核酸檢測(cè)情況范文
時(shí)間:2023-04-09 22:25:07
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篇1
關(guān)鍵詞:物體的檢測(cè) 顏色的形變 校正紋理
中圖分類(lèi)號(hào):O411
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):1007-3973(2012)007-114-02
1 前言
在視頻圖像中被監(jiān)視的場(chǎng)景圖像變化情況稱為運(yùn)動(dòng)目標(biāo)的檢測(cè)。由于陰影、目標(biāo)與背景的差別很大且二者又運(yùn)動(dòng)一致,運(yùn)動(dòng)目標(biāo)的分割和提取常見(jiàn)干擾為:目標(biāo)合并,目標(biāo)外形改變,目標(biāo)消失。目前,背景圖像靜止不動(dòng)的情況,究其原理主要分為三類(lèi):光流的計(jì)算方法、幀間差分方法、背景的消減方法。
幀間差分方法主要特點(diǎn)是:相鄰的幀差時(shí)間的間隔比較短,場(chǎng)景光線的變化時(shí)該方法不太敏感。背景消減法主要特點(diǎn)是:此方法與幀間差分法比較在靜止的背景模型下,在目標(biāo)運(yùn)動(dòng)區(qū)域內(nèi)可獲得完整而又精確的描述,較精確的目標(biāo)圖像可以被提取出來(lái)。
傳統(tǒng)方法在特性方面存在不完善的地方,傳統(tǒng)算法中陰影的紋理、顏色、空間屬性在需要分析的區(qū)域中會(huì)造成的顏色的形變。本文給出未知攝像位置和場(chǎng)景特征的陰影檢測(cè)的算法,通過(guò)校正紋理和顏色的補(bǔ)償來(lái)獲得運(yùn)動(dòng)的陰影和物體。
2 運(yùn)動(dòng)目標(biāo)分析
2.1 背景模型
在背景是靜止并且光照條件不變的情況下,此背景點(diǎn)的像素值是相對(duì)比較穩(wěn)定的。統(tǒng)計(jì)一段時(shí)間內(nèi)序列為n幅圖像每一像素點(diǎn)顏色值的期望 和方差 為像素點(diǎn)。和 組成圖像 為初始背景模型。如靜止場(chǎng)景內(nèi)發(fā)生了光照強(qiáng)度改變,或靜止物體開(kāi)始移動(dòng),圖像上物體靜止的像素點(diǎn)被認(rèn)為前景點(diǎn),跟蹤目標(biāo)時(shí)產(chǎn)生的錯(cuò)誤累加起來(lái),需用序列視頻的方法提供信息對(duì)初始模型的參數(shù)進(jìn)行更新。為不斷更新背景圖像的參數(shù)分布,引用參數(shù)更新率 (常數(shù))。設(shè) 和 為時(shí)刻t點(diǎn)i的期望和方差, 為時(shí)刻t+1采集點(diǎn)i的顏色值,t+1時(shí), 背景模型為 。
2.2 陰影模型
在可見(jiàn)光點(diǎn)光源和散射源照射下的情況下,假設(shè)任意一點(diǎn)的彩色光強(qiáng)值為x,則 , E為照明條件下函數(shù),%d為波長(zhǎng)參數(shù),%j為反射系數(shù),為
為點(diǎn)光源的強(qiáng)度,Ca為散射源的強(qiáng)度,L為光源的方向,N為表面的法向量,是半影系數(shù)轉(zhuǎn)變成為沒(méi)有陰影的系數(shù)。幀F(xiàn)k陰影的描述通過(guò)照明變化進(jìn)行,在RGB空間形成的對(duì)角形矩陣的模型: , 和 為背景Bk和幀F(xiàn)k陰影像素RGB值。顏色比率,, 都小于1,為相關(guān)聯(lián)的變量,場(chǎng)景出現(xiàn)不同是在不同的時(shí)刻情況下,在短時(shí)間內(nèi)可以近似認(rèn)為不變量。
2.3 陰影的屬性
戶外陰影特征據(jù)分析如下:覆蓋的像素RGB分量數(shù)值降低;陰影像素的藍(lán)色分量在散射源的作用下其比例上升;若空間上目標(biāo)內(nèi)部無(wú)空缺,在目標(biāo)內(nèi)部陰影不會(huì)出現(xiàn),由于陰影必須和背景緊挨著;在此陰影情況下區(qū)域紋理不被影響;同時(shí)陰影會(huì)保持一段時(shí)間。
2.4 本文算法
(1)運(yùn)動(dòng)目標(biāo)的檢測(cè)。在文獻(xiàn)[3]中,通過(guò)對(duì)背景拆分得到開(kāi)始運(yùn)動(dòng)目標(biāo)M1。用兩種方法:對(duì)當(dāng)前幀和背景的加權(quán)的平均數(shù)值進(jìn)行背景刷新。IB是瞬間背景,由Bk中目標(biāo)M1內(nèi)的像素和幀F(xiàn)k中目標(biāo)M1掩模型外的像素兩部分?jǐn)?shù)量組成,Bk+1由IB和Bk加權(quán)平均計(jì)算: 為變換后的速度,取值一般0.1。
(2)精簡(jiǎn)初始陰影像素。設(shè)r、g、b顏色的分量為幀的分量,R、G、B顏色的分量為背景的分量。檢測(cè)中陰影屬性(1)每個(gè)像素顏色分量與背景相應(yīng)分量比較,是否較小,排除不屬于陰影的像素。當(dāng),p(x)為背景的像素;當(dāng)為造成的錯(cuò)誤檢測(cè)在運(yùn)動(dòng)的目標(biāo)、噪聲和陰影方面的檢測(cè)模型。初始化陰影掩模,則。與M1比,M2中運(yùn)動(dòng)目標(biāo)的像素涉及到,計(jì)算量會(huì)發(fā)生變化在陰影區(qū)域被保留或減少步驟。檢測(cè)藍(lán)色分量。令 ,據(jù)戶外陰影屬性,比和大。初始化陰影掩模,則 , 。剔除M3中不屬于陰影的像素。
(3)反射率(相同)在表面的分割。文獻(xiàn)[1]介紹反射率圖像分割標(biāo)準(zhǔn)基于相鄰像素基礎(chǔ)上,如: 為相鄰像素亮度,%j1、%j2為反射比率。反射比率不受照明方向、亮度、反射函數(shù)及表面幾何性的影響。空間上顏色的分割。設(shè)p1,p2為兩個(gè)相鄰點(diǎn),u和v為相鄰點(diǎn)各顏色分量,p1,p2連續(xù)性: ,因此 是RGB空間內(nèi)的函數(shù),此函數(shù)是連續(xù)的,若此函數(shù)以幀的形式則相鄰的兩個(gè)點(diǎn)在同一表面。三通道RGB檢測(cè)對(duì)空間分割更精確,同時(shí)對(duì)顏色較敏感。在幀F(xiàn)K上對(duì)掩模M3覆蓋面對(duì)反射率進(jìn)行分割,所分割得尺寸進(jìn)行濾波,形成兩個(gè)子區(qū)域集合:區(qū)域集合 和區(qū)域集合。
(4)顏色的形變校正。計(jì)算顏色的形變 。輸入?yún)^(qū)域和。中多數(shù)區(qū)域?yàn)殛幱埃鴧^(qū)域?yàn)楸砻娌煌闹車(chē)繕?biāo)的背景。依據(jù)為空間相鄰、區(qū)域顏色相近。找到顏色的形變 區(qū)域?qū)υ趦蓚€(gè)區(qū)域集合中,即為被陰影覆蓋的區(qū)域和背景的區(qū)域。設(shè) 區(qū)域集合中的第j個(gè)子區(qū)域和 區(qū)域集合中的第i個(gè)子區(qū)域滿足所要求的條件,則(顏色的形變)的計(jì)算如下:
分子和分母RGB分量的平均數(shù)值。陰影覆蓋表面特征:多種表面出現(xiàn)相應(yīng)顏色的形變比率 多種以及滿足要求的區(qū)域?qū)σ彩嵌鄠€(gè)。根據(jù)距離對(duì)這些顏色的形變進(jìn)行分類(lèi),確定該類(lèi)的 采用加權(quán)平均辦法,并顏色的形變?cè)O(shè)有n個(gè):,其中wi為對(duì)應(yīng) 子區(qū)域的像素個(gè)數(shù)。不同表面的顏色的形變集合,校正集合D的顏色的形變。在 子區(qū)域?qū)現(xiàn)K校正顏色得到 ,與背景Bk對(duì)應(yīng)區(qū)域的顏色相匹配。設(shè) 中區(qū)域的平均值 為顏色向量,均值為 為對(duì)應(yīng)背景Bk顏色向量,定義兩個(gè)向量之間的夾角為:,表示該區(qū)域?yàn)殛幱霸诮嵌群苄r(shí),陰影掩模 在子區(qū)域校驗(yàn)后得到。
(5)校正紋理。陰影區(qū)域是否被遺漏和在陰影中目標(biāo)的區(qū)域被排除可以使用校正紋理的方法。用比較簡(jiǎn)單的一階求導(dǎo)的方法對(duì)圖像計(jì)算找到不同之處。子區(qū)域?yàn)殛幱氨砻餍∮陂撝?,子區(qū)域?yàn)槟繕?biāo)表明大于閾值。陰影的掩模和目標(biāo)的掩模 通過(guò) 校正紋理得到 。
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論
通過(guò)多次采集圖像實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
表面的劃分出現(xiàn)錯(cuò)誤是因?yàn)槔脗鹘y(tǒng)方法分割目標(biāo)是不完全的。本文方法使得分割的結(jié)果比較完整。在的陰影中包含兩個(gè)不同表面的顏色的形變,目標(biāo)分割使用本文方法是較完整的,對(duì)其中一個(gè)表面劃分是不會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤。本文方法較好地完成了陰影地檢測(cè)。
4 結(jié)論
由于傳統(tǒng)運(yùn)動(dòng)檢測(cè)算法存在不完善地方,在視頻特征不清楚的情況下提出陰影檢測(cè)的算法。最終發(fā)現(xiàn)陰影檢測(cè)的算法準(zhǔn)確并且適用。此外,室內(nèi)陰影檢測(cè)能使用如下算法:針對(duì)室內(nèi)陰影模型特點(diǎn),相應(yīng)調(diào)整藍(lán)色檢測(cè)步驟,提出的框架算法。室內(nèi)光線復(fù)雜或簡(jiǎn)單,檢測(cè)也相應(yīng)的有簡(jiǎn)有繁。這是下一步攻關(guān)的難點(diǎn)。
參考文獻(xiàn):
[1] 朗銳.數(shù)字圖像處理學(xué)[M].北京:北京希望電子出版社,2003:232-305.
篇2
[關(guān)鍵詞]核酸檢測(cè);血液篩查;輸血風(fēng)險(xiǎn);血液安全;轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴(kuò)增技術(shù)
輸血相關(guān)傳染病的預(yù)防和控制是全社會(huì)關(guān)注的焦點(diǎn)之一。2010年,國(guó)家衛(wèi)生與計(jì)劃生育委員會(huì)(原衛(wèi)生部)確定在全國(guó)15家采供血機(jī)構(gòu)開(kāi)展核酸檢測(cè)(NAT)試點(diǎn)工作,以進(jìn)一步保證血液檢測(cè)質(zhì)量,提升我國(guó)無(wú)償獻(xiàn)血者血液檢測(cè)水平。到目前NAT技術(shù)已經(jīng)廣泛運(yùn)用于全國(guó)各地血站的血液篩檢。該技術(shù)的檢測(cè)靈敏度較ELISA檢測(cè)方法高,能顯著縮短病原體檢測(cè)的窗口期,從而降低輸血傳播病毒的殘余風(fēng)險(xiǎn)50%以上。但NAT技術(shù)從理論上并不能完全消除“窗口期”,國(guó)外已有經(jīng)核酸檢測(cè)后仍發(fā)生輸血后感染的病例報(bào)道,包括HIV和HBV。本中心2010年11月正式將NAT技術(shù)應(yīng)用于血液篩查項(xiàng)目中,對(duì)全部無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本進(jìn)行HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA核酸檢測(cè)。本研究通過(guò)對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本的常規(guī)血清學(xué)及核酸檢測(cè)結(jié)果的分析,以評(píng)估核酸檢測(cè)的檢測(cè)功效,以及本地獻(xiàn)血者人群的感染狀況?,F(xiàn)將檢測(cè)結(jié)果報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1一般資料
2011年1月~2014年12月,廣州血液中心采集的無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本1146740例。所有無(wú)償獻(xiàn)血者均符合現(xiàn)行的衛(wèi)生部《獻(xiàn)血者健康檢查要求》(GB18467-2011)。血液采集后同時(shí)留取核酸檢測(cè)標(biāo)本和酶免檢測(cè)標(biāo)本管各一支。核酸檢測(cè)標(biāo)本采集、保存和處理等均嚴(yán)格按照衛(wèi)生部核酸檢測(cè)試點(diǎn)技術(shù)要求操作。
1.2主要儀器與試劑
核酸檢測(cè)儀器:Grifols公司(原諾華診斷公司)PROCLEIX TIGRIS全自動(dòng)核酸檢測(cè)分析系統(tǒng),試劑配置恒溫箱(RPI)。試劑為PROCLEIXULTRIO Assay核酸聯(lián)檢試劑盒和核酸鑒別試劑盒(Discriminatory Assay)。核酸檢測(cè)試劑批號(hào):(593226,614952,624775,116153等)。血清學(xué)檢測(cè)儀器:STAR全自動(dòng)加樣儀和全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀(FAME24/30)。ELISA檢測(cè)主要試劑包括乙肝表面抗原試劑盒(法國(guó)梅里埃,批號(hào)B11FA,20110704;上海科華:批號(hào)201101031,201201011,201302011)、丙型肝炎抗體試劑盒(美國(guó)強(qiáng)生ORTHO:批號(hào)EXE187,EXE208;上??迫A:批號(hào)201103011,201202031,201303011)及人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIVl/2)抗原抗體檢測(cè)試劑盒(法國(guó)伯樂(lè),批號(hào)1F0189,280213,3F0259;北京萬(wàn)泰,批號(hào)1201 10204,120121 120,12013 1022)。
1.3檢測(cè)策略
血液標(biāo)本采用血清學(xué)和NAT并行檢測(cè)操作策略;對(duì)核酸檢測(cè)單獨(dú)反應(yīng)性標(biāo)本進(jìn)行分項(xiàng)鑒別試驗(yàn)。
1.4檢測(cè)方法
采用PROCLEIX TIGRIS 全自動(dòng)核酸檢測(cè)分析系統(tǒng)(TMA方法)對(duì)血液核酸標(biāo)本進(jìn)行單人份聯(lián)合檢測(cè)(HIV-1/HCV/HBV);對(duì)核酸檢測(cè)單獨(dú)反應(yīng)性標(biāo)本進(jìn)行分項(xiàng)鑒別試驗(yàn);核酸檢測(cè)結(jié)果反應(yīng)性結(jié)果由檢測(cè)系統(tǒng)軟件自動(dòng)判定,其判定標(biāo)準(zhǔn)為樣本的S/CO值≥1。采用兩種不同廠家的ELISA試劑對(duì)獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行血清學(xué)HBsAg、HCVAb、HIVAgAb檢測(cè),嚴(yán)格執(zhí)行說(shuō)明書(shū)進(jìn)行相關(guān)操作,通過(guò)陰陽(yáng)性對(duì)照及室內(nèi)質(zhì)控品來(lái)控制試劑盒的質(zhì)量和檢測(cè)的有效性;血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性的判定:樣本OD≥cut off值。
1.5檢測(cè)原理
Grifols核酸檢測(cè)試劑是以轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增(transcription-mediated amplification,TMA)技術(shù)原理來(lái)檢測(cè)病毒核酸的方法。其檢測(cè)基本原理是:利用特異性的目標(biāo)捕獲試劑和磁微珠分離純化被檢測(cè)病毒核酸分子,再通過(guò)TMA技術(shù)來(lái)擴(kuò)增HBVDNA、HCV RNA和HIV-1 RNA(1型)的核酸片斷,最后通過(guò)雜交保護(hù)(HPA)方法檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物。試劑中含有內(nèi)標(biāo)分子,用以監(jiān)測(cè)整個(gè)反應(yīng)過(guò)程,避免出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理和分析,對(duì)計(jì)數(shù)資料進(jìn)行x2檢驗(yàn),P
2結(jié)果
2.1血清學(xué)與核酸檢測(cè)結(jié)果的比較
對(duì)1 146 740例獻(xiàn)血者血液標(biāo)本,核酸檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率為0.97%,低于血清學(xué)(HBsAg,HCVAb,H1VAbAg三項(xiàng)之和)的檢測(cè)陽(yáng)性率1.66%,二者之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=2128.4,P
2.2核酸檢測(cè)
4年中Grifols單人份核酸檢測(cè)系統(tǒng)的總陽(yáng)性率為0.97%,并且陽(yáng)性率呈現(xiàn)逐年緩慢增加的趨勢(shì)。在對(duì)每年的檢測(cè)陽(yáng)性率進(jìn)行比較時(shí),各年度間檢測(cè)陽(yáng)性率未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=2.442,P
2.3血清學(xué)合格標(biāo)本中核酸檢測(cè)情況
在1114428例血清學(xué)檢測(cè)合格標(biāo)本中,單人份核酸檢測(cè)共檢出2457例核酸反應(yīng)性樣本,核酸單獨(dú)反應(yīng)性比率為0.22%;在對(duì)每年檢測(cè)陽(yáng)性率進(jìn)行比較時(shí),各年度間血清學(xué)檢測(cè)合格標(biāo)本其N(xiāo)AT檢測(cè)陽(yáng)性率之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=16.506,P
2.4核酸鑒別結(jié)果
在2457例核酸單獨(dú)反應(yīng)性標(biāo)本中,鑒別試驗(yàn)反應(yīng)性的樣本為718例,其中,HBV-DNA 711例,HCV-RNA 4例,HIV-RNA 3例,獻(xiàn)血者中核酸單獨(dú)陽(yáng)性的樣本大多屬于HBV感染,HBV DNA鑒別陽(yáng)性率與另外兩者間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=2091.464,P
3討論
目前,國(guó)內(nèi)外應(yīng)用于血液篩查的核酸檢測(cè)技術(shù)主要有TMA及PCR兩種。我中心使用的是Grills公司基于TMA技術(shù)的核酸檢測(cè)試劑,對(duì)全部獻(xiàn)血者樣本進(jìn)行單人份核酸檢測(cè)。這種檢測(cè)方法的靈敏度高,反應(yīng)條件簡(jiǎn)單,擴(kuò)增效率高,可以防止低拷貝的病毒陽(yáng)性血液的漏檢。其分析靈敏度為:HBVDNA 10.4IU/mL,HCV RNA 3.0IU/mL和HIV RNA45.0IU/mL。并且該方法的整個(gè)反應(yīng)過(guò)程在1個(gè)試管中進(jìn)行,因此也減少了污染發(fā)生的可能。本研究顯示,廣州地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本的核酸陽(yáng)性檢出率明顯低于酶免檢測(cè)項(xiàng)目陽(yáng)性檢出率(P
在獻(xiàn)血者血液篩查中引入核酸檢測(cè)技術(shù),其主要目的是檢測(cè)出原有血清學(xué)檢測(cè)可能漏掉的具有感染性的獻(xiàn)血者樣本。在本研究中的1114428份血清學(xué)檢測(cè)合格標(biāo)本中,單人份核酸檢測(cè)共檢測(cè)出反應(yīng)性樣本2475例,陽(yáng)性檢出率為0.22%(2457/1114428),結(jié)果明顯高于大連和沈陽(yáng)地區(qū)0.07%,這可能與各地區(qū)病毒流行率差異、檢測(cè)樣本數(shù)量、使用試劑差異,以及檢測(cè)模式(單人份與多人份混樣檢測(cè))不同有關(guān)。在對(duì)這些核酸單獨(dú)陽(yáng)性樣本的鑒別檢測(cè)中,共檢出718例陽(yáng)性結(jié)果,鑒別陽(yáng)性檢出率為29.22%。這個(gè)鑒別率與汪德海等報(bào)道的一致,而低于大連,杭州等地的數(shù)據(jù)。而出現(xiàn)核酸檢測(cè)聯(lián)檢反應(yīng)性,而鑒別試驗(yàn)全部為非反應(yīng)性的原因可能有:(1)聯(lián)檢結(jié)果假陽(yáng)性。這可能是由于酶免及核酸檢測(cè)平行進(jìn)行,檢測(cè)人員若操作不規(guī)范,導(dǎo)致陽(yáng)性標(biāo)本的小范圍污染,增加聯(lián)檢結(jié)果假陽(yáng)性的可能;或由于檢測(cè)試劑本身的非特異性反應(yīng)。(2)鑒別試驗(yàn)的假陰性。如病毒濃度處于極低的濃度水平,由于病毒顆粒在血漿中的泊松分布,導(dǎo)致取樣時(shí)未能吸取到帶有病毒的樣本;或可能是因不合適的儲(chǔ)存條件,不良的運(yùn)送,干擾物質(zhì)的存在,導(dǎo)致樣本中病毒的降解,也會(huì)造成鑒別試驗(yàn)假陰性的結(jié)果。由于我國(guó)乙肝的流行率相對(duì)較高,因此獻(xiàn)血者中核酸單獨(dú)陽(yáng)性的樣本大多屬于HBV感染。而HBV感染,特別是隱匿性乙肝感染(OBI)的病毒濃度通常很低,因此出現(xiàn)上述低濃度樣本的可能性很大。已有文章報(bào)道,對(duì)于不可鑒別的樣本,采用其他核酸檢測(cè)方法,或乙肝感染標(biāo)志物(如乙肝核心抗體)進(jìn)行檢測(cè)時(shí),部分樣本仍然呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。提示這些不可鑒別的樣本中存在一定比例的真陽(yáng)性。
篇3
關(guān)鍵詞:核酸適體;生物醫(yī)學(xué);應(yīng)用
1基于核酸適體的生物醫(yī)學(xué)診斷
1.1生物大分子檢測(cè)
隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃的完成,研究蛋白質(zhì)等生物大分子的具體跟蹤檢測(cè)高靈敏分析方法已經(jīng)是目前基因組學(xué)的研究熱點(diǎn)和重點(diǎn)。原來(lái)的蛋白質(zhì)檢測(cè)一般是根據(jù)抗原/抗體免疫分析的方式來(lái)進(jìn)行檢測(cè),一般分析出來(lái)的數(shù)據(jù)都會(huì)受到抗體性質(zhì)的干擾。而核酸適體能夠與蛋白質(zhì)進(jìn)行特異性結(jié)合,在不同溫度、不同鹽濃度絡(luò)合劑條件下能夠進(jìn)行特異性變性與復(fù)性研究,所以在蛋白質(zhì)分析檢測(cè)上的使用越來(lái)越受到各方面重視。運(yùn)用核酸適體能夠通過(guò)GIC方法實(shí)施擴(kuò)增的特點(diǎn),增強(qiáng)酶聯(lián)核酸適體診斷方法的檢測(cè)精確度,把兩種不一樣的核酸適體組合到蛋白或蛋白復(fù)合體兩個(gè)相近的結(jié)合位置上,兩種核酸適體的游離末端通過(guò)互補(bǔ)堿基鏈接起來(lái),最終根據(jù)GIC方式實(shí)施實(shí)時(shí)擴(kuò)增。與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比較,該種新型檢測(cè)方式非常明顯地應(yīng)用了核酸適體在發(fā)展各種可取代抗體的蛋白靶的功能,在測(cè)定體內(nèi)蛋白質(zhì)含量和研究蛋白質(zhì)的功能以及對(duì)疾病的早期診斷等方面擁有非常大的使用價(jià)值。
1.2腫瘤細(xì)胞鑒別分析
從分子水平實(shí)現(xiàn)早期癌細(xì)胞的準(zhǔn)確檢測(cè)具有非常重要的意義,因此設(shè)計(jì)和發(fā)展特異性分子探針成為癌細(xì)胞早期檢測(cè)的關(guān)鍵因素。研究顯示,將前列腺專一性膜抗原(GFBE)的核酸適體連接到具有近紅外光性能的量子點(diǎn)上,可以特異性地檢測(cè)前列腺癌細(xì)胞,為核酸適體應(yīng)用于活細(xì)胞及生物體內(nèi)的分子檢測(cè)提供了新思路。在癌癥早期檢測(cè)中,從病人血液或唾液等收集到的惡性腫瘤細(xì)胞含量通常較低,所以發(fā)展一種從低含量體液中聚集并檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的方案成為目前癌癥早期診斷的核心,運(yùn)用先進(jìn)的雙功能納米粒子作用于白血病細(xì)胞的加速富集與檢測(cè)的速度。運(yùn)用一種修飾有核酸適體的吸引力納米粒子實(shí)施靶細(xì)胞的提取和聚集,還有一種摻雜有熒光色素的納米粒子添加到待檢測(cè)系統(tǒng)中完場(chǎng)信號(hào)放大,氧化鐵混合的二氧化硅納米粒子接觸面積大,這相比較于一般微米尺寸粒子擁有更加強(qiáng)大的萃取功能,所以相對(duì)于免疫表型等復(fù)雜的檢測(cè)方式,這種方式僅僅需要完成分析即可。這種方法不單單可以從全血樣本中反復(fù)提取得到靶細(xì)胞,而且更具有研究意義的是,可以廣泛使用于多種癌細(xì)胞的同時(shí)提取和鑒定。
1.3腫瘤標(biāo)志物的甄定
癌癥的臨床診斷現(xiàn)在還是主要依賴于影像學(xué)檢查組織和細(xì)胞表面形態(tài),一般情況分辨率不高,不能夠完成癌癥的早期診斷等問(wèn)題,特殊檢測(cè)惡性腫瘤相關(guān)組織和細(xì)胞標(biāo)志物是完成癌癥早期診斷的一個(gè)十分正確的方法。雖然腫瘤標(biāo)志物在很早之前就用于癌癥的臨床實(shí)驗(yàn)診斷,但是現(xiàn)在腫瘤標(biāo)志物種類(lèi)相對(duì)較少,特異性和靈敏度不夠準(zhǔn)確,并且不能夠表明各項(xiàng)惡性腫瘤產(chǎn)生機(jī)制,不能準(zhǔn)確地用于癌癥的早期診斷。由于抗體的蛋白芯片雖然已經(jīng)被努力地用來(lái)尋找與惡性腫瘤有關(guān)的蛋白質(zhì)標(biāo)志物,但是因?yàn)閻盒阅[瘤的多樣性,以及抗體制造和使用上的特異性而效果不明顯。所以,現(xiàn)階段急需找到一種能夠直接得到癌變組織細(xì)胞的特征分子標(biāo)志,快速發(fā)現(xiàn)癌癥發(fā)生、發(fā)展期間的生物標(biāo)志物,然后完成這些生物標(biāo)志物特異靈敏檢測(cè)。
2基于核酸適體的靶向治療
分子水平靶向治療的核心是使癌癥治療更加有效。低毒和無(wú)副作用用于篩選獲得的核酸適體擁有比抗體還要好的化學(xué)性質(zhì),可以與蛋白特異性結(jié)合而且能夠間接影響蛋白功能,并且不會(huì)引起體內(nèi)免疫原反應(yīng),而且滲透性好,有可能成為新的靶向治療方式并且許多核酸適體不可以將細(xì)胞完全吸收。為了完成細(xì)胞內(nèi)的靶向分子轉(zhuǎn)送,開(kāi)展高效的核酸適體載體體系已經(jīng)成為該領(lǐng)域研究的核心問(wèn)題。通過(guò)觀察癌癥細(xì)胞細(xì)胞核酸適體的內(nèi)化過(guò)程,可以觀察到內(nèi)化的核酸適體可以與鐵傳遞蛋白的內(nèi)涵體相互結(jié)合,這就說(shuō)明核酸適體能夠定向地進(jìn)入靶向細(xì)胞,并且不存在細(xì)胞毒性,可以將抗癌藥物和靶向癌細(xì)胞表面分子的核酸適體抗體等相連接,能夠?qū)⑺幬锾禺愋暂斔偷桨┰?,不單單能夠增?qiáng)化療效果,而且還可以降低藥物毒性,把容易被生物降解的高分子與抗核酸適體相結(jié)合。
3結(jié)語(yǔ)
腫瘤細(xì)胞及其標(biāo)志物的核酸適體,這些核酸適體被大量地運(yùn)用于生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)疾病標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)以及靶向治療。目前已經(jīng)可以根據(jù)核酸適體對(duì)癌癥病人樣本進(jìn)行染色,根據(jù)流式細(xì)胞計(jì)數(shù)等方式完成對(duì)癌癥的快速診斷。除此之外,只要是有關(guān)抗體的診斷領(lǐng)域,大部分都能夠用核酸適體替代,能夠彌補(bǔ)抗體在診斷領(lǐng)域應(yīng)用中的缺點(diǎn)和不足之處。
參考文獻(xiàn):
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[2]雷麗紅,傅迎春,徐霞紅,等.基于核酸適體的電化學(xué)生物傳感器[J].化學(xué)進(jìn)展,2009(4).
篇4
對(duì)此,寧夏教育考試院官網(wǎng)12月25日“情況說(shuō)明”稱,為做好考試疫情防控和組考工作,考前寧夏教育考試院先后通過(guò)4種方式告知考生,參加考試必須按照考點(diǎn)疫情防控要求進(jìn)入考場(chǎng)。其中,在12月17日還向考生發(fā)送了短信或微信提醒,所有考生應(yīng)在首場(chǎng)考試時(shí)持48小時(shí)內(nèi)核酸檢測(cè)陰性結(jié)果紙質(zhì)證明參加考試。
具體通過(guò)哪些方式告知考生,前述“情況說(shuō)明”介紹:
一是12月7日寧夏教育考試院通過(guò)“中國(guó)研究生招生信息網(wǎng)”(研考唯一報(bào)名網(wǎng)站)、“寧夏教育考試院官網(wǎng)”了《寧夏2022年全國(guó)碩士研究生招生考試疫情防控通告》,告知考生“考試疫情防控措施將根據(jù)疫情防控形勢(shì)變化適時(shí)調(diào)整,請(qǐng)考生關(guān)注寧夏教育考試院官方網(wǎng)站,及時(shí)了解疫情防控相關(guān)要求”。
二是根據(jù)自治區(qū)疫情防控工作要求,寧夏教育考試院分別于12月16日在“中國(guó)研究生招生信息網(wǎng)”、17日在“寧夏教育考試院官網(wǎng)”了《寧夏2022年全國(guó)碩士研究生招生考試疫情防控通告(二)》,明確“所有考生應(yīng)在首場(chǎng)考試時(shí)持48小時(shí)內(nèi)核酸檢測(cè)陰性結(jié)果紙質(zhì)證明(核酸檢測(cè)出結(jié)果的時(shí)間在2021年12月23日早8:00后)參加考試”。
篇5
2022年春節(jié)馬上就要到了,大家開(kāi)始關(guān)注回家相關(guān)政策,那么2022年春節(jié)回家最新規(guī)定是什么?2022年春節(jié)回家需要隔離14天嗎 ?春節(jié)回家需要核酸檢測(cè)嗎?下面小編為大家?guī)?lái)2022年春節(jié)回家疫情最新規(guī)定,感興趣的小伙伴一起來(lái)看一下吧。
其實(shí),春節(jié)回家是否需要隔離,這樣看情況而定。如果在疫情低風(fēng)險(xiǎn)區(qū)回家,并且沒(méi)有接觸疑似確診患者,還有持綠碼通行,那么是不需要隔離14天的。 但是,在你回家前,若你所回的地區(qū)有當(dāng)?shù)卣▓?bào)有確診病例,且被升級(jí)為中高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū),就需要隔離,且部分地區(qū)需持綠碼健康碼和核酸檢測(cè),若無(wú)法提供就要隔離。在疫情高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)逗留的人,還是建議就地過(guò)年比較好。
比如上一年安徽疫情隔離規(guī)定,對(duì)于高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)需要集中隔離14天,進(jìn)行2次核酸檢測(cè),中風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)需要在社區(qū)集中隔離管理,進(jìn)行2次核酸檢測(cè),低分險(xiǎn)地區(qū)的合肥,如果當(dāng)?shù)赜写_診病例,需要持有3日有效核酸檢測(cè)陰性證明,如果本土無(wú)確診病例,則可以憑借綠碼通行。
以上就是春節(jié)回家需要隔離14天嗎介紹,希望對(duì)大家有所幫助。
(來(lái)源:文章屋網(wǎng) )
篇6
一是建立健全應(yīng)急指揮體系。
核酸檢測(cè)陽(yáng)性冷鏈?zhǔn)称窇?yīng)急處置工作由市疫情防控指揮部統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo),進(jìn)口冷鏈?zhǔn)称繁O(jiān)管組牽頭協(xié)調(diào),市直及駐各有關(guān)單位按職責(zé)分工開(kāi)展。各縣區(qū)疫情防控應(yīng)急指揮部及其冷鏈?zhǔn)称饭ぷ鳈C(jī)構(gòu)在各職能部門(mén)的指導(dǎo)下具體負(fù)責(zé)現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)急處置工作。
二是加強(qiáng)預(yù)防和監(jiān)測(cè)。
各級(jí)市場(chǎng)監(jiān)管部門(mén)要督促進(jìn)口冷鏈?zhǔn)称飞a(chǎn)經(jīng)營(yíng)單位和個(gè)人嚴(yán)格執(zhí)行《關(guān)于進(jìn)一步加強(qiáng)進(jìn)口冷鏈?zhǔn)称饭芸氐耐ǜ妗芬?,?qiáng)化進(jìn)口冷鏈?zhǔn)称饭芸?;要加?qiáng)冷鏈?zhǔn)称芬咔楸O(jiān)測(cè),對(duì)重點(diǎn)場(chǎng)所、冷鏈?zhǔn)称?、直接接觸食品的貯存容器、工具、設(shè)備、環(huán)境及從業(yè)人員不間斷開(kāi)展核酸檢測(cè);各縣區(qū)、各有關(guān)單位應(yīng)選取有資質(zhì)的核酸檢測(cè)機(jī)構(gòu),按照相關(guān)文件要求,規(guī)范進(jìn)行冷鏈?zhǔn)称凡蓸訖z測(cè)。
篇7
艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合癥,由感染“HIV”病毒引起。HIV是一種能攻擊人體免疫系統(tǒng)的病毒,它可以侵襲人的免疫體系,并終極損壞人體的免疫功效。隨著人體免疫力的下降,人會(huì)越來(lái)越頻繁地感染上各種致病微生物,而且感染的水平也會(huì)變得越來(lái)越來(lái)重,終極會(huì)因各種復(fù)合感染而導(dǎo)致逝死亡。艾滋病嚴(yán)重威脅人類(lèi)的身心健康,當(dāng)我們出現(xiàn)一些異樣的癥狀后,應(yīng)該選擇什么樣的檢測(cè)方法,怎樣確診自己是否患有艾滋病就顯得格外重要。按規(guī)定的檢測(cè)程序?qū)Π滩〉臋z測(cè)方法研討如下。
1 材料和方法
1.1 材料:選取我院臨床初篩檢測(cè)病例72例,其中男性40例,女性32例。年齡28-63歲,平均39歲。
1.2 臨床癥狀:初期的開(kāi)始癥狀像傷風(fēng)、流感、全身疲勞無(wú)力、食欲減退、發(fā)熱、體重減少、隨著病情的加重,癥狀日見(jiàn)增多,如皮膚、粘膚出現(xiàn)白色念球菌感染,單純皰疹、帶狀皰疹、紫斑、血腫、血皰、滯血斑、皮膚容易損傷,傷后出血不止等。
1.3 方法:目前作為診斷手段使用的檢測(cè)主要包括抗HIV病毒抗體檢測(cè)、核酸檢測(cè)和抗原檢測(cè)。其中對(duì)病毒抗體的檢測(cè)是艾滋病初篩實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的方法
1.3.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA):目前應(yīng)用的ELISA法有8種之多。它們的特異性和敏感性超過(guò)99%。在一些特殊情況下,當(dāng)抗體檢測(cè)無(wú)法滿足HIV感染診斷的需要時(shí),病毒分離及測(cè)定、核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)可作為輔助手段使用,這包括對(duì)非典型血清學(xué)反應(yīng)樣品的診斷、HIV感染的窗口期診斷、新生兒早期診斷和對(duì)特殊樣品的診斷。
1.3.2 明膠顆粒凝集法(PA):它是快速、簡(jiǎn)便的一種篩選方法。PA的基本過(guò)程是先將樣品稀釋,然后分別加入經(jīng)抗原致敏的和未致敏的明膠顆粒,混勻后保溫(一般為室溫)。當(dāng)血清中有HIV抗體存在時(shí),經(jīng)抗原致敏的明膠顆粒與抗體發(fā)生抗原抗體反應(yīng),根據(jù)明膠顆粒在孔中的凝集情況判讀結(jié)果。PA操作簡(jiǎn)便,無(wú)需特殊儀器設(shè)備,適合對(duì)少量標(biāo)本的檢測(cè)。是對(duì)大量人群初篩實(shí)驗(yàn)使用的方法,例公民義務(wù)獻(xiàn)血的初篩檢測(cè)。
1.3.3 免疫熒光試驗(yàn)(IFA):基本原理為應(yīng)用H9或HUT78培養(yǎng)細(xì)胞作為載體,用HIV感染細(xì)胞,該細(xì)胞內(nèi)就會(huì)含有HIV抗原,將HIV感染的淋巴細(xì)胞涂于玻片上固定,制備為抗原片,加入待檢血清,待檢血清中的抗 HIV抗體與抗原結(jié)合后,再與熒光素標(biāo)記的抗人Ig結(jié)合,在熒光顯微鏡下可見(jiàn)到細(xì)胞內(nèi)有黃綠色熒光。
1.3.4 免疫印跡試驗(yàn):主要用于確認(rèn)試驗(yàn),基本原理是HIV全病毒抗原經(jīng)過(guò)SDSPAGE電泳,將分子量大小不等的蛋白帶分離開(kāi)來(lái),然后再把這些已經(jīng)分離的不同蛋白帶電轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。將此膜切割成條狀,每一條硝酸纖維素膜上均含有經(jīng)電泳分離過(guò)的HIV病毒抗原。將待檢血清樣品用稀釋液稀釋成1/100,再把它直接加到硝酸纖維素膜上,恒溫震蕩,使其充分接觸反應(yīng),血清中若含有抗HIV抗體,就會(huì)與膜條上的抗原帶相結(jié)合并呈現(xiàn)紫褐色。此確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室是初篩陽(yáng)性的標(biāo)本送檢省疾控的HIV確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室或市疾控的HIV中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的。
1.3.5 病毒核酸檢測(cè):是通過(guò)檢測(cè)HIV RNA水平來(lái)反映病毒載量,具有很高的靈敏度,使用適時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù),能夠在HIV感染的前2周檢測(cè)到病毒核酸。病毒核酸檢測(cè)方法可用于HIV的早期診斷,如窗口期輔助診斷、病程監(jiān)控、指導(dǎo)治療方案及療效測(cè)定、預(yù)測(cè)疾病進(jìn)程等。目前常用的測(cè)定方法有逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)(RT PCR)、核酸序列擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)(NASBA)、分支DNA雜交實(shí)驗(yàn)(bDNA)等。使用高靈敏度的適時(shí)熒光PCR技術(shù),能夠在HIV感染的前2周檢測(cè)到病毒核酸。此種檢測(cè)是在HIV感染確診之后,判定使用抗病毒藥物的檢測(cè)指標(biāo),現(xiàn)在可有省疾控中心的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室完成。
2 結(jié)果
經(jīng)過(guò)我院的檢測(cè)和分析后,14例送檢經(jīng)確認(rèn)實(shí)驗(yàn),未確診艾滋病感染。
3 討論
近年來(lái),HIV檢測(cè)技術(shù)取得了很大進(jìn)展,但是仍有不足的地方。例如ELISA法第四代試劑增加了P24抗原的檢測(cè), p24抗原檢測(cè)能夠在病毒開(kāi)始復(fù)制后檢測(cè)到血液中的可溶性p24抗原,但易出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,陽(yáng)性結(jié)果必須經(jīng)中和試驗(yàn)確認(rèn),該結(jié)果才可作為HIV感染的輔助診斷依據(jù)。還有病毒核酸檢測(cè)方法具有很高的靈敏度,對(duì)疾病進(jìn)展的監(jiān)測(cè)、抗病毒療效觀察和耐藥性監(jiān)測(cè)非常重要。但是,由于HIV基因的多樣性,沒(méi)有一套引物可以覆蓋所有的HIV序列,使檢測(cè)的敏感性又受到限制。
HIV感染的診斷是艾滋病預(yù)防控制工作的重要組成部分,建立敏感實(shí)用的檢測(cè)方法對(duì)于監(jiān)測(cè)、診斷或血液篩查,控制艾滋病的流行顯得尤為重要??偨Y(jié)以上討論的檢測(cè)方法,我們得出的結(jié)論是,既要提高檢測(cè)的敏感性、特異性,縮短窗口期,又要簡(jiǎn)便、快速和降低成本已成為HIV檢測(cè)技術(shù)發(fā)展的要求和方向,很多的研究正致力于尋找病毒檢測(cè)的替代技術(shù)。
參考文獻(xiàn)
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篇8
【關(guān)鍵詞】棘球蚴病;核酸檢測(cè);細(xì)粒棘球絳蟲(chóng);多房棘球絳蟲(chóng)
棘球蚴病(俗稱包蟲(chóng)病),是棘球?qū)俳{蟲(chóng)的中絳期幼蟲(chóng)寄生于人或動(dòng)物體內(nèi)引起的一種危害嚴(yán)重的人獸共患寄生蟲(chóng)病,呈世界性分布,被世界衛(wèi)生組織列為被忽視的熱帶病之一。目前全球公認(rèn)的棘球絳蟲(chóng)有五種,分別是細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)(E.granulosus)、多房棘球絳蟲(chóng)(E.multilocularis)、伏氏棘球絳蟲(chóng)(E.vo-geli)、少節(jié)棘球絳蟲(chóng)(E.oligarthrus)、石渠棘球絳蟲(chóng)(E.shiquicus)。細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)病呈全球性分布[1 ],在大洋洲、歐洲、亞洲、非洲和美洲等畜牧產(chǎn)業(yè)發(fā)達(dá)的地區(qū)發(fā)病率較高。全球每年遭受細(xì)粒棘球蚴病(囊型包蟲(chóng)病)和泡型棘球蚴病(泡型包蟲(chóng)病/泡球蚴病)危害的人數(shù)分別為300 萬(wàn)和65 萬(wàn)[2 ]。我國(guó)包蟲(chóng)病人群患病率為0 .24%,患病人數(shù)約17 .4 萬(wàn)[3 ],以囊型包蟲(chóng)病為主,這與全球流行情況基本一致。目前棘球蚴病的診斷依據(jù)主要包括流行病學(xué)史、臨床癥狀體征、病原學(xué)檢測(cè)[4 ]、核酸檢測(cè)[5 -6 ]、免疫學(xué)[7 -8 ]和影像學(xué)診斷。由于棘球蚴在人體內(nèi)發(fā)育較慢,早期體積較小,影像學(xué)技術(shù)(B超、CT、MRI)在感染早期不易發(fā)現(xiàn)病灶;感染早期,由于抗體水平較低或現(xiàn)有診斷試劑敏感性和特異性不高,免疫學(xué)檢測(cè)可能出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。因此,免疫學(xué)和影像學(xué)診斷技術(shù)都存在一定局限性,不利于棘球蚴病的早期診斷。核酸檢測(cè)技術(shù)具有所需樣本量少、敏感性高、特異性強(qiáng)、反應(yīng)快速等優(yōu)點(diǎn),已被廣泛應(yīng)用于腫瘤[9 ]、細(xì)菌感染[10 -11 ]、病毒感染及寄生蟲(chóng)?。?2 -14 ]等臨床診斷。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者針對(duì)棘球蚴病診斷進(jìn)行了一些核酸檢測(cè)技術(shù)的研發(fā)和應(yīng)用,本文綜述如下。
1 常規(guī)PCR
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)發(fā)明于20 世紀(jì)80 年代,即在體外模擬DNA合成過(guò)程,在酶促合成反應(yīng)條件下,通過(guò)控制溫度和時(shí)間對(duì)目的核酸片段進(jìn)行指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。因其靈敏度高、特異性好、成本低、省時(shí)高效等優(yōu)點(diǎn),逐漸成為核酸檢測(cè)的重要手段。2017 年,Hamza[15 ]等根據(jù)線粒體基因12SrRNA為靶標(biāo)建立了PCR方法,對(duì)48 只嚙齒動(dòng)物肝臟病灶檢測(cè),檢出5 只感染多房棘球絳蟲(chóng)。2019 年,Mary-am[16 ]等以細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)COX1 和NADH1 為目的基因建立PCR方法,分析了伊朗80 例棘球蚴病患者的臨床標(biāo)本,血清樣本的棘球絳蟲(chóng)基因陽(yáng)性率分別為15 .0%和10 .0%,包囊組織的棘球絳蟲(chóng)基因陽(yáng)性率分別為91 .3%和83 .8%。John[17 ]等以NADH1 和NADH5 為目的基因建立PCR方法,對(duì)來(lái)自羊及耗牛的85 份囊液標(biāo)本進(jìn)行鑒定,結(jié)果均為細(xì)粒棘球蚴,其中G1 基因型77 份,G3 基因型6 份,G6 基因型2 份,該研究首次在西藏牦牛體內(nèi)檢測(cè)到G6 基因型。少節(jié)棘球絳蟲(chóng)和伏氏棘球絳蟲(chóng)報(bào)道較少。2013 年,Soare[18 ]根據(jù)COX1 建立PCR方法,對(duì)人體分離的肝包囊進(jìn)行核酸擴(kuò)增和測(cè)序,最終證實(shí)病原體為少節(jié)棘球絳蟲(chóng)。2018 年,F(xiàn)ernanda[19 ]等根據(jù)COX1 建立PCR方法,對(duì)豚鼠分離的包囊進(jìn)行核酸檢測(cè),測(cè)序結(jié)果提示為伏氏棘球絳蟲(chóng)。
2 多重引物PCR
多重引物PCR(Multiplex-PCR)技術(shù)原理與常規(guī)PCR無(wú)差異,區(qū)別在于反應(yīng)體系中至少有兩對(duì)特異性引物,一次反應(yīng)即可完成多個(gè)目的基因的檢測(cè),大大提高了檢測(cè)效率。與常規(guī)PCR技術(shù)相比,mul-tiplex-PCR技術(shù)具有快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),在鑒別不同物種基因方面具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。2011 年,Molouk[20 ]等以NADH1 和rRNA為目的基因建立了multiplex-PCR方法,目的片段長(zhǎng)度分別為395 和117bp,可以鑒別多房棘球絳蟲(chóng)和細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)。2016 年,Ka-rin[21 ]等根據(jù)NADH1 和rRNA小亞基(Cest3 、Cest4 和Cest5)基因建立了multiplex-PCR方法,該方法能夠同時(shí)鑒別細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)和多房棘球絳蟲(chóng)感染,可用于監(jiān)測(cè)兩型包蟲(chóng)病混合流行情況。2018 年,Ger-ald[22 ]等利用細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的兩個(gè)特異性微衛(wèi)星(EgSca6 和EgScall)分別建立了PCR和mulitiple-PCR方法,PCR方法分辨指數(shù)分別為0 .824 和0.987 ,而mulitiple-PCR顯示出了極高的分辨指數(shù)(0.994),提示mulitiple-PCR方法有較好的應(yīng)用前景。根據(jù)遺傳學(xué)特征目前最廣為接受的理論[23 ],囊型棘球蚴病的致病原由4 個(gè)棘球絳蟲(chóng)復(fù)合種構(gòu)成:狹義細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)(E.granulosussensustrict)、奧氏棘球絳蟲(chóng)(E.ortleppi)、馬棘球絳蟲(chóng)(E.equinus)、加拿大棘球絳蟲(chóng)(E.canadensis)。2019 年,Jing[24 ]根據(jù)atp6 、NADH1 和rrnL序列作為檢測(cè)靶標(biāo)建立multi-plex-PCR方法,可以同時(shí)檢測(cè)狹義細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)、多房棘球絳蟲(chóng)和加拿大棘球絳蟲(chóng),multiplex-PCR鑒定結(jié)果與原始測(cè)序結(jié)果一致,對(duì)3 種棘球絳蟲(chóng)檢出限均為5pg/μL。用相同濃度3 種混合模板進(jìn)行檢測(cè),對(duì)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)、多房棘球絳蟲(chóng)、加拿大棘球絳蟲(chóng)的檢出限分別為50 、10 和5pg/μL,表明multi-plex-PCR在快速診斷和流行病學(xué)調(diào)查方面具有優(yōu)勢(shì)。2019 年,F(xiàn)an[25 ]等根據(jù)狹義細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)、多房棘球絳蟲(chóng)、加拿大棘球絳蟲(chóng)線粒體基因設(shè)計(jì)種屬特異性引物,并建立了multiplex-PCR方法,其中狹義細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)和加拿大棘球絳蟲(chóng)檢測(cè)限僅為0 .32pg,多房棘球絳蟲(chóng)檢測(cè)限為1 .6pg,除與石渠棘球絳蟲(chóng)有微弱交叉反應(yīng)外,可與其他7 種絳蟲(chóng)進(jìn)行鑒別,顯示了較好的敏感性和特異性。
3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-timePCR)利用熒光染料或探針,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)核酸擴(kuò)增過(guò)程中產(chǎn)生的熒光信號(hào),并通過(guò)Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確定量樣本目的基因的初始拷貝數(shù)。相比于常規(guī)PCR方法,Real-timePCR具有特異性更強(qiáng)、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn),已經(jīng)成為核酸定量檢測(cè)的重要手段。miRNA能夠在宿主的血清或血漿中穩(wěn)定存在,對(duì)于疾病診斷和療效評(píng)價(jià)具有重要意義,近年來(lái)已成為研究熱點(diǎn)。2017 年,Guo[26 ]等通過(guò)測(cè)序分析在疾病模型的小鼠血清中找到7 種多房棘球絳蟲(chóng)特異性miRNA,通過(guò)real-timePCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)emu-miRNA-10 和emu-miRNA-227 表達(dá)水平顯著上調(diào),對(duì)于疾病診斷和了解宿主-蟲(chóng)體相互作用具有重要意義。2018 年Alice[27 ]等利用U1snRNA和NADH5 基因片段建立了real-timePCR和微滴式數(shù)字PCR(dd-PCR)方法,檢測(cè)到泡球蚴病患者和患病動(dòng)物血清中循環(huán)游離DNA(ccf-DNA)均為陽(yáng)性,但由于泡球蚴病患者體內(nèi)檢測(cè)到的ccf-DNA濃度過(guò)低,目前該方法還不能用于泡球蚴病診斷。2019 年,Ren[28 ]等利用real-timePCR比較60 名健康人和47 名多房棘球絳蟲(chóng)病患者血清中3 種microRNA的表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)患者miRNA-483 -3p顯著上調(diào),可作為疾病診斷的候選標(biāo)志物。2019 年,Zahra[29 ]等建立real-timePCR方法并對(duì)30 名細(xì)粒棘球蚴病患者血漿進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)egr-miR-r71 和egr-let-7 表達(dá)上調(diào);術(shù)后3 個(gè)月和6 個(gè)月分別對(duì)患者血漿再次進(jìn)行檢測(cè),兩種miRNA表達(dá)水平明顯下調(diào),提示該方法可以用于疾病早期診斷和療效監(jiān)測(cè)。
4 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)
環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)是一種新型的核酸檢測(cè)方法,該方法不需要模板的熱變性、長(zhǎng)時(shí)間溫度循環(huán)、繁瑣的電泳和紫外觀察等過(guò)程,可以在等溫條件下一步完成,并通過(guò)肉眼讀取結(jié)果。因其具有簡(jiǎn)單快速、特異性強(qiáng)、成本低等優(yōu)點(diǎn),已成為核酸檢測(cè)技術(shù)的研究熱點(diǎn)。2014 年,Marion[30 ]利用NADN1 基因建立了一種高效的LAMP方法,可以準(zhǔn)確鑒別狹義細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)、馬棘球絳蟲(chóng)、奧氏棘球絳蟲(chóng)、加拿大棘球絳蟲(chóng)及獅棘球絳蟲(chóng)(E.felidis)。2016 年,Ahmed[31 ]根據(jù)線粒體基因NADH1 為靶標(biāo)建立了LAMP方法,檢測(cè)限為10fg,具有較高的敏感性,通過(guò)肉眼可以直接判斷陽(yáng)性結(jié)果,而且與血吸蟲(chóng)、片形吸蟲(chóng)、牛囊尾蚴等無(wú)交叉反應(yīng),具有流行區(qū)現(xiàn)場(chǎng)篩查的應(yīng)用價(jià)值。
5 基于PCR的其他檢測(cè)方法
PCR-RFLP技術(shù)(限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng))是用特異設(shè)計(jì)的引物擴(kuò)增目的基因,對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物片段進(jìn)行酶切處理,以檢測(cè)其多態(tài)性。2012 年Canan[32 ]等根據(jù)ITS-1 和NADH1 基因分別建立了PCR-RFLP和PCR-SSCP方法,其中PCR-RFLP可以通過(guò)不同的限制性切酶產(chǎn)物鑒別細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的基因型,而PCR-SSCP能夠通過(guò)肉眼就可以直接鑒別細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的基因型。2014 年,Cagrl[33 ]等根據(jù)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)和多房棘球絳蟲(chóng)線粒體特異性基因建立PCR-RFLP方法,分析4 種不同限制性內(nèi)切酶的酶切產(chǎn)物鑒別兩種蟲(chóng)體,其中3 種酶(MboⅠ、MboⅡ、AccⅠ)只能酶切多房棘球絳蟲(chóng)基因組PCR產(chǎn)物,而TSol只能酶切細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)基因組PCR產(chǎn)物,可以準(zhǔn)確鑒別兩種蟲(chóng)體。2019 年,F(xiàn)allahizadeh[34 ]等采用狹義細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)ITS-1 基因建立了PCR-RFLP方法,使用4 種不同的限制性內(nèi)切酶酶切PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。其中AluⅠ酶切產(chǎn)生800 和200bp,HpaⅡ酶切產(chǎn)生700 和300bp,Rsa酶切產(chǎn)生655 和345bp,而TaqⅠ不能酶切PCR產(chǎn)物。
篇9
作為宮頸癌生物基因檢測(cè)領(lǐng)域的市場(chǎng)領(lǐng)導(dǎo)者,國(guó)內(nèi)領(lǐng)先的核酸分子診斷產(chǎn)品提供商,凱普生物(300639.SZ)專注分子診斷試劑、分子診斷配套儀器等體外診斷相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售和服務(wù)。
經(jīng)過(guò)十余年的發(fā)展,凱普生物基于強(qiáng)大的技術(shù)研發(fā)實(shí)力和自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的導(dǎo)流雜交技術(shù)平臺(tái),研發(fā)了覆蓋傳染病檢測(cè)和遺傳病檢測(cè)兩大領(lǐng)域的系列產(chǎn)品,廣泛應(yīng)用于臨床檢測(cè)、大規(guī)模人口篩查和優(yōu)生優(yōu)育管理領(lǐng)域。
日前,凱普生物的發(fā)明專利“人狀瘤病毒基因分型檢測(cè)試劑盒及其基因芯片制備方法”榮獲被譽(yù)為“中國(guó)知識(shí)產(chǎn)權(quán)奧斯卡”的第十八屆中國(guó)發(fā)明專利獎(jiǎng)金獎(jiǎng),成為本屆體外診斷領(lǐng)域?qū)@麆?chuàng)新唯一的金獎(jiǎng)。
凱普生物獲獎(jiǎng)專利是在首創(chuàng)低密度基因芯片技術(shù)平臺(tái),借助香港大學(xué)兩項(xiàng)專利,通過(guò)解決傳統(tǒng)雜交耗時(shí)長(zhǎng)和易污染的技術(shù)難題,突破原市場(chǎng)主導(dǎo)技術(shù)――雜交捕獲方法不能分型技術(shù)障礙,解決HPV檢測(cè)鑒定病毒型別的難題和宮頸癌早期檢測(cè)的臨床跟蹤和治療的關(guān)鍵問(wèn)題,在核酸層面實(shí)現(xiàn)HPV檢測(cè)產(chǎn)業(yè)化。
這只是凱普生物強(qiáng)大研發(fā)實(shí)力的冰山一角,在發(fā)展中,凱普生物已形成一套集自主研發(fā)、優(yōu)勢(shì)技術(shù)、產(chǎn)學(xué)醫(yī)合作、流程質(zhì)控、數(shù)據(jù)積淀、客戶需求挖掘、品牌價(jià)值于一體的核心競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)循環(huán)系,收入及凈利潤(rùn)快速增長(zhǎng),盈利能力領(lǐng)先同行業(yè)。
基于國(guó)際通用PCR平臺(tái)和擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的導(dǎo)流雜交平臺(tái),目前凱普生物已擁有國(guó)內(nèi)產(chǎn)品注冊(cè)證書(shū)44項(xiàng),獲得歐盟CE認(rèn)證產(chǎn)品18項(xiàng),同時(shí)在研產(chǎn)品超過(guò)30項(xiàng),并且多項(xiàng)產(chǎn)品已進(jìn)入臨床最后試驗(yàn)階段及申請(qǐng)注冊(cè),覆蓋宮頸癌、性病等傳染病,地中海貧血、蠶豆病等遺傳病,婚前體檢、新生兒缺陷病等領(lǐng)域。
包括多種品類(lèi)HPV熒光試劑盒、HPV分型試劑盒、地貧檢測(cè)試劑盒、STD檢測(cè)試劑盒、乙肝熒光試劑盒、STD熒光試劑盒、耳聾基因檢測(cè)等產(chǎn)品。結(jié)合產(chǎn)品核準(zhǔn)上市進(jìn)度及核酸分子的市場(chǎng)發(fā)展情況,公司有步驟地推出適時(shí)新品,豐富現(xiàn)有產(chǎn)品系列,優(yōu)化產(chǎn)品結(jié)構(gòu)有望鞏固并提升公司的競(jìng)爭(zhēng)地位,進(jìn)一步提高市場(chǎng)份額。
凱普生物在核酸分子領(lǐng)域擁有較強(qiáng)的技術(shù)優(yōu)勢(shì)。全球多家醫(yī)療機(jī)構(gòu)、企業(yè)實(shí)驗(yàn)室、高校實(shí)驗(yàn)室采用公司研發(fā)的HPV21分型試劑盒、HPV13高危熒光試劑盒、HPV12+2高危熒光試劑盒等產(chǎn)品。并參加多屆世界衛(wèi)生組織“HPV實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)檢測(cè)鑒定”,靈敏度、特異性等多項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)試結(jié)果優(yōu)異。
截至2015年年末,以公司產(chǎn)品為研究工具的成果論文累計(jì)逾300篇,部分研究成果發(fā)表在國(guó)外著名專業(yè)雜志和國(guó)內(nèi)核心學(xué)術(shù)期刊上,其中包括被SCI收錄的際論文30余篇。
2014-2016年,凱普生物三年中營(yíng)業(yè)收入和凈利潤(rùn)均保持穩(wěn)健增長(zhǎng),2016年,公司綜合毛利率和凈利潤(rùn)率分別達(dá)到85.67%、18.72%。不僅在營(yíng)收上保持前進(jìn)的步伐,凱普生物在現(xiàn)有診斷儀器以及診斷試劑基礎(chǔ)上,公司已在全國(guó)主要省市相繼成立 “凱普檢驗(yàn)所”,從事核酸分子醫(yī)學(xué)服務(wù),打造“儀器+試劑+服務(wù)”全鏈條的產(chǎn)業(yè)服務(wù)模式,增加盈利點(diǎn),降低運(yùn)營(yíng)風(fēng)險(xiǎn)。
通過(guò)檢測(cè)網(wǎng)絡(luò)的鋪設(shè),凱普生物奠定面向終端市場(chǎng)銷(xiāo)售的基礎(chǔ),未來(lái)可逐步拓展終端市場(chǎng)銷(xiāo)售模式,直接面對(duì)終端患者,實(shí)現(xiàn)公司品牌的渠道下沉,解決渠道品牌商的限制格局,提升“凱普”品牌的傳播效能。
篇10
根據(jù)我國(guó)的疫情防控措施,疫情風(fēng)險(xiǎn)分為三個(gè)等級(jí),即便高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)、中風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)和低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū),而只有低風(fēng)險(xiǎn)的人員是可以正常出行的。不過(guò)隨著春節(jié)的臨近,現(xiàn)在各地返鄉(xiāng)政策也已經(jīng),那么2022春節(jié)低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)到低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)要核酸檢測(cè)隔離嗎?一起來(lái)看下。
根據(jù)國(guó)內(nèi)的疫情防控政策,疫情低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)不對(duì)人員采取隔離措施,不得再設(shè)置障礙。也就是說(shuō)從低風(fēng)險(xiǎn)區(qū)去低風(fēng)險(xiǎn)區(qū)一般情況下無(wú)需隔離,具體可咨詢當(dāng)?shù)胤酪卟块T(mén)。
不過(guò),現(xiàn)在各地都出臺(tái)了最新的返鄉(xiāng)政策,跨省出行人員,即便是低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)到低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū),雖然不用隔離,大部分都是需要持有48小時(shí)核酸檢測(cè)陰性證明的。
以上就是2022春節(jié)低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)到低風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)要不要核酸檢測(cè)隔離介紹了。希望對(duì)大家有所幫助。
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