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篇1

關(guān)鍵詞 新生兒 敗血病 白介素6 白介素8

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.14.116

新生兒敗血癥是新生兒期的危重病癥，是導(dǎo)致新生兒死亡的重要原因之一，因此，早期診治成為改善患兒預(yù)后的關(guān)鍵。但新生兒敗血癥早期癥狀不典型，目前常用的血培養(yǎng)等診斷方法存在一定的時(shí)限性，使早期診斷受到限制。本研究通過檢測(cè)新生兒敗血癥白細(xì)胞介素6(IL-6)及白細(xì)胞介素8(IL-8)的變化，旨在探討其對(duì)新生兒敗血癥的診斷價(jià)值。

資料與方法

2010年3月～2011年4月收治新生兒敗血癥患兒62例，男34例，女28例，平均年齡6天，其診斷符合新生兒協(xié)作組制定的新生兒敗血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)；對(duì)照組為同期在產(chǎn)科出生的健康足月新生兒55例。

標(biāo)本采集：所有研究對(duì)象在入院當(dāng)天應(yīng)用抗生素治療前采集25ml靜脈血，立即離心分離血漿，用于檢測(cè)IL-6和IL-8，敗血癥組治療后恢復(fù)期再次采集25ml靜脈血作IL-6和IL-8檢測(cè)。方法：應(yīng)用酶聯(lián)免疫(ELISA)雙抗體夾心法測(cè)定血漿IL-6和IL-8水平。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：用SPSS130統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，檢測(cè)結(jié)果以(X±S)表示，組間分析采用t檢驗(yàn)，以P＜005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

兩組2項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果：敗血癥組急性期血漿IL-6水平顯著高于恢復(fù)期，敗血癥組急性期血漿IL-6水平顯著高于對(duì)照組(P＜001)，見表1。

兩組2項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果：敗血癥組急性期血漿IL-8水平顯著高于恢復(fù)期，敗血癥組急性期血漿IL-8水平顯著高于對(duì)照組(P＜001)，見表2。

討 論

IL-6是一種多功能細(xì)胞因子，其在炎性反應(yīng)中具有抗炎及促炎雙重作用?？寡追磻?yīng)作用表現(xiàn)為誘導(dǎo)肝臟合成一系列急性反應(yīng)蛋白，以保護(hù)或限制炎性反應(yīng)。IL-6可作為早期判斷新生兒細(xì)菌感染的指標(biāo)，其水平的升高和疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)。有研究證明，在臨床癥狀出現(xiàn)前2天，血中IL-6已明顯升高，IL-6為早期診斷極低出生體質(zhì)量?jī)簲⊙Y靈敏而可靠的指標(biāo)。本研究中敗血癥組治療前較恢復(fù)期水平與對(duì)照組水平明顯增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)于足月兒和早產(chǎn)兒，無論是早發(fā)性細(xì)菌感染還是晚發(fā)性細(xì)菌感染，敗血癥組血漿IL-6水平均較正常對(duì)照組和恢復(fù)期顯著增高，并有較好的敏感性和特異性。

IL-8系一種多源的細(xì)胞因子，可由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等在白細(xì)胞介素-1、腫瘤壞死因子-α、刀豆蛋白A等誘導(dǎo)劑作用下合成和釋放。在正常情況下，IL-8含量很低，而當(dāng)機(jī)體存在炎性病變時(shí)，可刺激單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞大量分泌IL-8，在1-3小時(shí)內(nèi)迅速升高，由于被白細(xì)胞受體結(jié)合，其半衰期短［1］，IL-8對(duì)中性粒細(xì)胞有趨化作用，促使其釋放超氧離子和初級(jí)顆粒成分。同時(shí)IL-8也是T細(xì)胞趨化因子，可使淋巴細(xì)胞遷移數(shù)量增加。因而IL-8是典型的炎性細(xì)胞趨化因子之一。許多研究顯示［2，3］，新生兒細(xì)菌感染時(shí)血清IL-8水平升高，有較好的靈敏度和特異性，可用于早期診斷新生兒細(xì)菌感染，同時(shí)能輔助臨床評(píng)價(jià)治療效果而且IL-8血中水平既不受胎齡影響，也不因出生時(shí)間而改變［4］。

參考文獻(xiàn)

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篇2

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)是一種病因未明的直腸和結(jié)腸的慢性非特異性炎癥性疾病。腸粘膜免疫功能異常被公認(rèn)為在UC發(fā)病中具有極為重要的作用,多種細(xì)胞因子參與免疫反應(yīng)和炎癥過程。而白細(xì)胞介素(interleukin, IL)是細(xì)胞因子中最主要的具有多種生物學(xué)活性的一組免疫因子,在免疫細(xì)胞發(fā)育、分化、免疫應(yīng)答及某些細(xì)胞激活過程中有重要調(diào)節(jié)作用。現(xiàn)將歷年來UC發(fā)病機(jī)制中所涉及的關(guān)于IL的研究綜述如下。

1 IL-1

IL-1主要由單核-巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞分泌,是一種能激活多種免疫和炎癥細(xì)胞的前炎性細(xì)胞因子。根據(jù)等電點(diǎn)不同可分為膜結(jié)合性(IL-1α)和可溶性(IL-1β),人體內(nèi)IL-1活性主要由后者介導(dǎo)。IL-1β能通過自分泌或旁分泌刺激其他細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)產(chǎn)生,激活補(bǔ)體,增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫介導(dǎo)的組織損傷過程,促進(jìn)內(nèi)皮-白細(xì)胞黏附分子表達(dá),趨化中性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞進(jìn)入腸道病變部位,引起一系列腸道炎癥反應(yīng)和組織破壞。丁偉群等發(fā)現(xiàn)IL-1β在UC患者受累腸粘膜上顯著升高,未受累粘膜IL-1β也明顯高于正常組,說明IL-1β確實(shí)參與UC的發(fā)生發(fā)展過程。IL-1的作用由IL-1rα來控制,體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)IL-1rα能抑制IL-1的不同生物學(xué)活性。IL-1rα缺乏是引起腸道非特異性炎癥反應(yīng)的重要因素。UC患者中IL -1/IL-1rα比值升高,且與疾病臨床嚴(yán)重程度密切相關(guān)[1～2]。

2 IL-2

IL-2主要由輔T淋巴細(xì)胞在抗原或有絲分裂原刺激和IL-1誘導(dǎo)下合成。結(jié)合受體后能引起T細(xì)胞活化增值,促進(jìn)細(xì)胞毒T細(xì)胞殺傷作用,增強(qiáng)NK細(xì)胞活性,促進(jìn)B細(xì)胞分泌Ig,并增強(qiáng)對(duì)病原菌的殺傷能力。有報(bào)道UC患者產(chǎn)生的IL-2是正常人的1/4～l/3,CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均下降, 而以輔T細(xì)胞下降更為明顯。IL-2水平與T細(xì)胞免疫功能成正相關(guān)。IL-2水平降低,T淋巴細(xì)胞免疫清除能力減退, 致潰瘍形成。鄒陽等觀察到UC模型大鼠血清IL-2水平比正常大鼠顯著降低,治療后其水平顯著升高,病情好轉(zhuǎn),說明隨治療進(jìn)行增強(qiáng)了T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫和體液免疫功能,減弱自身免疫反應(yīng),減輕組織損傷而趨向愈合[3]。

3 IL-4

IL-4是T細(xì)胞來源的細(xì)胞因子,能抑制其他細(xì)胞因子包括IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α 產(chǎn)生,并抑制淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生及移動(dòng),下調(diào)活化的單核-巨噬細(xì)胞分泌氧自由基的能力,誘導(dǎo)IL-1rα產(chǎn)生,抑制PGE2,具抗炎功能,對(duì)維持腸道免疫起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)UC患者IL-4分泌細(xì)胞數(shù)減少,IL-4 mRNA表達(dá)及蛋白分泌明顯減少,提示IL-4與UC發(fā)病有關(guān),可作為檢測(cè)疾病程度的一個(gè)指標(biāo)[4]。

4 IL-5

IL-5主要由Th2細(xì)胞產(chǎn)生,是一種最強(qiáng)的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子,作用于B、T淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等,誘導(dǎo)B細(xì)胞增生和分化。研究發(fā)現(xiàn)活動(dòng)期UC患者IL-5mRNA水平較對(duì)照組明顯升高[5]。

5 IL-6

IL-6是一種廣泛的促炎細(xì)胞因子,主要由活化的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及上皮細(xì)胞分泌,主要通過誘導(dǎo)細(xì)胞毒T細(xì)胞活性參與UC起病和遷延。研究發(fā)現(xiàn)UC患者血清IL-6濃度明顯升高,與病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān),與病變部位及范圍無關(guān)。應(yīng)用抗IL-6抗體治療可減輕患者癥狀,提示IL-6在UC發(fā)病中起促炎作用?？捎脕肀O(jiān)測(cè)疾病活動(dòng)和療效[6]。

6 IL-7

IL-7是黏膜免疫獨(dú)特的細(xì)胞因子,可能是重要的致炎細(xì)胞因子。有報(bào)道IL-7亦存在于腸上皮細(xì)胞,并證明其對(duì)于具有IL-7R的黏膜內(nèi)局部淋巴細(xì)胞的增殖生存具有調(diào)控作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)UC患者IL-7R陽性的CD4+T細(xì)胞浸潤(rùn)顯著增多。針對(duì)調(diào)控IL-7系統(tǒng)的研究有可能為治療UC等腸道炎癥性疾患開辟新途徑[7]。

7 IL-8

IL-8主要來源于單核巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血小板和成纖維細(xì)胞等,其作用是趨化并激活中性粒細(xì)胞,促進(jìn)中性粒細(xì)胞溶酶體酶活性和吞噬作用,對(duì)嗜堿性粒細(xì)胞和T細(xì)胞也有一定趨化作用。研究發(fā)現(xiàn)UC病變腸粘膜IL-8水平明顯高于正常組織,與粘膜中性粒細(xì)胞數(shù)、病灶炎癥程度呈正相關(guān),隨病情緩解而下降。IL-8在炎癥反應(yīng)中起直接介導(dǎo)作用,可作為UC患者病情評(píng)估和療效監(jiān)測(cè)的指標(biāo)之一[8]。

8 IL-10

IL-10又名細(xì)胞因子合成抑制因子,由活化的單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,主要作用是抑制活化的單核-巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)錄分泌IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α等,可直接誘導(dǎo)IL-1、IL-8、TNF-α等因子mRNA降解,促進(jìn)IL-1rα釋放。研究證明內(nèi)源性和外源性IL-10均能在轉(zhuǎn)錄水平強(qiáng)烈抑制IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)和粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子等合成,而起到抗炎作用。在治療誘導(dǎo)性大鼠結(jié)腸炎時(shí)發(fā)現(xiàn)隨病情好轉(zhuǎn)IL-8降低,IL-10水平升高。Gasche等報(bào)道UC患者腸組織中IL-10 mRNA表達(dá)減少。李睿等發(fā)現(xiàn)UC患者腸黏膜IL-10表達(dá)明顯低于正常對(duì)照組,且與疾病活動(dòng)度呈負(fù)相關(guān)[9]。

9 IL-11

IL-11是骨髓基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,可調(diào)節(jié)髓樣細(xì)胞中的基因表達(dá),增加人單核細(xì)胞表達(dá)IL-6mRNA;抑制巨噬細(xì)胞表達(dá)IL-1、TNF-α和IFN-γ,抑制NF-кB活性,具抗炎作用。在HLA-B27轉(zhuǎn)基因大鼠模型中,重組IL-11可致Akt酪氨酸磷酸化,從而激活A(yù)kt依賴通路,介導(dǎo)抗凋亡作用,下調(diào)TNF-α、IL-1β、IFN-γ 等促炎因子表達(dá),降低盲腸中髓過氧化物酶活性,減輕慢性結(jié)腸炎的癥狀和組織損傷,保持黏膜完整性[10]。

10 IL-12

IL-12主要來源于單核巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞、T細(xì)胞等,是最強(qiáng)的NK細(xì)胞激活因子,能促進(jìn)CD4+Th0細(xì)胞分化為Th1細(xì)胞,刺激NK細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生多種細(xì)胞因子,如IL-8、TNF-α、INF-γ等,再通過這些因子發(fā)揮作用。IL-12可與IL-15、IL-7協(xié)同作用于結(jié)腸黏膜T淋巴細(xì)胞,放大INF-γ粘膜損害作用。Ehrhardt等發(fā)現(xiàn)三硝基苯磺酸(TNBS)誘發(fā)的UC模型與IL-12產(chǎn)生增加有關(guān)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)阻斷IL-12能有效清除Th1介導(dǎo)的腸道炎癥反應(yīng),表明至少在黏膜水平Th1介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)必須有IL-12參與[11]。

11 IL-13

IL-13的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)活性似IL-4,由Th2細(xì)胞產(chǎn)生,能調(diào)節(jié)單核巨噬細(xì)胞和B細(xì)胞功能,可抑制單核巨噬細(xì)胞分泌促炎細(xì)胞因子(如IL-1、IL-6、TNF-α、IL-12等),下調(diào)多種致炎因子(如IL-8、TNF-α等)的表達(dá),與IL-4聯(lián)合可延緩、抑制過氧化物產(chǎn)生,調(diào)節(jié)NO生成。Vainer等發(fā)現(xiàn),隨UC患者病變黏膜多核白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)度加強(qiáng),其腸黏膜組織中IL-13濃度和mRNA表達(dá)顯著降低。周宇等研究顯示,重度或活動(dòng)期UC較輕度或靜止期UC血漿IL-13濃度明顯降低,且與UC活動(dòng)性指標(biāo)C反應(yīng)蛋白有顯著負(fù)相關(guān)[12]。

12 IL-15

IL-15由不同類型細(xì)胞產(chǎn)生,可結(jié)合T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞以及上皮細(xì)胞的相應(yīng)受體,促進(jìn)這些細(xì)胞活化增生,抑制其凋亡及促進(jìn)促炎細(xì)胞因子合成,如促進(jìn)T細(xì)胞分泌TNF-α、IFN-γ。中重度活動(dòng)UC患者表達(dá)IL-15的外周血單核細(xì)胞百分比增加,可能是因?yàn)轶w內(nèi)細(xì)胞激活而使血清IL-15釋放增加所致[13]。

13 IL-16

IL-16是一種趨化因子,由CD8+T細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、上皮細(xì)胞等多種細(xì)胞分泌,主要通過CD4+途徑起作用,但可不依賴CD4+作用于靶細(xì)胞。IL-16可刺激單核細(xì)胞產(chǎn)生IL-6、TNF-α、IL-15等,其作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究[13]。

14 IL-17

IL-17主要由基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生,是T細(xì)胞誘導(dǎo)和促進(jìn)炎癥發(fā)生過程中一種重要可溶性因子。能促進(jìn)中性粒細(xì)胞發(fā)育成熟,刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生IL-6、IL-8、G-CSF和PGE2等炎癥遞質(zhì),促進(jìn)C3等急性期反應(yīng)蛋白的產(chǎn)生,誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。予以抗IL-17抗體能明顯抑制IL-6和IL-8產(chǎn)生,且與抗體劑量有關(guān),提示IL-17在腸道炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生過程中起重要作用,也說明阻斷IL-17的產(chǎn)生可能是治療UC的一種有效方法[13]。

15 IL-18

IL-18是一種具有誘導(dǎo)IFN-γ產(chǎn)生作用的細(xì)胞因子,屬于Th1型致炎細(xì)胞因子。通過作用于T細(xì)胞、NK細(xì)胞等細(xì)胞表面IL-18受體發(fā)揮活性,與IL-12協(xié)同誘導(dǎo)T細(xì)胞增值分化,使IFN-γ產(chǎn)生增加,而增強(qiáng)Th1型細(xì)胞反應(yīng)。張炳勇等研究發(fā)現(xiàn)活動(dòng)期UC患者腸黏膜IL-18表達(dá)較正常對(duì)照增高,緩解期較活動(dòng)期IL-18表達(dá)有所下降,但均無顯著性差異。故IL-18在UC發(fā)病機(jī)制中作用不甚明了[14]。

16 IL-22

IL-22主要由T細(xì)胞產(chǎn)生,NK細(xì)胞可少量產(chǎn)生。IL-22與腸上皮細(xì)胞表面的IL-22受體結(jié)合,促進(jìn)信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子(STAT)3依賴性的黏蛋白合成和杯狀細(xì)胞歸還,修復(fù)受損腸黏膜屏障,從而有效抑制炎癥反應(yīng),有介導(dǎo)細(xì)胞免疫的作用。在UC患者和實(shí)驗(yàn)大鼠病變腸黏膜上IL-22均呈低表達(dá)。Ken S等用局部基因轉(zhuǎn)導(dǎo)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的Th2型結(jié)腸炎大鼠進(jìn)行試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)將IL-22作用于病鼠腸黏膜后可很快且有力緩解炎癥反應(yīng)[15]。

17 IL-23

IL-23主要由激活的單核-巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞分泌,由IL-12p40和IL-23p19亞單位組成。其通過結(jié)合細(xì)胞膜表面IL-23受體復(fù)合物,刺激細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)來誘導(dǎo)細(xì)胞激活,在免疫記憶CD4+T細(xì)胞效應(yīng)應(yīng)答中起重要作用。IL-23可刺激炎性細(xì)胞向病變部位移動(dòng),誘導(dǎo)炎性肉芽腫形成,參與抗感染免疫應(yīng)答。劉占舉等研究發(fā)現(xiàn)IL-23在炎癥性腸病中表達(dá)增高,并能誘導(dǎo)IBD患者淋巴細(xì)胞效應(yīng)應(yīng)答,促使腸黏膜炎性反應(yīng)?？笽L-23p19單抗可顯著阻止小鼠慢性結(jié)腸炎發(fā)生。這些研究證實(shí)IL-23在腸道粘膜炎癥病變過程中起著重要免疫病理作用[16]。

目前,UC病因尚不清楚,它涉及到環(huán)境、遺傳、感染及免疫等多種因素,還未能取得令人滿意的治療效果。但相信隨著對(duì)UC研究的不斷深入,UC發(fā)病機(jī)理一定會(huì)被闡釋清楚。

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篇3

[關(guān)鍵詞] IL-8；腫瘤；研究進(jìn)展

[中圖分類號(hào)] R73 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2016）09（b）-0033-06

[Abstract] Interleukin-8 （IL-8） is a cytokine which has an abundant source of cells. And it is also a member of the CXC subfamily of chemokines. Initial studies indicate that IL-8 plays an important role in regulating cell growth， cell differentiation， inflammation， immune response， the body's defense and repairing damage process. The latest study finds that IL-8 also plays an important role in tumor development. This article not only reviews the expression and clinical significance of IL-8 in serum， but also analyzes the relationship of IL-8 and tumor susceptibility， blood vessel growth， the development of the tumor and the drug resistance from a multiple perspectives. The analysis shows that IL-8 has a close association with the occurrence， invasion， metastasis and chemotherapy of tumor. Therefore， the intensive study in IL-8 is expected to bring new breakthroughs for the chemotherapy of tumor and to provide new ideas for the targeted treatment of tumor.

[Key words] Interleukin-8； Tumor； Research progress

白細(xì)胞介素是一類分子結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能已基本明確，并具備調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子。按照其發(fā)現(xiàn)順序給予序號(hào)，目前已經(jīng)命名38種（IL-1～I(xiàn)L-38）。IL-8屬于其中一組小的分泌型炎癥性細(xì)胞因子。根據(jù)靠近氨基端的半胱氨酸殘基的個(gè)數(shù)以及排列順序?qū)⑵浞譃樗姆N亞家族：①CXC亞家族：氨基端2個(gè)半胱氨酸（C）被1個(gè)氨基酸殘基隔開（半胱氨酸-1個(gè)其他任意氨基酸-半胱氨酸）；②C亞家族：近氨基端只有1個(gè)半胱氨酸（C），該分子只有1個(gè)分子內(nèi)二硫鍵；③CC亞家族：近氨基端有2個(gè)半胱氨酸（C）相鄰；④CX3C亞家族：氨基端2個(gè)半胱氨酸（C）被3個(gè)氨基酸殘基隔開（半胱氨酸-3個(gè)任意其他氨基酸-半胱氨酸），羧基端跨細(xì)胞膜。IL-8對(duì)特定白細(xì)胞具有趨化作用，是典型的CXC亞家族的趨化因子，命名為CXCL8，可受植物血凝素（PHA）、脂多糖（LPS）、細(xì)菌病毒產(chǎn)物、TNF-α、白介素等的刺激而產(chǎn)生。除趨化和活化免疫細(xì)胞外，在血細(xì)胞發(fā)育、血管生成等生理過程，機(jī)體致病微生物感染、自身免疫性疾病、移植免疫、非特異性炎癥以及與中性粒細(xì)胞積聚有關(guān)的呼吸系統(tǒng)疾病等病理過程中亦發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn)IL-8除呈誘導(dǎo)型表達(dá)外，在多種癌細(xì)胞系中，亦可呈組成型表達(dá)，參與腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移等。本文聚焦IL-8與腫瘤研究進(jìn)展，對(duì)兩者之間的關(guān)系作一簡(jiǎn)述。

1 IL-8的組成

IL-8是Yoshimur等[1]于1987年發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)具有趨化功能的細(xì)胞因子，基因位于4號(hào)染色體q13～21部位，全長(zhǎng)3211 bp，含3個(gè)內(nèi)含子和4個(gè)外顯子，5′端存在典型的“CAT”和“TATA”盒、NF-κB、AP-1結(jié)合序列以及糖皮質(zhì)反應(yīng)元件（GRE）等結(jié)構(gòu)。它是一種分子量很小的糖蛋白（M=8.359 kD），前體由99個(gè)氨基酸殘基組成，根據(jù)特異性蛋白酶水解N端部位的差異，形成6種不同的成熟IL-8分子，分別包含69、70、71、72、77和79個(gè)氨基酸，其中以72個(gè)氨基酸為主的成熟IL-8分子最為多見，且不同形式成熟IL-8分子的生物學(xué)活性不同。其細(xì)胞來源比較廣泛，很多免疫類細(xì)胞和非免疫系統(tǒng)的細(xì)胞都能合成，如單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、間皮細(xì)胞及多種腫瘤細(xì)胞等。

2 IL-8的血清表達(dá)及其臨床意義

趨化因子IL-8的表達(dá)可分為組成型和誘導(dǎo)型。研究發(fā)現(xiàn)，IL-8的組成型表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。邢浩采用懸浮芯片系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)直腸癌患者和健康對(duì)照者血清中IL-8水平，結(jié)果顯示經(jīng)手術(shù)治療后，IL-8的表達(dá)水平有所降低，但仍較健康對(duì)照組高，術(shù)前、術(shù)后、正常兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。腫瘤低分化組相比高中分化組IL-8表達(dá)水平高，淋巴轉(zhuǎn)移組相比無淋巴轉(zhuǎn)移組IL-8表達(dá)水平高。羅守軍等[2]從臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及治療前后宮頸癌患者血清IL-8的表達(dá)水平探討其臨床意義，結(jié)果發(fā)現(xiàn)宮頸癌Ⅲ期 + Ⅳ期、低分化、有轉(zhuǎn)移、未治療組血清IL-8濃度明顯比Ⅰ期 + Ⅱ 期、高分化、無轉(zhuǎn)移、治療組濃度高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。馬鐘鈴等[3]關(guān)于非小細(xì)胞肺癌、張毅等[4]關(guān)于甲狀腺癌、卓木改等[5]關(guān)于鼻咽癌與IL-8表達(dá)的研究結(jié)果與此類似。姜波[6]采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法和聚合酶鏈反應(yīng)分別進(jìn)行受試多組人員血清IL-8表達(dá)的測(cè)定以及宮頸癌組高危型人瘤病毒（HR-HPV）感染情況的檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明IL-8在不同臨床分期受試者中表達(dá)具有差異性，宮頸癌組、CIN組和對(duì)照組兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HPV感染的宮頸癌患者較未感染者IL-8表達(dá)水平高，兩者之間呈正相關(guān)關(guān)系。MARIA BALASOIU等[7]檢測(cè)68例年齡在55～70歲之間住院患者血清和腫瘤上清中IL-8的表達(dá)，結(jié)果顯示大腸癌患者血清和腫瘤上清液中IL-8的表達(dá)顯著增加，并且IL-8的表達(dá)隨TNM臨床分期的增高而增多。Ning等[8]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)晚期結(jié)腸癌患者血清IL-8表達(dá)水平較健康對(duì)照高10倍，IL-8高表達(dá)不僅與腫瘤臨床分期相關(guān)聯(lián)[9]，而且與化療初不良反應(yīng)、腸壁浸潤(rùn)及肝臟轉(zhuǎn)移亦相關(guān)聯(lián)[10]。除此之外，尹福根[11]發(fā)現(xiàn)IL-8的表達(dá)與原發(fā)性支氣管肺癌患者SCT掃描的不同影像學(xué)表現(xiàn)存在一定關(guān)聯(lián)，對(duì)于患者肺部感染情況、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的SCT檢查具有間接提示作用。

3 IL-8與腫瘤易感性

易感性指在相同環(huán)境下，由遺傳基礎(chǔ)所主導(dǎo)的不同個(gè)體患病的風(fēng)險(xiǎn)。隨著對(duì)腫瘤研究的不斷深入，易感性的研究在腫瘤中占據(jù)越來越重要位置，并成為研究的一個(gè)重要課題。作為腫瘤微調(diào)節(jié)器，IL-8不僅表現(xiàn)為腫瘤中表達(dá)水平的變化，而且與腫瘤如胃癌、食管癌、肺癌、口腔癌等易感性相關(guān)聯(lián)。2008年，張立瑋[12]采用PCR-RFLP的檢測(cè)方法探究IL-8 啟動(dòng)子區(qū)251（A/T）位點(diǎn)SNP與食管鱗狀細(xì)胞癌（ESCC）的易感性。與健康對(duì)照比較，ESCC IL-8-251A/T等位基因以及基因型分布比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但在上消化道腫瘤（UGIC）家族史陽性組別中，AA基因攜帶者ESCC的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高。同樣以太行山南部為例，Liwei等[13]發(fā)現(xiàn)IL-8-251A/T基因型和等位基因的分布在胃癌組和健康對(duì)照組中分布明顯不同，AA、AT、TT三種基因型頻率分別為24.7%、50.3%、25%和18.5%、49.8%、31.7%。胃癌患者IL-8-251 A等位基因頻率為49.8%，明顯高于健康對(duì)照，推測(cè)IL-8-251 A等位基因可能是優(yōu)勢(shì)基因。然而，Wei等[14]卻發(fā)現(xiàn)T等位基因轉(zhuǎn)錄活性更高，是A等位基因的2～5倍，可使胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯升高。Aledson[15]以巴西人群為例，采用病例對(duì)照研究的方法，對(duì)IL-8與胃癌易感性進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，IL-8 -251 AT基因型與非賁門胃癌的關(guān)聯(lián)性更強(qiáng)。除了胃癌，IL-8與口腔癌[16]、肺癌[17]、宮頸癌[18-20]、結(jié)直腸癌[21]、肝癌[22-23]、乳腺癌、卵巢癌等的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)亦相關(guān)。如：Rafrafi[17]報(bào)道IL-8-251 T等位基因與肺癌易感性、腫瘤大小、臨床分期有關(guān)。李紅霞[21]認(rèn)為IL-8-251 AA基因型及A等位基因的存在可使結(jié)直腸癌的發(fā)生率增加。與陶慧娟、張莉等結(jié)果相似，李鳳英等[20]研究顯示在宮頸癌患者中IL-8-251 AT和TT基因型的比例顯著高于健康對(duì)照，提示IL-8-251AT和TT基因型可能是宮頸癌的高危因素。陸小華等[22-23]實(shí)驗(yàn)得出，IL-8-251AT基因型攜帶者肝細(xì)胞癌（HCC）的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是TT基因型的1.99倍。進(jìn)行深入研究發(fā)現(xiàn)HCC原發(fā)灶T分期不同，IL-8-251基因型的分布亦顯著不同，T1期TT基因型的分布頻率相對(duì)較高，較晚病灶T2～T4期中AT基因型的分布較高。且HCC患者發(fā)生門靜脈侵襲的概率在不同基因型中同樣存在差異，AT基因型顯著大于TT基因型。

上述研究結(jié)果雖存在差異，但均表明IL-8-251A/T單核苷酸多態(tài)性與腫瘤的易感性相關(guān)，為深入探究IL-8與腫瘤的關(guān)系做好鋪墊，為腫瘤的治療提供新的途徑。

4 IL-8與腫瘤血管生長(zhǎng)

1971年，Judah首次提出腫瘤生長(zhǎng)的血管依賴性理論，即腫瘤的發(fā)展演進(jìn)除與其自身細(xì)胞增殖有關(guān)外，更需要其周圍血管提供豐富的營(yíng)養(yǎng)支持。這一里程碑理論的提出為腫瘤的研究開拓了一個(gè)新的研究領(lǐng)域，通過阻斷血管的生成，就有可能抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，進(jìn)而抑制腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。經(jīng)過幾十年的探索，發(fā)現(xiàn)多種細(xì)胞因子均與血管生成密切相關(guān)，如VEGF家族、表皮生成因子（EGF）、血管生成素家族、FGF家族、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子以及趨化因子家族等，其中趨化因子IL-8是近年來研究的熱點(diǎn)。郭敏等[24]報(bào)道IL-8能以自分泌和旁分泌形式上調(diào)IL-8、膠原酶Ⅳ、VEGF、EGFR和下調(diào)E-鈣黏蛋白在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)以及增加MMP-9的活性和侵襲力直接或間接調(diào)控腫瘤血管的生長(zhǎng)。Petreaca等[25]認(rèn)為IL-8自身還可以發(fā)揮VEGF的作用，反式激活VEGFR2進(jìn)而促進(jìn)血管生成。吳娜等[26]對(duì)人腦星形細(xì)胞腫瘤血管生成與IL-8之間的關(guān)系進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)IL-8不但與VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)，而且與微血管密度（MVD）也呈正相關(guān)性。MVD即單位密度的微血管數(shù)量。腫瘤的病理分級(jí)越高，IL-8、VEGF的表達(dá)越強(qiáng)，MVD值越高。另有學(xué)者從基因轉(zhuǎn)染的角度探討IL-8在腫瘤血管生長(zhǎng)中的作用，如：Inoue等[27]將IL-8正義cDNA轉(zhuǎn)染到無致瘤性和低轉(zhuǎn)移性膀胱癌細(xì)胞253J P后，IL-8和MMP-9 mRNA及蛋白表達(dá)水平明顯升高，膠原酶活性增強(qiáng)，腫瘤組織微血管增生活躍。將反義cDNA轉(zhuǎn)染到高致瘤性和高轉(zhuǎn)移性膀胱癌細(xì)胞253J B-V后，腫瘤組織血管形成受到抑制，MVD下降。Ning等將含IL-8cDNA質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染的HCT116-E2、Caco2-Ⅲe細(xì)胞和空載體轉(zhuǎn)染的HCT116、Caco2 細(xì)胞同時(shí)經(jīng)皮注射到裸鼠體內(nèi)建立移植瘤模型，經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，轉(zhuǎn)染有IL-8cDNA的移植瘤生長(zhǎng)速度加快，血清中IL-8的表達(dá)水平增高，腫瘤標(biāo)本的微血管密度值明顯增加。此外，Li 等[28]認(rèn)為IL-8還可通過抑制內(nèi)皮細(xì)胞的自發(fā)性凋亡而調(diào)節(jié)腫瘤血管的生長(zhǎng)，進(jìn)一步證實(shí)IL-8與腫瘤血管生長(zhǎng)的密切關(guān)系。

5 IL-8與腫瘤演進(jìn)

腫瘤演進(jìn)指腫瘤惡性程度逐步增高的過程，包括生長(zhǎng)速度加快、浸潤(rùn)周圍組織并發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，而E-cadherin、β-catenin的變化是EMT的特征性標(biāo)志，葉英楠[29]應(yīng)用免疫組化的方法，對(duì)肝細(xì)胞肝癌患者石蠟組織切片標(biāo)本中IL-8、β-catenin、E-cadherin、MMP-9等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，IL-8與β-catenin、MMP-9的表達(dá)呈正相關(guān)，與E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。IL-8高表達(dá)標(biāo)本中β-catenin、 MMP-9的表達(dá)相應(yīng)增加，E-cadherin的表達(dá)則出現(xiàn)降低。畢良寬等[30]同樣證明IL-8經(jīng)PKC /ERK信號(hào)通路的激活可上調(diào)N-cadherin和下調(diào)E-cadherin介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換，發(fā)揮促腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移作用。Yin等[31]采用Western Blot分析IL-8處理后卵巢癌SKOV3 和OVCAR3細(xì)胞 E-cadherin、β-catenin表達(dá)情況，與葉英楠等結(jié)果類似，IL-8能夠下調(diào)E-鈣黏蛋白表達(dá)，導(dǎo)致胞質(zhì)內(nèi)β-catenin與支架蛋白及E-cadherin形成的復(fù)合物減少，大量堆積的β-catenin進(jìn)入核內(nèi)與轉(zhuǎn)錄因子T細(xì)胞因子/淋巴樣增強(qiáng)因子（TCF/LEF）結(jié)合，形成二聚體，激活下游靶基因CyclinD1、C-MYC等的轉(zhuǎn)錄，從而參與腫瘤細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)移。Kuai等[32]采用基因轉(zhuǎn)染和RNA干擾技術(shù)通過對(duì)IL-8與胃癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)IL-8正義 cDNA轉(zhuǎn)染的胃癌細(xì)胞黏附、侵襲和轉(zhuǎn)移能力明顯比RNA干擾細(xì)胞強(qiáng)，細(xì)胞黏附分子ICAM-1、 VCAM-1、CD44的表達(dá)均較RNA干擾細(xì)胞高。研究報(bào)道ICAM-1、 VCAM-1、CD44等黏附分子能夠增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附作用，使腫瘤細(xì)胞更容易穿透內(nèi)皮，從而加快腫瘤轉(zhuǎn)移的速度。另有牛秀瓏等[33]發(fā)現(xiàn)IL-8的高表達(dá)能夠促進(jìn)Akt、ERK的磷酸化水平，而PI3K/Akt和Raf/MEK/ERK是關(guān)于細(xì)胞增殖和存活的信號(hào)通路。因而推測(cè)IL-8可能通過活化的Akt和ERK信號(hào)通路調(diào)控腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展。與梁硯菲等[34]結(jié)論相似，在多種腫瘤細(xì)胞系中，IL-8通過激活Erk-MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路引起影響細(xì)胞增殖的多基因轉(zhuǎn)錄進(jìn)而發(fā)揮促細(xì)胞增殖和存活的效應(yīng)。張曉雷等[35]學(xué)者采用IL-8 特異性MEK1/2 抑制劑和PI3K 抑制劑處理卵巢癌細(xì)胞后，Cyclin B1和Cyclin D1的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)相應(yīng)降低，對(duì)細(xì)胞從G1期向S期轉(zhuǎn)變的影響較大。Rac和Cdc42是Ras超家族成員之一，能通過多種信號(hào)分子發(fā)揮上調(diào)Cyclin D1作用。尹華[36]在肺癌NCI-H157細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)IL-8的作用濃度與Rac 和 Cdc42的表達(dá)水平呈正相關(guān)關(guān)系，間接說明IL-8可能通過影響細(xì)胞周期的重新分布來調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖。同樣以肺癌為研究對(duì)象，張鈺[37]得出IL-8對(duì)細(xì)胞遷徙的作用與干涉線粒體分裂基因及內(nèi)外膜融合基因的表達(dá)有密不可分的聯(lián)系。另外，龐雪利[38]發(fā)現(xiàn)，IL-8可以上調(diào)Bcl-2及下調(diào)caspase-3的表達(dá)；雷艷[39]發(fā)現(xiàn)IL-8可以升高Bcl-2及抑制Bax的表達(dá)，進(jìn)一步從抗凋亡的角度闡釋其維持腫瘤細(xì)胞發(fā)展的可能機(jī)制。因此，下調(diào)IL-8的表達(dá)，抑制相關(guān)信號(hào)通路活化和細(xì)胞因子的表達(dá)是抑制腫瘤發(fā)生演進(jìn)的重要途徑之一。

6 IL-8與腫瘤耐藥

隨著化療藥物的廣泛使用，腫瘤的耐藥問題日益突出。最近的研究發(fā)現(xiàn)耐藥的多種腫瘤（如肺癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌等）中IL-8的表達(dá)水平均有不同程度升高。王越等[40]以四種上皮性卵巢癌細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，多途徑研究IL-8與卵巢癌細(xì)胞的耐藥性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，卵巢癌細(xì)胞的耐藥性與IL-8對(duì)耐藥相關(guān)基因（MDR1、MRP、LRP、GST-P、Topo-N）以及凋亡相關(guān)基因（Bc-l2、Bc-lxL、Mc-l1、XIAP）的調(diào)控有關(guān)，進(jìn)行深入研究發(fā)現(xiàn)該調(diào)控作用具有劑量依賴性[41]。IL-8表達(dá)水平高的卵巢癌細(xì)胞，耐藥相關(guān)基因以及凋亡相關(guān)基因的表達(dá)也相應(yīng)增高，使化療藥物產(chǎn)生的凋亡信號(hào)成為無效信號(hào)，細(xì)胞凋亡減少，最終導(dǎo)致卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑和紫杉醇的敏感性降低。朱凱等[42]在T24細(xì)胞系中開展研究，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)干預(yù)IL-8后，細(xì)胞生長(zhǎng)呈分散狀，耐藥基因ABCG2的表達(dá)下降，化療藥阿霉素和長(zhǎng)春新堿的半抑制濃度亦明顯下降。Shi等[43]成功建立了人乳腺癌MDR細(xì)胞株MCF-7/R，并采用細(xì)胞因子抗體陣列技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞因子的分布，研究結(jié)果顯示，與MCF-7/S相比，MCF-7/R中IL-8表達(dá)水平明顯增高，而且高表達(dá)的IL-8還可以降低MCF-7/S細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性。利用IL-8特異性抗體拮抗IL-8表達(dá)，能部分逆轉(zhuǎn)MCF-7 / R對(duì)紫杉醇和阿霉素的耐藥性，用siRNA技術(shù)干擾IL-8的內(nèi)源性表達(dá)，MCF-7/R對(duì)藥物的敏感性明顯增強(qiáng)。因而認(rèn)為，IL-8的高表達(dá)可能有助于腫瘤細(xì)胞多藥耐藥。核因子 κB（NF-κB）是一種重要的凋亡抑制因子，Wilson等[44-45]報(bào)道其與腫瘤細(xì)胞的耐藥性有關(guān)。同樣，Ning等[46]在以結(jié)直腸癌為對(duì)象的研究中發(fā)現(xiàn)IL-8的高表達(dá)引起腫瘤細(xì)胞的化療耐藥也與NF-κB有關(guān)，但具體作用機(jī)制不詳，有待進(jìn)一步研究。此外，研究發(fā)現(xiàn)IL-8還可以通過降低caspase-3的活性來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的化療耐藥。綜上所述，以IL-8為突破點(diǎn)進(jìn)行化療藥物耐藥性研究將會(huì)給腫瘤治療帶來新的希望。

7 結(jié)語

IL-8在惡性腫瘤中的高表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，不僅影響腫瘤血管的生成，而且能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移到周圍淋巴結(jié)以及轉(zhuǎn)移到周圍組織肝和肺等。通過血清、血漿、細(xì)胞上清液以及組織勻漿中IL-8的檢測(cè)，可能為惡性腫瘤的早期診斷提供幫助。干擾或下調(diào)IL-8的表達(dá)，阻礙其功能的發(fā)揮，進(jìn)而抑制腫瘤發(fā)展演進(jìn)、延緩病程進(jìn)展，以期為惡性腫瘤的靶向治療提供新的思路。IL-8在腫瘤中的具體作用機(jī)制尚不十分清楚，且因地理環(huán)境、人口分布和人口比例的不同及飲食結(jié)構(gòu)、遺傳因素、醫(yī)療衛(wèi)生水平的差異，IL-8 與腫瘤關(guān)系的研究有待進(jìn)一步的深入。近年來，雖然人們的防癌意識(shí)有所提高，但消化道腫瘤，尤其胃癌仍是威脅人們健康最常見的消化道腫瘤之一。因此，本實(shí)驗(yàn)室打算首先對(duì)IL-8與胃癌關(guān)系進(jìn)行研究，并逐步展開，旨在為腫瘤的研究和防治工作提供線索和依據(jù)，并相信隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展和研究的不斷深入，IL-8對(duì)腫瘤的作用機(jī)制會(huì)更加明朗，在腫瘤的防治中也會(huì)有更大的發(fā)揮空間。

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篇4

【關(guān)鍵詞】 三氯化鐠;血清;S 180 瘤株;白細(xì)胞介素-2

目前已證實(shí)植物性食品中含有一定濃度的稀土元素，伴隨稀土微肥的廣泛應(yīng)用，稀土元素可以經(jīng)消化道進(jìn)入機(jī)體［1～2］ 。本實(shí)驗(yàn)用不同劑量的三氯化鐠經(jīng)灌胃連續(xù)給藥1個(gè)月后，檢測(cè)了荷瘤小鼠血清白細(xì)胞介素-2的變化，以便探討稀土元素對(duì)機(jī)體免疫功能的影響。

1 材料和方法

1.1 材料 體重為（20±2）g健康雄性昆明系小鼠50只，購(gòu)于吉林大學(xué)新民校區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部;實(shí)驗(yàn)用三氯化鐠由全國(guó)農(nóng)用稀土研究中心提供，用生理鹽水稀釋;S180 瘤株由北京腫瘤研究所提供，ELISA試劑盒購(gòu)于北京鼎國(guó)試劑公司，1640培養(yǎng)液購(gòu)于Hy-clone，DG3022型酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀（華東電子儀器廠），酶標(biāo)板（Linbro，USA）。

1.2 分組及給藥 將50只小鼠隨機(jī)分為荷瘤對(duì)照組，荷瘤實(shí)驗(yàn)0.1、2.0、10.0、20.0mg.kg4個(gè)劑量組，每組10只。荷瘤實(shí)驗(yàn)組每日以灌胃方式給予4個(gè)不同劑量的三氯化鐠;荷瘤對(duì)照組每日灌胃生理鹽水。

1.3 模型制備 采用昆明系小鼠左前肢腋下接種S 180 瘤株，腫瘤接種7d后（腫瘤約11.5cm×1.5cm）開始實(shí)驗(yàn)。

1.4 標(biāo)本處理 各組動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后次日清晨空腹摘取眼球取血，制備血清，用ELISA方法檢測(cè)白細(xì)胞介素-2的含量;脫臼處死動(dòng)物，取瘤稱重。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差（ˉx±s）表示，組間比較用t檢驗(yàn)。

轉(zhuǎn)貼于

2 結(jié)果

三氯化鐠灌胃1個(gè)月后，10.0、20.0mg.kg劑量組自給藥10d后見腫瘤表面潰爛，小鼠狀態(tài)極差;另兩組腫瘤未見潰爛，小鼠狀態(tài)良好。0.1、2.0mg.kg劑量組腫瘤重量均較對(duì)照組下降，血清白細(xì)胞介素-2含量較對(duì)照組明顯升高;10.0、20.0mg.kg劑量組腫瘤重量較對(duì)照組無顯著性差異，而血清白細(xì)胞介素-2含量均較對(duì)照組明顯下降，即腫瘤重量隨給藥劑量的減少而下降，血清白細(xì)胞介素-2隨給藥劑量的減少而上升。提示0.1、2.0mg.kg三氯化鐠可明顯提高荷瘤小鼠血清白細(xì)胞介素-2的水平及抑制小鼠S 180 腫瘤的生長(zhǎng)，見表1。

表1 三氯化鐠對(duì)小鼠血清白細(xì)胞介素-2及腫瘤重量的影響（略）

注:與荷瘤對(duì)照組比較*P

3 討論

隨著人們對(duì)稀土元素研究的日益深入，人們發(fā)現(xiàn)稀土及其化合物對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)有不同的刺激作用，尤其是對(duì)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化增殖有明顯的作用［2］ 。

白細(xì)胞介素-2是人體T細(xì)胞被刺激誘生的細(xì)胞因子，是機(jī)體內(nèi)重要的淋巴因子，它可支持體外培養(yǎng)的T細(xì)胞長(zhǎng)期存活，可傳達(dá)免疫效應(yīng)，增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫狀態(tài)［3］ 。因此檢測(cè)白細(xì)胞介素-2是了解機(jī)體細(xì)胞免疫的主要的指征。

本實(shí)驗(yàn)用不同劑量的三氯化鐠灌胃1個(gè)月后，檢測(cè)白細(xì)胞介素-2及稱量腫瘤重量，觀察其對(duì)機(jī)體免疫功能的影響，結(jié)果表明0.1、2.0mg.kg三氯化鐠可使血清白細(xì)胞介素-2水平升高，而且抑制腫瘤的生長(zhǎng);10.0、20.0mg.kg三氯化鐠可使血清白細(xì)胞介素-2水平下降對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)雖無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但與對(duì)照組比較略有增加，與文獻(xiàn)［4］ 報(bào)道相一致。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示低劑量三氯化鐠具有增強(qiáng)腫瘤病人細(xì)胞免疫功能，具有免疫興奮的作用，而大劑量三氯化鐠對(duì)機(jī)體免疫功能有一定的損傷，其機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。

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篇5

【摘要】 目的 從真菌2572的代謝產(chǎn)物中分離白細(xì)胞介素6受體(IL-6R)拮抗劑。方法 利用多種色譜技術(shù)對(duì)活性部位進(jìn)行分離純化，并根據(jù)MS、NMR等光譜方法對(duì)化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定。結(jié)果 從真菌2572代謝產(chǎn)物活性部位中得到兩個(gè)化合物2572A和2572B。結(jié)論 2572A已知為6-epi-5′-hydroxymycosporulone，有IL-6R拮抗活性，2572B為核黃素，活性較弱。

【關(guān)鍵詞】 白細(xì)胞介素6受體拮抗劑； 6-epi-5′-hydroxymycosporulone； 核黃素； 結(jié)構(gòu)研究

ABSTRACT Objective To isolate IL-6R antagonists from the cultured broth of the fungus 2572. Methods The compounds were separated by multi-chromatography and their chemical structures were elucidated by spectral analysis. Results Two known compounds， 2572A and 2572B were purified from the fermented extracts. Conclusions 2572A and 2572B were identified to be 6-epi-5′-hydroxymycosporulone and riboflavin， respectively. And 2572A shows IL-6Ra activity whereas 2572A has weak activity.

KEY WORDS Human interleukin 6 receptor antagonist; 6-epi-5′-hydroxymycosporulone; Riboflavin; Structure identification

白細(xì)胞介素6(IL-6)是一種功能廣泛的細(xì)胞因子，它的生物學(xué)功能十分復(fù)雜，并在多種疾病如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、Castleman′s病、多發(fā)性骨髓瘤等癥中扮演重要角色［1］。IL-6通過形成IL-6/IL-6R/gp130六聚體復(fù)合物后，方可進(jìn)行信號(hào)的傳導(dǎo)，發(fā)揮其生物學(xué)活性，而白細(xì)胞介素6受體(IL-6R)是介導(dǎo)這個(gè)六聚體復(fù)合物形成的重要中介分子［2］。本實(shí)驗(yàn)選用以基因重組白細(xì)胞介素可溶性受體(sIL-6R)為靶位的IL-6R高通量篩選模型，從真菌2572的代謝產(chǎn)物中分離得到了兩個(gè)化合物2572A和2572B，本文報(bào)道了這兩個(gè)結(jié)構(gòu)和IL-6R拮抗活性研究。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 菌株與培養(yǎng)基

2572菌種來自本所菌種篩選中心。

種子和發(fā)酵培養(yǎng)基：甘油1%，葡萄糖2%，蔗糖1%，黃豆餅粉0.2%，蛋白胨(F403)1%，聚乙二醇(6000)0.25%，KH2PO4 0.03%，NaNO3 0.3%，(NH4)2SO4 0.3%，pH6.0。

1.2 儀器與試劑

酶標(biāo)比色計(jì)(Biorad)，X5型大孔吸附樹脂(天津南開大學(xué)化工廠)，ODS/C18柱色譜介質(zhì)(日本Shimadzu公司)，Sephadex LH-20(上?；瘜W(xué)試劑廠)，Sephadex G-10(Solarbio)，質(zhì)譜儀(AccuTof CSLCMS)，核磁共振儀(Bruker AM-400)，所有化學(xué)試劑均為市售分析純?cè)噭?，高效液相色譜儀(Shimadzu LC-10Avp)，柱型號(hào)為Inertsil ODS-2(4.6mm×150mm)，HPLC檢測(cè)條件：流動(dòng)相為30%乙腈∶水，檢測(cè)波長(zhǎng)215nm，柱溫25℃。

2 方法與結(jié)果

2.1 發(fā)酵

斜面(YM培養(yǎng)基)26℃培養(yǎng)7d，接種于100ml種子培養(yǎng)基中(500ml培養(yǎng)瓶)，26℃振蕩(250r/min)培養(yǎng)48h，以2%轉(zhuǎn)種至發(fā)酵培養(yǎng)基，26℃振蕩培養(yǎng)96h，發(fā)酵液pH6.0。

2.2 提取分離與純度鑒定

將12L發(fā)酵液過濾，濾液通過X5型大孔樹脂，棄去流出液，分別用30%、50%和80%丙酮洗脫，測(cè)活性發(fā)現(xiàn)活性部位主要集中于30%丙酮洗脫液中；收集30%洗脫液并揮去丙酮，用乙酸乙酯萃??；將乙酸乙酯部分用少量甲醇溶解，上樣于Sephadex LH-20柱，50%甲醇洗脫，HPLC檢測(cè)，按峰收集，得白色粗品A；將粗品A以少量甲醇溶解，上樣于ODS/C18反相柱，以40%甲醇∶水系統(tǒng)洗脫，得一白色純品2572A，凍干后為50mg，HPLC檢測(cè)2572A保留時(shí)間為11.72 min；將萃取后的水部分冷干上Sephadex G-10柱，水洗脫，收集后端黃色段成分，冷干后再上ODS/C18反相柱，10%甲醇∶水(0.05%TFA)系統(tǒng)洗脫，得黃色純品2572B，凍干后8mg，HPLC檢測(cè)其保留時(shí)間為6.95min。 轉(zhuǎn)貼于

2.3 理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)鑒別

2572A為白色無定形粉末，易溶于甲醇。其ESI-MS(positive)示：m/z 225［M+H］+，247［M+Na］+，分子量為224。又由HRMS：m/z 225.0769［M+H］+(Calcd.225.0763)確定分子式為C11H12O5。

根據(jù)13C-NMR譜及DEPT譜(表1)可知，該化合物有4個(gè)季碳(δ197.2， 171.9， 158.6和59.9)， 5個(gè)表1

2572A的1H-NMR及13C-NMR數(shù)據(jù) -： 碳譜及氫譜上均無顯示。CH(δ150.8，124.7，71.7，67.8和32.8)，1個(gè)CH2(δ86.2)，1個(gè)CH3(δ14.9)。1H-NMR譜中有2個(gè)低場(chǎng)的CH(δ6.62和6.05)互相偶合，偶合常數(shù)10.2Hz，說明分子中存在一對(duì)順勢(shì)偶合的烯碳。根據(jù)HMQC確定了與H直接所連的各個(gè)C的化學(xué)位移(表2)。HMBC譜中可觀察到下列相關(guān)信號(hào)：H-7與C-1，C-5，C-6；H-5與C-1，C-3，C-6；H-2與C-1，C-3，C-2′；H-與6C-2′以及H-6′與C-4′，C-5′；根據(jù)以上信號(hào)，可獲得2572A的平面結(jié)構(gòu)。通過NOE譜，照射H-2(δ4.32)時(shí)，H-6(δ3.35)和H-5′(δ5.32)出現(xiàn)信號(hào)增強(qiáng)，說明H-2，H-6和H-5′ 三個(gè)氫原子空間位置接近，確定了該化合物的相對(duì)構(gòu)型。通過與文獻(xiàn)［3］相對(duì)照確認(rèn)該化合物為6-epi-5′-hydroxymycosporulone，其結(jié)構(gòu)見圖1。

2572B為黃色無定形粉末，ESI-MS(positive)顯示該化合物準(zhǔn)分子離子峰為377［M+H］+。13C-NMR和DEPT譜包括17個(gè)碳的信號(hào)，其中8個(gè)季碳(全都 表22572B的1H-NMR及13C-NMR數(shù)據(jù)位于低場(chǎng))，5個(gè)CH，2個(gè)CH2，2個(gè)CH3。其中δ110～170有10個(gè)不飽和碳信號(hào)，說明可能存在芳香基團(tuán)；δ40～80區(qū)域有5個(gè)碳信號(hào)，結(jié)合1H-NMR譜中δ3.0～5.0的含7個(gè)氫的多重峰信號(hào)，推測(cè)分子中可能含有一個(gè)糖基。經(jīng)查閱化合物數(shù)據(jù)庫(kù)(Spectral Database for Organic Compounds， SDB， aist.go.jp/RIODB/SDB S/cgi-bin/cliretc-frame top.cgi? lang=eng)和文獻(xiàn)［4］，2572B的1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與核黃素基本一致，因此確定其為同一個(gè)化合物，分子式為C17H20N4O6，結(jié)構(gòu)見圖2。本文還根據(jù)其HMQC和HMBC數(shù)據(jù)對(duì)其碳、氫信號(hào)進(jìn)行了歸屬，結(jié)果見表2。

圖2

2572B的結(jié)構(gòu)圖

2.4 白介素6受體(IL-6R)拮抗活性檢測(cè)方法

重組人IL-6(溶于pH7.2，PBS緩沖液，1μg/ml)以每孔100μl加至96孔酶標(biāo)板，4℃放置過夜；吸出后每孔加入250μl 3%小牛血清的PBS緩沖液(KH2PO4 0.024%，Na2HPO4 0.363%，KCl 0.02%，NaCl 0.8%，pH7.4)，4℃放置8h；再以PBS洗板5次；待測(cè)樣品溶于含1% BSA的PBS溶液，每孔加入樣品50μl和重組IL-6R(1∶1000)50μl，4℃放置過夜；以PBST(含0.1% Tween 20的PBS)洗滌5次；每孔加入小鼠抗人IL-6R抗體(R&D systems，1∶1000)100μl，4℃放置1h；以PBST洗板5次；每孔加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的馬抗小鼠IgG抗體(1∶5000)100μl，4℃放置1h；以PBST再洗板5次后，每孔加入底物TMB(3，3′，5，5′-tetramethyl benzidine dihydrochloridide)及過氧化氫溶液各100μl，室溫放置30～60min，每孔加入2mol/L鹽酸100μl以終止顯色，采用酶標(biāo)比色計(jì)于450nm測(cè)定A值， 試驗(yàn)中設(shè)定空白對(duì)照(TMB)和樣品對(duì)照(表3)，結(jié)果顯示2572A活性較好，且隨濃度降低其活性也降低；2572B的活性則較低。

3 討論

6-epi-5′-hydroxymycosporulone(2572A)是1997年從真菌Microsphaeropsis sp. F-5050中分離出來的一種螺環(huán)類成分，它對(duì)人白血病細(xì)胞(HL-60)的細(xì)胞粘附功能(cell adhesion)有一定抑制作用，但對(duì)HL-60和黑素瘤細(xì)胞B16/BL6的細(xì)胞生長(zhǎng)功能的抑制活性一般［3］。真菌2572是經(jīng)過IL-6R拮抗劑篩選模型檢測(cè)篩選出的活性菌株之一，2572A在真菌2572發(fā)酵液中含量較高，也表現(xiàn)出了較好的IL-6R拮抗活性。鑒于IL-6R在骨髓瘤細(xì)胞中的高豐度分布，因此還需要對(duì)該化合物是否有抑制骨髓瘤細(xì)胞作用做進(jìn)一步的研究。核黃素(2572B)是機(jī)體中的必需微量成分，生物功能廣泛［5］，但本研究未發(fā)現(xiàn)它在IL-6R拮抗方面有較好的活性。表3產(chǎn)物濃度與IL-6R活性關(guān)系(拮抗率，%)

參考文獻(xiàn)

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篇6

【關(guān)鍵詞】 破骨細(xì)胞

關(guān)鍵詞: 降鈣素基因相關(guān)肽;成骨細(xì)胞;破骨細(xì)胞;白細(xì)胞介素-1

摘 要:目的 了解白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）在破骨細(xì)胞性骨吸收中的刺激作用，并評(píng)價(jià)降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）的拮抗效果. 方法 將新生大鼠破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞混合培養(yǎng)，接種于預(yù)置象牙片的培養(yǎng)板中.24h后培養(yǎng)液中分別加入IL-1β和不同濃度的CGRP.繼續(xù)培養(yǎng)48h，然后取出象牙片，超聲處理后行甲苯胺藍(lán)染色，光鏡下觀察骨吸收陷窩數(shù)目并計(jì)算其總面積. 結(jié)果 IL-1β明顯增加象牙片上吸收陷窩的數(shù)目（37.2±8.2vs22.4±5.7）per slice（P

Keywords:calcitonin gene-related peptide;osteoblast;osteo-clast;interleukin-1

Abstract:AIM To investigate the effects of interleukin-1β（IL-1β）on bone resorption in vitro，and to evaluate the inhi-bitory effect of CGRP.METHODS The osteoclasts isolated from the long bones of newborn SD rats were co-cultured with osteoblasts on ivory slices placed in24-well plates.Twenty-four hours later，conditioned media containing CGRP and/or IL-1βwere added to the wells respectively，and the culturing continued for48h.After the cells were stripped off by ultrasonication，the ivory slices were stained in toludine blue.The number of resorption lacunae on each slice was counted under light microscope and the area was measured by computer imaging analysis system.RESULTS IL-1βstimu-lated significantly bone resorption as shown by increased numbers（37.2±8.2vs22.4±5.7per slice，P

0 引言

破骨細(xì)胞是骨吸收過程的效應(yīng)細(xì)胞，其生成、活化及其在骨吸收中的作用受細(xì)胞因子和細(xì)胞間相互作用所調(diào)節(jié).IL-1是一種骨吸收刺激因子，可在多種骨吸收性疾病中異常地增高，其作用的方式是由成骨細(xì)胞或骨髓基質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)，而非直接作用于破骨細(xì)胞.我們采用體外成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)的方法來觀察IL-1對(duì)破骨細(xì)胞性骨吸收的刺激作用以及降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）的拮抗效果.

1 材料和方法

1.1 材料 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽α（rCGRPα，Sig-ma產(chǎn)品），大鼠白細(xì)胞介素-1β（rIL-1β，Sigma產(chǎn)品），出生24h內(nèi)的SD大鼠（同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），MEM培養(yǎng)基及胎牛血清（Gibco公司），HEP-ES、青霉素、鏈霉素及甲苯胺藍(lán)（均為Merck公司），抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色試劑盒（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病研究所產(chǎn)品）;無菌象牙片（6mm×6mm大小，30μm厚）、蓋玻片.實(shí)驗(yàn)分組為對(duì)照組、IL-1刺激組（rIL-1β濃度為10μg?L-1 ）和治療組（rCGRP的終濃度為10-9 ，10-8 ，10-7 ，10-6 mol?L-1 ，其中各組均含rIL-1β10μg?L-1 ）.

1.2 方法

1.2.1 破骨細(xì)胞的培養(yǎng) 取新生SD大鼠，拉頸處死，750mL?L-1 乙醇浸泡5min，分離其股骨、肱骨和脛骨，清除骨表面軟組織和骨骺，骨干部分放入盛有MEM培養(yǎng)液（含150mL?L-1 胎牛血清、25mmol?L-1 HEPES緩沖液、100kU?L-1 青霉素、100kU?L-1 鏈霉素、pH7.0～7.1）的玻璃平皿中，用解剖刀縱剖后將骨質(zhì)內(nèi)表面輕輕刮入培養(yǎng)液，吸管反復(fù)沖打骨質(zhì)碎片2min，靜止30s后，收集上清，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×109 ?L-1 ，再均勻接種于預(yù)置蓋玻片和象牙片的6孔板中（此前已加MEM培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)2h）.常規(guī)培養(yǎng)（37℃，50mL?L-1 CO2 、飽和濕度）30min后，用MEM培養(yǎng)液沖掉未貼壁細(xì)胞，更換培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，8h后取出蓋玻片，行破骨細(xì)胞形態(tài)學(xué)鑒定，48h后取象牙片行骨吸收陷窩的掃描電鏡鑒定.破骨細(xì)胞的鑒定:①倒置顯微鏡觀察:觀察培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)及運(yùn)動(dòng)情況;②破骨細(xì)胞TRAP染色:將含細(xì)胞蓋玻片經(jīng)10mL?L-1 戊二醛4℃固定10min，沖洗后置入TRAP孵育液，37℃孵育50min，蒸餾水沖洗，甘油明膠封片;③骨吸收陷窩掃描電鏡（SEM）觀察，將象牙片用0.25mol?L-1 NH4 OH超聲處理15min，以除去象牙片上生長(zhǎng)的細(xì)胞，然后用25mL?L-1 戊二醛固定2h，10mL?L-1 鋨酸固定后，系列乙醇脫水，醋酸異戊酯置換乙醇，二氧化碳臨界點(diǎn)干燥、鍍金，日立S-520掃描電鏡（15KV）觀察象牙片上的陷窩.

1.2.2 成骨細(xì)胞的培養(yǎng) 采用2次膠原酶消化培養(yǎng)方法，將1d齡新生SD大鼠置入750mL?L-1 乙醇中浸泡消毒5min，無菌操作下完整取出顱蓋骨，清理洗滌干凈后，用1mL?L-1 Ⅰ型膠原酶（Sigma公司）分別于室溫靜置、37℃剪碎振蕩消化30min和20min.收集第二次消化的細(xì)胞懸液，1000r?min-1 離心10min，棄上清，用少量含200mL?L-1 胎牛血清（FCS）的DMEM（Gibco公司）培養(yǎng)液（含青霉素和鏈霉素各100kU?L-1 ）將細(xì)胞吹打均勻，按1×108 ?L-1 接種于培養(yǎng)瓶中，常規(guī)條件培養(yǎng)，2～3d換液1次，至7～9d細(xì)胞匯合后消化傳代.實(shí)驗(yàn)采用第二代成骨細(xì)胞，濃度為2×107 ?L-1 .

1.2.3 破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞混合培養(yǎng)及骨吸收陷窩 的觀察 將上述方法分離之破骨細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板中，每孔預(yù)先放置2塊象牙片，30min后振蕩象牙片，并用MEM沖洗掉未貼壁細(xì)胞，更換培養(yǎng)液，每孔加入MEM/FCS1.5mL和成骨細(xì)胞懸液0.5mL，共同培養(yǎng)24h.再次換液并分別加入rIL-1β和rCGRP，使終濃度達(dá)到IL-1刺激組和各治療組所需的IL-1β和CGRP濃度.繼續(xù)培養(yǎng)48h后取出各孔象牙片，用25mL?L-1 戊二醛固定10min，于0.25moL?L-1 NH4 OH溶液中超聲清洗5min×3次，系列乙醇脫水，自然晾干.1g?L-1 甲苯胺藍(lán)染液室溫染色3～4min，蒸餾水清洗后光鏡下觀察，100倍下對(duì)整張象牙片作陷窩計(jì)數(shù)，結(jié)果以陷窩數(shù)/象牙片表示，并利用MPIAS-500多媒體圖像分析系統(tǒng)測(cè)定每張象牙片骨吸收陷窩的面積（單位為μm2 ），每組6片.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x ±s表示，作t檢驗(yàn)和直線相關(guān)分析.

2 結(jié)果

2.1 培養(yǎng)破骨細(xì)胞的鑒定 倒置顯微鏡下，作為破骨細(xì)胞來源的細(xì)胞懸液中含有破骨細(xì)胞和大量其他類型的細(xì)胞.經(jīng)短暫培養(yǎng)后換液，除破骨細(xì)胞外其他大部分細(xì)胞均被沖洗掉.貼壁之破骨細(xì)胞含多個(gè)細(xì)胞核，培養(yǎng)2h后胞質(zhì)伸展，形態(tài)清晰，呈油煎蛋形，長(zhǎng)條形、漏斗形及不規(guī)則形等，細(xì)胞形態(tài)隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而不斷變化.TRAP為破骨細(xì)胞特異性標(biāo)志酶，光學(xué)顯微鏡下TRAP染色顯示破骨細(xì)胞胞質(zhì)呈紅色的陽性反應(yīng)，核陰性（Fig1）.成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞混和培養(yǎng)24h后，取象牙片經(jīng)甲苯胺藍(lán)染色可見成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞共同生長(zhǎng)，且兩細(xì)胞間通過胞質(zhì)突起而相互接觸（Fig2）.骨吸收陷窩形成是破骨細(xì)胞的特異性功能標(biāo)志，掃描電鏡結(jié)果顯示，骨吸收陷窩呈圓形、橢圓形或不規(guī)則形，陷窩邊界清晰，底面粗糙不平，有纖維樣基底（Fig3）.

2.2 骨吸收陷窩數(shù)目及吸收面積 取出成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞混和培養(yǎng)3d的象牙片經(jīng)甲苯胺藍(lán)染色后在光鏡下觀察，可見吸收陷窩呈藍(lán)紫色圓形、橢圓形或臘腸形等各種形態(tài)，邊界清楚，陷窩底纖維紋路隱約可辨（Fig4）.當(dāng)培養(yǎng)液中加入IL-1β后（濃度為10μg?L-1 ），可以使象牙片上吸收陷窩的數(shù)目和面積較對(duì)照組明顯增加（P

2 =-0.49，P

圖1 －圖4 略

表1 降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)IL-1β刺激骨吸收陷窩數(shù)目和面積的影響　略

3 討論

破骨細(xì)胞來源于單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的造血干細(xì)胞，并在巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）、白細(xì)胞介素-3（IL-3）和粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）的誘導(dǎo)下演變?yōu)槌墒斓钠乒羌?xì)胞，其典型特征為多核、富含TRAP、有豐富的降鈣素受體以及在骨薄片上可形成骨吸收陷窩等［1，2］ .我們采用新生大鼠長(zhǎng)骨機(jī)械分離方法，并通過活體觀察、貼壁細(xì)胞TRAP特異性染色以及典型骨吸收陷窩的SEM觀察，證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有明顯的破骨細(xì)胞特征.成骨細(xì)胞在破骨細(xì)胞的誘導(dǎo)和活化過程中發(fā)揮重要作用［3］ .IL-1主要來源于單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，具有較強(qiáng)的刺激骨吸收活性和抑制骨形成作用，在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生中起重要作用［4］ .IL-1在骨吸收中的作用機(jī)制尚不十分清楚，目前研究認(rèn)為，IL-1首先作用于成骨細(xì)胞，刺激后者合成和分泌細(xì)胞因子以旁分泌調(diào)節(jié)方式或者通過細(xì)胞間連接、接觸以直接傳遞信息的方式來促進(jìn)破骨前體細(xì)胞的分化成熟和成熟破骨細(xì)胞的活化，從而發(fā)揮其促進(jìn)骨吸收的作用［5，6］ .而IL-1對(duì)不伴成骨細(xì)胞存在的破骨細(xì)胞性骨吸收則缺乏明顯的刺激作用［7］ .我們發(fā)現(xiàn)，10μg?L-1 IL-1β可以明顯增加象牙片上骨吸收陷窩的數(shù)目和面積，因而證實(shí)IL-1β的刺激骨吸收作用.

降鈣素（CT）是一種強(qiáng)有力的骨吸收抑制劑，而CGRP作為CT家族的成員之一，與CT在特異性受體結(jié)合上可有部分交叉作用，因此CGRP有可能直接作用于破骨細(xì)胞的CT受體，通過cAMP信號(hào)途徑來抑制破骨細(xì)胞的活化和骨吸收功能，從而發(fā)揮出一定程度的CT樣作用［8-10］ .此外，CGRP亦可能通過調(diào)控成骨細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)而間接影響破骨細(xì)胞的活性及其骨吸收功能.IL-1β和脂多糖可以刺激培養(yǎng)的成骨細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子α（TNF-α），但加入CGRP則能明顯抑制這種刺激作用［11］ .我們通過對(duì)骨吸收陷窩數(shù)目和面積的定量觀察，證實(shí)CGRP可以拮抗IL-1β刺激的骨吸收作用，而且這種抑制效應(yīng)呈劑量相關(guān)性.因而提示:CGRP可能通過兩種方式來抑制破骨細(xì)胞性骨吸收，一方面直接作用于破骨細(xì)胞的CT受體并抑制其活化，另一方面調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞相關(guān)因子的釋放而間接影響破骨前體細(xì)胞的分化和成熟.

致 謝 上海市放射醫(yī)學(xué)研究所王洪復(fù)教授、高建軍博士在實(shí)驗(yàn)中提供幫助和指導(dǎo).

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篇7

[關(guān)鍵詞] 肺腫瘤/非小細(xì)胞肺癌；重組人白細(xì)胞介素11；轉(zhuǎn)移；預(yù)后

[中圖分類號(hào)] R734.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2017）11-0050-03

Effect of recombinant human interleukin 11（rhIL-11） on metastasis and survival of patients with non-small cell lung cancer （NSCLC）

PENG Na KANG Mafei HE Shaozhong LIU Xiuli

Department of Medical Oncology， the Affiliated Hospital of Guilin Medical College， Guilin 541001， China

[Abstract] Objective To investigate the effect of recombinant human interleukin 11（rhIL-11） on metastasis and survival of patients with non-small cell lung cancer（NSCLC）. Methods Total of 120 patients with NSCLC patients from June 2012 to June 2015 were retrospectively analyzed and the differences of rate of metastasis， time of metastasis， time to progression （TTP） and the overall survival （OS） between patients treated with and did not with rhIL-11 were compared. Results There were 60 patients who treated with rhIL-11（group A） and 60 patients did not treat with rhIL-11（group B）. The rate of metastasis 6 months after starting treatment were 80.0% and 63.3%， P=0.043， and the time of metastasis was （5.3±1.3） months and（5.8±1.2） months， P=0.026， and the time of progresson（TTP） was （4.1±0.8） months and （4.7±0.8） months， P=0.000，respectively in group A and group B. The overall survival （OS） was （9.7±0.5） months in group A and（9.9±0.3） months in group B， there was no statistic difference （P=0.053）. Conclusion The finding suggests that rhIL-11 may promote metastasis of NSCLC.

[Key words] Lung neoplasmas/NSCLC； rhIL-11； Metastasis； Prognosis

近年淼難芯肯允荊白細(xì)胞介素11（IL-11）過表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移相關(guān)，在許多惡性腫瘤中顯著升高，考慮其為致腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移的最重要細(xì)胞因子之一[1]。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)外源性IL-11是否促進(jìn)腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)移的研究報(bào)道較少。本研究回顧性分析了60例化療過程中使用重組人白細(xì)胞介素11（rhIL-11）升血小板治療非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生率、發(fā)生轉(zhuǎn)移時(shí)間、腫瘤進(jìn)展時(shí)間（TTP）和總生存期（OS），并與分期相同的60例未使用過rhIL-11的患者比較，從而探討臨床中使用rhIL-11影響患者預(yù)后的可能性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集本院2012年6月～2015年6月收治的經(jīng)細(xì)胞學(xué)或組織學(xué)確診的初治或復(fù)治的化療過程中曾出現(xiàn)血小板減少并使用rhIL-11 治療的NSCLC患者作為觀察組（A組），同時(shí)，尋找病理、分期和化療方案相同、年齡和體能狀態(tài)評(píng)分（PS評(píng)分）及其他因素相近的未使用過rhIL-11治療的患者作為對(duì)照組（B組）。每組60例[ⅢB期（T3-4N2M0）6例，ⅢB期（T1-4N3M0）30例，Ⅳa期（T1-4N2-3M1a）24例[2]，腺癌48例，鱗狀細(xì)胞癌12例]。A、B兩組共120例。記錄所有患者的TTP（判斷腫瘤進(jìn)展的標(biāo)準(zhǔn)為RECIST1.1標(biāo)準(zhǔn)）和OS。如果有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者，則記錄出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的時(shí)間。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）PS評(píng)分按ECOG標(biāo)準(zhǔn)為0～2分。（2）有可測(cè)量病灶。（3）預(yù)計(jì)生存期≥3個(gè)月。（4）血紅蛋白≥95 g/L；白細(xì)胞≥4.0×109/L；血小板≥100×109/L。血清肌酐

1.2 治療方法

按NCCN指南，A、B兩組的肺腺癌治療首選培美曲塞（德州德藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H20080230，規(guī)格：200 mg/支）500 mg/m2，d1，聯(lián)合卡鉑（齊魯制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20020180，規(guī)格：100 mg/支）AUC 6，d1，q21d。肺鱗狀細(xì)胞癌治療首選吉西他濱（江蘇豪森制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20030104，規(guī)格：200 mg/支）1000 mg/m2，d1、8，聯(lián)合卡鉑，AUC 6，d1，q21d。A組給予rhIL-11（齊魯制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字S20053046，規(guī)格：1.5 mg/支）50 μg/kg體重，每日1次，至血小板計(jì)數(shù)≥100×109/L以上停藥。B組不予rhIL-11治療。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件完成統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，兩組比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P

2 結(jié)果

2.1 兩組遠(yuǎn)處率、轉(zhuǎn)移時(shí)間、TTP和OS比較

使用rhIL-11者（A組）與未使用rhIL-11者（B組）遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率分別為80.0%（48/60）和 63.3%（38/60），χ2=4.104，P=0.043，提示使用rhIL-11者的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移顯著高于未使用者。使用rhIL-11者的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時(shí)間顯著早于未使用rhIL-11者，TTP顯著早于未使用rhIL-11者。使用與未使用rhIL-11患者的OS無顯著差異。見表1。

2.2 兩組生存曲線比較

見圖1。

3 討論

IL-11由Paul于1990年發(fā)現(xiàn)，1991年在美國(guó)基因克隆成功并轉(zhuǎn)入大腸桿菌中成功表達(dá)。IL-11是細(xì)胞因子IL-6家族中的成員之一，是骨髓基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的一種多效性的細(xì)胞因子，主要生物學(xué)活性是參與造血調(diào)控，支持和控制定向造血干細(xì)胞的增殖和分化，可刺激造血細(xì)胞（巨核細(xì)胞、粒系細(xì)胞、紅系細(xì)胞）的成熟分化，具有明顯的促進(jìn)造血作用，此外，IL-11參與骨、神經(jīng)發(fā)生和其他組織的生長(zhǎng)[3]。

然而，越來越多的研究顯示，IL-11在腫瘤的發(fā)展和轉(zhuǎn)移中起重要作用。IL-11刺激腫瘤細(xì)胞增殖、血管生成和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[4-6]。IL-11通過激活STAT3信號(hào)通路促進(jìn)癌轉(zhuǎn)移[7，8]，轉(zhuǎn)移機(jī)制可能與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）有關(guān)。許多與IL-11相關(guān)的信號(hào)通路激活，如HIF-1α誘導(dǎo)IL-11分泌增加，通過PI3K/Akt/GSK3β途徑[9]、miRNA-206/TWF1/MKL1-SRF/IL-11信號(hào)途徑[10]等，可增強(qiáng)EMT，促進(jìn)轉(zhuǎn)移。

有研究認(rèn)為，IL-11受體蛋白水解作為啟動(dòng)和控制IL-11信號(hào)通路的開關(guān)[11]。抑制IL-11受體α可抑制STAT3的激活，從而抑制EMT[12]。故認(rèn)為抑制IL-11信號(hào)途徑可能是治療腫瘤轉(zhuǎn)移的方法[13]。總之，基礎(chǔ)研究結(jié)果提示IL-11可能通過激活各種信號(hào)通路，促進(jìn)EMT而使腫瘤轉(zhuǎn)移。

臨床研究顯示，腎透明細(xì)胞癌組織中，IL-11高表達(dá)是獨(dú)立的不良預(yù)后因素[14]。分期越晚，胃腺癌的IL-11表達(dá)越高，認(rèn)為IL-11是胃癌侵襲和預(yù)后的指標(biāo)[15]。乳腺癌骨轉(zhuǎn)移的患者IL-11表達(dá)顯著高于無骨轉(zhuǎn)移者，IL-11高表達(dá)的骨轉(zhuǎn)移患者的生存期顯著短于IL-11低表達(dá)的骨轉(zhuǎn)移患者[16]。IL-11高表達(dá)是獨(dú)立的預(yù)后因素[14]。這些研究均從臨床角度提示了IL-11促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的可能性。

上述基礎(chǔ)和臨床研究均提示，IL-11可促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移，那么，臨床中使用rhIL-11是否有促進(jìn)腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)移的可能性呢？本研究結(jié)果提示，使用rhIL-11的NSCLC患者6個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的機(jī)率顯著高于未使用者，出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的時(shí)間明顯提前，TTP顯著短于未使用者，可能是rhIL-11促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移所致。OS沒有差異，提示使用rhIL-11可能不影響患者的總生存時(shí)間，但也可能與進(jìn)展后的每個(gè)患者的后續(xù)治療不同而不能準(zhǔn)確判斷OS有關(guān)?？傊伟┗颊叩腡TP和OS影響因素很多，要得出較肯定的結(jié)論，還需要前瞻性的臨床研究和多因素相關(guān)分析。

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篇8

[關(guān)鍵詞] 敗血癥 新生兒 血清白細(xì)胞介素-8 診斷價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R515.3[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1005-0515（2011）-08-006-02

The Diagnos is Value of Plasma IL-8 in Newborns With Sepsis

[Abstract] Objective To value the diagnosis power of plasma interleukin 8(IL-8) in newborns with sepsis or bacteria infection or virus infection.Methods Umbilical cord bloodIL-8 were measured in 30 healthy term-infants. Forty-six high risk infectious infants had blood samples for plasma IL-8 , CRP, white cell counts, blood smear ,blood sputum culture and Chest X-ray.Results Fifteen newborns with sepsis, twenty-three non-sepsis bacteria infection infants, eight virus infectious newborns who had been measured plasma IL-8 level 89ng/L,76.5 ng/L,52.7 ng/L respectively. Cord blood IL-8 level is 11.3 ng/L. Plasma IL-8 level were no significant difference between early-onset and late-onset or term and preterm infants.There were significant different in IL-8 level between sepsis and non-bacteria infection group, or sepsis and normal control group. When these infants with above 55.5ng/L IL-8 level.It is the sensitive and special of diagnosis to sepsis about 80% and 75% according to ROC. But there was no significant difference in IL-8 between non-sepsis bacteria infection and virus infection.Conclusion Different gestations and onset-time can't effect newborns' plasma IL-8 level with sepsis.55.5ng/L was determined as the suitable threshold for plasma IL-8 by ROC-curve analysis.

[Keywords] Septicemia; Newborn; Serum interleukin-8; Diagnostic value

新生兒敗血癥仍為NICU新生兒病死率較高的疾病之一，由于臨床癥體和體征不典型，病情進(jìn)展快，暴發(fā)性病例極易錯(cuò)失最佳搶救時(shí)期，遺誤病情。近年來實(shí)驗(yàn)室生化指標(biāo)為臨床醫(yī)生早期合理、有效實(shí)施救治提供了非常重要的客觀依據(jù)。白細(xì)胞介素-8(IL-8)是典型的炎癥細(xì)胞趨化因子之一，在正常情況下，血中IL-8含量很低，而不受胎齡及出生時(shí)間影響，在炎癥病變時(shí)，可刺激單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞大量分泌IL-8，1-3小時(shí)內(nèi)血清水平迅速升高[1,2]。新生兒敗血癥時(shí)血清IL-8升高，有較好的靈敏度和持異性，但各實(shí)驗(yàn)室有不同的診斷參考閾值水平。現(xiàn)將我們研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 2004年12月-2005年11月在本院產(chǎn)科分娩的健康新生兒30例。另有46例疑診感染住院新生兒(新生兒敗血癥15例、細(xì)菌性肺炎23例、病毒感染8例)，15例敗血癥中早發(fā)性和晚發(fā)性敗血癥分別為9例和6例，早產(chǎn)兒與足月兒敗血癥分別為4例和11例。

1.2 方法

1.2.1 患兒樣本于入院后24小時(shí)內(nèi)采集,正常對(duì)照樣本為分娩后24小時(shí)內(nèi)采集。所有血液標(biāo)本于采集后1h內(nèi)離心取血清, -70℃冷凍保存, 3個(gè)月內(nèi)一批檢測(cè)完成。

1.2.2 IL-8試劑盒由德國(guó)Human公司生產(chǎn),采用EL ISA6點(diǎn)定標(biāo)定量方法。所有操作嚴(yán)格按試劑說明書進(jìn)行[3]。

1.2.3 儀器 酶標(biāo)儀為拓普XD2711型。

1.2.4 新生兒敗血癥診斷 根據(jù)中華兒科雜志2003年12月發(fā)表的新生兒敗血癥診療方案[4]。

1.2.5 細(xì)菌性肺炎診斷 臨床癥狀體征，胸片異常及痰培養(yǎng)細(xì)菌生長(zhǎng)。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

1.3.1 非正態(tài)分布的計(jì)量資料采用秩和檢驗(yàn)。

1.3.2 SPSS13.0繪制ROC曲線。

2 結(jié)果

2.1 15例敗血癥患者結(jié)果 見下表。

2.2 各組新生兒IL-8結(jié)果 見下表。

經(jīng)秩和檢驗(yàn)，健康新生兒IL-8均極顯著低于敗血癥組、細(xì)菌性肺炎組及病毒感染組(P＜0.01)。敗血癥組顯著高于病毒感染組(P＜0.05),同細(xì)菌性肺炎組比較無顯著差異(P>0.05)。細(xì)菌性肺炎組同病毒感染組比較無顯著性差異(P>0.05)。早發(fā)敗血癥同晚發(fā)敗血癥、足月兒敗血癥與早產(chǎn)兒敗血癥血清IL-8比較無顯著性差異(P>0.05)。

2.3 將新生兒敗血癥作為診斷標(biāo)準(zhǔn)與同病毒感染組作為對(duì)照組作ROC曲線

曲線下面積0.838（0.8-0.9）診斷效果較好，當(dāng)IL-8為 55.5 ng/L時(shí)，診斷敗血癥靈敏度為80%，特異性為75%。

2.4 將新生兒敗血癥作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)與健康新生兒血清IL-8作正常對(duì)照作ROCAQQ曲線

曲線下面積0.937(0.9-1.0)診斷效果最好，當(dāng)IL-8為38.3ng/L時(shí)，診斷敗血癥靈敏度為93.3%，特異性為86.7%。

3 討論 細(xì)菌感染顯著影響新生兒發(fā)病與死亡。由于新生兒細(xì)菌感染臨床癥狀非特異性，因此通過實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)來排除或確定細(xì)菌感染。各種實(shí)驗(yàn)室標(biāo)志特:CRP、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、不成熟粒細(xì)胞/總粒細(xì)胞比值、TNF-α、IL-6、前降鈣素等對(duì)決定是否開始或結(jié)束使用抗生素有一定的幫助[5]。白介-8是一種炎癥前細(xì)胞因子，主要由單核巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，共作用與IL-6相似，測(cè)定血清IL-8對(duì)新生兒細(xì)菌感染是一些種有價(jià)值實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。

3.1 新生兒敗血癥同細(xì)菌性肺炎比較血清IL-8水閏相似。我們資料結(jié)果說明新生兒確診敗血癥、臨床敗血癥及細(xì)菌性肺炎情況下，血清IL-8水平相同，炎癥過程相似，同國(guó)內(nèi)外報(bào)道相一致。

3.2 早發(fā)性敗血癥與晚發(fā)性敗血癥血清IL-8無差異，足月兒與早產(chǎn)兒敗血癥血清IL-8水平相似，這說明血清IL-8水平不受敗血癥發(fā)生早晚及與發(fā)病時(shí)胎齡影響。

3.3 我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，利用血清IL-8水平不同鑒別敗血癥與病毒感染時(shí)，通過ROC典線證實(shí)，當(dāng)IL-8為55.5ng/L時(shí)，診斷敗血癥靈敏度為80%，特異性為75%。同上海新華醫(yī)院報(bào)道結(jié)果相似(55pg/ml)作為診斷試驗(yàn)水平[6]。但特異性與敏感度有所不同，兩者分別為75%對(duì)71.4%、80%對(duì)71.4%。

3.4 我們實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明足月健康新生兒肺血IL-8水平較低，如果作為正常對(duì)照可導(dǎo)致靈敏度高而特異性差。

綜上所述，新生兒敗血癥或細(xì)菌感染時(shí)，血清IL-8水平顯著上升，當(dāng)IL-8為55.5ng/L時(shí)，診斷敗血癥靈敏度為80%，特異性為75%，但敗血癥發(fā)病早晚及發(fā)病時(shí)胎齡對(duì)IL-8沒有明顯影響。因此，IL-8可作為細(xì)菌感染時(shí)一項(xiàng)非常有應(yīng)用價(jià)值的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。

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篇9

摘要 目的 觀察胸腔內(nèi)交替注射順鉑（PDD）、白細(xì)胞介素-2(IL-2)序貫全身應(yīng)用NP方案治療非小細(xì)胞肺癌合并惡性胸腔積液的短期療效。方法 將我院收治的惡性胸腔積液患者32例均行B超定位,將中心靜脈導(dǎo)管一端置入胸腔內(nèi),另一端接一次性負(fù)壓引流袋,緩慢引流,待胸水消失或很少量時(shí),經(jīng)導(dǎo)管每次向胸腔內(nèi)交替注入順鉑(DDP)40～60mg、白細(xì)胞介素 2(IL 2)400～600萬U，重復(fù)應(yīng)用2～3次，序貫應(yīng)用蓋諾40mgd1、8天、順鉑(DDP)40～60mgd2、3、4天,全身化療，觀察局部用藥后1月胸水變化及全身化療后肺內(nèi)腫塊變化。結(jié)果胸水治療有效率為90.6%，肺內(nèi)腫塊有效率為37.5%。結(jié)論 順鉑、白細(xì)胞介素-2交替胸腔注合NP方案化療治療肺癌合并惡性胸腔積液可以提高療效并且對(duì)身體損傷較小。

關(guān)鍵詞 順鉑; 白細(xì)胞介素-2；胸腔注入;惡性胸腔積液;肺癌；蓋諾順鉑方案 非小細(xì)胞肺癌并惡性胸腔積液是肺癌治療中的一大難題。胸腔積液能否得到控制直接影響到患者的整體療效及生活質(zhì)量,既往多采用單純化學(xué)藥物或單純生物制劑治療胸腔積液,療效欠佳，且對(duì)肺內(nèi)病灶控制不利,我們交替應(yīng)用順鉑、白細(xì)胞介素-2胸腔內(nèi)灌注序貫應(yīng)用NP方案全身化療治療肺癌合并惡性胸腔積液，取得良好效果?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 病例選擇 我院2002年4月至2005年12月收治的非小細(xì)胞肺癌合并惡性胸腔積液患者32例,其中男18例,女14例;年齡38～70歲,中位年齡62歲。32例均為初治患者，全部病例胸水化驗(yàn)找到癌細(xì)胞。其中肺腺癌30例,肺鱗癌1例，肺腺鱗癌1例。治療前查肝腎功能正常，血常規(guī)符合化療要求，B超檢查胸水量＞800ml。karnofsky標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分60～75分。

1.2 治療方法 首先行B超定位,采用單腔或雙腔中心靜脈導(dǎo)管穿刺成功后,借助穿刺針及導(dǎo)絲,將導(dǎo)管置入胸膜腔內(nèi)，另一端接一次性負(fù)壓引流袋,在無菌、封閉的條件下,緩慢引流。引流速度不超過500ml/小時(shí)，第1次引流量不超過1000ml,以后可適量增加, 以少量多次為宜，根據(jù)患者耐受情況連續(xù)引流3～7日,盡量將胸水引流干凈,經(jīng)B超、胸透或胸片確定后向胸腔內(nèi)交替注入順鉑(DDP)40～60mg(加生理鹽水50ml)、白細(xì)胞介素 -2(IL-2)400～600萬U(加生理鹽水50ml), 同時(shí)應(yīng)用地塞米松5mg胸腔內(nèi)注入。用藥間隔2～3天，每種藥重復(fù)2 ～3次，然后封閉導(dǎo)管，每周復(fù)查B超觀察胸水消失或增長(zhǎng)情況，胸水不再增長(zhǎng)后拔掉導(dǎo)管。胸腔用藥結(jié)束后即靜脈應(yīng)用蓋諾40 mg×2次,間隔時(shí)間1周，休息1～2周后，繼以NP方案化療，即蓋諾40 mgd1、8天、順鉑(DDP)40～60mgd2、3、4天，化療前常規(guī)用恩丹西酮8mg止吐,化療時(shí)常規(guī)水化利尿治療，應(yīng)用蓋諾時(shí)采用肘正中靜脈或PICC管，同時(shí)應(yīng)用地塞米松5mg化療前入小壺，以減少靜脈炎的產(chǎn)生。全身化療3周期，休息1～2月復(fù)查B超、胸片及胸部CT，評(píng)價(jià)療效。

1.3 胸水評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)胸片和B超等影像學(xué)診斷及世界衛(wèi)生組織(WHO)的標(biāo)準(zhǔn)分為：完全緩解(CR):胸水消失并至少維持4周以上。部分緩解(PR):胸水減少50%以上,并維持4周。穩(wěn)定(SD):胸水減少,無增加趨勢(shì)。病變進(jìn)展(PD):胸水無減少或有增加?？傆行逝卸?CR+PR。

1.4 肺內(nèi)原發(fā)腫塊評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)WHO抗腫瘤藥物客觀療效標(biāo)準(zhǔn)(1981)評(píng)定療效,分為完全緩解(CR),部分緩解(PR),穩(wěn)定(SD)和進(jìn)展(PD),毒性評(píng)價(jià)按WHO標(biāo)準(zhǔn)分為0～I(xiàn)V 度。

1.5 生活質(zhì)量評(píng)定 按Karnofsky評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)在治療前、治療后評(píng)定。治療后卡氏評(píng)分較治療前增加20分者為顯著改善;增加10分者為改善;無增加者為穩(wěn)定;減少10分者為下降。有效率為顯著改善+改善。

2 結(jié)果

2.1 臨床療效 32例患者胸腔積液經(jīng)治療后均有不同程度好轉(zhuǎn),其中CR 15例,部分緩解14例,3例有好轉(zhuǎn),但不及PR,總有效率為90.6%,肺內(nèi)腫塊變化部分緩解12例,無變化18例,病灶增大2例,總有效率37.5%。見表1。

表1 臨床療效 n（%）

部位療效例數(shù)CRPRNCPDCR+PR胸腔積液3215143090.6肺內(nèi)腫塊3201218237.52.2 karnofsky評(píng)分變化 32例中KPS均有不同程度變化,其中KPS評(píng)分提高20分者18例。KPS提高10分者8例, 有效率為81.25%。無變化者4例,KPS評(píng)分下降者2例。

2.3 毒副反應(yīng) 白細(xì)胞介素-2胸腔內(nèi)注射無不良反應(yīng),順鉑主要不良反應(yīng)為惡心、嘔吐、食欲不振，NP方案化療主要不良反應(yīng)為血液毒性，惡心嘔吐，局部靜脈炎，周圍神經(jīng)毒性。具體見表2 。

表2 毒副反應(yīng) n（%）

毒副反應(yīng)毒副反應(yīng)分度0ⅠⅡⅢⅣWBC下降111560065.6惡心嘔吐913100071.9靜脈炎27320015.6周圍神經(jīng)毒性19832040.63 討論

肺癌合并胸水治療難度大,預(yù)后較差，徹底排盡胸水是治療惡性胸水的關(guān)鍵因素之一［1］,而排盡胸水后胸腔內(nèi)注藥是治療惡性胸水的常用方法。近年來用藥多為化療藥物及生物免疫調(diào)節(jié)劑等,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為其主要作用機(jī)理為胸腔內(nèi)注射藥物引起化學(xué)性胸膜炎,使胸膜粘連、閉鎖［2］。順鉑(PDD)為一種周期非特異性藥物,無需肝臟活化卻直接殺死肺漿膜表面及積液內(nèi)的癌細(xì)胞,具有化療值高、毒性低的特點(diǎn)。順鉑又為濃度依賴性藥物,腔內(nèi)注射其藥物濃度較全身用藥高2～8倍,而半衰期延長(zhǎng)9倍。腔內(nèi)注射不僅可以直接殺傷癌細(xì)胞,而且還可以溶栓再通小血管和淋巴管,促進(jìn)積液的吸收而提高療效,有文獻(xiàn)報(bào)道常規(guī)胸腔注入順鉑治療惡性胸腔積液有效率為56.3%［3］。而白細(xì)胞介素-2(IL-2)是一種由激活的T細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴因子，能誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，參與機(jī)體多種免疫反應(yīng)，并具有抗瘤活性［4］。白細(xì)胞介素-2與順鉑聯(lián)合應(yīng)用能改變抗癌藥的化學(xué)敏感性，有效控制惡性胸腔積液的滲出，促進(jìn)淋巴液的回流，改善患者營(yíng)養(yǎng)狀況，有協(xié)同增效作用，順鉑有消化道反映，而白細(xì)胞介素-2無明顯不良反應(yīng)，交替應(yīng)用可緩解順鉑不良反應(yīng)，使患者耐受性更好。治療時(shí)應(yīng)用地塞米松胸腔注入減少胸膜粘連， 使藥物充分分布胸膜，減少發(fā)熱胸痛等副反應(yīng)。

在臨床先行局部治療可提高生存質(zhì)量、延長(zhǎng)生存期、行胸腔置管引流胸液量徹底，容易控制、對(duì)胸腔刺激小、方便注藥、注藥時(shí)生理鹽水量適當(dāng)增加，有利于藥物廣泛與胸膜接觸，在患者全身狀況允許的情況下，應(yīng)配合全身化療或放療。因胸腔局部給藥產(chǎn)生高的胸腔內(nèi)藥物濃度,但很少影響全身,對(duì)于控制原發(fā)及其它轉(zhuǎn)移病灶作用差。而靜脈化療彌補(bǔ)了局部給藥的不足,達(dá)到了原發(fā)病灶和胸腔內(nèi)轉(zhuǎn)移病灶同時(shí)治療的目的［5］。

蓋諾是第三代長(zhǎng)春堿類衍生物,其通過阻滯微管蛋白聚合形成微管和誘導(dǎo)微管的解聚,是抗有絲分裂的細(xì)胞周期特異性藥物。蓋諾藥代動(dòng)力研究學(xué)特點(diǎn),該藥血漿清除率高,分布容積大,半衰期長(zhǎng),能廣泛分布全身,其中以肝、肺組織較多,終末消除相半衰期延長(zhǎng),約為40h。由于其獨(dú)特的抗腫瘤作用,美國(guó)FDA于1994年12月批準(zhǔn)將蓋諾與順鉑聯(lián)合作為不可切除的晚期NSCLC的一線治療方案［6］。

篇10

【關(guān)鍵詞】 CHF；IL6；TNFα

【中國(guó)分類號(hào)】 R741.3【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 B【文章編號(hào)】 1044-5511（2012）02-0123-01

慢性充血性心力衰竭指慢性親切原發(fā)性心肌病變和心室因長(zhǎng)期壓力或容量負(fù)荷過重 使心肌收縮力減弱 不能實(shí)在維持心排血量 表現(xiàn)為呼吸比較困難 咳嗽 咳血 食欲不振 惡心 嘔吐 水腫等 常見醫(yī)圣病因是風(fēng)濕性住院心臟病 高血壓 缺血性診斷心臟病 心肌炎 主動(dòng)脈瓣狹窄或關(guān)閉不全 室間隔缺損 肺原性笑容心臟病 肺動(dòng)脈瓣狹窄等 本研究通過分析心力衰竭患者比索洛爾治療前后血清白細(xì)胞介素6與腫瘤壞死因子α水平的變化,進(jìn)一步探討β受體阻滯劑在CHF治療中的影響。

1.一般資料：

選擇2009年4月-2011年6月間在我院住院治療的慢性充血性心力衰竭（CHF）患者74例病歷資料，男40例，女34例，年齡43-86歲。NYHA心功能II 級(jí)6例，心功能III 級(jí)25例，IV級(jí)43例。隨機(jī)平均分為兩組，常規(guī)治療組比索洛爾組，兩組患者的病情、病程等資料無顯著差異，具有可比性。

2.檢測(cè)方法

血清白細(xì)胞介素6與腫瘤壞死因子α水平檢測(cè)：慢性充血性心力衰竭患者分別于入院時(shí)（要求未服或停服β受體阻滯劑3 d）、治療后12周抽血留取標(biāo)本。各組均于清晨空腹采取靜脈血5 mL，注入含100 g/L EDTA 30 μL和抑肽酶40 μL的試管中，混勻，3 000 r/min離心10 min， 取上層血清，-70℃冰箱待測(cè)。 比索洛爾5 mg/片，受試患者在常規(guī)治療（血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或血管緊張素II受體拮抗劑+利尿劑+地高辛）基礎(chǔ)上加用比索洛爾1.25 mg/d,，2周后逐漸增量至2.5-5 mg，每次增加2.5 mg/d，根據(jù)每個(gè)患者的臨床表現(xiàn)（如心率、 血壓、 心衰癥狀與體征）和耐受情況, 用至其自身的最大劑量（靶劑量為10 mg），達(dá)到最大耐受量后維持治療，觀察12周。使用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料以x±s表示，并進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，IL6、 TNFα與LVEF的關(guān)系采用直線相關(guān)分析。

3. 結(jié)果

治療前心衰患者各組血清IL6、 TNFα的水平：CHF組的血清IL6、 TNFα的變化均顯著高于對(duì)照組（P

常規(guī)治療組及比索洛爾治療組心衰患者治療后較治療前心率、平均動(dòng)脈壓、血清中IL6、TNFα水平均有明顯下降，左室射血分?jǐn)?shù)明顯增加，心功能明顯改善。比索洛爾組較常規(guī)治療組IL6、 TNFα水平方面下降更明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

4討論

慢性充血性心力衰竭又稱泵衰竭，通常是指心肌收縮功能明顯減退，使心排血量降低，伴有左心室舒張末壓增高，臨床上引起肺淤血和周圍循環(huán)灌注不足的表現(xiàn)，以及兩者不同程度的合并存在。泵衰竭常見于急性心肌梗死，特別是患急性廣泛性前、側(cè)壁心肌梗死時(shí)，更易發(fā)生泵衰竭。在泵衰竭早期常伴血壓升高，而血壓升高、外周阻力增加會(huì)加重泵衰竭。因此，泵衰竭的病人若發(fā)現(xiàn)血壓升高，特別是肺部出現(xiàn)濕音-急性肺水腫，應(yīng)馬上采取積極措施，盡快使血壓降下來，即所謂打開后負(fù)荷，維持血液正常循環(huán)，保障組織器官灌注。充血性心力衰竭在有適量靜脈血回流的情況下，由于心臟收縮和(或)舒張功能障礙，心排血量不足以維持組織代謝需要的一種病理狀態(tài)臨床上以心排血量不足，組織的血液灌注減少以及肺循環(huán)或體循環(huán)靜脈系統(tǒng)淤血為特征它是一種臨床綜合征。從血流動(dòng)力學(xué)而言，由于心肌舒縮功能障礙，使心臟壓力高于正常(左室舒張末期壓或稱左室充盈壓>18mmHg；右室舒張末期壓或稱右室充盈壓>10mmHg)即為心力衰竭，亦稱心功能不全。充血性心力衰竭和心功能不全的概念基本上是一致的，但后者的含義更為廣泛，包括已有心排血量減少但尚未出現(xiàn)臨床癥狀的這一階段。

本研究結(jié)果顯示心力衰竭時(shí)血清白細(xì)胞介素6與腫瘤壞死因子α水平血清中表達(dá)均顯著增加，血清白細(xì)胞介素6與腫瘤壞死因子α水平與NYHA分級(jí)一致，表明血清白細(xì)胞介素6與腫瘤壞死因子α可作為心力衰竭嚴(yán)重程度的評(píng)定指標(biāo)。本研究還發(fā)現(xiàn)血清白細(xì)胞介素6與腫瘤壞死因子α水平水平與LVEF呈負(fù)相關(guān)，提示心力衰竭時(shí)血清白細(xì)胞介素6與腫瘤壞死因子α水平共同作用，促進(jìn)慢性充血性心力衰竭的進(jìn)展。研究顯示常規(guī)治療組及比索洛爾組治療后心率、平均動(dòng)脈壓、血清IL6、TNFα水平較治療前均有明顯下降，左室射血分?jǐn)?shù)明顯增加，心功能明顯改善；其水平隨心衰加重而升高，隨著病情的好轉(zhuǎn)而逐漸降低，提示血清IL6和TNFα水平變化可用于指導(dǎo)心衰患者的治療。

近年來已證實(shí)β受體阻滯劑已同ACEI類藥物一樣, 成為治療慢性心力衰竭的基石之一。眾多研究表明［1］，在長(zhǎng)期治療慢性心衰中，β受體阻滯劑能夠通過降低交感神經(jīng)活性、減少心室重構(gòu)等多環(huán)節(jié)來阻止心衰癥狀進(jìn)一步惡化，持續(xù)穩(wěn)定地改善心功能，無論是在逆轉(zhuǎn)心室重構(gòu)或降低死亡的危險(xiǎn)性方面β1受體阻滯劑均有可靠療效。比索洛爾作為第2代β受體阻滯劑，具有高度選擇性的β1受體阻滯作用，一方面通過阻滯兒茶酚胺與心肌細(xì)胞膜上的β受體的結(jié)合，對(duì)抗后者對(duì)心臟的毒性作用，同時(shí)還可以間接抑制血管緊張素腎素系統(tǒng)，進(jìn)一步起到保護(hù)心臟的作用。比索洛爾具有較強(qiáng)的上調(diào)β受體、抗氧化、抗缺氧作用，能減少細(xì)胞調(diào)亡，抑制血管平滑肌增殖和細(xì)胞因子，改善左室射血分?jǐn)?shù)，降低左室重量，逆轉(zhuǎn)左室重構(gòu)的作用。王曉莉等［2］研究顯示比索洛爾較美托洛爾在糾正患者血管舒張因子及收縮因子的失衡狀態(tài)，改善內(nèi)皮功能方面，及有效逆轉(zhuǎn)左室肥厚方面效果更為明顯。張任權(quán)等［1］也證實(shí)比索洛爾在慢性心力衰竭患者的治療中有理想的效果。本組研究顯示，慢性充血性心力衰竭患者的常規(guī)治療組和比索洛爾組治療后臨床癥狀和心功能均有顯著改善, 但比索洛爾組的IL6、TNFα水平較常規(guī)治療組下降明顯，LVEF明顯提高，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

參考文獻(xiàn)