導(dǎo)語：如何才能寫好一篇青春啊青春，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

各大論壇都流行著一句話，韓劇核心理念是閃閃發(fā)光的我在你眼里閃閃發(fā)光，日劇的理念是我平凡又渺小，好比一塊黑面包，可這樣的我，在你眼里依舊能夠閃閃發(fā)光。

這部《對不起，青春》也秉承著日劇一向的核心理念，關(guān)鍵詞是青春、熱血、有趣。男主角是近年有著超高人氣，并且和女神新桓結(jié)衣有過一段情的錦戶亮，帥氣的外表也為整部劇添色不少，被稱為耷拉眼版本的陳坤。

男主角戀上氣質(zhì)女神，卻不幸被好友撬了墻腳，一氣之下，怒放煙花，卻導(dǎo)致了隔壁女校的火災(zāi)。這場火災(zāi)導(dǎo)致兩所學(xué)校之人一直彼此憎惡著對方，十四年后，女高面臨破產(chǎn)，不得不嘗試與隔壁男高合并。

合并前的試點(diǎn)班級班主任，便是十四年前引發(fā)那場火災(zāi)的男主角。十四年前的火災(zāi)一直是男主角心中無法釋懷的原罪，他想要盡自己最大的努力彌補(bǔ)自己的過錯。

整部劇的人設(shè)就是：女主角是神經(jīng)病一樣的存在，氣場暴烈，能瞬間手撕雞；男主角軟萌可愛，每集耍一次嘴皮，愛說教；保守的大嫂以前拍過熱辣寫真集；神神道道的媽媽會常常扮成各種臥姿奇怪的佛像。

總有人呵斥國產(chǎn)青春劇不屬于我們這一代人，又窮又丑的人沒有青春，只有堆滿課桌的試卷和習(xí)題冊。其實青春里點(diǎn)點(diǎn)滴滴的快樂如同被海浪沖上沙灘的貝殼，繽紛且多彩，關(guān)鍵是看你是否有心采擷。

劇中每個人物都詮釋著自己在青春時面臨的種種問題，男主角為自己十四年前犯下的錯耿耿于懷，女主角不明白自己為什么會喜歡上完全不是理想型的男主角。有人因為壓力一直壓抑著自己，有人因為自卑一直不敢向喜歡的人表白心跡。

可身為男主角的班主任鼓勵他們勇敢去做――

“喜歡一個人，就應(yīng)該讓他（她）知道，否則不是白白喜歡了嗎？”

“青春只有一次，貪婪點(diǎn)有何不可？”

置身事外的人永遠(yuǎn)最輕松，停頓在原地的人永遠(yuǎn)不用擔(dān)心未來，可是不努力邁出一步，就永遠(yuǎn)不知道前面等待著自己的是什么，是他（她）的“我也喜歡你”抑或是“對不起”？無論答案是哪一個，只有邁出這一步的人才有權(quán)利知道。

青春不是一條一通到底的大道，它是一條有著無數(shù)岔道的小路，每一個岔路口，我們都要選擇往哪里走。偶爾走了錯誤的路，繞了遠(yuǎn)一點(diǎn)的路，又有什么關(guān)系呢？或許這條小路有更美麗的風(fēng)景，或許你在這條小路上能碰到志同道合的好朋友。

我們每個人都有權(quán)利犯錯誤，也都有權(quán)利說對不起，年輕的時候，要勇敢地去走那條自己向往的路。

我讀書的時候喜歡一個人，我覺得他有一點(diǎn)傻，像橫道世之介，也像堂吉訶德，勇敢到莽撞，善良到蠢笨?？赡贻p時的驕傲總是阻止我告訴他自己的心意。后來我跌跌撞撞長大了，我喜歡的那個人卻早已經(jīng)有了一個對他好、喜歡他的姑娘。

所以我一度認(rèn)為自己是一個很糟糕的人，年少時候的虛榮讓我不敢承認(rèn)自己的心思，后來又成了一個膽小鬼，總也不敢說自己那點(diǎn)忐忑的念想。

因著這點(diǎn)經(jīng)歷，我看這部劇時，幾乎哭成了淚人。

篇2

“女硬漢”VS“小嬌羞”

小時候堅信婦女能頂半邊天，長大了后才發(fā)現(xiàn)不對勁，但凡頂天立地的女子們都變成了一群會痛經(jīng)的“女硬漢”，有些甚至還引以為榮。這讓人挺傷感的，女人哪能是這樣的?

我們是該在超市掰碎袋裝泡面報復(fù)社會?還是該痛罵男人不夠爭氣?還是該詛咒那些不肯跟我們一起做一條真的漢子的“小嬌羞”呢?一切的一切都只能無解，“女硬漢”和“小嬌羞”的關(guān)系就好比劉三好與姚金鈴、聶寶言與小唐菜、四眼衰女與金發(fā)啦啦隊長、奧斯卡影后與杰西卡?阿爾芭。

如果你常看美式青春校園片，就會發(fā)現(xiàn)，片子里雷打不動會有啦啦隊長與橄欖球四分衛(wèi)或籃球隊長的“官配”組合，要是啦啦隊長恰好是不起眼女主角的死對頭，那么橄欖球四分衛(wèi)或籃球隊長在影片最后必定會被豬油蒙了心，發(fā)現(xiàn)外在美雖重要，四眼衰女的內(nèi)在美卻更好。

那些驕縱任性、美麗動人的拉拉隊長們，她們自小貌美優(yōu)秀、充滿自信、人見人愛，早上上學(xué)去，呼風(fēng)喚雨帶著小嘍，雙手叉腰貓步橫行于休息區(qū)，眾人如迎接公主駕臨。這樣的生活多么美好，直到被女主角使絆子、插足。然后，就沒有然后了，你用腳趾頭想都該知道，代表主流價值觀的女主角徹底贏了，美女的命運(yùn)再無人關(guān)心。

筆者年輕的時候很喜歡看這類滅美女威風(fēng)的橋段，但是隨著年齡的漸長，卻越來越喜歡漂亮的人物，尤其是年輕的啦啦隊長們都酷似杰西卡?阿爾芭的翻版。她可是全民寶貝啊，是自從《風(fēng)度》雜志2000年開始設(shè)置“年度最性感100人”名單以來，唯一每年都榜上有名的女人。業(yè)界總有各種關(guān)于杰西卡的“神話”――《美國周刊》聲稱，杰西卡曾是湯姆?克魯斯與凱蒂?霍爾姆斯交好之前的首選目標(biāo)。而痞子阿姆則在歌曲《My Band》中念叨：“昨天Kuniva(說唱樂隊D12成員之一)拿刀威脅我，因為我告訴他，杰西卡?阿爾芭會成為我的老婆。”《碧海追蹤》的導(dǎo)演斯托克威爾則回憶道：“米高梅的主管們在后期監(jiān)制過程中，都被杰西卡的美貌所分神。我會時不時地受到質(zhì)問：‘為什么你把她游泳那段剪掉了?’”

少年記憶女主角

沒錯，能讓觀眾幾年來都忽略演技，只求一睹銀幕上芳容的女星，似乎也只有杰西卡?阿爾芭一人。其實杰西卡并不是一個囂張跋扈的姑娘，只是那樣一張陽光明媚如五月天的臉龐，和如蜜糖裹身般的身段，就該是一個顛倒眾生的校園尤物。

據(jù)美國IMDb電影網(wǎng)站的一項統(tǒng)計表明，杰西卡的美貌正好符合15-28歲常上電影院觀影的男青年的審美標(biāo)準(zhǔn)。在他們心里，杰西卡是青春的影像，當(dāng)歷史背景褪色、記憶渾濁的時候，只有她的笑容和美好還是清晰的，定格在16歲暑假的海邊假期里，鮮明在和死黨的中――少年始終不敢沖上前去和她說聲“嗨”，因為她身邊已經(jīng)有一個高大英俊的他，她是一個愛欺負(fù)人但本性不壞的17歲姑娘，并忠于愛情，即使他是一個人渣，少年也深知就算他和她分手了也沒自己的事兒。于是漫漫長夜里，為情所困的少年擼完一管又一管。

于是杰西卡成了所有少年心事中的女神，是他們儲藏柜深處的秘密，是從美國東海岸到西海岸天空上呼嘯而過的飛機(jī)，是返校舞會皇后評選時斬釘截鐵的選票，是再也回不去的高中時代里最后一絲憂郁。

如今已經(jīng)是兩個孩子媽媽的杰西卡，仍然保持著神奇的少女美態(tài)，仿佛從未走出過少年們的夢中。她一直站在原地，像個符號，指導(dǎo)大家完成青春必修課。雖然身邊除了高大英俊的外，還多了兩個小奶瓶，但這無損她愛情導(dǎo)師的形象。

齙牙妹都是潛力股

現(xiàn)實中的杰西卡并不是一路從美少女長成大美人的。小時候的她根本就不是學(xué)校里的風(fēng)云人物，她在接受采訪時表示：“我在學(xué)校時總是被欺負(fù)得很慘，爸爸不得不經(jīng)常護(hù)送我進(jìn)學(xué)校以免受到襲擊。中午我要躲在護(hù)士的辦公室吃午餐，這樣就不必跟其他女孩坐在一起?？偸桥铑^垢面的我，上課時則得時刻保持警醒。這些遭遇除了因為我是混血人種外，還因為我的爸媽沒錢。我既沒有漂亮衣服，也沒有酷酷的背包，你想，一個講話帶著濃厚得克薩斯州口音的齙牙妹，誰不想順帶欺負(fù)一下?”

杰西卡長到十五六歲的時候，才開始穿短裙和泳裝，蛻變由此開始。她一步步地突破自我，擺脫拘束，重拾自信。拍攝電影《罪惡之城》時，導(dǎo)演羅德里格斯覺得她應(yīng)該把頭發(fā)染成金色，于是人生中第一次杰西卡上沙龍換了發(fā)色。那段時間，當(dāng)她頂著金發(fā)出入比弗利山酒店或四季酒店的酒廊時，都不需要自己掏錢買酒?！熬频昀飻D滿了王子或富有的老男人，每次都會有人請我喝一杯，我對自己說：‘噢，天啊，難道就是因為我的金發(fā)?!’那是我最大限度地賣弄自己了，僅此而已。我一直遵循媽媽教給的道德標(biāo)準(zhǔn)，自我尊重和尊重他人。我希望我的孩子也能學(xué)到這點(diǎn)。”

看看今時今日的杰西卡，不曉得當(dāng)年欺負(fù)過她的男同學(xué)們作何感想。筆者不得不提醒大家，齙牙妹都是潛力股，好好珍惜吧。

表演自在街頭

在國內(nèi)即將上映的系列電影《非常小特工之時間大盜》中，杰西卡?阿爾巴飾演一個孩子的親媽，兩個孩子的后母，隱藏身份還是一個身手不凡的女特務(wù)。這是杰西卡第一次在大銀幕上扮演母親的角色，看似是個挑戰(zhàn)，實際上是她最拿手的――去年杰西卡生下了第二個女兒海文?加納?沃倫，辣媽春游的隊伍又壯大了。

說到好萊塢的辣媽街拍，就必須得提杰西卡?阿爾芭，雖然她沒有“精靈嫂”米蘭達(dá)?可兒的模特身材，沒有“貝嫂”維多利亞?貝克漢姆的大女人氣場，也沒有“阿湯嫂”凱蒂?霍爾姆斯的全身貴氣名牌，但是杰西卡勝在溫婉親切，家?？扇?。更重要的是，她隨身攜帶的最佳配飾――大女兒奧娜，實在是太古靈精怪了。被圍觀群眾親切稱為“圖娃”的奧娜，完全不是小蘇瑞那樣的小公主派頭，你永遠(yuǎn)都想不到頭戴各種莫名其妙、五彩斑斕發(fā)卡的娃，在面對狗仔鏡頭時的下一個表情和動作是什么，吐舌頭還是斗雞眼?猩猩步還是僵尸舞?萌得太刺激了。

比起演技時常被評論家詬病的媽媽來說，娃更有表演天分，這就叫上帝關(guān)上一扇門，又會為你打開一扇窗――輩子都可能無緣奧斯卡獎的杰西卡，收獲了一個小表演藝術(shù)家。

一個能把孩子捌飭成這樣的媽媽，也一定是個極天真和有趣的人。所以在街拍這件事情上，杰西卡也總給人一種“我很認(rèn)真地想知道，你們到底喜歡我穿什么”的敬業(yè)態(tài)度。她的出鏡率特別高，以至于街拍都快成了她的主業(yè)。在所有好萊塢辣媽中，杰西卡的穿著打扮有很高的學(xué)習(xí)價值。不拍戲時，她做的最多的事情就是把自己和孩子打扮得漂漂亮亮，挑一個光線最佳的時段出門，有意無意地配合著狗仔拍美照。

篇3

太陽是金梭，月亮是銀梭，織出生活的燦爛，織出歲月的壯美。這是青春的主旋律，也道出了生命之于時光的意蘊(yùn)。

光陰荏苒，轉(zhuǎn)瞬離開共青團(tuán)崗位已經(jīng)十多年了，也許日常工作的瑣屑漸次淡然，但青年工作朝氣蓬勃、昂揚(yáng)奮發(fā)的氣息和精神，一直激勵著我在不同的工作中進(jìn)取?；厥走^往，那是一段深刻而美好的記憶。之所以深刻，是因為共青團(tuán)工作讓我感悟到，青年人敢作敢為的情懷只有與祖國和人民的念想緊緊擁抱在一起，才會顯得那樣的開闊和博大；之所以美好，是因為共青團(tuán)工作讓我從一種職責(zé)、一種使命的角度去透視赤橙黃綠青藍(lán)紫，讓我認(rèn)識到青春是以奉獻(xiàn)印證出自己最靚麗的本色。故此，我多有感慨：人生能有在共青團(tuán)工作的經(jīng)歷，端的是一種緣分，一種精神的財富，它能讓你跟隨時代的走向一往無前，終身受益。

由青年工作我想到青年人，由青年人我想到青春。青春不屬于某個年齡段的專利，青春是進(jìn)取的標(biāo)志，是創(chuàng)新者的宣言。青春是一種精神，是書山勤為徑、學(xué)?？嘧髦鄣淖穼?，是路漫漫其修遠(yuǎn)兮的求索，是苦其心志勞其筋骨的磨礪，是百尺竿頭更進(jìn)一步的跋涉。青春是一種使命，是成就偉業(yè)舍我其誰的氣魄，是天下興亡匹夫有責(zé)的胸襟，是我以我血薦軒轅的赤誠，是只問耕耘不問收獲的超脫。

人生短暫，平凡而偉大；青春不朽，純粹而燦爛。生命因奮斗而壯美，青春因追求而風(fēng)流。朋友們，該是我們寫下傳說的時候了。

謹(jǐn)以此感言向《時代青年》創(chuàng)刊60周年暨復(fù)刊30周年表示熱烈的祝賀。

(作者王新強(qiáng)系河南省西平縣人民政府縣長。曾任河南省直機(jī)關(guān)團(tuán)委書記)

精彩的驛站，無悔的青春――寫在《時代青年》創(chuàng)刊60周年復(fù)刊30周年之際

朱良才

六十甲子，歲月輪回，滄海桑田，流逝的是歲月，孕育的是希望；

三十而立，時光荏苒，崢嶸年華，留下的是足跡，收獲的是輝煌。

《時代青年》，譜盡青春風(fēng)華；《時代青年》，指引青春航向。

“聚是一團(tuán)火，散作滿天星?！闭沁@種生生不息的共青精神，感召我們奮斗在鮮艷的團(tuán)旗下。有緣投身團(tuán)的工作，是組織的信任，更是個人的光榮。

我從鄉(xiāng)鎮(zhèn)最基層的崗位上一步步走進(jìn)共青團(tuán)的大家庭，既經(jīng)歷了戰(zhàn)天斗地的豪情、面朝黃土背朝天的艱辛，也感受了泥土芳香中播撒希望、歡慶收獲的喜悅?；厥酌篮秒y忘的流金歲月，五彩斑斕的廣闊天地，浸潤這片沃土的滋養(yǎng)，沐浴共青團(tuán)工作洗禮，砥礪了自己的品性，堅定了自己的意志，陶冶了自己的情操，真正領(lǐng)會了“春夏秋冬共青路，東南西北共青情”的內(nèi)涵。

我摯愛共青團(tuán)工作，并榮幸能成為共青團(tuán)大家庭的一員，先后兩次團(tuán)的工作經(jīng)歷，四年難忘的共青歲月，讓我深切感受到共青團(tuán)火一樣的生命力和青年的熱情、無畏、朝氣與潛能。與青年志愿者一起支援四川災(zāi)區(qū)，和小朋友共值“紅領(lǐng)巾交通崗”，為留守兒童送去發(fā)自內(nèi)心的關(guān)愛，同周口青年英模傾情交流，幫外出務(wù)工青年撐起一片晴空……我正是在朝氣蓬勃、實事求是的追求與挑戰(zhàn)中感受著青春的魅力與永恒。

篇4

Sarah Jessica Parker五官塌陷的太過明顯，法令紋特別突出，更可怖的是，她畫了一個小煙熏，讓她的眼睛像一只靈巧的貓或者豹子，頭發(fā)亂糟糟的黃黑相間，這一切搭配著John Galliano的白色“軍裝”，在熱愛SJP的粉絲眼中，無疑是一個車禍現(xiàn)場。

社交平臺更加無情，把Sarah Jessica Parker的照片和《俠膽雄獅》中的獅子（其實是一個長著獅子臉的人）擺放在一起，獅子并沒有顯得太難看。

搜索了一下，Sarah Jessica Parker最近一直熱衷的這款眼妝，也是有名有姓的造型師造型，并且是刻意為之的。

據(jù)說，這是Sarah Jessica Parker自己設(shè)計的造型，她希望在出席任何party和名人出現(xiàn)的事件中，這雙小煙熏的貓眼是她的眼睛。

最近一直在哼唱這個曲子，“時光一逝永不回，往事只能回味，憶童年竹馬青梅，兩小無猜日夜相隨?！?/p>

唱著唱著覺得是在講我們愛過的女主角們。

記憶中的Sarah Jessica Parker是什么形象呢？

金黃色的波西米亞卷發(fā)，永遠(yuǎn)傳遞出半夢半醒的黏膩感，臉長，但是脖子也是頎長的，她是敢穿基本款出門仍然很美艷的人，就是因為那標(biāo)志性的卷曲頭發(fā)。

Carrie（《欲望都市》女主角）的長相大概是毀譽(yù)參半，有人甚至說，長這么難看還能當(dāng)主角的，除了史萊克，也就只有她了。比長相更不招待見的，是她的神態(tài)，一遇到男人，就開始搖頭晃腦，說話裝可愛，像個情竇初開的loli，但是就是這種做作搭配她的臉?biāo)拇笞焖难劬?，一切都合理很多。雖然個子矮，但是比例奇好，不跟別人站一起，都顯不出她矮，腿尤其漂亮，又細(xì)又直又長。

她敏感脆弱，聰明幽默，有點(diǎn)小才情，有點(diǎn)矯情虛榮，診斷起別人的感情來一針見血，但輪到自己了就滿腦袋漿糊，對朋友好，但也經(jīng)常重色輕友……好多女人愿意成為她。

看豆瓣有一則提問――怎樣才能過上這樣的生活？回答一睡覺；回答二做夢。

可是時間都去哪里了？

好多人還是沒有機(jī)會長大成為Carrie，Carrie就已經(jīng)老了。

有人說，人的衰老就是細(xì)胞含水量的減少，我們看到的干干巴巴的歐美老人只是因為他們瘦啊，咱這兒五十來歲的瘦人也是干干巴巴的，再加上他們經(jīng)常曬太陽什么的，紫外線對于皮膚的傷害其實還挺大的，于是看著就像干尸了……大寫的一個遄幀

痛定思痛，打開一瓶高倍補(bǔ)水面霜，拯救自己，從現(xiàn)在開始吧。

TIPS！

尋找欲望的都市道路很長

劉瑜老師說了，“雖然我生活在紐約，雖然我也有幾個死活嫁不出去的女朋友，但是我特別討厭看《欲望都市》。討厭的原因很簡單：這些女人得到男人們怎么就那么容易？”

如果說年輕女子前往紐約是為了尋找兩個“L”――品牌（Label）和愛情（Love），那么看罷該片我們不妨也捫心自問，你呢？

這個提問始于2000年初第一次看《欲望都市》的時候自己問自己的話。時間過去了十幾年了，這個問題還是通用的，還是捫心自問。

現(xiàn)在說起《欲望都市》，真的有點(diǎn)朝花夕拾的感覺。

關(guān)于紐約，1979年，伍迪?艾倫曾在他的電影《曼哈頓》里這樣饒舌

――無論季節(jié)如何流轉(zhuǎn)，對他而言，紐約都是浸沒在喬治?蓋希文爵士樂之中的城市。

他恰是他所深愛的紐約的化身，黑邊眼鏡下是他叢林豹般不可抗拒的魅力，紐約是他的城市，并將永遠(yuǎn)如此。

Sarah Jessica Parker亦是紐約的形象代言人。只要有她在，即使失去了傲人高聳的雙子塔，紐約依然是個充滿致命誘惑的不夜城。

她是《人物》雜志全球25位最具吸引力人物之一，拿過三回金球獎喜劇和劇情類電視最佳女主角。她被人稱做“紐約街頭時尚風(fēng)向標(biāo)”，她自己更自稱是時尚的“風(fēng)眼”，她說：“一切流行的旋風(fēng)都從我身邊刮過去?！?/p>

女人們花一個晚上看她主演的電視劇，再花一整個白天研究她的包包和鞋子。從Carrie在1998年第一次用她微醺的嗓音，向她們發(fā)出“hello stranger”的召喚開始，她們觀摩了關(guān)于她和她的三女友們落力出演的一場場關(guān)于愛和友誼的悲喜劇，其中Carrie擅長成人童話??；Miranda熟捻金領(lǐng)諷刺??；Charlotte擔(dān)綱家庭輕喜劇，Samantha領(lǐng)銜情場傳奇劇。

而這十年劇場人生，四女子除了臉上風(fēng)云“皺”起外，其他一概未變，依然高唱著Love和Label的凱歌。而在現(xiàn)實生活中跌宕了十年的作為觀眾的她們，對愛和婚姻的認(rèn)識卻已經(jīng)完全改變：那些曾經(jīng)的愛大抵已經(jīng)下落不明，而即使仍有殘影，對于那些愛的糾纏，往往也是出于慣性。

Sarah Jessica Parker飾演的那個著名的時尚女Carrie Bradshaw甚至穿著很隆重的黑色Burberry和trilby款的帽子進(jìn)超市，即使在家里也要扮富貴的Nina Ricci女郎，然而，以平均兩分鐘的速度更換的八十一件衫，終歸還是不及最后那雙Manolo Blahnik高跟鞋來得意味深長，不僅是代表了感受，也是愛的抉擇。

如同她們和時斷時續(xù)糾纏了十年的老情人的愛事一樣，她們對《欲望都市》和與它有關(guān)的一切影像記憶，其實已經(jīng)和熱愛沒有關(guān)系，她們只是在青春的影子里，和自己談著一場一廂情愿的戀愛。

篇5

作者：梁英民　蔣姍姍　孫強(qiáng)　吳絨麗　陳萍　李榮　周鵬　王鍵　韓驊

【關(guān)鍵詞】 基因表達(dá)

關(guān)鍵詞: bcr/abl;基因表達(dá);融合蛋白;抗血清

摘 要:目的 克隆并表達(dá)bcr/abl融合基因片段，并制備其抗血清. 方法 PCR擴(kuò)增包含蛋白融合點(diǎn)的bcr/abl癌基因片段，序列測定后克隆入帶有His標(biāo)簽的原核表達(dá)載體pET-16b，轉(zhuǎn)化宿主菌BL21，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，SDS-PAGE分析表達(dá)結(jié)果，Ni-NTA樹脂親和純化，皮下多點(diǎn)注射免疫小鼠，ELISA確認(rèn)抗血清的滴度. 結(jié)果 PCR擴(kuò)增得到大小約523bp的目的片段，序列測定表明與發(fā)表序列完全一致;得到了一種新的癌基因bcr/abl片段的原核表達(dá)載體pET-16b-bcr/abl，在BL21中表達(dá)可見于Mr21×103 處有一蛋白新生帶，表達(dá)的BCR/ABL蛋白免疫小鼠后，ELESA確認(rèn)抗血清的滴度>1∶2000. 結(jié)論 成功的克隆、表達(dá)了bcr/abl融合基因片段，并制備了相應(yīng)的抗血清.

Keywords:bcr/abl;gene expression;fusion protein;immune serum

Abstract:AIM To clone and to express bcr/abl fusion gene fragment and to produce immune serum against the expressed fusion protein.METHODS PCR-amplified bcr/abl gene fragment was inserted into plasmid pET-16b with His tag　to form a new plasmid pET-16-bcr/abl（pEb）.The BCR/ABL fusion protein was expressed in E.coli BL21trans-formed with pEb and induced with IPTG.The expressed pro-tein was purified by affinity resin-Ni-NTA and analyzed by SDS-PAGE.In order to produce anti-serum，Mice were im-munized by subcutaneously multi-site injection with BCR/ABL protein.The anti-serum was assayed by ELISA.RESULTS Molecular weight of the PCR-aimplified bcr/abl gene fragment which was consistent with the published se-quence was about523bp.Plasmid pEb was constructed.The molecular size of BCR/ABL protein expression was about Mr21×103 .The titer of the BCR/ABL protein anti-serum was more than1∶2000.CONCLUSION Fragment of bcr/abl fu-sion gene is successfully cloned and expressed.The antiserum of BCR/ABL protein fragment has been produced.

0 引言

慢性粒細(xì)胞白血病（Chronic myelogenous leukemia，CML）是起源于骨髓造血干細(xì)胞的惡性腫瘤.絕大多數(shù)CML患者的腫瘤細(xì)胞帶有染色體異常，即9∶22號染色體易位，形成特征性的費(fèi)城染色體（Pheladophia，ph染色體）［1，2］ .在分子水平，這一染色體易位造成bcr基因和abl基因的融合，表達(dá)的BCR/ABL融合蛋白具有持續(xù)性的激酶活性，引起細(xì)胞的轉(zhuǎn)化［2］ .Bcr/abl融合蛋白被認(rèn)為是CML特異性腫瘤抗原，可作為CML診斷和治療的指標(biāo)［3-6］ .我們用PCR擴(kuò)增了BCR/ABL融合蛋白的基因片段，并在大腸桿菌中進(jìn)行了表達(dá).表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)純化復(fù)性后，用于免疫小鼠，得到可識別該抗原的小鼠抗血清.

1 材料和方法

1.1 細(xì)菌和質(zhì)粒 大腸桿菌XL-10gold由本室保存.質(zhì)粒pET-16b及大腸桿菌BL21均來自Nav-agene公司.帶有人bcr/abl（b3a2）融合基因的質(zhì)粒pGD210由本校附屬唐都醫(yī)院血液科劉立博士提供.

1.2 引物設(shè)計與bcr/abl融合基因表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建 DNA重組所用試劑來自Promega、寶生物工程公司及華美生物工程公司.以質(zhì)粒pGD210為模板，用PCR擴(kuò)增了bcr/abl基因跨越融合點(diǎn)的523bp基因片段（93aa-265aa）.PCR引物的序列為:上游引物:5’-CTCGAGACGTTCCTGATCTCCTCT;下游引物:5’-GGATCCTTAGTAGTTGCTTGGGACC-CA.PCR產(chǎn)物經(jīng)電泳回收純化后插入pGEM-T載體（Promega），進(jìn)行DNA序列分析.從正確克隆的載體中，用Xho I和BamH I雙酶切下含有bcr/abl融合基因插入片段，插入質(zhì)粒pET-16b，得到表達(dá)BCR/ABL融合蛋白的質(zhì)粒pET-bcr/abl（Fig1），以下簡稱pEb.

1.3 重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)和純化 用表達(dá)質(zhì)粒pEb轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21，加入IPTG至終濃度1mmol?L-1 ，誘導(dǎo)不同時間后，收集菌體.懸浮于PBS，超聲裂菌，離心棄去上清.向沉淀中加入2mol?L-1 尿素，離心除去雜蛋白.再用8mol?L-1 尿素溶解沉淀的蛋白，在Ni-NTA-agarose柱（Vector公司）上進(jìn)行親和層析.用250mmol?L

-1 咪唑洗脫.收集洗脫的蛋白，透析后凍干保存.

圖1 略

1.4 抗血清的制備 BALB/c小鼠由第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供，用50μg基因重組的BCR/ABL融合蛋白與等量的福氏佐劑混后皮下多點(diǎn)注射，每周一次，第四周腹腔注射加強(qiáng)一次，加強(qiáng)免疫后14天取血，分離血清備用.

1.5 酶聯(lián)免疫試驗（ELISA） 向96孔板中加入純化的BCR/ABL融合蛋白（5μg/μL）100μL，4℃包被過夜.加入稀釋的經(jīng)免疫小鼠的血清與未經(jīng)免疫小鼠的血清，血清稀釋度均為1∶500，1∶1000，1∶2000，1∶4000，1∶8000，1∶16000，設(shè)一陰性對照孔， 37℃水浴1h，加入酶標(biāo)抗體，37℃1h，TMB顯色15～30min，酶聯(lián)免疫檢測儀測定，測定波長為492nm.

1.6 DNA序列分析 按說明書用PE公司的熒光DNA序列測定試劑盒（Big-dye）進(jìn)行序列測定反應(yīng)，用310型DNA序列測定儀進(jìn)行電泳及結(jié)果分析.

2 結(jié)果

2.1 bcr/abl基因的亞克隆 為表達(dá)BCR/ABL融合蛋白融合點(diǎn)兩側(cè)約200個氨基酸的片段.以全長bcr/abl基因為模板，用PCR擴(kuò)增了這一片段的cD-NA.Fig2顯示523bp的目的片段被擴(kuò)增出來.將這一片段插入T載體后，進(jìn)行DNA序列分析，但在5’和3’端分別插入了設(shè)計的Xho I和BamH I酶切位點(diǎn).

圖2 略

2.2 BCR/ABL融合蛋白的誘導(dǎo)表達(dá) 用bcr/abl表達(dá)質(zhì)粒pEb轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21，培養(yǎng)后用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo).SDS-PAGE分析結(jié)果表明，與用pET-16b轉(zhuǎn)化的BL21及未轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的BL21裂解產(chǎn)物相比，在21kd處有一新生蛋白帶，與預(yù)期的融合蛋白分子大小相同.灰度掃描顯示IPTG誘導(dǎo)3h后融合蛋白的表達(dá)約占細(xì)菌總蛋白的20%.

2.3 BCR/ABL融合蛋白的純化 用Ni-NTA-a-garose親和層析柱進(jìn)行BCR/ABL融合蛋白的純化.收集蛋白峰，PBS透析后，進(jìn)行SDS-PAGE分析（Fig3）.表達(dá)的融合蛋白被純化為單一條帶.

2.4 BCR/ABL融合蛋白在小鼠中的抗體應(yīng)答 收集免疫小鼠的抗血清，ELISA檢測結(jié)果見圖4，與正常對照比較，接受融合蛋白免疫的小鼠產(chǎn)生了較高滴度的血清，說明基因重組的BCR/ABL融合蛋白對小鼠具有免疫原性.

圖3 － 圖4 略

3 討論

bcr/abl融合基因是CML的分子標(biāo)記，bcr/abl融合基因編碼一個分子量為Mr21×104 的融合蛋白.由于融合蛋白連接區(qū)的氨基酸序列是其他任何正常蛋白質(zhì)不具有的，被認(rèn)為是CML細(xì)胞所特有的.BCR/ABL融合蛋白是一種胞漿內(nèi)蛋白，研究bcr/abl融合蛋白在細(xì)胞表面的表達(dá)的類型和該融合蛋白的免疫學(xué)特點(diǎn)對開展CML的免疫治療有重要意義［3-6］ .然而，由于融合蛋白很難從患者體內(nèi)獲得，而且在細(xì)胞內(nèi)加工和提呈的效率也難以檢測，為此，本文用體外基因重組的方法獲得了bcr/abl融合蛋白的原核表達(dá)產(chǎn)物，經(jīng)純化復(fù)性后，用于免疫小鼠，得到了可識別該抗原的小鼠抗血清，為隨后的單克隆抗體制備及免疫治療的研究奠定了基礎(chǔ).

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篇6

[關(guān)鍵詞] 阿法骨化醇；IgA腎??；腫瘤壞死因子-α；白細(xì)胞介素-6；轉(zhuǎn)化生長因子-β1

[中圖分類號] R692.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2016）03（b）-0150-04

[Abstract] Objective To explore the effect of different doses of Alfacalcidol on serum levels of tumor necrosis factor alpha （TNF-α）， interleukin 6 （IL-6） and transforming growth factor beta 1 （TGF-β1） in patients with IgA nephropathy （IgAN）. Methods 52 patients with IgAN admitted to Three Gorges University People's Hospital from October 2012 to February 2015 were selected and randomly divided into group A and group B， with 26 cases in each group. While 30 healthy adults were selected as normal group. On the basis of routine RAS therapy plan， group B was treated with Alfacalcidol （0.5 μg， once a day） for 12 weeks， while group A was treated with Alfacalcidol （0.25 μg， once a day）. The changes of serum TNF-α， IL-6， TGF-β1， cystainCm（Cys-C）， blood urea nitrogen （BUN）， serum creatinine （Scr） and 24 hours urinary total protein （UTP） in two groups were compared before and after treatment. Results Compared with normal group， serum TNF-α， IL-6 and TGF-β1 levels were significantly higher than those in IgAN group （P < 0.01）. After 12 weeks of treatment， the level of TNF-α， IL-6， TGF-β1， Cys-C and 24 h UTP had obviously declined （P < 0.05）， compared with that before treatment in two groups， and the reduction of group B was higher than group A （P < 0.05）. There was no significant difference in BUN and Scr between the two groups before and after treatment （P > 0.05）. Conclusion Inflammation reaction exists in IgAN， Alfacalcidol can significantly reduce TNT-α， IL-6， TGF-β1 level in serum of IgAN patients， reduce albuminuria， improve renal function， and the dose of 0.5 μg/d is better than 0.25 μg/d.

[Key words] Alfacalcidol； IgA nephropathy； Tumor necrosis factor-α； Interleukin-6； Transforming growth factor-β1

IgA腎?。↖gA nephropathy，IgAN）是導(dǎo)致我國終末期腎病的主要原因之一。盡管其病因與發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，但I(xiàn)gAN發(fā)病機(jī)制的中心環(huán)節(jié)與細(xì)胞炎性因子的分泌異常有關(guān)，且被認(rèn)為是導(dǎo)致各種腎小球腎炎腎臟損傷的重要物質(zhì)。既往已有研究報道在IgAN患者血清中炎性因子表達(dá)升高[1]，且臨床研究證實活性維生素D能降低IgAN患者的蛋白尿，已作為IgAN治療新的嘗試[2-3]，但目前尚不清楚在不同的病理生理狀態(tài)下，活性維生素D作用于維生素D受體，進(jìn)而能產(chǎn)生抗炎性反應(yīng)作用所需的合理劑量[4]。本研究旨在觀察已應(yīng)用雙倍劑量腎素血管緊張素系統(tǒng)（RAS）阻斷劑治療3個月以上、但蛋白尿未降至0.5 g/24 h以下的IgAN患者血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）水平的變化及探討不同劑量阿法骨化醇對其的影響，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2012年10月～2015年2月在三峽大學(xué)人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）隨訪的IgAN患者52例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①Lee分級Ⅱ級或Ⅲ級；②雙倍劑量的RAS阻斷劑治療時間3個月以上，血壓控制在130/80 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）以內(nèi)；③24 h尿蛋白定量0.5～3.0 g伴或不伴血尿，估算腎小球濾過率（MDRD計算公式）>50 mL/（min?1.73 m2）。排除標(biāo)準(zhǔn)：①繼發(fā)性IgAN患者；②阿法骨化醇過敏者；③計劃妊娠者；④使用糖皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑者；⑤合并嚴(yán)重心、腦、肝等慢性疾病者；⑥高鈣血癥者；⑦2周內(nèi)應(yīng)用過維生素、阿司匹林、調(diào)脂藥及抗氧化劑藥物者；⑧依從性差不能完成隨訪者。符合入選標(biāo)準(zhǔn)的IgAN患者52例，其中男29例，女23例，平均年齡（35.1±13.2）歲。按隨機(jī)數(shù)字表法分為A組和B組，每組26例，兩組患者在性別、年齡、病程、血壓、腎臟病理及RAS阻斷劑藥物治療方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。見表1。同期選取性別和年齡與患者相匹配的健康成年人30例為正常組，其中男16例，女14例，平均年齡（34.9±13.1）歲，均來源于我院健康體檢者。本研究方案經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會通過，所有患者均簽署了知情同意書。

1.2 方法

所有IgAN患者均維持原有雙倍劑量RAS阻斷劑等常規(guī)治療，在此基礎(chǔ)上，A組患者口服阿法骨化醇膠丸（中美合資昆明貝克諾頓制藥公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字J20130162）0.25 μg，1粒/d，B組口服阿法骨化醇膠丸0.5 μg，1粒/d。兩組療程均為12周。

1.3 檢測指標(biāo)及方法

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測外周血中TNF-α、IL-6和TGF-β1含量。日立7600型全自動生化分析儀檢測血胱抑素-C（Cys-c）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）水平。雙縮脲法測定24 h尿蛋白總量（UTP）。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件對本研究所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，同組內(nèi)治療前后比較采用配對t檢驗，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IgAN組和正常組血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平比較

與正常組比較，IgAN組患者血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平明顯升高，差異均有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.01）。見表2。

2.2 A組和B組Cys-c、BUN、Scr、24 h UTP比較

治療前，A組和B組Cys-c、BUN、Scr、24 h UTP差異比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。12周后，A和B組患者Cys-c、24 h UTP均較本組治療前顯著下降（P < 0.05），且治療B組患者Cys-c、24 h UTP均低于治療A組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。兩組患者BUN、Scr水平比較以及與本組治療前相應(yīng)指標(biāo)水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。見表3。

2.3 A組和B組血清TNF-α、IL-6和TGF-β1比較

治療前，A組和B組患者血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。12周后，A組患者血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）；B組血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平較本組治療前及治療A組治療后明顯下降，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表4。

3 討論

IgAN是多因素參與的免疫相關(guān)性腎小球腎炎，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究認(rèn)為，免疫介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在IgAN發(fā)生、發(fā)展中起關(guān)鍵作用[5]，免疫反應(yīng)為始動因素，IgAN患者體內(nèi)的異常多聚IgA1沉積于腎系膜細(xì)胞（glomerular mesangial cells，GMC）后釋放了多種炎性因子而致病，其中炎性因子TNF-α、IL-6、TGF-β1 在IgAN進(jìn)程中的作用逐漸引起人們的廣泛關(guān)注[6]。

TNF-α主要由活化的單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，但腎臟固有細(xì)胞如GMC、上皮細(xì)胞均可分泌TNF-α。研究表明[7]，TNF-α可影響腎小球GMC功能，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞骨架的改變，刺激GMC增殖及表達(dá)黏附分子，并能刺激成纖維細(xì)胞增生，促進(jìn)腎臟纖維化。有報道顯示[8]，IgAN患者血、尿及腎組織中TNF-α的濃度均明顯增高，其升高程度與病情成正相關(guān)，隨著病情的好轉(zhuǎn)，TNF-α含量明顯下降。IL-6既可作為各種腎臟病急性期反應(yīng)的調(diào)節(jié)因子，又可通過自分泌或旁分泌方式與多種細(xì)胞炎性因子如TNF-α、TGF-β1等相互作用，參與免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)。目前有研究顯示IgAN患者血清IL-6水平明顯增高，IL-6可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的促凝血活性、增加系膜細(xì)胞蛋白激酶的活性，加重腎臟損害[9]。馬云霞等[10]研究表明，在系膜增殖性腎炎病變中，免疫復(fù)合物沉積刺激GMC分泌IL-6，IL-6又可以進(jìn)一步刺激細(xì)胞外基質(zhì)的增生，形成惡性循環(huán)，導(dǎo)致腎小球纖維化。有學(xué)者應(yīng)用抗IL-6抗體，既可抑制GMC分泌IL-6，又可抑制系膜增殖[11]，進(jìn)一步表明IL-6在IgAN的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸中的重要意義。TGF-β1在IgAN進(jìn)展過程中起重要作用，其過度表達(dá)可通過多種途徑促進(jìn)GMC增殖及細(xì)胞外基質(zhì)聚積[12]。多項對TGF-β1/Smad通路的研究發(fā)現(xiàn)，拮抗該通路的活化，可以抑制腎間質(zhì)纖維化[13]。有學(xué)者報道中國華北地區(qū)IgAN患者的腎小球和血清中TGF-β1水平明顯升高，且與病理級別、尿蛋白呈正相關(guān)[14]，提示可以通過抑制TGF-β1生成來防治IgAN的發(fā)生、發(fā)展。

阿法骨化醇主要成分是1α-羥基維生素D3，臨床主要用于骨質(zhì)疏松、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、維生素D缺乏癥和腎性骨病等。近期的動物實驗發(fā)現(xiàn)活性維生素D具有抑制腎素活性、調(diào)節(jié)免疫功能，可以通過核因子κB信號通路及Toll樣受體4路徑抑制腎臟局部炎癥反應(yīng)[15-16]。Fishbane等[17]發(fā)現(xiàn)活性維生素D 治療CKD患者，可抑制T淋巴細(xì)胞的增殖與活化，減少細(xì)胞因子及TGF-β1的產(chǎn)生，抑制粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子及樹突狀細(xì)胞的生長。Andress等[18]在CKD中的研究表明，活性維生素 D 可抑制炎癥因子IL-1B、IL-6合成，促進(jìn)IL-10、IL-4分泌，抑制巨噬細(xì)胞活性。以上研究提示，活性維生素D可以減輕CKD患者的免疫炎癥，但在不同的病理生理狀態(tài)下所需要的最佳劑量尚不明確。

本研究嘗試在已使用雙倍劑量RAS阻斷劑治療3個月以上、但尿蛋白水平未降至0.5 g/24 h以下的IgAN患者中，采用不同劑量阿法骨化醇探討其對IgAN患者血清TNF-α、IL-6 、TGF-β1水平的影響，結(jié)果顯示：與正常組比較，IgAN患者治療前血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，提示IgAN患者存在炎性反應(yīng)，疾病處于進(jìn)展?fàn)顟B(tài)。經(jīng)12周治療后，兩組患者Cys-C及24 h UTP自身前后對照均明顯降低（P < 0.05），組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），說明兩種治療方法均有效，但是B組優(yōu)于A組。有研究表明[19]，雙倍劑量活性維生素D治療糖尿病腎病，其降低尿蛋白程度與單倍劑量相比，有明顯的增加，與本研究結(jié)果類似。表4結(jié)果顯示：兩組患者血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平較治療前均明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

綜上所述，阿法骨化醇對IgAN患者具有減輕炎癥反應(yīng)、減少蛋白尿及保護(hù)腎功能的作用，本研究初步結(jié)果顯示阿法骨化醇0.5 μg/d劑量效果優(yōu)于0.25 μg/d劑量。當(dāng)然，由于本研究納入的樣本量偏少、時間較短，阿法骨化醇對IgAN腎臟保護(hù)作用與劑量依賴性是否相關(guān)有待進(jìn)一步探討。

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篇7

青春期的煩惱，真的可能說不清吧。經(jīng)歷過青春期的人應(yīng)該都知道那應(yīng)該是最難熬的一段日子了，所有人都不理解你來的莫名其妙地小情緒，你臉上時不時冒出來的幾顆紅痘痘，又紅又腫，更是讓一些外協(xié)的人對你的印象不好了，痘痘在青春期簡直算是家長便飯了吧……

青春期還有很多很多說不盡的煩躁啊，雖然青春期的時候身高會漲得更快一些，讓你看上去很高挑，可是正因為身體激素分泌的太多，我們會發(fā)現(xiàn)自己的眼睛看東西也越來越模糊了啊？是的，青春期的時候眼睛度數(shù)也越長越快，給戴眼鏡的小伙伴們造成了無限的煩躁，青春期有一段日子就是叛逆期了，那段時間你會遭受所有人的不理解， 會遭受各種冷嘲熱諷，嘲諷你的為人態(tài)度，嘲諷你的脾氣暴躁，嘲諷你最近一段時期的挫敗，幾乎你身上發(fā)生的所有的事情都會因為你對別人的態(tài)度而遭受別人的非議。想做一個沒有青春期和叛逆期的人啊，可有時候我又想通了。誰沒有經(jīng)歷青春期的時候呢？誰沒有一段青澀稚嫩的青春呢？經(jīng)歷過青春期之后的我們那才是真的成熟了，如果一個人從頭到尾都是成熟的話，那怎么可能呢？我們都不是圣人，誰都有七情六欲誰都有曾經(jīng)懵懂無知的時候啊，我們不可能每一刻都保持住自己的理智啊，誰沒有青春時候沖動過呢？多少人渴望青春的季節(jié)，可現(xiàn)在的我們正在青春的好時期，卻總是不懂得珍惜，人生就是這樣，你擁有的時候不懂得珍惜，等你失去的時候也就是你追悔莫及的時候了。人生充滿了太多的惋惜和后悔了，可我們唯一能做的就是讓我們自己的遺憾和后悔……

青春期，多少人想要回頭再重新經(jīng)歷，可現(xiàn)在的我們又想拋棄青春期這個磨人的小妖精，是苦是樂一切盡在不言中，有人惋惜，有人后悔，有人留戀……

篇8

09年第二天我摔跤。

09年第三天我被OBAS罵。

……

難道這就是青春？

第四天我又會干什么？

青春啊，為什么你總是讓我的運(yùn)氣這么損？為什么你總是讓我的心受傷？

孩子啊，每個人都是這樣走過青春的。

徐老大說，你一年的第一天認(rèn)真寫作業(yè)，你一年就都會認(rèn)真寫作業(yè)。一開始我不屑一顧，覺得我的IQ不會低到被老師騙的程度吧？可是現(xiàn)在我卻好怕，好怕我這一年都會摔跤，都會挨罵。

哎，青春啊青春，為什么你總是這么喜歡捉弄人呢？

媽媽說，我已經(jīng)長大了，懂事了，需要抵抗的誘惑也越來越多了。我知道。媽媽不準(zhǔn)我晚上太晚回來，不可以去偏僻的地方，不可以和無所事事的人玩……好多好多的規(guī)定啊，搞的我好煩好煩。沒辦法，媽媽也是為了我好嘛，所以只好盡量去做媽媽心中的好女兒了。

哎，青春啊青春，為什么你總是有這么多束縛呢？

爸爸說，人不可以活的太張揚(yáng)。我深深的記住了這句話，因為我覺得這話對我一定會有用的。“虛榮心是女孩子的弱點(diǎn)，也是致命的弱點(diǎn)。”爸爸的話我都記得很清楚。我上了中學(xué)，感覺世界也變得復(fù)雜了很多。以前在小學(xué)的時候，不用擔(dān)心會有誰欺負(fù)我，因為在小學(xué)大家都是規(guī)規(guī)矩矩的。可是到了中學(xué)，我走路都是低著頭的，而且見到穿著古怪的學(xué)生就趕緊繞道而行。有時候我都覺得自己有點(diǎn)太過敏感了，因為我生性就怕流氓，看到了總是躲的遠(yuǎn)遠(yuǎn)的，好像他們是老虎獅子似的。爸爸的話讓我明白了，做人不可以太張揚(yáng)，要學(xué)會低調(diào)做人，那樣才不會有危險。

篇9

回首過去，展望未來，可能有太多值得思考和留戀的了，現(xiàn)在，正值青春期的我們，十二三四的年齡，我們是怎樣的呢？

正值青春期的我們，是叛逆？是反感？曾一而再，再而三的與父母頂撞，一切都按照自己的意愿為所欲為。不曾再像小時一樣，為父母捏腰捶背，關(guān)心父母，而是對他們冷眼相對嗎？在那個充滿溫馨的母親節(jié)中，你做了什么？這可能就是：青春期。我們。

正值青春期的我們，開始愛美，耍酷，這都是可以了解的個性，因為畢竟我們還都是一個個正擁有青春面容的孩子，更何況：愛美之心，人皆有之??！可當(dāng)我們在擺弄著那些衣櫥中的愛衣時，爸爸媽媽呢？他們在為我們奔波，為我們這些所有的一切而奮斗??！我們曾有想過他們嗎？我們從來都是那樣刁蠻任性嗎？從來就沒有為他人著想過嗎？我想：這錯了！也許，這就是：青春期。我們

現(xiàn)在，我們每一個孩子，可以說都在正值青春期，而祖國需要的是一個個可以建設(shè)我們國家的棟梁之才??！青春期的我們，還會是那樣嗎？叛逆？強(qiáng)詞奪理？我想：青春期。我們應(yīng)該是另一個新面貌，另一個世界的我們……所有青春期的朋友，也許，我們的青春期應(yīng)該是另一個面貌，不是嗎？

四小，五一五年級：唐一鳴

篇10

斑駁在童年的夢上，

那綺麗的南柯一夢；

那嫣然的芳菲夢想；

那縹緲的真摯諾言。

可愛的青春，

倒映在母親的搖籃上，

那綿綿的天籟絮語；

那迷人的溫馨童話；

那愜意的搖籃曲音符。

莫名的青春，

相逢在十五歲的路上，

那壯闊的藍(lán)天蒼穹；

那輕柔的雀躍步履；

那點(diǎn)滴的容貌蛻變。

深邃的青春，

相約在陌生的欲望上，

那澎湃的人生舞臺；

那素顏的青春傷疤；

那破繭的酸楚悲痛。

朋友??！

別做昏庸的無知者，

一起擁護(hù)青春，

喝彩青春，

珍惜青春，

把握青春。

朋友??！

用一顆無暇的心，