導(dǎo)語：小青龍湯復(fù)方提取工藝研究論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1儀器與試藥

1.1儀器Agilent1100Series高效液相色譜儀（安捷倫公司）；SartoriusBP211-D電子天平（德國(guó)賽多利斯公司）。

1.2試藥

麻黃、芍藥、細(xì)辛、干姜、甘草、桂枝、半夏和五味子藥材（均購(gòu)于成都市荷花池中藥材市場(chǎng)）；磷酸二氫鉀、磷酸；甲醇和乙腈為色譜純。

2方法［2，3］

2.1指標(biāo)及含量測(cè)定方法《中國(guó)藥典》2005版收載的小青龍湯現(xiàn)有制劑均只以方中的芍藥苷為質(zhì)量控制指標(biāo)，因此本方保留該質(zhì)量控制指標(biāo)。復(fù)方中麻黃為君藥，因此增加鹽酸麻黃堿為質(zhì)量控制指標(biāo)。

2.1.1鹽酸麻黃堿含量測(cè)定方法鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液的制備：精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品10.83mg于100ml容量瓶中，以甲醇定容，搖勻，精密吸取2ml于25ml量瓶中，甲醇定容，搖勻，過0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液備用。

麻黃供試品的制備：精密量取復(fù)方提取液適量（相當(dāng)于麻黃生藥0.2g）于已干燥的錐形瓶中，低溫?fù)]干，以25ml甲醇溶解，稱定重量，超聲處理45min，放冷，再稱定重量，以甲醇補(bǔ)足減少量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)液1ml，置中性氧化鋁柱（100～200目，內(nèi)徑1cm，1.5g）上，以50%甲醇洗脫，收集洗脫液約9ml于量瓶中，加磷酸1滴，以50%甲醇定容搖勻，過0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液備用。

測(cè)定方法：C18柱（250mm×4.6mmDiamonsil5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸（9∶90），以三乙胺調(diào)節(jié)pH=4.5，檢測(cè)波長(zhǎng)207nm，流速1ml/min，柱溫25℃，理論板數(shù)以鹽酸麻黃堿峰計(jì)，不得低于3000。

鹽酸麻黃堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別吸取鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液2，4，6，8，10，12，16，20，24μl進(jìn)樣，按照測(cè)定方法測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果見圖1?；貧w曲線Y=1722.7X+39.103，R2=0.9998，鹽酸麻黃堿進(jìn)樣量在0.017288～0.207456μg間具有良好的線性關(guān)系。

2.1.2芍藥苷含量測(cè)定方法

芍藥苷對(duì)照品溶液的制備：精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，加入量瓶中，甲醇定容，制成60μg/ml的甲醇對(duì)照品溶液，過0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液備用。

白芍供試品溶液的制備：精密量取復(fù)方提取液適量（相當(dāng)于白芍生藥0.1g），水浴揮干，以35ml稀乙醇轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，超聲處理30min，冷卻至室溫，稀乙醇定容，搖勻，過0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液備用。

測(cè)定方法：C18柱（250mm×4.6mm,Diamonsil5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸（14∶86），檢測(cè)波長(zhǎng)230nm，流速1ml/min，柱溫25℃，理論板數(shù)以芍藥苷峰計(jì)，不得低于2000。

芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別吸取芍藥苷對(duì)照品溶液1，2，3，4，6，8μl進(jìn)樣，按照測(cè)定方法測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，（見圖2）?；貧w曲線Y=15414X+2.5391，R2=0.9998，芍藥苷進(jìn)樣量在0.006～0.048μg間具有良好的線性關(guān)系。

2.26種提取工藝的優(yōu)化研究及結(jié)果

2.2.1不同提取溶劑回流提取工藝研究及結(jié)果以水、60%乙醇、95%乙醇為提取溶劑，按L9（34）正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。因素水平安排按照表1執(zhí)行，實(shí)驗(yàn)按各正交表實(shí)施，結(jié)果用SPSS11.5作方差分析，確定優(yōu)化工藝。結(jié)果見表2～7。表1不同溶液回流提取工藝因素水平（略）表2以水為溶劑回流提取考察結(jié)果（略）表3以水為溶劑回流提取方差分析結(jié)果（略）表4以60%乙醇為溶劑回流提取考察結(jié)果（略）表5以60%乙醇溶劑回流提取方差分析結(jié)果（略）表6以95%乙醇為溶劑回流提取考察結(jié)果（略）表7以95%乙醇為溶劑回流提取方差分析結(jié)果（略）

由方差分析結(jié)果分析得，影響因素大小為：提取次數(shù)（C）＞提取溶劑量（A）＞提取時(shí)間（B），3個(gè)因素均具有顯著性影響，優(yōu)化工藝為A2B2C3。

由方差分析結(jié)果得，影響因素大小為：提取時(shí)間（B）＞提取溶劑量（A）＞提取次數(shù)（C），3個(gè)因素均具有顯著性影響，優(yōu)化工藝為A3B2C2。

由方差分析結(jié)果分析得，影響因素大小為：提取次數(shù)（C）＞提取溶劑量（A）＞提取時(shí)間（B），3個(gè)因素均具有顯著性影響，優(yōu)化工藝為A3B2C3。

2.2.2不同提取溶劑滲漉提取工藝研究及結(jié)果以水、60%乙醇、95%乙醇為提取溶劑，按L9（34）正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。因素水平安排按照表8執(zhí)行，實(shí)驗(yàn)按各正交表實(shí)施，結(jié)果用SPSS11.5作方差分析，確定優(yōu)化工藝。結(jié)果見表9～14。表8不同溶劑滲漉提取工藝因素水平（略）表9以水為溶劑滲漉提取考察結(jié)果（略）表10以水為溶劑滲漉提取方差分析結(jié)果（略）表11以60%乙醇為溶劑滲漉提取考察結(jié)果（略）表12以60%乙醇溶劑滲漉提取方差分析結(jié)果（略）表13以95%乙醇為溶劑滲漉提取考察結(jié)果（略）表14以95%乙醇為溶劑滲漉提取方差分析結(jié)果（略）

由方差分析結(jié)果分析得，影響因素大小為：滲漉液量（A）＞滲液速度（C）＞藥材粒度（B），A和C因素具有顯著性影響，優(yōu)化工藝為A3B2C3。

由方差分析結(jié)果得，影響因素大小為：藥材粒度（B）＞滲漉液量（A）＞滲漉速度（C），B因素具有顯著性影響，優(yōu)化工藝為A1B3C1。

由方差分析結(jié)果分析得，影響因素大小為：滲漉液量（A）＞藥材粒度（B）＞滲漉速度（C），A因素具有顯著性影響，優(yōu)化工藝為A2B2C1。

2.3不同提取工藝及提取溶劑對(duì)提取工藝的影響對(duì)比研究

2.3.1不同正交實(shí)驗(yàn)因素分析結(jié)果見表15。表15不同正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析（略）

2.3.2不同優(yōu)化提取工藝的對(duì)比研究按照上述各種優(yōu)化工藝，分別稱取復(fù)方藥材進(jìn)行提取試驗(yàn)，以提取液中鹽酸麻黃堿和芍藥苷的含量為指標(biāo)加權(quán)（權(quán)重系數(shù)依次為0.6和0.4），綜合評(píng)價(jià)提取工藝。對(duì)比不同提取工藝的差異。結(jié)果見表16。表16不同工藝驗(yàn)證結(jié)果(略)

2.3.3相同方法不同溶劑對(duì)提取工藝的影響研究結(jié)果見表17。表17不同溶劑時(shí)間的比較結(jié)果（略）

2.3.4相同溶劑不同提取方法間的比較研究結(jié)果見表18。表18不同提取方法比較結(jié)果（略）

2.3.5綜合評(píng)價(jià)結(jié)果實(shí)驗(yàn)表明，在考察范圍內(nèi)，小青龍湯提取工藝優(yōu)劣順序?yàn)?0%乙醇回流提?。舅亓魈崛。?0%乙醇滲漉＞95%乙醇回流提取＞水滲漉；提取方法對(duì)比研究結(jié)果表明，回流提取方法效果較滲漉提取方法效果好；提取溶劑對(duì)比研究表明60%乙醇為提取溶劑較其他兩種溶劑效果好。

3討論

現(xiàn)有小青龍湯成方制劑只選擇了芍藥苷為含量控制指標(biāo)，對(duì)于復(fù)方制劑的多指標(biāo)多成分而言，顯得質(zhì)量控制過于單一。本研究從處方構(gòu)成出發(fā)，增加君藥麻黃的指標(biāo)成分鹽酸麻黃堿為指標(biāo)，更多的注重全方的系統(tǒng)性。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果均反應(yīng)回流提取法較滲漉法的提取效果好，其中提取溶劑又以60%乙醇為佳，這與控制指標(biāo)的選擇有一定的關(guān)系，但是是否在藥效方面有正變的關(guān)系，還需要進(jìn)行藥效學(xué)研究。

小青龍湯整體提取的不同工藝比較結(jié)果得出，優(yōu)化提取工藝為12倍量60%乙醇回流提取2次，1.5h/次。所得優(yōu)化提取工藝合理可行，可作為小青龍湯的提取工藝。

【參考文獻(xiàn)】

［1］段富津.方劑學(xué)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002：25.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

［3］馬云淑，寧朝香.小青龍滴丸的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［J］.云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，22（3）：14.

【摘要】目的探討提取方法、提取溶劑對(duì)小青龍湯復(fù)方提取的影響，并篩選出最佳提取工藝。方法擬用回流、滲漉兩種傳統(tǒng)提取法，水、60%乙醇、95%乙醇3種提取溶劑進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，以提取液中鹽酸麻黃堿、芍藥苷含量（權(quán)重系數(shù)依次為0.6，0.4）為指標(biāo)，通過指標(biāo)加權(quán)計(jì)算綜合評(píng)分以評(píng)價(jià)提取工藝，篩選出6種不同提取工藝的最佳提取條件，再對(duì)這6種提取工藝進(jìn)行相同方法不同溶劑、相同溶劑不同方法的比較研究。結(jié)果小青龍湯最佳提取工藝為以12倍量60%乙醇回流提取2次，1.5h/次。結(jié)論所得優(yōu)化提取工藝合理可行，可作為小青龍湯的提取工藝。

【關(guān)鍵詞】小青龍湯復(fù)方；正交實(shí)驗(yàn)；鹽酸麻黃堿；芍藥苷