轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究論文
時間:2022-10-18 09:08:00
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摘要轉(zhuǎn)基因技術(shù)作為生命科學(xué)的前沿技術(shù)之一,已經(jīng)逐漸走入了人們的生活。轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以認為是在一定程度上通過科學(xué)技術(shù)手段讓其他生物、植物朝著對人類有利方向發(fā)展的技術(shù)。通過對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的介紹,闡述了該技術(shù)的利弊關(guān)系,指出只有通過正確的引導(dǎo)和規(guī)范管理,才能很好地利用該技術(shù),使它為人類服務(wù)。
關(guān)鍵詞轉(zhuǎn)基因技術(shù)發(fā)展歷程利弊關(guān)系
1前言
轉(zhuǎn)基因技術(shù)是生命科學(xué)前沿的重要領(lǐng)域之一。自從人類耕種作物以來,我們的祖先就從未停止過作物的遺傳改良。過去的幾千年里農(nóng)作物改良的方式主要是對自然突變產(chǎn)生的優(yōu)良基因和重組體的選擇和利用,通過隨機和自然的方式來積累優(yōu)良基因。遺傳學(xué)創(chuàng)立后近百年的動植物育種則是采用人工雜交的方法,進行優(yōu)良基因的重組和外源基因的導(dǎo)入而實現(xiàn)遺傳改良。因此,可以認為轉(zhuǎn)基因技術(shù)是與傳統(tǒng)技術(shù)一脈相承的,其本質(zhì)都是通過獲得優(yōu)良基因進行遺傳改良。但在基因轉(zhuǎn)移的范圍和效率上,轉(zhuǎn)基因技術(shù)與傳統(tǒng)育種技術(shù)有兩點重要區(qū)別,第一,傳統(tǒng)技術(shù)一般只能在生物種內(nèi)個體間實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移,而轉(zhuǎn)基因技術(shù)所轉(zhuǎn)移的基因則不受生物體間親緣關(guān)系的限制;第二,傳統(tǒng)的雜交和選擇技術(shù)一般是在生物個體水平上進行,操作對象是整個基因組,所轉(zhuǎn)移的是大量的基因,不可能準(zhǔn)確地對某個基因進行操作和選擇,對后代的表現(xiàn)預(yù)見性較差。而轉(zhuǎn)基因技術(shù)所操作和轉(zhuǎn)移的一般是經(jīng)過明確定義的基因,功能清楚,后代表現(xiàn)可準(zhǔn)確預(yù)期。因此,轉(zhuǎn)基因技術(shù)是對傳統(tǒng)技術(shù)的發(fā)展和補充。將兩者緊密結(jié)合,可相得益彰,大大地提高動植物品種改良的效率。
2轉(zhuǎn)基因技術(shù)的介紹
轉(zhuǎn)基因技術(shù)是指用人工分離和修飾過的外源基因?qū)肷矬w的基因組中,從而使生物體的遺傳性狀發(fā)生改變的技術(shù),可分為轉(zhuǎn)基因動物與轉(zhuǎn)基因植物兩大分支。人們常說的“遺傳工程”、“基因工程”、“遺傳轉(zhuǎn)化”均為轉(zhuǎn)基因的同義詞。
2.1轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)
轉(zhuǎn)基因植物是指利用重組DNA技術(shù)將克隆的優(yōu)良目的基因整合到植物的基因組中,并使其得以表達,從而獲得的具有新的遺傳性狀的植物。自1983年世界第一例轉(zhuǎn)基因植物——煙草問世以來僅20多年的時間,轉(zhuǎn)基因植物的研究和應(yīng)用就已經(jīng)得到了迅猛的發(fā)展,已有近1000例轉(zhuǎn)基因植物被批準(zhǔn)進入田間試驗,涉及的植物物種有50余個,已有48個轉(zhuǎn)基因植物品種被批準(zhǔn)進行商業(yè)化生產(chǎn)。常見的轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)有:
(1)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法。農(nóng)桿菌是普遍存在于土壤中的一種革蘭氏陰性細菌,它能在自然條件下趨化性地感染大多數(shù)雙子葉植物的受傷部位,并誘導(dǎo)產(chǎn)生冠癭瘤或發(fā)狀根。根癌農(nóng)桿菌和發(fā)根農(nóng)桿菌的細胞中分別含有Ti質(zhì)粒和Ri質(zhì)粒,其上有一段T-DNA,農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進入細胞后,可將T-DNA插入到植物基因組中。因此,農(nóng)桿菌是一種天然的植物遺傳轉(zhuǎn)化體系。人們將目的基因插入到經(jīng)過改造的T-DNA區(qū),借助農(nóng)桿菌的感染實現(xiàn)外源基因向植物細胞的轉(zhuǎn)移與整合,然后通過細胞和組織培養(yǎng)技術(shù),再生出轉(zhuǎn)基因植株。農(nóng)桿菌介導(dǎo)法起初只被用于雙子葉植物中,近年來,農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化在一些單子葉植物(尤其是水稻)中也得到了廣泛應(yīng)用。
(2)基因槍介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法。利用火藥爆炸或高壓氣體加速(這一加速設(shè)備被稱為基因槍),將包裹了帶目的基因的DNA溶液的高速微彈直接送入完整的植物組織和細胞中,然后通過細胞和組織培養(yǎng)技術(shù),再生出植株,選出其中轉(zhuǎn)基因陽性植株即為轉(zhuǎn)基因植株。與農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化相比,基因槍法轉(zhuǎn)化的一個主要優(yōu)點是不受受體植物范圍的限制。而且其載體質(zhì)粒的構(gòu)建也相對簡單,因此也是目前轉(zhuǎn)基因研究中應(yīng)用較為廣泛的一種方法。
(3)花粉管通道法。在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道,將外源DNA導(dǎo)入受精卵細胞,并進一步地被整合到受體細胞的基因組中,隨著受精卵的發(fā)育而成為帶轉(zhuǎn)基因的新個體。該方法于20世紀80年代初期由我國學(xué)者周光宇提出,我國目前推廣面積最大的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉就是用花粉管通道法培育出來的。該法的最大優(yōu)點是不依賴組織培養(yǎng)人工再生植株,技術(shù)簡單,不需要裝備精良的實驗室,常規(guī)育種工作者易于掌握。
2.2轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)
轉(zhuǎn)基因動物是指用實驗導(dǎo)入的方法將外源基因在染色體基因內(nèi)穩(wěn)定整合并能穩(wěn)定表達的一類動物。1974年,Jaenisch應(yīng)用顯微注射法,在世界上首次成功地獲得了SV40DNA轉(zhuǎn)基因小鼠。其后,Costantini將兔-珠蛋白基因注入小鼠的受精卵,使受精卵發(fā)育成小鼠,表達出了兔卜珠蛋白;Palmiter等把大鼠的生長激素基因?qū)诵∈笫芫褍?nèi),獲得“超級”小鼠;Church獲得了首例轉(zhuǎn)基因牛。到目前為止,人們已經(jīng)成功地獲得了轉(zhuǎn)基因鼠、雞、山羊、豬、綿羊、牛、蛙以及多種轉(zhuǎn)基因魚。主要的轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)包括有:
(1)原核顯微注射法,又稱DNA顯微注射法,即通過顯微操作儀將外源基因直接用注射器注入受精卵,利用外源基因整合到DNA中,發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。其創(chuàng)始人是Jaenisch和Mintz等。此方法目前應(yīng)用較普遍,現(xiàn)在的轉(zhuǎn)基因動物研究大都是在Palmiter等方法的基礎(chǔ)上有所改進而進行的。這種方法的特點是外源基因的導(dǎo)入整合效率較高,不需要載體,直接轉(zhuǎn)移目的基因,目的基因的長度可達100Kb。它可以直接獲得純系,實驗周期短。但需要貴重精密儀器,技術(shù)操作較難,并且外源基因的整合位點和整合的拷貝數(shù)都無法控制,易造成宿主動物基因組的插入突變,引起相應(yīng)的性狀改變,重則致死。
(2)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法,指將目的基因重組到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體上,制成高濃度的病毒顆粒,人為感染著床前或著床后的胚胎,也可以直接將胚胎與能釋放逆轉(zhuǎn)錄病毒的單層培養(yǎng)細胞共孵育以達到感染的目的,通過病毒將外源目的基因插入整合到宿主基因組DNA中去。這種逆轉(zhuǎn)錄病毒被用重組DNA技術(shù)修飾后作為基因載體在應(yīng)用中優(yōu)于微注射法之處為:無需要重排,可在整合點整合轉(zhuǎn)移基因的單個拷貝;將胚胎置于高濃度病毒容器中,或者與被感染的細胞體外共同培養(yǎng),或微注射雞胚盤里,整合有逆轉(zhuǎn)錄病毒的DNA的胚胎率高。缺點是:需要生產(chǎn)帶有轉(zhuǎn)基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒;插入逆轉(zhuǎn)錄病毒的基因有一定的大小限度;所得轉(zhuǎn)基因家畜的嵌合性很高,而需要廣泛的雜交,以建立轉(zhuǎn)基因系;轉(zhuǎn)基因的表達問題尚未解決。
(3)胚胎干細胞介導(dǎo)法是將基因?qū)肱咛ビ诩毎蝗缓髮⑥D(zhuǎn)基因的胚胎干細胞注射于動物囊胚后可參與宿主的胚胎構(gòu)成,形成嵌合體,直至達到種系嵌合。其優(yōu)點是:在將胚胎干細胞植入胚胎前,可以在體外選擇一個特殊的基因型,用外源DNA轉(zhuǎn)染以后,胚胎干細胞可以被克隆,繼而可以篩選含有整合外源DNA的細胞用于細胞融合,由此可以得到很多遺傳上相同的轉(zhuǎn)基因動物。缺點就是許多嵌合體轉(zhuǎn)基因動物生殖細胞內(nèi)不含有轉(zhuǎn)基因。目前,胚胎干細胞介導(dǎo)法在小鼠上應(yīng)用比較成熟,在大動物上應(yīng)用較晚。
3轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利與弊
科學(xué)家發(fā)明轉(zhuǎn)基因技術(shù)的初衷是想利用該技術(shù)造福人類,既可加快農(nóng)作物和家畜品種的改良速度,提高人類食物的品質(zhì),又可以生產(chǎn)珍貴的藥用蛋白,為患病者帶來福音。比如說,抗蟲的轉(zhuǎn)基因玉米不會被蟲咬,可以讓人們放心食用;將能產(chǎn)生人體疫苗的基因轉(zhuǎn)入植物食品,人們就可以在食用食物的同時增加自身對疾病的抵抗力。
但是,人類對自然界的干預(yù)是否會造成潛在的尚不可能預(yù)知的危險?大量轉(zhuǎn)基因生物會不會破壞生物多樣性?轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品會不會對人類健康造成危害?一些科學(xué)家們開始擔(dān)心對生物、植物生命進行的“任意修改”,創(chuàng)造出的新型遺傳基因和生物可能會危害到人類。它們可能會對生態(tài)環(huán)境造成新的污染,即所謂的遺傳基因污染,而這種新的污染源很難被消除。還有,轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物和以此為原材料制造的轉(zhuǎn)基因食品對人體的影響也尚未有定論。
目前,國內(nèi)外學(xué)者對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的負面影響也作了大量研究,出現(xiàn)了許多相關(guān)報道,如英國的權(quán)威科學(xué)雜志《自然》刊登了美國康奈爾大學(xué)副教授約翰·羅西的一篇論文,引起世界震驚。論文指出,研究人員在實驗室里把抗蟲害轉(zhuǎn)基因玉米“BT玉米”的花粉撒在苦苣菜葉上,然后讓蝴蝶幼蟲啃食這些菜葉。4天之后,有44%的幼蟲死亡,活著的幼蟲身體較小,并且沒有精神。而另一組幼蟲啃食撒有普通玉米花粉的菜葉,就沒有出現(xiàn)死亡率高或發(fā)育不良的現(xiàn)象。論文據(jù)此推斷,BT轉(zhuǎn)基因玉米花粉中含有毒素。另據(jù)報道,英國倫理和毒性中心的實驗報告說,與一般大豆相比,耐除草劑的轉(zhuǎn)基因大豆中,防癌的成分異黃酮減少了。與普通大豆相比,兩種轉(zhuǎn)基因大豆中的異黃酮成分減少了12%~14%,還有巴西堅果事件等。
面對國際上出現(xiàn)的種種關(guān)于轉(zhuǎn)基因作物的爭議,許多科學(xué)家、學(xué)術(shù)團體紛紛以各種形式發(fā)表對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的支持態(tài)度。由美國Tuskegee大學(xué)Prakash教授2000年1月起草的題為“科學(xué)家支持農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的聲明”,已征集到世界上3000多位科學(xué)家的簽名,其中包括DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)者、諾貝爾獎得主JamesWatson,綠色革命的創(chuàng)始人、諾貝爾獎得主NormanBorlaug,世界糧食獎獲得者、國際水稻研究所首席育種家GurdevKhush。該聲明稱,“對植物負責(zé)任的遺傳修飾既不新也不危險。如抗病蟲等諸多性狀已通過有性雜交和細胞培養(yǎng)的方法經(jīng)常性地引入作物中。與傳統(tǒng)的方法相比較,通過重組DNA技術(shù)引入新的或不同的基因并不一定會有新的或更大的風(fēng)險,且商品化的產(chǎn)品的安全性則由于目前的安全管理規(guī)則而得到了更進一步的保障。遺傳新技術(shù)為作物改進提供了更大的靈活性和精確性?!?/p>
因此,筆者認為和現(xiàn)代任何一項工業(yè)技術(shù)一樣,轉(zhuǎn)基因技術(shù)也具有兩面性,有長亦有短。在發(fā)展轉(zhuǎn)基因技術(shù)等生物技術(shù)時,應(yīng)該揚長避短、趨利避害、規(guī)范管理,使轉(zhuǎn)基因技術(shù)能夠健康發(fā)展。
4轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展展望
當(dāng)前條件下,轉(zhuǎn)基因技術(shù)還存在許多不足,還處于不斷的發(fā)展與完善之中,表現(xiàn)在:轉(zhuǎn)基因表達水平低,許多轉(zhuǎn)基因的表達強烈地位受著其宿主染色體上整合位點的影響,往往出現(xiàn)異位表達和個體發(fā)育不適宜階段表達,影響轉(zhuǎn)基因表達能力或基因表達的組織特異性,從而使大部分轉(zhuǎn)基因表達水平極低,極少部分基因表達水平過高;難以控制轉(zhuǎn)基因在宿主基因組中的行為,轉(zhuǎn)基因隨機整合于動物的基因組中,可能會引起宿生細胞染色體的插入突變,還會造成插入位點的基因片段丟失,插入位點周圍序列的倍增及基因的轉(zhuǎn)移,也可能激活正常狀態(tài)下處于關(guān)閉狀態(tài)的基因;不了解哪些基因控制多數(shù)生理過程,不了解基因表達的發(fā)育控制和組織特異性控制的機制;制作轉(zhuǎn)基因動物的效率低,這是目前幾乎所有從事轉(zhuǎn)基因動物研究的實驗室都面臨的問題,也是制約著這項技術(shù)廣泛應(yīng)用的關(guān)鍵;對傳統(tǒng)倫理是一種挑戰(zhàn),對人類的生存有一定的負面作用等。但筆者相信只要通過科學(xué)家的進一步研究和各國對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的規(guī)范管理,保證轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究和開發(fā)的健康而有序,制定相關(guān)的法律、法規(guī),健全轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的管理,如對轉(zhuǎn)基因作物進行監(jiān)管,對轉(zhuǎn)基因食品進行標(biāo)識等,應(yīng)該更深入的了解轉(zhuǎn)基因技術(shù)其中的奧秘,只有更了解它才能利用好它,讓我們的生活更加美好和諧,使公眾對轉(zhuǎn)基因技術(shù)有一個較為科學(xué)的認識,主動地接受轉(zhuǎn)基因食品,使轉(zhuǎn)基因技術(shù)貼近民眾,造福于人類。
參考文獻
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