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篇1

關(guān)鍵詞：羊草；分子生物學(xué)；遺傳多樣性；組織培養(yǎng)；基因克隆

中圖分類(lèi)號(hào)：S543.901　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A　文章編號(hào)：1007-7847(2007)04-0289-06

羊草(Leymus chinensis)是多年生禾本科賴草屬草本植物，由于其環(huán)境適應(yīng)性較強(qiáng)。具有耐寒、耐旱、耐鹽堿等優(yōu)點(diǎn)而成為松嫩平原的優(yōu)勢(shì)物種，同時(shí)羊草也是一種重要的牧草資源，蛋白質(zhì)含量高，適口性好，耐踐踏，在發(fā)展草原畜牧業(yè)方面具有重大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益，但羊草種子發(fā)芽率低、種子萌發(fā)最適pH值為8.0～8.5，加上過(guò)變放牧和草地鹽堿化日益加重等原因，我國(guó)現(xiàn)存系統(tǒng)管理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(K09M6)羊草草地約有90％以上發(fā)生了不同程度的退化，因此，研究羊草的遺傳分化、抗逆機(jī)理、栽培育種以及轉(zhuǎn)基因等對(duì)于改善生態(tài)環(huán)境和草場(chǎng)建設(shè)具有重要意義，隨著分子生物學(xué)對(duì)各個(gè)學(xué)科的交叉滲透，使羊草的研究從細(xì)胞水平進(jìn)一步深入到分子水平，羊草屬于異交植物，物種趨向于在種群中具有較高水平的變異性，僅在松嫩草原中西部靠近內(nèi)蒙古高原東部草原上的羊草種群就數(shù)以千計(jì)，這為研究羊草種群的遺傳多樣性提供了對(duì)象，培養(yǎng)愈傷組織是進(jìn)行羊草轉(zhuǎn)基因研究的前期工作，但誘導(dǎo)率低的問(wèn)題尚未得到解決，筆者結(jié)合自己的科研工作，對(duì)羊草分子生物學(xué)領(lǐng)域的研究成果加以綜述，旨為羊草抗逆分子機(jī)理研究提供參考資料。

1　羊草遺傳多樣性研究

由于羊草生態(tài)適應(yīng)性強(qiáng)、分布范圍廣、生境類(lèi)型多樣，在長(zhǎng)期的適應(yīng)和進(jìn)化過(guò)程中，羊草種群之間在形態(tài)、生理、生態(tài)以及遺傳特征方面均產(chǎn)生了趨異，RAPD(randomly amplified polymorphic DNA，隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA)技術(shù)可以在對(duì)被檢對(duì)象無(wú)任何分子生物學(xué)資料的情況下對(duì)其基因組進(jìn)行分析，而且具有費(fèi)用較低、方便易行、模板DNA用量少、不需要同位素，在安全性和實(shí)驗(yàn)操作上具有比AFLP(amplified fragment length polymorphism，擴(kuò)增酶切片段多態(tài)性)、SSR(simple sequence rc-peat，微衛(wèi)星重復(fù)序列)等分子標(biāo)記更加簡(jiǎn)便易行等優(yōu)點(diǎn)，從而使其成為目前研究羊草遺傳多樣性的最重要的手段之一，該技術(shù)主要是利用各種群羊草的總基因組DNA作為模版，篩選能夠擴(kuò)增出具有明顯差異性條帶的隨機(jī)引物，以至少兩次重復(fù)均出現(xiàn)的結(jié)果做0，1矩陣圖，即有條帶記為1，無(wú)條帶記為0，計(jì)算總片段數(shù)及多態(tài)位點(diǎn)百分率、各種群間遺傳相似系數(shù)和遺傳距離，利用分析軟件進(jìn)行聚類(lèi)分析從而得到其遺傳結(jié)構(gòu)樹(shù)狀圖，

羊草RAPD分析可以用于研究羊草的種群關(guān)系以及遺傳分化的影響因子，崔繼哲等應(yīng)用RAPD技術(shù)證明相似生境或同一地域的種群在一些位點(diǎn)上表現(xiàn)出相似或相同的變化，劉惠芬等運(yùn)用RAPD技術(shù)對(duì)內(nèi)蒙古典型草原不同生境8個(gè)羊草種群進(jìn)行分析，聚類(lèi)結(jié)果顯示生境相似的種群能夠聚在一起，而地理距離最近的種群不一定歸為一類(lèi)，說(shuō)明小范圍內(nèi)羊草種群間的遺傳分化與地理距離不存在相關(guān)性，而與其生境間的相似度相關(guān)，影響遺傳相似性的不是單一因子而是各種因子的綜合作用，較小地理范圍內(nèi)羊草種群間的遺傳分化主要是由環(huán)境的異質(zhì)性所引起的，筆者曾以采自中國(guó)大安堿地生態(tài)試驗(yàn)站(N45°36′，E123°53′)的羊草種子單株播種栽培，以每株羊草幼苗的地上部為材料進(jìn)行RAPD分析，30個(gè)實(shí)驗(yàn)樣品的平均遺傳距離為0.1909，共可分為4個(gè)類(lèi)群(待發(fā)表)，通過(guò)RAPD分析，還可以進(jìn)一步將羊草遺傳分化多樣性的原因具體化，汪恩華等””利用分子標(biāo)記與形態(tài)標(biāo)記以21個(gè)有效隨機(jī)引物中對(duì)9份羊草材料進(jìn)行RAPD分析，對(duì)隨機(jī)抽取的17份禾草種質(zhì)進(jìn)行了種質(zhì)評(píng)估的比較研究，結(jié)果表明，羊草種質(zhì)的小穗數(shù)、種子千粒重、葉色、有性繁殖量和結(jié)實(shí)率5個(gè)形態(tài)學(xué)指標(biāo)與遺傳多樣性指標(biāo)存在一定的相關(guān)性，應(yīng)用RAPD技術(shù)對(duì)不同生境羊草在水分脅迫下游離脯氨酸含量的變化做聚類(lèi)圖比較分析，證實(shí)水分是影響羊草種群間遺傳變異和生態(tài)型分化的一個(gè)最主要的因子，雖然水因子是影響羊草分化的一個(gè)主導(dǎo)因子，但是在實(shí)際研究工作中也認(rèn)識(shí)到羊草變異和分化是多種生態(tài)因子綜合起作用的結(jié)果(如溫度、海拔、經(jīng)緯度、土壤類(lèi)型等)，而且各因子之間又是相互影響，在不同的生境中限制因子又是變換的，這就造成不同地理種群的羊草遺傳分化過(guò)程的復(fù)雜性，由此可見(jiàn)，目前以羊草為實(shí)驗(yàn)材料的RAPD分析雖有許多報(bào)道。但是由于羊草本身具有較高的種群變異性。組成羊草群落的植物總計(jì)有357種，加之尚缺乏一種統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)分型方法，因此RAPD技術(shù)就成為研究羊草分類(lèi)及來(lái)源的主要工具，在物種鑒定及遺傳分化研究中發(fā)揮著重要作用。

除了RAPD技術(shù)以外，等位酶技術(shù)也可用于羊草遺傳多樣性分析，等位酶是指由一個(gè)位點(diǎn)的不同等位基因編碼的同種酶的不同類(lèi)型，其功能相同但氨基酸序列不同，崔繼哲等通過(guò)該技術(shù)，綜合分析了松嫩平原11個(gè)羊草種群的遺傳多樣性及遺傳分化指標(biāo)，深入剖析了灰綠型和黃綠型兩種葉色類(lèi)型羊草種群之間的遺傳差異，證明種群間的遺傳距離與地理距離之間沒(méi)有相關(guān)，崔繼哲等還采用淀粉凝膠電泳技術(shù)，應(yīng)用等位酶分析方法測(cè)定了松嫩平原南部微生境下羊草灰綠色和黃綠色兩種生態(tài)型9個(gè)種群的遺傳多樣性和遺傳分化程度，證明羊草種、種群和生態(tài)型水平都維持較高的遺傳多樣性，兩種生態(tài)型之間有明顯的遺傳多樣性差異及遺傳分化，另外，對(duì)不同生境、不同分類(lèi)種群的遺傳結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)羊草種群遺傳變異度很高，但是無(wú)論如何歸屬，松嫩草原上的羊草種群遺傳分化程度很低，推測(cè)可能與羊草為異花授粉、不同類(lèi)型混生及種群間基因流強(qiáng)度大有關(guān)，劉杰等曾用SSR作為探針構(gòu)建了羊草的遺傳指紋圖譜，為羊草種質(zhì)資源評(píng)價(jià)、種間及種內(nèi)親源關(guān)系分析、生物多樣性研究提供了有效手段，利用AFLP方法對(duì)我國(guó)不同地區(qū)分布的羊草材料進(jìn)行的DNA多態(tài)性分析結(jié)果也表明了羊草基因組DNA具有比較豐富的多態(tài)性。

2 羊草愈傷組織培養(yǎng)及利用

植物組織細(xì)胞培養(yǎng)(plant tissue and cell cul-ture)是通過(guò)運(yùn)用植物組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)實(shí)現(xiàn)植物育種獲得新品種的一條快捷途徑，既可以通過(guò)

花粉培養(yǎng)、未授粉子房以及胚株培養(yǎng)等誘導(dǎo)形成單倍體植物，也可以通過(guò)植物愈傷組織培養(yǎng)中普遍存在的染色體變異實(shí)現(xiàn)植物突變育種，另外，通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行的植物細(xì)胞融合(尤其是原生質(zhì)體融合)、胚胎培養(yǎng)以及植物體外受精技術(shù)可獲得遠(yuǎn)緣雜交種，通過(guò)植物組織培養(yǎng)中的莖尖培養(yǎng)能夠產(chǎn)生無(wú)病毒原種，因而可用于植物脫毒，解決生產(chǎn)實(shí)踐中植物病毒危害問(wèn)題，組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程學(xué)、遺傳學(xué)、植物生理學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究的重要基礎(chǔ)，不僅用于快速繁殖。還用于單倍體育種、種質(zhì)保存、生理學(xué)研究和基因轉(zhuǎn)化等領(lǐng)域。

早在上世紀(jì)80年代，高天舜就利用羊草根莖作為外植體進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)和植株再生材料，目的是為了改良羊草的遺傳性狀，試圖通過(guò)組織培養(yǎng)途徑獲得羊草新類(lèi)型，該研究采用當(dāng)年生羊草根莖幼嫩部分的節(jié)間基部切段以及隔年生老根莖和當(dāng)年生根莖的芍間中部、頂部切段作為外植體，消毒處理后接種于3種MS培養(yǎng)基中，先進(jìn)行暗培養(yǎng)。待長(zhǎng)出愈傷組織后轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)率平均在20％左右，分化率最高也只有24.2％，羊草幼穗和成熟種子也可作為誘導(dǎo)愈傷組織的外植體，劉公社等，以幼穗作為外植體，恒溫25℃條件下誘導(dǎo)愈傷組織，在加有1mg/L2，4-D MS培養(yǎng)基上繼代2次后，轉(zhuǎn)移到含1.0mg/L KT和0.5mg/NAA的MS培養(yǎng)基上分化培養(yǎng)得到再生芽，并在無(wú)激素的基本培養(yǎng)基上獲得了生根的試管苗，移栽到溫室后可正常生長(zhǎng)，盡管從羊草葉片、幼穗和成熟胚在同樣培養(yǎng)條件下均能誘導(dǎo)出愈傷組織，但只有幼穗愈傷組織能夠繼續(xù)分化出再生植株，但分化率因基因型和外源激素的不同而不同，以成熟羊草種子為外植體誘導(dǎo)愈傷組織具有操作簡(jiǎn)便、污染程度低、材料選擇直觀化的優(yōu)點(diǎn)，且誘導(dǎo)率和幼苗分化率較高、幼苗健壯、生長(zhǎng)勢(shì)好，崔秋華等采用3種培養(yǎng)基(MS、B5和8114)，3種2，4-D的濃度水平(1、2、4 mg/L)培養(yǎng)羊草幼嫩根莖和種子，結(jié)果表明，以種子作為外植體可獲得較高的愈傷組織誘導(dǎo)率(29.05％)，但目前對(duì)于最適激素濃度沒(méi)有統(tǒng)一結(jié)論，其范圍從1～4mg/L不等，對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)效果也未達(dá)到令人滿意的水平，仍需要深入研究。

在對(duì)羊草愈傷組織的應(yīng)用方面，可以以羊草種子誘導(dǎo)出的愈傷組織為材料，用含有NaCl的培養(yǎng)基和含有NaHCO3與Na2CO3的混合鹽培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)定羊草愈傷組織的耐鹽性，結(jié)果表明羊草愈傷組織對(duì)NaCl最大耐受強(qiáng)度為180mmol/L；對(duì)NaHC03與Na2CO3的混合鹽的最大耐受強(qiáng)度為4mmol/L中性鹽(NaCl)與堿性鹽(NaHCO3與Na2CO3)對(duì)羊草愈傷組織的脅迫機(jī)制明顯不同，國(guó)內(nèi)外對(duì)于愈傷組織的培養(yǎng)大多應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因，但在羊草方面進(jìn)行的該項(xiàng)研究卻很少，劉公社將攜帶PAT基因的質(zhì)粒通過(guò)基因槍法轉(zhuǎn)化羊草愈傷組織。然后在篩選培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，篩選抗性愈傷組織并轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，得到再生苗，然后接種到含有篩選劑的生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)后得到轉(zhuǎn)基因羊草小苗，該研究已獲得耐除草劑的羊草新品種專(zhuān)利，曲同寶等用基因槍將BADH基因轉(zhuǎn)入由羊草成熟胚誘導(dǎo)出的胚性愈傷組織中，獲得了轉(zhuǎn)基因植株，經(jīng)過(guò)PCR檢測(cè)證明外源基因已整合到羊草基因組中并得以表達(dá)，雖然轉(zhuǎn)入羊草的基因都可被檢測(cè)到已整合人羊草基因組中，而且也得到表達(dá)，但是對(duì)于轉(zhuǎn)基因羊草對(duì)周?chē)鷳B(tài)環(huán)境的影響還未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道，篩選突變體是羊草愈傷組織的另一用途，陳暉等用組織培養(yǎng)方法篩選獲得羊草抗羥脯氨酸(HYP)變異系HR20-8，該變異系細(xì)胞內(nèi)游離氨基酸和蛋白質(zhì)組分氨基酸含量均發(fā)生了較大的變化，與供體對(duì)照比較，分別提高2.35倍和1.40倍，其中，游離脯氨酸和蛋白質(zhì)組分脯氨酸分別提高6.6倍和3.0倍，且脯氨酸合成途徑必需的r-谷氨酸激酶的活性提高了2.5倍。

3 羊草酶蛋白類(lèi)研究

蛋白質(zhì)是生物體生命中的第一重要物質(zhì)，是生理功能的執(zhí)行者，是生命現(xiàn)象的直接體現(xiàn)者，同時(shí)能夠調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)，植物對(duì)抗非生物脅迫必然有蛋白質(zhì)的參與，比如耐冷蛋白、熱休克蛋白、水通道蛋白、赤霉素信號(hào)傳導(dǎo)蛋白等，從羊草中檢測(cè)這些蛋白的含量以及克隆表達(dá)該蛋白的基因?qū)τ谘芯垦虿菽湍娣肿訖C(jī)理和改善羊草品質(zhì)都具有重要意義。

目前對(duì)于羊草酶蛋白的研究還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，主要有細(xì)胞色素氧化酶、過(guò)氧化物酶、脂酶同工酶等，其應(yīng)用也僅局限于闡明羊草的遺傳分化，通過(guò)聚類(lèi)分析可以研究羊草種群在不同地理及生態(tài)環(huán)境中羊草在分子水平上細(xì)胞色素氧化酶同工酶存在著種內(nèi)分化，羊草在同工酶水平上的分化受多個(gè)環(huán)境因子的綜合影響，而且與羊草耐寒性能存在一定的內(nèi)在聯(lián)系，張麗萍等對(duì)采自同一天然草地上葉片呈黃綠色、灰綠色兩種類(lèi)型羊草的根、莖、葉的過(guò)氧化物同工酶、脂酶同工酶進(jìn)行了分析比較，結(jié)果表明，兩種葉色羊草，其相同組織的過(guò)氧化物同工酶譜及脂酶同工酶譜基本一致，兩種羊草葉片呈現(xiàn)不同顏色只屬不同生態(tài)型，

磁場(chǎng)處理不僅可以促進(jìn)羊草的生長(zhǎng)。而且還能提高羊草的抗鹽堿性，磁場(chǎng)使羊草過(guò)氧化物酶(POD)活性提高，并且誘發(fā)了一條新的同工酶帶，張衛(wèi)東等認(rèn)為羊草自交不孕的原因是自交不親和。并利用禾本科植物自交不親和性有關(guān)的硫氧還蛋白(thsioredoxin)^基因設(shè)計(jì)的引物在羊草DNA中檢測(cè)到預(yù)期片段，說(shuō)明硫氧還蛋白h基因可能與羊草的自交不親和性有關(guān)，該基因現(xiàn)已被克隆并能夠從GenBank中查到其序列。

研究羊草草原土壤酶的活性可以判斷土壤的肥力，土壤肥力水平接近則土壤酶的活性相似，土壤蛋白酶、脲酶、多酚氧化酶的活性與土壤有機(jī)碳、全氮呈顯著相關(guān)關(guān)系，可以反映土壤肥力水平高低，是評(píng)價(jià)土壤退化的重要指標(biāo)。

4 羊草耐逆基因的分離與克隆

羊草具有耐寒、耐旱、耐鹽堿的特性，并且蛋白質(zhì)含量較高，說(shuō)明羊草在面對(duì)非生物脅迫時(shí)高效表達(dá)能夠適應(yīng)、緩解或?qū)瓜鄳?yīng)逆境條件的物質(zhì)，尤其是調(diào)控這些物質(zhì)表達(dá)的酶類(lèi)基因，據(jù)報(bào)道，羊草種子個(gè)體萌發(fā)期最大忍受pH范圍是9.14-9.53，對(duì)于NaCl可耐受的最大強(qiáng)度為600mmol/L，對(duì)于Na2C03可耐受的最大強(qiáng)度為175mmol/L，為了弄清這種適應(yīng)機(jī)制的復(fù)雜性，通過(guò)大規(guī)模的cDNA克隆或者表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)的測(cè)序分離相關(guān)基因是非常重要的，Jin等采集自然生長(zhǎng)的植物葉組織經(jīng)過(guò)Na2CO3脅迫處理構(gòu)建了cDNA文庫(kù)，并對(duì)其EST進(jìn)行測(cè)序?qū)Ρ确治?，推斷在羊草葉和根中各有39和31個(gè)非生物脅迫相關(guān)基因，這些EST資源將有助于對(duì)植物耐鹽堿分子基礎(chǔ)的深入研究和理解。

甜菜堿是在生物體內(nèi)起著滲透保護(hù)作用最主要的細(xì)胞相溶性物質(zhì)，編碼決定該物質(zhì)合成的關(guān)鍵酶一甜菜堿醛脫氫酶(BADH)基因已經(jīng)先后從多種生物體內(nèi)得到克隆，并在多種植物中進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化。已獲得了抗鹽、抗寒、耐旱能力得到較大程度提高的轉(zhuǎn)基因植株，某些植物體內(nèi)的甜菜堿含量和BADH活性隨著土壤鹽堿化程度的加重而增加，因此推測(cè)甜菜堿可能與羊草耐鹽堿性有關(guān)，目前羊草中的部分BADH基因片段也已經(jīng)被成功克隆。

5　問(wèn)題與展望

篇2

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1006-1959(2009)07-0280-02

腎細(xì)胞癌(renalcellcarcinoma,RCC)是泌尿系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,長(zhǎng)期危害著人類(lèi)健康。近十年來(lái),對(duì)腎細(xì)胞癌的分子生物學(xué)研究取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展,使我們對(duì)腎細(xì)胞癌有了更深刻的認(rèn)識(shí)。本文就腎細(xì)胞癌各種病理分型的分子生物學(xué)研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1腎細(xì)胞癌發(fā)生的分子生物機(jī)制

腎癌的發(fā)生發(fā)展是多階段、多步驟的過(guò)程,包括癌基因激活和抑癌基因(tumorsuppressorgene,TSG)失活在內(nèi)的一系列遺傳學(xué)改變。抑癌基因的缺失或失活是腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中重要的分子事件之一。腫瘤常在抑癌基因位點(diǎn)出現(xiàn)染色體基因缺失,表現(xiàn)為等位基因雜合性缺失(lossofheterozygosity,LOH),通過(guò)檢測(cè)分析腫瘤LOH及其規(guī)律,可在染色體一定范圍內(nèi)發(fā)現(xiàn)腫瘤的抑癌基因及易感基因。為了能較全面的了解導(dǎo)致腎細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵分子事件,不同學(xué)者對(duì)腎細(xì)胞癌全基因組進(jìn)行了不同的研究,發(fā)現(xiàn)腎細(xì)胞癌發(fā)生高頻率LOH主要見(jiàn)于以下幾個(gè)染色體:3p、5q、8p、9p、10q、14q、17和18q染色體。

1.13號(hào)染色體:3號(hào)染色體短臂的部分缺失是腎癌基因改變中的高發(fā)事件。其中定位于3p25-26的VHL抑癌基因被認(rèn)為是這些基因改變的首要目標(biāo)。在以前的研究中,VHL在腎透明細(xì)胞癌(cc-RCC)中的失活機(jī)制主要為等位基因缺失和突變,DNA超甲基化很少見(jiàn)。劉寧等利用PCR限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性法對(duì)3號(hào)染色體上的VHL基因的兩個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)來(lái)分析VHL基因的雜合性缺失失情況,發(fā)現(xiàn),42%(8/19)發(fā)生VHL基因LOH,并未發(fā)現(xiàn)VHL基因失活與腫瘤的分期、分級(jí)存在聯(lián)系。

有雜合性缺失研究顯示,有可能在染色體3p上存在另外的RCC相關(guān)抑癌基因。定位于染色體3p14.2上包含最常見(jiàn)的FRA3B脆性位點(diǎn)的FHIT基因作為候選抑癌基因日益受到關(guān)注。Velickovic等通過(guò)選擇性的檢測(cè)FHIT區(qū)域的LOH發(fā)生情況認(rèn)為這個(gè)基因在ccRCC的發(fā)展過(guò)程中起到很重要的作用。并且發(fā)現(xiàn)在cc-RCC中染色體3p的LOH發(fā)生率達(dá)76%。Farkas等對(duì)88例腎細(xì)胞癌病例進(jìn)行LOH研究,選取了3p14.2-p25范圍內(nèi)16個(gè)位點(diǎn)采用PCR技術(shù)進(jìn)行LOH分析,結(jié)果顯示VHL基因和FHIT基因區(qū)域,透明細(xì)胞癌的LOH發(fā)生率高達(dá)96%,而狀細(xì)胞癌和嫌色細(xì)胞癌僅為10%和18%,并且LOH的發(fā)生率與腫瘤大小、分期、分級(jí)無(wú)關(guān)。從而認(rèn)為VHL和FHIT的等位基因缺失是腫瘤發(fā)生的早期事件。

1.25號(hào)染色體:1986年APC基因首次在一位患有息肉病及多種其它先天性畸形患者的5號(hào)染色體長(zhǎng)臂片段先天性中間缺失中得到證實(shí),確切的基因位點(diǎn)隨后由定位克隆確定。Pecina-SlausN等利用相對(duì)外顯子11和15的特殊寡核苷酸引物對(duì)36例腎細(xì)胞癌病例進(jìn)行限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性的檢測(cè),了解與APC基因相關(guān)的LOH情況,并同時(shí)檢測(cè)APC蛋白的表達(dá)情況。研究發(fā)現(xiàn)36例樣本中有33例為信息性病例,其中有17例出現(xiàn)LOH,并且LOH的發(fā)生與年齡以及腫瘤的TNM分期呈正相關(guān)。但并不是所有出現(xiàn)LOH的病例都有APC蛋白的表達(dá)。從而認(rèn)為APC基因與腫瘤的進(jìn)展有著密切關(guān)系,可能不是腫瘤發(fā)生的早期事件。

1.38號(hào)、9號(hào)染色體:Presti等學(xué)者對(duì)72例腎透明細(xì)胞癌進(jìn)行LOH測(cè)定,并將LOH作為臨床預(yù)后指標(biāo)的評(píng)估,他們選取了3p,8p,9p,14q四個(gè)不同的染色體,在每個(gè)染色體上選取兩對(duì)引物,結(jié)果顯示8p、9p的LOH發(fā)生率與腫瘤復(fù)發(fā)率正相關(guān)。由此推測(cè)8p、9p的LOH可作為判斷局部進(jìn)展型腎癌預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)。

近年來(lái)許多學(xué)者在多種腫瘤,如肺癌、食管癌、黑色素、胃癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤等研究中均發(fā)現(xiàn),9號(hào)染色體常出現(xiàn)較高頻率的LOH,所以推測(cè)9號(hào)染色體上存在不止一個(gè)與這些腫瘤的發(fā)生相關(guān)的抑癌基因。Fukunaqa等利用熒光多重PCR技術(shù)比較提取自腫瘤組織和對(duì)應(yīng)的外周血液樣本中的DNA,通過(guò)對(duì)9號(hào)染色體上的13個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)109例腎細(xì)胞癌中27例至少有一個(gè)位點(diǎn)出現(xiàn)LOH,其中最高發(fā)生率出現(xiàn)在PTCH基因所在的9P22區(qū)域。而Sanz-casla等對(duì)40例單發(fā)腎細(xì)胞癌病例同時(shí)進(jìn)行p16基因附近染色體9p21區(qū)域的LOH和p16基因啟動(dòng)子超甲基化的檢測(cè),出現(xiàn)LOH的為9例,超甲基化的為8例但是兩者之間沒(méi)有必然聯(lián)系由此推測(cè)p16基因的失活和其他未知的抑癌基因共同參與腎細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)制。Grady則通過(guò)對(duì)60例腎細(xì)胞癌病例進(jìn)行9號(hào)染色體上的16個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)的LOH分析,60例樣本中至少一個(gè)位點(diǎn)出現(xiàn)LOH的為44例,主要缺失區(qū)域出現(xiàn)在位于9p21的DS171、D9S1749和DS270上。有46%的病例在9q32-9q33出現(xiàn)LOH,在這一區(qū)域的D9S170位點(diǎn)LOH發(fā)生率達(dá)22%,研究認(rèn)為除了在9p21附近的p16候選抑癌基因外,在9p21以及9q32-9q33附近很有可能存在其它的抑癌基因。

1.410號(hào)染色體：Velickovic等對(duì)10號(hào)染色體上與PTEN/MMAC1抑癌基因相關(guān)的7個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記物L(fēng)OH發(fā)生率進(jìn)行分析，其中腎透明細(xì)胞癌的LOH發(fā)生率為37.5%，狀細(xì)胞癌為29.7%，嫌色細(xì)胞癌為87.5%，且LOH發(fā)生率與腫瘤的分期、分級(jí)和生存率有關(guān)，并且認(rèn)為雙等位基因失活的發(fā)生多由非點(diǎn)突變畸變導(dǎo)致。

1.514號(hào)染色體：Kaku等對(duì)染色體14q24-31區(qū)域的7個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)42例信息性病例中23例（54.8%)出現(xiàn)LOH，并發(fā)現(xiàn)LOH發(fā)生最普遍的區(qū)域位于D14S67附近的2-Mb范圍，且LOH的發(fā)生率與腫瘤分期呈正相關(guān)。同樣Alimov等利用2個(gè)RFLP位點(diǎn)對(duì)45例腎細(xì)胞癌患者進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)45例信息性病例中17例（38%）在染色體14q31-q32.2上出現(xiàn)LOH，并且LOH的發(fā)生率與腫瘤的分級(jí)和低生存率正相關(guān)。而Gallou等的實(shí)驗(yàn)則將14q上的普遍缺失區(qū)域定位于D14S281到D14S277之間。另外有學(xué)者對(duì)130例腎透明細(xì)胞癌病例采用D14S588、D14S617、GATA136B01三個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行LOH分析，數(shù)據(jù)顯示LOH發(fā)生率與腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)、生長(zhǎng)速度以及致死率呈正相關(guān)。

以上關(guān)于14q染色體的LOH研究均顯示與腫瘤的分級(jí)和低生存率呈正相關(guān)關(guān)系，表明腫瘤的14qLOH很可能與腫瘤的侵襲發(fā)展有關(guān)。

1.617號(hào)染色體：p53基因位于17p13.1上，具有反式激活功能和廣譜抑癌作用，與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有關(guān)。因此研究染色體17p上TP53位點(diǎn)的LOH情況對(duì)于揭示P53在腫瘤發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮的作用意義重大。在29例腎細(xì)胞癌中，W.M.L.報(bào)道了關(guān)于P53的雜合性缺失為48%(14/29)，并通過(guò)序列測(cè)定確認(rèn)單鏈構(gòu)象多態(tài)性而發(fā)現(xiàn)了有11例出現(xiàn)突變。Ogawa等利用p53基因附近的5個(gè)多態(tài)性探針對(duì)48例腎癌進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)染色體17p的等位基因缺失率為17%(6/36)，并且染色體17p的等位基因缺失與腫瘤分期無(wú)確切相關(guān)性。其他研究者發(fā)現(xiàn)在17號(hào)染色體上還存在著其它LOH發(fā)生區(qū)域。Khoo等對(duì)BHD基因區(qū)域的2個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)D17S740和D17S2196進(jìn)行檢測(cè)，28例腎細(xì)胞癌中10例（36%）出現(xiàn)LOH，其中6例嫌色細(xì)胞癌中2例（33%）出現(xiàn)LOH，6例狀細(xì)胞癌中出現(xiàn)5例（83%），透明細(xì)胞癌12例出現(xiàn)3例（25%）。并推測(cè)BHD基因可能在腎臟腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。而Simon-kayser等對(duì)處于17q11到17q23之間的7個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè)，15例狀腎細(xì)胞癌中14例為信息性病例7例出現(xiàn)LOH。發(fā)生頻率最高的為與FBXO47候選抑癌基因相關(guān)的D17s250位點(diǎn)。

1.718號(hào)染色體：Hirata等對(duì)126例腎透明細(xì)胞癌病例進(jìn)行研究，通過(guò)對(duì)染色體18q上的9個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)24例(19%)發(fā)生LOH，LOH最高發(fā)生率出現(xiàn)在DCC基因所在的18q21.3區(qū)域，并發(fā)現(xiàn)LOH的發(fā)生率與性別、腫瘤分期、分級(jí)、等參數(shù)無(wú)關(guān)。認(rèn)為DCC和SMAD4可能做為候選抑癌基因與腎透明細(xì)胞癌的發(fā)生有關(guān)。 2腎細(xì)胞癌的病理分型與分子生物學(xué)機(jī)制

1997年國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)和美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)(AJCC)根據(jù)已知基因改變以及腫瘤細(xì)胞起源，并結(jié)合腫瘤細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)將腎癌分為透明細(xì)胞癌(clearcellrenalcellcarcinoma)、狀腎細(xì)胞癌(papillaryrenalcellcarcinoma)、嫌色細(xì)胞癌(chromophoberenalcellcarcinoma)和集合管癌（carcinomaofthecollectingducts）4種基本形式。約有4％~5％腎癌細(xì)胞形態(tài)及遺傳學(xué)改變不一，細(xì)胞成分混雜或有未識(shí)別的細(xì)胞成分，此類(lèi)腫瘤歸為未分類(lèi)腎細(xì)胞癌（renalcellcarcinoma，unclassified），有待今后進(jìn)一步研究。由于在各型腎癌組織中都可見(jiàn)到細(xì)胞質(zhì)中含有嗜酸顆?；蛩笮渭?xì)胞成分，所以在新分類(lèi)中取消了顆粒細(xì)胞癌和肉瘤樣癌。

腎透明細(xì)胞癌或稱為傳統(tǒng)的腎細(xì)胞癌或非狀腎癌，約占70％~80％，是最常見(jiàn)的病理類(lèi)型，起源于腎近曲小管。已明確的遺傳學(xué)改變是以3p缺失、VHL基因突變、甲基化或缺失為特征，此外尚有不十分明確的改變。綜合國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，常見(jiàn)的染色體缺失區(qū)域包括4q、6q、9p、13q、Xq、8p，常見(jiàn)的染色體擴(kuò)增區(qū)域包括5q、9q、17p、17q。Jiang等利用分枝樹(shù)模型及時(shí)間樹(shù)模型對(duì)腎癌比較基因組雜交數(shù)據(jù)進(jìn)行分析后認(rèn)為透明細(xì)胞癌至少可能分為兩個(gè)亞型，一型伴有-6、+17p、+17q，另一型伴有-9p、-13q、-18q。-4q是透明細(xì)胞癌發(fā)展過(guò)程中除-3p外的另一重要早期事件，-8q多出現(xiàn)在轉(zhuǎn)移灶中，是原發(fā)性透明細(xì)胞癌的一個(gè)晚期事件，9p、13q上可能存在與腎癌進(jìn)展相關(guān)的抑癌基因。

狀腎細(xì)胞癌或稱為嗜色腎細(xì)胞癌或腎小管狀癌，約占10％一15％，是第二常見(jiàn)的腎惡性腫瘤，可能起源于腎近曲小管。遺傳學(xué)上，以Y染色體丟失、7號(hào)染色體和17號(hào)染色體的三倍體或四倍體異常為特征，此外較典型的分子遺傳學(xué)異常尚有C-MET基因活化、+12q、+16q、+20q、-1P、-4q、-6q、-9p、-13q、-xp、-xq、-Y等。Delahunt和Eble在1997年應(yīng)用免疫組化方法分析91例狀腎細(xì)胞癌，根據(jù)形態(tài)學(xué)改變分為2型，1型狀腎細(xì)胞癌光學(xué)顯微鏡下呈管狀結(jié)構(gòu)，被覆小細(xì)胞，含有卵圓形小細(xì)胞核，核仁不顯著，胞質(zhì)少、灰白。2型狀腎細(xì)胞癌為狀結(jié)構(gòu)，被覆豐富嗜酸性胞質(zhì)的大細(xì)胞，含有大球形細(xì)胞核。分析結(jié)果顯示：7號(hào)染色體和17號(hào)染色體倍體異常多見(jiàn)于狀腎細(xì)胞癌1型，而-Xp常提示預(yù)后不良。與透明細(xì)胞癌相比，狀腎細(xì)胞癌的多灶性或雙腎癌更常見(jiàn)。

嫌色細(xì)胞腎細(xì)胞癌約占5％，起源于腎集合小管暗細(xì)胞。遺傳學(xué)以多個(gè)染色體丟失和單倍體為特征，LOH常發(fā)生在1、2、6、10、13、17或21號(hào)染色體。

腎集合管癌少見(jiàn)，起源于腎髓質(zhì)或腎的中央?yún)^(qū)集合管上皮，遺傳學(xué)上的改變無(wú)統(tǒng)一形式，以染色體18、21和Y染色體單體丟失以及染色體7、12、17、20的多倍體異常較常見(jiàn)。

篇3

關(guān)鍵詞：豬傳染性胃腸炎；病毒分子；生物學(xué)檢測(cè)方法

中圖分類(lèi)號(hào) S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2016）12- 0110-02

豬傳染性胃腸炎（TGE）是由豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）導(dǎo)致豬出現(xiàn)脫水、水樣腹瀉以及嘔吐等為主要臨床癥狀的高度傳染性疾病，該病在春季、初秋以及冬季具有較高的發(fā)病率[1]。豬傳染性胃腸炎最早發(fā)生于美國(guó)，隨后在世界各地均有發(fā)生，我國(guó)于20世紀(jì)50年代首次發(fā)現(xiàn)該病，目前全國(guó)大部分地區(qū)均發(fā)生過(guò)豬傳染性胃腸炎。不同日齡和品種的豬均可以感染傳染性胃腸炎，其中以15日齡左右的仔豬發(fā)病后死亡率最高，高達(dá)100%；5周齡以上的仔豬感染傳染性胃腸炎后死亡率較低，但是會(huì)影響仔豬后期的生長(zhǎng)，降低仔豬的飼料利用率。目前，該病已被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為B類(lèi)必檢傳染性疾病。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，該技術(shù)已經(jīng)廣泛用于各種細(xì)菌性和病毒性疾病的檢測(cè)[2]。本文綜述了分子生物學(xué)技術(shù)在傳染性胃腸炎中的應(yīng)用，以期能為從事傳染性胃腸炎診斷和防控的工作者提供幫助。

1 傳染性胃腸炎病毒基因組結(jié)構(gòu)和基因表達(dá)方式

1.1 TGEV基因組結(jié)構(gòu) 傳染性胃腸炎病毒屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬，該病毒的基因組不分節(jié)段、單股正股RNA，具有高度傳染性。傳染性胃腸炎基因組全序列分為7個(gè)區(qū)29kb，結(jié)構(gòu)序列為5'-la-lb-S-3a-3b-sM-M-N-7-3'，并且該基因組的3'-末端以共價(jià)鍵結(jié)合的poly結(jié)構(gòu)，5'末端有帽結(jié)構(gòu)[3]?；蚪M1約有20kb，主要負(fù)責(zé)病毒的編碼，其余基因均在近3'端。傳染性胃腸炎病毒全基因組編碼由4種結(jié)構(gòu)蛋白和3種非結(jié)構(gòu)蛋白組成，其中基因7、基因3和基因1為非結(jié)構(gòu)蛋白，N、M、sM、S為傳染性胃腸炎的結(jié)構(gòu)蛋白。

1.2 基因表達(dá)方式 傳染性胃腸炎病毒在胞漿脫殼以后，其正鏈RNA就呈現(xiàn)了mRNA的功能，使基因1轉(zhuǎn)錄表達(dá)RNA聚合酶，同時(shí)該基因有作為模板合成負(fù)鏈RNA，進(jìn)而親代RNA與負(fù)鏈RNA形成雙鏈復(fù)制中間體。因此，在感染傳染性胃腸炎病毒的細(xì)胞內(nèi)，可以檢測(cè)出不完全RNA、基因組RNA、mRNA以及雙鏈中間體4個(gè)特異性RNA，這可以作為豬傳染性胃腸炎病毒分子生物學(xué)檢測(cè)指標(biāo)之一[4]。

2 結(jié)構(gòu)蛋白及功能

豬傳染性胃腸炎病毒的結(jié)構(gòu)蛋白主要為S糖蛋白、M蛋白、N蛋白以及sM蛋白等。S蛋白是豬傳染性胃腸炎病毒纖突的主要成分之一，在病毒粒子的表面，該蛋白基因全長(zhǎng)4.3kb，蛋白分子量為195～220ku；S蛋白不僅是決定豬傳染性胃腸炎病毒抗原的重要結(jié)構(gòu)，也影響著病毒對(duì)細(xì)胞的致病性、親嗜性等。M蛋白是構(gòu)成病毒粒子蛋白的主要有效成分之一，研究表明[5]，M蛋白前體是由膜外區(qū)、信號(hào)肽、極性區(qū)、跨膜區(qū)突于病毒粒子內(nèi)C-端區(qū)等功能區(qū)域構(gòu)成，分子質(zhì)量為29～31ku；M蛋白不僅決定了病毒粒子的出芽位點(diǎn)和裝配位點(diǎn)，也可以影響病毒變異。N蛋白是一種酸性蛋白質(zhì)，分子量為47KDa，含有382個(gè)氨基酸殘基，該蛋白不僅是豬傳染性胃腸炎病毒的結(jié)構(gòu)蛋白，同時(shí)對(duì)病毒基因組的加工、復(fù)制都具有重要作用。sM蛋白分子質(zhì)量為78ku，含有1種小膜蛋白和82個(gè)氨基酸殘基，該功能蛋白在抗豬傳染性胃腸炎病毒感染的體液和細(xì)胞免疫中具有重要作用。

3 分子生物學(xué)檢測(cè)方法

3.1 核酸探針 核酸探針檢測(cè)方法的基本原理是利用核苷酸堿基互補(bǔ)，在堿基互補(bǔ)過(guò)程中，采用標(biāo)記物標(biāo)記與被檢測(cè)靶序列互補(bǔ)的單鏈核酸分子，進(jìn)而檢測(cè)到目的核序列。該檢測(cè)方法與掃描電鏡、熒光抗體試驗(yàn)、病毒分離等相比，具有較好的特異性，并且可以實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)的目的?，F(xiàn)代研究表明[6]，不同的病毒探針可以分別擴(kuò)增出與其對(duì)應(yīng)的病毒模板，對(duì)其他病毒模板影響不大，同時(shí)核酸探針擴(kuò)增的最低檢測(cè)限為3 000～6 000個(gè)拷貝的單個(gè)病毒核酸，具有較高的特異性和敏感性。

3.2 普通RT-PCR方法 該檢測(cè)方法使用的首要條件是知道被檢測(cè)病原的相關(guān)目的基因序列，根據(jù)相關(guān)目的序列后，采用相關(guān)軟件設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物，然后進(jìn)行體外擴(kuò)增目的基因，進(jìn)而達(dá)到檢測(cè)的目的。王黎等[7]采用RT-PCR方法檢測(cè)豬傳染性胃腸炎病毒，并采用相同濃度做重復(fù)性檢測(cè)，結(jié)果顯示RT-PCR擴(kuò)增的特異性條帶為590bp左右；然后又以豬瘟病毒、豬細(xì)小病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬偽狂犬病病毒以及豬輪狀病毒做特異性試驗(yàn)，結(jié)果顯示僅有豬傳染性胃腸炎病毒得到了特異性目的條帶，所以RT-PCR檢測(cè)方法對(duì)豬傳染性胃腸炎病毒檢測(cè)具有較好的重復(fù)性和特異性。

3.3 多重RT-PCR方法 多重RT-PCR檢測(cè)方法是以普通PCR為基礎(chǔ)發(fā)展的一種新型檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法可以在一個(gè)PCR反應(yīng)體系中加入多對(duì)引物，并通過(guò)采用優(yōu)化后的PCR反應(yīng)條件，達(dá)到同時(shí)檢測(cè)多種病原的目的，具有快速、成本低等優(yōu)點(diǎn)，目前也常用于各種疾病的診斷。霍金耀等[8]建立了多重RT-PCR法檢測(cè)傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、嵴病毒和A群輪狀病毒的方法，并對(duì)該檢測(cè)方法進(jìn)行了敏感性試驗(yàn)和特異性試驗(yàn)，結(jié)果顯示，多重RT-PCR法可以檢測(cè)出50TCID50的混合病毒，且能擴(kuò)增出長(zhǎng)度為275bp、544bp、750bp的3條特異性片段，具有較高的特異性和敏感性，可以在臨床上推廣使用。

3.4 套式PCR方法 套式PCR方法需要設(shè)計(jì)內(nèi)、外2對(duì)引物，并通過(guò)2次擴(kuò)增對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，該方法相對(duì)其他PCR檢測(cè)方法，具有較高的敏感性，且節(jié)約成本。現(xiàn)代研究表明，PCR技術(shù)在檢測(cè)病毒時(shí)，可以省略不同病毒分離的過(guò)程，具有較高的敏感性和特異性，而套式PCR方法在病毒粒子較少的情況下依然能夠檢測(cè)出，表明套式PCR比常規(guī)PCR具有更好的敏感性。沈海娥等[9]采用套式PCR檢測(cè)豬呼吸道冠狀病毒和豬傳染性胃腸炎病毒的S基因序列，根據(jù)兩組病毒的基因序列分別設(shè)計(jì)了2對(duì)引物，然后分別以豬呼吸道冠狀病毒細(xì)胞和豬傳染性胃腸炎病毒細(xì)胞為模板進(jìn)行套式PCR特異性片段擴(kuò)增，結(jié)果顯示，豬呼吸道冠狀病毒擴(kuò)增的基因片段為214bp，豬傳染性胃腸炎病毒擴(kuò)增的基因片段為886bp，同時(shí)檢測(cè)出了這種病毒，具有較高的特異性和敏感性。

3.5 熒光定量RT-PCR方法 熒光定量RT-PCR檢測(cè)方法的原理是在PCR反應(yīng)體系中采用熒光探針標(biāo)記法或加入了SYBR GreenI熒光染料標(biāo)記PCR的反應(yīng)產(chǎn)物，然后使用反應(yīng)儀器收集反應(yīng)產(chǎn)物的熒光信號(hào)，并根據(jù)熒光信號(hào)的強(qiáng)弱確定產(chǎn)物的量，進(jìn)而達(dá)到與起始模板準(zhǔn)確定量的目的。該檢測(cè)方法與常規(guī)RT-PCR相比，不需要進(jìn)行電泳試驗(yàn)檢測(cè)PCR反應(yīng)產(chǎn)物，反應(yīng)結(jié)果更為直觀、方便，同時(shí)又避免了因電泳試驗(yàn)對(duì)環(huán)境造成污染。王建中等[10]根據(jù)豬傳染性胃腸炎病病毒的S基因序列設(shè)計(jì)了引物，并通過(guò)多組試驗(yàn)對(duì)熒光定量RT-PCR反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果顯示，優(yōu)化后的檢測(cè)方法對(duì)其他病原的檢測(cè)結(jié)果均為陰性，檢測(cè)結(jié)果的敏感性高達(dá)43.07拷貝/μL，是常規(guī)PCR檢測(cè)方法的100倍，具有較高的敏感性和特異性。

3.6 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù) 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)是近幾年新興的一種分子生物學(xué)檢測(cè)方法，因其具有特異性強(qiáng)、敏感性高、檢測(cè)速度以及操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于病毒病和細(xì)菌病檢測(cè)。高睿澤等[11]根據(jù)豬傳染性胃腸炎病毒的N基因建立了環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增快速檢測(cè)方法，并對(duì)該檢測(cè)方法的敏感性和特異性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，該方法在63℃下可以使豬傳染性胃腸炎病毒N基因獲得較高的特異性擴(kuò)增，且與豬流行性腹瀉病毒等物交叉反應(yīng)，具有加高的特異性；同時(shí)該檢測(cè)方法可以檢測(cè)到131.4fg/μL的DNA，其靈敏度比常規(guī)PCR高出3個(gè)數(shù)量級(jí)。

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篇4

【關(guān)鍵詞】 肺癌 流行病學(xué) 女性

吸煙已被證實(shí)為肺癌發(fā)病的主要原因，西方國(guó)家統(tǒng)計(jì)80%的肺癌與吸煙有關(guān)，男性發(fā)病顯著高于女性。近年來(lái)，大量的統(tǒng)計(jì)資料顯示，20世紀(jì)90年代開(kāi)始西方發(fā)達(dá)國(guó)家男性肺癌的發(fā)病率和死亡率正緩慢下降，而女性肺癌的發(fā)病率和死亡率仍在持續(xù)上升，女性肺癌的危害日益引起關(guān)注[1]。

1 女性肺癌的流行狀況

美國(guó)女性肺癌死亡率從1930年到1997年上升了600%，1987年首次超過(guò)乳腺癌，成為美國(guó)女性惡性腫瘤的首位死因，2004年占所有女性腫瘤死亡的25%[2]。我國(guó)天津報(bào)道了過(guò)去20年該市區(qū)男性肺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)先揚(yáng)后抑，從20世紀(jì)90年代起略有下降趨勢(shì)，而女性肺癌的發(fā)病仍保持穩(wěn)定[3]。上海胸科醫(yī)院分析了1972年以來(lái)上海市區(qū)的肺癌標(biāo)化發(fā)病率男性呈下降趨勢(shì)，而女性持續(xù)穩(wěn)定，時(shí)間趨勢(shì)有上升可能[4]。隨著女性肺癌相關(guān)發(fā)病率和死亡率的增加與之伴隨的男性肺癌發(fā)病率和死亡率的下降，顯著改變了肺癌患者的男女性別比例，同時(shí)肺癌病理類(lèi)型在過(guò)去20年中也發(fā)生了改變，男性肺癌中腺癌的比例正在上升，而女性肺癌中鱗癌和小細(xì)胞肺癌的比例上升，這在很大程度歸因于煙草使用模式的變化[5]。與1960年煙草消費(fèi)的高峰時(shí)期比較，男性吸煙已下降了一半，但是女性煙草消費(fèi)只下降了25%[6]，美國(guó)仍有1/4的婦女吸煙，并有13%~22%的婦女在懷孕期吸煙[7]。吸煙婦女中非洲和亞洲人的比例明顯增多，估計(jì)從1990年起2 000萬(wàn)中國(guó)婦女開(kāi)始吸煙，在日本從1986~1991年吸煙婦女成倍增加，從9%上升到18%，因此有高吸煙特點(diǎn)的女性尚未達(dá)到肺癌高風(fēng)險(xiǎn)的年齡。隨著吸煙人群的增多，女性肺癌的發(fā)病率和死亡率可能會(huì)進(jìn)一步增高。

2 女性肺癌的危險(xiǎn)因素

吸煙是被公認(rèn)為肺癌的最主要致病因素，吸煙同樣增加了女性患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)。Aqudo等[8]報(bào)道了一項(xiàng)在歐洲6個(gè)國(guó)家9個(gè)腫瘤中心進(jìn)行的一項(xiàng)病例對(duì)照研究，該研究入組了1 556例年齡小于75歲的明確診斷的女性原發(fā)性肺癌患者，與2 450例相同年齡分布的非腫瘤女性對(duì)照，發(fā)現(xiàn)既往有吸煙史的女性增加了肺癌的發(fā)病率，OR為5.21，95%CI：4.49~6.05，而仍在吸煙的女性其肺癌的發(fā)生率更高，OR為8.90，95%CI：7.54~10.6。肺癌的發(fā)病與吸煙呈劑量正相關(guān)，每年10包可增加70%的肺癌風(fēng)險(xiǎn)，戒煙10年后，肺癌的風(fēng)險(xiǎn)下降20%。與吸煙最密切的病理類(lèi)型為小細(xì)胞肺癌，其次是鱗癌。

與男性相比，女性吸煙的人群要明顯低于男性，女性是否對(duì)煙草致癌更為敏感，長(zhǎng)期以來(lái)一直存在爭(zhēng)議。一個(gè)以醫(yī)院為基礎(chǔ)的病例對(duì)照研究，包括1981年到1994年新診斷肺癌病人1 889例，對(duì)照組為與吸煙無(wú)關(guān)的其他疾病2 070例，發(fā)現(xiàn)男性吸煙年齡要早于女性，每天吸煙支數(shù)及深吸煙要明顯多于女性，然而女性肺癌在各組織類(lèi)型的危險(xiǎn)比男性高1.2~1.7倍，對(duì)年齡、體重、身高進(jìn)行調(diào)整后，這種高危險(xiǎn)仍然沒(méi)有變化。Henschke等[9]調(diào)查了北美地區(qū)1993年到2005年近1.7萬(wàn)名無(wú)癥狀煙民，其吸煙至少10包/年，持續(xù)40年，基線時(shí)開(kāi)始CT篩選，7 498名吸煙女性中156人發(fā)生肺癌，肺癌發(fā)病率為2.1%。而9 427名男性吸煙患者中，113人發(fā)生肺癌，肺癌發(fā)病率為1.2%，與男性相比，女性發(fā)生肺癌的風(fēng)險(xiǎn)為1.9倍，95%CI：1.5~2.5，女性煙民發(fā)生肺癌的可能性是男性煙民的2倍，這表明女性對(duì)煙草致癌的敏感性更強(qiáng)。

另一方面，多中心的隊(duì)列研究早已認(rèn)定，女性對(duì)煙草致癌的敏感性與男性相同。美國(guó)癌癥科學(xué)預(yù)防研究Ⅰ，一項(xiàng)入組超過(guò)百萬(wàn)隨訪12年的多中心前瞻研究，證實(shí)吸煙患肺癌的相對(duì)危險(xiǎn)，男女性別比為9.4。Bain 等[10]前瞻性研究了60 296例女性和25 397例男性曾有吸煙或正在吸煙的人群，在女性中檢出955例原發(fā)性肺癌，而男性311例，無(wú)論是曾經(jīng)吸煙還是仍在吸煙，男女性別上肺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)沒(méi)有差異。

環(huán)境中的煙草煙霧也是引起女性肺癌的主要危險(xiǎn)因素，環(huán)境中的煙草煙霧（ETS）與主動(dòng)吸煙吸入的煙霧在組成成分上有顯著的不同，一些致癌物如：苯并芘、亞硝胺等在環(huán)境煙草煙霧中的濃度要高于吸煙者吸入煙霧中的濃度，而ETS目前已被認(rèn)為是A級(jí)致癌物，美國(guó)國(guó)家癌癥研究委員會(huì)估計(jì)ETS導(dǎo)致了20%的非吸煙人群發(fā)生肺癌[11]。有研究調(diào)查了亞洲國(guó)家生產(chǎn)的香煙，其煙霧中各種致癌物的濃度要普遍高于歐美國(guó)家的香煙，對(duì)東方女性其危害程度超過(guò)了主動(dòng)吸煙，工作環(huán)境和社交中煙草煙霧暴露的危害更顯著于配偶。一項(xiàng)集中了37項(xiàng)流行病學(xué)研究[12]共4 626例病人的薈萃分析顯示，配偶使用煙草的非吸煙女性發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)增加24%(P＜0.001)，并且這種危險(xiǎn)性隨暴露水平和暴露的持續(xù)時(shí)間升高而增高。另外最新的來(lái)自亞洲的報(bào)道證實(shí)，在兒童期暴露于父親吸煙煙霧的婦女，其患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加。Zhang L調(diào)查中國(guó)上海女性肺癌的流行病學(xué)發(fā)現(xiàn)，丈夫吸煙的非吸煙中國(guó)女性的肺癌危險(xiǎn)度是1.1（0.8~1.5），而暴露于工作環(huán)境中的煙草煙霧，其危險(xiǎn)度為1.7（1.3~23），并隨著工作環(huán)境中吸煙人數(shù)增多，吸煙時(shí)間的延長(zhǎng)而危險(xiǎn)度增加。Wen[13]也有類(lèi)似的報(bào)道，工作環(huán)境中有煙草煙霧暴露的中國(guó)非吸煙女性，增加了腫瘤的相關(guān)死亡率（OR=1.19，95%CI：0.94~1.50）特別是肺癌的死亡率（OR=1.79，95%CI：1.09~2.93）。

另一顯著的環(huán)境因素是室內(nèi)污染，包括烹調(diào)產(chǎn)生的高溫油煙和室內(nèi)燃煤產(chǎn)生的煙霧均增加了肺癌的風(fēng)險(xiǎn)，這在中國(guó)女性尤為突出。一項(xiàng)長(zhǎng)達(dá)5年的肺癌流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，中國(guó)女性肺癌大于60%的病人有長(zhǎng)期接觸廚房油煙史，經(jīng)常接觸廚房和經(jīng)常吸煙兩者患肺癌的概率幾乎對(duì)等。在中國(guó)邊炒邊攪拌和高溫煎炒非常普遍，粗制的油菜籽油、大豆油以及玉米油產(chǎn)生的高溫油煙所含的揮發(fā)性物質(zhì)，氧化后成為熱解物，高溫油煙中的苯并芘、丁二烯、苯酚等都已被證實(shí)為致突變物和致癌物，廚房油煙的暴露增加了1.4~3.8倍的肺癌危險(xiǎn)。來(lái)自中國(guó)臺(tái)灣的一項(xiàng)研究[14]認(rèn)為，烹調(diào)中不使用排風(fēng)裝置的婦女增加肺癌風(fēng)險(xiǎn)3.2~12.2倍。

中國(guó)農(nóng)村地區(qū)在無(wú)通風(fēng)條件下室內(nèi)燃煤，不完全燃燒所產(chǎn)生的煙霧含有大量多環(huán)芳香烴類(lèi)致癌和致突變物質(zhì)。云南宣威婦女主動(dòng)吸煙率僅0.1%，然而其肺癌的發(fā)病率和死亡率卻居高不下，在宣威的流行病學(xué)調(diào)查研究顯示，室內(nèi)燃煤加之?huà)D女大多數(shù)時(shí)間均在家中，顯著增加了肺癌的危險(xiǎn)，采集室內(nèi)氣體進(jìn)行放射測(cè)定，發(fā)現(xiàn)烷基化的多環(huán)芳香烴化合物是主要的致癌物。室內(nèi)燃煤估計(jì)與16%~20%的肺癌有關(guān)。

流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)女性肺癌患者家族中癌癥患者要高于對(duì)照組，來(lái)自英國(guó)的一項(xiàng)病例對(duì)照研究[15]，共入組了1 482例女性非吸煙肺癌患者，與1 079例健康者對(duì)照，發(fā)現(xiàn)一級(jí)親屬中患肺癌的女性，其肺癌的危險(xiǎn)度1.49(1.13~1.96)，年齡小于60歲危險(xiǎn)度高達(dá)2.02(1.22~3.24)，有兩個(gè)或更多親屬患肺癌則危險(xiǎn)度進(jìn)一步提高達(dá)2.68(1.29~5.55)，危險(xiǎn)度隨著親屬腫瘤病史呈現(xiàn)一個(gè)有意義的增高趨勢(shì)（P=0.001）。

女性肺癌的發(fā)病相關(guān)因素可能與飲食有關(guān)，腌肉、油煎食物和辣椒則會(huì)增加患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)。而水果、綠葉蔬菜、胡蘿卜、維生素A是保護(hù)性因素女性的這一飲食關(guān)聯(lián)比男性更明顯[16]。結(jié)核、人狀瘤病毒（HPV16/18）和犬屬小孢子菌的感染也可能增加了女性肺癌的風(fēng)險(xiǎn)[17]。

3 女性肺癌的分子生物學(xué)特點(diǎn)

環(huán)境中的煙草煙霧被認(rèn)為是肺癌最主要的危險(xiǎn)因素，它包含了100多種致突變和致癌物，包括多環(huán)芳香烴類(lèi)，N-硝基胺類(lèi)和芳香胺類(lèi)。在煙草致癌物代謝過(guò)程中有兩類(lèi)酶發(fā)揮了關(guān)鍵作用，Ⅰ和Ⅱ期解毒酶，Ⅰ期酶為細(xì)胞色素p450酶（CYP1A1酶），是致癌的多環(huán)芳香族碳?xì)浠衔锎x酶，由CYP1A1基因編碼?；罨亩喹h(huán)芳香化合物在CYP1A1酶的作用下反應(yīng)性增高，它們結(jié)合在DNA上，形成DNA加合物，Ⅱ期酶可轉(zhuǎn)化這些活性中間產(chǎn)物成為無(wú)活性的水溶性化合物，使其易于排出。已經(jīng)證實(shí)[18，19]，女性產(chǎn)生的這種DNA加合物水平比男性高，DNA加合物水平與細(xì)胞色素p4501A1基因的表達(dá)有關(guān)。對(duì)159例肺癌患者的無(wú)癌變肺組織進(jìn)行分析，無(wú)論男性和女性吸煙者，其DNA加合物水平均高于非吸煙者。盡管女性吸煙者的包—年數(shù)和吸煙持續(xù)時(shí)間低于男性，但其DNA加合物水平卻更高，女性的CYP1A1mRNA量也顯著高于男性[20]。

Ⅱ期解毒酶的常見(jiàn)基因多態(tài)型是谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶M1（GSTM1），由于基因缺失，總的人群中40%~60%表現(xiàn)為無(wú)效型，GSTM1無(wú)效表型與暴露于環(huán)境煙草煙霧（EST）的不吸煙女性患肺癌危險(xiǎn)性增高有關(guān)，有EST且無(wú)GSTM1表達(dá)的女性與有GSTM1表達(dá)的女性相比，其OR為2.6，危險(xiǎn)度隨EST暴露的水平而增高，CYP1A1高表達(dá)和GSTM1基因無(wú)效表型和基因缺失與女性肺癌的危險(xiǎn)增加有關(guān)[21，22]。

經(jīng)典的雌激素受體α被認(rèn)為是與雌激素依賴的腫瘤如乳腺癌和子宮內(nèi)膜癌有關(guān)的一種配子激活的轉(zhuǎn)錄因子。盡管一些研究者報(bào)道，雌激素受體α在人類(lèi)肺癌中存在，但其免疫組化的表達(dá)率在7%~97%，無(wú)確切的臨床意義。已證實(shí)雌激素具有誘導(dǎo)肺分化和成熟的作用，這可能與位于14號(hào)染色體上的雌激素受體β有關(guān)，研究表明在人的正常肺組織細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肺癌細(xì)胞中雌激素受體βmRNA以及相應(yīng)的蛋白均有較高水平的表達(dá)，在體外實(shí)驗(yàn)中，β-雌二醇對(duì)肺癌細(xì)胞株和正常肺纖維細(xì)胞均有增殖效應(yīng)，用雌二醇進(jìn)行孵育，正常肺成纖維細(xì)胞增殖增加僅3.8倍，而肺癌傳代細(xì)胞株增殖增加17倍，在裸鼠體內(nèi)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)β-雌二醇刺激腫瘤細(xì)胞增殖是正常細(xì)胞的1.2倍，而此作用能被抗雌激素藥物所阻斷。Taioli和Wynder用病例對(duì)照的方法，發(fā)現(xiàn)早期絕經(jīng)的婦女肺腺癌的風(fēng)險(xiǎn)下降，而雌激素替代治療的患者肺癌風(fēng)險(xiǎn)明顯升高，且雌激素替代、吸煙和肺腺癌發(fā)生存在交叉影響。Moore等分析了絕經(jīng)前后女性肺癌，并與同年齡組的男性肺癌對(duì)比，發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)前女性比絕經(jīng)后女性更易患廣泛性的病變和腺癌，絕經(jīng)前女性肺癌相關(guān)死亡率與年輕男性相似，而絕經(jīng)后女性肺癌死亡率低于老年男性。β雌激素在肺癌中的確切作用并不清楚，雌激素可能是CYP1A1表達(dá)水平增高的誘因，Thomsem等已經(jīng)在乳腺癌MDA-MB-2131細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)，雌激素受體和芳香碳?xì)浠衔锸荏w有交叉表達(dá)，雌激素可能調(diào)節(jié)了多環(huán)芳香化合物代謝酶，特別是CYP1A1酶。β-雌二醇還增強(qiáng)了H23、784T肺癌細(xì)胞株中雌激素反應(yīng)元件（estrogen responsive element，ERE）的轉(zhuǎn)錄，這種轉(zhuǎn)錄比起在乳腺癌MCF-7細(xì)胞株中要弱，但與對(duì)照組相比仍達(dá)到了顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，并顯示出了劑量依賴效應(yīng)，提示雌激素受體可能與ERE結(jié)合，并激活了基因的轉(zhuǎn)錄。研究[23~25]顯示雌激素能刺激肺成纖維細(xì)胞分泌肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF），與空白對(duì)照組比較這一作用增加了1倍。HGF已知是支氣管黏膜下層的間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的旁分泌生長(zhǎng)因子，它們作用于正常細(xì)胞和新生物的上皮細(xì)胞，促進(jìn)其有絲分裂。HGF基因包含了兩個(gè)ERE，一個(gè)在它的啟動(dòng)因子的區(qū)域，另一個(gè)在它的第一內(nèi)含子上。因此，HGF基因?yàn)榇萍に氐南掠位?，它與雌激素受體β結(jié)合，引發(fā)核內(nèi)信號(hào)的傳導(dǎo)，導(dǎo)致成纖維細(xì)胞增殖。

女性可能還有其他潛在的致癌的因素，一些研究顯示[26]，胃泌素多肽（GRP）一種存在于小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌中的自分泌生長(zhǎng)因子，通過(guò)與GRP受體互相作用，刺激支氣管細(xì)胞生長(zhǎng)，可能為肺發(fā)育的調(diào)節(jié)劑，并能通過(guò)刺激細(xì)胞增殖而促進(jìn)惡性腫瘤生長(zhǎng)。GRP受體的基因位于X染色體上，女性與男性比較有2個(gè)活化的GRPR基因的遺傳因子。Shriver報(bào)道[27]，GRPRmRNA在不吸煙女性中的表達(dá)占55%，但是在不吸煙男性中表達(dá)僅為20%，當(dāng)人的氣道上皮細(xì)胞暴露于雌激素中，GRPR的表達(dá)水平增高。Seigfried[28]也證實(shí)在肺纖維母細(xì)胞中，GRPRmRNA的表達(dá)是隨著尼古丁的暴露程度而增高，且有學(xué)者認(rèn)為，GRPRmRNA的表達(dá)使女性對(duì)致癌尼古丁的敏感性增加。

化學(xué)致癌物誘發(fā)的DNA堿基損傷和DNA鏈斷裂，是導(dǎo)致細(xì)胞癌變和癌變發(fā)展的重要分子事件，DNA修復(fù)基因在防止機(jī)體受致癌作用的過(guò)程中起了重要作用，婦女可能比男性呈現(xiàn)出較低的DNA修復(fù)能力（DRC）。Wei等用淋巴細(xì)胞和煙草衍生致癌物一起培養(yǎng)檢測(cè)DRC水平，采用病例對(duì)照的方法，肺癌組764例，對(duì)照組677例，兩組各種特征均相似。他們發(fā)現(xiàn)調(diào)整了年齡、性別和吸煙的因素，肺癌組的DRC顯著低于對(duì)照組，OR為1.5（1.2~1.9），并隨著DRC的下降，肺癌的風(fēng)險(xiǎn)逐漸增大（P＜0.001），女性與男性相比，DRC水平明顯降低，患肺癌的危險(xiǎn)更高（P＜0.001）[29，30]。

現(xiàn)有的大量研究提示女性肺癌可能更易發(fā)生分子的變異。Kure等發(fā)現(xiàn)，盡管女性病人煙草暴露水平低于男性（平均23包/年vs.39包/年），但DNA加合物平均水平和肺癌細(xì)胞中p53基因發(fā)生G/C到T/A的特異突變的頻度，與男性相似。Toyooka等[31]檢測(cè)了705例肺癌病人的p53突變，發(fā)現(xiàn)吸煙的女性患者這種突變的發(fā)生明顯高于非吸煙的女性和吸煙的男性。p53蛋白的高表達(dá)顯著發(fā)生在有室內(nèi)燃煤污染的女性肺癌中[32]。原癌基因K-ras突變同樣在女性吸煙者多于男性吸煙者，并多與腺癌的發(fā)生相關(guān)，可能提示預(yù)后不良，但是在非吸煙的女性肺癌中，K-ras卻幾乎無(wú)表達(dá)，CYP1A1的高表達(dá)和GSTM1的無(wú)效表型增加了K-ras突變的危險(xiǎn)[33]。表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）的突變多發(fā)生在東方人種、女性病人、肺泡細(xì)胞癌或包含肺泡細(xì)胞癌的腺癌和非吸煙者，并預(yù)示表皮生長(zhǎng)因子受體酪胺酸酶激酶抑制劑治療有效[34~36]。ERBB2（HER-2/new）的突變?cè)贜SCLC中非常罕見(jiàn)，僅見(jiàn)于腺癌，在東方人種、女性、非吸煙者中有較高的突變率。這些都提示在不同性別、吸煙與不吸煙之間，肺癌的發(fā)生可能有不同的途徑，在臨床上有不同的特點(diǎn)[37]。

綜上，女性肺癌在基因、代謝和激素水平上與男性肺癌存在顯著差異，其流行和臨床特點(diǎn)及對(duì)治療的反應(yīng)均不同于男性。在肺癌的預(yù)防、篩查、研究和臨床治療中需要充分考慮這些因素。

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篇5

關(guān)鍵詞：分子生物學(xué)；分子影像學(xué)；醫(yī)師；學(xué)習(xí)

中圖分類(lèi)號(hào)：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2015）41-0186-02

分子生物學(xué)的誕生拓展了人們對(duì)于疾病的認(rèn)識(shí)，分子生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容涉及到生命的本質(zhì)，它的出現(xiàn)對(duì)生命科學(xué)有著巨大的沖擊，尤其是對(duì)醫(yī)學(xué)有著重要的影響[1，2]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)條件下，從分子水平認(rèn)識(shí)疾病并尋找對(duì)策已成為醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要途徑之一。分子生物學(xué)的方法和技術(shù)被廣泛的應(yīng)用于影像醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)和臨床研究中，與之交叉產(chǎn)生的新興學(xué)科――分子影像學(xué)，已然成為影像醫(yī)學(xué)的前沿與熱點(diǎn)[3，4]，學(xué)習(xí)和利用分子生物學(xué)的知識(shí)對(duì)于廣大醫(yī)生，特別是影像科醫(yī)生來(lái)說(shuō)有重要的意義，有助于我們了解行業(yè)研究的前沿和熱點(diǎn)，提高科學(xué)研究和臨床診療水平。然而廣大醫(yī)生，特別是影像科醫(yī)師在實(shí)際工作中常常面臨知識(shí)缺乏或老化的問(wèn)題，原來(lái)掌握的理論和技能在疾病診斷、發(fā)病機(jī)制的研究、療效的跟蹤和評(píng)估等方面越來(lái)越受到制約。因此，隨著分子影像學(xué)的出現(xiàn)和醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的交叉與發(fā)展，今后的影像臨床和科研中要求影像醫(yī)師能夠掌握與其工作相關(guān)的理論知識(shí)和技能，從而有效地為臨床工作及科學(xué)研究服務(wù)。

一、分子生物學(xué)在影像醫(yī)學(xué)發(fā)展中的意義

近20年來(lái)，分子生物學(xué)在理論和應(yīng)用上都取得了重要進(jìn)展，其理論與技術(shù)已滲透到生命科學(xué)的諸多領(lǐng)域，而影像醫(yī)學(xué)與其結(jié)合產(chǎn)生的新型學(xué)科――分子影像學(xué)更是走在影像醫(yī)學(xué)發(fā)展的最前沿。分子影像學(xué)的出現(xiàn)和發(fā)展將從根本上改變未來(lái)的醫(yī)學(xué)模式，引領(lǐng)整個(gè)醫(yī)學(xué)影像學(xué)發(fā)展的方向[5]。與傳統(tǒng)的影像診斷學(xué)不同，分子影像學(xué)借助于分子探針應(yīng)用醫(yī)學(xué)影像成像設(shè)備非侵入性地對(duì)活體的生理病理過(guò)程進(jìn)行觀察，其優(yōu)點(diǎn)是在器官或組織結(jié)構(gòu)的形態(tài)變化之前，從分子水平進(jìn)行定量或定性的可視化觀察[6]。例如通過(guò)標(biāo)記腫瘤產(chǎn)生過(guò)程的關(guān)鍵分子然后進(jìn)行影像學(xué)檢查，既可以顯示出腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的解剖改變，也可以追蹤觀察疾病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的病理生理變化，有助于疾病的早期明確診斷和發(fā)生機(jī)制等的研究。在藥物開(kāi)發(fā)和作用機(jī)制研究中，通過(guò)標(biāo)記藥物本身或者其作用靶點(diǎn)可以直接顯示藥物在體內(nèi)的變化或靶點(diǎn)的改變，從而為藥物的篩選和作用機(jī)制的研究提供直觀的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。分子影像學(xué)技術(shù)不僅為生命科學(xué)相關(guān)的基礎(chǔ)研究提供了重要方法，而且也在臨床研究和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中發(fā)揮重要的作用[7]。在未來(lái)的個(gè)體化醫(yī)學(xué)模式中，分子成像技術(shù)可能會(huì)同時(shí)融合疾病的分子診斷和治療跟蹤系統(tǒng)，在早期診斷疾病的同時(shí)進(jìn)行治療并跟蹤其治療后的變化，從而實(shí)現(xiàn)疾病診療的一體化。

二、影像醫(yī)師學(xué)習(xí)分子生物學(xué)知識(shí)的必要性

分子影像學(xué)是分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)影像技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物，分子影像學(xué)利用現(xiàn)有的一些醫(yī)學(xué)影像技術(shù)，如核醫(yī)學(xué)、核磁共振和光學(xué)成像方法等，通過(guò)特異性的分子探針的設(shè)計(jì)和應(yīng)用，能夠?qū)θ梭w內(nèi)部的生理或病理過(guò)程中在分子水平上發(fā)生的變化進(jìn)行在體成像，安全無(wú)創(chuàng)，可重復(fù)行強(qiáng)，在疾病的診斷、治療以及療效評(píng)價(jià)、發(fā)病機(jī)制等的方面發(fā)揮著不可估量的作用。分子影像學(xué)是一門(mén)新的交叉學(xué)科，作為影像醫(yī)師要想掌握并應(yīng)用好，除了原有的影像學(xué)知識(shí)外，還要學(xué)習(xí)和掌握分子探針的制備原理和技術(shù)、信號(hào)通道及相關(guān)機(jī)制、腫瘤靶點(diǎn)的篩選和定位等相關(guān)知識(shí)和技術(shù)，而這些都屬于分子生物學(xué)的范疇。分子影像學(xué)使影像檢查從原來(lái)單純觀察解剖結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)向功能性分析，從主觀診斷轉(zhuǎn)向客觀的定量分析，因此影像醫(yī)生必然要整合分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)或合成化學(xué)等方面的知識(shí)，在研發(fā)分子探針、篩選基因靶點(diǎn)等方面不斷努力，借助于先進(jìn)的影像學(xué)成像手段早期、直觀的顯示疾病的發(fā)生發(fā)展、治療效果及轉(zhuǎn)歸等，實(shí)現(xiàn)分子影像學(xué)的長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展。而且隨著相關(guān)技術(shù)的興起，分子影像學(xué)越來(lái)越注重對(duì)個(gè)體化表型差異的分析，這也為實(shí)現(xiàn)個(gè)性化醫(yī)療，即精準(zhǔn)醫(yī)療，提供了重要的條件。未來(lái)，分子影像學(xué)將推進(jìn)個(gè)體化治療的發(fā)展進(jìn)程，例如許多腫瘤的診斷靶點(diǎn)，也可作為治療靶點(diǎn)，通過(guò)篩選關(guān)鍵靶點(diǎn)，定制對(duì)應(yīng)的特異性分子探針，應(yīng)用分子影像的個(gè)體化分析為病人“量身定做”最佳治療方案，并能予以跟蹤、評(píng)價(jià)，從而實(shí)現(xiàn)診斷治療的一體化?？傊?，掌握分子生物學(xué)知識(shí)對(duì)提高影像科醫(yī)師綜合診療水平具有極大的指導(dǎo)意義。目前我國(guó)普通高等醫(yī)學(xué)院校都已開(kāi)設(shè)了分子生物學(xué)課程及其相關(guān)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)，也有相應(yīng)的規(guī)劃教材和實(shí)驗(yàn)教材，因此畢業(yè)于醫(yī)學(xué)院的影像醫(yī)師大多具備了一定的醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)知識(shí)基礎(chǔ)，但分子生物學(xué)的理論和技術(shù)不斷地更新，這就迫使影像醫(yī)師仍需要不斷地學(xué)習(xí)，以便了解分子生物學(xué)的最新進(jìn)展。而對(duì)于沒(méi)有學(xué)校學(xué)習(xí)基礎(chǔ)的高年資醫(yī)師而言，分子生物學(xué)是個(gè)嶄新的領(lǐng)域，需在重新學(xué)習(xí)[8]。

三、影像醫(yī)師加強(qiáng)分子生物學(xué)知識(shí)學(xué)習(xí)的途徑

影像醫(yī)師應(yīng)認(rèn)識(shí)到加強(qiáng)分子生物學(xué)知識(shí)學(xué)習(xí)的重要性，并積極主動(dòng)地加強(qiáng)分子生物學(xué)知識(shí)的學(xué)習(xí)。除了醫(yī)院、學(xué)科或科室有組織的進(jìn)行學(xué)習(xí)外，更重要的方法還是自主學(xué)習(xí)，通過(guò)有效地繼續(xù)教育獲取必要的理論及技能。在繼續(xù)教育的過(guò)程中，影像醫(yī)師應(yīng)根據(jù)自身的需要選擇學(xué)習(xí)的深度和廣度。如實(shí)際工作中需要對(duì)疾病的發(fā)病機(jī)制、藥物作用機(jī)制、療效評(píng)估等研究較多，還必須全面地學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的最新理論和相關(guān)技術(shù)，才能更好服務(wù)于實(shí)際工作中。影像醫(yī)師獲取分子生物學(xué)知識(shí)的途徑有很多：

1.全面系統(tǒng)的學(xué)習(xí)基礎(chǔ)知識(shí)。影像醫(yī)師應(yīng)根據(jù)自身的基礎(chǔ)選擇相應(yīng)的教科書(shū)或參考資料，可以優(yōu)先選擇國(guó)家規(guī)劃教材，以便由淺入深的掌握分子生物學(xué)的理論，明晰各種常用名詞、術(shù)語(yǔ)，了解分子生物學(xué)涉及的研究領(lǐng)域。近年來(lái)大學(xué)的網(wǎng)絡(luò)公開(kāi)課程建設(shè)日趨完善，還可以通過(guò)慕課等進(jìn)行在線的視聽(tīng)學(xué)習(xí)[9]，有助于知識(shí)的理解與掌握。在有一定基礎(chǔ)的前提下，再通過(guò)專(zhuān)業(yè)雜志和文獻(xiàn)，了解最新的進(jìn)展和研究動(dòng)態(tài)。

2.明確方向，學(xué)習(xí)相關(guān)的專(zhuān)業(yè)技術(shù)。分子影像學(xué)的研究涉及到多個(gè)學(xué)科的知識(shí)，因此在學(xué)習(xí)中，影像醫(yī)師應(yīng)明確自身的研究方向，有針對(duì)性的學(xué)習(xí)。應(yīng)用互聯(lián)網(wǎng)學(xué)習(xí)操作簡(jiǎn)單、便捷，易于被廣大醫(yī)生接受，而且其內(nèi)容全面、檢索便捷等優(yōu)勢(shì)也已在醫(yī)學(xué)繼續(xù)教育中發(fā)揮著不可替代的重要作用。可以通過(guò)維普、知網(wǎng)、同方等專(zhuān)業(yè)網(wǎng)站，有針對(duì)性的篩選文獻(xiàn)和資源進(jìn)行學(xué)習(xí)。另外和可以進(jìn)入到分子生物學(xué)的網(wǎng)站、論壇等進(jìn)行瀏覽、搜索等，既能緊跟前沿動(dòng)態(tài)，還可以與他人互動(dòng)交流、進(jìn)行討論。

3.注重學(xué)術(shù)交流與合作研究。參加專(zhuān)題學(xué)術(shù)講座或會(huì)議，尤其是國(guó)家級(jí)或國(guó)際性學(xué)術(shù)交流活動(dòng)是十分必要的。通過(guò)學(xué)術(shù)交流，可以較快的了解分子生物學(xué)在影像醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用和最新動(dòng)態(tài)，而且在交流過(guò)程中，可以與同行及專(zhuān)家進(jìn)行直接的溝通，交流并獲得必要的指導(dǎo)和幫助[10]。在科學(xué)技術(shù)飛速發(fā)展的今天，單單依靠影像科醫(yī)師無(wú)法發(fā)展分子影像學(xué)，唯有與分子生物學(xué)等交叉學(xué)科的專(zhuān)家精誠(chéng)合作，才能更好的推動(dòng)分子影像學(xué)的發(fā)展和臨床應(yīng)用。哈佛大學(xué)分子影像中心Weissleder教授曾指出影像醫(yī)師應(yīng)該切實(shí)肩負(fù)起開(kāi)展分子影像研究工作的任務(wù)，要與基礎(chǔ)學(xué)科相互溝通，發(fā)揮各自的優(yōu)勢(shì)，協(xié)同合作。因此加強(qiáng)合作與交流能夠更好地解決分子影像學(xué)發(fā)展中所涉及的問(wèn)題，有效的促進(jìn)影像醫(yī)師分子生物學(xué)的學(xué)習(xí)和研究。

總之，分子生物學(xué)是目前公認(rèn)的最具活力的醫(yī)學(xué)帶頭學(xué)科。分子影像學(xué)的出現(xiàn)是分子生物學(xué)的理論和技術(shù)推動(dòng)影像醫(yī)學(xué)發(fā)展的直接表現(xiàn)。作為新時(shí)代的影像醫(yī)師，必須重視分子影像學(xué)的研究，學(xué)習(xí)和應(yīng)用好與之相關(guān)的分子生物學(xué)等基礎(chǔ)知識(shí)和技術(shù)，才能適應(yīng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要，更好的服務(wù)于科研與臨床醫(yī)療工作。

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篇6

1制定合理的帶教計(jì)劃，重點(diǎn)明確

實(shí)習(xí)學(xué)生在本院實(shí)習(xí)分子生物學(xué)的時(shí)間為4周。由于實(shí)習(xí)時(shí)間較短，帶教老師應(yīng)首先制定合理的帶教計(jì)劃，便于學(xué)生充分利用有限的時(shí)間掌握實(shí)習(xí)內(nèi)容。在制定帶教計(jì)劃的過(guò)程中，不僅要結(jié)合學(xué)科的大綱要求，還應(yīng)結(jié)合歷屆學(xué)生的學(xué)習(xí)情況和實(shí)驗(yàn)室的基本情況，制定最合理、最貼近實(shí)際的帶教計(jì)劃。由于本實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展的檢驗(yàn)項(xiàng)目較多，而學(xué)生實(shí)習(xí)時(shí)間較短，實(shí)習(xí)內(nèi)容不可能面面俱到，因此在帶教計(jì)劃中將帶教內(nèi)容分為4個(gè)類(lèi)別，即熟練掌握、基本掌握、熟悉和了解。例如，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的分區(qū)制度、工作流程、乙型肝炎病毒DNA檢測(cè)等納入實(shí)習(xí)生應(yīng)熟練掌握的內(nèi)容。有側(cè)重點(diǎn)的帶教可以讓實(shí)習(xí)學(xué)生在有限的時(shí)間內(nèi)牢固掌握常用檢測(cè)項(xiàng)目的原理、操作方法、注意事項(xiàng)、臨床意義等，有助于學(xué)生在以后的工作中進(jìn)一步由點(diǎn)到面地進(jìn)行分子生物學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)的學(xué)習(xí)。

2注重崗前教育，樹(shù)立整體意識(shí)

為引導(dǎo)實(shí)習(xí)學(xué)生轉(zhuǎn)變角色，保證實(shí)習(xí)質(zhì)量，崗前教育是必不可少的。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室對(duì)設(shè)備、環(huán)境和操作人員有較高的要求，因此在實(shí)習(xí)學(xué)生進(jìn)入分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室前，應(yīng)首先對(duì)其進(jìn)行崗前教育，包括分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室基本情況、分區(qū)制度及相關(guān)工作流程等。并且要求學(xué)生實(shí)習(xí)前仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)室管理文件和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）文件，著重學(xué)習(xí)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室各區(qū)的工作制度、各項(xiàng)目檢測(cè)操作規(guī)范、質(zhì)量控制、生物安全防護(hù)及標(biāo)本接收、處理和保存等內(nèi)容，使學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作有初步的認(rèn)識(shí)。學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，帶教老師應(yīng)首先引導(dǎo)實(shí)習(xí)學(xué)生按照區(qū)域流向制度依次參觀各實(shí)驗(yàn)分區(qū)，系統(tǒng)地向其介紹各檢驗(yàn)項(xiàng)目的檢測(cè)原理及臨床意義。然后，根據(jù)帶教計(jì)劃的側(cè)重點(diǎn)，選擇常用檢測(cè)項(xiàng)目，結(jié)合項(xiàng)目介紹主要相關(guān)儀器設(shè)備的工作原理、操作程序、日常保養(yǎng)及記錄登記，讓實(shí)習(xí)生樹(shù)立整體意識(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的工作有全面的了解。

3加強(qiáng)操作訓(xùn)練，培養(yǎng)質(zhì)量控制理念

分子生物學(xué)的發(fā)展速度較快，學(xué)生在校園內(nèi)依靠有限的教學(xué)設(shè)備和較少的實(shí)驗(yàn)課時(shí)難以掌握分子生物學(xué)的基本技術(shù)。因此，實(shí)習(xí)學(xué)生在進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)室后，對(duì)很多儀器設(shè)備較為陌生，操作過(guò)程中難免存在不規(guī)范之處。再加上分子生物學(xué)檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的要求比較高，因此在指導(dǎo)學(xué)生的過(guò)程中，應(yīng)給予學(xué)生盡可能多的實(shí)踐機(jī)會(huì)，使其不斷進(jìn)步。首先，帶教老師必須從最基本的實(shí)驗(yàn)操作出發(fā)，邊操作示范邊講解相關(guān)知識(shí)，重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)操作要點(diǎn)和關(guān)鍵步驟，指出注意事項(xiàng)并說(shuō)明原因。然后讓學(xué)生實(shí)際操作，帶教老師在旁給予指導(dǎo)，并當(dāng)場(chǎng)糾正操作中出現(xiàn)的錯(cuò)誤，讓學(xué)生記憶深刻。通過(guò)操作示范和指導(dǎo)，帶領(lǐng)學(xué)生逐步完成規(guī)定的實(shí)驗(yàn)操作項(xiàng)目。此外，帶教老師應(yīng)盡量多地創(chuàng)造機(jī)會(huì)讓學(xué)生動(dòng)手，加強(qiáng)對(duì)學(xué)生的監(jiān)督，讓學(xué)生能夠熟練掌握各項(xiàng)目的檢測(cè)操作步驟和操作規(guī)范，在短期內(nèi)提高學(xué)生的動(dòng)手能力。準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的生命。檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)較大偏差會(huì)對(duì)患者診治產(chǎn)生影響，甚至引起醫(yī)療糾紛。分子生物學(xué)檢驗(yàn)是繁雜有序且細(xì)致的工作，從標(biāo)本接收、標(biāo)本前處理、DNA提取、擴(kuò)增分析到報(bào)告發(fā)放的任何一個(gè)環(huán)節(jié)都不得有誤。因此，帶教老師應(yīng)注重培養(yǎng)學(xué)生全面的質(zhì)量控制理念。帶教老師在帶教過(guò)程中，需要根據(jù)崗前教育的內(nèi)容，對(duì)各個(gè)操作環(huán)節(jié)的影響因素進(jìn)行細(xì)致分析，并向?qū)W生講解相應(yīng)的質(zhì)控措施，重點(diǎn)說(shuō)明標(biāo)本質(zhì)量判斷標(biāo)準(zhǔn)、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范、儀器設(shè)備校準(zhǔn)、質(zhì)控參數(shù)設(shè)定、結(jié)果處理、報(bào)告審核與簽發(fā)等內(nèi)容。在學(xué)生進(jìn)行實(shí)際操作時(shí)，帶教老師應(yīng)做到“放手不放眼”，對(duì)學(xué)生嚴(yán)格要求、持續(xù)關(guān)注，一方面保證檢驗(yàn)質(zhì)量，另一方面也能培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)和良好的工作習(xí)慣。

4科學(xué)考核，嚴(yán)把實(shí)習(xí)質(zhì)量

在學(xué)生實(shí)習(xí)期滿時(shí)，應(yīng)按照要求對(duì)其進(jìn)行考核。本實(shí)驗(yàn)室對(duì)實(shí)習(xí)生分子生物學(xué)檢驗(yàn)的考核內(nèi)容包括如下兩方面。（1）基本操作考核：實(shí)習(xí)生需獨(dú)自完成規(guī)定標(biāo)本的乙型肝炎病毒DNA檢測(cè)。帶教老師根據(jù)學(xué)生的操作流程、操作規(guī)范程度、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性進(jìn)行打分。（2）理論考試：內(nèi)容涉及分子生物學(xué)的基本理論、實(shí)驗(yàn)室分區(qū)、標(biāo)本采集及保存、質(zhì)量控制、常用檢驗(yàn)項(xiàng)目的簡(jiǎn)要操作流程或項(xiàng)目檢測(cè)的臨床意義、污染預(yù)防措施等。通過(guò)考核，帶教老師能了解實(shí)習(xí)學(xué)生對(duì)實(shí)習(xí)內(nèi)容的掌握情況，對(duì)實(shí)習(xí)學(xué)生掌握不佳的知識(shí)點(diǎn)再加以指導(dǎo)，為保證實(shí)習(xí)質(zhì)量把好關(guān)。

5引導(dǎo)學(xué)習(xí)前沿知識(shí)，培養(yǎng)科研思維

由于教材更新一般都滯后于學(xué)科的發(fā)展，因此為了彌補(bǔ)分子生物學(xué)教材和臨床實(shí)踐應(yīng)用脫節(jié)的缺陷，帶教老師還應(yīng)盡量引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)專(zhuān)業(yè)相關(guān)前沿知識(shí)，提倡學(xué)生廣泛搜集、閱讀文獻(xiàn)和專(zhuān)業(yè)書(shū)籍，使學(xué)生能夠了解最新的學(xué)科進(jìn)展。當(dāng)然，這對(duì)帶教老師也提出了較高要求，需要不斷加強(qiáng)學(xué)習(xí)，掌握新知識(shí)、新技術(shù)，為學(xué)生做好表率。此外，學(xué)生實(shí)習(xí)期間還需完成畢業(yè)論文，對(duì)于承擔(dān)畢業(yè)課題指導(dǎo)任務(wù)的帶教老師而言，還需注重培養(yǎng)學(xué)生的科研能力。如果條件允許，帶教老師可以讓學(xué)生參與相關(guān)科研課題的研究，使其能夠在完成畢業(yè)論文過(guò)程中，通過(guò)搜集、整理文獻(xiàn)鞏固基礎(chǔ)理論知識(shí)，了解新的研究進(jìn)展；通過(guò)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)熟悉和掌握多種實(shí)驗(yàn)方法；通過(guò)撰寫(xiě)畢業(yè)論文提高科研寫(xiě)作水平。科研和教學(xué)相輔相成，既豐富了分子生物學(xué)帶教內(nèi)容，又激發(fā)了學(xué)生的科研思維和提高了學(xué)生的科研能力。

6小結(jié)

篇7

關(guān)鍵詞：分子生物學(xué)雙語(yǔ)教學(xué)教學(xué)實(shí)踐

分子生物學(xué)是高等院校生物技術(shù)、生物科學(xué)等專(zhuān)業(yè)開(kāi)設(shè)的主干課程之一，主要是從分子水平研究生命現(xiàn)象、本質(zhì)、活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)[1]，是現(xiàn)代生命科學(xué)中發(fā)展最快、最具活力的帶頭學(xué)科，其基礎(chǔ)理論和技術(shù)手段已滲透到生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域，很多國(guó)家已經(jīng)把分子生物學(xué)及對(duì)應(yīng)的生物技術(shù)列為優(yōu)先發(fā)展的高科技項(xiàng)目[2]。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)研究的突飛猛進(jìn)，新理論、新技術(shù)不斷涌現(xiàn)，新詞匯層出不窮，給分子生物學(xué)教學(xué)帶來(lái)了前所未有的挑戰(zhàn)。為了使學(xué)生及時(shí)了解快速發(fā)展的分子生物學(xué)前沿理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)，我校按照國(guó)家教育部出臺(tái)的《關(guān)于加強(qiáng)高等學(xué)校本科教學(xué)工作提高教學(xué)質(zhì)量的若干意見(jiàn)》的要求，從08級(jí)生物技術(shù)專(zhuān)業(yè)開(kāi)始，進(jìn)行了分子生物學(xué)雙語(yǔ)教學(xué)改革的嘗試。

1.雙語(yǔ)教學(xué)的含義

雙語(yǔ)教學(xué)是指在教學(xué)過(guò)程中使用兩種語(yǔ)言，即在教材使用、課堂講授、課后輔導(dǎo)、課程考核等教學(xué)環(huán)節(jié)中同時(shí)使用外語(yǔ)（主要為英語(yǔ)）和漢語(yǔ)兩種語(yǔ)言作為教學(xué)手段，進(jìn)行部分或全部的教學(xué)活動(dòng)[3]。雙語(yǔ)教學(xué)是我國(guó)高等教育走向國(guó)際的重要舉措之一，能使學(xué)生在專(zhuān)業(yè)學(xué)習(xí)和研究實(shí)踐中盡快掌握本學(xué)科相關(guān)的英語(yǔ)詞匯，加強(qiáng)學(xué)生了解生物科技最新成果的能力，對(duì)跟蹤國(guó)際分子生物學(xué)發(fā)展的最新進(jìn)展、分子生物學(xué)教學(xué)內(nèi)容和水平與國(guó)際接軌等方面具有重要意義。

2.分子生物學(xué)雙語(yǔ)教材的選擇

雙語(yǔ)教學(xué)應(yīng)盡可能使用英文原版教材，它便于和國(guó)際接軌，接觸到國(guó)外第一手資料[4]。因此，我們采用Geoge M.Malacinski等主編的《Essentials of Molecular Biology》（分子生物學(xué)精要）影印版原文教材，該教材具有條理清晰、簡(jiǎn)明扼要、重點(diǎn)和主線清晰明確、容易理解等特點(diǎn)，并附章前提示和章末小結(jié)、參考文獻(xiàn)及主題索引等，是指導(dǎo)學(xué)生快速掌握分子生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)的優(yōu)秀教材。但該教材知識(shí)點(diǎn)內(nèi)容偏少，不能完全滿足教學(xué)需要。因此，我們選用了Turner等編著的《Instant Notes in Molecular Biology》原文教材和朱玉賢主編的《現(xiàn)代分子生物學(xué)》這兩種國(guó)內(nèi)廣泛采用的教材作為指定參考書(shū)目，幫助學(xué)生理解教學(xué)內(nèi)容及擴(kuò)充分子生物學(xué)理論知識(shí)。

3.雙語(yǔ)教學(xué)方式的探索

分子生物學(xué)傳統(tǒng)教學(xué)方式都是教師在講臺(tái)上不停地講，學(xué)生坐著聽(tīng)，是一種“填鴨式”教學(xué)，學(xué)生處于被動(dòng)地位，不利于創(chuàng)新能力、發(fā)散思維和自主學(xué)習(xí)能力的培養(yǎng)，更與雙語(yǔ)教學(xué)這種新穎的授課模式不相適應(yīng)[5]。因此利用靈活多變的教學(xué)方法和現(xiàn)代化教學(xué)手段是目前雙語(yǔ)教學(xué)廣泛采用的主要方法。

3.1 授課語(yǔ)言

學(xué)生英語(yǔ)水平不同，多數(shù)缺乏專(zhuān)業(yè)英語(yǔ)基礎(chǔ)，要求都能一下子聽(tīng)懂英語(yǔ)講授的內(nèi)容并用英語(yǔ)思考比較生疏難懂的專(zhuān)業(yè)知識(shí)，存在較大難度。因此，我們?cè)诮虒W(xué)中仍以母語(yǔ)為主，采用滲透式混語(yǔ)，重點(diǎn)攻克分子生物學(xué)專(zhuān)業(yè)詞匯，先講述構(gòu)詞方法，鼓勵(lì)學(xué)生盡量“猜詞”，使其專(zhuān)業(yè)詞匯量迅速增加；在講授重要概念和分子機(jī)制時(shí)用英語(yǔ)講述，使學(xué)生可以多一些機(jī)會(huì)接觸英語(yǔ)詞匯，并強(qiáng)化刺激學(xué)生聽(tīng)覺(jué)；或交替使用中英文講授，讓學(xué)生學(xué)會(huì)如何用英語(yǔ)表達(dá)中文內(nèi)容。對(duì)于一些關(guān)鍵點(diǎn)用英文講解后再用中文作些解釋?zhuān)幻總€(gè)章節(jié)用英、中文作簡(jiǎn)要總結(jié)。另外，必須根據(jù)學(xué)生的反應(yīng)循序漸進(jìn)，隨時(shí)調(diào)整中英文的使用比例，避免盲目追求形式，例如過(guò)于強(qiáng)調(diào)英文的使用比例和頻率而不考慮學(xué)生的實(shí)際情況，造成學(xué)生學(xué)習(xí)專(zhuān)業(yè)知識(shí)的興趣就會(huì)被語(yǔ)言障礙所干擾，既影響教學(xué)效果，使學(xué)生對(duì)雙語(yǔ)教學(xué)產(chǎn)生畏難甚至抵觸情緒。

3.2 教學(xué)內(nèi)容

分子生物學(xué)課堂教學(xué)既包括經(jīng)典內(nèi)容，又增補(bǔ)了生命科學(xué)的新技術(shù)、新進(jìn)展，尤其是人類(lèi)基因組計(jì)劃的完成和后基因組時(shí)代的到來(lái)，該領(lǐng)域呈現(xiàn)日新月異的變化，因此，我們?cè)诮虒W(xué)過(guò)程中需要著眼于21世紀(jì)生命科學(xué)的重大學(xué)科方向和領(lǐng)域，注重本學(xué)科出現(xiàn)的重大理論和應(yīng)用問(wèn)題，充分反映生命科學(xué)最新進(jìn)展和成就，目的在于完善學(xué)生知識(shí)結(jié)構(gòu)，提高學(xué)生整體素質(zhì)，激發(fā)學(xué)生對(duì)生命科學(xué)的興趣，讓學(xué)生應(yīng)用所學(xué)的知識(shí)進(jìn)行分析、討論與評(píng)價(jià)分子生物學(xué)研究現(xiàn)狀等科學(xué)問(wèn)題，有利于培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)素質(zhì)。

3.3 教學(xué)方式

在雙語(yǔ)課程的學(xué)習(xí)過(guò)程中，學(xué)生既要克服語(yǔ)言障礙又要理解記憶專(zhuān)業(yè)知識(shí)，維持連續(xù)的旺盛精力和高度集中的注意力非常困難，如果教學(xué)方法單一，學(xué)生就更難接受和理解，因此要求教師采用靈活多變的教學(xué)方法和現(xiàn)代化教學(xué)手段。

在實(shí)踐中，先利用校園網(wǎng)絡(luò)，開(kāi)辟分子生物學(xué)雙語(yǔ)教學(xué)專(zhuān)區(qū)，學(xué)生可以通過(guò)該網(wǎng)頁(yè)了解課程的相關(guān)情況，教師通過(guò)網(wǎng)絡(luò)布置學(xué)習(xí)任務(wù)，讓學(xué)生提前通過(guò)上網(wǎng)查詢資料，進(jìn)行探究式學(xué)習(xí)，鍛煉學(xué)生的自學(xué)能力、使用各種學(xué)習(xí)資源的能力以及與他人合作相處的能力。上課時(shí)，教師一律使用全英文形式的電子教案，采用圖文并茂、信息量大、形象生動(dòng)的多媒體形式教學(xué)，幫助學(xué)生理解抽象的理論知識(shí)，全英文課件可盡量包含所有知識(shí)點(diǎn)，以幫助學(xué)生理解。例如：在講到 “核酸與染色體”時(shí)，可以通過(guò)相關(guān)視頻，讓學(xué)生回憶和學(xué)習(xí)在生物化學(xué)和遺傳學(xué)中涉及的內(nèi)容，既省時(shí)又生動(dòng)地完成這部分內(nèi)容；講到“RNA的轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)的翻譯”時(shí)，可以通過(guò)Flas將轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程完整地展示給學(xué)生，然后采用啟發(fā)式教學(xué)方法去詳細(xì)講。另外，在講課中適時(shí)、適量地列舉反映分子生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)的生活、生產(chǎn)實(shí)例，對(duì)學(xué)生聯(lián)系實(shí)際，橫向思維，開(kāi)拓思路有很好的幫助，同時(shí)激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣[6]。課余時(shí)間我們通過(guò)英文版配套光盤(pán)學(xué)習(xí)、參觀分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室及本科生參與青年教師科研課題等多種方式來(lái)加強(qiáng)課堂學(xué)習(xí)內(nèi)容。

4. 課程教學(xué)考核

考核屬于教學(xué)內(nèi)容的一部分，通過(guò)考核可以提高學(xué)生學(xué)習(xí)熱情，鞏固學(xué)習(xí)內(nèi)容，對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)方式也有一定影響，不同的考核方式，導(dǎo)致學(xué)生以不同的態(tài)度面對(duì)課程的學(xué)習(xí)。傳統(tǒng)的考核方法著眼于結(jié)果，對(duì)學(xué)習(xí)過(guò)程考慮較少，致使學(xué)生為應(yīng)付考試而學(xué)習(xí)，最終喪失了求知興趣[7]。因此我們嘗試采用多元化的考核方式，用啟發(fā)性和總結(jié)性的考試題目來(lái)激勵(lì)學(xué)生，使學(xué)生在雙語(yǔ)教學(xué)過(guò)程中所付出的努力和成果得到公正、客觀的體現(xiàn)?；谶@一教學(xué)理念，我們采用綜合考核方法，平時(shí)成績(jī)占30%，主要考核學(xué)生的聽(tīng)課和回答問(wèn)題情況，調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性和主動(dòng)性；課外作業(yè)占10%，考核學(xué)生課外作業(yè)的完成質(zhì)量，目的是督促學(xué)生高質(zhì)量完成課外作業(yè)，強(qiáng)化課堂講授內(nèi)容；期末考試占60%，采用全英文試卷，學(xué)生可用英文或中文答題，也可二者結(jié)合答題，用英文答題酌情額外加分，目的是鼓勵(lì)學(xué)生盡可能使用英文思考并回答問(wèn)題，激發(fā)和挖掘?qū)W生的學(xué)習(xí)潛能。

分子生物學(xué)是生物類(lèi)相關(guān)專(zhuān)業(yè)課程體系中重要的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課之一，其原理和方法已廣泛滲透到眾多生物類(lèi)相關(guān)學(xué)科，并推進(jìn)它們的進(jìn)一步發(fā)展和進(jìn)步。采用雙語(yǔ)教學(xué)，使學(xué)生充分了解分子生物學(xué)日新月異的發(fā)展，促進(jìn)本科教學(xué)與國(guó)際接軌，推動(dòng)高等教育的國(guó)際交流和留學(xué)生教育。通過(guò)我們的努力，將摸索出提高雙語(yǔ)教學(xué)質(zhì)量的好方法，提高我校整體的教學(xué)水平。

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資助項(xiàng)目：

浙江省新世紀(jì)高等教育教學(xué)改革項(xiàng)目（ZC2010040）；浙江海洋學(xué)院第11批校級(jí)高等教育教學(xué)改革研究項(xiàng)目

篇8

關(guān)鍵詞：生物化學(xué)與分子生物學(xué)；教學(xué)改革；創(chuàng)新思維

中圖分類(lèi)號(hào)：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2016）13-0082-02

生物化學(xué)與分子生物學(xué)是醫(yī)學(xué)院校最重要的基礎(chǔ)學(xué)科之一，生物化學(xué)主要闡述活細(xì)胞中發(fā)生的各項(xiàng)化學(xué)過(guò)程，分子生物學(xué)主要從分子水平上揭示生命現(xiàn)象的奧秘。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，生物化學(xué)與分子生物學(xué)早已滲入到生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域中，成為當(dāng)代促進(jìn)整個(gè)生命科學(xué)發(fā)展的前沿學(xué)科。其理論和技術(shù)越來(lái)越多的被應(yīng)用于疾病的診斷、治療和預(yù)防，已成為醫(yī)學(xué)生步入21世紀(jì)醫(yī)學(xué)殿堂的必備條件，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的“催化劑”。為適應(yīng)新世紀(jì)醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要，當(dāng)代高等院校培養(yǎng)出來(lái)的醫(yī)學(xué)生，不僅要具備扎實(shí)的生物化學(xué)與分子生物學(xué)的理論知識(shí)，而且要具備運(yùn)用其技術(shù)解決醫(yī)學(xué)實(shí)際問(wèn)題的能力和科研創(chuàng)新能力。為此，我們?cè)谏锘瘜W(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)中，要不斷地改革教學(xué)方法，努力培養(yǎng)具有創(chuàng)新精神、創(chuàng)新思維以及創(chuàng)新意識(shí)的高素質(zhì)醫(yī)學(xué)人才。

一、以往生物化學(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)過(guò)程中存在的弊端

我國(guó)高等醫(yī)學(xué)教育傳統(tǒng)的人才培養(yǎng)模式主要圍繞著“以教師為中心，以書(shū)本為中心，以課堂為中心”的模式進(jìn)行知識(shí)的傳授。隨著生物化學(xué)與分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展，新技術(shù)新手段的層出不窮，以往的教學(xué)模式的弊端不斷顯露出來(lái)。①學(xué)生缺乏對(duì)教學(xué)的主動(dòng)參與性，師生之間缺乏雙向交流，為了應(yīng)付考試不得不死記硬背，不利于學(xué)生創(chuàng)新能的培養(yǎng)及素質(zhì)的提高。②生物化學(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)內(nèi)容多而復(fù)雜，名詞概念抽象難懂，使得學(xué)生對(duì)課程感到枯燥無(wú)味，甚至產(chǎn)生厭倦心理。③在教學(xué)內(nèi)容上往往過(guò)重于教材的講授，輕視對(duì)新的研究熱點(diǎn)和前沿知識(shí)的補(bǔ)充。雖然教材內(nèi)容時(shí)有更新，但相關(guān)領(lǐng)域的最新進(jìn)展并不能及時(shí)涵蓋，這不僅造成教師更新知識(shí)的動(dòng)力下降，同時(shí)也會(huì)使學(xué)生喪失了學(xué)習(xí)生物化學(xué)與分子生物學(xué)的興趣。因此，要培養(yǎng)高質(zhì)量的21世紀(jì)醫(yī)學(xué)專(zhuān)門(mén)人才，就必須以新的教育思想和教育觀念為指導(dǎo)，對(duì)這種傳統(tǒng)的教學(xué)模式進(jìn)行優(yōu)化與改革，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維和實(shí)踐能力。

二、新型生物化學(xué)與生分子生物學(xué)的教學(xué)策略

（一）豐富理論課教學(xué)方法，提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣

在《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》理論教學(xué)中，采取了多種教學(xué)方法以及形式多樣的教學(xué)活動(dòng)來(lái)加強(qiáng)學(xué)生對(duì)這門(mén)課基本理論知識(shí)的理解和掌握。

1.采用直觀教學(xué)的方法，使抽象知識(shí)通俗化、形象化。生物化學(xué)與分子生物學(xué)其研究?jī)?nèi)容相對(duì)抽象復(fù)雜，而且知識(shí)點(diǎn)較多，傳統(tǒng)的教學(xué)方式往往使人不易理解和記憶。計(jì)算機(jī)多媒體技術(shù)將文字、圖像、聲音和動(dòng)畫(huà)等融為一體，為學(xué)生提供了一個(gè)圖形并茂、生動(dòng)逼真的教學(xué)環(huán)境，使抽象難懂的微觀生命過(guò)程具體化，增強(qiáng)了教學(xué)感染力和教學(xué)內(nèi)容的內(nèi)在魅力，從而激發(fā)了學(xué)生的主動(dòng)性和積極性[1]。如蛋白質(zhì)合成過(guò)程，涉及了氨基酸的激活與轉(zhuǎn)運(yùn)、翻譯的起始、延伸、終止以及翻譯產(chǎn)物的加工修飾多個(gè)過(guò)程，并且有大量輔助因子的參與。單憑口述，學(xué)生是很難在心目中留下印象的。而通過(guò)動(dòng)畫(huà)演示、色彩變化以及聲音的配合，原來(lái)抽象死板的內(nèi)容瞬間變得生動(dòng)形象起來(lái)，學(xué)生不但容易理解，而且活躍了課堂氣氛。

2.建立微信公共平臺(tái)，延伸教學(xué)空間。為了充分利用現(xiàn)代網(wǎng)絡(luò)資源，我們建立了班級(jí)微信群。一方面，老師可以將最新的研究熱點(diǎn)和前沿資訊到群里，或是將一些生物化學(xué)與分子生物學(xué)發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的重要事件上傳到網(wǎng)上。另一方面，學(xué)生也可以通過(guò)微信群將自己學(xué)習(xí)過(guò)程中遇到的問(wèn)題及時(shí)反饋給老師，學(xué)生之間也可以參與討論。通過(guò)微信群進(jìn)行師生的互動(dòng)交流，不僅延伸了課堂教學(xué)空間，提高了學(xué)生學(xué)習(xí)生物化學(xué)與分子生物學(xué)的興趣和自主性，同時(shí)還能使學(xué)生及時(shí)了解學(xué)科的最新進(jìn)展。

3.引入病例引導(dǎo)型的教學(xué)方式。生物化學(xué)與分子生物學(xué)是臨床醫(yī)學(xué)生的一門(mén)非常重要的基礎(chǔ)課，其理論與臨床醫(yī)學(xué)密切相關(guān)。但由于該課程涉及面廣、內(nèi)容繁雜、邏輯性強(qiáng)，使得學(xué)生在學(xué)習(xí)過(guò)程中常常感到內(nèi)容抽象枯燥、不易理解。因此，應(yīng)建立“病例引導(dǎo)型教學(xué)”模式[2]，將臨床實(shí)際案例融入到課堂上，由表及里地講解疾病相關(guān)的生物化學(xué)與分子生物學(xué)機(jī)理，這樣既生動(dòng)又具有啟發(fā)性和實(shí)踐性，激發(fā)學(xué)生的思維，讓學(xué)生早期接觸臨床，將理論與實(shí)踐有機(jī)結(jié)合起來(lái)。比如，在講解維生素這一章節(jié)時(shí)，可將維生素過(guò)量或缺乏時(shí)所引起的疾病，夜盲癥、佝僂病、腳氣病、癩皮病等癥狀引入課堂中。又如在講解基因診斷時(shí)，可列舉臨床上常見(jiàn)的多種疾病，如脆性X染色體綜合征，肌強(qiáng)直性肌萎縮以及乳腺癌、肺癌等，以此引出檢測(cè)出這些疾病所用的分子生物學(xué)手段，同時(shí)講解最新測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用。

4.開(kāi)展以問(wèn)題為導(dǎo)向的教學(xué)方式。培養(yǎng)人的創(chuàng)新能力，最重要的是培養(yǎng)人的創(chuàng)造思維，在創(chuàng)造思維活動(dòng)中，發(fā)散式思維起主導(dǎo)作用。因此，在教學(xué)過(guò)程中，根據(jù)大綱要求及目的，我們會(huì)給學(xué)生創(chuàng)設(shè)一定的問(wèn)題情景，以激發(fā)學(xué)生的求知欲，啟發(fā)學(xué)生進(jìn)行思考[3]。如在講授蛋白質(zhì)生物合成時(shí)，提問(wèn)生命是如何將核酸的核苷酸序列的信息變成蛋白質(zhì)的氨基酸序列信息？密碼子為什么是3個(gè)核苷酸？又如在講“物質(zhì)代謝”前，提問(wèn)為什么有些人會(huì)得“三高”？這樣學(xué)生為了找出答案，在課前就會(huì)積極思考，尋找理論依據(jù)。課上抽一至兩名學(xué)生進(jìn)行回答，老師對(duì)結(jié)果進(jìn)行點(diǎn)評(píng)，肯定正確部分，糾正錯(cuò)誤部分，最后得出結(jié)論。實(shí)踐證明，開(kāi)展以問(wèn)題為中心的啟發(fā)式和引導(dǎo)式教學(xué)，充分發(fā)揮了教師為主導(dǎo)、學(xué)生為主體的作用，不但加強(qiáng)了學(xué)生對(duì)基本知識(shí)的理解和掌握，而且促進(jìn)了學(xué)生學(xué)習(xí)的動(dòng)機(jī)。

（二）加強(qiáng)創(chuàng)新性實(shí)踐教學(xué)

生物化學(xué)與分子生物學(xué)是一門(mén)實(shí)踐性和應(yīng)用性很強(qiáng)的學(xué)科，其中實(shí)驗(yàn)教學(xué)占了非常重要的地位，學(xué)生只有多動(dòng)手，才能更好地加深對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解和掌握，更重要的是在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，學(xué)生的科研思維，綜合分析和解決問(wèn)題的能力才能得到更好的提高。傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)多為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，這類(lèi)實(shí)驗(yàn)的原理、步驟、結(jié)論等很明確，內(nèi)容單一，學(xué)生只需要在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)照葫蘆畫(huà)瓢地去做就可以，嚴(yán)重影響了學(xué)生的探索精神和潛能的釋放。

為了培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力，我們?cè)黾恿嗽O(shè)計(jì)性、綜合性實(shí)驗(yàn)，將單一的實(shí)驗(yàn)有機(jī)的結(jié)合在一起，實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的系統(tǒng)性和各個(gè)相關(guān)技術(shù)之間的內(nèi)在聯(lián)系性。例如，開(kāi)展分子克隆實(shí)驗(yàn)，分別將PCR、酶切、DNA重組、連接轉(zhuǎn)化、基因表達(dá)、DNA提取以及瓊脂糖電泳鑒定等多項(xiàng)技術(shù)串聯(lián)起來(lái)，環(huán)環(huán)相扣，增加了學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的整體認(rèn)識(shí)。又如，我們讓學(xué)生檢測(cè)某未知蛋白的濃度。學(xué)生可以通過(guò)查閱文獻(xiàn)，自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程，準(zhǔn)備相關(guān)的實(shí)驗(yàn)物品，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，最后分組對(duì)各自的實(shí)驗(yàn)原理和實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行討論分析。在整個(gè)過(guò)程中，學(xué)生處于自主學(xué)習(xí)狀態(tài)，學(xué)習(xí)目的明確，學(xué)生的創(chuàng)造性思維較為活躍，從而極大地調(diào)動(dòng)了學(xué)生的科研興趣和創(chuàng)造力。

（三）綜合評(píng)價(jià)考試成績(jī)

考試成績(jī)是評(píng)價(jià)學(xué)生學(xué)習(xí)情況和教師教學(xué)效果的常用手段，也是一種比較有效的評(píng)斷方式。而傳統(tǒng)的考核方式往往只看重卷面上的分?jǐn)?shù)，導(dǎo)致大部分學(xué)生考試之前臨時(shí)抱佛腳，死記硬背，考試過(guò)后，所學(xué)的知識(shí)很快被遺忘。另外由于生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課隸屬于理論課，學(xué)科結(jié)業(yè)僅僅考核理論部分，幾乎沒(méi)有進(jìn)行實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的考核，也使得實(shí)驗(yàn)課的設(shè)置形同虛設(shè)。

為了培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)和創(chuàng)新能力，我們對(duì)本門(mén)課程的考核形式進(jìn)行了改革：閉卷考試（70%）+實(shí)驗(yàn)成績(jī)（20%）+課堂表現(xiàn)（10%）。生物化學(xué)與分子生物學(xué)是從分子水平探討生命現(xiàn)象本質(zhì)的一門(mén)學(xué)科，主要研究生物體的分子結(jié)構(gòu)與功能、物質(zhì)代謝與調(diào)節(jié)以及基因信息的傳遞等，涉及內(nèi)容之廣。為了強(qiáng)化和鞏固學(xué)生對(duì)這門(mén)課的理論知識(shí)的掌握，閉卷考試仍是不可取代的考核方式。其次，注重實(shí)驗(yàn)課的考核，對(duì)實(shí)驗(yàn)考勤、實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)報(bào)告以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)定。這樣一方面督促學(xué)生重視實(shí)驗(yàn)課，另一方面也有助于學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)操作技能和實(shí)驗(yàn)理論知識(shí)。再者，將課堂考勤、課堂預(yù)習(xí)、課堂回答問(wèn)題以及對(duì)課后作業(yè)的完成情況也納入到最終的成績(jī)內(nèi)，充分發(fā)揮學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性。通過(guò)以上的測(cè)評(píng)方式，不僅培養(yǎng)了學(xué)生的綜合能力，又提高了生物化學(xué)與分子生物學(xué)的教學(xué)質(zhì)量，符合創(chuàng)新型人才培養(yǎng)的要求。

（四）優(yōu)化教師隊(duì)伍

教師是教學(xué)改革的主體，作為課程的具體實(shí)施者，教師是否具有科學(xué)創(chuàng)新意識(shí)是實(shí)施創(chuàng)新教育的關(guān)鍵。生物化學(xué)與分子生物學(xué)不僅是醫(yī)學(xué)生最重要的基礎(chǔ)課，也是引領(lǐng)當(dāng)今生命科學(xué)的前沿學(xué)科。作為本門(mén)課程的教師，有責(zé)任引導(dǎo)學(xué)生注重生物化學(xué)與分子生物學(xué)的學(xué)習(xí)，也要借助生物化學(xué)與分子生物學(xué)的學(xué)習(xí)培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新性思維。因此，教師要不斷學(xué)習(xí)，用最新的知識(shí)武裝自己，緊跟科學(xué)發(fā)展潮流，同時(shí)還要注重自身思想素質(zhì)的提高，為培養(yǎng)創(chuàng)新型醫(yī)學(xué)人才而努力。

總之，教學(xué)改革是一個(gè)永無(wú)止境的工程，伴隨著生物科技的飛速發(fā)展，我們要敢于打破教條、挑戰(zhàn)權(quán)威，將教學(xué)改革落到實(shí)處，為社會(huì)培養(yǎng)更多更優(yōu)秀的創(chuàng)新型醫(yī)學(xué)人才。

參考文獻(xiàn)：

[1]秦宜德.醫(yī)學(xué)院校《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》教學(xué)中的科學(xué)創(chuàng)新教育[J].安微醫(yī)藥，2013，17（1）：175-177.

篇9

【摘 要】適應(yīng)新課標(biāo)對(duì)高等師范學(xué)校生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)的人才要求，改革高師《分子生物學(xué)》課程教學(xué)內(nèi)容和知識(shí)體系，解決《分子生物學(xué)》枯燥難學(xué)的問(wèn)題，激發(fā)和調(diào)動(dòng)學(xué)生對(duì)分子生物學(xué)課程的學(xué)習(xí)興趣，有利于改善分子生物學(xué)課程的教學(xué)，使培養(yǎng)出來(lái)的本科師范生更好適應(yīng)中學(xué)生物教學(xué)。

關(guān)鍵詞 分子生物學(xué)；教學(xué)改革；師范生

中圖分類(lèi)號(hào)：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1671-0568（2015）05-0051-02

作者簡(jiǎn)介：張振霞，女，博士，副教授，從事分子生物學(xué)教學(xué)工作。鄭玉忠，男，博士，副研究員，從事生物學(xué)教學(xué)工作。

基金項(xiàng)目：本文系第六批高等學(xué)校特色專(zhuān)業(yè)建設(shè)項(xiàng)目“國(guó)家教育部第六批高等學(xué)校特色專(zhuān)業(yè)建設(shè)點(diǎn)[教高函2010]15號(hào)生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)”（編號(hào)：TS12367）和廣東省高等教育教學(xué)改革工程項(xiàng)目“生物學(xué)教育研究型教師培養(yǎng)方案的創(chuàng)立與實(shí)踐”（編號(hào)：BKYB2011065）的研究成果。

《分子生物學(xué)》是高等師范院校生物科學(xué)業(yè)的一門(mén)重要的基礎(chǔ)課，是生命科學(xué)中公認(rèn)的核心學(xué)科，它的誕生與發(fā)展不僅使人類(lèi)對(duì)生命現(xiàn)象本質(zhì)的認(rèn)識(shí)深入到分子水平，而且其基本理論和研究方法已經(jīng)滲透到生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域，因而也成為生命科學(xué)類(lèi)相關(guān)專(zhuān)業(yè)重要的基礎(chǔ)理論課程。該課程講述的是微觀世界和分子水平上的知識(shí)，其內(nèi)容結(jié)構(gòu)抽象，很難理解及掌握。因此，《分子生物學(xué)》是學(xué)生公認(rèn)的難學(xué)科目，學(xué)生們對(duì)該課總是懷有畏學(xué)心理；另一方面，中學(xué)新課程標(biāo)準(zhǔn)的基本理念是提高學(xué)生的生物科學(xué)素養(yǎng)、面向全體學(xué)生、倡導(dǎo)探究能力以及注重與現(xiàn)實(shí)生活的聯(lián)系，采用多種教學(xué)方式以滿足不同學(xué)生的學(xué)習(xí)需要。但高師生物學(xué)專(zhuān)業(yè)教學(xué)模式卻與中學(xué)生物學(xué)新體系脫節(jié)，大多數(shù)教學(xué)方式多側(cè)重于研究教師的“教學(xué)”而忽視學(xué)生的“學(xué)習(xí)”，過(guò)分強(qiáng)調(diào)教師在教學(xué)中的主導(dǎo)作用，而忽略學(xué)生的學(xué)習(xí)主體作用。教師仍是居高臨下的權(quán)威，把學(xué)生當(dāng)做接受教育的被動(dòng)者。所以，主客觀兩方面的因素導(dǎo)致了教學(xué)效果不佳，學(xué)生學(xué)習(xí)效率低下。為了適應(yīng)新課標(biāo)對(duì)高等師范學(xué)校生物科學(xué)專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)的人才要求，改革教學(xué)內(nèi)容和體系，調(diào)整課程內(nèi)容與知識(shí)體系，使培養(yǎng)出來(lái)的本科師范生更好適應(yīng)中學(xué)生物教學(xué)，而對(duì)高師《分子生物學(xué)》課程教學(xué)改革也顯得極其重要和必要。

一、調(diào)整課程內(nèi)容， 構(gòu)建新的知識(shí)體系

合理調(diào)整課程內(nèi)容體系，削枝強(qiáng)干，精簡(jiǎn)內(nèi)容，克服各教學(xué)環(huán)節(jié)求全的弊端。面對(duì)分子生物學(xué)抽象眾多的基礎(chǔ)理論教學(xué)內(nèi)容，教師需幫助學(xué)生理清課程脈絡(luò)，對(duì)課程的框架結(jié)構(gòu)內(nèi)容以及交叉知識(shí)點(diǎn)做到心中有數(shù)，實(shí)現(xiàn)學(xué)生在掌握課程基本知識(shí)點(diǎn)的基礎(chǔ)上，能夠更好地理解重點(diǎn)并解決難點(diǎn)。

1.熟悉分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容。分子生物學(xué)的內(nèi)容包括：DNA重組技術(shù)、基因表達(dá)調(diào)控、生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能、基因組及生物信息學(xué)等。目前分子生物學(xué)的主要內(nèi)容是對(duì)核酸中所包含信息的研究與應(yīng)用，所以該課程又稱為核酸分子生物學(xué)。

2.把握分子生物學(xué)的中心線索。通過(guò)中心法則來(lái)構(gòu)建分子生物學(xué)的知識(shí)體系。在遺傳信息傳遞的過(guò)程中，核酸及蛋白質(zhì)生物大分子的結(jié)構(gòu)、功能、來(lái)源以及它們的相互作用成就了遺傳信息的精確表達(dá)；以此讓學(xué)生宏觀地對(duì)課程內(nèi)容進(jìn)行理解，掌握課程的精髓。

3.理解分子生物學(xué)與相關(guān)學(xué)科的關(guān)系。生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)、微生物學(xué)和生命科學(xué)導(dǎo)論等學(xué)科是分子生物學(xué)的先修課程，這些學(xué)科中的一些現(xiàn)象和規(guī)律，其分子機(jī)制是由分子生物學(xué)來(lái)加以闡述的。教師應(yīng)具備相關(guān)學(xué)科知識(shí)的基本素質(zhì)，對(duì)學(xué)生在學(xué)科交叉知識(shí)點(diǎn)中的疑惑加以闡述。

二、教學(xué)方式的改革

提高學(xué)生學(xué)習(xí)分子生物學(xué)課程的興趣，改革教學(xué)模式上，讓學(xué)生主動(dòng)參與課堂，采取多變的教學(xué)方式，把學(xué)習(xí)的主動(dòng)權(quán)真正交給學(xué)生，讓他們有較多的自學(xué)和研究的余地，即授人以漁。單純的灌輸，只會(huì)扼殺學(xué)生的積極性和主動(dòng)性。

1.提出問(wèn)題來(lái)吸引學(xué)生的注意力。 改變以教師為主的被動(dòng)教學(xué)模式，“以問(wèn)題為基礎(chǔ)”的方式加強(qiáng)對(duì)課程內(nèi)容的學(xué)習(xí)，引導(dǎo)學(xué)生思考，調(diào)動(dòng)學(xué)生的主動(dòng)性，活躍課堂氣氛，充分發(fā)揮學(xué)生主體的作用。比如，講到RNA轉(zhuǎn)錄時(shí)，提出問(wèn)題：為什么RNA聚合酶能準(zhǔn)確無(wú)誤地找到轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)？再如講到蛋白質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制時(shí)，提問(wèn)：新合成的蛋白質(zhì)是如何知道它該去的地方，從而形成膜蛋白、胞質(zhì)蛋白以及不同細(xì)胞器官的蛋白，等等。通過(guò)問(wèn)題的提出，引導(dǎo)學(xué)生思考、解析，獲得答案的過(guò)程也是思維能力提高的過(guò)程，同時(shí)也是對(duì)所學(xué)內(nèi)容理解的過(guò)程。

2.學(xué)生自主總結(jié)課堂內(nèi)容。分子生物學(xué)課程講述的是微觀世界和分子水平上的知識(shí)，其內(nèi)容結(jié)構(gòu)抽象，很難理解及掌握。由教師一個(gè)人在講臺(tái)上連續(xù)講3 個(gè)學(xué)時(shí)，講得再好，在被動(dòng)的狀態(tài)下學(xué)生也容易失去興趣。教學(xué)過(guò)程中應(yīng)將教學(xué)內(nèi)容中的重點(diǎn)和難點(diǎn)部分詳細(xì)說(shuō)明，而對(duì)次要的和易懂的部分只做簡(jiǎn)要講解或讓學(xué)生自學(xué)，利用課堂最后十分鐘，讓學(xué)生整理和總結(jié)一下所學(xué)內(nèi)容的重點(diǎn)和難點(diǎn)內(nèi)容。比如，第二章“染色體與 DNA”，由于染色體與 DNA 結(jié)構(gòu)部分是在生物化學(xué)和遺傳學(xué)里學(xué)過(guò)的內(nèi)容，所以只做簡(jiǎn)單的回顧，重點(diǎn)放在DNA的復(fù)制，對(duì)復(fù)制的引發(fā)到終止過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，最后讓學(xué)生自己整理和總結(jié)參與DNA 復(fù)制的酶和蛋白質(zhì)及其作用。就原核生物而言，參與DNA復(fù)制的酶和蛋白質(zhì)達(dá)16個(gè)之多，學(xué)生在聽(tīng)課當(dāng)中不一定都能記得住。因此，在教師講解的基礎(chǔ)上，讓學(xué)生自己來(lái)整理和總結(jié)所學(xué)的內(nèi)容，能使學(xué)生更好地消化和掌握所學(xué)的內(nèi)容，同時(shí)也達(dá)到提高學(xué)生自學(xué)能力和綜合分析能力的目的。

3.注重課前預(yù)習(xí)課后復(fù)習(xí)。老師對(duì)學(xué)生嚴(yán)格要求，督促和鼓勵(lì)學(xué)生課前預(yù)習(xí)、課后復(fù)習(xí)，布置一定的思考題，“以問(wèn)題為基礎(chǔ)”的方式加強(qiáng)對(duì)課程內(nèi)容的學(xué)習(xí)。預(yù)習(xí)課程時(shí)處處尋找問(wèn)題，而復(fù)習(xí)課程內(nèi)容時(shí)又不斷地回答問(wèn)題，加之學(xué)生的聽(tīng)講過(guò)程中教師適時(shí)的、靈活隨機(jī)性的、啟發(fā)式提問(wèn)，讓學(xué)生對(duì)課程內(nèi)容的學(xué)習(xí)是在一系列的提問(wèn)、討論、釋疑、小結(jié)、復(fù)習(xí)中完成，從而真正做到從以“教”為中心轉(zhuǎn)變到以“學(xué)”為中心。

4.成立學(xué)習(xí)小組。學(xué)習(xí)小組以6~8人為單位，擬定題目，自己查閱文獻(xiàn)并制作多媒體課件，如轉(zhuǎn)基因安全性、疾病與健康、人類(lèi)基因組計(jì)劃等。通過(guò)學(xué)生講述，同學(xué)和教師進(jìn)行評(píng)述，既實(shí)現(xiàn)了師生互動(dòng)和教學(xué)相長(zhǎng)，又使學(xué)生的知識(shí)面有所拓寬、科研思路有所清晰、自主學(xué)習(xí)意識(shí)有所提高，每位學(xué)生可以充分地互動(dòng)，有利于學(xué)生學(xué)術(shù)素養(yǎng)、 團(tuán)隊(duì)合作精神及交流溝通的技能的提高。

三、革新教學(xué)內(nèi)容

1.學(xué)習(xí)最新成果。適當(dāng)補(bǔ)充的最新研究成果，介紹最新研究動(dòng)向和發(fā)展趨勢(shì)?！斗肿由飳W(xué)》是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最快的內(nèi)容，并與其他學(xué)科廣泛交叉與滲透，因此教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)過(guò)程中一定要結(jié)合最新科學(xué)發(fā)現(xiàn)、科研進(jìn)展、最新科研技術(shù)、最新時(shí)訊時(shí)事等。如端粒和人類(lèi)壽命、生物芯片、RNA在生物進(jìn)化中的作用等生命科學(xué)中的新發(fā)現(xiàn)、新進(jìn)展，能吸引學(xué)生興趣，激發(fā)學(xué)生的思維，增強(qiáng)學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力。

2.聯(lián)系社會(huì)生活。在教學(xué)中注重“科學(xué)、技術(shù)、社會(huì)”（STS）教育，把科學(xué)教育與當(dāng)前的社會(huì)生活、生產(chǎn)、發(fā)展緊密結(jié)合起來(lái)，使學(xué)生深刻理解科學(xué)、技術(shù)、社會(huì)三者之間的相互關(guān)系。在講授過(guò)程中經(jīng)常恰當(dāng)?shù)拇┎逡恍┩ㄋ滓锥?、不失科學(xué)性的實(shí)例和生活常識(shí)的例子，如HIV的治療和預(yù)防、SARS的確診方法、試管嬰兒、親子鑒定等。教會(huì)學(xué)生用課本知識(shí)解釋生活或科學(xué)領(lǐng)域的現(xiàn)象，這樣一方面使學(xué)生更容易理解教學(xué)內(nèi)容，另一方面使學(xué)生感受到分子生物學(xué)在生活中的應(yīng)用，從而激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，開(kāi)拓學(xué)生的科學(xué)思維，增進(jìn)學(xué)生的社會(huì)責(zé)任感，促使學(xué)生逐漸樹(shù)立人與自然和諧共處，經(jīng)濟(jì)、自然、社會(huì)可持續(xù)發(fā)展的觀念。

四、充分利用教學(xué)資源

隨著信息處理技術(shù)、多媒體技術(shù)和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的快速發(fā)展，教科書(shū)不應(yīng)該也越來(lái)越不可能成為惟一的課程資源，要培養(yǎng)學(xué)生學(xué)會(huì)自己在網(wǎng)上獲取各種信息資源。

五、運(yùn)用現(xiàn)代教育技術(shù)，提高課堂教學(xué)質(zhì)量

現(xiàn)代教育技術(shù)能創(chuàng)造出形、光、聲、色等視聽(tīng)信息和教育信息，從多角度、多方向、多層次、多水平使分散的注意轉(zhuǎn)向集中注意，突出教學(xué)的重點(diǎn)內(nèi)容，突破時(shí)間和空間、微觀和宏觀的限制，使一些抽象的理論轉(zhuǎn)化為感性的認(rèn)識(shí)等優(yōu)點(diǎn)， 解決了以往教學(xué)中“一張嘴”的枯燥和抽象。結(jié)合教學(xué)內(nèi)容，巧妙運(yùn)用現(xiàn)代教育技術(shù)，能有效提高教學(xué)效率。

參考文獻(xiàn)：

[1]王慧.高等師范教育：近30年改革發(fā)展的回顧與思考[J].河北師范大學(xué)學(xué)報(bào)（教育科學(xué)版），2010，12（11）：90-93.

[2]張振霞，鄭玉忠. PBL 在《分子生物學(xué)》教學(xué)中的應(yīng)用初探[J].時(shí)代教育，2009，（1）：108.

篇10

【關(guān)鍵詞】醫(yī)學(xué)；高等院校；中醫(yī)專(zhuān)業(yè)；醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)；教學(xué)；實(shí)踐

1教材的選擇

教材是體現(xiàn)教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)方法的知識(shí)載體，也是教師授課的重要依據(jù)和學(xué)生學(xué)習(xí)知識(shí)的工具，因此選擇合適的教材是教學(xué)過(guò)程中非常重要的環(huán)節(jié)。在開(kāi)設(shè)中醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程時(shí)，我們選擇了供中醫(yī)藥類(lèi)專(zhuān)業(yè)使用，由唐炳華，王繼峰主編，中國(guó)中醫(yī)藥出版社出版的《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》作為教材。該教材承接醫(yī)學(xué)院校生物化學(xué)的教學(xué)內(nèi)容，深入和系統(tǒng)地介紹分子生物學(xué)的理論、技術(shù)和應(yīng)用，注重與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的結(jié)合，符合中醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)學(xué)生醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)的實(shí)際情況，增強(qiáng)了教學(xué)效果。分子生物學(xué)是一門(mén)現(xiàn)代生命科學(xué)領(lǐng)域中的前沿性學(xué)科，新知識(shí)、新理論、新技術(shù)層出不窮，發(fā)展成果日新月異。因此如何借助現(xiàn)代化的教學(xué)設(shè)施將基礎(chǔ)性的教材內(nèi)容與最新研究成果的補(bǔ)充增添內(nèi)容融為一體，是教學(xué)改革的主要內(nèi)容[5]。近年來(lái)，以新一代基因測(cè)序技術(shù)為代表的高通量分析技術(shù)，極大地推動(dòng)了分子生物學(xué)的發(fā)展，組學(xué)以及大數(shù)據(jù)分析的技術(shù)手段為分子生物學(xué)的研究提供了更豐富的信息和更廣闊的視野。這使得現(xiàn)有的教材出現(xiàn)了一定的滯后性，我們根據(jù)長(zhǎng)期教學(xué)和科研工作的經(jīng)驗(yàn)體會(huì)，編寫(xiě)了針對(duì)高等醫(yī)學(xué)院校學(xué)生醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的專(zhuān)業(yè)授課為明確對(duì)象的《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》教材。本教材在突出前沿和實(shí)用為原則的前提下，縮減了同類(lèi)教材中普遍出現(xiàn)的與技術(shù)細(xì)節(jié)相關(guān)的大篇幅內(nèi)容，而對(duì)理論和原理部分進(jìn)行了擴(kuò)展與強(qiáng)化；注重討論與疾病和臨床案例或相關(guān)問(wèn)題的聯(lián)系；根據(jù)對(duì)分子生物學(xué)發(fā)展趨勢(shì)的把握，嘗試了對(duì)系統(tǒng)生物學(xué)等前沿領(lǐng)域的介紹[1]。目前，該教材已經(jīng)在本校醫(yī)學(xué)各專(zhuān)業(yè)使用了近1年，取得了良好的教學(xué)效果。

2教學(xué)內(nèi)容的優(yōu)化

醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程的概念抽象，內(nèi)容繁多、新概念、新技術(shù)及新進(jìn)展不斷涌現(xiàn)。在有限的學(xué)時(shí)內(nèi)，合理安排教學(xué)內(nèi)容、根據(jù)學(xué)生專(zhuān)業(yè)的特點(diǎn)優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容、注重理論知識(shí)及技術(shù)相互滲透，并兼顧新知識(shí)的傳授，是取得良好教學(xué)效果的關(guān)鍵。配合新教材的內(nèi)容，重新修訂了大綱和教案，精選了7個(gè)專(zhuān)題，以“基因與基因組”，“基因組穩(wěn)定性與DNA損傷修復(fù)”，“基因表達(dá)的表觀遺傳調(diào)控”作為學(xué)生學(xué)習(xí)分子生物學(xué)理論知識(shí)的基礎(chǔ)；隨后通過(guò)“基因結(jié)構(gòu)分析的基本方法”，“基因克隆與基因體外表達(dá)”介紹多項(xiàng)分子生物學(xué)中重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)；與醫(yī)學(xué)緊密聯(lián)系的“腫瘤分子生物學(xué)”；包含近年來(lái)分子生物學(xué)前沿知識(shí)的“生物組學(xué)與研究方法”。確保課程內(nèi)容既豐富全面，涵蓋基本理論與基本技術(shù)，又避免重復(fù)，還具有前沿性。

3教學(xué)方法的多樣性

醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程的特點(diǎn)決定了必須采用靈活多樣的教學(xué)方法才能達(dá)到良好的教學(xué)效果。

3.1利用多媒體教學(xué)的優(yōu)勢(shì)

醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程中有很多需要掌握的概念、原理和技術(shù)，傳統(tǒng)教學(xué)模式會(huì)導(dǎo)致學(xué)生感覺(jué)學(xué)習(xí)枯燥，不能深刻理解概念，缺乏學(xué)習(xí)興趣。相較于以往傳統(tǒng)的板書(shū)教學(xué)，多媒體形式更靈活、內(nèi)容含量更豐富，可以通過(guò)幻燈片、動(dòng)畫(huà)、視頻等更加直觀形象地呈現(xiàn)，利于學(xué)生在有限的時(shí)間內(nèi)獲得更多的信息量[6]。例如在講授聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)的基本原理時(shí)，僅有文字描述，甚至示意圖都不能讓學(xué)生很好的理解PCR技術(shù)是如何把目的基因擴(kuò)增至100萬(wàn)倍的，在講解原理后配合PCR擴(kuò)增的多媒體動(dòng)畫(huà)，生動(dòng)形象的展示PCR在每一輪循環(huán)中DNA新鏈合成的過(guò)程，數(shù)目變化，最終是如何達(dá)到100萬(wàn)倍的。這樣就使抽象的理論知識(shí)變得具體化，加深了學(xué)生對(duì)概念的理解和記憶，提高了學(xué)習(xí)興趣。

3.2注重學(xué)生知識(shí)體系的建立

分子生物學(xué)的理論知識(shí)與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)各個(gè)學(xué)科如生理學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、病理學(xué)、藥理學(xué)以及臨床各學(xué)科都有廣泛的聯(lián)系，相互交叉與滲透。所以要透徹理解分子生物學(xué)的理論精髓，必須將這些相關(guān)學(xué)科的基本原理有機(jī)地貫穿到相應(yīng)的原理和概念中去。在醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)過(guò)程中注重之間的相互聯(lián)系，例如核酸分子雜交技術(shù)涉及生物化學(xué)課程中講過(guò)的核酸分子重要的特性即：核酸的變性和復(fù)性。我們?cè)谥v授核酸分子雜交技術(shù)之前會(huì)帶著學(xué)生復(fù)習(xí)核酸分子變性和復(fù)性的概念，然后引出核酸分子雜交的概念，再進(jìn)入核酸分子雜交技術(shù)的介紹。這樣既鞏固了學(xué)生已有的知識(shí)，又由淺入深地理解和掌握了新知識(shí)，使學(xué)生的知識(shí)體系跨越學(xué)科的界限相互聯(lián)系在一起。

3.3突出分子生物學(xué)技術(shù)在中醫(yī)藥學(xué)研究中的應(yīng)用

近年來(lái)，運(yùn)用分子生物學(xué)相關(guān)知識(shí)與技術(shù)研究中醫(yī)學(xué)已經(jīng)在國(guó)內(nèi)外廣泛開(kāi)展，目前的研究成果多集中在中醫(yī)基礎(chǔ)理論、中醫(yī)辨證論治學(xué)說(shuō)、中藥臨床應(yīng)用、中醫(yī)臨床研究等方面，對(duì)推動(dòng)中醫(yī)理論向現(xiàn)代化邁進(jìn)有著重要的意義[7]。中醫(yī)藥專(zhuān)業(yè)學(xué)生的生物學(xué)知識(shí)背景相對(duì)薄弱，因此在教學(xué)過(guò)程中需要考慮到學(xué)生的知識(shí)體系、興趣以及中醫(yī)藥專(zhuān)業(yè)人才的培養(yǎng)需求，針對(duì)性的進(jìn)行講授[8]。在給中醫(yī)專(zhuān)業(yè)的學(xué)生講授醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程的過(guò)程中，我們注意在醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)的講解過(guò)程中穿插中醫(yī)藥研究中實(shí)際案例，如在講解限制性長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）技術(shù)時(shí)，引入科學(xué)家利用PCR和RFLP技術(shù)作為分析手段對(duì)黃芪亞族和甘草亞族親緣關(guān)系的研究。在講解人類(lèi)基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的研究成果時(shí)，介紹利用蛋白芯片技術(shù)來(lái)鑒定中藥品質(zhì)、分析中藥成分；利用基因芯片技術(shù)研究中藥治療前后疾病相關(guān)基因位點(diǎn)的變化，篩選中藥作用靶點(diǎn)。一方面激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，開(kāi)拓了視野，另一方面讓學(xué)生認(rèn)識(shí)到學(xué)習(xí)和掌握分子生物學(xué)理論和技術(shù)的重要性。

4提高學(xué)生的綜合素質(zhì)

時(shí)代的發(fā)展對(duì)分子生物學(xué)教學(xué)不斷提出新要求，對(duì)專(zhuān)業(yè)人才知識(shí)結(jié)構(gòu)和能力素質(zhì)也提出了新標(biāo)準(zhǔn)，迫切需要培養(yǎng)創(chuàng)新型高素質(zhì)人才[9]。因此，針對(duì)當(dāng)前中醫(yī)專(zhuān)業(yè)學(xué)生的特點(diǎn)，培養(yǎng)學(xué)生在基礎(chǔ)研究、臨床實(shí)踐中應(yīng)用醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)知識(shí)分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力，可以為今后學(xué)生科研選題或從事這方面的工作打下良好基礎(chǔ)。此外，我們還鼓勵(lì)有能力的學(xué)生閱讀相關(guān)英文專(zhuān)業(yè)書(shū)籍、和專(zhuān)業(yè)文獻(xiàn)；參加海內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域?qū)＜宜龅膶W(xué)術(shù)報(bào)告，增加學(xué)習(xí)興趣和熱情。