動(dòng)物源性飼料檢測(cè)技術(shù)研究

時(shí)間:2022-09-10 09:02:30

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動(dòng)物源性飼料檢測(cè)技術(shù)研究

動(dòng)物源性飼料檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展瘋牛病作為一種神經(jīng)性、漸進(jìn)性的動(dòng)物疾病,其傳染的的頻率快、范圍廣,危害性較大,直接影響動(dòng)物和人的安全。瘋牛病最早暴發(fā)在歐洲地區(qū)的英國(guó),為英國(guó)以及歐洲養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了極大損失。此類疾病發(fā)生主要原因是飼料中的牛肉、羊肉、腦、脊髓、內(nèi)臟,污染了朊病毒,并且牛羊制品也會(huì)攜帶朊病毒。使用這些原料制作飼料,會(huì)傳播朊病毒,對(duì)動(dòng)物以及人類構(gòu)成威脅。

1顯微鏡檢測(cè)技術(shù)

顯微鏡檢測(cè)是一種應(yīng)用較早的檢測(cè)技術(shù),美國(guó)和加拿大最先使用,距今已有40年之久,也是歐盟唯一承認(rèn)的動(dòng)物源性飼料官方檢測(cè)方法。顯微鏡檢測(cè)主要低倍鏡檢測(cè)和生物顯微鏡檢測(cè)。低倍鏡主要用于監(jiān)測(cè)飼料的顏色、形狀、粒度、硬度、氣味等各項(xiàng)物理性狀。而生物顯微鏡主要檢測(cè)飼料當(dāng)中的細(xì)胞、組織結(jié)構(gòu)。生物顯微鏡檢測(cè)時(shí),一般需要將動(dòng)物單蛋白粉碎、其粒度非常小,細(xì)胞結(jié)構(gòu)容易被破壞,所以檢測(cè)的難度相對(duì)較大。若要使用生物顯微鏡檢測(cè),需要研究者掌握扎實(shí)的生理以及解剖知識(shí)才能夠開(kāi)展相關(guān)操作,并獲取較為準(zhǔn)確的結(jié)果。飼料中的動(dòng)物源性成分一般都是動(dòng)物骨骼和肌肉,其中動(dòng)物骨骼在133℃高溫下持續(xù)20min依然保持穩(wěn)定,這可作為顯微鏡檢測(cè)技術(shù)的關(guān)鍵點(diǎn)。而用于顯微鏡檢測(cè)的肌纖維片段相對(duì)短小,且肌肉纖維的寬度和動(dòng)物的影響狀況、飼料加工情況息息相關(guān),所以無(wú)法將其作為動(dòng)物源性飼料的判斷依據(jù)。所以在進(jìn)行低倍鏡觀測(cè)時(shí),哺乳動(dòng)物的骨組織呈現(xiàn)出不透明的白色和乳白色石塊,禽類的骨組織在粉碎時(shí)更加容易破碎,末端呈現(xiàn)出尖銳的狀態(tài)。在高倍鏡下觀察,哺乳動(dòng)物骨組織表面可以看到橢圓形或近似圓形的縫隙,縫隙之間有著細(xì)小的微管相連接,而魚(yú)骨組織一般都是呈現(xiàn)出平行排列的狀態(tài),骨裂拉長(zhǎng)呈現(xiàn)出紡錘形,裂縫之間有著明顯的微管結(jié)構(gòu)。經(jīng)驗(yàn)豐富的高倍鏡檢測(cè)技術(shù)人員,可以檢測(cè)到最低添加量0.1%的動(dòng)物源性飼料。

2PCR檢測(cè)技術(shù)

PCR檢測(cè)技術(shù)一般分為兩種手段,分別是傳統(tǒng)PCR檢測(cè)技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)。2.1傳統(tǒng)PCR檢測(cè)。PCR是一種用于放大壙增特定DN段的分子生物學(xué)技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核和線粒體都有DNA,可作為PCR檢測(cè)技術(shù)的靶序列。線粒體DNA是一個(gè)比較理想的用于PCR檢測(cè)的靶基因,由于不同動(dòng)物體存在許多拷貝線粒體基因組的模板數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了細(xì)胞核染色體基因模板,這就可以有效的增強(qiáng)PCR檢測(cè)的靈敏度。此外,由于許多動(dòng)物線粒體的基因組已經(jīng)被完全測(cè)定,并且很多已知的基因組能夠找到保守核苷酸序列,所以結(jié)合特定的引物,可有效提升PCR檢測(cè)的特異性。2.2實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)。該法是指在PCR反應(yīng)體系中加熒光基因,利用熒光信號(hào)積累時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),能在原有的反應(yīng)體系當(dāng)中,加入一條熒光標(biāo)記探針,當(dāng)探針保持完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)的熒光信號(hào)就被淬滅基團(tuán)所淬滅。通過(guò)收集熒光信號(hào),可以對(duì)整個(gè)PCR檢測(cè)整體過(guò)程進(jìn)行實(shí)施監(jiān)控和動(dòng)態(tài)分析??梢杂行У谋苊鈧鹘y(tǒng)PCR檢測(cè)技術(shù)的耗時(shí)耗力,適合大批量的飼料樣品檢測(cè)。

3結(jié)束語(yǔ)

要切實(shí)有效保障飼料的健康安全、避免動(dòng)物源性物質(zhì)在飼料中出現(xiàn),應(yīng)該研究多樣化的動(dòng)物源性飼料檢測(cè)技術(shù),最大程度上確保動(dòng)物及人類的生命安全。

作者:閆超 單位:河北省獸藥監(jiān)察所