導(dǎo)語(yǔ)：病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)研究一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

摘要:為培養(yǎng)學(xué)生生物安全意識(shí)，養(yǎng)成正確的生物安全操作習(xí)慣，在病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課中加強(qiáng)生物安全教學(xué)至關(guān)重要。文章立足學(xué)校和學(xué)科現(xiàn)狀，從加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范、注重教師教育和培訓(xùn)以及強(qiáng)化生物安全知識(shí)和無(wú)菌操作訓(xùn)練等方面加強(qiáng)生物安全教學(xué)，取得良好效果。

關(guān)鍵詞:病原生物學(xué);實(shí)驗(yàn)教學(xué);生物安全;實(shí)驗(yàn)室管理

隨著生物研究、醫(yī)療、衛(wèi)生事業(yè)的迅速發(fā)展，實(shí)驗(yàn)室感染事故也時(shí)有發(fā)生。2003年，新加坡、中國(guó)臺(tái)灣及北京均有研究人員因?yàn)镾ARS病毒的泄漏或處置不當(dāng)而造成嚴(yán)重的后果［1］，2010年?yáng)|北某高校生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生28人的布魯菌感染事件，都讓我們認(rèn)識(shí)到生物危害的嚴(yán)重性，以及加強(qiáng)生物安全教學(xué)，即避免危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露，向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施教育的必要性。病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課以其特殊的實(shí)驗(yàn)材料“具有感染性的微生物和寄生蟲”，在醫(yī)學(xué)院校本科生實(shí)驗(yàn)教學(xué)中承擔(dān)著培養(yǎng)學(xué)生生物安全意識(shí)，養(yǎng)成正確的生物安全操作規(guī)范的重要責(zé)任。生物安全貫穿實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過程，生物安全教育也要貫穿于實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的全過程［1，2］。本課程立足學(xué)校和學(xué)科的現(xiàn)狀，從加強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范、注重教師教育及培訓(xùn)、強(qiáng)化生物安全知識(shí)和無(wú)菌操作訓(xùn)練等幾個(gè)方面加強(qiáng)生物安全教學(xué)。

1標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)

病原生物學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室在教學(xué)過程中涉及到第三類和第四類病原體，因此必須要有相應(yīng)的生物安全實(shí)驗(yàn)室而不是普通實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行教學(xué)實(shí)驗(yàn)和準(zhǔn)備工作。根據(jù)國(guó)家有關(guān)部門并實(shí)施的兩個(gè)重要的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)［2］，即《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB19489－2008)和《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》(GB50346－2011)，我們對(duì)原普通實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行改造，建設(shè)生物安全一級(jí)實(shí)驗(yàn)室(BSL－1)5間，用于本科生實(shí)驗(yàn)，以及BSL－2級(jí)實(shí)驗(yàn)室1間，用于實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及少數(shù)RBL學(xué)生實(shí)驗(yàn)。BSL－1級(jí)實(shí)驗(yàn)室外的走廊設(shè)置了可供同學(xué)們放置書包等個(gè)人物品的儲(chǔ)物柜，以免帶入實(shí)驗(yàn)室而污染。實(shí)驗(yàn)室張貼明顯生物安全標(biāo)識(shí)，室內(nèi)配制了洗眼器、消防器材、應(yīng)急燈、緊急出口標(biāo)識(shí)等預(yù)防突發(fā)事件的設(shè)施。同時(shí)，生物安全柜作為重要的保障生物安全的儀器也引入了學(xué)生BSL－1級(jí)實(shí)驗(yàn)室。作為BSL－2級(jí)實(shí)驗(yàn)室的配套，還配備2臺(tái)高壓蒸汽滅菌器，將清潔物以及污染廢棄物的滅菌處理分開。

2嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范

合格的硬件設(shè)施只是實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的基礎(chǔ)條件，嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范才是實(shí)驗(yàn)室安全順利運(yùn)行的基石，根據(jù)國(guó)家陸續(xù)頒布實(shí)驗(yàn)室生物安全的法律、法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn):《醫(yī)療廢棄物管理?xiàng)l例》(2003年國(guó)務(wù)院第380號(hào)令)、《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》(2004年第17號(hào)主席令)、《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》(2004年國(guó)務(wù)院第424號(hào)令)、《人間傳染的病原微生物名錄》(2006年衛(wèi)生部令)、《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》(2006年衛(wèi)生部第45號(hào)令)、《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》(中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS233－2017)［3，4］，相應(yīng)建立了“實(shí)驗(yàn)室安全管理制度”、“菌/毒種管理制度”、“化學(xué)危險(xiǎn)品管理制度”、“實(shí)驗(yàn)室廢棄物處置制度”、“實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度”、“實(shí)驗(yàn)室設(shè)備管理制度”、“突發(fā)狀況緊急處置預(yù)案”、“生物因子生物危害評(píng)估”、“生物安全檢查制度”、“實(shí)驗(yàn)室人員生物安全行為規(guī)范”及“事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度”等多項(xiàng)管理制度，并予以嚴(yán)格執(zhí)行［5］。

3注重教師教育及培訓(xùn)

教師是生物安全知識(shí)的傳授者，其對(duì)生物安全知識(shí)的重視程度和相應(yīng)的理論和實(shí)踐知識(shí)的積累是圓滿達(dá)成生物安全教學(xué)目標(biāo)的關(guān)鍵。從2008年開始，不論是上課教師還是實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備人員每?jī)赡瓯仨殔⒓右淮斡缮虾Ｊ蓄A(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)舉辦的為期兩天的生物安全培訓(xùn)，經(jīng)考核通過后方能繼續(xù)工作。積極鼓勵(lì)教師參加國(guó)內(nèi)和國(guó)際的生物安全交流會(huì)議，同時(shí)邀請(qǐng)國(guó)際生物安全專家講學(xué)，不斷更新教師們生物安全的知識(shí)體系，強(qiáng)化其生物安全意識(shí)。在常規(guī)集體備課和試講中也強(qiáng)調(diào)生物安全細(xì)節(jié)的培訓(xùn)，每一步不僅要告知學(xué)生如何操作，而且還要告知如此操作的原因，比如在講解無(wú)菌操作時(shí)，用完的接種環(huán)需要燒灼滅菌后再放置回接種環(huán)架，這一步同學(xué)們非常容易理解，是避免接種環(huán)上殘留的細(xì)菌的污染環(huán)境。標(biāo)準(zhǔn)取完細(xì)菌的接種環(huán)燒灼滅菌步驟應(yīng)該是將圓環(huán)的上部區(qū)域放置于火焰外焰1－2s，待圓環(huán)部位菌液烤干后，再燒灼圓環(huán)部位，然后后續(xù)滅菌過程同未取細(xì)菌接種環(huán)燒灼滅菌過程相同。帶教老師若僅如此操作，學(xué)生會(huì)覺得多此一舉，很可能在他們實(shí)際操作中不會(huì)依此而行，如果老師在操作時(shí)把原因講清楚，“如果直接將帶有菌液的接種圓環(huán)部位在火焰外焰燒灼，會(huì)產(chǎn)生大量氣溶膠污染周圍環(huán)境”，讓學(xué)生明白這個(gè)步驟的重要性，不僅能留下深刻印象，而且是規(guī)范操作的動(dòng)力和保證。

4生物安全教學(xué)的實(shí)施

4.1教學(xué)內(nèi)容的梳理。根據(jù)前面所提的各項(xiàng)法規(guī)我們對(duì)病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)材料包括菌株、毒株、血清以及蟲體等進(jìn)行了梳理，對(duì)于達(dá)不到規(guī)范要求的實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行替換或者對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及形式進(jìn)行調(diào)整［3］。比如抗酸染色中結(jié)核病人的痰液我們用卡介苗制成人工痰液代替，肥達(dá)試驗(yàn)中的病人血清我們用自制的傷寒O抗體和H抗體的混合物代替，病毒血凝和血凝抑制試驗(yàn)中所用的試劑我們用禽流感監(jiān)測(cè)試劑盒中的試劑代替，弓形蟲試驗(yàn)由傳統(tǒng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)改為虛擬實(shí)驗(yàn)。4.2生物安全相關(guān)內(nèi)容的強(qiáng)化。我們把“實(shí)驗(yàn)室規(guī)范”、“生物安全”和“無(wú)菌操作”作為第一次實(shí)驗(yàn)課的關(guān)鍵內(nèi)容，將實(shí)驗(yàn)室要求和安全規(guī)范制作成卡通片，并以微信公眾號(hào)推送的形式，在上課之前就讓同學(xué)們學(xué)習(xí)。這樣能在第一次上課時(shí)，杜絕不穿實(shí)驗(yàn)服、穿著露趾鞋、頭發(fā)披散及攜帶食物及水杯進(jìn)教室的現(xiàn)象。老師們?cè)谡n堂上會(huì)結(jié)合實(shí)際講解注意事項(xiàng)，發(fā)生緊急情況的應(yīng)對(duì)方案，講明教室各項(xiàng)相關(guān)設(shè)施如洗眼器、醫(yī)療廢棄物放置區(qū)、利器盒等等，對(duì)學(xué)生的醫(yī)療廢物處理方式進(jìn)行強(qiáng)化教育，不同的廢物丟棄至不同的垃圾箱中，認(rèn)真嚴(yán)格的對(duì)待醫(yī)療廢物的處理。結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)室不遵守安全規(guī)范帶來的嚴(yán)重后果，并且強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)室要求與安全規(guī)范與成績(jī)掛鉤，如果嚴(yán)重違反，比如私自帶走實(shí)驗(yàn)材料等，一經(jīng)查明，平時(shí)成績(jī)記零分。生物安全貫穿實(shí)驗(yàn)操作的整個(gè)過程，生物安全教育也要貫穿于實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的全過程。從第一節(jié)課直至最后操作考試，生物安全都是強(qiáng)調(diào)和要求的重點(diǎn)，鼓勵(lì)老師將看到的同學(xué)們或其他部門不符合生物安全規(guī)范的情況以照片等形式記錄下來，并且在課堂讓同學(xué)們分析借鑒。正確的操作是生物安全的基礎(chǔ)，特別是無(wú)菌操作技術(shù)尤為關(guān)鍵。我們將標(biāo)準(zhǔn)操作過程拍攝成微視頻，放在課程網(wǎng)站上供同學(xué)們隨時(shí)學(xué)習(xí)，還以實(shí)驗(yàn)操作競(jìng)賽和實(shí)驗(yàn)操作考試等多種形式，促進(jìn)同學(xué)們對(duì)該技術(shù)的掌握和重視。生物安全柜是生物安全實(shí)驗(yàn)室極為重要的設(shè)備，規(guī)范正確的使用是保證生物安全必備條件。我們?cè)诿總€(gè)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室配備一臺(tái)ⅡA型生物安全柜，講解其原理，操作要點(diǎn)和注意事項(xiàng)，并在后續(xù)常規(guī)實(shí)驗(yàn)操作中，讓小班同學(xué)分批使用，錯(cuò)誤的操作及時(shí)得到帶班老師的糾正，確保每位同學(xué)均能規(guī)范操作。對(duì)于生物醫(yī)科科學(xué)專業(yè)的同學(xué)和選擇在病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行RBL學(xué)習(xí)的同學(xué)，在生物安全方面的要求更高，比如要掌握高壓蒸汽滅菌器的規(guī)范操作以及如何使用BSL－2級(jí)實(shí)驗(yàn)室等等，并且設(shè)計(jì)一些突發(fā)狀況進(jìn)行實(shí)際演練。4.3以人為本。一方面要讓同學(xué)們有生物安全的意識(shí)，另一方面也不要讓同學(xué)們因?yàn)閲?yán)格要求而產(chǎn)生抵觸情緒，因此在嚴(yán)格的教學(xué)和管理中，勿忘以人為本，各項(xiàng)規(guī)章制度既要學(xué)生遵守，但也留有一絲溫情，反而更能達(dá)到目的。比如基于學(xué)生實(shí)驗(yàn)課基本要求和生物安全規(guī)范要求，每個(gè)走進(jìn)實(shí)驗(yàn)室上課的學(xué)生必須穿著實(shí)驗(yàn)服，但偶有學(xué)生忘記，以前我們強(qiáng)制學(xué)生去拿，校內(nèi)的學(xué)生好說，耽誤十分鐘課，可住在校外宿舍的同學(xué)來回起碼要耽誤一節(jié)課的時(shí)間。現(xiàn)在我們通過回收學(xué)生實(shí)驗(yàn)課結(jié)束后丟棄的實(shí)驗(yàn)服，洗凈消毒后在準(zhǔn)備間存儲(chǔ)起來。如果同學(xué)沒帶實(shí)驗(yàn)服，可登記后借用。但是，按照規(guī)定，第一次為無(wú)償借用，自第二次起則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)課的平時(shí)成績(jī)。

5教學(xué)成效

自從本實(shí)驗(yàn)室在課程中加強(qiáng)生物安全教育之后，生物安全意識(shí)普遍加強(qiáng)，著裝符合實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范，2017學(xué)年2萬(wàn)多生學(xué)時(shí)數(shù)的實(shí)驗(yàn)課中，實(shí)驗(yàn)服的借用率117次，僅有0.5%左右;學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作更加規(guī)范，無(wú)菌操作意識(shí)大大加強(qiáng);無(wú)一例私帶實(shí)驗(yàn)材料事故發(fā)生;無(wú)一例生物安全事故發(fā)生;生物安全知識(shí)考核正確率從87%左右(未學(xué)習(xí))到95%(通過所給安全錄像等進(jìn)行學(xué)習(xí)后的)一直提高到99%以上(經(jīng)過完整課程學(xué)習(xí))。更為可喜的是，近一兩年，老師們都會(huì)接到已經(jīng)進(jìn)入臨床或科研階段的同學(xué)們就如何安全開展細(xì)菌、病毒等實(shí)驗(yàn)的電話、微信等詢問，說明生物安全的防控意識(shí)在同學(xué)們頭腦里扎下了根。病原生物學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室是開展病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)，培養(yǎng)醫(yī)學(xué)及相關(guān)專業(yè)學(xué)生的動(dòng)手能力、科研思維、綜合分析與解決問題能力、合作意識(shí)和團(tuán)隊(duì)精神的重要教學(xué)基地［6，7］。病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課規(guī)范的生物安全教學(xué)和培訓(xùn)，使未來的醫(yī)務(wù)工作者和醫(yī)學(xué)研究人員具有嚴(yán)格的生物安全觀念和素養(yǎng)，為同學(xué)、醫(yī)院及社會(huì)提供了安全的保障，一定要常抓不懈。

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作者:張灼陽(yáng) 袁臻東 楊 楊 楊鶴萍 趙 蔚 單位:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心