生破壞性細(xì)胞因子ifnγ、tnfα等，它們可促進(jìn)炎性介質(zhì)的釋放并直接或間接的殺傷少突膠質(zhì)細(xì)胞，使髓鞘形成障礙，導(dǎo)致脫髓鞘［13］。il4可下調(diào)th1細(xì)胞的活性及炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生，從而促使eae恢復(fù)。

本實(shí)驗(yàn)elisa結(jié)果顯示血清中，與對照組相比回輸組的ifnγ、tnfα的濃度明顯下降，而il4的濃度升高，并且均具有顯著性差異（p<0.05）。這提示我們，bmscs通過調(diào)節(jié)t細(xì)胞的活性，減少th1細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的量，下調(diào)其致炎活性；同時(shí)增加th2細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的量，增強(qiáng)其免疫抑制作用，從而平衡紊亂的th1細(xì)胞和th2細(xì)胞的比例，促進(jìn)疾病的恢復(fù)。而t細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣顯示bmscs下調(diào)了t細(xì)胞的增殖活性，可以對發(fā)生紊亂的免疫系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)節(jié)。

綜上所述，我們認(rèn)為bmscs通過兩條途徑來治療eae：①bmscs可以游走到受損髓鞘受損部位，并部分分化成少突膠質(zhì)細(xì)胞，修復(fù)受損髓鞘；②bmscs可以對免疫系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)節(jié)，降低促炎性細(xì)胞因子，促進(jìn)抑炎性細(xì)胞因子，降低t細(xì)胞的增殖活性，逆轉(zhuǎn)th1細(xì)胞與th2細(xì)胞的比例，抑制免疫反應(yīng)。

bmscs對eae治療的有效性，可以為此類自身免疫性疾病的治療提供一條新的途徑。同時(shí)，bmscs具有獲取方法簡單易行、體外擴(kuò)增相對穩(wěn)定及不存在抑制排斥反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，是移植治療的一種很好的選擇。

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篇10

【關(guān)鍵詞】 中西醫(yī)結(jié)合； 封閉抗體； 反復(fù)流產(chǎn)； 免疫治療

Integrated western and Chinese therapy on recurrent spontaneous

abortion caused by blocking antibody deficiency

ZHOU Aixiang

Department of Obstetrics and Gynaecology, Ma Anshan Municipal Hospital of Women

and Children’s Health, Anhui 243000, China

【Abstract】 Objectives: To explore the effect of Integrated western and Chinese therapy on recurrent spontaneous abortion caused by blocking antibody deficiency. Methods: Eighty-six patients were selected and randomly divided into the treatment group(46 cases) and the control group(40 cases). The control group was treated with the spouse’s lymphocyte immunotherapy. The treatment group was treated with supplement Yupinfengsan combined with lymphocyte immunotherapy. Immunotherapy was administered once every 3 weeks and 4 times as a treatment course. The therapeutic effects were observed after two treatment courses. Results: Among 86 patients who finished the treatments, 11 of the control group showed positive blocking antibody after one treatment course, 21 showing positive after two treatment courses; 24 of the treatment group indicated positive antibody after one course, 20 cases revealing positive after two courses. The control group produced 30 cases of successful pregnancy, and the treatment group producing 42 cases. The treatment group showed significant advantage over the control group in BA positive-transforming speed, rate and in pregnancy success rate (P

【Key words】 Integrated Chinese and western therapy； Blocking antibody; Recurrent spontaneous abortion; Immnothearpy

反復(fù)自然流產(chǎn)( recurrent spontaneous abortion, RSA) 是指連續(xù)2次或2次以上的自然流產(chǎn)，發(fā)生率為0.4%~5%。導(dǎo)致RSA的原因比較復(fù)雜，包括染色體、解剖、內(nèi)分泌、感染、自身抗體的產(chǎn)生等因素，其中與封閉抗體( blocking antibodies,BA)缺乏最為密切，臨床檢出率較高。BA是指在正常妊娠中，滋養(yǎng)細(xì)胞攜帶的父系抗原刺激母體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一類IgG抗體。它可以和母體淋巴細(xì)胞及胚胎的滋養(yǎng)細(xì)胞相結(jié)合，從而阻斷母兒之間的抗原識(shí)別及其引起的繼發(fā)排斥反應(yīng)。RSA在祖國醫(yī)學(xué)中屬于“滑胎”的范疇，辨為脾腎兩虛、氣血不足，在其治療上積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。筆者在臨床中多運(yùn)用中西醫(yī)結(jié)合治療BA不足引起的RSA，效果顯著，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 病例選擇

2009年7月~2011年2月，共收集封閉抗體缺失所致反復(fù)自然流產(chǎn)患者86例，年齡20~35歲，隨機(jī)分為中西醫(yī)結(jié)合治療組46例，西醫(yī)治療對照組40例。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

①連續(xù)2次或2次以上自然流產(chǎn)；②男方常規(guī)分析在正常范圍，性生活正常，無內(nèi)分泌及其他免疫性疾病史；③雙方染色體核型分析正常；④女方無內(nèi)分泌失調(diào)及子宮畸形等疾病，無弓形體、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒、風(fēng)疹病毒感染，抗子宮內(nèi)膜抗體、抗抗體、抗磷脂抗體、抗核抗體、抗卵巢抗體等為陰性；⑤外周血封閉抗體CD3、CD4、CD8檢測至少有一項(xiàng)為陰性；⑥雙方無乙肝、丙肝、HIV、梅毒等傳染病。

1.3 研究方法

1.3.1 檢測方法 取患者丈夫的外周抗凝全血100μl加入鼠抗人CD3、CD4、CD8 單克隆抗體20μl，再加入患者血清或正常男性AB型血清50μl，孵育30min，加入紅細(xì)胞溶解液3ml，PBS洗滌2次，以流式細(xì)胞儀分析出加女性血清及加AB型血清的配偶淋巴細(xì)胞CD3、CD4、CD8細(xì)胞比例，按如下公式計(jì)算封閉抗體效率：封閉效率=加AB型血清CD比例(%)―加女性血清CD比例(%)，正常生育組封閉效率(X-1.96s)，大于此值者為陽性，小于者為陰性[1]。

1.3.2 治療方法 對照組治療：采集丈夫靜脈血3~5 ml，肝素抗凝處理。用相同體積的淋巴細(xì)胞分離液分離出淋巴細(xì)胞，用無菌生理鹽水清洗兩次，將最后得到的淋巴細(xì)胞濃度調(diào)整為(20~40)×106/ml[2]。取此淋巴細(xì)胞液1 ml于患者前臂皮下注射，呈扇形分布。每次間隔3周，在前臂交替進(jìn)行。4次為一個(gè)療程。一個(gè)療程后2周復(fù)查封閉抗體，轉(zhuǎn)陽性后，安排受孕，如為陰性則繼續(xù)加強(qiáng)一個(gè)療程治療。妊娠后再免疫治療2次，每次間隔3周，并合用黃體酮保胎治療。治療組治療：按西醫(yī)的免疫處理外，再服用加味玉屏風(fēng)散：生黃芪30g、白術(shù)20g、防風(fēng)10g、當(dāng)歸20g、茯苓10g、雞內(nèi)金10g、山藥20g、巴戟天15g、女貞子10g、紫河車10g、肉蓯蓉10g。水煎服，每日2次。妊娠后停用中藥，改為黃體酮保胎治療。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）的格式表示。用卡方（χ2）檢驗(yàn)對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，以P

2 結(jié) 果

2.1 臨床療效

86例患者均完成了治療。對照組在免疫治療一個(gè)療程后，封閉抗體全部轉(zhuǎn)陽有11例，第二療程有21例；治療組在第一個(gè)療程后轉(zhuǎn)陽24例，第二療程有20例。治療組在封閉抗體第一療程轉(zhuǎn)陽率上優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.020

具體數(shù)據(jù)見表1。

2.2 不良反應(yīng)

兩組患者在服藥期間無1例出現(xiàn)不良反應(yīng)。

3 討 論

BA是母體針對胚胎抗原產(chǎn)生的一種保護(hù)性抗體。研究表明，77%正常分娩史者BA為陽性，而88%RSA患者的BA為陰性[3]。如果妊娠時(shí)缺乏足夠的BA，母體就會(huì)引起同種免疫識(shí)別保護(hù)功能低下，母體免疫系統(tǒng)容易對胎兒作異物排斥，進(jìn)而造成流產(chǎn)[4]。

淋巴細(xì)胞免疫治療是臨床治療BA缺失性RSA的常用方法，其目的是增加習(xí)慣性流產(chǎn)患者體內(nèi)抗丈夫白細(xì)胞抗體(antipaternal lukocyte antibody, APLA)的水平，使再次妊娠得以成功[5]。本實(shí)驗(yàn)也證實(shí)淋巴細(xì)胞免疫治療兩個(gè)療程的轉(zhuǎn)陽率能達(dá)到80%，成功妊娠率能達(dá)到75%。

本病的病名在中醫(yī)學(xué)中并無記載，根據(jù)其臨床表現(xiàn)當(dāng)屬“滑胎”的范疇。與全身臟腑氣血功能、沖任二脈及胞宮均有關(guān)系，其中與氣血和脾腎的關(guān)系尤為密切。氣血失調(diào)，則胎失所養(yǎng)，胎元不固，而致墮胎。腎虛不能司封藏之職，不能助子宮之藏；脾氣不足，氣血乏源，影響胚胎發(fā)育，發(fā)為墮胎。因此益氣養(yǎng)血、補(bǔ)腎健脾是治療RSA的常用治法。筆者在臨床應(yīng)用加味玉屏風(fēng)散聯(lián)合免疫療法治療RSA，效果顯著。方中玉屏風(fēng)散強(qiáng)衛(wèi)固表，疏風(fēng)散邪。藥理學(xué)研究證明黃芪不僅能促進(jìn)體液免疫，提高免疫球蛋白的含量，而且能改善細(xì)胞營養(yǎng)，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成與能量代謝，擴(kuò)張外周血管，增進(jìn)血液循環(huán)，有利于提高抗病能力，對免疫系統(tǒng)具有雙向調(diào)節(jié)作用[6]。當(dāng)歸活血養(yǎng)血并重。茯苓、山藥、雞內(nèi)金補(bǔ)脾健胃，后天充足則氣血自旺，現(xiàn)代藥理表明茯苓多糖有增強(qiáng)免疫功能的作用，山藥對小鼠細(xì)胞免疫功能和體液免疫有較強(qiáng)的促進(jìn)作用。巴戟天、女貞子、紫河車、肉蓯蓉補(bǔ)腎填精，陰陽平補(bǔ)。研究表明，女貞子可增強(qiáng)非特異性免疫功能，對異常的免疫功能具有雙向調(diào)節(jié)作用。肉蓯蓉水提液小鼠灌胃，能顯著增加脾臟和胸腺重量，增強(qiáng)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力，提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和遲發(fā)性超敏反應(yīng)指數(shù)。紫河車中含有多種酶系統(tǒng)，增強(qiáng)機(jī)體抵抗力，提高免疫及抗過敏作用[7]。本研究也證實(shí)，免疫治療聯(lián)合加味玉屏風(fēng)散能顯著提高封閉抗體的轉(zhuǎn)陽率以及轉(zhuǎn)陽的速度，優(yōu)于單純免疫治療組（P

因此，基于本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果，我們證實(shí)中西醫(yī)結(jié)合治療BA缺失性RSA療效肯定。但是，其具體的作用機(jī)制仍不清楚，有待于進(jìn)一步深入研究。

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