【摘要】本研究旨在探究mPEG修飾的紅細胞Rh抗原的穩(wěn)定性。利用紅細胞膜蛋白SDS-PAGE電泳技術(shù)分析mPEG修飾后紅細胞膜蛋白與mPEG結(jié)合情況，用紅細胞血影凝集實驗及4℃CPD保養(yǎng)液保存的修飾紅細胞與匹配血液體外混血實驗，觀察mPEG修飾后紅細胞Rh抗原被遮蔽的穩(wěn)定性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：不同保存時間的mPEG修飾的紅細胞在模擬輸血（即混血前后）的血型保持不變，同時mPEG修飾的紅細胞在保存過程中游離血紅蛋白水平正常，并且混血后經(jīng)37℃孵育的mPEG修飾的紅細胞游離血紅蛋白水平低于不混合的修飾的紅細胞。比較分析PEG特異的碘染和考馬斯亮藍染的顯色圖譜發(fā)現(xiàn)，特殊的碘染顯示出mPEG與紅細胞膜蛋白結(jié)合的條帶，mPEG-SPA與紅細胞膜蛋白結(jié)合后導(dǎo)致蛋白分子遷移速度發(fā)生改變。mPEG修飾的紅細胞血影凝集實驗證實，修飾紅細胞在質(zhì)膜裂損后mPEG仍有效地遮蔽抗原。結(jié)論：mPEG-SPA不論在紅細胞膜蛋白被單獨提取后，還是膜破損后以及存活狀態(tài)下，均能與紅細胞膜蛋白穩(wěn)固結(jié)合。

【關(guān)鍵詞】mPEG修飾紅細胞；Rh抗原；紅細胞

RhAntigenStabilityofmPEGModifiedRedBloodCells

AbstractTheobjectiveofstudywastoinvestigatetheRhantigenstabilityofmPEG-modifiedRBC.RBCmembraneproteinSDS-PAGEtechnologywasusedtoanalyzethecombinationofthemPEGmodifiedRBCmembraneproteinwithmPEGmolecules;theRBCghostcoagulationtestand4℃CPD-preservedmodifiedRBCmixedwithmatchedbloodwereusedtoobservethestabilityofRBCRhantigencamouflagedbymPEG.TheresultsshowedthatthebloodgroupsofstoredmPEG-modifiedRBCwerekeptconsistencybeforeoraftersimulatingtransfusion,i.e.mixtureofmodifiedRBCwithmatchedbloods,whiletheplasmahemoglobinaftersimulatingtransfusionwasnotonlywithinthenormalrangeduringthestorage,butalsolessthanthatbeforesimulatingtransfusionevenafterincubationat37℃.TheelectrophoresispatternstainedwithiodineandCoomassiebluedisplayedthebandsofmPEGcombinedwithRBCmemberaneproteinandtheslowmobilityofmembraneprotein.ThehemagglutinationofPEGylationRBCghostsdidnottakeplaceandmPEGstillcoveredtheantigen.Inconclusion,mPEG-SPAcanbindtheerythrocytewithitsextractedmembraneproteininbothghostsandlivingerythrocytes.

KeywordsmPEGmodifiedredbloodcell;Rhantigen;redbloodcell

mPEG-SPA可以與蛋白質(zhì)和多肽中的賴氨酸（K）、精氨酸(R)的胺基、組氨酸(H)的咪唑基以及酪氨酸(Y)的羥基發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，形成共價結(jié)合鍵，從而結(jié)合到蛋白質(zhì)多肽上［1］，達到遮蔽抗原的作用。mPEG與紅細胞膜Rh抗原結(jié)合后是否穩(wěn)定，進入人體后是否會脫落，這些問題關(guān)系到修飾后紅細胞進入人體后的安全性。為此，我們采用mPEG修飾的紅細胞膜蛋白SDS-PAGE電泳、紅細胞血影凝集實驗以及用4℃CPD保養(yǎng)液保存的修飾紅細胞與匹配血液進行的體外混血實驗，對mPEG修飾后紅細胞Rh抗原被遮蔽的穩(wěn)定性進行了初步的研究。

論文關(guān)鍵詞：前S1；抗原檢測；體會

論文摘要：前S1抗原（Pre-S1Ag）檢測是對乙肝“兩對半”尤其是e抗原和HBV-DNA測定的重要補充和加強。前S1抗原酶免測定試劑盒經(jīng)過在北京、四川、浙江、河南、深圳、海南等近百家醫(yī)院與乙肝“兩對半”檢測聯(lián)合應(yīng)用后正式推向臨床，充分顯示了該試劑在病毒性乙型肝炎的臨床診斷，指導(dǎo)治療等方面的重要價值。筆者就前S1抗原檢測談?wù)勛约旱捏w會。

S、前S2和前S1是乙型肝炎病毒（HBV）的三種成分，含有前S1的蛋白主要存在于Dane顆粒和管型顆料上，前S1蛋白在病毒感染、裝配、復(fù)制和刺激機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)以及在病毒侵入肝細胞等方面起著十分重要的作用。

1基因結(jié)構(gòu)

乙肝病毒為嗜肝DNA病毒，約3200個氨基酸，由一個不完全雙鏈DNA組成。長鏈L含4個開放讀碼框架，為病毒蛋白的編碼區(qū)：S、C、P、X；短鏈S相當于長鏈的50%~100%，其不固定端可被內(nèi)原性DNA多聚酶延長，使病毒成為完整的雙鏈。HBV基因組編碼HBV抗原，所有四個功能性讀碼框架位于DNA負鏈，P基因編碼DNA聚合酶，C基因編碼HbcAg，S基因編碼S抗原，前S1抗原和前S2抗原，X基因編碼X產(chǎn)物。編碼不同形式的表面抗原（HBsAg）的HBV基因區(qū)域由大蛋白（LHBs），中蛋白（MHBs）和小蛋白（SHBs）組成，在第一和第二個起始密碼子之間的序列稱為Pres1，在第二和第三個之間為Pres2，從第三個密碼子到終點密碼子的序列為S。

2臨床意義和用途

摘要目的：用單克隆抗體鑒定白細胞共同抗原并對其性質(zhì)進行初步分析。方法：用B細胞株3D5免疫Balb/c小鼠得到單抗5H12，借助間接免疫熒光及流式細胞儀分析，檢測5H12抗原在多種白細胞表面的表達情況，并從白細胞膜中提取5H12抗原，通過增殖試驗、聚丙烯酰胺凝膠電泳及免疫印跡對其特性進行初步分析。結(jié)果：5H12抗原表達于多種白細胞表面，包括休止T細胞、休止B細胞、單核細胞、中性粒細胞、體外PHA激活的T細胞、體外anti-μ激活的B細胞、也表達在T細胞株(Jurkat、Peer)、B細胞株(3D5、Daudi、CESS、BJAB)、單核細胞株U937和髓細胞株K652表面。增殖試驗表明，該抗原與相應(yīng)單抗結(jié)合后導(dǎo)致B細胞活化抑制。對抗原的初步分析顯示：5H12是一種單鏈蛋白質(zhì)分子，分子量為22kD。結(jié)論：5H12是一種單鏈膜蛋白分子，屬于白細胞共同抗原，與B細胞活化有關(guān)。

關(guān)鍵詞白細胞共同抗原5H12分子量

Identificationofleukocytecommonantigen(LCA)5H12anddiscoveryofitseffectonBcellactivation

WANGYun-Ping,ZHANGShu-Zhen,ZHULi-Ping.

DepartmentofImmunology,BinzhouMedicalCollege,Binzhou256603

AbstractObjective:Toidentifyleukocytecommonantigen(LCA)withmonoclonalantibody(McAb)andanalyzetheLCA.Methods:ImmunizedBalb/cmicewithBcellline3D5andobtainedMcAb5H12，thendetectedtheexpressionof5H12antigenonvariouskindsofleukocytesandwhitecelllinesbyindirectimmunofluorescenceandflowcytometricanalysisandfinallyisolatedandpurified5H12antigenfromcellmembraneandanalyzedthe5H12byproliferationtest,SDS-polyacrylamidegelelectrophoresis(SDS-PAGE)andWestern-blotting.Results:5H12wasexpressedonapanelofhumanleukocytesandwhitecelllinesincludingrestingTcells,restingBcells,monocytes,neutrophils,PHA-activatedTcells,anti-μ-activatedBcells,Tcelllines(Jurkat,Peer),Bcelllines(3D5,Daudi,CESS,BJAB),binationof5H12antigenwith5H12McAbcouldinduceinhibitionofBcellactivationinadose-dependentmannerandthissuggestedthat5H12mightplayaroleintheprocessthatledtoBcellactivationandproliferation.SDS-PAGEandWestern-blottinganalysisindicatedthat5H12isa22kDone-peptide-chainprotein.Conclusion:5H12isaone-peptide-chainmembraneproteinmolecule,itisaLCAandrelatedtocellactivation.

關(guān)鍵詞：抗體

天皰瘡是累及皮膚黏膜的一種自身免疫性大皰性疾病。目前已證實天皰瘡是以患者體內(nèi)出現(xiàn)針對自身表皮角質(zhì)形成細胞上的橋粒芯糖蛋白（dcsnoglein,Dsg)的特異性抗體IgG，能與角質(zhì)形成細胞結(jié)合產(chǎn)生棘層松解，導(dǎo)致臨床上所見的松弛性水皰和大皰，其中Dsg1、Dsg3及其抗體在天皰瘡中發(fā)揮極其重要的作用。本文就抗原抗體及其臨床意義作一綜述。

1抗原抗體

1.1抗原現(xiàn)已明確天皰瘡抗原Dsg屬于橋粒的跨膜成分,屬粘附分子中的鈣粘素超家族的成員,其基因位于18q12.1上。Dsg分為Dsg1、Dsg2、Dsg3三類，其中Dsg2表達于所有的橋粒組織中，Dsg1、Dsg3主要限于復(fù)層鱗狀上皮。Dsg1分子量約160KD，主要分布于表皮上層的角質(zhì)細胞膜上，以顆粒層和顆粒下層優(yōu)勢表達［1］，為落葉性天皰瘡（PF）的靶抗原；Dsg3的分子量約為130KD，主要分布于表皮基底層，在基底層上層的角質(zhì)形成細胞表面，是尋常性天皰瘡（PV）的靶抗原。楊春俊等［2］在天皰瘡抗原的定位研究中，用金標記包埋后采用免疫熒光技術(shù)，發(fā)現(xiàn)PF和PV的靶抗原在角質(zhì)形成細胞間的部位相同，均位于橋粒復(fù)合體上。Dsg1及Dsg3分子同其他鈣粘素分子一樣具有5個串聯(lián)重復(fù)、大小大致相等的胞外結(jié)構(gòu)域（extracellulardomain,EC)，其中ECⅠ對應(yīng)胞外氨基端殘基，EC5位于羥基端。Dsg1及Dsg3的不同主要在于Dsg1的1～4胞外結(jié)構(gòu)域具有同源性，Dsg3的5個胞外結(jié)構(gòu)域均具有同源性。

天皰瘡抗原的5個胞外結(jié)構(gòu)域中，EC0、EC2、EC4之間具有相對較大的同源性，能被天皰瘡患者的血漿特異性識別，因此，這些表位被稱為“免疫優(yōu)勢表位”或“致病性表位”，特異性的識別該表位的抗體被稱為“致病性抗體”，其中EC1-2及EC3-4具有抗原特異性，與天皰瘡抗體具有高度的親和力，從而為天皰瘡的血清學(xué)診斷與鑒別提供了新的途徑［3］。

1.2抗體天皰瘡抗體（PAb)是天皰瘡發(fā)病的關(guān)鍵因素。1964年Beumer等證實在天皰瘡病人的血清中存在抗鱗狀上皮的細胞間抗體，并且發(fā)現(xiàn)在天皰瘡皮損的邊緣有免疫球蛋白和補體沉積。最近，Amagai［4］用ELISA方法，通過重組Dsg1、Dsg3，發(fā)現(xiàn)天皰瘡的臨床表現(xiàn)是由患者體內(nèi)抗橋粒芯蛋白自身抗體的類型所決定。且國內(nèi)外多數(shù)研究認為尋常性天皰瘡中天皰瘡抗體IgG4是其發(fā)病中的重要致病性抗體亞類。國內(nèi)李逾等［5］為研究天皰瘡抗體（PAb）各亞類在致病中的作用，在培養(yǎng)的組織中加入純化的天皰瘡抗體IgG1～IgG4，免疫熒光檢查發(fā)現(xiàn)IgG4的熒光最強，其次為IgG3、IgG1、IgG2，說明IgG4與抗原有較強的親和力。而當各亞型濃度相同時，致培養(yǎng)表皮細胞棘層松解程度相同。另外，在培養(yǎng)的表皮細胞中加入天皰瘡抗體繼續(xù)培養(yǎng)24h，細胞的整體外觀無明顯變化，48～72h，細胞間隙漸增寬，細胞出現(xiàn)松解和小水皰。由此奠定了天皰瘡抗體在天皰瘡發(fā)病中的重要地位。

摘要：目的研究人類白細胞抗原(HLA)-DR3、DR7、DR13、DR53等位基因與乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus，HBV)宮內(nèi)感染的關(guān)系，探討HBV宮內(nèi)感染的遺傳易感性，確定HBV宮內(nèi)感染的易感基因和保護基因。方法采用聚合酶鏈反應(yīng)/序列特異性引物(PCR-SSP)技術(shù)檢測HBsAg陽性孕婦及其新生兒各187例外周靜脈血血塊中HLA-DR3、DR7、DRl3、DR53等位基因型分布及頻率。結(jié)果(1)宮內(nèi)感染組孕婦HLA-DR3基因頻率為2414％(7／29)，顯著高于非宮內(nèi)感染組孕婦的633％(10／158)(P=0007)。其余各表型比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>005)。(2)宮內(nèi)感染組新生兒HLA-DR3基因頻率為1724％(5／29)，顯著高于非宮內(nèi)感染組新生兒的506％(8／158)(P=0033)。其余各表型比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>005)。(3)母嬰HLA-DR3同陽性在宮內(nèi)感染組與宮內(nèi)未感染組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0049)；母嬰HLA-DR7、DR13、DR53同陽性在宮內(nèi)感染組與宮內(nèi)未感染組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>005)。結(jié)論HBsAg陽性孕婦及其胎兒同時或任一攜帶HLA-DR3，易導(dǎo)致HBV宮內(nèi)感染；HLA-DR3是HBV宮內(nèi)感染的易感基因。

【關(guān)鍵詞】乙型肝炎病毒；宮內(nèi)感染；人類白細胞抗原DR等位基因(HLA-DR)

肝炎是一種嚴重危害人類健康的世界性傳染病，我國是乙肝高發(fā)區(qū)，乙肝病毒的母嬰傳播不僅造成人群中眾多的HBsAg攜帶者，而且是引起成人慢性肝炎、肝硬化以及肝癌的重要因素。迄今，多數(shù)學(xué)者認為，人類白細胞抗原DR等位基因(HLA-DR)與乙型肝炎病毒(HBV)感染密切相關(guān)，而HLA-DR等位基因與HBV宮內(nèi)感染的關(guān)系爭議較多。本文通過研究HLA-DR3、DR7、DR13、DR53與HBV宮內(nèi)感染的關(guān)系，探討HBV宮內(nèi)感染的遺傳易感性，為防制HBV宮內(nèi)感染提供理論依據(jù)。

1對象與方法

11對象以2003年6月～2004年11月太原市省各市級醫(yī)院篩檢，并在太原市傳染病院婦產(chǎn)科進行產(chǎn)前檢查及分娩的HBsAg陽性孕婦及其新生兒各187例作為研究對象。并根據(jù)新生兒有無宮內(nèi)感染，分為宮內(nèi)感染組(29例)和宮內(nèi)未感染組(158例)，2組在年齡分布、文化程度、職業(yè)構(gòu)成等均衡可比。

12方法

【關(guān)鍵詞】前列腺腫瘤；抗原,CD3；抗體親和力；四聚體

BiologicalactivityoftetramerofbispecificsinglechainantibodyagainsthumanprostatespecificantigenandCD3molecule

【Abstract】AIM:Tostudythebiologicalactivityoftetramerofbispecificsinglechainantibodyagainsthumanprostatespecificantigen(PSA)andCD3molecule.METHODS:Flowcytometry(FCM)wasusedtodetectthebindingactivityofbispecificsinglechainantibodytoCD3positivecelllineJurkatandprostatecarcinomacelllineLNCaP.Theefficacyoftheantibodiyinmediatingtumorcelllysisinvitrowasdeterminedbyusingthe51Crreleasetest.Forinvivoevaluationoftheantibodysactivity,anudemousemodelwasused.ThemicewereinoculatedwithLNCaPprostatecancercells.RESULTS:ItwasdemonstratedthatthetetramerofbispecificsinglechainantibodycouldbindtotheJurkatandLNCaPcellswithhighspecificity.Thepercentsofthecellsbondbytheantibodywere70.4%and81%,respectively.Invitro,withactivatedCTLsaseffectorcells,aspecificlysisofLNCaPcellsmediatedbytheantibodywasconfirmedby51Crreleaseassay.ThespecificlysisrateofLNCaPcellswaspositivelycorrelatedtotBsAbconcentrationoreffector/targetcellratio.Thehighestspecificlysisrateswere(80.3±5.2)%and(78.6±5.5)%infixedantibodyconcentrationgroupandfixedeffector/targetcellratiogroup,respectively.Invivo,theantibodycouldsuppressthetumorgrowthinnudemicesignificantlyascomparedtothegrouptreatedonlywithCTLsandtheuntreatedcontrolgroup(P<0.0001).CONCLUSION:ThetetramerofbispecificsinglechainantibodyagainsthumanprostatespecificantigenandCD3moleculehasagoodbiologicalactivityinbindingantigens,mediatinglysisofLNCaPcellsandinhibitingtumorgrowth.

【Keywords】prostaticneoplasms;antigens,CD3;antibodyaffinity;tetramer

【摘要】目的：研究抗前列腺特異抗原(PSA)/抗CD3雙特異性單鏈抗體四聚體的生物活性.方法：利用流式細胞儀和51Cr釋放試驗評價雙特異性單鏈抗體四聚體的抗原親和活性和體外介導(dǎo)殺傷靶細胞的效果.利用裸鼠前列腺癌模型分析其在體內(nèi)介導(dǎo)細胞毒T淋巴細胞對腫瘤細胞殺傷的能力.結(jié)果：抗PSA/抗CD3雙特異性單鏈抗體四聚體可以特異性結(jié)合表達前列腺癌細胞和CD3陽性的淋巴瘤細胞，陽性結(jié)合率分別為70.4%和81%.在體外，有細胞毒T淋巴細胞存在時該四聚體可引起前列腺癌細胞的裂解，在抗體濃度固定組和效應(yīng)細胞/靶細胞比例固定組，靶細胞裂解率分別隨著效應(yīng)細胞/靶細胞比例和抗體濃度的增加而增加，最高裂解率分別可以達到(80.3±5.2)%和(78.6±5.5)%.與對照組比較，接種前列腺癌細胞的裸鼠在體內(nèi)注射激活的細胞毒T淋巴細胞的同時接受該四聚體的治療后，腫瘤生長明顯受到抑制(P<0.0001).結(jié)論：抗PSA/抗CD3雙特異性單鏈抗體四聚體具有良好的生物學(xué)活性，具有體外殺傷腫瘤細胞和體內(nèi)抑制腫瘤生長的作用.

【關(guān)鍵詞】前列腺腫瘤；抗原，CD3；抗體親和力；四聚體

［摘要］目的：在外源抗原表位表達載體系統(tǒng)中構(gòu)建并表達乙型肝炎病毒(HBV)抗原表位，并對其診斷敏感性進行評價。方法：人工合成編碼HBV“a”抗原決定簇表位中24個氨基酸(S124147)的寡核苷酸序列，克隆入外源抗原表位表達載體系統(tǒng)FHVRNA2I3位點，構(gòu)建重組質(zhì)粒，在原核pET系統(tǒng)(BL21細胞)中表達。通過ELISA和Westernblot檢測表達產(chǎn)物的抗原性，并以表達產(chǎn)物為包被抗原,通過ELISA和Westernblot檢測58份乙肝患者血清抗HBs。結(jié)果：嵌和蛋白可與抗HBs特異性結(jié)合，其ELISA檢測抗HBs陽性率為77.5%，Westernblot的為68%，而對照試劑盒的為62%。結(jié)論：在外源抗原表位表達系統(tǒng)中表達的HBV重組抗原表位具有良好的抗原性，有診斷應(yīng)用價值。

［關(guān)鍵詞］HBV;抗原表位;抗原性;FHVRNA2載體系統(tǒng)

StudyonAntigenicityofHBVRecombinantEpitope

Abstract：ObjectiveConstructionandExpressionHBVrecombinantepitopeinaforeignepitopepresentingvector，andevalutionofdignosticsensitivityforantiHBswithHBVepitope.MethodsOligonucleotidsencodedtwentyfouraminoacids(aaS124147)whichiswithin"a"antigenicdeterninantweresynthesizedandinsertedintoaforeignepitopepresentingcarrierI3site(FHVRNA2cDNAI3).HBVepitopewasexpressedinaprokaryoticcellularsystem(BL21cell).TheexpressionproductwasanalyzedanditsantigenicitywasfurtherstudiedbyELISAandWsternblotmethodwithchimericproteinascoatingantigen.weusedchimericproteinascoatingantigentotestantiHBswithELISAandWsternblotin58seralsamples.ResultsThechimericproteinreactedwithantiHBsseralspecially.ThedetectionpositiveratioofantiHBsis77.5%and68%respectivelybyELISAandWsternblotwithchimericproteinascoatingantigen,thecontrol''''swas62%.ConclusionHBVepitopeexpressedinaforeignepitopepresentingcarrierpossessedgoodantigenicityanddiagnosticvalue.

Keywords：HBV；Epitope；Antigenicity；FHVRNA2carriersystem

乙型肝炎病毒(HBV)是乙型肝炎的病原體，并引起慢性肝炎和肝硬化，而且與肝癌的發(fā)生密切相關(guān)。迄今，對HBV感染最有力的預(yù)防和控制措施，仍是發(fā)展疫苗。FHVRNA2載體系統(tǒng)［1］是一個以昆蟲小RNA病毒flockhousevirus外殼蛋白為載體的新型抗原表位表達載體，此系統(tǒng)中表達的載體蛋白可自動組裝成病毒樣顆粒，使插入的外源抗原表位可以暴露在顆粒的表面，保持天然構(gòu)象和免疫學(xué)特性。本研究擬將HBVa抗原表位插入到FHV外殼蛋白上，并對其抗原性及診斷意義進行了研究。

1腫瘤特異性免疫機制及腫瘤的免疫逃逸機制腫瘤在機體內(nèi)能引發(fā)體液免疫應(yīng)答和細胞免疫應(yīng)答，而以后者為主.腫瘤抗原在細胞內(nèi)加工成肽段后與細胞表面的主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ(majorhistocompatibilitycomplex,MHCⅠ)類分子結(jié)合并呈遞給CD8+細胞毒性T淋巴細胞，或先從腫瘤細胞上脫落，再由抗原提呈細胞攝取、加工成肽段后與表面MHCⅡ類分子結(jié)合并呈遞給CD4+輔助性T淋巴細胞，進而誘發(fā)機體的抗腫瘤細胞免疫應(yīng)答.值得注意的是CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞的激活都需要MHC抗原肽復(fù)合物和免疫共刺激分子的協(xié)同刺激作用［1］，而共刺激分子的缺失正是腫瘤引發(fā)的機體外周免疫耐受的可能機制之一.腫瘤由于其極大的異質(zhì)性和遺傳不穩(wěn)定性，在機體環(huán)境長時間的免疫選擇壓力下，會啟動一系列的免疫逃避機制，對抗機體的抗腫瘤免疫反應(yīng).這些機制分別針對T細胞對腫瘤的識別階段和效應(yīng)階段，包括腫瘤抗原的丟失、MHCⅠ類分子表達下調(diào)、抗原加工缺陷、表達干擾細胞毒作用的蛋白酶及表達FasL等［2］.

2腫瘤疫苗的設(shè)計策略

2.1總體思路針對腫瘤抗原在機體內(nèi)免疫原性下降，造成特異性細胞免疫激活不足，外周免疫耐受的狀況，腫瘤疫苗設(shè)計策略的總體思路是應(yīng)用各種技術(shù)，增強免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原的識別能力，改善免疫微環(huán)境，引發(fā)有力的特異性抗腫瘤細胞免疫，阻止腫瘤進展，最終消除腫瘤.

2.2腫瘤細胞疫苗腫瘤細胞疫苗是將整個腫瘤細胞作為抗原導(dǎo)入患者體內(nèi)，誘導(dǎo)特異性的抗腫瘤免疫應(yīng)答.由于腫瘤細胞帶有腫瘤的全部抗原，無需考慮分離腫瘤特異性抗原（tumorspecificantigen,TSA），而且由于自體腫瘤細胞具有和正常組織相同的人類白細胞抗原，不會引發(fā)機體的免疫排斥反應(yīng)，因此被認為是理想的腫瘤疫苗方案.但是自體腫瘤組織來源十分有限，并且考慮到TSA的表達具有一定的組織特異性，因此這種方法的應(yīng)用受到了限制［3］.后來，人們開始使用人工培養(yǎng)的同種異體腫瘤細胞系進行腫瘤疫苗的研究.不同腫瘤細胞的混合能夠提供一系列的TSA，有利于增加腫瘤疫苗的免疫原性，減小其發(fā)生抗原丟失的幾率［2］.但是，單獨使用自體或異體的腫瘤細胞難以產(chǎn)生足夠強度的免疫應(yīng)答，免疫佐劑的使用極大地改善了這種情況.隨著基因工程的進展，人們開始對腫瘤細胞進行基因修飾，將編碼免疫共刺激分子如CD80，CD86的基因，導(dǎo)入腫瘤細胞中，為T細胞活化提供第二信號，有效地打破了腫瘤的外周免疫耐受.近年來，也有人將編碼一些細胞因子如IL2，IL12，粒巨噬細胞集落刺激因子（granulocytcmacrohagecolonystimulatihyfactor,GMCSF）等的基因?qū)肽[瘤細胞，期望通過細胞因子蛋白的表達，改善腫瘤組織局部免疫微環(huán)境，增強T細胞的抗腫瘤免疫效應(yīng)［4］.然而，近些年來臨床實驗表明，即使在實驗中能夠誘發(fā)滿意免疫反應(yīng)的腫瘤細胞疫苗，在轉(zhuǎn)化成臨床有效的治療性腫瘤疫苗時都遇到了困難.Fifis等［5］的研究發(fā)現(xiàn)，大鼠結(jié)腸癌細胞系經(jīng)體外培養(yǎng)后免疫同源小鼠，引發(fā)了免疫反應(yīng)和腫瘤保護效應(yīng).然而，當他們對荷瘤小鼠進行同樣處理時，卻大大促進了腫瘤的生長，提示腫瘤細胞能夠通過一系列機制抑制機體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，包括分泌免疫抑制因子IL10，腫瘤生長因子β阻止有效的免疫反應(yīng)；分泌血管內(nèi)皮細胞生長因子，GMCSF等因子活化具有免疫抑制作用的骨髓源性細胞；激活特異的調(diào)節(jié)性CD4+CD25+T細胞以下調(diào)細胞毒性T淋巴細胞的效應(yīng)等.

2.3腫瘤抗原疫苗腫瘤能夠引起機體特異性免疫反應(yīng)的現(xiàn)象引發(fā)了對腫瘤抗原的研究.腫瘤抗原包括多個層次：完整的蛋白質(zhì)分子、抗原肽及純化的DNA.關(guān)于腫瘤DNA疫苗，下文將另行討論.目前將腫瘤抗原分為TSA和腫瘤相關(guān)抗原（tumorassociated,TAA）.TSA是指只存在于腫瘤細胞，而TAA并非腫瘤細胞特有的抗原，只是在發(fā)生腫瘤時此類抗原的表達明顯上調(diào).Tabi等［2］認為，腫瘤抗原必須在全部或大多數(shù)患有相同腫瘤患者的大部分腫瘤細胞中呈普遍的高表達狀態(tài).他將腫瘤抗原分為5類：①突變抗原；②腫瘤細胞過度表達抗原；③癌睪抗原;④組織特異性分化抗原；⑤病毒抗原.

單獨應(yīng)用腫瘤抗原蛋白存在免疫原性差的問題，這是由于腫瘤細胞可通過抗原、HLA缺失等機制發(fā)生逃逸.劉宏利等［6］結(jié)合了肽疫苗和DNA疫苗各自的特點，以P815腫瘤細胞的CTL表位（P815A3543）為模型，合成該表位加多聚賴氨酸的顆粒性多肽，并制備含有編碼此表位和GMCSF基因的表達質(zhì)粒，制成了新型的顆粒性肽DNA復(fù)合疫苗，這種疫苗利于APC的攝取加工，可誘導(dǎo)有效的CTL應(yīng)答，從而預(yù)防小鼠致命性P815腫瘤細胞攻擊，并可部分根除腫瘤.

【論文關(guān)鍵詞】手術(shù)前；傳染性指標；檢測臨床意義

【論文摘要】目的探討患者手術(shù)前傳染性指標檢測的臨床意義。方法對我院1998年10月至2007年11月經(jīng)初步資料回顧與統(tǒng)計，對受血患者手術(shù)前作HBsAg、抗-HCV抗體、抗HIV抗體、梅毒螺旋體抗體4項傳染性指標的檢測共4692人次。結(jié)果其中男2964人次，女1728人次，年齡最大82歲，最小2歲，平均41歲，術(shù)前發(fā)現(xiàn)HBsAg陽性92人次，抗-HCV抗體陽性3人次，抗HIV抗體陽性4人次，梅毒螺旋體抗體陽性0人次。結(jié)論手術(shù)前傳染性指標檢測有效地防范和杜絕了輸血糾紛的發(fā)生，為醫(yī)療安全、醫(yī)護健康、患者早日康復(fù)做出重大的貢獻。

抗-HIV抗體檢測是采用雙抗原夾心兩步法檢測人血清或血漿樣本中的(HIV1/2)型抗體?？?HCV抗體的檢測所用包被抗原為合成多肽抗原和基因工程抗原(包括HCV病毒結(jié)構(gòu)區(qū)核心抗原和非結(jié)構(gòu)區(qū)抗原)。HBsAg采用夾擊心法原理檢測人血清原理檢測人血清或血漿中的乙肝表面抗原。梅毒螺旋體抗體的檢測一步雙抗原夾心法原理(ELISA)檢測人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。

根據(jù)衛(wèi)生部《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》相關(guān)規(guī)定的要求，結(jié)合當前醫(yī)療管理標準，我院自1998年10月至2007年11月對臨床手術(shù)科室明確提出，凡行手術(shù)患者，在手術(shù)前應(yīng)作乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)，人類免疫缺陷病毒抗體(抗-HIV抗體)，梅毒螺旋體抗體，丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV抗體)4項傳染性指標的檢測，而有關(guān)供血者更是在輸血前必須做以上4項指標檢測，目的是保證患者用血安全和醫(yī)務(wù)工作者的身體健康。

1、資料與方法

我院1998年10月至2007年11月經(jīng)初步資料回顧與統(tǒng)計，對受血患者手術(shù)前做HBsAg、抗-HCV抗體、抗HIV抗體、梅毒螺旋體抗體4項傳染性指標的檢測共4692人次，其中男2964人次，女1728人次，年齡最大82歲，最小2歲，平均41歲，手術(shù)前發(fā)現(xiàn)HBsAg陽性92人次，抗-HCV抗體陽性3人次，抗HIV抗體陽性4人次，梅毒螺旋體抗體陽性0人次。

近視眼是一種嚴重危害青少年視力的常見病、多發(fā)病，如何預(yù)防和治療近視、防止近視的進展是當今眼科學(xué)界的重大課題。在近視的發(fā)病機理方面，至今仍眾說紛紜，歸結(jié)起來不外遺傳和環(huán)境兩大因素［1］。盡管許多眼科學(xué)者在眼色素膜炎的免疫學(xué)和免疫病理學(xué)上做了大量的工作，但尚未有從免疫學(xué)角度分析近視的病因和發(fā)病機理的報道。而這種從免疫學(xué)觀點出發(fā)的病理學(xué)探究能夠促進對近視的治療新見解以及近視發(fā)病機理新概念的形成［2］。近視的免疫學(xué)探究也將從根本上為預(yù)防、控制和治療近視開辟一條廣闊的途徑。本文僅就近視的臨床免疫學(xué)探究進行綜述。

1近視和其相關(guān)抗原

1.1ABO抗原近年來，ABO抗原已被用于免疫遺傳性疾病的探究上，已知的可能和ABO抗原有關(guān)的眼病有原發(fā)性閉角型青光眼、近視性屈光不正、老年性白內(nèi)障及視網(wǎng)膜色素變性［3］。

有關(guān)近視的遺傳方式看法不一，主要觀點有多因子遺傳、隱性遺傳、常染色體隱性遺傳、單因子遺傳、常染色體顯性遺傳等。胡誕寧等［1］對近視眼患者家族的社會調(diào)查結(jié)果顯示，父母雙方均為高度近視者，子代100%為高度近視。而有的資料卻表明，雙親單純性近視或變性近視，子代不一定都出現(xiàn)近視。孫成甲［4］在臨床探究中發(fā)現(xiàn)，父母都有近視而其子女患近視的不足半數(shù)。還有人認為中低度近視的發(fā)病有肯定的家族傾向性，和遺傳密切相關(guān)［5］。另外，通常人眼各部分遺傳性不同，軸長、角膜曲率及晶狀體后曲率遺傳性大，而晶狀體厚度及前曲率和遺傳無關(guān)，Sorsby［4］認為決定近視眼遺傳的主要成分是軸長。

1.2HLA抗原HLA是比ABO血型系統(tǒng)更為復(fù)雜和重要的強抗原系統(tǒng)。HLA抗原稱人類組織相容性抗原，又稱人類白細胞抗原，是具有極高度遺傳性的多型性膜抗原［6］。HLA抗原根據(jù)其構(gòu)造、機能，分為Ⅰ類和Ⅱ類抗原。

目前已知有20多種眼病和HLA抗原有關(guān)［7］。1983年王蓉芳等人［8］發(fā)現(xiàn)HLA-B8陽性者易患高度近視，而HLA-B15陽性者不易患高度近視。Пучковская［9］發(fā)現(xiàn)，先天性近視和HLA-B7和HLA-B12是有聯(lián)系的，當近視患者同時有HLA-B7和HLA-B8抗原時，發(fā)生視網(wǎng)膜脫離的危險性升高。