導語：肺炎克雷伯菌β內(nèi)酰胺酶檢測與相關(guān)耐藥表型分析一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

［摘要］目的：研究呼吸科肺炎克雷伯菌對14種常用抗生素的耐藥性及其產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)菌株的檢出率。方法：選擇從臨床呼吸科分離的肺炎克雷伯菌，用KB紙片擴散法、雙紙片協(xié)同試驗和紙片確證試驗篩選和確認產(chǎn)ESBLs的菌株。結(jié)果：3a中呼吸科肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs總檢出率為36.7%(94/256)，產(chǎn)ESBLs菌株對亞胺培南高度敏感(100%)，對氨芐西林、頭孢唑林、頭孢噻肟、頭孢曲松、慶大霉素、環(huán)丙沙星均有極高的耐藥性(耐藥率＞80%)，高于不產(chǎn)ESBLs組，差異有顯著性(P＜0.005)。結(jié)論：呼吸科肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株的臨床分離率高，對多種抗生素具有較高耐藥性，亞胺培南是治療產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌感染的首選藥物。

［關(guān)鍵詞］肺炎克雷伯菌；β內(nèi)酰胺酶；耐藥性；呼吸科

質(zhì)粒介導的超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的產(chǎn)生和傳播是革蘭陰性桿菌對β內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的重要原因之一［1］。肺炎克雷伯菌是最常見的產(chǎn)ESBLs菌株［2］，已成為醫(yī)院感染的重要病原菌之一，可造成嚴重的醫(yī)院感染暴發(fā)和院外耐藥菌株的傳播［3］。特別是質(zhì)粒介導的ESBLs因其底物譜廣、傳播速度快而引起廣泛關(guān)注。我們對2003年1月至2005年12月本院呼吸科分離的肺炎克雷伯菌進行了抗生素敏感度測定及對產(chǎn)ESBLs菌株進行了檢測，現(xiàn)報道如下。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1菌株肺炎克雷伯菌來源于2003年1月至2005年12月本院呼吸科患者送檢痰標本，10天內(nèi)分離出相同菌種取第1次分離株。

1.1.2試劑API試條、MH瓊脂(法國梅里埃公司產(chǎn)品)，藥敏紙片：頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢噻肟/棒酸、頭孢他啶/棒酸購于英國Oxoid公司，其他藥敏紙片購于杭州天和微生物試劑廠。

1.2方法

1.2.1菌種鑒定根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》操作，采用API試條和APILABPLUS細菌鑒定系統(tǒng)進行細菌鑒定。

1.2.2藥敏試驗采用KB法，結(jié)果判讀按NCCLS2002年推薦標準。

1.2.3ESBLs檢測采用雙紙片協(xié)同試驗法，選取對頭孢噻肟耐藥或中介耐藥的肺炎克雷伯菌株，按常規(guī)紙片擴散法在MH瓊脂平板上涂布受試菌，先在平板中心貼上20μg/1μg阿莫西林/克拉維酸紙片，爾后在其上下左右貼30μg/片頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢他啶和氨曲南紙片，其紙片中心距復合劑紙片中心30mm或20mm，35℃孵育18h～20h。如周圍4個藥敏紙片中有任何一個抑菌環(huán)在靠近復合紙片一側(cè)的邊緣出現(xiàn)擴大或增強，說明該菌產(chǎn)ESBLs。如結(jié)果可疑或協(xié)同試驗陰性，但KB藥敏結(jié)果提示可能產(chǎn)ESBLs，則用確證試驗驗證，結(jié)果按美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)2002年推薦的標準判讀。ESBLs陰性質(zhì)控株為大腸埃希菌ATCC25922，ESBLs陽性質(zhì)控菌為ATCC700603。

2結(jié)果

2.1ESBLs檢出率3年中從下呼吸道感染標本中共檢出256株肺炎克雷伯菌，其中有94株產(chǎn)ESBLs，檢出率為36.7%(94/256)，較盧小軍等［4］報道的19.6%要高得多，較朱冬林等［5］報道的43.1%低。3年中呼吸科下呼吸道感染標本中產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌分離率，分別為33.3%(20/60)、37.5%(30/80)、37.9%(44/116)。

2.2產(chǎn)ESBLs和非產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌耐藥情況(中介歸于耐藥)產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌對亞胺培南全部敏感，對頭孢派酮/舒巴坦等加酶抑制劑的藥物耐藥率從2003年2.0%上升到2005年的11.8%，對頭孢唑林、頭孢噻肟、頭孢曲松、慶大霉素、環(huán)丙沙星耐藥突出，均超過80%，有的超過90%，對氨芐西林100%耐藥，而非產(chǎn)ESBLs菌株對上述除氨芐西林外的其他抗生素，均表現(xiàn)出較好的敏感率。結(jié)果見表1。

表1256株肺炎克雷伯菌耐藥表型結(jié)果（略）

3討論

有文獻［6］報道，肺炎克雷伯菌在痰培養(yǎng)所得革蘭陰性桿菌中占第二位，肺炎克雷伯菌是最常見的產(chǎn)ESBLs菌株。細菌產(chǎn)ESBLs多由于使用了超廣譜β內(nèi)酰胺類抗生素，使它們原有經(jīng)典酶TEM1、TEM2及SHV1經(jīng)點的突變而形成，它們可以不同程度的水解β內(nèi)酰胺類抗生素，如青霉素類、三代頭孢菌素等。肺炎克雷伯菌對氨基糖苷類耐藥的一個重要機制為鈍化酶的產(chǎn)生。ESBLs抑制劑與β內(nèi)酰胺類抗生素聯(lián)合應用是治療耐藥菌的有效途徑之一。值得注意的是亞胺培南本身對ESBLs穩(wěn)定，在臨床上能有效治療產(chǎn)酶細菌的感染，但同時亞胺培南卻是一種強有力的ESBLs誘導劑，能誘導產(chǎn)生大量的ESBLs，其作用的兩面性值得重視［7］。

參考文獻：

［1］王志軍，倪語星.超廣譜TEMβ內(nèi)酰胺酶檢測及分型［J］.中華醫(yī)學檢驗雜志，1999，22(6)：347348.

［2］熊劍輝.Etest用于革蘭陰性桿菌超廣譜β內(nèi)酰胺酶測定［J］.臨床檢驗雜志，1998，16(2)：138140.

［3］WienerJ,QuinnJP,BradfordPA,etal.MultipleantibioticresistantKlebsiellaandEscherichiacoliinnursinghomes［J］.JAMA,1999,281:517523.

［4］盧小軍，吳升，張麗君，等.產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶菌在老年患者中的感染［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2003，13(6)：586587.

［5］朱冬林，張嶸.陰溝腸桿菌等細菌超廣譜β內(nèi)酰胺酶檢測的探討［J］.上海醫(yī)學檢驗雜志，2002，17(6)：355357.

［6］陳灝珠.實用內(nèi)科學［M］.第10版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1998:432433.

［7］蔣燕群，王堅強，陳珊珊，等.用雙紙片法檢測革蘭陰性桿菌的誘導型β內(nèi)酰胺酶［J］.上海醫(yī)學檢驗雜志，1999，14(3)：142144.