血細胞分析儀范文
時間:2023-04-08 03:16:36
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篇1
在無償獻血工作全面開展、獻血隊伍日益壯大的今天,血液質(zhì)量與安全也成了刻不容緩的問題。血站實驗室的血細胞分析儀更多的被用于機采血小板前獻血者的血細胞計數(shù)以及采集的各血液成分的質(zhì)量監(jiān)測,因此也就成為血站實驗室保證血液產(chǎn)品質(zhì)量的關鍵設備之一。同一實驗室往往配置多臺血細胞分析儀,有的使用相同廠家不同型號,甚至是不同廠家不同型號,他們的檢測方法及原理不完全相同,性能之間存在差異,對同一標本的檢測結(jié)果存在著偏差就在所難免[1]。血站血細胞分析儀檢測結(jié)果的準確性和一致性是對獻血者獻血安全以及血液成分產(chǎn)品質(zhì)量的根本保障,為保證實驗室不同儀器間檢測結(jié)果的可比性和準確性,實驗室常用內(nèi)部比對實驗來對檢測結(jié)果進行質(zhì)量控制。現(xiàn)將對比結(jié)果報告如下:
1 資料與方法
1.1 儀器與試劑 日本希森美康Sysmex XS-500i及Sysmex XE-2100血細胞分析儀各一臺。均使用原廠原裝配套試劑、質(zhì)控品、校準品。
1.2 標本 重復性實驗用BIO-RAD全血質(zhì)控品;比對實驗用一次性EDTA-K2真空采血管采集健康獻血者新鮮血液2ml40份。
1.3 方法
1.3.1 儀器確定 Sysmex XE-2100血細胞分析儀參作為參比儀器;Sysmex XS-500i血細胞分析儀作為比對儀器。
1.3.2 重復性測定 嚴格按照Sysmex血細胞分析儀操作手冊中的質(zhì)量控制和校準對儀器進行操作,在儀器質(zhì)控滿意狀態(tài)下,取BIO-RAD全血質(zhì)控品同批號三瓶混合均勻,在兩臺儀器上分別連續(xù)檢測20次以進行重復性測定,計算它們各自的紅細胞(RBC),白細胞(WBC),血紅蛋白(HGB),紅細胞壓積(HCT)和血小板(PLT)5個參數(shù)的均值、SD和CV值。
1.3.3 一致性比對 每日收集新鮮健康獻血者血液標本8份(2ml/管),連續(xù)收集5d。在儀器質(zhì)控滿意狀態(tài)下,分別在每臺血細胞分析儀上按常規(guī)標本進行檢測,按標本號18的順序進行,然后再按81的相反順序連續(xù)測定,2~4h 內(nèi)完成,記錄各自的檢測結(jié)果。
1.4 統(tǒng)計 將結(jié)果應用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行處理。
1.5 判定規(guī)則 精密度:以CLIA'88規(guī)定的允許誤差的1/4作為判定規(guī)則:即CV:WBC≤3.75% 、RBC≤1.5% 、HGB≤1.75% 、HCT≤1.5% 、PLT≤6.25%。相對偏差:以CLIA'88規(guī)定的允許誤差的1/2作為判定標準: WBC≤7.5% 、RBC≤3.0% 、HGB≤3.5% 、HCT≤3.0% 、PLT≤12.5%[2]。
2 結(jié)果
2.1 2臺儀器重復性測定 見表1。
2.2 兩臺血細胞分析儀測定結(jié)果的相關性比較 見表2。
對比儀器Sysmex XS-500i測得的WBC、RBC、HGB、PLT、HCT5項檢測數(shù)據(jù)為X軸,參比儀器Sysmex XE-2100檢測數(shù)據(jù)為Y軸作回歸和相關性分析,求出他們的相關系數(shù)和回歸方程y=bx+a,r≥0.95為范圍合適,直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠。
3討論
本次試驗顯示,兩臺血細胞分析儀的5項指標的精密度均在CLIA88規(guī)定的1/4允許誤差的可接受范圍內(nèi),說明同一份標本在2臺儀器上測定重復性較好,精密度高。本次實驗的參比儀器選用Sysmex XE-2100血細胞分析儀,參加衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評成績一直為優(yōu)秀,其良好的性能保證了結(jié)果的溯源性,因此用其作為參比儀器。Sysmex XS-500i 血細胞分析儀作為試驗儀器進行比對。比對5日共40份新鮮全血標本,WBC、RBC、HBG、HCT、PLT比對結(jié)果均呈顯著性正相關,相關系數(shù)( r) 大于0.975。通過回歸方程計算的偏差在1 /2CLIA'88 能力比對檢驗質(zhì)量的要求以內(nèi),檢測結(jié)果一致性高、差異小,檢測結(jié)果可接受。
需要注意的是對血細胞分析儀比對實驗的分析評價應包括在整個比對實驗期間對室內(nèi)質(zhì)控的日常監(jiān)測,以及每日的保養(yǎng)維護,保證在儀器最滿意的可控狀態(tài)下來對每一項監(jiān)測指標進行比對分析。一旦出現(xiàn)某一項指標異常,應立即查找原因,看是否是由于偶然誤差所致。否則就必須對儀器進行校準甚至檢修后方可繼續(xù)進行實驗比對。實驗室做好室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評很大程度上可以避免偶然誤差和系統(tǒng)誤差,但卻難以滿足不同儀器之間的結(jié)果比對[3]。所以按CAP 認證標準中要求,試驗室每年需要進行至少2 次儀器比對。比對實驗是實現(xiàn)準確度溯源和檢驗結(jié)果可比性的重要途徑[4]。它是對血細胞分析儀除室內(nèi)質(zhì)控及室間質(zhì)評之外的一個重要質(zhì)量監(jiān)測方法。本站規(guī)定每年的6月、12月的第1w進行比對實驗。在期間若出現(xiàn)影響檢測結(jié)果的維修、保養(yǎng)后,應及時進行比對實驗,滿意后方可繼續(xù)使用。
本次實驗的目的是評價實驗室不同血細胞分析儀檢測結(jié)果的可比性和臨床接受性。近年來,血細胞分析儀的校準、質(zhì)量控制以及不同儀器測定結(jié)果間的比對是研究的熱點,三者相輔相成,互為因果[5]。要保證實驗結(jié)果的一致性,實驗室必須要建立完善的質(zhì)量體系,制定盡可能規(guī)范的標準操作規(guī)程作為指導性文件,隨著對血細胞分析儀使用的規(guī)范化、制度化,會對不同儀器的分析比對逐步完善,確保檢測結(jié)果的一致性、可靠性和可信性,使血站實驗室的質(zhì)量水平不斷提高,為提供合格安全的血液作保障。
參考文獻:
[1]朱濤,陳華英. 實驗室檢測結(jié)果內(nèi)部比對滿意度評價方法初探[J]. 現(xiàn)代測量與實驗室管理.2008,16( 1) : 38.
[2] 馮仁豐. 臨床檢驗質(zhì)量管理技術(shù)基礎[M](第2 版).上海:上??茖W技術(shù)文獻出版社.2007: 185-203.
[3] 沈觀樵,金海勇. 不同血細胞分析儀比對分析及偏差評估[J].現(xiàn)代實用醫(yī)學2014 .(11):1448 - 1449.
篇2
【關鍵詞】 血細胞
【摘要】 目的 探討用新鮮血代替校準物對血液細胞分析儀進行校準。 方法 以Abbott CD-3200為校準參考儀器,用新鮮血液作為校準品,校準本室Abbott CD-1700(1)、CD-1700(2)和Act.diff(Beckman Coulter)三臺血細胞分析儀。 結(jié)果 三臺血細胞分析儀與校準參考儀器的各檢測指標相關系數(shù)(r)均>0.90;新鮮全血的質(zhì)控偏差結(jié)果顯示:RDW的最大CV值為2.8%,PLT的最大CV值為4.9%,MPV的最大CV值為14.6%,余各項指標的CV值均<2.0%。 結(jié)論 新鮮血可作為校準物;每天對同一實驗室不同血細胞分析儀結(jié)果進行校準,是保證分析結(jié)果的準確度和精密度的有效手段和措施。
關鍵詞 血液 血細胞計數(shù) 質(zhì)量控制
在血液細胞分析儀質(zhì)量控制過程中,儀器的校正是必不可少的,新儀器安裝或每次維修后都應進行儀器的校正。儀器校正液是權(quán)威部門認可的標準物質(zhì),但只能用于校正同型號的儀器,不能用于其他品牌儀器的校正。血細胞分析的檢測結(jié)果只有直接或間接地溯源至參考方法,才能保證結(jié)果的準確性和不同實驗室檢測結(jié)果的可比性 [1] ,最好的校正液是經(jīng)ICSH推薦參考方法定值的新鮮人體血液。(1)氰化高鐵血紅蛋白法測定血紅蛋白(HGB);(2)微量紅細胞壓積法測定紅細胞比容(HCT);(3)微量計數(shù)板手工計數(shù)RBC和WBC;(4)相差顯微鏡計數(shù)血小板。所有器材都要經(jīng)過嚴格校正;該校正液能適合于各種型號的儀器校準之用。但由于血細胞分析檢測系統(tǒng)配套校準物的價格高、進口入關手續(xù)的辦理較難、效期短且難以及時獲得等特點,使校準物的使用難以得到推廣。此外,一些血細胞分析檢測系統(tǒng)無配套的校準物,致使用戶無法進行校準。在缺乏理想的多通道血細胞分析儀的質(zhì)量控制系統(tǒng)的情況下,使用了不同的質(zhì)量控制品,包括新鮮全血、穩(wěn)定血液樣品、非生物代用品等。血細胞分析是臨床最常用的實驗室檢測指標,其結(jié)果的準確性直接影響對患者的診斷和治療。為了對本室不同的血細胞分析儀測定結(jié)果的準確性及可靠性進行分析,我們用物理和化學成分與患者相同EDTA-K 2 抗凝的新鮮全血,代替校準物對血液細胞分析儀進行校準,探討新的校準品。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 儀器與試劑 Abbott CD-3200血細胞分析儀及進口配套試劑;Abbott CD-1700血細胞分析儀及進口配套試劑;Act.diff(Beckman Coulter)血細胞分析儀及進口配套試劑。
1.1.2 校準物 Abbott CD-3200原裝進口配套CELL- DYN系列質(zhì)控品及校準物,批號R0114A。
1.1.3 標本采集 臨床患者新鮮靜脈抗凝血2ml(EDTA-K 2 抗凝管)。
1.2 方法 用Abbott CD-3200原裝進口配套CELL-DYN系列質(zhì)控品及校準品對該儀器進行本底測試和高、中、低值質(zhì)控重復測定5次;校準完成后,把用作標準的新鮮血連續(xù)測定10次,計算均值,并把此均值作為新鮮血的參考值;用新鮮血代替校準品對本室Abbott CD-1700(1)、CD-1700(2)和Act.diff(Beckman Coulter)三臺血細胞分析儀進行校準;然后隨機選取一個正常新鮮血抗凝全標本對四臺血細胞分析儀進行質(zhì)控,與患者標本一起測定;以Abbott CD-3200血細胞分析儀測定的5份新鮮血標本為參考,分別在其他三臺分析儀上測定5次,取其均值,計算它們與被校準儀的偏差。
1.3 統(tǒng)計學方法 采用電腦程序化的樣本配對t檢驗和線性回歸統(tǒng)計學方法進行分析。
2 結(jié)果
用新鮮血代替校準品對本室Abbott CD-1700(1)、CD-1700(2)和Act.diff(Beckman Coulter)三臺血細胞分析儀進行校準;隨機選取一個正常新鮮血抗凝全標本對四臺血細胞分析儀與患者標本一起測定,三臺血細胞分析儀與Ab-bott CD-3200各參數(shù)之間的相關系數(shù)r>0.9。特別是WBC、RBC、HGB、HCT這四項參數(shù)的符合性最好,見表1。 以Abbott CD-3200血細胞分析儀測定的5份新鮮血標本為參考分別在其他三臺分析儀上測定5次,計算它們與被校準儀器的偏差,結(jié)果表明:用配套校準品校準過Ab-bott CD-3200血液細胞分析儀與用新鮮血校準過的三臺儀器測定5份新鮮血的結(jié)果非常接近,只有PLT和MPV的偏差比較大,但仍在可接受范圍內(nèi),見表2。
表1 被校準三臺血細胞分析儀相關性分析 (略)
表2 三臺血細胞新鮮血測定結(jié)果與CD-3200測定值的偏差 (略)
3 討論
血細胞分析儀由于計數(shù)結(jié)果準確,精密度高,操作簡便、快速,因而發(fā)展迅速,已逐漸取代傳統(tǒng)的手工法,并成為臨床實驗室的主要檢測手段。由于生產(chǎn)血細胞儀的廠家較多,各自使用的測定原理和方法不盡相同,導致其測定結(jié)果及參考范圍有所差異。另一方面,在國內(nèi)的大中型醫(yī)院,同一實驗室使用不同廠家和型號的血細胞計數(shù)儀已成為較普遍現(xiàn)象,致使在同一實驗室內(nèi)同一標本用不同的儀器分析,出現(xiàn)測定值的差異,給評估和解釋結(jié)果帶來一定的困難,給疾病的診斷、治療及預后帶來誤解和不良的影響 [2] 。在血液細胞分析儀質(zhì)量控制過程中,儀器的校準是不可少的。所謂自動血液細胞分析儀實際上就是一臺比較器,將它實測數(shù)據(jù)與校準數(shù)據(jù)進行比較,從而得出血標本的測定結(jié)果。由此可見,標準物在儀器測定結(jié)果是否準確的問題上有決定性的作用 [3] 。為保證血液細胞分析儀準確性,最好使用儀器生產(chǎn)廠家推薦的配套校準物對儀器進行校準,但由于校準物價格昂貴且有效期特別短,可只購買一臺性能較好儀器的配套校準物 [4] 。 血細胞分析儀是精密測量儀器,對周圍環(huán)境有較高的要求。溫度、相對濕度、周圍電磁場及室內(nèi)空氣中塵埃,都會干擾儀器進行血細胞計數(shù)時的電脈沖分析,特別是對血小板計數(shù)的干擾更為突出,是導致PLT、MPV偏差較大的原 因之一;我室由于情況特殊,除Abbott CD-3200血細胞分析儀在周圍環(huán)境較好的住院部專門儀器房外,余三臺血細胞分析儀均集中在條件較差的門診。而且在EDTA?K 2 抗凝血中,血小板體積不穩(wěn)定,隨時間的延長而增大,這也是導致PLT、MPV偏差較大的主要原因。本研究結(jié)果表明:用新鮮血校準的三臺血細胞分析儀與Abbott CD-3200各參數(shù)之間的相關系數(shù)r>0.90,特別是WBC、RBC、HGB、HCT這四項參數(shù)的符合性最好;說明用新鮮血校準血液細胞分析儀可取得滿意結(jié)果。每天對同一實驗室不同血細胞分析儀結(jié)果進行校準,是保證分析結(jié)果準確度和精密度的有效手段和措施。用配套校準物校準一臺性能最佳的血細胞分析儀,再用新鮮血在這臺儀器上得出參考值后去校準其他儀器,既可節(jié)省經(jīng)費,又能保證實驗結(jié)果的可靠性。
參考文獻
1 彭明婷,申子瑜.血細胞分析溯源體系的建立及有關問題的探討.中華檢驗醫(yī)學雜志,2004,27(3):132-133.
2 彭明婷,谷小林.不同方法校準血液分析儀結(jié)果比較.中華檢驗 醫(yī)學雜志,2000,23(1):35-37.
篇3
關鍵詞:檢驗科 血細胞分析儀 管理對策
在現(xiàn)代化的醫(yī)院中,醫(yī)療儀器設備不僅是開展醫(yī)療、教學、科研的必備條件,而且是提高醫(yī)療質(zhì)量的物質(zhì)基礎和先決條件,隨著醫(yī)學科學的飛速發(fā)展,現(xiàn)代化的檢測技術(shù)大量運用于醫(yī)學檢驗工作中,血細胞分析儀最近幾年來已被廣泛運用于醫(yī)學檢驗技術(shù)中。檢驗科全面質(zhì)量管理體系的建立是保證工作質(zhì)量,提高檢測水平的關鍵,是檢驗科全面管理的需要,是實際工作的需要。血細胞分析儀在使用過程中,我們堅持樹立全面質(zhì)量管理的觀念,認真做好質(zhì)量控制和儀器的維護與保養(yǎng)工作,使用效果非常滿意。由于長時間的使用和管理血細胞分析儀,我們積累了較為豐富的經(jīng)驗,為此,下面談一點我們粗淺的見解。
1 樹立全面質(zhì)量管理的觀念
縱觀醫(yī)學檢驗事業(yè)的發(fā)展,核心問題就是質(zhì)量管理的問題,質(zhì)量管理是醫(yī)學檢驗之本,沒有檢驗結(jié)果的高質(zhì)量就談不上學術(shù)的高水平,沒有準確可靠的檢驗結(jié)果作為依據(jù),臨床診斷治療工作就受到很大的制約,而且檢驗質(zhì)量又是檢驗科的核心問題,質(zhì)量得不到保證,再先進的儀器和方法也得不到可信任的結(jié)果[1]。圍繞檢驗質(zhì)量這一核心工作,首先,我們應該樹立全面質(zhì)量管理的觀念,所謂全面質(zhì)量管理是指在實驗的過程中所有影響實驗結(jié)果的因素和環(huán)節(jié)都要處于受控的狀態(tài),保證每一個環(huán)節(jié)的協(xié)調(diào)統(tǒng)一,確保實驗結(jié)果真實可靠[2],我們把這一過程劃分為檢驗前的質(zhì)量管理工作、檢驗過程中的質(zhì)量管理工作和檢驗后的質(zhì)量管理工作。
2 檢驗前的質(zhì)量管理工作
檢驗前階段是檢驗過程的第一階段,也是整個檢驗過程中很重要但又容易被忽略的環(huán)節(jié),包括從臨床醫(yī)師開出的檢驗申請單開始,檢驗單的填寫,患者準備,標本采集,標本儲存,運送直至接收等幾個具體環(huán)節(jié),而這些環(huán)節(jié)都是由醫(yī)生和護士等在實驗室外部完成的,我們需要與其加強溝通,協(xié)作并監(jiān)督他們完成這一過程的工作,針對每個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證,要求的具體做法如下。
2.1 檢驗申請的內(nèi)容要求
清晰準確,并有準確的臨床信息,包括患者姓名、性別、年齡、住院號、門診號、有條件的話我們建議使用ID號,申請人姓名、明確的檢驗項目,標本采集時間、采集的部位等內(nèi)容,并要求檢驗工作人員審查確保其完整。
2.2 患者的準備
患者的準備很重要,由于患者自身的差異以及在診療過程中的動態(tài)影響,必須要求其規(guī)范標本采集前的一切行為,我們的要求是:患者在標本采集前應處于情緒穩(wěn)定的平靜狀態(tài),避免劇烈的運動以及緊張、恐懼心理,并主張在清晨固定的時間采集,最好空腹采血,匆忙起床等情況下應囑其先休息后再采集,采血前應該禁煙、禁酒等,最好禁食。
2.3 正確采集標本
首先確保采集管的干燥清潔,并有EDTA-K2抗凝劑,1ml血液要求10~15μl抗凝劑,建議統(tǒng)一采用坐姿采血,并保證采血過程合乎規(guī)范,標本采集結(jié)束后輕輕混勻,有相關文獻報道,在大量靜脈滴注的患者存在血液稀釋使某些項目結(jié)果較真實值偏低[3],應避免在輸血輸液部位采集,盡可能在輸血輸液等操作之前或有效休息后采集,盡可能排除可能造成標本溶血的操作,熟練掌握穿刺術(shù),確保操作合乎規(guī)范,例如穿刺次數(shù)、時間等因素,采集完成后要在標本管上標記采樣時間及患者信息。
2.4 標本的儲存、運送及接收
標本采集后應該存放于專用密閉容器內(nèi),由專人立即送至檢驗科,接收標本時要嚴格觀察標本是否符合要求,包括標本類型與申請類型統(tǒng)一,標本外觀完好情況,病人信息完整情況等。
3 加強檢驗科與臨床科室交流
檢驗工作和臨床是密切相關的,許多工作是需要雙方有效合作,通過有效合作可以對檢驗前運行情況進行了解,對檢驗結(jié)果進行有效分析,并應用于臨床,我們建議作好以下3個方面的工作:第一,加強雙方的溝通交流,互相配合。第二,在臨床醫(yī)護人員中進行檢驗知識培訓,有效督促其標本采集等檢驗前工作合理進行,使其對影響因素進行關注,如清楚劇烈運動、藥物等對檢驗結(jié)果的影響,對病人執(zhí)行情況進行有效監(jiān)督,確保前期工作無誤。第三,提高臨床醫(yī)護人員標本采集技術(shù),了解標本容器質(zhì)量,抗凝劑種類以及操作對結(jié)果的影響,保證標本合格??傊訌娕c臨床交流是提高檢驗醫(yī)學水平的重要環(huán)節(jié),檢驗工作質(zhì)量取決于標本留取送檢,到報告發(fā)出每個細節(jié),嚴格遵守以上環(huán)節(jié),構(gòu)筑一個完整質(zhì)量管理體系,才能保證實驗的科學性、準確性,為病患的治療提供有效診療依據(jù)。
4 醫(yī)學檢驗血細胞分析儀操作的規(guī)范化、標準化整個檢驗過程
從申請單開出到報告單發(fā)出,是一個多人參與的過程,影響因素較多,嚴格遵守檢驗工作流程是確保檢驗質(zhì)量的重要舉措。我們建議使用條形碼管理,通過條形碼管理標本以減少人為誤差,以適應新形勢下的醫(yī)院管理模式。(1)抗凝劑使用,EDTA-K2,1ml血液需要加10~15μl抗凝劑。(2)標本采集操作,坐姿采集標本,并嚴格保證采集時間限制。(3)標本有效存放時間標本采集后,盡可能快的在1h內(nèi)檢測完畢,時間越短越好。(4)試劑的質(zhì)量,保證試劑特別是溶血劑的使用很重要,建議使用進口配套試劑。(5)儀器的校準,儀器使用后必須進行校準,建議使用進口配套校準物定期校準。(6)室內(nèi)質(zhì)控與室間質(zhì)評的分析,持每天質(zhì)量控制的結(jié)果進行,出現(xiàn)失控要及時查找原因,采取措施進行糾正,積極參與室間質(zhì)評活動,對失控的項目要進行分析,查找原因,及時糾正。(7)儀器檢測后,對檢測結(jié)果有異常信息警示的,要進行手工鏡檢復查。
參考文獻:
[1]《應重視與臨床交流》,張美和、宋文琪,《中華檢驗雜志》,2004年第27期。
篇4
【關鍵詞】血細胞分析儀;性能;評價
前言
血細胞分析儀具有快速、方便、工作效率高等優(yōu)點,已經(jīng)廣泛應用于各大、中醫(yī)院檢驗科。隨著科學技術(shù)的發(fā)展,血細胞分析儀日益完善,為臨床提供了血細胞直方圖等普通手段難以測量的參數(shù),使血細胞形態(tài)學觀察不再只局限于顯微鏡下少數(shù)細胞的微觀結(jié)構(gòu)。由美國貝克曼-庫爾特公司生產(chǎn)的五分類HMX型血細胞分析儀采用VCS(電導、射頻、激光)技術(shù),對接近原態(tài)細胞的體積、核質(zhì)比、顆粒特性進行精確的測定和分析,其結(jié)果于三維空間內(nèi)將細胞區(qū)分為五個亞型,達到白細胞五分類的目的。當標本中存在異常細胞時,根據(jù)儀器內(nèi)定和人工設定的參數(shù)閾值,對可疑異常細胞作出報警提示。此外,Coulter HMX型血細胞分析儀增加了網(wǎng)織紅細胞有關參數(shù)的測定,為臨床診斷及患者預后觀察提供了更多參考價值。為了探討該分析儀的精密度、準確度及攜帶污染率,對白細胞五分類結(jié)果及異常細胞報警提示的可信性,鏡檢與儀器檢測兩種方法同時進行網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的相關性,我們通過復片觀察,比較兩者的符合率,以對該儀器性能作以評價。
1材料
1.1儀器:Beckman Coulter HMX血細胞分析儀(美國貝克曼-庫爾特公司),雙目顯微鏡(Olympus公司)
1.2試劑:由美國庫爾特公司生產(chǎn)的與HMX型血細胞分析儀配套使用的試劑。溶血劑 批號:101607F ;稀釋液 批號:C303005;清洗劑 批號:C211001B;網(wǎng)織紅細胞試劑 批號:109162;高、中、低三種定值全血質(zhì)控物 批號:885000 ;1%煌焦油藍試劑 按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第二版配制
1.3標本來源:門診及本院住院患者
2統(tǒng)計學處理
采用SPSS For Window 11.0統(tǒng)計軟件進行方差分析
3方法與結(jié)果
3.1精密度與準確度的測定:以高、中、低三種已知定值的全血質(zhì)控物連續(xù)測定10次,計算出其中四項的均值(X)、標準差(S)、變異系數(shù)(CV)。評價精密度選用CV值,其結(jié)果見表1,質(zhì)控物實驗組測定值與靶值比較評價儀器的準確度,選用方差分析,各項P>0.0 5,說明實驗組的測定值與靶值無明顯差別,即儀器的準確度較好。
表1 三種已知定值質(zhì)控物測定值
3.2攜帶污染率檢測:先連續(xù)測定高值樣品3次(H1、H2、H3),緊接著再連續(xù)測定低值樣品3次(L1、L2、L3),通過公式攜帶污染率=L1-L3/H3-L3*100%計算結(jié)果,WBC、RBC、HB、PLT各項攜帶污染率在0~1.13%之間。
3.3網(wǎng)織紅細胞計數(shù)儀器法與鏡檢法比較:選取30例樣品,將全血與網(wǎng)織紅細胞試劑混勻溫育5分鐘,每份樣品用儀器測定的同時采用手工法完成計數(shù)。每份標本均測2次,取平均值,由本科2名富有經(jīng)驗的中級職稱以上人員進行。為判斷方法間有無顯著性差異,即主要是評價儀器的性能,因此不考慮會產(chǎn)生影響的人與人之間的顯著性差異,進行方法學之間的單因素方差分析。由分析得出P>0.05,說明兩方法之間不存在顯著性差異,這表明機器法與手工法進行網(wǎng)織紅細胞計數(shù)結(jié)果差別不明顯,說明機器性能良好,可信度較高。
3.4白細胞分類儀器法與手工法相關性分析:隨機選取30份樣品進行儀器測定的同時,將各樣品制備血涂片,瑞氏染色鏡檢200個白細胞分類(鑒于嗜堿性粒細胞少見,這里不作以分析比較)。由本科2位富有經(jīng)驗中級職稱以上的老檢驗人員完成。通過兩者的測定值比較二者的相關性。為斷定方法之間有無顯著性差異,即是主要要評價機器的性能,故不考慮會產(chǎn)生影響的人與人之間的顯著性差異,只做方法之間的單因素方差分析。經(jīng)統(tǒng)計分析得到各項中P>0.05,說明兩方法不存在顯著性差異,即儀器法與手工法顯著性差異不明顯,說明儀器法同手工法的符合率很好。
3.5儀器對形態(tài)異常細胞提示功能的評價:另選取門診及本院住院患者標本30例,上機檢測的同時各涂血片,瑞氏染色,鏡下計數(shù)200個白細胞。儀器的操作嚴格按照操作手冊完成。(1)Imm NE;(2)NRBC/Platelet Clumps;(3)Blast/Variant LY三項中儀器顯示的任何一項提示為陽性。顯微鏡分類符合下列標準之一即判定為陽性:(1)中性桿狀核粒細胞>15%;(2)不典型淋巴細胞>10%;(3)晚幼?;蚋珉A段粒細胞>1%;(4)幼紅細胞占白細胞數(shù)1%以上[1]。以鏡檢結(jié)果為標準,儀器及鏡檢均為陽性,定義為真陽性(14例);儀器陽性而鏡檢陰性的定義為假陽性(4例);二者均為陰性的定義為真陰性(12例);儀器陰性而鏡檢陽性的定義為假陰性(0例)。據(jù)此得出本組病例中儀器對形態(tài)異常血細胞得提示功能特異性為75.0%;敏感性為100%;檢出有效率為86.7%;假陽性占13.3%;假陰性占0%。
3種異常結(jié)果提示及儀器與鏡檢陽性符合率分析。見表2
表2 儀器提示3種異常結(jié)果與顯微鏡目測比較
4討論
由美國貝克曼-庫爾特公司生產(chǎn)的Beckman Coulter HMX型血細胞分析儀采用了VCS三維技術(shù)對全血細胞進行分析。其優(yōu)點是不但可以對白細胞進行五分類,而且可以進行網(wǎng)織紅細胞計數(shù),適合大批量標本的篩查檢測。不但為臨床提供了更多的診斷及治療信息,而且為檢驗科在繁重的工作中節(jié)省時間、人力,提高了效率。該設備在開機時可自動測知本底,以便了解儀器中各試劑的使用情況。使用中操作簡單,可連續(xù)測定,速度快。儀器連有顯示屏,各系統(tǒng)操作均在屏幕上完成,實現(xiàn)了人機對話,以利于掌握測量分析中的各種信息。另外,屏幕上在顯示各項測定值的同時配有三維直方圖及報警提示,使操作人員更直觀地了解該標本的基本情況,達到對該批標本進行初篩的作用。
篇5
【關鍵詞】血小板計數(shù);自動分析;鏡檢
【中圖分類號】R-0 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2014)02-0350-02
血小板計數(shù)是診斷血液疾病和患者出凝血時間的重要資料,其結(jié)果決定診斷的正確性以及醫(yī)生的治療方案。目前血小板計數(shù)廣泛采用血細胞分析儀進行檢驗,主要是通過電阻抗法和光學法進行原理進行檢測,但對于其計數(shù)結(jié)果可能存在不準確,為此,我們對同一標本分別用鏡檢、血細胞分析儀法兩種方法進行檢驗,對檢驗結(jié)果進行比較分析,現(xiàn)報道如下。
1 臨床資料與方法
1.1 臨床資料:2012年10-11月間,昆華醫(yī)院門診化驗室患者的PLT檢驗標本100份,患者年齡1-85歲,平均年齡45歲;男38例,女62例。
1.2 標本留置方法:檢查當日早晨空腹,用EDTA-K2抗凝管抽取靜脈血2ml,上下顛倒混勻10-15次,室溫放置。標本留置后1h內(nèi)完成PLT計數(shù)檢測。
1.3.1備與試劑;雙目鏡顯微鏡、血小板計數(shù)板;雅培五分類血細胞分析儀,血細胞分析儀的配套試劑。
1.3.2 試驗方法:血細胞分析儀按照損傷流程,每天進行質(zhì)量控制,用專用校準品進行儀器校正。按照檢測流程對同一標本用雅培五分類血細胞分析儀單獨完成全血細胞計數(shù)。鏡檢法PLT計數(shù)前對血細胞計數(shù)板進行校正,由兩名相關工作人員按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》獨立完成PLT計數(shù)取兩人平均值為檢驗結(jié)果。
1.4 統(tǒng)計學方法:均所有數(shù)據(jù)輸入SPSS12.0進行統(tǒng)計分析,用配對樣本和t檢驗,以p
2 結(jié)果
3 討論
雅培CD-3200血細胞分析儀的原理為電阻抗法,PLT與紅細胞同時進入計數(shù)池計數(shù),根據(jù)各種細胞不同電阻來分類白細胞計數(shù)。健康人紅細胞體積與血小板體積有明顯差異,可以通過電阻準確區(qū)分二者。我們的惡觀察結(jié)果也發(fā)現(xiàn),當血小板在著呢工廠范圍內(nèi)時,雅培CD-3200血細胞分析儀對血小板計數(shù)結(jié)果與鏡檢結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義。而病理情況下,當標本中有小紅細胞或大血小板等血細胞時,血小板與紅細胞之間有重疊,血液中可產(chǎn)生一些大小與血小板相似的非血小板顆粒,如紅細胞碎片、小紅細胞、真菌、細菌和免疫復合物等,電阻法可能將其分為血小板,而將大血小板誤認為紅細胞[1]。導致計數(shù)結(jié)果不準確,我們的觀察結(jié)果也發(fā)現(xiàn),當鏡檢血小板計數(shù)300x109/L組計數(shù)低于鏡檢計數(shù),差異有統(tǒng)計學意義。提示我們用雅培CD-3200血細胞分析儀進行血細胞分析時,對異常報道結(jié)果就進行手工復核,以免出現(xiàn)誤差,影響患者診斷與治療。
綜上所述,雅培CD-3200血細胞分析儀符合臨床對血常規(guī)檢驗需要,可以提高檢驗效率,縮短檢驗時間,減輕勞動負荷,但對儀器提示血細胞分布異常的標本,需要采取鏡檢的方法進行復核,以免出現(xiàn)計數(shù)誤差。
參考文獻:
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篇6
【關鍵詞】新鮮全血;血細胞分析儀 校準
Calibrate Different Hematology Analyzers Using Fresh Blood
ZHANG MING-hua(Department of Laboratory,The fourth People's Hospital OF Ziyang city, Ziyang china ,641300)
【Abstract】Objective:To investigate the feasibility of the calibration of hematology analyzers by fresh blood.Methods:The KX-2l hematology analyzer was selected as reference analyzer,and two COULTER AC Tbiff2 hematology analyzers were calibrated by fresh blood.Stability of the hematology analyzer and accuracy of the results were monitored,and to calibrate the hematology analyzer according to the result.Results: Items of these analyzers were calibrated.It showed that the results of the three analyzers of our division had good comparability and could be replaces by each other.Conclusion:To calibrate hematology analyzers with fresh blood can improve the accuracy of the hematology analyzer.
【Key words】Fresh blood;Calibration;Hematology analyzer
血細胞分析儀因其操作簡便、快速、精密度高、結(jié)果計數(shù)準確,已逐漸成為臨床實驗室的主要檢測手段,其檢測結(jié)果的準確性直接影響患者的診斷和治療【1】。在我國,同一實驗室同時使用不同廠家或同一廠家不同生產(chǎn)型號的血細胞分析儀的現(xiàn)象普遍存在,如果采用各儀器配套校準品進行儀器校準,可能會出現(xiàn)同一血樣標本在同一實驗室的不同儀器上檢測出的結(jié)果不一致,給臨川診斷帶來不確定,妨礙了疾病診斷。我科采用新鮮全血作為校準物,對本實驗室內(nèi)的3臺血細胞儀進行校準和評價,效果滿意?,F(xiàn)將相關情況報道如下。
1 材料和方法
1.1 標本來源
選取我院住正常體檢者的乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝全血,白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)及血小板(PLT)4個項目分為高、中、低值標本各10份。
1.2 儀器與試劑 2臺美國COULTER AC Tbiff2血液分析儀及配套試劑和質(zhì)控物,1臺日本SYSMEX公司的KX-2l血液分析儀及進口配套試劑、校準品和質(zhì)控物。EDTA-K2真空抗凝管(浙江生產(chǎn),批號20090520,有效期201105)。
1.3 方法
1.3.1 校準前的準備 對儀器的操作步驟熟練,所校準的儀器內(nèi)部通道及時清洗,背景計數(shù)和攜帶污染率符合質(zhì)控要求。
1.3.2 標本的采集 隨機抽取成年健康體檢者新鮮全血標本10份,每份標本在每臺血細胞儀上檢測11次,取第2-11次的平均值作為測定結(jié)果。每份標本取總量30ml,分別保存于3個EDTA-K2真空抗凝管內(nèi),分別用于儀器的定值、校準和校準后驗證。保證標本采集后2小時內(nèi)完成檢測【2】。進入校準的標本應滿足WBC(4.0-10.0)×109/L,RBC(3.5-5.5)×1012/L ,Hb 100-170 g/L,PLT(100~300)×109/L。
1.3.3 參考比對儀器的確定與新鮮全血標本的定值 根據(jù)儀器精密度、參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評成績確定KX-2l為參考比對儀器,其他為測試儀器。用配套校準品對參考儀器KX-2l進行嚴格校準。取第1支抗凝管內(nèi)新鮮全血在KX-2lN上連續(xù)檢測11次,去除第1次的結(jié)果,計算第2-11次結(jié)果的均值作為參數(shù)的靶值。
1.3.4 比對儀器的校準
取第2支抗凝管內(nèi)新鮮全血按高、中、低值對兩臺待測血細胞分析儀進行校準。以1988年美國臨床實驗室改進修正案【3】為參照,按照允許誤差范圍的1/4來確認這3臺血細胞分析儀的相對偏差,即按以下標準判斷待測儀器是否需要校準:WBC≤3.75%,RBC≤1.50%,Hb≤1.75%,PLT≤6.25%。若待測儀器與參考儀器檢測結(jié)果偏差小于上述參數(shù)范圍,且相關系數(shù)γ>0.95,說明這3臺儀器檢測結(jié)果一致性較好,不必更改校正系數(shù);若偏差超出上述偏差范圍,則應以參考儀器對新鮮全血進行定值后校準待測儀器,將新的校準系數(shù)(新校準系數(shù)=原校準系數(shù)×靶值/儀器檢測值)輸入儀器替換原校準系數(shù)即可;若偏差大于上訴參數(shù)的10%(PLT偏差可>15%)時,則需請廠商維修人員進行原因檢查和處理【4】。
1.3.5 校準結(jié)果的驗證
取第3支抗凝管內(nèi)的新鮮全血,在兩臺待測血細胞儀上嚴格按儀器操作規(guī)程連續(xù)檢測11此,分別計算第2~11次結(jié)果的均值及其與靶值的偏差,觀察是否在校準判斷標準以內(nèi),若不在此范圍內(nèi),應繼續(xù)調(diào)整。
1.3.6 校準后的處理
每月對3臺血細胞儀進行重新保養(yǎng)、維護、校準及比對試驗。注意儀器是否存在偶然誤差或系統(tǒng)誤差,偶然誤差應及時查明原因,系統(tǒng)誤差應重新進行上述比對校準試驗,調(diào)整校準系數(shù)。
1.3.7 統(tǒng)計學分析
用spssl3.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理和相關系數(shù)分析。檢驗水準為α=0.05。
2 結(jié)果
2.1 三臺血細胞分析儀校準前測定新鮮全血的變異系數(shù)見表1,儀器重復性很好,符合校準條件。
表1 各儀器重復測定結(jié)果的變異系數(shù)(CV,%)
2.2 通過對KX-2l血細胞分析儀定值,并把所定值作為靶值。將新鮮全血在其他兩臺待測血細胞儀上進行結(jié)果測定,其與靶值的偏差見表2,計算新的替換校準系數(shù)。
表2 校準前新鮮全血測定的各儀器的偏差(%)
注:*偏差超出允許范圍,須對系數(shù)進行調(diào)整
2.3 待測血細胞儀更換為新的校準系數(shù)后,檢測其與靶值的偏差并確定各項參數(shù)的測定結(jié)果見表3、表4。
表3 校準后新鮮全血測定的各儀器的偏差(%)
表6校準后新鮮全血在各儀器上的測定結(jié)果(Χ±s)
3討論
隨著醫(yī)療技術(shù)和水平的發(fā)展,各種醫(yī)療檢測儀器不斷進入臨床,為臨川診斷和治療提供了科學依據(jù)和指導思路。其中血細胞分析儀的出現(xiàn)給血液常規(guī)檢查帶來了革命性的變化,特別是近年來推出的各種新型全自動分析儀,無論是檢測結(jié)果的準確度還是精密度都有很大的提高。但是,血細胞分析儀是否能提供準確、可靠的檢測結(jié)果關鍵在于該儀器的校準。絕大多數(shù)的質(zhì)控物和校準物為進口產(chǎn)品,價格昂貴,不便于普遍使用,導致在同一實驗室內(nèi)同一標本若用不同儀器分析,出現(xiàn)測定值的差異。這些差異除了儀器本身的性能,更重要的在于校準方法正確與否。
根據(jù)國際血液學標準化委員會的文件要求,血細胞分析儀的檢測結(jié)果只有溯源國際標準參考方法,才能保證其準確性【5、6】。但考慮到成效比及絕大多數(shù)實驗室不具備國家認可的參考實驗室條件,無法用參考方法直接給新鮮全血定值,從而轉(zhuǎn)向采用間接溯源至國際標準的方法定值,即可溯源的檢測系統(tǒng)定值【7、8】。目前臨床對用新鮮全血作為校準物進行室內(nèi)和室間質(zhì)評進行了相關有益的嘗試【9-12】,取得了良好效果。本實驗應用新鮮全血對我室3臺血細胞分析儀進行校準,結(jié)果表明,校準調(diào)整后各研究參數(shù)與參比儀器具有相當?shù)目杀刃?,之后通過對日常選取的高、中、低值標本進行比對試驗,能夠很好地監(jiān)控儀器的穩(wěn)定性及結(jié)果的準確度,且這種方式經(jīng)濟實用,易于操作,值得在中、小型實驗室推廣。
總之,EDTA-K2抗凝的新鮮全血可代替標準方法測定全血細胞質(zhì)控物來校準多通道血細胞分析儀,保證其測定結(jié)果準確性。而每天以新鮮全血對血細胞分析儀進行質(zhì)控是了解各儀器測定結(jié)果間精密度的有效措施,及時避免系統(tǒng)誤差的發(fā)生,保證室內(nèi)多臺血細胞分析儀測定結(jié)果的準確性,使科室內(nèi)的不同儀器測定結(jié)果具有了可比性。
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篇7
[關鍵詞] SF-3000型全自動血細胞分析儀;顯微鏡復查;異常報警
[中圖分類號] R446 [中圖分類號] A[文章編號] 1673-9701(2009)24-173-02
目前血細胞分析的方法主要采用自動檢測儀器的方法,大大提高了臨床血液學檢驗的質(zhì)量和效率,然而這類儀器在鑒別血細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)方面還不夠完善[1]。如果完全依靠儀器檢測結(jié)果,不加以分析和復查直接發(fā)出報告,會有一定數(shù)量的錯誤報告發(fā)向臨床,使臨床醫(yī)生得不到有診斷意義的信息,造成誤診或不合理治療。因此要根據(jù)血細胞分析儀檢測的結(jié)果和儀器給出警示信息有選擇性地進行顯微鏡復查血片,經(jīng)確認、修正或修補后,才能發(fā)出報告,以保證檢驗的質(zhì)量和工作效率。
1材料與方法
1.1標本來源
本院各科住院患者及門診患者的新鮮抗凝全血,隨機抽取6250份,采血后均在2h內(nèi)完成檢測。
1.2儀器和試劑
日本神戶SysmexSF-3000型全自動血細胞分析儀:采用電阻抗原理進行血細胞計數(shù)和體積測定,當疑有異常細胞時,給出有原始細胞、異型淋巴細胞等異常細胞的警示信息。能夠?qū)准毎譃槭戎行粤<毎⑹人嵝粤<毎?、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞五類。Olympus CH-2雙筒顯微鏡用于血細胞顯微鏡分析。所用試劑是Sysmex的稀釋液、溶血劑、靶液等配套試劑。采用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)真空抗凝采血管取靜脈血。
1.3方法
儀器法檢測,嚴格按照SF-3000型全自動血細胞分析儀的操作手冊進行,并對有異常警報的標本作以標記。手工顯微鏡檢測按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2]進行。對儀器法提示有異常細胞報警的標本進行血涂片、瑞特-姬姆薩染色,用油鏡分類復查。儀器提示有異常細胞且鏡檢證實者為“真陽性”,儀器提示有異常細胞而鏡檢未檢出者為“假陽性”,儀器無異常提示而鏡檢有異常細胞者為“假陰性”。其中,敏感性=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%,特異性=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%,陽性預測值=真陽性/(真陽性+假陽性)×100%。
2結(jié)果
我們對采用SF-3000型全自動血細胞分析儀檢測的6250份臨床標本進行統(tǒng)計分析,其中儀器沒有異常報警信息的有5418份,占檢測總數(shù)的86.69%,儀器有異常提示報警的有832份,占檢測總數(shù)的13.31%,隨機選取儀器沒有報警信息的300份標本進行顯微鏡復檢,結(jié)果二者符合率為100%。832份儀器有異常提示的和300份儀器未報警的標本,儀器法及手工顯微鏡法檢測的結(jié)果見表1。
據(jù)表1可得出,SF-3000型全自動血細胞分析儀對形態(tài)異常的血細胞檢出能力的有關預測值分別為:敏感度100%,特異度50.2%,陽性預測值為64.2%,陰性預測值100%,準確度52.8%。
3討論
SF-3000型全自動血細胞分析儀由于具有標本量少、試劑消耗低、操作簡便等優(yōu)點,已經(jīng)廣泛應用于臨床檢驗,但有異常細胞時,儀器很難提供完全準確的分析結(jié)果。因此,實驗室工作人員應根據(jù)血液分析儀警示信息,通過縮小目標對標本進行顯微鏡復查,這樣在能保證檢驗質(zhì)量的前提下,提高工作效率。我們通過儀器檢測和顯微鏡復查發(fā)現(xiàn):儀器有異常報警提示而手工顯微鏡復查未檢出異常標本做進一步分析,在鏡檢中可發(fā)現(xiàn)中性粒細胞胞漿增粗或呈中毒樣改變、細胞體積增大、核左移或退行性變等情況,這可能是導致儀器假陽性報警的主要原因。我們認為這種報警有助于對中性粒細胞形態(tài)異常及感染的嚴重程度作進一步的分析,為臨床治療提供指導。有時血片鏡檢時見到細胞碎片、血小板凝集等現(xiàn)象,儀器也往往出現(xiàn)報警信息,故這種假陽性可能是受血細胞碎片、血小板凝集和小淋巴細胞的影響所致。
由表1可看出:SF-3000型全自動血細胞分析儀不能完全準確地給出檢測結(jié)果,我們分析是由于儀器測定細胞的標準是依據(jù)細胞體積的大小,而細胞體積的大小并不是判定細胞的唯一標準。溶血素處理后的細胞與自然體積無關,只有根據(jù)細胞體積、染色后胞漿顏色及量的多少、核的形狀及染色質(zhì)的特點等綜合分析,才能得出準確的細胞群[3,4]。面對血液中各種細胞的多形態(tài)、多變化性,儀器識別能力有限,因此,應利用儀器的報警功能和分析,將病理變化及其它因素干擾的需要復查的標本挑選出來,進行顯微鏡復查血片,以確認、修正,達到保證檢驗質(zhì)量及縮短患者候診的時間,提高工作效率的目的。另外,關于儀器的異常報警提示,我們在工作中體會到:要確保SF-3000型全自動血細胞分析儀檢測結(jié)果的準確可靠,必須做好實驗室的全面質(zhì)量管理工作。首先要對工作人員進行培訓,具有較高的專業(yè)理論和技術(shù)水平;其次要做好儀器日常使用及維護工作,更要做好標本的質(zhì)量控制;最后要做好室內(nèi)質(zhì)控工作,并定期校正儀器。計數(shù)后要觀察有無警報信息,如有,一定要進行手工計數(shù)和顯微鏡涂片復查,以糾正偏差。
多年來,在中華醫(yī)學會檢驗分會和衛(wèi)生部檢驗中心的努力指導下,外周血涂片檢查從標本采集方法和容器的規(guī)定、靜脈血抗凝劑的選擇、儀器的校準、方法的標準化和質(zhì)量的控制,都有了統(tǒng)一的規(guī)定[5]。而有關血液形態(tài)學方面復查問題,要在什么情況下進行復查,迄今沒有統(tǒng)一標準,我們通過探討研究,建議:當儀器沒有異常細胞報警提示且臨床醫(yī)生無特殊要求者,可不做手工顯微鏡復查。但由于儀器不能完全分辨是何種異常細胞,故只要儀器有異常細胞報警提示,均應對該標本進行手工涂片、染色、顯微鏡復查,以便為臨床提供更準確的檢驗信息。
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篇8
[關鍵詞] 血細胞分析儀;顯微鏡鏡檢;可行性
[中圖分類號] R446.1[文獻標識碼] B[文章編號] 1673-7210(2010)04(a)-132-02
血細胞分析儀是臨床檢驗中最基礎也是最常用的儀器,隨著五分類全自動血細胞分析儀的普及,實驗室為臨床疾病的診斷、治療、預后提供了更多有價值的指標。高新儀器的使用一方面促進了醫(yī)學檢驗的發(fā)展,同時也給檢驗工作帶來新的問題,怎樣才能在確保檢驗質(zhì)量的基礎上最大限度地發(fā)揮高新技術(shù)帶來的便捷需進一步探討。在常規(guī)工作中,首先遇到的是對血細胞分析儀檢測結(jié)果的復檢問題。對儀器的完全依賴極易造成漏診和誤診[1-2],全部鏡檢也不切合實際情況。為此,我科結(jié)合本科室的具體情況制訂了復檢標準,并對其臨床應用進行探討。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1儀器:靜脈血檢測使用美國Beckman-Coulter公司的LH500五分類全自動血細胞分析儀;日本Olympus顯微鏡進行細胞鏡檢。
1.1.2 試劑:LH500使用的稀釋液、溶血劑、白細胞分類試劑均由Beckman-Coulter蘇州有限公司提供。采用美國BD公司提供的EDTA鉀鹽真空抗凝管采集靜脈血標本。
1.1.3 標本:2009年10~11月收集我院各科住院患者的靜脈血標本,共分析4 000例,采血后室溫保存,2 h內(nèi)檢測完畢。
1.2方法
1.2.1 儀器檢測:LH500用公司配套校準物進行儀器校準,每天測定前做高、中、低三個水平的全血質(zhì)控物,確認儀器處于正常工作狀態(tài),進行標本檢測。
1.2.2 顯微鏡檢查標本經(jīng)儀器分析后涂片,瑞-姬染液染色,由經(jīng)驗豐富的形態(tài)室人員進行復片。
1.2.3 儀器結(jié)果異常的判斷標準,①結(jié)果異常:WBC>15×109/L或80%,淋巴細胞>60%,單核細胞>15%,嗜酸粒細胞>15%,嗜堿粒細胞>10%;③Hb
1.2.4 顯微鏡檢查異常的判斷標準,①白細胞:形態(tài)異常(分葉過多、中毒顆粒、空泡變性等)、異型淋巴細胞>5%,桿狀粒細胞>10%,存在幼稚細胞;②紅細胞:存在有核紅細胞,大小不一,染色異常,形態(tài)異常,分布異常;③血小板:血小板聚集,嚴重體積異常;④對儀器檢測白細胞、血小板數(shù)量的評估。
2結(jié)果
筆者對4 000例標本的儀器檢測結(jié)果和顯微鏡鏡檢結(jié)果進行以下幾個方面的分析:
2.1儀器檢測結(jié)果與顯微鏡鏡檢結(jié)果比較
儀器檢測結(jié)果完全正常2 232例,占55.8%;顯微鏡鏡檢結(jié)果異常970例,占24.2%。LH500對異常的血液標本檢出能力的有關預測值分別為,敏感度為99.9%,特異度為73.6%,陽性預測值為54.7%,陰性預測值為99.9%,準確度為79.9%。
2.2儀器檢測分組與顯微鏡鏡檢結(jié)果比較
將4 000例臨床標本分為四組:儀器結(jié)果正常、無Flags提示組,儀器結(jié)果輕度異常、無Flags提示組,儀器結(jié)果輕度異常、有Flags提示組,儀器結(jié)果明顯異常、有Flags提示組,四組結(jié)果與顯微鏡鏡檢結(jié)果比較見表1。
表1 儀器檢測分組與顯微鏡鏡檢結(jié)果比較
2.3儀器檢測警示分組與顯微鏡鏡檢結(jié)果比較
將儀器檢測的不同F(xiàn)lags提示分別與顯微鏡鏡查結(jié)果進行比較,結(jié)果見表2。
3 討論
美國Beckman-Coulter公司的LH500五分類全自動血細胞分析儀采用Coulter電阻抗原理和智能微數(shù)技術(shù)對血細胞進行計數(shù),基于流體力學原理,使用鞘流技術(shù)使溶血后液體里剩余的白細胞單個通過光路,通過檢測器接受VCS(volume,細胞體積;conductivity,高頻傳導;scatter,激光散射)三種技術(shù)同時檢測的信號對白細胞進行分類,并可得到細胞散點圖和直方圖。
隨著這些原理更科學、操作更自動化及血細胞分析儀的推廣和普及,檢驗人員對儀器的檢測結(jié)果越來越信賴,從而忽視了顯微鏡檢查。LH500對異常的血液標本檢出能力的有關預測值分別為:敏感度為99.9%,特異度為73.6%,陽性預測值為54.7%,陰性預測值為99.9%,準確度為79.9%。從儀器檢測結(jié)果與顯微鏡檢測結(jié)果的比較中可以看到,一方面,五分類的血細胞分析儀對異常細胞形態(tài)的敏感度較高,漏檢率也符合國際血液學復檢專家組對復檢規(guī)則的要求;另一方面,儀器的特異性不高,復片率達到44.2%,大大消弱了高新儀器的便捷。這就需要我們制訂一個切實可行的復檢標準。
筆者通過對4 000例標本的儀器檢測結(jié)果、Flags提示與顯微鏡鏡檢結(jié)果比較發(fā)現(xiàn),單一地依賴主要數(shù)據(jù)的異?;騿我坏匾蕾嘑lags提示都不能提高儀器的特異性。把兩者結(jié)合起來,根據(jù)數(shù)據(jù)的異常程度進行分組,在儀器結(jié)果正常、無Flags提示組中只有1例假陰性結(jié)果,顯微鏡檢查示分類原粒細胞為1%,為血液科初診患者,有發(fā)熱體征,后確診為AML-M1。在儀器結(jié)果輕度異常、無Flags提示組中,也只有1例假陰性,顯微鏡檢查示分類異型淋巴細胞為7%,為兒科患者,IM治療后。這兩組結(jié)果與鏡檢基本一致,2例假陰性也具有代表性,可以通過復檢標準的完善篩檢出來,這部分病例可以確定為不需要復片。在儀器結(jié)果輕度異常、有Flags提示組中,有350例(44.4%)假陽性結(jié)果,主要是白細胞分類異常和儀器報警提示,一方面,暴露了所有全自動血液分析儀在白細胞分類上的缺陷;另一方面,從表2的比較結(jié)果看出,這部分Flags警示多為Imm NE1/NE2、Blast、Verify Diff,集中在白細胞的分類上,提示我們復檢標準的不足之處,需要在今后的工作中積累更豐富的實驗數(shù)據(jù)和臨床經(jīng)驗,制訂更科學的復檢標準。在實驗中還有很少部分數(shù)據(jù)為儀器結(jié)果正常、有Flags提示組,提示Dimorphic Reds、Platelet Clumps,初步證實與標本采集、環(huán)境溫度等因素有關,需要工作人員的臨床經(jīng)驗,對復檢標準沒有影響,沒有納入實驗數(shù)據(jù)中。
通過實驗發(fā)現(xiàn),不同檢測原理、不同檔次的儀器所對應的復檢標準是不一樣的,每個實驗室應該自行規(guī)定復檢的條件。筆者認為,高檔次的儀器,檢測原理科學,數(shù)據(jù)分析全面,報警靈敏度很高,復檢的標準可以放寬,更側(cè)重于儀器的異常警報提示。對于中、低檔次的儀器,應該嚴格按照制訂的復檢標準執(zhí)行,對復檢的判斷更應該側(cè)重于對白細胞計數(shù)、白細胞分類、血紅蛋白、血小板計數(shù)等數(shù)據(jù)的分析。
4 體會
①儀器對細胞形態(tài)的識別能力,決定篩選標準的寬嚴程度;②在保證質(zhì)量基礎上降低復檢率至
[參考文獻]
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篇9
使用SYMEX-2100全自動血細胞分析儀,具有測定參多,分析速度快,結(jié)果準確,重復性好,性能穩(wěn)定等特點,使血常規(guī)的分析有了很大的進步。但是。由于血小板自身的特性及儀器自身檢測原理的特點,6%~7%的結(jié)果中血小板直方圖異常,具體表現(xiàn)只能分析血小板總數(shù),而不能分析出血小板分布寬度、血小板壓積、大血小板百分率等項目,IP信息提示:直方圖異常,血小板聚集,血小板減少等。先將兩年使用中的體會分析如下。
對血小板直方圖異常的標本作了儀器法與手工法在顯微鏡下計數(shù)的比較,對其結(jié)果不一致的標本進行了原因分析:⑴小紅細胞、紅細胞碎片、白細胞碎片,這類情況都可干擾血小板的正確計數(shù),使儀器計數(shù)結(jié)果高于手工計數(shù)結(jié)果,而由于形態(tài)的大小不一致導致直方圖不是對稱的,而是向左延伸,超出線性范圍而使直方圖異常。⑵紅細胞聚集,可使血小板受限,引起血小板假性降低。⑶過量的大血小板,由于這類大血小板可以超出血小板計數(shù)的高線閾值而不被作為血小板計數(shù),引起血小板假性降低,使儀器計數(shù)結(jié)果低于手工計數(shù)結(jié)果,體積大小不一直方圖向右延伸超出線性范圍表現(xiàn)異常。⑷化學療法:由于化療藥物可使血小板脆性增加,引起血小板計數(shù)結(jié)果降低。有的藥物如硫酸鎂可引起血小板聚集,使血小板數(shù)量和形態(tài)異常。⑸抗凝劑的原因:①當抗凝劑量不足,血量過多時抗凝不充分會出現(xiàn)凝塊。②由于血小板離體后,其形態(tài)立即發(fā)生變化,其外膜形成的微小管游離端向外發(fā)展,從而在血小板周圍形成偽足,數(shù)個這樣的血小板偽足纏繞,形成血小板可逆聚集體,其體積一般和淋巴細胞大小相似,由于這種血小板不被溶血劑溶解,故而使血小板暫時減少,隨著時間的延長,這種假性聚集發(fā)生一定的解聚,抗凝劑過濃會延長這個平衡過程所以為了提高準確性,建議在采血后放置15~20分鐘再測定,可得到準確結(jié)果。
以上原因造成的誤差都可用人工顯微鏡計數(shù)及血涂片染色鏡檢得到準確的計數(shù)結(jié)果及直方圖評價。
其他原因:①采血過程:采血速度和出血是否順利是保證血小板數(shù)目準確及直方圖正常的關鍵,靜脈血經(jīng)多次穿刺而引起的水腫及皮下出血時,因組織損傷,組織凝血因子混入血液標本中產(chǎn)生肉眼看不見的小凝塊,是造成血小板數(shù)目假性減低及體積異常的原因之一,所以對血小板減少患者,手工復查必要是進行涂片觀察。②試劑方面的問題:希森美康所用試劑為配套的專用試劑,切忌將瓶內(nèi)剩余的試劑倒入新打開的瓶中,因為剩余試劑的瓶底或多或少有雜質(zhì)進入,其中小顆粒物質(zhì)會使結(jié)果升高,而體積的不一致性則使直方圖異常,更換試劑時,保證容器出口沒有黏附灰塵,打開試劑容器后,保證沒有灰塵,臟物或細菌進入容器。③儀器方面的原因:進樣管道的污染和堵孔是造成計數(shù)和直方圖分析障礙的常見原因。在使用儀器時按操作規(guī)程開關機,每天關機前清洗,定期進行高濃度清洗,禁止做不合格的標本,尤其是凝集的標本,防止造成堵塞。
篇10
關鍵詞血液分析儀準確性一致性
隨著血液分析儀日新月異的發(fā)展實驗室同一項目檢測有兩種以上的檢測系統(tǒng)。由于不同系統(tǒng)間儀器、試劑、較準品、參數(shù)、檢驗程序、保養(yǎng)計劃等的組合差異其靈敏度、準確度等存在差異。使同一份標本在不同儀器上檢測的結(jié)果存在著一定的差異給臨床診斷和治療帶來困難。如何使兩臺儀器在檢測結(jié)果上取得一致性現(xiàn)在實驗室標準化、規(guī)范化亟待解決的問題。根據(jù)《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》對于相同項目在不同儀器上進行檢測時要對檢測結(jié)果進行比對為此對本室兩種不同型號的血液分析儀的5個參數(shù)的檢測結(jié)果進行相關性和準確性比較分析。以ME-7P(簡稱7P)為對比方法()ME-618(簡稱618)為試驗方法(Y)。
資料與方法
儀器及試劑:日本光電ME-7P、ME-618兩臺血細胞分析儀及原廠配套試劑。
標本:隨機抽取住院及門診患者人份其中1人份為正常人群(本院職工體檢)1人份為異常人群(住院及門診患者異常高值6異常低值)。無溶血、無乳糜、不同濃度分布的新鮮乙二胺四乙酸二鉀EDTA-抗凝全血進行測定標本。
校準物及質(zhì)控品:校準物由日本光電公司提供的ME-A配套校準品。質(zhì)控品由日本光電公司提供的ME-DN質(zhì)控批號B11NME-5DN質(zhì)控批號B8N。
方法:實驗前首先對臺儀器進行日常維護保證儀器的工作環(huán)境及運行狀態(tài)在正常狀態(tài)再用血細胞的校準液對分析儀的主要參數(shù)進行校準然后用質(zhì)量控制液進行檢測并使用患者新鮮全血在臺儀器上進行檢測。在整個實驗中保證實驗方法都處與完整的質(zhì)控之下始終對實驗結(jié)果有校準措施。
統(tǒng)計學處理:配對t檢驗和直線回歸分析。
操作:人份標本分天檢測每天5個標本每個標本重復測定兩次剔除離群數(shù)據(jù)后取平均進行統(tǒng)計分析。
結(jié)果
ME-7P和ME-618測定結(jié)果:在兩臺儀器上測定的結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義。兩者檢測結(jié)果具有良好的可比性同時對兩臺儀器測定結(jié)果進行了相關與回歸分析。結(jié)果如表ME-7P和ME-618檢測結(jié)果相關與分析所示5個檢驗結(jié)果呈良好的相關性。見表1。
討論
為保證對同一檢測項目在不同檢測儀器上分析結(jié)果的一致性AP認可標準要求實驗室每年至少要進行兩次比對研究。不同檢測儀器間的相關性和比對分析。已逐漸受到臨床檢驗工作者的重視從表可以看出隨機選擇的檢測項目在兩臺儀器上的分析結(jié)果呈良好的相關性和一致性。
因此不同型號血細胞分析儀檢測項目白細胞(WB)、紅細胞(RB)、血紅蛋白(HGB)、血細胞比容(Hct)、血小板計數(shù)(Plt)的檢測結(jié)果具有一致性。從而為臨床提供一個更可靠有可比性的實驗結(jié)果。
參考文獻