導(dǎo)語(yǔ)：如何才能寫(xiě)好一篇微生物的培養(yǎng)步驟，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

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關(guān)鍵詞 土壤微生物 分解作用 涂布平板法

中圖分類(lèi)號(hào) G633.91 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B

“土壤微生物的分解作用”是人教版高中生物必修內(nèi)容中的探究實(shí)驗(yàn)之一，旨在讓學(xué)生通過(guò)宏觀(guān)的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象了解微觀(guān)的實(shí)驗(yàn)原理，明白微生物在生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)循環(huán)中的重要作用。然而由于實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象較不明顯，開(kāi)展該實(shí)驗(yàn)的學(xué)校寥寥無(wú)幾。

1 教材分析與實(shí)驗(yàn)條件選擇

在人教版“土壤微生物分解作用”的實(shí)驗(yàn)中，教材提出了2個(gè)參考案例。第一個(gè)案例，使用落葉為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，設(shè)置滅菌土壤為對(duì)照組，對(duì)比得出土壤微生物具有分解作用;第二個(gè)案例：使用淀粉為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過(guò)斐林試劑和碘液的顯色反應(yīng)，得出土壤微生物具有分解作用。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，第二個(gè)案例實(shí)驗(yàn)時(shí)間適中，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象較為明顯;同時(shí)復(fù)習(xí)了斐林試劑的使用方法，較適合開(kāi)展實(shí)驗(yàn)教學(xué)。因此，筆者選用第二個(gè)案例（土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用），對(duì)“土壤微生物的分解作用”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

溫度、淀粉糊濃度和反應(yīng)時(shí)間是影響土壤微生物分解作用的主要因素。筆者選取了15°C、20°C、25°C、30°C和室溫等5個(gè)溫度，2%、4%、6%和8%等4個(gè)淀粉糊濃度以及5 d、7 d和9 d等3個(gè)反應(yīng)時(shí)間，探究它們對(duì)土壤微生物分解作用的影響。

特定土壤的pH是確定值，而pH的變化會(huì)影響土壤微生物的分解作用。在確定適宜的溫度、淀粉糊濃度和反應(yīng)時(shí)間之后，以pH為變量，繼續(xù)探究pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響。

為了使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具科學(xué)性，需要設(shè)置對(duì)照組。筆者在教材的基礎(chǔ)上增加了滅菌土壤浸出液作為第二對(duì)照組，排除了土壤浸出液中其他非生物因素的干擾，增加了實(shí)驗(yàn)的嚴(yán)謹(jǐn)性。

在教學(xué)研究中，有學(xué)者使用不同種類(lèi)的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以確定哪種土壤微生物的分解能力最強(qiáng)。土壤微生物分解能力的強(qiáng)弱，主要受微生物種類(lèi)和數(shù)量的影響。因此，為了揭示土壤微生物數(shù)量對(duì)分解作用的影響，筆者根據(jù)《微生物實(shí)驗(yàn)》的相關(guān)內(nèi)容，采用涂布平板法，對(duì)實(shí)驗(yàn)的土壤微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，初步確定土壤微生物的分解能力。

綜上所述，“土壤微生物的分解作用”實(shí)驗(yàn)可劃分為三個(gè)小實(shí)驗(yàn)，分別是：（1） 土壤微生物對(duì)淀粉分解作用實(shí)驗(yàn);（2） pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響實(shí)驗(yàn);（3） 土壤微生物計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)。其中第一個(gè)小實(shí)驗(yàn)為主實(shí)驗(yàn)，第二、第三個(gè)小實(shí)驗(yàn)為擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.1 實(shí)驗(yàn)器材

實(shí)驗(yàn)器具：小燒杯、試管、三角瓶、玻璃棒、pH計(jì)、恒溫光照培養(yǎng)箱、牛皮紙、紗布。

材料和試劑：土壤、淀粉、斐林試劑、碘液、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、NaCl、稀HCl、稀NaOH、無(wú)菌水。

2.2 實(shí)驗(yàn)步驟

2.2.1 土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用

（1） 土壤浸出液的制備：按照課本介紹的方法制備。

（2） 淀粉糊的制作：分別稱(chēng)取10 g、20 g、30 g和40 g淀粉，溶于500 mL開(kāi)水中，充分?jǐn)嚢瑁瞥珊隣?，得到濃度分別為2%、4%、6%和8%的淀粉糊。

（3） 滅菌：將蒸餾水、部分土壤浸出液、各濃度淀粉糊、實(shí)驗(yàn)所用的燒杯和試管等器皿放入滅菌鍋中滅菌。

（4） 加樣培養(yǎng)：按照課本介紹的方法，在無(wú)菌環(huán)境中操作加樣，并將實(shí)驗(yàn)溶液分別放入15°C、20°C、25°C和30°C的培養(yǎng)箱及室溫中培養(yǎng)

（5） 顯色反應(yīng)：按照課本介紹的方法取出實(shí)驗(yàn)溶液進(jìn)行顯色反應(yīng)。

2.2.2 pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響

（1） 土壤浸出液pH的測(cè)定和調(diào)節(jié)：使用北京哈納HI8424NEW型pH計(jì)測(cè)出土壤浸出液的原始pH值為8.12;使用稀HCl和稀NaOH溶液，將土壤浸出液的pH上下各調(diào)節(jié)1.5和3.0個(gè)pH單位，選擇5.12、6.62、8.12、9.62和11.12等5個(gè)pH作為實(shí)驗(yàn)pH。

（2） 制作淀粉糊、滅菌、加樣、培養(yǎng)與顯色反應(yīng)操作同2.2.1。

2.2.3 土壤微生物的計(jì)數(shù)（涂布平板法）

計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)包括配制細(xì)菌培養(yǎng)基、倒平板、制備土壤稀釋液、涂布和培養(yǎng)等五個(gè)步驟，具體操作同《微生物實(shí)驗(yàn)》教材。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用與溫度、淀粉糊濃度和分解作用的時(shí)間有關(guān)。30°C下，土壤微生物的分解作用最強(qiáng)烈，室溫（25°C～30°C）下次之，25°C、20°C和15°C下的分解作用依次減弱。土壤微生物對(duì)4%淀粉糊的分解作用最強(qiáng)，其次是2%、6%和8%。隨著時(shí)間的推移，土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用逐漸增強(qiáng);培養(yǎng)的第5 d，已有顯色現(xiàn)象;第7 d顯色現(xiàn)象顯著;第9 d和第7 d的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象相差無(wú)幾。從顯色劑的顯色效果看，加入斐林試劑的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象更直觀(guān)明顯。淀粉被分解后，產(chǎn)生的葡萄糖與斐林試劑作用，生成很明顯的磚紅色沉淀;加入碘液后，實(shí)驗(yàn)溶液依舊變藍(lán)，只是顏色較對(duì)照組淺。這說(shuō)明，一方面斐林試劑的顯色效果較顯著;另一方面，短時(shí)間里淀粉不能被分解殆盡。

3.2 pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響

pH為8.12的原始土壤浸出液中，微生物對(duì)淀粉糊的分解作用結(jié)果最明顯，出現(xiàn)最多的磚紅色沉淀;弱酸（pH6.62）和弱堿（pH9.62）性的土壤浸出液中，微生物對(duì)淀粉糊的分解作用結(jié)果出現(xiàn)較多的磚紅色沉淀，但均少于原始pH的土壤浸出液;強(qiáng)堿性（pH11.12）的土壤浸出液中，微生物對(duì)淀粉糊的分解作用結(jié)果產(chǎn)生較少的磚紅色沉淀;強(qiáng)酸性（pH5.12）的土壤浸出液中，微生物對(duì)淀粉糊的分解作用結(jié)果產(chǎn)生最少的磚紅色沉淀。碘液的顯色反應(yīng)結(jié)果并沒(méi)有明顯的差別，說(shuō)明只有部分淀粉被分解。

3.3 土壤微生物的計(jì)數(shù)

涂布平板結(jié)果顯示，土壤浸出液中微生物的含量約為668 889個(gè)/mL;根據(jù)之前的實(shí)驗(yàn)步驟得知，實(shí)驗(yàn)土壤浸出液濃度為0.1 g/mL，因此土壤中微生物的含量約為6 688 890個(gè)/g（表1）。有教學(xué)條件的學(xué)?？稍O(shè)計(jì)該實(shí)驗(yàn)，分析不同土壤微生物具有不同分解作用的原因，讓學(xué)生更深入地理解和掌握知識(shí)，培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)素養(yǎng)和探究精神。

4 討論

“土壤微生物的分解作用”實(shí)驗(yàn)中，材料易得，操作簡(jiǎn)單，可以在教學(xué)活動(dòng)中順利實(shí)施。許多學(xué)校由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)，影響教學(xué)安排，而很少開(kāi)展這一探究活動(dòng)。但筆者發(fā)現(xiàn)，該實(shí)驗(yàn)不但可以在短時(shí)間內(nèi)完成，而且能開(kāi)發(fā)出與之相關(guān)的教學(xué)實(shí)驗(yàn)，如pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響、土壤微生物計(jì)數(shù)等，這對(duì)學(xué)生創(chuàng)新思維的培養(yǎng)大有裨益。如果學(xué)校教學(xué)條件有限，無(wú)法順利開(kāi)展該實(shí)驗(yàn)，可由教師演示或者播放實(shí)驗(yàn)錄像，以取得一定的教學(xué)效果。

在本實(shí)驗(yàn)中，筆者并未以土壤類(lèi)型為實(shí)驗(yàn)變量，探究不同土壤中微生物分解作用和微生物數(shù)量的異同。但學(xué)校在安排教學(xué)活動(dòng)時(shí)，可以將學(xué)生分組，不同小組以不同的土壤為研究對(duì)象開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。這樣既節(jié)約了時(shí)間，又可以達(dá)到很好的實(shí)驗(yàn)效果。

本研究確定的適宜實(shí)驗(yàn)條件，可以為廣大師生提供參考。各學(xué)校也可以借鑒筆者的思路，開(kāi)展類(lèi)似實(shí)驗(yàn)，并安排不同學(xué)生完成不同條件下的實(shí)驗(yàn)，最后匯總結(jié)果，探討比較。這不僅能幫助學(xué)生培養(yǎng)團(tuán)隊(duì)合作精神和創(chuàng)新實(shí)踐能力，也能激發(fā)學(xué)生對(duì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的熱情，進(jìn)一步培養(yǎng)學(xué)生對(duì)生物學(xué)科的興趣。

參考文獻(xiàn)：

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關(guān)鍵詞:微生物檢驗(yàn);質(zhì)量控制;培養(yǎng)基

引言

當(dāng)前，隨著食品安全問(wèn)題關(guān)注度的不斷提高，很多食品制造企業(yè)日益重視檢驗(yàn)食品微生物，以此來(lái)對(duì)食品生產(chǎn)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，盡早檢測(cè)出食品所受微生物的污染狀況，這樣企業(yè)就可采取有效措施最大限度降低微生物的危害，盡可能地保障食品的安全性。在有關(guān)食品衛(wèi)生的微生物檢驗(yàn)方法及檢驗(yàn)步驟等方面，國(guó)家相關(guān)部門(mén)雖然已作了很詳細(xì)的說(shuō)明，但在實(shí)際操作中還存在很多對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)偏差的復(fù)雜因素，由于對(duì)這些因素的不夠重視，致使檢驗(yàn)結(jié)果不夠準(zhǔn)確，從而無(wú)法對(duì)食品的衛(wèi)生狀況進(jìn)行正確評(píng)價(jià)，也就未能對(duì)產(chǎn)品生產(chǎn)進(jìn)行有效監(jiān)督和指導(dǎo)?；诖?，對(duì)食品微生物檢驗(yàn)中的質(zhì)量控制問(wèn)題，進(jìn)行一些分析和探討。

1做好培養(yǎng)基的制備

1.1配制培養(yǎng)基

要嚴(yán)格依據(jù)處方來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)基配制，且應(yīng)做好仔細(xì)記錄。在培養(yǎng)基處方中，其成分多數(shù)為生物制品，不同廠(chǎng)家所生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量會(huì)存在一些差異，故應(yīng)做好配方中不同原理成分的質(zhì)量控制。此外，所用到的各成分的所有特征應(yīng)及時(shí)做好記錄，對(duì)于自制培養(yǎng)基各成分，應(yīng)按順序分別進(jìn)行添加，在分裝滅菌之前應(yīng)確保各成分完全均勻。

1.2應(yīng)用干粉培養(yǎng)基

當(dāng)前已有一系列專(zhuān)業(yè)化干燥培養(yǎng)基用于微生物實(shí)驗(yàn)行業(yè)中，這些干燥培養(yǎng)基不僅使用高效，而且使用便利，故被廣泛應(yīng)用于微生物實(shí)驗(yàn)行業(yè)中。通常那些專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)基生產(chǎn)廠(chǎng)家都有一套規(guī)范的生產(chǎn)工藝，可嚴(yán)格控制好原材料及產(chǎn)品，以此來(lái)確保產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。微生物檢驗(yàn)所用的那些藥品、干燥培養(yǎng)基或試劑，一定要滿(mǎn)足以下條件:①專(zhuān)業(yè)廠(chǎng)家所生產(chǎn)的質(zhì)量符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品。②具有生產(chǎn)商所提供的編號(hào)、名稱(chēng)、批號(hào)及各組成成分。③具有生產(chǎn)商所提供的培養(yǎng)基使用前的pH值、有效期及儲(chǔ)存資料。這樣就可讓使用者及時(shí)記錄產(chǎn)品和比較產(chǎn)品。

2做好培養(yǎng)基的水化

2.1選擇好培養(yǎng)基水化的容器

為避免離子進(jìn)入培養(yǎng)基，不得把鐵鍋或銅鍋等容器用于培養(yǎng)基的水化中，以此來(lái)確保微生物的正常生長(zhǎng)。此外，為不改變培養(yǎng)基的pH值，在加熱過(guò)程中盡可能地避免新玻璃瓶釋放出堿性物質(zhì)。為避免加熱溶解過(guò)程中溢出培養(yǎng)基，所用容器大小應(yīng)不小于兩倍的復(fù)水后培養(yǎng)基總體積。

2.2選擇好培養(yǎng)基水化的用水

所用的水，一定不得含有可影響微生物生長(zhǎng)的物質(zhì)，最好是蒸餾水，特別不得用那些受到污染的去離子水，因?yàn)檫@些水即使通過(guò)過(guò)濾也還是含有一些抑制微生物生長(zhǎng)的東西。由于自來(lái)水含有諸如氯等抗菌物質(zhì)，故一般不用這類(lèi)水。在水化培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)按步驟不斷把適量的水加入，首先在容器中加入三分之一的水量并予以一定的震蕩，然后再把剩下的三分之二水量加滿(mǎn)，并把容器壁上的那些培養(yǎng)基粉順勢(shì)沖下。

2.3稱(chēng)量培養(yǎng)基

為預(yù)防交叉污染而對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)影響，在稱(chēng)量過(guò)程中一定要使用專(zhuān)用的角匙，并確保在這一過(guò)程中盡可能地不吸入諸如選擇性培養(yǎng)基等粉末，盡可能地避免在濕度高的房間稱(chēng)取培養(yǎng)基，這樣可有效防止因培養(yǎng)基吸潮二酸化培養(yǎng)基等結(jié)果的產(chǎn)生。對(duì)于干粉培養(yǎng)基，一定要基于生產(chǎn)商所提供的相關(guān)說(shuō)明來(lái)完成配制。

3做好培養(yǎng)基的物理學(xué)和生物學(xué)的質(zhì)量控制

3.1關(guān)于培養(yǎng)基的物理學(xué)質(zhì)控

商品化的干燥培養(yǎng)基，為能獲得長(zhǎng)期保存培養(yǎng)基的光敏感性成分的活性劑干燥性，其包裝一定要充分密封，所制備的培養(yǎng)基平板一定要具備相應(yīng)的顏色，例如，血平板通常就制作為血紅色。正常情況下，所制備的培養(yǎng)基一定是沒(méi)有沉淀、沒(méi)有渾濁。不管是在實(shí)施培養(yǎng)基的溶解、還是凝固，都必須做好其適宜溫度的檢測(cè)，例如，就傾注平板的培養(yǎng)基而言，為便于低溫傾注平板，其凝固溫度一般應(yīng)低于40℃，這樣可最大限度避免樣品中的微生物受到熱損傷。

3.2關(guān)于培養(yǎng)基的生物學(xué)質(zhì)控

在完成培養(yǎng)基滅菌之后，為檢驗(yàn)和獲得所需滅菌的效果，一定要進(jìn)行無(wú)菌實(shí)驗(yàn)的操作，具體可選用培養(yǎng)基目標(biāo)菌生長(zhǎng)率和非目標(biāo)菌的選擇因子進(jìn)行測(cè)試。此外，對(duì)于菌落大小以及相應(yīng)的生理生化特性也必須進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)于不同批次的產(chǎn)品，都要使用與其相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行檢定，而且對(duì)于每1次的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，都要加以詳細(xì)地記錄。

4結(jié)語(yǔ)

做好微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的重要前提就是要控制好培養(yǎng)基的質(zhì)量，這直接關(guān)系到整個(gè)檢驗(yàn)工作的可靠性及準(zhǔn)確性，這個(gè)環(huán)節(jié)在整個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作中處于極為重要的地位。因此，在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，就食品微生物檢驗(yàn)中培養(yǎng)基的質(zhì)量控制這個(gè)問(wèn)題進(jìn)行深入分析和探討，這對(duì)于培養(yǎng)基質(zhì)量控制水平的不斷提高并不斷為微生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)提供質(zhì)量可靠的培養(yǎng)基，均具有極為重要的意義。

參考文獻(xiàn):

［1］許陽(yáng)．論食品微生物檢驗(yàn)中培養(yǎng)基的質(zhì)量控制［J］．疾病監(jiān)測(cè)與控制，2015(5)．

［2］杜偉．微生物檢測(cè)用培養(yǎng)基、試劑質(zhì)量控制方法研究［J］．中國(guó)微生物雜志，2013(5)．

篇3

臨床微生物學(xué)是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中重要亞專(zhuān)業(yè)之一,對(duì)感染性疾病進(jìn)行診斷,密切結(jié)合臨床提出及時(shí)有效的治療方案。目前,快速診斷是微生物檢驗(yàn)的發(fā)展方向大綱,雖然經(jīng)多年的研究和改進(jìn),檢驗(yàn)的微量化和自動(dòng)化已普及,自動(dòng)鑒定檢測(cè)項(xiàng)目已基本涵蓋臨床常見(jiàn)病原菌的檢測(cè)需要,但仍不能滿(mǎn)足臨床要求;具體要在改進(jìn)細(xì)菌檢驗(yàn)的工作模式中解決,需重視原始標(biāo)本的涂片、染色、藥敏等基礎(chǔ)檢查,因此,為適應(yīng)醫(yī)院的發(fā)展,提高微生物實(shí)驗(yàn)課學(xué)生的基礎(chǔ)技能很重要。

1 重視基礎(chǔ)技能實(shí)驗(yàn)課

微生物學(xué)是一門(mén)臨床聯(lián)系密切、實(shí)踐性強(qiáng)的學(xué)科,微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)為深入學(xué)習(xí)微生物學(xué)及相關(guān)學(xué)科奠定了基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是教學(xué)活動(dòng)中培養(yǎng)學(xué)生觀(guān)察、實(shí)驗(yàn)操作、分析問(wèn)題、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)等能力的重要環(huán)節(jié),是提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能的重要學(xué)習(xí)過(guò)程[1]。實(shí)驗(yàn)教師對(duì)于實(shí)驗(yàn)教學(xué)的意義和重要性都有很深的體會(huì),搞好實(shí)驗(yàn)教學(xué)不是件容易的事,微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課的教學(xué),目的是讓學(xué)生加強(qiáng)對(duì)課堂教學(xué)理論內(nèi)容的理解與體會(huì),掌握微生物學(xué)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)操作技能,運(yùn)用所學(xué)知識(shí)分析問(wèn)題、解決問(wèn)題,為今后從事微生物學(xué)的相關(guān)工作和科研打下良好的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)教學(xué)除了能使學(xué)生獲得感性知識(shí)和驗(yàn)證相關(guān)規(guī)律外,還能使學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技能得到提高,從而激發(fā)學(xué)生的興趣,沒(méi)有微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課也就沒(méi)有良好的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的教學(xué)。

2 提高學(xué)生的動(dòng)手操作能力M改變以教師示教為主的教學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)課教學(xué)一般由帶教老師準(zhǔn)備材料,并提供實(shí)驗(yàn)步驟,學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)認(rèn)識(shí)不深。因此,必須為學(xué)生提供充分動(dòng)手、思考和創(chuàng)新的機(jī)會(huì),變“被動(dòng)式”實(shí)驗(yàn)為“主動(dòng)式”實(shí)驗(yàn),將從傳統(tǒng)的“以教師為主”的模式轉(zhuǎn)變?yōu)椤皩W(xué)生為主”的模式,充分發(fā)揮學(xué)生的主動(dòng)性和積極性 ;因此,帶教老師要注意學(xué)生實(shí)踐能力的培養(yǎng),引導(dǎo)學(xué)生積極參與,盡量保證每位學(xué)生都有動(dòng)手操作的機(jī)會(huì)。同時(shí),實(shí)驗(yàn)教學(xué)里教師先示范操作的過(guò)程中,可將整個(gè)操作分解成若干個(gè)小單元,并明確告訴學(xué)生每個(gè)操作的“關(guān)鍵點(diǎn)”所在,強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)要觀(guān)察的重點(diǎn),并且采用隨時(shí)抽查學(xué)生進(jìn)行考核,這部分作為平時(shí)成績(jī)的依據(jù)。

3 結(jié)合實(shí)際,充實(shí)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容,提高教學(xué)質(zhì)量

微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)注重基礎(chǔ)知識(shí)的介紹,使學(xué)生牢固掌握微生物學(xué)研究的基本方法 與實(shí)驗(yàn)技術(shù),同時(shí)引導(dǎo)學(xué)生從簡(jiǎn)單的驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)向綜合性實(shí)驗(yàn)發(fā)展,提高學(xué)生觀(guān)察、思考、分析和解決問(wèn)題的能力。為進(jìn)一步加強(qiáng)微生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)的訓(xùn)練,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況,調(diào)整和增加實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,如飲用水的細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)、常見(jiàn)化膿性細(xì)菌的檢驗(yàn)等一些實(shí)驗(yàn)。同時(shí),還應(yīng)注意跟蹤學(xué)科前沿發(fā)展動(dòng)態(tài),結(jié)合實(shí)際,及時(shí)、準(zhǔn)確地吸收最新的知識(shí)增長(zhǎng)點(diǎn),安排相關(guān)的實(shí)驗(yàn),如引起非典流行的一種病毒,而這種新病毒以前沒(méi)有在人體或動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)過(guò),是引起呼吸道感染的一種病原體;它主要侵犯呼吸系統(tǒng),標(biāo)本可經(jīng)通過(guò)用細(xì)胞培養(yǎng)分離、熒光定量PCR方法檢測(cè)進(jìn)行鑒別。介紹這些內(nèi)容,容易引起學(xué)生學(xué)習(xí)相關(guān)知識(shí)的興趣,增強(qiáng)學(xué)生對(duì)這些疾病的了解,又能夠激發(fā)他們解決醫(yī)學(xué)難題的迫切愿望。

4 提高學(xué)生分析問(wèn)題的綜合能力

很多實(shí)驗(yàn)的操作過(guò)程簡(jiǎn)單,但若不認(rèn)真準(zhǔn)備,容易出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果,因此,可組織學(xué)生討論,分析出現(xiàn)問(wèn)題的原因,并找出解決問(wèn)題的方法;另外,可給出一份模擬標(biāo)本,讓學(xué)生自己依據(jù)已學(xué)理論知識(shí),設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方案,從準(zhǔn)備培養(yǎng)基開(kāi)始,進(jìn)行各項(xiàng)鑒定實(shí)驗(yàn)。要求學(xué)生記錄好每個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟及結(jié)果,最后寫(xiě)出綜合性實(shí)驗(yàn)報(bào)告。學(xué)生收到標(biāo)本后,按“培養(yǎng)基準(zhǔn)備細(xì)菌涂片、染色、鏡檢初步鑒定結(jié)果分離純細(xì)菌鑒定細(xì)菌(生化鑒定、血清學(xué)鑒定、藥敏試驗(yàn))報(bào)告結(jié)果”等臨床常規(guī)步驟進(jìn)行獨(dú)立操作,完成各個(gè)項(xiàng)目。老師應(yīng)在學(xué)生操作過(guò)程中要對(duì)每個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行檢查,并隨時(shí)提問(wèn)題。學(xué)生在操作中若遇問(wèn)題可討論、查詢(xún)相關(guān)資料及文獻(xiàn)或與老師交流等,此時(shí)老師只能引導(dǎo),不作解答。整個(gè)實(shí)驗(yàn)基本上在課內(nèi)完成,但時(shí)間較有彈性。因?yàn)橛袝r(shí)需要課前作些準(zhǔn)備、課后看結(jié)果等。由于實(shí)驗(yàn)從準(zhǔn)備到結(jié)束都由學(xué)生獨(dú)立完成,在操作過(guò)程中遇到的所有問(wèn)題,均需自己設(shè)法解決,有時(shí)沒(méi)有得到滿(mǎn)意的結(jié)果,但加深了對(duì)實(shí)驗(yàn)理解和印象,有利于培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立工作的能力,增強(qiáng)學(xué)生的責(zé)任感,調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和主動(dòng)性,培養(yǎng)學(xué)生分析和解決問(wèn)題的能力,同時(shí)提高學(xué)生的綜合素質(zhì)[2-3]。

參考文獻(xiàn)

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[2] 卜寧,陶思源.實(shí)施“三高”教學(xué),創(chuàng)建“微生物實(shí)驗(yàn)”課程新體系[J].微生物通報(bào),2006,33 (1):169-170

篇4

【關(guān)鍵詞】臨床醫(yī)學(xué)；微生物檢驗(yàn)；質(zhì)量控制；措施

【中圖分類(lèi)號(hào)】R446.1【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2012）11-0024-02

隨著分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展，微生物檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)診斷中的作用越來(lái)越大。在臨床醫(yī)學(xué)中，高質(zhì)量的微生物檢測(cè)結(jié)果能夠幫助臨床醫(yī)生對(duì)病人做出更準(zhǔn)確的診斷，同時(shí)給出合理的治療方案?；诖耍R床微生物檢驗(yàn)是一門(mén)實(shí)踐性較強(qiáng)的學(xué)科，其對(duì)檢驗(yàn)人員的理論知識(shí)和臨床經(jīng)驗(yàn)有較高的要求，不斷提高臨床微生物檢驗(yàn)技術(shù)的準(zhǔn)確性和靈敏度，提高檢驗(yàn)質(zhì)量，是臨床醫(yī)學(xué)的要求。

1微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制概述

科技進(jìn)步為臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展鋪平了道路，醫(yī)學(xué)臨床檢驗(yàn)擁有了更多更為精密的儀器，進(jìn)一步提升了微生物檢測(cè)結(jié)果的可信性。但是，臨床微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制仍然是檢驗(yàn)工作的重要組成部分。

微生物的臨床檢驗(yàn)涉及到多門(mén)學(xué)科，如：分析化學(xué)、生物學(xué)、生理學(xué)、統(tǒng)計(jì)科學(xué)、病理學(xué)等等?？偟膩?lái)說(shuō)，微生物檢驗(yàn)為臨床醫(yī)學(xué)提供了重要的醫(yī)學(xué)質(zhì)變，是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)分值。目前的微生物檢驗(yàn)標(biāo)本多指患者的血液樣品、分泌物樣本、體液樣本和各類(lèi)排泄物等，檢驗(yàn)人員根據(jù)檢驗(yàn)樣本的性質(zhì)區(qū)別和需要的指標(biāo)不同，運(yùn)用不同的儀器對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)對(duì)檢驗(yàn)各個(gè)環(huán)節(jié)的操作進(jìn)行質(zhì)量控制，確保檢驗(yàn)結(jié)果的可信性。

臨床檢驗(yàn)質(zhì)量管理主要包括兩個(gè)方面的工作。首先，做好分析過(guò)程的質(zhì)量控制管理；其次，做好分析前后的質(zhì)量管理工作。質(zhì)量管理工作的一般程序如下：第一，微生物檢驗(yàn)人員與臨床醫(yī)生做好溝通工作，明確影響樣品檢驗(yàn)的多方面因素，保證檢驗(yàn)結(jié)果的可信性；第二，采樣程序規(guī)范化，盡量減少樣品采集過(guò)程中的污染；第三，微生物檢驗(yàn)結(jié)束后，出具檢測(cè)報(bào)告。以上步驟共同組成了微生物檢測(cè)質(zhì)量控制的全過(guò)程，缺一不可，任何步驟失誤都可能致使檢驗(yàn)工作可信性降低。

2微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制與臨床醫(yī)學(xué)的關(guān)系

檢驗(yàn)工作為臨床醫(yī)學(xué)服務(wù)，臨床醫(yī)學(xué)以檢驗(yàn)工作為基礎(chǔ)，檢驗(yàn)技術(shù)的不斷進(jìn)步推動(dòng)臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展，而臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展又反過(guò)來(lái)要求檢驗(yàn)工作的日益精細(xì)化，微生物質(zhì)量檢驗(yàn)的結(jié)果關(guān)系到臨床醫(yī)生的對(duì)患者的癥狀進(jìn)行診斷和健康狀況評(píng)估，因此，此二者密不可分，相輔相成。

首先，檢驗(yàn)人員應(yīng)當(dāng)與臨床醫(yī)生加強(qiáng)合作與交流。當(dāng)檢驗(yàn)人員認(rèn)為樣本結(jié)果異常時(shí)，應(yīng)當(dāng)與臨床醫(yī)生結(jié)合病人的實(shí)際情況討論檢驗(yàn)結(jié)果，以確定檢驗(yàn)結(jié)果是否可信，從而對(duì)患者進(jìn)行診斷，防止對(duì)病人出現(xiàn)誤診情況，排除其他因素的干擾。

其次，檢驗(yàn)人員與臨床醫(yī)生合作制度化。隨著檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展，檢驗(yàn)人員通過(guò)測(cè)定多項(xiàng)指標(biāo)，從不同側(cè)面反映患者的身體狀況，越來(lái)越多新的指標(biāo)開(kāi)始發(fā)揮作用。當(dāng)檢驗(yàn)部門(mén)需要更新檢驗(yàn)指標(biāo)時(shí)，檢驗(yàn)部門(mén)應(yīng)當(dāng)就新添檢驗(yàn)項(xiàng)目的標(biāo)本采集特征、特異性等詳細(xì)信息出具報(bào)告，向臨床醫(yī)生解釋如何正確理解檢驗(yàn)結(jié)果，并規(guī)范此流程，使其制度化。醫(yī)生應(yīng)當(dāng)按照流程填寫(xiě)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)單，樣品采集量和患者基本信息，確保診斷結(jié)果的正確性。

3微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制措施

在了解了微生物質(zhì)量控制的概念及其與臨床醫(yī)學(xué)的關(guān)系之后，我們?cè)鯓硬拍茏龊梦⑸餀z測(cè)的質(zhì)量控制工作？提高微生物檢驗(yàn)的規(guī)范性？筆者結(jié)合自己的實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，給出了微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制的幾點(diǎn)措施。

3.1實(shí)驗(yàn)室內(nèi)控制

3.1.1樣品采集規(guī)范化： 樣品采集標(biāo)準(zhǔn)化是臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制的先決條件。影響樣品采集過(guò)程的因素有很多，例如樣品的采集方法是否規(guī)范，樣品的保存是否規(guī)范等等，任何步驟的紕漏都可能造成樣品質(zhì)量檢驗(yàn)的不合格。目前，臨床微生物檢驗(yàn)的樣品采集方式有兩種，一種是由患者自主采集，送往醫(yī)院檢查，例如尿液等，而有些樣本的采集技巧特殊，病人往往需要在醫(yī)生的協(xié)助下進(jìn)行采集，例如進(jìn)行痰液采集時(shí)，需要采集咽喉和口腔部位的痰液，這部分痰液的微生物較多，一般能夠滿(mǎn)足檢測(cè)要求，若是誤取為下呼吸道的痰液，由于此部位的微生物較少，導(dǎo)致微生物檢測(cè)出現(xiàn)誤差。樣本的保存同樣也會(huì)影響微生物檢驗(yàn)，不規(guī)范的樣品保存和運(yùn)送方法可能會(huì)造成樣品的損失和損壞。因此，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)控制微生物檢測(cè)質(zhì)量首先要從樣本質(zhì)量抓起，使得樣本滿(mǎn)足微生物檢驗(yàn)的基本要求。

3.1.2提高檢驗(yàn)人員專(zhuān)業(yè)知識(shí)： 檢驗(yàn)人員的專(zhuān)業(yè)知識(shí)時(shí)保證微生物檢驗(yàn)質(zhì)量的基礎(chǔ)。檢驗(yàn)人員首先應(yīng)當(dāng)具備一定的理論知識(shí)作為基礎(chǔ)，同時(shí)應(yīng)當(dāng)擁有豐富的工作經(jīng)驗(yàn)和出色的判斷能力。要做到以上三點(diǎn)，首先，醫(yī)院應(yīng)當(dāng)定期組織檢驗(yàn)人員進(jìn)行理論學(xué)習(xí)，同時(shí)鼓勵(lì)檢驗(yàn)人員外出實(shí)習(xí)培訓(xùn)，增加實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，另外，醫(yī)院還可以組織工作技能大賽、定期考核等，促使檢驗(yàn)人員不斷提升自己的專(zhuān)業(yè)知識(shí)，更好地為臨床醫(yī)學(xué)服務(wù)。

3.1.2加強(qiáng)分析過(guò)程質(zhì)量控制： 分析過(guò)程質(zhì)量控制是保證微生物檢驗(yàn)質(zhì)量的關(guān)鍵。在微生物檢驗(yàn)過(guò)程中，各個(gè)分析環(huán)節(jié)都應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格遵守操作要求。例如，培養(yǎng)基配置過(guò)程需謹(jǐn)慎，首先應(yīng)當(dāng)標(biāo)明日期和編號(hào)，避免造成樣品混淆，接種應(yīng)當(dāng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行操作，控制好培養(yǎng)基的pH值，并隨時(shí)對(duì)培養(yǎng)基的狀態(tài)進(jìn)行觀(guān)察記錄等。因此，無(wú)菌環(huán)境、涂片、接種等環(huán)節(jié)都應(yīng)當(dāng)進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，保證樣品檢驗(yàn)質(zhì)量。

3.2實(shí)驗(yàn)室間控制： 除了做好實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的控制工作，實(shí)驗(yàn)室間控制也是微生物質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)。在較好的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制工作的基礎(chǔ)上，做好實(shí)驗(yàn)室間控制為質(zhì)量控制增加了一層保障。有關(guān)的檢驗(yàn)質(zhì)量控制部門(mén)應(yīng)當(dāng)定期對(duì)各個(gè)醫(yī)院檢驗(yàn)部門(mén)的檢測(cè)水平進(jìn)行考核，考核項(xiàng)目一般包括：實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌條件，是否按時(shí)進(jìn)行消毒和清潔，實(shí)驗(yàn)室各類(lèi)檢測(cè)儀器的性能，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員的專(zhuān)業(yè)知識(shí)水平等等。相關(guān)部門(mén)做好評(píng)估報(bào)告，督促各個(gè)實(shí)驗(yàn)室做好質(zhì)量控制工作。

3.3加強(qiáng)管理工作，完善制度建設(shè)： 做好質(zhì)量控制工作需要相應(yīng)的規(guī)章制度作為保障。醫(yī)院微生物檢驗(yàn)部門(mén)應(yīng)當(dāng)制定嚴(yán)格的工作制度，并要求檢驗(yàn)人員嚴(yán)格遵守。首先，應(yīng)當(dāng)明確檢驗(yàn)人員的職責(zé)分配，要求檢驗(yàn)人員熟練掌握檢驗(yàn)技術(shù)，同時(shí)，認(rèn)真做好工作記錄，保管原始數(shù)據(jù)；最后，加強(qiáng)對(duì)儀器和藥品的管理，保證實(shí)驗(yàn)室正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

4總結(jié)

綜上所述，微生物檢驗(yàn)工作質(zhì)量關(guān)系到臨床診斷的正確性，要做好微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制工作，必須從規(guī)章制度、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外控制三方面入手。

參考文獻(xiàn)

［1］王偉民.淺談護(hù)理工作對(duì)檢驗(yàn)分析前質(zhì)量的影響及對(duì)策［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，20　07　，25?。?　）：36.

篇5

[論文摘要]：針對(duì)食品微生物學(xué)課程教學(xué)，文章從教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)手段、教學(xué)方法和成績(jī)考核標(biāo)準(zhǔn)等幾個(gè)方面進(jìn)行了探討，為食品微生物教學(xué)改革提供了新的思路。

食品微生物學(xué)是一門(mén)研究與食品有關(guān)的微生物的科學(xué)，通過(guò)對(duì)微生物的基本知識(shí)、基礎(chǔ)理論和基本實(shí)驗(yàn)技能的教學(xué)，使學(xué)生能辨別有益的、腐敗的和病原的微生物，從而在食品制造、保藏過(guò)程中，充分利用有益微生物，控制有害微生物的活動(dòng)，以防止食品的變質(zhì)[1]。該課程內(nèi)容多，涉及面廣，技術(shù)性實(shí)用性強(qiáng)，是食品專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程。在教學(xué)中，除重視基礎(chǔ)理論知識(shí)、基本操作技能的傳授外，也注重了培養(yǎng)學(xué)生分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力，做法和體會(huì)如下：

一、變學(xué)生被動(dòng)為主動(dòng)，變換教學(xué)立場(chǎng)

教師的備課不是簡(jiǎn)單的“背課”[2]，是在對(duì)教學(xué)內(nèi)容熟悉的基礎(chǔ)上，優(yōu)化內(nèi)容，根據(jù)食品微生物學(xué)知識(shí)體系的要求合理分配教學(xué)時(shí)間，增加學(xué)生在課堂上的參與和主動(dòng)，啟發(fā)引導(dǎo)學(xué)生完成學(xué)習(xí)任務(wù)，充分發(fā)揮教為主導(dǎo)，學(xué)為主體的作用。要改以往課堂以教師講為主，學(xué)生被強(qiáng)迫坐于課堂，不能也不敢出聲的傳統(tǒng)教學(xué)模式，做到讓學(xué)生“動(dòng)”起來(lái)，讓學(xué)生自身主動(dòng)地進(jìn)入到學(xué)習(xí)狀態(tài)，增加學(xué)習(xí)興趣，提高學(xué)習(xí)效果。

如“食品微生物學(xué)”與“生物化學(xué)”等課程相互滲透、相互聯(lián)系，在授課時(shí)間上有前有后，為了避免相近課程某些內(nèi)容重復(fù)，我們進(jìn)行了授課內(nèi)容的優(yōu)化。對(duì)于先修課程生物化學(xué)，已講過(guò)“物質(zhì)代謝”內(nèi)容，則以學(xué)生為主角，讓學(xué)生課下查閱資料豐富相關(guān)知識(shí)尤其是一些科研論文（這樣可以啟發(fā)學(xué)生發(fā)現(xiàn)更多問(wèn)題），然后課堂向教師提問(wèn)的方式來(lái)完成這部分教學(xué)內(nèi)容。教師要根據(jù)學(xué)生提問(wèn)的難易做到由淺及深地回答，幫助學(xué)生回顧已忘或還未掌握的內(nèi)容。學(xué)生在提問(wèn)時(shí)，允許學(xué)生充分發(fā)揮想象；老師答疑時(shí)要盡可能多聯(lián)系一些日常生活的實(shí)例和本學(xué)科當(dāng)前研究的最新進(jìn)展，用簡(jiǎn)練、幽默、易懂的語(yǔ)言回答相關(guān)問(wèn)題，這樣既豐富了學(xué)生知識(shí)，又調(diào)動(dòng)了學(xué)生積極性和趣味性，讓學(xué)生在課堂上能夠感覺(jué)到自己是課堂主角，要發(fā)揮主角作用。

二、善于利用多媒體教學(xué)資源

傳統(tǒng)的板書(shū)加掛圖的食品微生物教學(xué)模式已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足當(dāng)今學(xué)生的信息量。計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)成為當(dāng)今教育科學(xué)及教學(xué)手段的重要組成部分[3]。多媒體技術(shù)應(yīng)用于食品微生物教學(xué)中，使教學(xué)效果前所未有的提高。首先，多媒體技術(shù)使直觀(guān)教學(xué)成為可能。將微觀(guān)世界在課堂上生動(dòng)再現(xiàn)，其效果勝過(guò)任何語(yǔ)言的描述。其次，多媒體提供的信息量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于傳統(tǒng)教學(xué)模式。課堂上學(xué)生可以觀(guān)看多幅圖片，閱讀多篇教學(xué)材料，這個(gè)數(shù)量可以是傳統(tǒng)教學(xué)的幾倍。第三，多媒體將多種教學(xué)資源進(jìn)行了整合，提供了多種教學(xué)方法，如課件、動(dòng)畫(huà)、相關(guān)網(wǎng)絡(luò)聲像資料及新聞報(bào)道等。

食品微生物學(xué)，不僅內(nèi)容豐富，涉及面廣，發(fā)展迅速，而且個(gè)體微小，學(xué)生對(duì)它的認(rèn)識(shí)遠(yuǎn)不如對(duì)宏觀(guān)事物，再加上其營(yíng)養(yǎng)方式、遺傳類(lèi)型多種多樣、代謝機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，學(xué)生往往感覺(jué)其知識(shí)繁瑣、抽象和難以理解。針對(duì)這種情況，將多媒體技術(shù)應(yīng)用到微生物學(xué)課程的教學(xué)，受到了學(xué)生的普遍歡迎。通過(guò)flash動(dòng)畫(huà)、PPT課件、高清晰顯微照片、動(dòng)態(tài)顯微錄像等CAI教學(xué)軟件，使微觀(guān)世界宏觀(guān)化、教學(xué)內(nèi)容形象化[4]。例如，把細(xì)菌、真菌、病毒的顯微世界以色彩豐富、直觀(guān)清晰、生動(dòng)形象的三維畫(huà)面或科教電影形式展示給學(xué)生，以動(dòng)畫(huà)的形式表現(xiàn)出細(xì)菌鞭毛的運(yùn)動(dòng)、T偶噬菌體的增殖、主動(dòng)吸收的方式、細(xì)胞的分裂過(guò)程等內(nèi)容。不僅激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，有助于學(xué)生的理解與接受，而且可突破教學(xué)中的難點(diǎn)，加大教學(xué)的信息量，提高講課的效率。

三、采取形象化教學(xué)形式

在實(shí)際教學(xué)過(guò)程中要注重知識(shí)的邏輯性和系統(tǒng)性，強(qiáng)化抽象理論與具體實(shí)例結(jié)合，增加學(xué)生對(duì)抽象理論的感性認(rèn)識(shí)和接受能力。食品微生物學(xué)主要講解了微生物在食品生產(chǎn)、貯運(yùn)及銷(xiāo)售過(guò)程的利害影響，但由于微生物的自身特性，我們很難就只有顯微條件下才能觀(guān)察到的細(xì)小生物讓其形象化，宏觀(guān)化。雖然多媒體已經(jīng)在此方面有了很大改善，但要做到與具體實(shí)例聯(lián)系更加緊密，更加強(qiáng)化學(xué)生的感性認(rèn)識(shí)，我們必須借助實(shí)際生產(chǎn)、生活中的例子來(lái)實(shí)現(xiàn)形象化教學(xué)。如，上課時(shí)我們將一些常見(jiàn)的白酒、紅酒、酸乳、面包、醬類(lèi)等發(fā)酵食品帶入課堂來(lái)講授微生物在發(fā)酵食品中的應(yīng)用，并且通過(guò)與實(shí)驗(yàn)緊密結(jié)合，開(kāi)展發(fā)酵酸乳來(lái)增強(qiáng)學(xué)生對(duì)微生物利用的認(rèn)知，讓學(xué)生自已親自動(dòng)手制作酸乳，品評(píng)自已的勞動(dòng)成果，便于理解和掌握教學(xué)內(nèi)容重點(diǎn)。再如講到微生物對(duì)食品的危害時(shí)，我們選用了一些發(fā)霉的糧食、發(fā)霉的馬鈴薯以及發(fā)臭的肉和罐頭等進(jìn)入課堂，這樣在理論講解時(shí)有現(xiàn)實(shí)的例子，無(wú)論從教師的講授還是學(xué)生掌握都因有了宏觀(guān)感性認(rèn)識(shí)而變得輕松容易。

四、調(diào)動(dòng)學(xué)生興趣，培養(yǎng)創(chuàng)新能力

興趣是學(xué)習(xí)的動(dòng)力，也是創(chuàng)新的動(dòng)力，創(chuàng)新的過(guò)程需要興趣來(lái)維持。教育學(xué)家烏申斯基說(shuō)：“沒(méi)有絲毫興趣的強(qiáng)制學(xué)習(xí)，將會(huì)扼殺學(xué)生探求真理的欲望。”[5]食品微生物課堂教學(xué)中要注重培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，養(yǎng)成學(xué)生良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣，為學(xué)生創(chuàng)造性學(xué)習(xí)奠定基礎(chǔ)。那么如何在微生物教學(xué)過(guò)程中做到調(diào)動(dòng)學(xué)生興趣，培養(yǎng)創(chuàng)新能力呢?我們主要從三方面來(lái)做起。第一，因材施教。學(xué)生的個(gè)性差異和智力發(fā)展情況各不相同，因材施教，對(duì)不同層次的學(xué)生實(shí)施不同程度的思維能力和創(chuàng)造能力，對(duì)不同層次的學(xué)生要有不同的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和不同的目標(biāo)要求。第二，以“新”為軸，調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣。教學(xué)中突出“新”的理念（即運(yùn)用新思想，聯(lián)系新理論，列舉新課題等），在激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情，培養(yǎng)提出問(wèn)題，解決問(wèn)題的能力，積極參加各種學(xué)術(shù)討論會(huì)，大膽提問(wèn)等方面都無(wú)疑會(huì)起重要作用，同時(shí)還賦予學(xué)生寶貴的創(chuàng)新思維。第三，多樣化傳授知識(shí)。改傳統(tǒng)課堂教學(xué)模式，引入食品中微生物變化的課外觀(guān)察，自行了解微生物的生長(zhǎng)變化；鼓勵(lì)學(xué)生課堂提問(wèn)，學(xué)生課外查閱資料課堂以報(bào)告會(huì)形式進(jìn)行教學(xué)內(nèi)容討論；積極開(kāi)展相關(guān)實(shí)驗(yàn)，引入校園河水中微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)學(xué)生自行設(shè)計(jì)安排和完成實(shí)驗(yàn)的能力。

五、強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)，重視動(dòng)手能力

食品微生物學(xué)是一門(mén)實(shí)驗(yàn)性、技能性很強(qiáng)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課，這一學(xué)科的在校大學(xué)生踏上工作崗位前，普遍存在動(dòng)手能力較差、實(shí)驗(yàn)技能欠缺的問(wèn)題。充分利用現(xiàn)有的力所能及的各種條件，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn)，是最快捷有效的彌補(bǔ)方法。

（一）課堂實(shí)驗(yàn)

食品微生物實(shí)驗(yàn)課開(kāi)始時(shí)，講明實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求、步驟和注意事項(xiàng)，努力使實(shí)驗(yàn)成功的要求變成學(xué)生頭腦中的指令，使每位同學(xué)都全神貫注地投入到實(shí)驗(yàn)當(dāng)中去。從最基本的操作技術(shù)做起，抓住實(shí)驗(yàn)課上一切可以利用的機(jī)會(huì)，采取多種形式強(qiáng)化基本技能。具體如下：

最初，教師進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求、步驟和注意事項(xiàng)的詳細(xì)講解。

其次，以多媒體的形式將預(yù)先錄制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程向?qū)W生播放。這樣既可以回顧理論教學(xué)內(nèi)容加深實(shí)驗(yàn)印象，又可使學(xué)生初步了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程、實(shí)驗(yàn)步驟及實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵操作，幫助掌握實(shí)驗(yàn)技能。

再次，教師與學(xué)生同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。這樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，學(xué)生在觀(guān)看了錄像后對(duì)部分仍不明白或是記憶不清楚的地方可以通過(guò)教師演示與他們實(shí)驗(yàn)的同步，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)信息交換，從而讓學(xué)生能夠最短最及時(shí)最迅速地掌握正確的實(shí)驗(yàn)技能。

最后，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)總結(jié)，認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫(xiě)作和批閱，從中找出問(wèn)題并進(jìn)行集中答疑，進(jìn)一步修正學(xué)生實(shí)驗(yàn)中的錯(cuò)誤。

（二）課外實(shí)驗(yàn)

不定期安排學(xué)生在課外做些簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)或集中安排學(xué)生課外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)技能訓(xùn)練。如在講微生物腐敗變質(zhì)時(shí)安排學(xué)生課外取一空礦泉水瓶?jī)?nèi)裝入校園河流中比較清澈的水，然后進(jìn)行封口存放，直至水質(zhì)變化產(chǎn)生腥臭。讓學(xué)生通過(guò)這種現(xiàn)象來(lái)強(qiáng)化課堂所學(xué)內(nèi)容，起到了良好教學(xué)效果。再如集中學(xué)生利用課余時(shí)間進(jìn)行校園河水中微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，讓學(xué)生以小組為單位獨(dú)立完成從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)到完成檢測(cè)報(bào)告一系列工作，并且最后進(jìn)行結(jié)果評(píng)比。這樣不但豐富了學(xué)生課余生活，而且還調(diào)動(dòng)了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，提高了學(xué)生的實(shí)際動(dòng)手和綜合運(yùn)用知識(shí)的能力。

六、建立適合當(dāng)代大學(xué)生的考核機(jī)制[6]，正確評(píng)定學(xué)生成績(jī)

實(shí)行理論和實(shí)驗(yàn)考試分離，突出實(shí)驗(yàn)，綜合評(píng)定的考試模式。改以往教師授課內(nèi)容為藍(lán)本，學(xué)生考前背，考后忘的非正常態(tài)考試模式。將理論考查內(nèi)容面放寬加大，強(qiáng)調(diào)與實(shí)際食品生產(chǎn)的聯(lián)系，將知識(shí)點(diǎn)以命題形式溶入現(xiàn)實(shí)生活，做到“學(xué)以致用”。實(shí)驗(yàn)考試采用筆試和操作各占一半的命題形式，做到實(shí)驗(yàn)理論和實(shí)驗(yàn)操作并行，要求學(xué)生在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成兩部分命題，達(dá)到理論、操作都掌握的目的。實(shí)驗(yàn)筆試以實(shí)驗(yàn)基本原理和關(guān)鍵操作步驟為主要命題范圍，實(shí)驗(yàn)操作以抽簽形式定，內(nèi)容均為食品微生物必須掌握的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，如顯微鏡觀(guān)察、細(xì)菌染色、細(xì)菌計(jì)數(shù)等。最后學(xué)生成績(jī)由理論和實(shí)驗(yàn)兩部成績(jī)?cè)俳Y(jié)合平時(shí)的課堂提問(wèn)及實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行綜合評(píng)定，給出學(xué)生一個(gè)公平公正科學(xué)的考核成績(jī)。通過(guò)這種模式考試既要求學(xué)生掌握了食品微生物的相關(guān)理論知識(shí)，又培養(yǎng)了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作技能，為以后的實(shí)際工作打下了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

實(shí)踐證明，我們進(jìn)行的食品微生物課程教學(xué)改革的大膽嘗試是成功的。教學(xué)內(nèi)容的豐富更新、教學(xué)手段的現(xiàn)代化，考核機(jī)制的客觀(guān)化，不僅提高了教學(xué)質(zhì)量和教學(xué)效果，而且激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，拓寬了學(xué)生的知識(shí)面，增強(qiáng)了學(xué)生的動(dòng)手能力，適應(yīng)了現(xiàn)代社會(huì)對(duì)人才培養(yǎng)的要求。

參考文獻(xiàn)

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[2]朱宏飛，微生物教學(xué)中激發(fā)學(xué)生興趣的幾點(diǎn)探索[J]，微生物學(xué)通報(bào)，2007，34(1)173~175

[3]梁峙，微生物教學(xué)中的CAI[J]，彭城職業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，3(16)，76~79

[4]李平、杜先鋒、蔣軍，運(yùn)用多媒體課件好食品微生物學(xué)的嘗試[J]，高等農(nóng)業(yè)教育，2002，10，42~44

篇6

【關(guān)鍵詞】微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)驗(yàn)興趣應(yīng)用型

【中圖分類(lèi)號(hào)】G64 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-3089（2014）05-0186-02

微生物學(xué)是生物技術(shù)、生物技術(shù)及應(yīng)用、食品科學(xué)與工程、生物工程、制藥工程、環(huán)境工程等專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程，既有系統(tǒng)的理論，又有系統(tǒng)的實(shí)踐應(yīng)用。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)作為微生物學(xué)重要組成部分，既是對(duì)學(xué)生課堂理論知識(shí)的檢驗(yàn)，又是學(xué)生實(shí)踐能力的培養(yǎng)和提高的重要環(huán)節(jié)，對(duì)培養(yǎng)高質(zhì)量的應(yīng)用型人才具有重要作用。因此，如何利用微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)培養(yǎng)學(xué)生實(shí)踐應(yīng)用能力的培養(yǎng)，是擺在我們面前的重要課題，而學(xué)習(xí)興趣是學(xué)生學(xué)習(xí)的最好動(dòng)力，只有充分激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，才能最大限度地發(fā)揮學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性。因此，培養(yǎng)學(xué)生對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)的興趣，對(duì)于開(kāi)展微生物實(shí)驗(yàn)具有非常積極的作用。在教學(xué)工作中，經(jīng)過(guò)不斷的探索和嘗試，總結(jié)了以下幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)和方法。

1.教材選用的實(shí)用性

獨(dú)立院校作為一個(gè)在本世紀(jì)初出現(xiàn)的新型的辦學(xué)模式，培養(yǎng)學(xué)生的目標(biāo)較為明確即培養(yǎng)應(yīng)用型人才。發(fā)展十幾年來(lái)，社會(huì)也逐漸對(duì)獨(dú)立學(xué)院的學(xué)生有所認(rèn)可，教學(xué)出現(xiàn)了一些較其他本科院校不同的情況。于是針對(duì)獨(dú)立院校的學(xué)生特點(diǎn)和教學(xué)特點(diǎn)，出現(xiàn)了一些適用的教材，如經(jīng)濟(jì)科學(xué)出版社的“普通高校應(yīng)用型人才培養(yǎng)規(guī)劃教材”系列。但是目前對(duì)于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)還沒(méi)有相對(duì)應(yīng)的教材，因此在在教材的選用上就需要和授課對(duì)象的專(zhuān)業(yè)方向相一致，基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單化，但是操作要點(diǎn)要明確，并且有一定的和行業(yè)實(shí)踐相結(jié)合的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，這樣的教材才適合應(yīng)用型人才的培養(yǎng)?？筛鶕?jù)自身的需要，編寫(xiě)一部可行的教學(xué)教案。

2.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的合理安排

目前高校微生物實(shí)驗(yàn)課程的安排多與理論知識(shí)同步，即微生物觀(guān)察方法―微生物接種、分離、培養(yǎng)和無(wú)菌操作―培養(yǎng)基的配制―微生物顯微計(jì)數(shù)和平板菌落計(jì)數(shù)―生理生化反應(yīng)―檢測(cè)實(shí)驗(yàn)[1]。這種安排使學(xué)生仍然禁錮在理論教學(xué)的套路上，無(wú)法對(duì)操作的連貫性和實(shí)驗(yàn)的真正目的掌握清楚，因此對(duì)于這樣的現(xiàn)象將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的順序做調(diào)整讓學(xué)生知其然而且知其所以然，具體的安排可如下：無(wú)菌概念和培養(yǎng)基的配制-微生物的分離和培養(yǎng)―菌落計(jì)數(shù)和顯微計(jì)數(shù)―微生物個(gè)體的觀(guān)察方法―生理生化反應(yīng)―檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。這樣使同學(xué)們能夠明白整個(gè)實(shí)驗(yàn)的流程，也方便學(xué)生獨(dú)立完成某項(xiàng)微生物檢測(cè)任務(wù)，而且能夠讓學(xué)生有逐步深入、由宏觀(guān)到微觀(guān)、由整體到個(gè)體的一個(gè)認(rèn)識(shí)過(guò)程。另外在每堂課最后應(yīng)該提前告知下次實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容和要求，要求學(xué)生做預(yù)習(xí)。

3.實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的實(shí)用性

在微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，應(yīng)盡量安排學(xué)生感興趣的微生物學(xué)日?，F(xiàn)象和理論，可將學(xué)生遇到的一些問(wèn)題同微生物學(xué)知識(shí)理論緊密結(jié)合起來(lái)，這樣就能保障學(xué)生能夠充分掌握微生物學(xué)的各種方法和步驟。如，在進(jìn)行環(huán)境條件對(duì)微生物的影響的項(xiàng)目中可選擇生活中用的酒精、碘酒、洗手液或洗衣粉等時(shí)間進(jìn)行檢測(cè)，在微生物形態(tài)觀(guān)察中可選擇生活中發(fā)霉變質(zhì)的食物進(jìn)行培養(yǎng)并觀(guān)察，從而能夠使學(xué)生更加直觀(guān)的認(rèn)識(shí)到人類(lèi)與微生物之間的緊密關(guān)系。另外根據(jù)實(shí)驗(yàn)課時(shí)安排可確定幾個(gè)和生活相關(guān)的自選試驗(yàn)，讓學(xué)生自己選擇作為綜合實(shí)驗(yàn)，并以學(xué)生為主題，教師為輔，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)資料的收集和準(zhǔn)備，制定可行的實(shí)驗(yàn)步驟，這樣學(xué)生的主動(dòng)性就逐漸的調(diào)動(dòng)起來(lái)，興趣自然而然的就提高了[2]。

4.實(shí)驗(yàn)考核的嚴(yán)格性

獨(dú)立學(xué)院學(xué)生在學(xué)習(xí)習(xí)慣上有所欠缺，但是學(xué)習(xí)能力還是比較強(qiáng)，但是自律性或主動(dòng)性較弱，因此才實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)中，教師要把握實(shí)驗(yàn)課上的紀(jì)律性，并且嚴(yán)格考核，有條件的可以安排期末實(shí)驗(yàn)測(cè)試，對(duì)一學(xué)期的實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)行檢驗(yàn)，在課程進(jìn)行過(guò)程中對(duì)于無(wú)菌操作技術(shù)可進(jìn)行小測(cè)，嚴(yán)格規(guī)范整個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作，從試劑的取用，玻璃儀器的清洗，滅菌物品的包扎等各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行規(guī)范養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣和素養(yǎng)。另外對(duì)成績(jī)的核定不能僅僅依靠最后的考核，日常的考勤和實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)應(yīng)該占有一定的比例，可采用考勤20%（包括值日考勤）、實(shí)驗(yàn)表現(xiàn)30%、實(shí)驗(yàn)報(bào)告30%、考核20%[3]。

5.教學(xué)手段的多樣性

在教學(xué)手段上，不能僅僅是板書(shū)和簡(jiǎn)單的講解，可以利用多媒體教學(xué)系統(tǒng)使文本、圖像、圖形、聲音、動(dòng)畫(huà)、視頻等有效地結(jié)合，突出實(shí)驗(yàn)的難點(diǎn)和重點(diǎn)，并且對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的問(wèn)題能夠更直觀(guān)的顯現(xiàn)出來(lái)[4]，比學(xué)生抽象的想象要更加容易理解。另外實(shí)驗(yàn)的演示也是至關(guān)重要的，盡管有圖片和展示，但是實(shí)實(shí)在在的演示能讓同學(xué)們更加清晰的了解實(shí)驗(yàn)操作，從而也能明白操作的關(guān)鍵要點(diǎn)。

6.及時(shí)總結(jié)與反饋

每次實(shí)驗(yàn)完成教師應(yīng)及時(shí)的總結(jié)在課堂結(jié)束或第二實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，對(duì)學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過(guò)程出現(xiàn)的問(wèn)題和整個(gè)實(shí)驗(yàn)完成情況進(jìn)行總結(jié)，了解學(xué)生對(duì)本次實(shí)驗(yàn)的收獲或疑問(wèn)，及時(shí)解決、及時(shí)反饋。這樣才能加深學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的理解和鞏固，改變錯(cuò)誤的操作方法或方式。也可以幫助教師了解教學(xué)進(jìn)度和學(xué)生的需求，在下次教學(xué)中可以有針對(duì)性的講解和演示。

實(shí)驗(yàn)本身就是提高學(xué)生實(shí)際操作的重要環(huán)節(jié)，隨著社會(huì)對(duì)“應(yīng)用型”人才的重視，對(duì)學(xué)生的動(dòng)手能力要求也越來(lái)越高越來(lái)越嚴(yán)格，在今后的教學(xué)過(guò)程中要不斷總結(jié)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，探索實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法，提高學(xué)生的實(shí)踐操作能力，為社會(huì)培養(yǎng)出更多優(yōu)秀的應(yīng)用型人才。

參考文獻(xiàn)：

[1]丁祥.提高高校微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果的策略探索.時(shí)代教育，2012，8:76-77.

[2]宋波.高校微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)存在的問(wèn)題及改革對(duì)策.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011, 15:38-39.

篇7

Abstract： More and more researches are focused on viable but non-culturable bacteria in medical microbiology， epidemiology， general microbial ecology and sanitation quarantine since it was put forward in 1982. Although the VBNC is discussed in the above several aspects， the insufficient place is bacterial species are limited， especially the research only applies to pathogens. The recent researches concerning VBNC bacteria are reviewed， the formation mechanism， change and types of VBNC bacteria and the meanings of the studies are discussed.

關(guān)鍵詞： 活的不可培養(yǎng)狀態(tài)菌;生物學(xué)特性;微生物資源

Key words： VBNC bacteria;biological characteristics;microbial resources

0 引言

細(xì)菌的VBNC狀態(tài)是指細(xì)菌處于不良環(huán)境條件下，采用普通的方式不能促使其自然的生長(zhǎng)繁殖，那是因?yàn)榫w當(dāng)中的有很多內(nèi)部特質(zhì)發(fā)生了改變。其中細(xì)胞質(zhì)密度、蛋白質(zhì)、核糖體、DNA的改變會(huì)引起菌體收小，細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的進(jìn)一步改變。雖然如此，但是菌體還是能夠進(jìn)行新陳代謝。

1 活的不可培養(yǎng)狀態(tài)菌

1.1 活的不可培養(yǎng)狀態(tài)菌的特點(diǎn)

1.1.1 菌體在形狀上會(huì)有所改變 許多進(jìn)入VBNC狀態(tài)的細(xì)菌會(huì)發(fā)生改變的方面集中體現(xiàn)在體積、形態(tài)和排列上。其中，有兩種細(xì)菌菌體體積變化非常明顯，那就是桿菌和弧菌。有時(shí)，圓球形的菌可能是由桿狀的菌變來(lái)的，也有可能弧狀菌的衍生而來(lái)的。有時(shí)，有些菌還可以通過(guò)交聯(lián)的方式來(lái)組成長(zhǎng)連狀排列。

1.1.2 喪失了在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖能力 微生物菌體進(jìn)入活的不可培養(yǎng)狀態(tài)之后，其增值能力大大降低，在普通培養(yǎng)基上基本不增值，或者其菌落極小不易觀(guān)察，不會(huì)繼續(xù)生長(zhǎng)。

1.1.3 病原菌可保留毒力和致病性 通常情況下，保持在VBNC狀態(tài)的細(xì)菌在某種特定的情況下會(huì)產(chǎn)生致病性和感染性。姜熒安等發(fā)現(xiàn)了溶藻弧菌及其不可培養(yǎng)狀態(tài)復(fù)蘇后并不能解決斑馬魚(yú)的致病性，研究顯示溶藻弧菌在對(duì)外界的相關(guān)刺激幾乎沒(méi)有抵抗力。那是因?yàn)楫?dāng)細(xì)菌保持在VBNC狀態(tài)的時(shí)間太久，其相關(guān)的結(jié)構(gòu)就會(huì)失去原來(lái)的模樣，進(jìn)而導(dǎo)致致病性和感染性也會(huì)逐漸消失。

1.1.4 VBNC狀態(tài)菌的壽命是1-2年。

1.1.5 當(dāng)各方面條件都合適時(shí)，VBNC狀態(tài)菌會(huì)重新回到可培養(yǎng)狀態(tài)。一部分不可培養(yǎng)狀態(tài)微生物在適宜的條件下或者經(jīng)過(guò)一些誘導(dǎo)因子的作用，會(huì)進(jìn)入可培養(yǎng)狀態(tài)，恢復(fù)可培養(yǎng)狀態(tài)下的生物活性，開(kāi)始新的新陳代謝。

1.2 VBNC狀態(tài)菌的三種類(lèi)型

1.2.1 微生物本身具備生長(zhǎng)繁殖的潛力，但是現(xiàn)有的相關(guān)條件并不能促使其自由生長(zhǎng)。一旦掌握相關(guān)的培養(yǎng)技術(shù)，這類(lèi)微生物完全可以開(kāi)發(fā)出來(lái)。

1.2.2 微生物的分裂能力在某些特定的情況下可以得到重新的應(yīng)用，即使是其在無(wú)法繁殖的狀態(tài)下。通常，微生物從一個(gè)可適應(yīng)環(huán)境進(jìn)入另一個(gè)不能適應(yīng)的環(huán)境時(shí)，其系統(tǒng)內(nèi)部會(huì)發(fā)生改變，這樣會(huì)導(dǎo)致其進(jìn)入一個(gè)不可培養(yǎng)的狀態(tài)。但其生命力非常強(qiáng)大，只需要再進(jìn)入可適應(yīng)的環(huán)境，它就可以正常地進(jìn)行生長(zhǎng)代謝。

1.2.3 任何條件都不能使其重新生長(zhǎng)代謝。

2 活的不可培養(yǎng)狀態(tài)菌的形成

常見(jiàn)誘導(dǎo)微生物進(jìn)入VBNC狀態(tài)的因素：

①物理因素。

溫度、氧氣濃度、光照強(qiáng)度、濕度都會(huì)導(dǎo)致微生物的新陳代謝受到阻礙。多數(shù)文獻(xiàn)顯示溫度是使微生物進(jìn)入不可培養(yǎng)狀態(tài)的主要因素，并且多和寡養(yǎng)條件相結(jié)合。

②化學(xué)因素。

當(dāng)細(xì)菌出現(xiàn)有害化學(xué)物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)成分缺乏這些情況時(shí)，細(xì)菌就會(huì)長(zhǎng)期處于饑餓狀態(tài)，就沒(méi)有能力進(jìn)行新陳代謝，接著就會(huì)進(jìn)入VBNC狀態(tài)。

③生物因素。

水生細(xì)菌在條件合適的時(shí)候，可以重新進(jìn)行新陳代謝;一旦處于不適合其生存的條件時(shí)，其便可以附著在生物體的體外進(jìn)入VBNC狀態(tài)。

3 活的不可培養(yǎng)狀態(tài)菌的復(fù)蘇

復(fù)蘇是指細(xì)菌從VBNC狀態(tài)進(jìn)入可培養(yǎng)狀態(tài)的這一系列過(guò)程。VBNC細(xì)菌的主要特點(diǎn)就集中在復(fù)蘇這方面。但是，許許多多的實(shí)驗(yàn)證明，復(fù)蘇絕不是簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單的一個(gè)過(guò)程，而是涉獵很多方面的相當(dāng)復(fù)雜的一個(gè)過(guò)程，這也就意味著復(fù)蘇的挑選非常嚴(yán)格。

通過(guò)直接逆轉(zhuǎn)不良環(huán)境條件這種方式，在不良環(huán)境條件下，通過(guò)直接逆轉(zhuǎn)的方式，實(shí)現(xiàn)VBNC細(xì)菌復(fù)蘇。有的研究表明VBNC細(xì)菌轉(zhuǎn)入宿主體內(nèi)孵育，可以使其得到復(fù)蘇。

4 活的不可培養(yǎng)狀態(tài)菌的幾種研究方法

4.1 VBNC研究中的熒光顯微鏡檢測(cè)技術(shù)

吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)的李影等人，在前人熒光染色顯微技術(shù)的基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)改進(jìn)了實(shí)驗(yàn)用品及方法，用在不可培養(yǎng)狀態(tài)菌的研究上取得了很好的效果。其過(guò)程大概如下：

①菌體的前處理。

控制菌液濃度在1×106個(gè)/mL，用滅菌生理鹽水充分洗滌菌體，離心皆為8000r/min，離心2min。以盡可能的除盡培養(yǎng)液，以免培養(yǎng)液產(chǎn)生自發(fā)熒光干擾結(jié)果。

②微孔濾膜的前處理。

主要是微孔濾膜的疏水性檢查。

③微孔濾膜的染色與烘烤。

將處理過(guò)的微孔濾膜光面朝上，在濾膜圓心處滴一滴黑色鋼筆墨水，讓其自行侵染擴(kuò)散并浸透整個(gè)濾膜，然后60℃烤膜20min。

④VBNC細(xì)菌樣本可以將其染成熒光色。

將VBNC菌體沉淀溶于50μL滅菌生理鹽水中，貼壁加入工作濃度的SYTO-9和PI各25μL至離心管中，瞬間離心，吹吸混勻，室溫避光染色15min。

⑤制備VBNC細(xì)菌熒光標(biāo)本。

首先將微孔濾膜先染成黑色，其次將染好的濾膜完整的放在載玻片的中間，再將染好的VBNC菌液滴入10μL，再通過(guò)手動(dòng)壓片方式除盡濾膜和蓋玻片之間的空氣夾層。

最后，將無(wú)自發(fā)光的油滴一滴在蓋玻片上，將蓋玻片放于落射熒光顯微鏡上，放于暗室中細(xì)心觀(guān)察，并計(jì)算活菌數(shù)量。在視野中，發(fā)出綠色熒光的即為活菌，而發(fā)出紅色熒光的為死菌。

4.2 VBNC研究中的宏基因組學(xué)技術(shù)

采用宏基因組學(xué)技術(shù)研究活的不可培養(yǎng)的微生物主要有圖1幾個(gè)步驟。

在圖1步驟中樣品的提取方法是一個(gè)重要的步驟，主要有兩種，一種是原位提取法，另一種是異位提取法。

采用化學(xué)方法、酶降解方法、物理方法，使得微生物當(dāng)中的DNA進(jìn)行釋放和純化，這種純化方式是在微生物環(huán)境中，破壞微生物細(xì)胞實(shí)現(xiàn)的，這就是原位提取法。這種方法所獲得的DNA可以保存完好，便于研究探索。但是由于較大的剪切力的存在，會(huì)使所提取的DN段較?。?kb-50kb），這樣當(dāng)構(gòu)建載體時(shí)，可以選用質(zhì)粒載體或者λ噬菌體，然后以大腸桿菌作為宿主細(xì)胞。

異位提取法，采用離心介質(zhì)等方式首先讓微生物從環(huán)境樣品中脫離出來(lái)，再利用處理純培養(yǎng)細(xì)胞的方式，使微生物細(xì)胞得以分裂和降解，并提取DNA。這種方法的優(yōu)點(diǎn)很多，純凈度較好，DNA保存完好，對(duì)于學(xué)者的研究很有幫助和啟迪。一般選用細(xì)菌人工載體或者柯斯質(zhì)粒作載體。

在轉(zhuǎn)化子的挑選上也是一個(gè)很重要的步驟，一般分為三個(gè)水平的挑選：

①生物活性水平的篩選。

運(yùn)用相關(guān)的活性檢測(cè)設(shè)備，采用先進(jìn)的活性檢測(cè)手段對(duì)活性克隆子進(jìn)行選擇，利用重組克隆產(chǎn)生的新活性進(jìn)行檢驗(yàn)，從而得出最優(yōu)的效果。

②挑選具備最好的化合物結(jié)構(gòu)的細(xì)菌。

采用色譜圖的檢測(cè)手段，通過(guò)比對(duì)特定的峰值對(duì)應(yīng)特定的物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，判斷出宿主細(xì)胞或發(fā)酵液抽提出的最優(yōu)結(jié)構(gòu)的克隆子。

③DNA序列水平的篩選。

運(yùn)用序列相似性原理，可以判斷出相同的基因序列的的幾種酶很有可能就是同一種酶。根據(jù)這個(gè)相似原理，可以將相關(guān)功能基團(tuán)的序列通過(guò)某種特定的方式增加并挑選陽(yáng)性克隆子。

4.3 VBNC研究中的其他技術(shù)

梯度凝膠電泳技術(shù)是用來(lái)分離DN段的，主要運(yùn)用的是梯度變性膠在不同變性劑不同DNA條件下的解離程度的特點(diǎn)，適用于突變分析。在電泳時(shí)，具有解鏈的DNA的速度比不具備解鏈的較大，這樣就可以使得具有不同解鏈效果的DNA得到很好的分離結(jié)果。其他一些常規(guī)技術(shù)還有核酸雜交技術(shù)、PCR技術(shù)等，其中PCR技術(shù)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的發(fā)展，更延伸了不同的PCR技術(shù)。

5 活的不可培養(yǎng)狀態(tài)菌研究的重要意義

在醫(yī)學(xué)研究中的重要性：病原VBNC菌具有的致病性、抗原性以及黏附性與耐藥性，并且一些VBNC菌在某些條件下能夠轉(zhuǎn)化成正常的細(xì)菌體，恢復(fù)正常的致病力。這是對(duì)衛(wèi)生及醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)方法提出新的挑戰(zhàn)。

土壤生態(tài)研究中的意義：由于自然樣品中只有極小一部分活的微生物可以用實(shí)驗(yàn)室方法培養(yǎng)出來(lái)，所以傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法是不能表現(xiàn)出自然界中微生物的多樣性。VBNC狀態(tài)菌的發(fā)現(xiàn)大大擴(kuò)充了土壤微生物的多樣性，以此更有效地尋找新類(lèi)型微生物及其有應(yīng)用價(jià)值的產(chǎn)物。

參考文獻(xiàn)：

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[2]李影，段銳，錢(qián)愛(ài)東，等.“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”細(xì)菌熒光觀(guān)察方法[J].生物技術(shù)，2010，20（3）：66-69.

篇8

關(guān)鍵詞：食品微生物 教學(xué)改革 多媒體課件 實(shí)驗(yàn)與實(shí)習(xí)

中圖分類(lèi)號(hào)：R37 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-0515（2013）5-006-01

食品微生物學(xué)是一門(mén)研究與食品有關(guān)的科學(xué)，是食品專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程。通過(guò)對(duì)微生物的基本知識(shí)、基礎(chǔ)理論和基本實(shí)驗(yàn)技能的教學(xué)，使學(xué)生能辨別有益的、腐敗的和病原的微生物，從而在食品制造、保藏過(guò)程中，充分利用有益微生物，控制有害微生物的活動(dòng)，以防止食品的變質(zhì)。該課程內(nèi)容多，涉及面廣，技術(shù)性實(shí)用性強(qiáng)，在教學(xué)中，除重視基礎(chǔ)理論知識(shí)、基本操作技能的傳授外，也注重了培養(yǎng)學(xué)生分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力。

一、從不同的方面進(jìn)行教學(xué)模式改革

1、教師備課

教學(xué)方法的改變首先要求教師在備課形式上有所改變。目前，微生物學(xué)因科學(xué)技術(shù)的發(fā)展而突飛猛進(jìn)，日新月異。因此，在備課時(shí)要求教師除了以教材為藍(lán)本，還要增添新知識(shí)、新技術(shù)、新方法等內(nèi)容，并將相應(yīng)的內(nèi)容總結(jié)、整合貫通后成為其授課資料。這樣可以極大的提高教師主動(dòng)學(xué)習(xí)新知識(shí)、了解本學(xué)科新動(dòng)向的積極性，同時(shí)，也拓展了學(xué)生的知識(shí)面。

2、改革理論教學(xué)方法

在對(duì)教學(xué)內(nèi)容熟悉的基礎(chǔ)上，優(yōu)化內(nèi)容，根據(jù)食品微生物學(xué)知識(shí)體系的要求合理分配教學(xué)時(shí)間，增加學(xué)生在課堂上的參與和主動(dòng)，啟發(fā)引導(dǎo)學(xué)生完成學(xué)習(xí)任務(wù)，充分發(fā)揮教為主導(dǎo)，學(xué)為主體的作用。要改以往課堂以教師講為主，學(xué)生被強(qiáng)迫坐于課堂，不能也不敢出聲的傳統(tǒng)教學(xué)模式，做到讓學(xué)生“動(dòng)”起來(lái)，讓學(xué)生自身主動(dòng)地進(jìn)入到學(xué)習(xí)狀態(tài)，增加學(xué)習(xí)興趣，提高學(xué)習(xí)效果。

3、調(diào)動(dòng)學(xué)生興趣，培養(yǎng)創(chuàng)新能力

興趣是學(xué)習(xí)的動(dòng)力，也是創(chuàng)新的動(dòng)力，創(chuàng)新的過(guò)程需要興趣來(lái)維持。食品微生物課堂教學(xué)中要注重培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，養(yǎng)成學(xué)生良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣，為學(xué)生創(chuàng)造性學(xué)習(xí)奠定基礎(chǔ)。那么如何在微生物教學(xué)過(guò)程中做到調(diào)動(dòng)學(xué)生興趣，培養(yǎng)創(chuàng)新能力呢？我們主要從三方面來(lái)做起。第一，因材施教。學(xué)生的個(gè)性差異和智力發(fā)展情況各不相同，因材施教，對(duì)不同層次的學(xué)生實(shí)施不同程度的思維能力和創(chuàng)造能力，對(duì)不同層次的學(xué)生要有不同的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和不同的目標(biāo)要求。第二，以“新”為軸，調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣。教學(xué)中突出“新”的理念即運(yùn)用新思想，聯(lián)系新理論，列舉新課題等，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情，培養(yǎng)提出問(wèn)題，解決問(wèn)題的能力，積極參加各種學(xué)術(shù)討論會(huì)，大膽提問(wèn)等方面都無(wú)疑會(huì)起重要作用，同時(shí)還賦予學(xué)生寶貴的創(chuàng)新思維。

二、根據(jù)教材，制作多媒體課件

多媒體技術(shù)應(yīng)用于食品微生物教學(xué)中，使教學(xué)效果前所未有的提高。同以往的僅僅教授課本內(nèi)容的方法比較，多媒體教學(xué)的信息量也大大增加。因?yàn)?，教師在課前做了大量準(zhǔn)備，授課時(shí)只需輕點(diǎn)鼠標(biāo)，大量翔實(shí)、圖文并茂的幻燈片就會(huì)呈現(xiàn)在學(xué)生眼前。省出的板書(shū)時(shí)間，則可講授更多更實(shí)用的內(nèi)容。當(dāng)然，這對(duì)同學(xué)們的學(xué)習(xí)和記筆記就提出了更高的要求。面對(duì)來(lái)自于教材及互聯(lián)網(wǎng)的海量的信息，學(xué)生有可能會(huì)不知所措、來(lái)不及記筆記、難以分清主次。針對(duì)這種局面，教師應(yīng)有應(yīng)對(duì)措施。如：課前把哪些是應(yīng)知的、哪些是應(yīng)會(huì)的告知學(xué)生，每次課后總結(jié)、下次課前提問(wèn)，反復(fù)重復(fù)學(xué)生需掌握的重點(diǎn)和難點(diǎn)。

三、強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)，重視動(dòng)手能力

1.規(guī)范實(shí)驗(yàn)基本操作，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目蒲袘B(tài)度

微生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)課在教學(xué)中所占的比例較大，實(shí)驗(yàn)教學(xué)是全面實(shí)施教學(xué)大綱和提高教學(xué)質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，是加強(qiáng)實(shí)踐教育環(huán)節(jié)的重要內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)、間接經(jīng)驗(yàn)與直接經(jīng)驗(yàn)、抽象思維和形象思維、傳授知識(shí)和訓(xùn)練才能相結(jié)合的過(guò)程，是科研工作的主體，嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。

2、讓學(xué)生參與實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備

以前，每次實(shí)驗(yàn)都是由實(shí)驗(yàn)人員提前準(zhǔn)備好了實(shí)驗(yàn)菌和培養(yǎng)基，學(xué)生實(shí)驗(yàn)時(shí)只管接種已知實(shí)驗(yàn)菌，培養(yǎng)好后再在教師的指導(dǎo)下完成實(shí)驗(yàn)。這樣學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)菌常出現(xiàn)的地方、鑒定程序、基本鑒定依據(jù)等都一無(wú)所知，因而極不利于培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力和實(shí)踐能力。為了加強(qiáng)學(xué)生的實(shí)踐操作技能的培養(yǎng)，我們讓學(xué)生自己動(dòng)手準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)，如在做細(xì)菌接種實(shí)驗(yàn)前，讓學(xué)生自己動(dòng)手制備培養(yǎng)基，熟悉培養(yǎng)基配制的環(huán)節(jié)，并用他們接種培養(yǎng)的細(xì)菌進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。這不僅提高了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技能，也培養(yǎng)了學(xué)生強(qiáng)烈的工作責(zé)任心。

3、強(qiáng)化基本技能：

食品微生物實(shí)驗(yàn)課開(kāi)始時(shí)，講明實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求、步驟和注意事項(xiàng)，努力使實(shí)驗(yàn)成功的要求變成學(xué)生頭腦中的指令，使每位同學(xué)都全神貫注地投入到實(shí)驗(yàn)當(dāng)中去。從最基本的操作技術(shù)做起，抓住實(shí)驗(yàn)課上一切可以利用的機(jī)會(huì)，采取多種形式強(qiáng)化基本技能。具體如下：

（1）教師進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求、步驟和注意事項(xiàng)的詳細(xì)講解。

（2）以多媒體的形式將預(yù)先錄制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程向?qū)W生播放。這樣既可以回顧理論教學(xué)內(nèi)容加深實(shí)驗(yàn)印象，又可使學(xué)生初步了解實(shí)驗(yàn)過(guò)程、實(shí)驗(yàn)步驟及實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵操作，幫助掌握實(shí)驗(yàn)技能。

（3）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)總結(jié)，認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫(xiě)作和批閱，從中找出問(wèn)題并進(jìn)行集中答疑，進(jìn)一步修正學(xué)生實(shí)驗(yàn)中的錯(cuò)誤。

四、要求學(xué)生學(xué)寫(xiě)專(zhuān)題綜述，培養(yǎng)學(xué)生獲取知識(shí)的方法和能力

微生物學(xué)作為一門(mén)重要的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課，它既是基礎(chǔ)課，又是應(yīng)用科學(xué)，它的理論和應(yīng)用研究都非?；钴S，科技信息量猛增。由于教師的消化吸收能力有限，時(shí)間也有限，不可能在短短的幾十個(gè)學(xué)時(shí)內(nèi)把本學(xué)科的知識(shí)、技術(shù)百分之百地傳遞給學(xué)生。

為了使學(xué)生對(duì)微生物在其專(zhuān)業(yè)中的應(yīng)用和研究動(dòng)態(tài)有較全面的了解，以彌補(bǔ)教材的短缺與滯后，在開(kāi)始授課時(shí)，結(jié)合現(xiàn)實(shí)的情況，適時(shí)提出一些論題，要求學(xué)生課后到圖書(shū)館檢索，查找文獻(xiàn)資料，然后寫(xiě)出綜述，在課堂上指定幾名同學(xué)講解、然后點(diǎn)評(píng)。

篇9

摘要目的：探討六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器在層流手術(shù)間空氣檢測(cè)中的使用方法。方法：用FA-1型六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器按制定的操作流程對(duì)層流手術(shù)間進(jìn)行空氣采樣后計(jì)算結(jié)果，并評(píng)價(jià)效果。結(jié)果：各層流手術(shù)間的空氣中微生物數(shù)量均在GB50333制定的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)。結(jié)論：六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器具有操作簡(jiǎn)單、采樣效率高、結(jié)果更客觀(guān)的優(yōu)點(diǎn)，有助于手術(shù)室感染質(zhì)量監(jiān)控的開(kāi)展。

關(guān)鍵詞 六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器；層流手術(shù)間空氣檢測(cè)；應(yīng)用

doi：10.3969/j.issn.1672-9676.2014.02.084

醫(yī)院感染是指患者入院時(shí)既不存在也不處于潛伏期而在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的感染，包括在醫(yī)院內(nèi)獲得而于出院后發(fā)病的感染。手術(shù)室是醫(yī)院感染控制的重點(diǎn)科室。由于層流手術(shù)間的廣泛使用，層流手術(shù)間的空氣監(jiān)測(cè)則是手術(shù)室感染質(zhì)量監(jiān)控的一項(xiàng)重點(diǎn)工作。為此，我手術(shù)室引進(jìn)三臺(tái)FA-1型六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器對(duì)手術(shù)間及輔助區(qū)域進(jìn)行空氣監(jiān)測(cè)，現(xiàn)將方法介紹如下。

1特點(diǎn)

六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器是由6個(gè)撞擊器組合成一體，每一級(jí)實(shí)際是一個(gè)單級(jí)采樣器，利用六次反復(fù)撞擊原理，絕大部分粒子都撞擊下來(lái)，因而它采集到的粒子大小范圍較廣，而且有更高的采樣效率。

2工作原理

六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器模擬人體呼吸道的結(jié)構(gòu)及空氣動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)，采用撞擊原理將懸浮在空氣中的微生物粒子按大小分別采集在培養(yǎng)皿上，然后做細(xì)菌培養(yǎng)，分析結(jié)果。

3操作步驟

3.1物品準(zhǔn)備準(zhǔn)備六級(jí)撞擊器，主機(jī)，定時(shí)器，橡膠管，操作臺(tái)， 無(wú)菌治療巾2塊，無(wú)菌手套，無(wú)菌紗布，75%酒精，每個(gè)采樣器準(zhǔn)備7個(gè)培養(yǎng)皿（6個(gè)操作組，1個(gè)操作對(duì)照組），另準(zhǔn)備1個(gè)制作對(duì)照組（由感染辦準(zhǔn)備）。

3.2環(huán)境準(zhǔn)備采樣前提前30 min通知保潔人員進(jìn)行物體表面清潔，打開(kāi)層流，關(guān)閉房間門(mén)，靜置30 min。

3.3操作步驟洗手，戴口罩，戴無(wú)菌手套，鋪置無(wú)菌操作臺(tái)，用無(wú)菌紗布蘸75% 酒精擦拭撞擊器（先外后內(nèi)）、主機(jī)、橡膠管，然后放于無(wú)菌操作臺(tái)上。將橡皮管與主機(jī)、撞擊器連接好，30 min后打開(kāi)房間，將無(wú)菌巾鋪于手術(shù)床上，再將機(jī)器放于手術(shù)床上；將培養(yǎng)皿按從上到下的順序放入臺(tái)座上，瓊脂面向上，將蓋扣在臺(tái)面上。操作對(duì)照組的準(zhǔn)備：在打開(kāi)任一操作組培養(yǎng)皿的同時(shí)打開(kāi)對(duì)照組培養(yǎng)皿，在蓋上臺(tái)座的同時(shí)蓋上對(duì)照組皿；掛上3個(gè)彈簧拉鉤，取下撞擊器的進(jìn)氣口的上蓋；將記時(shí)器設(shè)定為30 min，將機(jī)器插頭插在計(jì)時(shí)器上，再將記時(shí)器插在電源插座上。按下計(jì)時(shí)器的“倒計(jì)時(shí)”鍵，再按“電源開(kāi)關(guān)”，調(diào)節(jié)“流量調(diào)節(jié)旋鈕”，使流量計(jì)轉(zhuǎn)子穩(wěn)定在28.3 L/min，離開(kāi)房間；30 min后進(jìn)入房間，蓋上進(jìn)氣口上蓋，按從下到上的順序收回培養(yǎng)皿；將培養(yǎng)皿放入清潔容器，及時(shí)送至細(xì)菌室培養(yǎng)［1，2］；用中性洗滌劑或超聲波清洗撞擊器，如噴孔有堵塞，應(yīng)用高壓氣流或配備的細(xì)針清除。

4培養(yǎng)條件

將采樣后的培養(yǎng)皿倒置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)48 h。

5結(jié)果計(jì)算

空氣中微生物數(shù)量計(jì)算公式：空氣中微生物數(shù)量(CFU/m3)=所有平皿菌落數(shù)/［采樣時(shí)間(min)×28.3(L/min)］×1000

將得出的結(jié)果按手術(shù)間層流級(jí)別與GB50333制定的標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行比對(duì)，即可得知手術(shù)間空氣的質(zhì)量是否達(dá)標(biāo)。如超標(biāo)則應(yīng)對(duì)操作環(huán)節(jié)、培養(yǎng)皿、手術(shù)間對(duì)輔助區(qū)的壓差、層流設(shè)備等進(jìn)行排查，分析原因，進(jìn)行改進(jìn)。再按標(biāo)準(zhǔn)流程用撞擊式空氣微生物采樣器進(jìn)行采樣監(jiān)測(cè)。

6小結(jié)

隨著現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的飛速發(fā)展，傳統(tǒng)的空氣監(jiān)測(cè)方法“沉降法”無(wú)法適應(yīng)實(shí)際工作中空氣潔凈度監(jiān)測(cè)的需要。而六級(jí)篩孔撞擊式空氣微生物采樣器具有操作簡(jiǎn)單、采樣效率高、結(jié)果更客觀(guān)的優(yōu)點(diǎn)，有助于手術(shù)室感染質(zhì)量監(jiān)控的開(kāi)展，可作為醫(yī)院內(nèi)空氣細(xì)菌學(xué)監(jiān)測(cè)的常規(guī)方法推廣應(yīng)用。同時(shí)，制定簡(jiǎn)單、規(guī)范化的操作流程，對(duì)感控監(jiān)測(cè)員進(jìn)行規(guī)范化培訓(xùn)非常重要。

參考文獻(xiàn)

［1］孫敬，陳會(huì)，陳麗霞，等.醫(yī)院內(nèi)環(huán)境空氣細(xì)菌監(jiān)測(cè)方法學(xué)探討［J］.江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2006，24(5)：390-392.

［2］魏革，劉蘇君主編.手術(shù)室護(hù)理學(xué)［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2005：190-191.

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關(guān)鍵詞：微生物學(xué) 實(shí)驗(yàn)室管理 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 改革

中圖分類(lèi)號(hào)：G642 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-9795（2013）05（a）-0119-01

微生物學(xué)本身的特性決定了它很強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)性，而微生物實(shí)驗(yàn)也就順理成章的成為微生物學(xué)不可或缺的重要組成部分。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)作為生物的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課，其實(shí)驗(yàn)的理論和方法對(duì)現(xiàn)代生物科學(xué)的每個(gè)領(lǐng)域都有著重要的影響。特別是對(duì)于現(xiàn)代生命科學(xué)、食品科學(xué)和環(huán)境科學(xué)等都有極其重要的影響。因此，要想學(xué)生對(duì)生命科學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)以及生命科學(xué)的發(fā)展動(dòng)態(tài)有個(gè)系統(tǒng)的理解，就必須做好微生物學(xué)的研究教學(xué)工作。微生物學(xué)的教學(xué)關(guān)鍵還是實(shí)驗(yàn)研究，然而一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備先進(jìn)與否，更是作為評(píng)定高?？蒲兴降闹匾w現(xiàn)。作為高等本科院校，高效的實(shí)驗(yàn)室管理以及合理的實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革對(duì)學(xué)生創(chuàng)新能力的發(fā)展尤為重要。筆者就多年的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)以及近些年我校對(duì)于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改革，和對(duì)實(shí)驗(yàn)室的管理做出如下總結(jié)。

1 增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理力度，提升教學(xué)質(zhì)量

我們都知道合理的管理章程可為提升教學(xué)成果，培養(yǎng)和提升學(xué)生自主動(dòng)手及創(chuàng)新能力奠定良好的基礎(chǔ)。但是實(shí)驗(yàn)室的所有程序是一個(gè)完整系統(tǒng)，必須從細(xì)節(jié)做起，才能達(dá)到服務(wù)于教學(xué)、有利于學(xué)生學(xué)習(xí)目的。

1.1 強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室管理，更新健全各項(xiàng)管理制度

有條不紊的實(shí)驗(yàn)室管理制度，才能創(chuàng)造安全有序的實(shí)驗(yàn)環(huán)境，從而是實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)行。具體實(shí)施如下：安排特定人員管理實(shí)驗(yàn)室，且制定除院辦公室有備用鑰匙外，和實(shí)驗(yàn)管理人員配帶1把，其他人一律不得攜帶，從而確保了實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備安全。水災(zāi)、火災(zāi)的防控是實(shí)驗(yàn)室管理的基本。高校微生物實(shí)驗(yàn)室也建有“實(shí)驗(yàn)室安全制度”和“實(shí)驗(yàn)人員職責(zé)”等制度。便捷的常規(guī)管理不但縮減了工作量，而且還降低了工作難度，使效率在逐步提升中。我們要求學(xué)生使用試劑后及時(shí)放回原處，便于本組同學(xué)或下組同學(xué)使用。避免了學(xué)生使用后隨處亂放、不能及時(shí)清理的壞習(xí)慣，使得每次實(shí)驗(yàn)都能夠井然有序的進(jìn)行。這樣不但確保實(shí)驗(yàn)?zāi)芎翢o(wú)差錯(cuò)地開(kāi)展，而且加大了實(shí)驗(yàn)室管理的安全性。

1.2 加強(qiáng)儀器管理，確保實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)行

顯微鏡無(wú)疑是最常用的實(shí)驗(yàn)儀器，如果管理不當(dāng)會(huì)大大影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程。因此，在使用前要向?qū)W生多次強(qiáng)調(diào)務(wù)必要安全使用，其他儀器的使用也會(huì)同樣強(qiáng)調(diào)，效果非常明顯。為了便于檢修，我們將所有的實(shí)驗(yàn)儀器都進(jìn)行了編號(hào)，并將各儀器配有使用登記本，要求使用者在使用后及時(shí)登記使用情況。然后將其掛在有相應(yīng)編號(hào)的顯微鏡上，并將顯微鏡放入相應(yīng)編號(hào)的儲(chǔ)藏柜中，這樣整個(gè)實(shí)驗(yàn)室顯得特別整潔有序。學(xué)期結(jié)束前，我們對(duì)所有的顯微鏡實(shí)施徹底查看，將需要修理的進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，然后將結(jié)果提交到秘書(shū)辦公室，使其能夠即時(shí)得到修理，確保下學(xué)期實(shí)驗(yàn)時(shí)顯微鏡能夠正常使用。

2 強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革，適應(yīng)形勢(shì)發(fā)展需要

2.1 建立完善的考核制度

以往的生物教學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)于看重實(shí)驗(yàn)報(bào)告上的最后結(jié)果，卻疏忽了在整個(gè)過(guò)程中培養(yǎng)學(xué)生們的實(shí)地動(dòng)手能力。這種實(shí)驗(yàn)導(dǎo)致學(xué)生們覺(jué)得只要在最后填寫(xiě)的結(jié)論是對(duì)的就可以，根本不必實(shí)際操作，這種實(shí)驗(yàn)不僅失去的本身的意義，還大大地扼殺了學(xué)生參加實(shí)驗(yàn)的興趣。我們?cè)撊绾螒?yīng)對(duì)這種情況？為此我們對(duì)實(shí)驗(yàn)核制度做了修改，將考核內(nèi)容更改為從熟記實(shí)驗(yàn)報(bào)告―― 具體操作―― 真實(shí)做出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。通過(guò)此次實(shí)驗(yàn)制度的完善相信大幅度提高了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)積極性。

2.2 加強(qiáng)課堂整體連貫性

生物實(shí)驗(yàn)課是在每學(xué)年的第一學(xué)期開(kāi)課，為了使每個(gè)實(shí)驗(yàn)達(dá)到預(yù)期效果。在基礎(chǔ)技能培訓(xùn)中，我們將實(shí)驗(yàn)步驟按順序分為：基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、微生物的形態(tài)觀(guān)察實(shí)驗(yàn)、微生物數(shù)量的鑒定、細(xì)胞大小鑒定和微生物生理生化指標(biāo)的測(cè)定。培養(yǎng)基的制備及高壓滅菌實(shí)驗(yàn)，該實(shí)驗(yàn)中制備的大量培養(yǎng)基可以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。通過(guò)整個(gè)過(guò)程，器皿和儀器的使用方法將深入學(xué)生大腦，以及是學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)基本理論得到進(jìn)一步的了解，可在原理上更進(jìn)一步理解每一步驟的含義，在操作上不斷領(lǐng)會(huì)每個(gè)細(xì)節(jié)的注意事項(xiàng)，這樣熟練整個(gè)操作過(guò)程，養(yǎng)成較好的實(shí)驗(yàn)操作習(xí)性，為以后的深入研究墊下結(jié)實(shí)的基礎(chǔ)。

2.3 讓學(xué)生自主實(shí)施實(shí)驗(yàn)

為了鍛煉學(xué)生實(shí)驗(yàn)的基本功，強(qiáng)化學(xué)生實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力，需要對(duì)《微生物學(xué)》課程實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化。驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，學(xué)生只能學(xué)到很多底層的操作技能，卻無(wú)法將所學(xué)內(nèi)容與實(shí)踐相聯(lián)系起來(lái)。讓學(xué)生領(lǐng)悟課堂上所學(xué)的實(shí)驗(yàn)技能，去進(jìn)一步制定出新的方案，將不同的實(shí)驗(yàn)技能做到綜合運(yùn)用。這不光讓學(xué)生掌握了實(shí)驗(yàn)理念，更鞏固了實(shí)驗(yàn)技術(shù)，而且還提升了學(xué)生的積極自主操作技能。

傳統(tǒng)理念中，實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備都是由教師們進(jìn)行，學(xué)生完全是被動(dòng)學(xué)習(xí)知識(shí)，實(shí)驗(yàn)課時(shí)他們只需要按照實(shí)驗(yàn)步驟做下去即可。為了改變這一局面，學(xué)生都是自己著手準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)，自己動(dòng)手的學(xué)生不但鞏固了實(shí)驗(yàn)課所學(xué)內(nèi)容，他們的自主動(dòng)手能力也得到了大大的進(jìn)步，明顯高于其他同學(xué)，保證了整節(jié)課的順利進(jìn)行。學(xué)生參與準(zhǔn)備不但減輕了實(shí)驗(yàn)老師的準(zhǔn)備工作量，還使學(xué)生親身體驗(yàn)了準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的煩瑣和辛苦，為他們以后做其它方面的實(shí)驗(yàn)和畢業(yè)設(shè)計(jì)奠定了扎實(shí)的地基。

3 結(jié)語(yǔ)

總之，一節(jié)實(shí)驗(yàn)課成功的進(jìn)行和良好的實(shí)驗(yàn)室管理是密不可分的。近幾年，通過(guò)我們堅(jiān)持不懈地強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室的管理與工作方法的改革，收效非常明顯。學(xué)生不但對(duì)微生物學(xué)這門(mén)看似枯燥無(wú)味的學(xué)科有了濃厚的學(xué)習(xí)興趣，而且進(jìn)一步調(diào)動(dòng)了教師們對(duì)微生物學(xué)理論教學(xué)和實(shí)驗(yàn)教學(xué)的積極性。只要不斷強(qiáng)化自己，勇于創(chuàng)新，堅(jiān)持將實(shí)驗(yàn)理念和實(shí)踐相結(jié)合的原則，消除學(xué)生的散漫氣氛，實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量必定還逐漸得到升級(jí)，教學(xué)改革也將推向縱深。

參考文獻(xiàn)

[1] 李順鵬.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2003（3）.