導(dǎo)語：如何才能寫好一篇詠雪聯(lián)句，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公文云整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

《義務(wù)教育語文課程標(biāo)準》指出：“語文課程應(yīng)致力于學(xué)生語文素養(yǎng)的形成與發(fā)展”“引導(dǎo)學(xué)生豐富語言的積累，培養(yǎng)語感，發(fā)展思維，初步掌握學(xué)習(xí)語文的基本方法，養(yǎng)成良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣，使他們具有適應(yīng)實際需要的識字寫字能力、閱讀能力、寫作能力、口語交際能力”。語文教學(xué)中，詞匯的積累、把句子說完整的訓(xùn)練等等，對學(xué)生將來的語言表達具有無可替代的作用。因此，一方面，我們教學(xué)時不可忽視這些“細節(jié)”；另一方面，我們應(yīng)針對小學(xué)各個階段學(xué)生的身心發(fā)展特點、知識儲備和能力基礎(chǔ)，進行相應(yīng)的字、詞、句、段、篇的訓(xùn)練，從整個小學(xué)階段的高度把握訓(xùn)練的尺度，使這一要求呈現(xiàn)螺旋上升的良性態(tài)勢。唯有如此，才能讓語文工具性的訓(xùn)練具備序列化的特點。

當(dāng)前小學(xué)語文課堂中，針對“學(xué)用字詞句”練習(xí)部分的教學(xué)存在以下問題。

【存在問題】

一、 編者意圖的“跳躍性空白”

“以學(xué)生為本，走綜合之路，貼近學(xué)生實際，創(chuàng)設(shè)生活化場景，提高學(xué)生學(xué)用能力”是“學(xué)用字詞句”練習(xí)編寫的中心原則和特點。但是一道道練習(xí)題之間的聯(lián)系由于文本平面性所固有的束縛、版面的限制以及編者思維的跳躍性，呈現(xiàn)出一種文本所特有的跳躍性空白。由于能力限制，這種空白對于一些執(zhí)教者來說恰恰是備課過程中認識水平難以逾越的一道鴻溝，客觀上造成了教師因為對文本理解的不到位而割裂項目訓(xùn)練之間的內(nèi)在聯(lián)系的、單一化的、以完成練習(xí)題為目的的課堂教學(xué)。以至于整節(jié)課呈現(xiàn)出一種“做題—核對答案—再做題—再核對答案”的單向循環(huán)，課堂效率極低。

二、 教師課堂教學(xué)的理解性缺失

1.對學(xué)生現(xiàn)有知識經(jīng)驗、生活經(jīng)驗了解不深入，盲目設(shè)定教學(xué)目標(biāo)

這種在日常閱讀教學(xué)中時常出現(xiàn)的問題，在看似簡單的綜合練習(xí)課上仍舊出現(xiàn)，并且執(zhí)教者往往不自知，甚至因為學(xué)生的“不配合”而郁悶不已。比如，第三冊練習(xí)8“看圖寫話·踢足球”，學(xué)生對此題目感到困難絕不是因為他們不愛這項運動，也不是因為他們不樂于表達，而是在于他們?nèi)狈@項運動的深入了解（比如運動規(guī)則、專業(yè)術(shù)語之類）。

2.缺乏細致的教學(xué)環(huán)節(jié)的預(yù)設(shè)與教學(xué)生成的處理機智，課堂教學(xué)受眾單一

貌似平實的練習(xí)，實則環(huán)環(huán)相扣，“牽扯”眾多。如果教師課前缺乏細致全面的預(yù)設(shè)，或在課堂上缺乏教學(xué)生成的處理機智，一不小心，課堂教學(xué)就會陷入被動。最終的處理結(jié)果，要么是教者抓過一名優(yōu)秀生迅速“解決問題”，使課堂成為“展示臺”“一言堂”；要么是教者“虛晃一槍”，以回家作業(yè)的形式“下放”權(quán)力給家長，讓該項練習(xí)的課堂教學(xué)流于形式。這最終將造成學(xué)生對該練習(xí)存在的漠視，極大地浪費了教材資源。

三、 學(xué)生認知局限造成的淺嘗輒止的缺憾

充滿兒童情趣的“學(xué)用字詞句”練習(xí)閃爍著“人文的關(guān)愛”，形成了學(xué)生“上手快，丟得更快”的尷尬。學(xué)生在輕易地成功面前迷失了自我，最終對于“學(xué)用字詞句”的學(xué)習(xí)往往只是蜻蜓點水般淺嘗輒止，既不深入也不持久，更遑論融會貫通，進而養(yǎng)成習(xí)慣了。

【教學(xué)策略】

一、“補白”，勾連項目，構(gòu)建綜合學(xué)習(xí)板塊

針對教材的“跳躍性空白”，一方面我們應(yīng)該內(nèi)延相關(guān)概念，以期勾連各練習(xí)項目，達到引導(dǎo)學(xué)生領(lǐng)會其內(nèi)在聯(lián)系的目的；另一方面我們還應(yīng)該適度拓展，努力構(gòu)建綜合學(xué)習(xí)的板塊，讓每次“學(xué)用字詞句”練習(xí)的效益最大化。

教師要仔細研讀課標(biāo)、教參，廣泛查閱相關(guān)文獻資料，深入了解編者意圖，理解教材編纂的目的，適度“補白”，為教材的二度開發(fā)奠定堅實的理論基礎(chǔ)和正確的教學(xué)理念。

比如，第二冊練習(xí)8“看圖涂色·填詞·說話”，如果僅僅就題做題，那么勢必割裂該項三個練習(xí)題之間的內(nèi)在聯(lián)系，達不到1+1>2的預(yù)期目標(biāo)。事實上，現(xiàn)行絕大多數(shù)教案都拘泥于教材表面所呈現(xiàn)出來的對于涂色、寫字的練習(xí)，使得課堂教學(xué)“一片繁榮”。隨后又花費大量時間在學(xué)生說話訓(xùn)練上，卻又因為學(xué)生們各自根據(jù)圖意編故事而難以逐一輔導(dǎo)，造成課堂上只有個別優(yōu)秀生展示，絕大多數(shù)學(xué)生無話可說的現(xiàn)象。實際上，這恰恰是對本題按照“字—詞—句—段”逐層遞進的訓(xùn)練意圖視若無睹的體現(xiàn)。

新課標(biāo)要求第一學(xué)段的學(xué)生“樂于運用閱讀和生活中學(xué)到的詞語”“能較完整地講述小故事”。顯而易見，對于剛剛開始學(xué)習(xí)規(guī)范表達的一年級學(xué)生，應(yīng)該以漢字的使用、詞語的積累、完整句式的訓(xùn)練為主，幫助他們初步樹立講述完整故事的意識，并且做到“見好就收”。因此，面對完整體現(xiàn)了“表象—字—詞—句—段”的語言形成過程的本篇教材，以下的教學(xué)設(shè)計，尤其是第三、第四層次的“補白”對于低年段學(xué)生不可或缺。

第一層次：涂色。激發(fā)興趣的同時，自然地引導(dǎo)出學(xué)生細致的前期觀察，解決對事物的認知問題，為后面深入的語言表達做準備。

第二層次：寫字。在學(xué)生學(xué)會運用文字表達確切意思的同時，繼續(xù)練習(xí)端端正正地寫字。

第三層次：擴詞。讓學(xué)生在“填上合適的詞”的練習(xí)中，積累能夠把句子說具體的短語，初步形成運用形容詞能夠使事物描述得更加具體、生動的意識，為進一步的學(xué)習(xí)奠定基礎(chǔ)。

第四層次：照樣子補充句子、組合句子。由詞到句，滲透使用形容詞以及把句子說完整的概念，培養(yǎng)學(xué)生的語感，并且解決后面講故事的素材問題。

第五層次：編故事。由句到段到篇，讓學(xué)生運用剛剛練習(xí)所得的詞句連綴成話，并且要言之有物。

層層推進、環(huán)環(huán)相扣的教學(xué)設(shè)計，很好地解決了學(xué)生語言表達的材料問題，使本節(jié)課清晰地呈現(xiàn)出“積累—簡單運用—綜合性運用”的層次感、梯度感，這足以引起我們對教材“留白”處的深思，以及如何“補白”的探究熱情。

二、對話，巧設(shè)訓(xùn)練坡度，教學(xué)目標(biāo)多元化

備課期間，教師認真與文本、編者及學(xué)生對話尤為重要。只有心中有教材、有編者、有學(xué)生，課堂教學(xué)才能立體起來，呈現(xiàn)出科學(xué)訓(xùn)練所特有的坡度，也正因為有了這樣的多邊對話，學(xué)生的語言學(xué)習(xí)才會呈現(xiàn)出異彩紛呈的多元化局面。

1.充分了解學(xué)生現(xiàn)有的知識經(jīng)驗及生活經(jīng)驗，及時解決學(xué)生面臨的“無米之炊”的尷尬。

仍以第三冊練習(xí)8“看圖寫話·踢足球”為例，教師教學(xué)時立足于學(xué)生知識經(jīng)驗、生活經(jīng)驗的欠缺，以適量提供詞語及句式的方式彌補了學(xué)生關(guān)于足球運動的“知識盲點”和學(xué)生較少接觸正式的足球運動造成的“生活盲點”，以及由于該運動過快造成的學(xué)生難以觀察、描摹細致的“習(xí)作盲點”。教師適度地指導(dǎo)學(xué)生觀察、敘述的視角，有效地解決了學(xué)生描寫場面時敘述混亂無序的毛病。

教師提供關(guān)于足球運動的詞、句：

生龍活虎、汗流浹背

傳、帶、飛奔而來、抬腿、繃直腳背、飛起一腳、劃過一道優(yōu)美的弧線

伸出雙手、向上躍起、奮不顧身

緊張、狂喜、歡呼雀躍、噓聲一片、一蹦三尺高

有的……有的……還有的……

一會兒……一會兒……

可以想見，在這樣的精心設(shè)計中，雖然每個學(xué)生最終的說話內(nèi)容不盡相同，但是他們的語言能力都得到了穩(wěn)步提高，而且基礎(chǔ)扎實，很難出現(xiàn)語言不通，或者無話可說的狀況。這種多元化的學(xué)習(xí)目標(biāo)，才能夠真正達成編者編撰“學(xué)用字詞句”練習(xí)的目的，達到優(yōu)化課堂教學(xué)效率的目標(biāo)。

2.教學(xué)預(yù)設(shè)力求全面，細化教學(xué)實施步驟，面向全體落實訓(xùn)練

蘇教版教材中“學(xué)用字詞句”的練習(xí)尤其彰顯了立足于“生本”的特色。比如，第三冊練習(xí)1-3的“音序查字法”，第四冊練習(xí)1-4的“部首查字法”，以及第四冊練習(xí)8、第五冊練習(xí)6的“選擇正確讀音”，第五冊練習(xí)2的“選擇正確義項”，還有第六冊練習(xí)4的“學(xué)習(xí)查詞典”等。這一系列教給學(xué)生如何使用工具書的方法的練習(xí)，淺顯、實用，讓學(xué)生在最短的時間里學(xué)會了最基本的語文學(xué)習(xí)技能，并能為學(xué)生終身發(fā)展服務(wù)。

但是實際操作中，卻不乏把該項練習(xí)以回家作業(yè)的形式“布置”給家長的“聰明”教師。于是，學(xué)生們形形的不正確、不科學(xué)的查閱工具書的方法層出不窮，最后以家長埋怨、教師暴怒、學(xué)生迷糊結(jié)束。若問教師：為什么會把“權(quán)力下放”？答曰：這又不難，但是在課堂上，卻很難整齊劃一地教學(xué)，不如“化整為零”，還節(jié)省時間呢。

這樣的答案歸根結(jié)底是教師的惰性在作怪。如果我們動動腦筋，那么就不難把使用工具書的方法劃分為幾個清晰的步驟，進而利用課堂時間，由扶到放，給予學(xué)生充分的實際操作時間，有效引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)正確的使用方法和思維模式，為今后的學(xué)習(xí)奠定堅實的基礎(chǔ)。

當(dāng)然，僅僅如此是遠遠不夠的，教師還要長期堅持，以布置預(yù)習(xí)作業(yè)的方式要求學(xué)生查字典、選讀音、選義項，從而引導(dǎo)學(xué)生熟練掌握使用工具書的方法。長此以往，學(xué)生就能形成良好的使用工具書的習(xí)慣，從長遠看也奠定了學(xué)生全面發(fā)展和終身發(fā)展的基礎(chǔ)。

事實上，不僅是如何使用工具書，對于語法學(xué)習(xí)的引導(dǎo)更需要教師的“垂直”指導(dǎo)和堅持。比如，第四冊練習(xí)7、第六冊練習(xí)8的“學(xué)用標(biāo)點符號”，第七冊練習(xí)1的“避免重復(fù)”等練習(xí)，課堂上的朗讀、討論和交流，可以有效地讓學(xué)生在探究的過程中明白，不同的標(biāo)點符號表示不同的停頓與語氣，前后句子的主語應(yīng)該避免重復(fù)，正確使用代詞可以有效精煉語句等。教師如果能夠堅持在課堂教學(xué)中不著痕跡地通過有重點地推敲一些標(biāo)點符號來指導(dǎo)朗讀，指導(dǎo)學(xué)生聯(lián)系上下文理解一些關(guān)鍵性的代詞的含義，必能為學(xué)生以后正確使用標(biāo)點符號、流暢行文奠定基礎(chǔ)。相對的，蜻蜓點水式的讀過，由優(yōu)秀生代替全體學(xué)生完成教師眼中簡單至極的練習(xí)的做法，是肯定不能達到這樣的效果的。

三、“留白”，創(chuàng)設(shè)情境實踐，培養(yǎng)良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣

基于“語文課程的多重功能和奠基作用”，我們需要在課堂教學(xué)之外留下“空白”，創(chuàng)設(shè)情境給予學(xué)生大量的實踐語言的機會，最終達到培養(yǎng)學(xué)生良好學(xué)習(xí)習(xí)慣的目的。

“學(xué)用字詞句”練習(xí)中有一批旨在拓寬學(xué)生視野，引導(dǎo)學(xué)生了解自然、了解祖國、了解生活，從而達到學(xué)語文、用語文的目的的題目。對于這樣一批訓(xùn)練題，我們不能急于在課堂上結(jié)束任務(wù)，應(yīng)該適度“留白”，給學(xué)生留下實踐和持續(xù)發(fā)展的空間。

比如，第三冊練習(xí)6的“小小氣象站”，在學(xué)完相應(yīng)的符號含義之后，我們可以在黑板的一角長期開辟一個“小小氣象員”專欄，按學(xué)號每天更新，引導(dǎo)學(xué)生觀察生活，知道氣象預(yù)報的含義及意義，懂得一些氣象專業(yè)術(shù)語，對一些地理名詞形成初步概念。

篇2

關(guān)鍵詞：西班牙語句子連詞;虛擬式;非虛擬式

中圖分類號：G648 文獻標(biāo)識碼：B文章編號：1672-1578（2014）13-0008-01

實例分析講解

1.使用虛擬式的情況

此次研究使用虛擬式的情況，所涉及的連詞主要包括：como; como si ; por si(acaso); a no ser que/ a menos que/ excepto que/ salvo que; en caso de que; a condición de que/ con la condición de que/ con tal de que; con que/ a poco que/ a nada que; a cambio de que; siempre que/ mientras

1.1 Como si (ni que) 譯為：仿佛好像Como si 無論主句動詞是什么時態(tài)，從句中表未完成時用虛擬式過去未完成時; 完成時用虛擬式過去完成時。請看以下虛擬式未完成時(Ega,Egb)和虛擬式完成時(Egc,Egd)的例子。

Eg a : La mujer trata a los jóvenes como si fuera sus propios hijos. 譯為：這女人對待這些年輕人像對待自己孩子一樣（此時的時值相當(dāng)于陳述式現(xiàn)在時）

b. Cuando entraron, no nos saludaron , como si no nos conocieran. （此時的時值相當(dāng)于陳述式過去未完成時）譯為：當(dāng)他們進來時，沒有和我們打招呼，仿佛不認識我們。

Egc: Nos contó lo ocurrido en detalle como si lo hubiera visto con sus propios ojos. (時值相當(dāng)于簡單過去時) 譯為：他給我們很細致的講述了所發(fā)生的一些仿佛他親眼看到了。

d: Por qué gritas tanto a los presentes como si ellos te hubieran ofendido.(時值相當(dāng)于一般現(xiàn)在時) 譯為：你為什么沖在場的人大聲喊叫仿佛他們侮辱了你一樣。

1.2 como /si，譯為"如果"

Eg: Como/si llegues tarde, no te esperaré. 譯為：如果你到晚了，我就不等你了。

1.3. Por si / por si acaso 譯為：以防萬一

Eg: Lleva el paraguas por si llueve .

Lleva el paraguas por si lloviera.

這兩句都可譯為：你帶著傘以防萬一下雨。但有所不同的是llover這個詞的虛擬式時態(tài)。用Llueve虛擬式現(xiàn)在時說話人傾向于很有可能下雨，而lloviera虛擬式過去未完成時說話人則傾向于下雨的可能性很小。

1.4 A no ser que/ a menos que/ excepto que/ salvo que 譯為：除非

Eg: Iremos de excursión a menos que haga mal tiempo.

我們將要去遠足除非天氣不好。

1.5 En caso de que 譯為：倘若

Eg: Creo que llegaré pronto, pero en caso de que no sea así, no me esperes.

我認為我很快會到的，但是倘若不是這樣，你不要等我。

1.6 Con que/ a poco que/ a nada que 譯為：雖然，盡管

Eg: Con que estudies un poco, aprobarás.

雖然他學(xué)的不多，但是他能過。

1.7 A cambio de que 譯為：換取

Eg: Te ayudaré con el trabajo a cambio de que me invites a cenar.

我?guī)湍愎ぷ鳎ㄒ該Q?。┠阏埼页燥垺?/p>

1.8 A condición de que/ con la condición de que/ con tal de que 譯為：只要

Eg: Te dejaré conducir a condición de que te calles.

只要你閉上嘴我就讓你開車。

1.9 Siempre que/ mientras 譯為:只要

Eg: Siempre que tengas dinero, tendrás amigos.

只要你有錢，你就會有朋。主要注意的是，"siempre que" 除了當(dāng)"只要"講時用虛擬式，"Siempre que"還可譯為"每次，" 無需使用虛擬式。如: Siempre que vengo a verte, estás ocupado. 每次我來看你，你都在忙。

可以看得出來，除了como si 與虛擬式連用作為固定搭配外，其余的連詞與虛擬式連用所表達的含義都是未來時，還未發(fā)生的。

2.使用非虛擬式的情況

2.1 Con/ sólo con/ con sólo + infinitivo(動詞原形) 譯為：雖然

Eg: Con estudiar un poco, aprobarás el examen. 雖然學(xué)的不多，但你會通過考試的。

2.2 Que.....que (si......si no....)譯為：如果......否則(如果不)......

Eg: Que hace bueno, salimos, que no, nos quedamos en casa. 如果天氣不錯，我們就出門，如果不好，就留在家里。這句話也可以用si......si no來說，si hace bueno,salimos, si no，nos quedamos en casa.

參考文獻：

篇3

【關(guān)鍵詞】拓展訓(xùn)練；體育教學(xué)；應(yīng)用實踐；效果

為了加快現(xiàn)代化教育的進程，體育教學(xué)也成為了現(xiàn)代化教育中的一個重點，它能夠更好的培養(yǎng)人才，引導(dǎo)他們向全面發(fā)展的方向前進。高職體育教學(xué)的發(fā)展也跟著時代的進程不斷地前進，為了讓高職的學(xué)生能夠更好的適應(yīng)社會，讓他們能夠提高自身的實踐能力，高職院校就利用有多種教學(xué)模式的體育教學(xué)，來激發(fā)學(xué)生自身能力。

現(xiàn)在有一些職業(yè)學(xué)院體育教學(xué)就已經(jīng)走在了前面，引入了拓展訓(xùn)練。拓展訓(xùn)練這個項目不僅僅是一個體育的教學(xué)方式，它還能夠調(diào)動學(xué)生的思考能力。拓展訓(xùn)練的設(shè)計都是具有趣味性的，通過大家的合作來完成，例如其中的穿越火線、三米跳等活動項目既有對自身的能力訓(xùn)練，還有對社交能力和合作信任等方面進行訓(xùn)練，通過拓展訓(xùn)練這種非常富有刺激性的教學(xué)方式，能夠引起學(xué)生的強烈的欲望。不但能夠激發(fā)學(xué)生對體育鍛煉的興趣，還能夠讓學(xué)生的體質(zhì)真正得到改善。

一、拓展訓(xùn)練在高職體育教學(xué)中應(yīng)用的必要性

（一）滿足現(xiàn)代教育發(fā)展的需要

現(xiàn)代的教育方式和教育的要求已經(jīng)變化，和傳統(tǒng)的教育相比較，現(xiàn)代教育更注重以人為本，并且教育的發(fā)展方向更人性化和個性化，教育要求學(xué)生“德智體美勞”全面發(fā)展。在體育發(fā)展中拓展訓(xùn)練是一個非常有效的活動，它具有一定的挑戰(zhàn)性，通過實際的模擬，讓學(xué)生能夠親身經(jīng)歷，引導(dǎo)學(xué)生自己經(jīng)歷磨難并克服困難，培養(yǎng)自己的思維能力、激發(fā)自己的潛能，學(xué)會團結(jié)合作等。在拓展訓(xùn)練的活動中，教師的角色就是一個導(dǎo)演，學(xué)生就是演員。在這個過程中，就不再是傳統(tǒng)體育教學(xué)的模式，老師在上面示范動作，學(xué)生就依照葫蘆畫瓢。拓展訓(xùn)練更加注重的是：學(xué)生自身的學(xué)習(xí)和體驗，通過這樣的教學(xué)方式才能夠真正的激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，才能夠讓他們表現(xiàn)出自身的特點。

（二）高職體育教學(xué)改革需要拓展訓(xùn)練的融入

在原來的體育教學(xué)的定義中，體育教學(xué)內(nèi)容主要以體育基本的知識和身體訓(xùn)練為主，針對于心靈上的教育根本沒有進行深入的教學(xué)，不能全面均衡的培養(yǎng)學(xué)生。隨著素質(zhì)教育不斷地推行，現(xiàn)在對學(xué)生的培養(yǎng)要求變得越來越高，在這種前提下，現(xiàn)在高職院校中就對現(xiàn)在的體育教學(xué)改革進行不斷的深入研究和拓展。拓展訓(xùn)練就能夠很好的將原來傳統(tǒng)的體育教學(xué)方式和有趣的體育活動鏈接起來，不但能夠從身體訓(xùn)練上提高學(xué)生的素質(zhì)，而且還能夠從心里上提高學(xué)生的素質(zhì)，因此拓展訓(xùn)練必須要融入高職體育教學(xué)的改革中。

二、拓展訓(xùn)練在高職體育教學(xué)中的具體應(yīng)用方式

在高職體育教學(xué)素質(zhì)拓展訓(xùn)練中，訓(xùn)練的不僅僅只是身體方面，更多的是心理素質(zhì)方面的訓(xùn)練。在身體素質(zhì)方面的訓(xùn)練主要就是訓(xùn)練學(xué)生的耐力、爆發(fā)力和協(xié)調(diào)能力等，在心理素質(zhì)方面就不僅僅是涉及到個人，相應(yīng)的還有自身的團隊。

（一）身體素質(zhì)訓(xùn)練

1.耐力訓(xùn)練

耐力訓(xùn)練是鍛煉一個人意志最好的方法。體育教學(xué)中的拓展訓(xùn)練和傳統(tǒng)的體育教學(xué)中的耐力訓(xùn)練相比更加的有趣。傳統(tǒng)的耐力訓(xùn)練就是讓學(xué)生進行長跑訓(xùn)練，通過這樣的方式既可以提高學(xué)生的心肺功能還能夠讓腿部肌肉得到良好的訓(xùn)練，利用這樣的方法來訓(xùn)練學(xué)生的耐力。在拓展訓(xùn)練中：耐力訓(xùn)練不只是結(jié)合了傳統(tǒng)的耐力訓(xùn)練方式而且還結(jié)合了學(xué)生自身的特色，比如耐力訓(xùn)練可以通過接龍比賽的方式進行，將學(xué)生分成幾個組，在組與組之間進行一個接力比賽，比賽的時長要有一個科學(xué)的度，PK的形式讓耐力訓(xùn)練更加的有意思。在學(xué)生都能夠適應(yīng)以后，在進行別的方式，可以在長跑的過程中加入一些新的元素，比如中間添加手臂的動作。

2.協(xié)調(diào)性訓(xùn)練

協(xié)調(diào)性的訓(xùn)練是一個非?；A(chǔ)的訓(xùn)練，因為在各項體育運動中，都必須要具有一定的協(xié)調(diào)性。協(xié)調(diào)性的訓(xùn)練可以采用比較常用的一些方式，例如跳繩，可以花式跳繩、也可以進行多人跳，或者是通過穿越火線的方式來訓(xùn)練協(xié)調(diào)性。用這兩種方式都能夠讓學(xué)生發(fā)揮充分的想象能力，而且還能夠激發(fā)學(xué)生的興趣，使課堂的學(xué)習(xí)氣氛變得活躍；不但如此在穿越火線中還需要團隊的配合，這樣能夠培養(yǎng)學(xué)生的團隊配合能力。

（二）心里素質(zhì)訓(xùn)練

在拓展訓(xùn)練中，針對于心里素質(zhì)訓(xùn)練不僅僅是訓(xùn)練個人自身的心里素質(zhì)，還可以訓(xùn)練團隊的團結(jié)力和整個團隊人員的心里素質(zhì)。心里素質(zhì)訓(xùn)練能夠讓個人提高自身的信心，能夠從容的面對以前自己有可能不敢應(yīng)對的挑戰(zhàn)，從交流和信任、心里素質(zhì)等多方面促進學(xué)生和團隊的關(guān)系，激發(fā)團隊的力量。心里素質(zhì)訓(xùn)練在高職的體育教學(xué)中用得最多的是場地訓(xùn)練，其中在場地上進行的一個項目非常能夠考驗心里素質(zhì)，那就是三米跳。要跳的同學(xué)要面背著要接住她的同學(xué)向后倒，這就在訓(xùn)練自身的心里素質(zhì)和是否信任團隊，團隊的力量。

在高職體育拓展訓(xùn)練教學(xué)將心里素質(zhì)訓(xùn)練融合到每一節(jié)課中，例如同舟共濟的游戲就能很好的培養(yǎng)學(xué)生的協(xié)調(diào)性和團結(jié)協(xié)作能力，所有的同學(xué)都踩著連接的報紙，大家要齊心協(xié)力才能夠真正的能夠?qū)ⅰ皥蠹垺敝圻\行起來，還可以采用其他的活動培養(yǎng)學(xué)生的的能力。

三、總結(jié)

綜上所述：本文通過舉例說明了拓展訓(xùn)練不但非常具有挑戰(zhàn)能力，而且還非常的有趣，在高職教學(xué)中應(yīng)用后能夠從耐力、協(xié)調(diào)能力、團結(jié)能力等方面提高學(xué)生的素質(zhì)，能夠促進學(xué)生的全面發(fā)展。

參考文獻：

[1]徐博.拓展訓(xùn)練在高職高專體育教學(xué)中的合理應(yīng)用[J].才智，2014，03：128

[2]劉曉明.拓展訓(xùn)練在高職體育教學(xué)中的作用分析[J].華章，2013，13：241

[3]張叢林.探析拓展訓(xùn)練在高職體育教學(xué)中的作用[J].學(xué)園，2013，19：65-66

篇4

關(guān)鍵詞：家用電動器具 教學(xué)方法 理論教學(xué) 實驗教學(xué)

家用電動器具圍繞著各種家用電動器具用電動機的結(jié)構(gòu)、工作原理、拆裝與維修以及電風(fēng)扇、洗衣機、吸塵器、廚用及整容電動器具的結(jié)構(gòu)、工作原理、使用、拆裝與維修等進行講授。它的特點是以電工學(xué)和機械學(xué)為基礎(chǔ)，與實際生產(chǎn)結(jié)合比較緊密，是一門應(yīng)用性極強的學(xué)科。這門課的教學(xué)安排，必須結(jié)合學(xué)生的實際情況，我們的學(xué)生以初中畢業(yè)生為主，文化基礎(chǔ)相對差一些，而且大部分沒有接觸過生產(chǎn)企業(yè)，對這方面的認識很少。在這種情況下，如何使學(xué)生們愉快地學(xué)習(xí)這一學(xué)科，使他們學(xué)于所愛，學(xué)而能用，就成了我們教學(xué)過程中的難點。在此，我們談?wù)勌岣呒矣秒妱悠骶叩慕虒W(xué)效果的做法。

1. 基本理論的教學(xué)

1.1 理論聯(lián)系實際

基本理論的教學(xué)總是以課堂教學(xué)的形式來完成，可以說，課堂教學(xué)是教學(xué)活動的中心環(huán)節(jié)和基本形式，其效果直接關(guān)系到教學(xué)質(zhì)量的高低。教學(xué)是教與學(xué)有機結(jié)合的整體，是完整不可分割的，教學(xué)效果很大程度上決定于學(xué)生的配合，好的教學(xué)方法可以充分調(diào)動學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和主動性，是取得好的教學(xué)效果的保證。在教學(xué)過程中，我們是這樣做的。首先，要多聽取學(xué)生的意見，不斷探索和改進教學(xué)方法。學(xué)生是教與學(xué)的主體，不能只是被動的學(xué)，要想方設(shè)法使他們能夠主動地學(xué)，并積極參與教學(xué)方法的改進。其次，要理論與實踐有機地結(jié)合。家用電動器具的教學(xué)內(nèi)容包括課堂教學(xué)和實驗教學(xué)兩部分。我們將部分實驗內(nèi)容納入課堂教學(xué)之中，把生產(chǎn)企業(yè)的相關(guān)實際操作方法和規(guī)程搬到課堂，有條件時還把有關(guān)的實際電路系統(tǒng)在課堂上操作和演示，給學(xué)生予直觀感覺，比如采用洗衣機和脫水機來學(xué)習(xí)電動機的洗滌和脫水的過程。這樣可以增加學(xué)生對所學(xué)知識在感性和理性兩方面的認識。

1.2 借助現(xiàn)代教學(xué)手段

借助多媒體、教具、模型或?qū)嵨锏扔懈行哉J識的東西，使學(xué)生對學(xué)習(xí)有一定的興趣。比如講授換氣扇課程時，分為普通換氣扇和管道換氣扇兩種，它們有不同的結(jié)構(gòu)特點和安裝場合，只講授理論，學(xué)生不僅覺得抽象且無趣，還會覺得不容易理解。我們可以把它們做成FLASH動畫形式，在多媒體課室演示給學(xué)生看，這樣就使學(xué)生對結(jié)構(gòu)有比較直觀的認識，容易理解。對于結(jié)構(gòu)相對簡單且操作比較容易的元件（比如洗衣機的電磁閥、蓋開關(guān)等），采用教具、模型或?qū)嵨锏男问絹碇v解，這樣學(xué)生就不會覺得抽象難懂，使他們加深了理解，同時也調(diào)動了他們的主動性和積極性。在講授電動機等比較復(fù)雜系統(tǒng)的工作原理時，尤其要結(jié)合多媒體和實驗教學(xué)，把電動機的結(jié)構(gòu)和工作原理做成FLASH動畫，再結(jié)合實驗拆裝就可以使學(xué)生有比較深刻的認識，學(xué)起來也比較有興趣。

1.3 結(jié)合本專業(yè)的情況，加強應(yīng)用方面的教學(xué)

家用電動器具是家電維修相關(guān)專業(yè)的重要專業(yè)課，是該專業(yè)學(xué)生以后學(xué)習(xí)專業(yè)課和畢業(yè)后從事技術(shù)工作的重要技術(shù)基礎(chǔ)。市場經(jīng)濟要求我們培養(yǎng)出來的人才應(yīng)該符合市場的需求，培養(yǎng)出來的人才應(yīng)該符合企業(yè)或其他單位的要求，企業(yè)對技術(shù)人才的要求是技術(shù)過硬，基礎(chǔ)扎實，有創(chuàng)造性。我們在教學(xué)的過程中就應(yīng)該結(jié)合本專業(yè)的特點，使學(xué)生認識到學(xué)好這門課程對他們以后學(xué)習(xí)和工作有很大的幫助。比如，我們在講授家用電動器具用電動機一章時，除介紹各種電動機的結(jié)構(gòu)組成和基本工作原理外，如果有條件就應(yīng)該使他們用所學(xué)會的知識來組裝一臺家用電動器具用電動機，到實驗室按組件的連接順序把它們組裝起來，使他們認識到這門課程與他們的專業(yè)學(xué)習(xí)和工作息息相關(guān)，必須學(xué)好。還比如，學(xué)習(xí)洗衣機一章時，就要使他們會利用所學(xué)知識對洗衣機的各種常見故障進行分析與排除，為以后工作打好扎實的基礎(chǔ)。有條件時可以帶他們到家電維修服務(wù)站去，讓他們用實際操作來體會本學(xué)科的作用和重要性。

2. 實驗環(huán)節(jié)的教學(xué)

2.1 改進傳統(tǒng)的實驗方式

傳統(tǒng)的實驗方式都采用分組的實驗方式，其效果受學(xué)生的自覺性的影響。有些學(xué)生自覺性差，圖輕松，只想動動筆，記一下實驗數(shù)據(jù)，而不愿操作儀器，因而導(dǎo)致對于測量儀器的操作很不熟悉，動手能力很差，甚至有些企業(yè)反應(yīng)有些畢業(yè)生的動手能力很差，這樣影響很壞。為了改變這種現(xiàn)象，雖然我們?nèi)匀徊捎梅纸M實驗的方式，但是對于實驗的過程作了嚴格的要求，要求每個學(xué)生必須輪流操作儀器并且測量結(jié)果要達到一定的精度，這樣測量結(jié)果每個同學(xué)一般不會全部相同，實驗報告時就可反應(yīng)出來。這樣，不僅使每位學(xué)生都有機會操作儀器，還使測量的真實性和可靠性得到提高。本課程教學(xué)計劃時數(shù)少，要求我們利用課堂外的時間進行實驗，也豐富了學(xué)生的課余生活。

2.2 開設(shè)新的實驗

由于各方面的限制，實驗條件和開設(shè)的實驗品種都是很有限，因此在實驗條件允許的情況下，我們應(yīng)該盡量開設(shè)更多的實驗種類，加強學(xué)生實踐環(huán)節(jié)的教學(xué)。比如，我們可以開設(shè)一些讓學(xué)生自主設(shè)計和開發(fā)的實驗，如自行組裝電動機或電風(fēng)扇等，并進行測試。

2.3 加強實踐環(huán)節(jié)的考核

傳統(tǒng)的課程考核方法，總是以學(xué)生期末考試成績?yōu)橹鳎瑢嶒炛皇钦计綍r成績的一部分，而平時成績只是占20～30%，很難做到加大實踐環(huán)節(jié)教學(xué)力度的目的，因此必須改進考核方式，加大實踐環(huán)節(jié)的比重，加強實踐環(huán)節(jié)的考核。具體做法是，根據(jù)專業(yè)培養(yǎng)目的和教學(xué)計劃要求，確定出課程的有關(guān)內(nèi)容，制定出實踐技能考核標(biāo)準，對每個學(xué)生進行考核、操作評分。

2.4 與生產(chǎn)實習(xí)結(jié)合，系統(tǒng)掌握家電維修技術(shù)

按照教學(xué)安排，學(xué)完本課程后學(xué)生就要出去生產(chǎn)實習(xí)，我們根據(jù)學(xué)習(xí)的內(nèi)容，安排相關(guān)的實習(xí)任務(wù)，加強對家電維修技術(shù)的理解和實踐。實習(xí)是直接到生產(chǎn)企業(yè)里去，學(xué)生可以接觸到很多實際的工作，可以接觸到很多學(xué)校遇不到的問題，同時有意識給他們布置相關(guān)實習(xí)任務(wù)既加強了實際操作技能，又加深了對本課程的理論知識的理解。

3. 結(jié)束語

教學(xué)是一門藝術(shù)，需要不斷地探索。不斷提高教學(xué)效果也是每一個教師不懈努力的目標(biāo)。教學(xué)沒有固定的模式，要真正做到因材施教，不是一件容易的事，教師必須不斷努力改進自己的教育教學(xué)方式和方法，不斷提高自身的業(yè)務(wù)水平，密切關(guān)注人類科技進步，并充分利用現(xiàn)代各種科技新成果，來提高教學(xué)效果。事實證明，學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和學(xué)習(xí)興趣對教師的教學(xué)效果有很大影響，在教學(xué)過程中要不斷培養(yǎng)學(xué)生對本課程的學(xué)習(xí)主動性，使他們對課程產(chǎn)生興趣，這樣就取得教與學(xué)的良好效果。

參考文獻

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[關(guān)鍵詞] 阿司匹林；氯吡格雷；糖尿病合并腦梗塞

[中圖分類號] R587.1 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1672-4062（2016）10（a）-0095-02

糖尿病是一種比較常見的代謝性疾病，往往容易出現(xiàn)諸多并發(fā)癥，尤其是腦梗塞，不僅損害腦組織，在一定程度上還增加了病死率[1]。當(dāng)前臨床上在治療糖尿病合并腦梗塞時，主要為對癥治療，包括穩(wěn)定斑塊、降糖、營養(yǎng)神經(jīng)、降脂以及改善循環(huán)等，但是療效較差。因此，該文探討了糖尿病合并腦梗塞治療中運用雙聯(lián)抗血小板聚集療法的臨床價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院2015年5月―2016年5月期間收治的82例糖尿病合并腦梗塞患者為研究對象，糖尿病病程2～15年，平均（8.2±4.5）年，年齡42～79歲，平均年齡為（62.2±10.9）歲，其中45例為男性、37例為女性，按照數(shù)字隨機法分組，每組41例。入選標(biāo)準：①有糖尿病病史；②符合腦梗塞診斷標(biāo)準，且經(jīng)顱內(nèi)MRI或者CT檢查確診；③年齡48 h者；②合并肝腎功能不全、惡性腫瘤、昏迷者；③藥物禁忌證者。兩組的病程、性別等資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 對照組 對照組患者入院后，主要接受常規(guī)治療，包括清除自由基、營養(yǎng)神經(jīng)、改善腦循環(huán)、穩(wěn)定斑塊、降脂、降糖以及營養(yǎng)支持等，對于合并水腫的患者，再運用甘露醇治療，并且在此基礎(chǔ)上，再運用阿司匹林聯(lián)合治療，即口服阿司匹林腸溶片（國藥準字H43021814，規(guī)格50 mg），100 mg/次，3次/d，15 d為1個療程，連續(xù)治療2個療程，共30 d。

1.2.2 觀察組 觀察組在對照組治療的基礎(chǔ)上，再運用氯吡格雷聯(lián)合治療，即硫酸氫氯吡格雷片（注冊證號H20100750，規(guī)格75 mg）口服，75 mg/次，1次/d，1個療程為15 d，連續(xù)治療30 d，共2個療程。

1.3 觀察指標(biāo)

于治療前后運用神經(jīng)功能缺損評分（NIHSS）分別評價兩組的神經(jīng)功能缺損情況，得分越低，說明神經(jīng)功能損傷越小。同時，觀察兩組的血小板參數(shù)，包括血小板比率（P-LCR）、血小板分布寬（PDW）、平均血小板體積（MPV）以及血小板（PLT）。

1.4 療效判定標(biāo)準

根據(jù)NIHSS評分情況將治療效果分為四個等級：①基本痊愈。病殘程度為0級，且NIHSS評分較治療前下降90%～100%；②顯效。病殘程度為1～3級，且與治療前相比，NIHSS評分下降46%～89%；③有效。NIHSS評分較治療前下降18%～45%；④無效。與治療前相比，NIHSS評分下降

1.5 統(tǒng)計方法

運用SPSS16.0統(tǒng)計軟件分析該次研究數(shù)據(jù)，其中計數(shù)資料采用百分率（%）表示，運用χ2檢驗組間治療有效率對比，采用均數(shù)±標(biāo)準差（x±s）表示計量資料，運用t對組間NIHSS、PLT、MPV等比較，P

2 結(jié)果

2.1 兩組NIHSS評分治療前后比較

兩組NIHSS評分治療前對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；治療后，相比較對照組而言，觀察組的NIHSS評分明顯下降，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

2.2 兩組治療效果對比

與對照組相比，觀察組的治療有效率較高，組間對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

2.3 兩組血小板參數(shù)比較

兩組的P-LCR、PDW、MPV以及PLT等血小板參數(shù)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

3 討論

通常情況下，糖尿病合并腦梗塞患者往往容易出現(xiàn)彌漫性血管病變，再加上高血糖容易增加乳酸生成，增高血黏度，使腦水腫加重，從而升高致死率和致殘率，所以在控制血糖的基礎(chǔ)上，抗血小板治療極其重要[3]。阿司匹林是比較常見的一種抗血小板聚集藥物，在糖尿病心腦血管疾病的治療和預(yù)防中得到廣泛運用，其作用機制主要為通過對TXA2生成進行抑制，對血小板生成環(huán)氧酶進行抑制，避免體內(nèi)形成前列腺素，從而發(fā)揮抗血小板聚集功效[4]。氯吡格雷作為新型的一種抗血小板聚集藥物，其作用機制包括幾點：①通過選擇性結(jié)合ADP受體，對血小板聚集進行抑制，從而避免形成血栓；②通過將ADP誘發(fā)的血小板活化擴增阻斷，對其他激動劑誘發(fā)的血小板聚集進行抑制；③使血小板膜糖蛋白的表達降低，使血液流變功能得到改善，對使腦部缺氧、缺血狀態(tài)得到改善[5]；④使動脈粥樣硬化斑塊面積縮小，使血清C反應(yīng)蛋白濃度降低；⑤使動脈粥樣硬化斑塊的組成成分發(fā)生改變，增加斑塊的穩(wěn)定性[6]。同時，阿司匹林還可以對前列腺素進行抑制，減輕機體炎癥反應(yīng)，發(fā)揮抗炎效果，對組胺、緩激肽釋放進行抑制，減輕機體疼痛感，并且與氯吡格雷聯(lián)合運用，能夠減輕神經(jīng)功能缺損，改善臨床癥狀，從而達到治療目的[7]。

綜上所述，在糖尿病合并腦梗塞的臨床治療中，運用雙聯(lián)抗血小板聚集療法，不僅可以使治療效果提高，還能對血小板聚集進行抑制，改善患者神經(jīng)功能，具有一定的推廣價值。

[參考文獻]

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[2] 劉喜燦，王潤青，呂娟. 急性腦梗死合并糖尿病雙抗血小板治療的臨床觀察[J]. 中國實用神經(jīng)疾病雜志，2011，22（12）：44-45.

[3] 劉建軍，劉海超. 奧扎格雷聯(lián)合阿司匹林雙抗血小板治療糖尿病并急性腦梗死臨床觀察[J]. 中國實用神經(jīng)疾病雜志，2014，18（8）：28-30.

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[6] FM Sacks，LP Svetkey，WM Vollmer，et al.Effects on blood pressure of reduced dietary sodium and the Dietary Approaches to Stop Hypertension （DASH） diet. DASH-Sodium Collaborative Research Group[J].New England Journal of Medicine， 2011， 344（11）：3-10.

篇6

［關(guān)鍵詞］ 聚凝胺試驗； 微柱凝膠試驗； 不規(guī)則抗體； 交叉配合試驗

［中圖分類號］ R446.6 ［文獻標(biāo)識碼］ B ［文章編號］ 1671-7562（2011）01-0093-03

doi:10.3969/j.issn.1671-7562.2011.01.省略

傳統(tǒng)的鹽水介質(zhì)法只能檢出相對分子質(zhì)量大的IgM類抗體，對相對分子質(zhì)量小的不規(guī)則抗體（主要是IgG類抗體）往往造成漏檢。手工聚凝胺試驗對Kell系統(tǒng)外的大多數(shù)血型系統(tǒng)均適用，且操作簡便、快速、經(jīng)濟［1］，作為臨床輸血配合試驗正在被國內(nèi)許多基層醫(yī)院所采用。微柱凝膠試驗靈敏度高，結(jié)果直觀，能定量自動化操作，最大限度減少人為誤差［2-4］。為確保臨床輸血安全，有效防止急、慢性溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生，我院根據(jù)《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》，對有妊娠史、輸血史和短期內(nèi)需大量輸血的患者進行不規(guī)則抗體篩選，再根據(jù)篩選結(jié)果選擇微柱凝膠試驗或聚凝胺試驗進行交叉配血，收到良好效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源

受血者系本院2010年1月至2010年6月住院和門診輸血患者共1 367例，其中男743例，女624例，年齡1 d～89歲。供血者血液全部來自江蘇省血液中心。

1.2 試劑

紅細胞血型抗體篩選細胞（瑞士達亞美公司產(chǎn)品），聚凝胺試劑盒（臺灣Baso公司產(chǎn)品），單克隆抗A、B標(biāo)準血清（長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司），抗-D試劑（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司），微柱凝膠卡及配套離心機、孵育箱（瑞士達亞美公司產(chǎn)品）。

1.3 方法

對有妊娠史、輸血史和短期內(nèi)需大量輸血的患者均進行不規(guī)則抗體篩選，不規(guī)則抗體陰性患者采用聚凝胺試驗進行交叉配血，陽性患者采用微柱凝膠試驗進行交叉配血。

1.3.1 不規(guī)則抗體篩查 采用微柱凝膠試驗進行不規(guī)則抗體篩查，即將3種濃度為0.8%的普細胞懸液各50 μl加入微柱凝膠卡反應(yīng)室，再各加入血清 25 μl，37 ℃孵育15 min，離心10 min。觀察凝集情況，紅細胞全部沉積在反應(yīng)室底部判為陰性，懸浮于凝膠表面或散在分布于凝膠中則為陽性。

1.3.2 交叉配合試驗 （1） 微柱凝膠試驗：首先在微柱凝膠卡上注明受血者、供血者姓名及主、次側(cè),然后制備受血者、供血者0.8%～1.0%紅細胞懸液。主側(cè)加入50 μl供者細胞及25 μl受者血清,次側(cè)加入50 μl受者細胞及25 μl供者血清，37 ℃孵育15 min,離心10 min。結(jié)果判斷同上。（2） 聚凝胺試驗：首先在試管上注明受血者、供血者姓名及主、次側(cè),主側(cè)加入受血者血清2滴及供血者3%紅細胞懸液1滴，次側(cè)加入供血者血清2滴及受血者3%紅細胞懸液1滴，然后主、次側(cè)管各加低離子溶液0.6 ml，混勻，室溫靜置1 min后加入聚凝胺溶液2滴，混勻，室溫靜置15 s，離心15 s，傾去上清液，輕輕搖動試管，若觀察到紅細胞凝集，則加入2滴復(fù)懸液，輕輕混勻。觀察結(jié)果，紅細胞仍有凝集者判為陽性，紅細胞均勻懸浮于溶液中則判為陰性。

2 結(jié) 果

1 367例患者中不規(guī)則抗體陽性者12例，采用微柱凝膠試驗、聚凝胺試驗同時做交叉配血試驗。聚凝胺法交叉配血試驗不相合7例，相合5例，相合率為41.7%;微柱凝膠法交叉配血試驗不相合9例，相合3例，相合率為25%。由此可見，微柱凝膠法交叉配血試驗不相合率高于聚凝胺法，即微柱凝膠法敏感性高于聚凝胺法。因此，不規(guī)則抗體陽性患者采用微柱凝膠法進行交叉配血提高了輸血安全性。12例陽性標(biāo)本的具體交叉配血結(jié)果見表1。

表1 12例抗體篩選陽性標(biāo)本兩種配血方法進行交叉配血的結(jié)果

3 討 論

不規(guī)則抗體是指抗A、抗B以外的血型抗體［5-6］，多為IgG類抗體,主要是經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激而產(chǎn)生，在鹽水介質(zhì)中IgG類抗體不能引起紅細胞凝集，只能使相應(yīng)紅細胞致敏。IgG類不規(guī)則抗體可引起受血者溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病［7］，對患者健康造成嚴重危害，甚至威脅生命。本研究對1 367例患者進行了不規(guī)則抗體篩查，陽性12例，陽性患者采用聚凝胺法交叉配血，相合率為41.7%（5/12），微柱凝膠法交叉配血相合率25%（3/12），交叉配合試驗聚凝胺法相合率高于微柱凝膠法。對于微柱凝膠法交叉配血不相合的樣本，再與其它獻血者進行交叉配血，直至找到相合的供者。

聚凝胺試驗對結(jié)果的觀察是從凝集到無凝集的過程，對試管振搖的力度和解聚的時間需要嚴格掌握，弱凝集的標(biāo)本由于用力振搖或放置時間稍長凝集也會消失。因此，聚凝胺法雖能檢出IgG類不完全抗體，但其本質(zhì)仍是介質(zhì)法，且操作難以標(biāo)準化、影響因素多、缺乏完善的質(zhì)控體系，易造成假陰性結(jié)果，敏感性低于微柱凝膠試驗［8］。微柱凝膠試驗在操作程序上更加標(biāo)準化，加樣量精確到微升，孵育時間、離心速度和時間都進行了標(biāo)準化設(shè)置，克服了許多人為因素造成的誤差，因而大大提高了實驗結(jié)果的可重復(fù)性，且具有靈敏度高、特異性強等優(yōu)點［9］。因此，使用微柱凝膠法交叉配血能夠減少輸血反應(yīng)的發(fā)生，保證臨床輸血安全。

在實際工作中建議選用微柱凝膠試驗進行受血者不規(guī)則抗體篩選，不規(guī)則抗體陰性患者采用聚凝胺法進行交叉配合試驗，陽性患者采用微柱凝膠法進行交叉配合試驗。根據(jù)患者情況選擇不同方法交叉配血既能更加快速、高效地為臨床提供安全的血液制品，減輕患者的經(jīng)濟負擔(dān)，同時能夠確保患者的輸血安全。

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篇7

2.陽光透過淡薄的云層，照耀著白茫茫的大地，反射出銀色的光芒，耀得人眼睛發(fā)花。

3.寒風(fēng)起，思念意；立冬至，長相憶；遙相寄，祝福你；變天氣，多注意；冷添衣，顧身體；愿朋友，甜如蜜，書美麗。立冬快樂。

4.這個立冬的季節(jié)，我的祝福浸潤每一個時光，耕耘出一方思念的熱土，我把牽掛的情懷播種，用關(guān)懷澆灌，盛開出兩朵美麗的花。一朵霜花綻放好運的笑臉，一朵雪花迎來如意的腳步，此刻我把這兩朵美麗的花送給你，愿好運隨著你，如意伴著你。

5.白雪紛紛何所似?撒鹽空中差可擬?！x安《詠雪聯(lián)句》

6.又到立冬，飄零的落葉旋轉(zhuǎn)隨風(fēng)，冰雪將大地封凍，愿你依然快樂輕松，帶著好運攜手成功，在我的祝福聲里感受溫暖向前沖，把身體保重，圓幸福美夢。

7.立冬啦，祝你：好運像雪花紛紛而落，煩惱像落葉深深埋藏，幸福像冰塊堅不可摧，壓力如蛇娃已然冬眠，情誼如松柏長青不萎，日子像炭火暖暖融融！

8.天冷了，他不會給你擁抱，你只能自已添外套。

9.風(fēng)沙吹過，凍雨飄落，冬天的旋律誰載了我的相思?看這一盞盞燈，我獨自烤著火，潔白的落幕在發(fā)稍，是癡情卷生的愁素。

10.立冬到了，天氣漸涼，加強鍛煉，身體健康。今晚到明天：晴到少云，東北風(fēng)到級，氣溫到度，濕度到%。汕頭氣象臺日晚發(fā)。

11.品一杯香茶：思念朋友；聽一首老歌：回憶朋友；發(fā)一條：聯(lián)絡(luò)朋友；道一聲問候：最近好嗎？傳一份關(guān)懷：天冷保重；送一個祝福；立冬快樂！

12.今日立冬。一年又一年，一個節(jié)氣又一節(jié)氣。但其實又不是簡單的重復(fù)，因為今時今日再不會有。唯有珍惜每個一天！

13.天冷了，我卻凍的像個小丑，沒人給暖手。

14.不要忘記冬天的理想，那是你在春天的愿望。

15.遠處巍峨的群山，在陽光照映下，披上了金黃色的外衣，顯得格外美麗。

16.墻角數(shù)枝梅，凌寒獨自開?！醢彩睹坊ā?/p>

17.又是寒冷立冬時，冒著凜冽寒風(fēng)吹，頂著鵝毛大雪飛，忍著超常低溫凍，拎著冷靜頭腦奔，沖著時間比賽跑，趕著手機結(jié)冰前，接著友情信息念。朋友，又立冬了，穿厚點可別凍著！

18.眨眼立冬降臨，忍不住發(fā)條提醒你：天冷多注意，添衣保暖防病襲；保持好心情，莫要煩躁壞情緒；有空時多聯(lián)系，溫馨帶去溫暖！祝身康體健，快樂如意，好運繼續(xù)！

篇8

關(guān)鍵詞 全血直接擴增; 線性指數(shù)聚合酶鏈式反應(yīng); 焦磷酸測序; 基因多態(tài)性; 酒精代謝

1 引 言

隨著基因組學(xué)及后基因組學(xué)的發(fā)展，人們意識到基因多態(tài)性在闡明疾病的發(fā)生和發(fā)展、毒物的易感性與耐受性、疾病臨床表現(xiàn)的多樣性以及對藥物治療的反應(yīng)上都起著重要作用，而單核苷酸多態(tài)性是目前最受關(guān)注的一類多態(tài)性。

焦磷酸測序技術(shù)是通過核苷酸和單鏈模板結(jié)合后釋放焦磷酸引發(fā)酶級聯(lián)反應(yīng)，促使熒光素發(fā)光并進行檢測的一種核酸測序技術(shù)[1～3]，用于基因多態(tài)性檢測^[4]、微生物分型^[5]、基因甲基化檢測^[6]等領(lǐng)域，尤其是在大規(guī)模DNA測序中^[7]的應(yīng)用，使測序技術(shù)發(fā)生了革命性變化。但是目前焦測序的單鏈模板制備主要采用固相微球法^[8]，該方法操作步驟繁瑣且效率較低; 使用生物素標(biāo)記引物、鏈親和素包被微球增加了檢測的成本; 同時，單鏈制備過程中容易引起樣品的交叉污染，以上不足極大地妨礙了焦測序技術(shù)的臨床應(yīng)用^[9]。

為了解決單鏈模板制備問題，可以采取不對稱PCR直接產(chǎn)生單鏈產(chǎn)物^[10]，但常規(guī)不對稱PCR方法擴增單鏈的效率低，無法得到廣泛使用。線性指數(shù)PCR（Linear-after-the exponential-polymerase chain Rreaction， LATE-PCR）^[11]在不對稱PCR的基礎(chǔ)上，通過優(yōu)化引物濃度和Tm值，可獲得接近對稱PCR的擴增效率，產(chǎn)生大量單鏈DNA產(chǎn)物，能夠滿足基于單鏈核酸序列的雜交、實時熒光PCR等反應(yīng)的需要^[12]。但是LATE-PCR引物設(shè)計要求嚴格，且隨著PCR的進行，非限制性引物與擴增產(chǎn)物產(chǎn)生競爭，若擴增片段較長則得到的單鏈DNA產(chǎn)率會降低。改進的LATE-PCR方法（Improved LATE-PCR， imLATE-PCR）^[13]彌補了LATE-PCR的不足，增加非限制性引物長度，減少限制性引物長度，使兩者的Tm差值更大，引物的設(shè)計相較于LATE-PCR更為寬泛，產(chǎn)生擴增片段長度也更長，擴大了不對稱PCR的實際使用范圍。

為了提高基因檢測速度，降低樣本污染的可能性，本研究將全血直接擴增和imLATE-PCR技術(shù)相結(jié)合，建立了基于普通rTaq聚合酶和“高pH緩沖液（HpH Buffer）”的全血imLATE-PCR擴增方法。本方法具有以下優(yōu)點：（1）檢測速度快，操作簡便。采用全血直接作為擴增單鏈DNA測序的模板，省去了DNA提取和單鏈模板制備兩個繁瑣的步驟，極大提高了檢測速度，簡化了操作過程，縮短了檢測時間; （2）成本低，經(jīng)濟環(huán)保。無需制備DNA單鏈可以避免使用生物素修飾引物和磁性微球，無需DNA提取可以省去大量有機試劑和實驗耗材，降低了成本; （3）污染少。避免了DNA提取和模板制備過程中反復(fù)打開管蓋進行加液、移液等操作，減少了平行測多份樣品時交叉污染的可能性; （4）靈敏度高。實驗表明， 0.1 μL全血即采用指尖取血即可得到較好的測序結(jié)果，應(yīng)用于臨床檢測方便、快速^[14]。采用本方法對酒精代謝相關(guān)基因ADH1B、ADH1C進行了基因多態(tài)性焦測序檢測，用于臨床快速評估人體酒精代謝能力，對于預(yù)防與飲酒行為相關(guān)的多種疾病，以及常規(guī)體檢監(jiān)測有重要意義。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

EDC-10基因擴增儀（東勝創(chuàng)新生物科技有限公司）; 小型焦測序儀（日本Hitachi公司）。

三磷酸腺苷硫酸化酶（ATP-sulfurylase）和Klenow聚合酶為實驗室自表達; rTaq DNA聚合酶、500 bp DNA Ladder marker（日本Takara公司）; 聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、QuantiLum重組熒光素酶（美國Promega公司）; 腺苷三磷酸雙磷酶-Ⅶ（Apyrase-Ⅶ）、腺苷-5′-磷酸硫酸（Adenosine 5′-phosphosulfate， APS）、牛血清蛋白（Bovine serum albumin， BSA）（美國Sigma公司）; Sepharose Beads（美國GE Healthcare公司）; α-硫化三磷酸腺苷 （dATPαS）、三磷酸脫氧胞苷酸（dCTP）、三磷酸脫氧鳥苷酸（dGTP）、三磷酸脫氧胸腺苷酸（dTTP）（美國Amersham Pharmacia公司）; 其它試劑均為分析純; 實驗用水均為滅菌二次蒸餾水。

所有引物由上海Invitrogen公司合成，具體引物名稱及序列見表1。

2.2 實驗方法

2.2.1 imLATE-PCR引物設(shè)計 本研究選取與酒精代謝相關(guān)的乙醇脫氫酶（ADH）基因中中國人較常見位點進行擴增。擴增引物使用Primer 5.0軟件進行設(shè)計，引物設(shè)計原則：TmE-TmL≥5 ℃; TmA-TmE≤13 ℃^[13]（TmE為過量引物Tm值，TmL為限制性引物Tm值，TmA為擴增產(chǎn)物Tm值）。Tm值計算采用OligoAnalyzer 3.1軟件（地址：http：///analyzer/Applications/OligoAnalyzer/）。本實驗中所用到的PCR擴增引物見表1。

2.2.2 全血imLATE-PCR擴增 取抗凝外周全血樣本1μL（本研究中血樣均來源于總院受試者，受試者已簽署知情同意書并獲得倫理委員會同意。除特別說明，抗凝血所用抗凝劑均為EDTA二鉀。）直接用于ADH1B、ADH1C位點的目的片段擴增。PCR 反應(yīng)體系包括用于全血PCR 反應(yīng)的HpH Buffer（100 mmol/L Tris-HCl，50 mmol/L KCl，pH 9.3～9.5）5.35 μL，2 mmol/L Mg2+，dNTPs 100 μmol/L，過量引物（PE）1 μmol/L，限制性引物（PL）0.1 μmol/L，Taq 酶2.5 U，適當(dāng)PCR添加劑（10% BSA和5% 吐溫20），全血模板1 μL，加水補充至50 μL。ADH1B位點PCR反應(yīng)條件：3個循環(huán)（94 ℃， 3 min; 55 ℃， 3 min）; 65個循環(huán)（90 ℃， 10 s; 53 ℃， 20 s; 72 ℃， 20 s）。ADH1C位點PCR反應(yīng)條件： 94 ℃預(yù)變性3 min; 65個循環(huán)（90 ℃，10 s; 55 ℃， 20 s; 72 ℃， 20 s）。

2.2.3 單鏈擴增產(chǎn)物處理以及焦磷酸測序 imLATE-PCR擴增產(chǎn)物除了大量單鏈DNA可用做測序模板，還含有過量的dNTPs、延伸產(chǎn)生的PPi、部分未完全延伸的產(chǎn)物等，這些成分都會對后續(xù)的焦測序反應(yīng)造成影響。因此，擴增產(chǎn)物需經(jīng)過處理后方可進行焦測序反應(yīng)。本研究使用自制的焦測序反應(yīng)液^[15]對產(chǎn)物進行處理，主要成分為0.1 mol/L Tris-HAc（pH 7.7），2 mmol/L EDTA，10 mmol/L Mg（Ac）2， 0.1% BSA，1 mmol/L DTT，80 μmol/L APS，0.4 mmol/L D-蟲螢光素，60 U/mL ATP-sulfurylase，1.6 U/mL Apyrase-Ⅶ，18 U/mL Klenow聚合酶，適量熒光素酶。反應(yīng)液中的APS可以和延伸產(chǎn)生的PPi作用生成ATP，過量的dNTPs和少量的ATP可以在Aprase-Ⅶ作用下發(fā)生降解，從而減少對焦測序反應(yīng)的影響^[10]。具體步驟為：取3 μL imLATE-PCR擴增產(chǎn)物，加入自制焦測序反應(yīng)液，置于小型焦磷酸測序儀中，室溫反應(yīng)5 min; 加入10 pmol測序引物，常溫下退火5 min，再循環(huán)加入dATPαS， dCTP， dTTP 和dGTP 進行焦測序反應(yīng)。測序引物如下： ADH1B： 5′-ATGGTGGCTGTAGGAATCTGTC-3′， ADH1C： 5′-TTTCGTTTGAAGTCATCGGTC-3′。

3 結(jié)果與討論

3.1 PCR擴增體系對全血imLATE-PCR的影響

以全血代替DNA作為模板，其中的免疫球蛋白G、血紅蛋白和乳鐵蛋白等成分會抑制PCR反應(yīng)，且常用血液抗凝劑EDTA或肝素也會抑制PCR反應(yīng)。所以，采用全血代替DNA作為PCR反應(yīng)模板時，需要調(diào)整PCR反應(yīng)體系。本實驗室之前報道的“HpH Buffer”體系可以很大程度上減少全血成分對PCR擴增的影響，主要由于高pH值的緩沖體系可以使蛋白質(zhì)表面帶負電，抑制其與帶負電的基因組DNA相互作用，從而降低對PCR反應(yīng)的抑制作用^[16]。

3.2 全血imLATE-PCR擴增血液模板量考察

考察了上述方法在進行全血imLATE-PCR擴增時，0.05， 0.10， 0.50， 1.00和2.00 μL 5個模板加入量對擴增和測序結(jié)果的影響。結(jié)果表明，50 μL擴增體系中加入0.10～2.00 μL的EDTA抗凝全血作為模板進行擴增，擴增產(chǎn)物經(jīng)處理后進行焦測序，均可得到良好的焦測序結(jié)果（圖2），擴增產(chǎn)物的檢測平均單堿基信號值分別為0.629、0.794、0.879、0.883，均可進行準確的SNP分型。由此證明，本方法僅需0.10 μL全血樣本就可對乙醇脫氫酶的兩個SNP位點進行焦測序檢測并分型，大大減少了對病人的創(chuàng)傷。

3.3 乙醇脫氫酶ADH1B、ADH1C基因SNP位點檢測

對收集到的24例臨床血樣的乙醇脫氫酶基因ADH1B、ADH1C的多態(tài)性檢測結(jié)果（圖3）顯示，本方法測序結(jié)果較好，測序信號強度高，可以進行準確的SNP分型。24例樣本的基因型測序結(jié)果如表2所示，其中ADH1C位點AA純合型本實驗中未檢測到，而NCBI數(shù)據(jù)庫也顯示了亞洲人群中AA型基因頻率接近于0。為了驗證測序結(jié)果的準確性，從24例樣本中抽取10例進行Sanger測序（圖4），結(jié)果與本實驗的測序結(jié)果完全一致，證明了本方法的準確性。ADH1B位點的AA型和ADH1C位點的GG型的患者酒精代謝能力較強，可加快乙醇向乙醛轉(zhuǎn)化的速度，易產(chǎn)生面紅、惡心等反應(yīng)，使飲酒者對乙醇耐受性降低，一定程度上可以避免產(chǎn)生酗酒或酒精依賴^[17]; ADH1B位點的GG純合型和ADH1C位點的

AA型患者的乙醇代謝能力較弱，易產(chǎn)生酒精依賴和酒精濫用，臨床應(yīng)建議減少酒精的攝入^[18]。

考察了臨床上常用的3種血液抗凝劑EDTA二鉀、檸檬酸鈉和肝素鈉對全血imLATE-PCR擴增的影響。結(jié)果表明，3種抗凝劑對擴增無明顯影響，均能夠得到準確的測序結(jié)果。

3.4 本方法與傳統(tǒng)焦測序檢測方法的比較

表3是本實驗方法和傳統(tǒng)焦磷酸測序檢測方法^[20，21]在耗時和成本方面的比較。本方法以全血作為模板省去了DNA提取過程，從收到樣本到得到PCR擴增產(chǎn)物可在2 h內(nèi)完成，同時降低了樣品間交叉污染的可能性; 另外，高靈敏的焦磷酸測序在保證檢測準確性的前提下僅使用0.10 μL全血或3.00 μL PCR產(chǎn)物，與傳統(tǒng)焦磷酸測序方法相比，成本下降了約40%。

a基因組DNA提取使用QIAamp DNA 血液提取試劑盒。b傳統(tǒng)PCR方法和全血imLATE-PCR方法均使用rTaq DNA 聚合酶。c傳統(tǒng)基于PCR的焦測序方法單鏈DNA制備使用鏈親和素瓊脂糖球珠。d傳統(tǒng)基于PCR的焦測序方法采用PyroMark Gold Q24 焦測序試劑。

a QIAamp DNA Blood Mini Kit （QIAGEN） was used for gDNA extraction. b rTaq DNA polymerase （TaKaRa） was used for conventional PCR and whole blood-imLATE-PCR. c Streptavidin Sepharose beads （GE Healthcare） were used for ssDNA preparation in conventional PCR-based pyrosequencing. d PyroMark Gold Q24 Reagents （QIAGEN） were used for conventional PCR-based pyrosequencing.

4 結(jié) 論

乙醇脫氫酶基因多態(tài)性導(dǎo)致乙醇在不同個體中的代謝速率不同。研究表明，急性酒精中毒、酒精性肝病、胰腺炎、心腦血管疾病、肝癌以及結(jié)直腸癌等一些癌癥都與乙醇脫氫酶基因多態(tài)性有關(guān)^{[17，18]}。乙醇對許多腫瘤是一種促癌劑，已有報道表明乙醇代謝酶基因多態(tài)性與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)^[19]。所以檢測酒精代謝相關(guān)基因的多態(tài)性，評估人體酒精代謝能力，可用于預(yù)防與飲酒相關(guān)疾病，對人類健康有著非常重要的意義。

本研究改進了LATE-PCR方法，采用“HpH Buffer”以全血為模板直接擴增，建立了全血imLATE-PCR方法，該方法具有檢測速度快、靈敏度高、污染少、成本較低等優(yōu)點，為臨床上檢測基因多態(tài)性和疾病早期預(yù)警提供了新手段。

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China Pharmaceutical University， Nanjing 210009， China）

2（Department of Pharmacology， Jinling Hospital， Nanjing University School of Medicine， Nanjing 210002， China）

Abstract Pyrosequencing is one of the important genetic polymorphism detection methods currently， but the complicated pretreatment procedure limits its application in clinical test. To simplify the whole process of pyrosequencing， on the basis of the linear-after-the-exponential-polymerase chain reaction （LATE-PCR）， we improved the primer design method of LATE-PCR， increased the length and the concentration of the excess primer， applied direct amplification technology with whole blood， and established a whole blood-imLATE-PCR method based on common rTaq polymerase and “HpH Buffer” （High pH buffer）. The amplification system was optimized， and the influences of blood anticoagulant and the amount of whole blood template were investigated. The single stranded template for the pyrosequencing was obtained by PCR amplification using a single tube in one-step process， and the alcohol dehydrogenase gene polymorphisms of 24 clinical blood samples were then detected successfully. The results could be used to guide clinical individualized medication. The genotypes of ADH1B locus of 24 samples were 6 cases of AA homozygote， 14 cases of AG heterozygote， and 4 cases of GG homozygote. The genotypes of ADH1C were 20 cases of GG homozygote， 4 cases of AG heterozygote， and no cases of AA homozygote.

篇9

我期盼這場雪已經(jīng)好久，等待著它來滋潤萬物。說實話，我對雪也是挑剔的，《詠雪聯(lián)句》中說：“撒鹽空中差可擬，未若柳絮因風(fēng)起”。我想這可能是江南的雪，顯得細膩。南國的雪愛跟雨水湊熱鬧，落地即化，不能在人間長駐。“燕山雪花大如席”或許描寫的有些夸張，卻是北方那大學(xué)飛紛的真實寫照。

這場雪來的干凈利落，毫無保留的把它積攢的能量釋放出來。這場雪是地地道道的北方雪。如北國風(fēng)光，千里冰封，萬里雪飄，帶有一種豪放粗曠。雪來之時，天地如同一張白紙，不知怎地，也許太陽不想?yún)⑴c這白色的盛宴，直到上午10點多，太陽都沒有出現(xiàn)，被封殺在白茫茫里。

曾聽一些長輩說過，冬至后，一九開始，諺語說“一九二九不出手，三九四九冰上走……”。雖然此時已不是一九二九，卻同樣寒冷?？墒窃诖笱╋w紛中，我并沒有感覺到無法出手的冷意，取而代之的是興奮。在雪中，我們奔跑與歡笑，在我們的歡聲笑語中，雪漸漸大了，雪花直直地快速墜落，鋪在地上，越來越密，越來越厚，像織成了一張大網(wǎng)?；氐浇淌?，平時最愛聽的生物課也無心眷戀，只是一直久久地注視窗外，希望不要停，越來越大，我不知道為什么這樣想，或許是想讓潔白的雪來豐富我的生活。

放學(xué)后，走在回家的路上，在微弱的燈光下，雪層反射出刺眼的白光，一閃一閃，接連不停，這時，我才能真正了解雪的晶瑩剔透，看著透明的雪，我甚至不忍去踩它們。

不管如何如何，我總覺得這次雪與其它時候不一樣，我也無法將全部都注入到這張紙上。