導(dǎo)語：如何才能寫好一篇頂級(jí)生活，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

一位名叫血紅的網(wǎng)絡(luò)，一不小心就成了其中的一位。

有人說，他代表著中國(guó)網(wǎng)絡(luò)奇幻小說的一個(gè)時(shí)代，也有人說，他是中國(guó)網(wǎng)絡(luò)奇幻小說的第一掘金人。

打開百度百科，如果你輸入“血紅”二字，第一個(gè)詞條就是關(guān)于這位網(wǎng)絡(luò)作家的：原名劉煒，年齡30歲，畢業(yè)于武漢大學(xué)計(jì)算機(jī)專業(yè)。2003年起，開始從事網(wǎng)絡(luò)小說的創(chuàng)作，數(shù)年下來，完成了《升龍道》、《龍戰(zhàn)星野》、《神魔》、《邪風(fēng)曲》、《逆龍道》等多部網(wǎng)絡(luò)小說，其中《升龍道》僅在“起點(diǎn)網(wǎng)”的點(diǎn)擊率就達(dá)到了18050714，被讀者譽(yù)為“網(wǎng)絡(luò)第一人”，是2004年“起點(diǎn)網(wǎng)”惟一年薪超百萬網(wǎng)絡(luò)。血紅的寫作以超高的寫作速度和強(qiáng)大的情節(jié)控制能力著稱，文風(fēng)獨(dú)特，極易辨認(rèn)，作品主角通常都帶有獨(dú)特的市井氣息。

據(jù)了解，血紅開始在“起點(diǎn)中文網(wǎng)”寫作的時(shí)候，是靠作品點(diǎn)擊率賺錢的。例如網(wǎng)民看小說按千字2分錢收費(fèi)，他上傳1萬字，如果有10萬人點(diǎn)擊閱讀，那么就產(chǎn)生2萬元的收入，網(wǎng)站與作者是四六分成，分成后，他賺到1.2萬元。

不過像他這樣年收入能超過300萬元的并不多。他說現(xiàn)在有二三十萬人從事網(wǎng)絡(luò)寫作，但多數(shù)人賺的只是幾包煙錢，新人靠一本書就紅還比較困難。對(duì)自己的成功，他主要?dú)w結(jié)為運(yùn)氣好，因?yàn)槌龅涝?，所以有一批鐵桿粉絲，有一定的名氣，稿費(fèi)自然要高一些。

血紅一天的生活記錄

8:00

當(dāng)很多上海的小白領(lǐng)正擁擠在地鐵里或塞車在馬路上時(shí)，住在浦東的網(wǎng)絡(luò)血紅才剛好睡到“自然醒”。對(duì)他來說，8點(diǎn)還很早，如果前一天晚上喝過酒，他起得更晚，比如9點(diǎn)。2002年，剛走出大學(xué)校園的血紅，也跟那些白領(lǐng)一樣，每天匆忙起床，匆匆走進(jìn)寫字樓。這種狀態(tài)并沒維持太久，3個(gè)月后，他因?yàn)槿穗H關(guān)系被那家IT公司掃地出門。2003年，家人安排他進(jìn)了朋友的公司，因?yàn)楣ぷ髑彘e，也因?yàn)橄矚g寫作，他開始在“起點(diǎn)中文網(wǎng)”上寫東西。2004年，他辭職去了上海，租房專職寫作。

9:00

開始看書。血紅看書很雜，眼下正在看的是《丁丁歷險(xiǎn)記》、《中國(guó)修辭學(xué)》。至于8點(diǎn)起床還是9點(diǎn)起床，對(duì)血紅沒什么影響。因?yàn)楹?jiǎn)單的早點(diǎn)后，他要做的不過是看書。雖是網(wǎng)絡(luò)，但血紅更愿意看傳統(tǒng)出版物，而且內(nèi)容很雜。他說網(wǎng)上寫得好的基本都是理科出身，這些人的優(yōu)點(diǎn)是寫東西比較嚴(yán)謹(jǐn)，對(duì)情節(jié)的把握比較深刻，但缺點(diǎn)是文筆都不太好，需要慢慢積累經(jīng)驗(yàn)。

11:00

打開音箱，伴著輕音樂，血紅開始一天惟一的工作：碼字。他寫東西時(shí)很少分心，基本不停。眼下他正在寫的是新作《人途》。這部作品從2008年12月起在“17K”上線連載。對(duì)血紅而言，他寫小說不會(huì)預(yù)先寫什么提綱，隨意性很大，不會(huì)過多考慮作品構(gòu)架、人物設(shè)置等。另外，讀者的參與也是重要依據(jù)。很多情節(jié)走向是跟著讀者的口味和評(píng)論走的。主角最后被殺光的情節(jié)很少出現(xiàn)，因?yàn)樽x者不會(huì)答應(yīng)，讀者更愿意看喜劇，不愿意看悲劇。

13:00

1萬字順利寫完。他進(jìn)入郵箱粘貼好，輸入編輯地址，按下發(fā)送鍵，這意味著他今天一半的收入已經(jīng)到手――至少5000元。1萬字是他比較常態(tài)的寫作狀態(tài)，如果心情好可能會(huì)寫上1.5萬字。發(fā)稿之后是簡(jiǎn)單的午飯。像血紅這樣的，寫1萬字跟玩兒一樣。因?yàn)槊總€(gè)字都有稿費(fèi)，字?jǐn)?shù)越多稿費(fèi)越多，寫得少的話可能還賺不夠上網(wǎng)費(fèi)。而且網(wǎng)絡(luò)讀者對(duì)文字的要求不像傳統(tǒng)讀者那么高，于是就“成就”了網(wǎng)絡(luò)的“井噴”式創(chuàng)作。

14:00

打開QQ，一邊與讀者群的人閑扯，一邊去“起點(diǎn)”、“17K”等論壇看別人發(fā)表的東西。血紅有4個(gè)讀者群，都是他的粉絲建的。其中一個(gè)超級(jí)群里有300多人，另3個(gè)群里平均每個(gè)有一百七八十人。因?yàn)槿硕啵谌豪锊豢赡茏屑?xì)聊什么，常常是這邊忽悠兩旬，那邊忽悠兩旬，不外乎是預(yù)告一下新書情節(jié)，或者說說自己今天的情緒，都是無關(guān)痛癢的話。除了網(wǎng)站舉行的讀者見面會(huì)，他很少私下與讀者見面，行走江湖，安全第一。見男的，不外乎就是喝酒，喝了兩次胃出血后，就不再見了。見女的，容易惹麻煩，他更不見。這些粉絲，很多都跟隨他好幾年了。他說，自己當(dāng)初在網(wǎng)上寫作時(shí)，成名相對(duì)容易，因?yàn)槟菚r(shí)認(rèn)真寫的不過幾十個(gè)人。現(xiàn)在則翻了上百倍。他說自己屬于先占坑的，只要每部作品質(zhì)量還可以，比上本有點(diǎn)改進(jìn)，就能繼續(xù)賺稿費(fèi)。

16:00

篇2

那天坐地鐵，上班高峰段，自然是百分百的沙丁魚罐頭。車門邊有一條年輕的美女沙丁魚很是惹眼，留著黃色披肩發(fā)，戴著大框眼鏡，耳朵里塞著耳機(jī)，手里捏著手機(jī)，“旁若無魚”地沉浸于自己的視聽世界，好像這個(gè)罐頭就是一泓魚池，身在其中，便是如魚得水，悠然自若哉！然而，一個(gè)緊急剎車，正專注于音樂世界的美女沙丁魚在慣性作用下一頭撲入了身旁一尾中年男魚懷中。

中年男魚幸運(yùn)地被天上掉下來的餡餅砸到，他無辜地?fù)肀е琅~，臉上霎時(shí)蕩漾起一陣幸福的紅暈。美女沙丁魚一聲尖叫，撐住中年男魚胸膛想推開他，可是車廂內(nèi)擁擠到幾無縫隙，兩條魚尷尬的推搡恰似纏綿的糾繞。美女魚惱羞成怒，不知是要?jiǎng)游?，還是要掩住那張湊得實(shí)在太近的臉，揚(yáng)起手朝中年男魚面門甩去。車門恰在那時(shí)開啟，很不幸，美女魚的眼鏡在她自己的揚(yáng)手挑撥下悠然脫離鼻梁，飛出了罐頭，落到了站臺(tái)上。更不幸的是，中年男魚的“腦袋”居然也像一顆軟塌塌的黑球，脫離它原來安放的肩膀，追隨著美女魚的眼鏡飛射而出，沉甸甸地落于站臺(tái)，“呼啦啦”一下?lián)湓诹嗣琅~的眼鏡之上。

整車魚頓時(shí)發(fā)出一片驚叫聲，扭頭看車廂內(nèi)的中年男魚，這條可憐的沙丁魚正頂著他那顆光芒四射的禿腦袋，目瞪口呆地盯著站臺(tái)水泥地上已然脫離主體的黑發(fā)“腦袋”，臉上的幸福紅暈早已被羞憤的煞白掩蓋，顫抖的嘴唇里爆出一聲慘烈的呼救：“我的假發(fā)套！”

整車廂的驚叫聲立即被一陣哄堂大笑替代，笑聲中，美女魚的尖叫脫口而出：“你賠我眼鏡！”

這一聲喊叫讓中年男魚霎時(shí)怔住，他看了看不再戴著眼鏡的美女魚，又看了看站臺(tái)上緊依在一起的眼鏡和黑色發(fā)套，終于爆發(fā)出一聲發(fā)自丹田的憤怒吼叫：“你賠我假發(fā)套！”

接下來，這兩條年齡差距懸殊的沙丁魚便如一對(duì)反目成仇的老夫少妻，開始了喋喋不休的爭(zhēng)吵。三兩聲虛弱的勸架夾雜其中：“不要吵了，車門要關(guān)了?！?/p>

正在危急關(guān)頭，站在這兩人身后的一個(gè)瘦男孩，哦不，一條年輕的沙丁男魚，忽然撥開爭(zhēng)吵的兩條魚，一個(gè)箭步?jīng)_出車門，迅速撿起假發(fā)套和眼鏡框，直起身回頭快速朝車門內(nèi)用力一擠。青年沙丁男魚一手托著眼鏡，對(duì)氣急敗壞的美女魚朗朗而道：“凹凹造型的，又沒有鏡片，摔不壞，別叫人家賠啦?！?/p>

說完，又把另一只手里的假發(fā)套往中年男魚頭上一扣：“很好哦，沒壞，大叔，還能戴?！?/p>

美女魚接過鏡框，羞怒而道：“這是國(guó)外買的原裝名牌貨，你有錢也賠不起……”聲音明顯輕了許多。

篇3

關(guān)鍵詞 生活垃圾；微生物；除臭

中圖分類號(hào) Q939.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2011）12-0270-01

隨著我國(guó)城市化進(jìn)程的加快，城市人口日益增多，隨之而來的是城市生活垃圾高速增加。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，近年來我國(guó)垃圾增長(zhǎng)率達(dá)10％以上，每年產(chǎn)生近1.5億t。全國(guó)600多座城市已有2/3的大中城市陷入生活垃圾的包圍之中。這些城市固體廢棄物在轉(zhuǎn)運(yùn)、堆放處理的過程中產(chǎn)生大量臭氣，造成嚴(yán)重的環(huán)境污染。惡臭氣體按其組成可分成5類：含硫化合物，如硫化氫、二氧化硫、硫醇等；含氮化合物，如氨氣、胺類、吲哚等；鹵素及衍生物，如氯氣、鹵代烴等；烴類及芳香烴；含氧有機(jī)物，如醇、酚、醛、酮等[1]。氣相色譜檢測(cè)表明，城市生活垃圾臭氣的主要成分為氨（NH3）和硫化氫（H2S）[2-4]。該文通過分離和篩選生活垃圾的有效除臭菌株，來減輕垃圾中惡臭氣體對(duì)環(huán)境的污染[5]。

1 材料與方法

1.1 培養(yǎng)基

試驗(yàn)設(shè)3種培養(yǎng)基，即牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、高氏一號(hào)培養(yǎng)基、馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基，分別用于培養(yǎng)細(xì)菌、放線菌、真菌[5]。

1.2 菌株分離方法

從屈原垃圾填埋場(chǎng)中采集樣品，經(jīng)篩選獲得兼性厭氧菌和兼性好氧菌，在30 ℃的條件下，分別采用相應(yīng)的培養(yǎng)基劃線或系列稀釋法[6]，獲得若干菌株。

1.3 篩選方法

1.3.1 初篩。在發(fā)臭垃圾中按10%接種量接入所試菌株，以自來水作為對(duì)照，分別在間隔24、48、72 h后用感觀法初步判斷各菌株的除臭效果，經(jīng)感官篩選出除臭能力較強(qiáng)的微生物，進(jìn)行復(fù)篩試驗(yàn)[1]。

1.3.2 復(fù)篩。①降氨試驗(yàn)：取18 mL菌液于2 L大燒杯中，再加500 mg/L氨水2 mL；向大燒杯中放入裝有20 mL稀硫酸吸收液的50 mL小燒杯，蓋上雙層塑料薄膜密封[1]。②降硫化氫試驗(yàn)：取10 mL菌液于2 L大燒杯中，再加10 mg/L硫化氫溶液10 mL，向大燒杯中放入裝有20 mL氫氧化鎘吸收液的50 mL小燒杯，蓋上雙層塑料薄膜密封[1]。

以上處理均以等量的去離子水作為對(duì)照。每個(gè)處理3次重復(fù)。將密封后燒杯置于（30±2）℃的培養(yǎng)箱中，24 h后，取出小燒杯檢測(cè)氨或硫化氫氣體的釋放量。氨采用納氏試劑比色法測(cè)定[6]，硫化氫采用亞甲基藍(lán)比色法測(cè)定[7]。

1.4 垃圾除臭試驗(yàn)

試驗(yàn)用垃圾的主要成分為剩飯菜及果蔬等富含蛋白質(zhì)的物質(zhì)。每盆裝5 kg垃圾，各盆的菌種使用量為垃圾重量的3%，將菌種稀釋10倍后加入垃圾中拌勻。對(duì)初篩試驗(yàn)中有除臭效果的微生物進(jìn)行分類編號(hào)，字母B、F、Y分別表示細(xì)菌、絲狀真菌、酵母菌，字母后面加相應(yīng)數(shù)字表示菌株號(hào)。試驗(yàn)設(shè)8個(gè)處理，即處理1：B2+B10；處理2：B10+Y3；處理3：B2+Y2；處理4：Y2+Y3；處理5：B2+Y2+Y3；處理6：B2+B10+Y3；以加自來水作對(duì)照（CK1）；以不加任何物質(zhì)作空白對(duì)照（CK2）。3次重復(fù)。置于室溫下（30±2）℃。間隔24 h，采用感觀法評(píng)價(jià)臭氣等級(jí)[8]。

2 結(jié)果與分析

2.1 初篩菌株的除臭效果

對(duì)分離到的菌株均進(jìn)行了初步的降氨及降硫化氫試驗(yàn)，并對(duì)菌株進(jìn)行了初步的分類，結(jié)果如表1所示。

可以看出，放線菌沒有降氨效果，其他各類微生物的降氨結(jié)果也表現(xiàn)各異，48株細(xì)菌中6株表現(xiàn)有降氨效果，20株絲狀真菌中僅有1株有降氨效果，22株酵母菌中有2株有降氨能力。降氨菌的分離效果以細(xì)菌最好，效果達(dá)12.5%；絲狀真菌降氨效果最低，為5%。這可能是由于垃圾中細(xì)菌的繁殖能力高于絲狀真菌和酵母，易形成優(yōu)勢(shì)菌群，從而表現(xiàn)較好的降氨能力。而相比之下能快速降硫化氫的微生物較少，且能有效降硫化氫的菌株主要是細(xì)菌和酵母。這可能與取樣時(shí)成分及深度的影響有關(guān)。初篩試驗(yàn)只是定性試驗(yàn)，還需做定量試驗(yàn)，以確定各菌株除臭能力的強(qiáng)弱。

2.2 復(fù)篩菌株的除臭效果

部分在初篩試驗(yàn)中具有降氨或降硫化氫能力的微生物在復(fù)篩的定量試驗(yàn)中也表現(xiàn)出良好的除臭能力[1]，如Y3對(duì)氨氣的去除率為82.0%（表2）。有一部分菌株在初篩試驗(yàn)中具有降氨能力，但在復(fù)篩試驗(yàn)中的降解能力明顯下降，如B1、B4、B5、F1，因此，復(fù)篩試驗(yàn)在除臭菌株分離中是必要的。

2.3 垃圾除臭效果

通過人的嗅覺器官對(duì)惡臭氣體的反應(yīng)來進(jìn)行評(píng)價(jià)和測(cè)定。在垃圾中加菌株處理24、48 h后的評(píng)定結(jié)果見表3。

可以看出，經(jīng)添加菌株后，各處理的垃圾臭味明顯降低，但處理3在加菌24 h后臭氣有所回升；處理5、6則表現(xiàn)出較好的除臭效果，臭味明顯降低。因試驗(yàn)所用垃圾臭氣源的氨氣產(chǎn)量較高，所以各處理的除臭效果均表現(xiàn)較好。但是不同地域垃圾的成分較復(fù)雜，為了進(jìn)一步確定所篩選菌株的除臭效果，還需要在更大范圍內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。研究發(fā)現(xiàn)，垃圾在處理48 h后，各有效處理的臭氣開始回升[1]。因此，還需進(jìn)一步研究其使用量及使用次數(shù)等問題。

3 結(jié)論

（1）通過初篩與復(fù)篩相結(jié)合的方法，有效篩選出降氨效果較好的微生物B2、Y3和降硫化氫效果好的微生物B10、Y2。

（2）在垃圾中加入混合除臭菌株后，收到了較好的除臭效果，垃圾臭味在24 h內(nèi)明顯降低。因此，幾個(gè)或多個(gè)菌株的協(xié)同除臭效果值得進(jìn)一步研究。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 許麗娟，任杰，張德元，等.城市生活垃圾除臭微生物的篩選及效果測(cè)定[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（11）：19-21.

[2] 石磊，邊炳鑫，趙由才，等.城市生活垃圾衛(wèi)生填埋場(chǎng)惡臭的防治技術(shù)進(jìn)展[J].環(huán)境污染治理技術(shù)與設(shè)備，2005，6（2）：6-9.

[3] 趙由才.城市生活垃圾衛(wèi)生填埋場(chǎng)技術(shù)與管理手冊(cè)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1999：125-139.

[4] 馮明謙.城市生活垃圾堆肥廠中的除臭技術(shù)[J].四川環(huán)境，2002，21（2）：44-46.

[5] 陳書安，黃為一.除臭微生物分離與效果測(cè)定[J].上海環(huán)境科學(xué)，2002，21（9）：571-573.

[6] 周耀明，張恒.生活垃圾降解菌除臭效果比較研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（26）：8312-8313.

篇4

關(guān)鍵詞：煤基活性炭；炭化；活化；再生

中圖分類號(hào)： TQ424.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)：

引言：活性炭又叫多孔炭，是一種具有高度發(fā)達(dá)的孔隙結(jié)構(gòu)和極大表面積的人工炭材料，其物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，耐酸堿，能經(jīng)受水濕、高溫及高壓，不溶于水和有機(jī)溶劑，使用失效后可以再生，是一種循環(huán)經(jīng)濟(jì)性材料。并且活性炭的制備原料十分廣泛，主要分為木質(zhì)類和煤質(zhì)類原料。木質(zhì)類原料主要有果殼，農(nóng)作物秸稈及紙漿廢液等；煤質(zhì)類原料主要有褐煤，無煙煤，焦炭煤及石油，石油瀝青焦等。

一、煤基活性炭的生產(chǎn)

1、炭化

煤基活性炭的生產(chǎn)工藝中，炭化的主要目的是使煤分子結(jié)構(gòu)中的含氧官能團(tuán)斷裂并使得自由基芳環(huán)進(jìn)行分解聚合，從而可以增加碳的含量，為活化過程中需要形成的孔隙碳結(jié)構(gòu)進(jìn)行培育。煤基活性炭的炭化過程，簡(jiǎn)單的說就是在隔絕空氣，不加入化學(xué)品的條件下熱解。炭化過程首先是包括氫、氧等大部分的非碳元素經(jīng)過分解之后，以氣態(tài)的形式釋放，之后一些自由的碳元素互相結(jié)合，形成有序結(jié)構(gòu)，也就是石墨微晶單元形式，然后，那些無序的碳就可以填充進(jìn)去，經(jīng)過活化之后形成發(fā)達(dá)的空隙結(jié)構(gòu)活性炭。

2、活化

煤基活性炭的活化過程就是利用水蒸氣和二氧化碳等對(duì)碳進(jìn)行弱氧化的過程?；罨^程分為化學(xué)活化法和物理活化法，所謂化學(xué)活化法是將化學(xué)藥劑與含碳的物質(zhì)進(jìn)行混合，然后結(jié)合炭化進(jìn)行活性炭的生產(chǎn)；而物理活化法是利用水蒸氣和二氧化碳、氧氣等與含碳物質(zhì)炭化之后產(chǎn)生的半焦進(jìn)行反應(yīng)的一種活化方法，它也是生產(chǎn)中常用的方法。

二、影響煤基活性炭質(zhì)量的因素

1、原料煤性質(zhì)

煤基活性炭的生產(chǎn)以及活性炭質(zhì)量的主要影響因素就是原料煤的性質(zhì)，原料煤性質(zhì)不同會(huì)對(duì)活性炭的質(zhì)量造成不同的影響。比如說不同的煤種中，含有碳、氫、氧的含量不同，煤的化學(xué)結(jié)構(gòu)也不同，因此在炭化后產(chǎn)生的半焦的特性就不同。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，原煤在沒有經(jīng)過處理時(shí)，大同的煤種效果是最好的。

2、炭化溫度

炭化過程中產(chǎn)生的半焦的性質(zhì)往往受到炭化溫度的影響，溫度過高，微孔的容積會(huì)有明顯的下降，強(qiáng)度就會(huì)相應(yīng)的增加。也就是說，煤的炭化溫度能夠直接影響碳化料的空隙結(jié)構(gòu)以及性質(zhì)。經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)，不難發(fā)現(xiàn)，600℃是炭化的最佳溫度，除此之外，在炭化過程中一定要注意防止氧化，否則就會(huì)在很大程度上影響孔隙的碳結(jié)構(gòu)。

3、活化溫度

據(jù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，一般水蒸氣的活化溫度控制在800―900℃，煙道氣活化溫度一般控制在900―950℃，而空氣的話化溫度大約控制在600 ℃左右，而這些活化溫度都是根據(jù)所用的活化劑與在炭化過程中形成的碳骨架發(fā)生反應(yīng)的最佳溫度以及催化劑使用過程中的最佳分解溫度來確定的。

4、活化時(shí)間

活化時(shí)間的長(zhǎng)短也間接影響著煤基活性炭的生產(chǎn)，在生產(chǎn)中，隨著活化時(shí)間的不斷延長(zhǎng)，活性炭的碘吸附值就會(huì)呈現(xiàn)出先增大后減小的變化趨勢(shì)，在一個(gè)小時(shí)左右會(huì)達(dá)到最大值。但是，如果活化的時(shí)間沒有得到控制，過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致采用的活化劑與空隙周圍的碳原子發(fā)生反應(yīng)，從而影響了石墨微晶的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，使得活性炭遭到過度的燒蝕，造成活性炭的吸附能力降低，影響活性炭的質(zhì)量。

5、煤中礦物質(zhì)

灰分的含量是評(píng)價(jià)煤基活性炭的一個(gè)重要指標(biāo)，而灰分就是煤中的礦物質(zhì)以及有機(jī)成分經(jīng)過灼燒后生成的產(chǎn)物，很多研究表明，灰分的存在會(huì)對(duì)活性炭的性能造成不利的影響，因此要盡量降低煤基活性炭中灰分的含量。而煤中的一些無機(jī)成分能夠降低活性炭的著火點(diǎn)以及活性炭灼燒的熔點(diǎn)，從而就可以使灰分和活性炭成功的脫離開來，也就自然降低了活性炭中灰分的含量，并增強(qiáng)活性炭的質(zhì)量。

三、活性炭再生與再生效果評(píng)價(jià)

1、活性炭再生研究

活性炭的再生從經(jīng)濟(jì)和環(huán)保角度來看很有必要?；钚蕴康脑偕h(huán)利用技術(shù)已經(jīng)成為反映活性炭工業(yè)水平高低的重要標(biāo)志?；钚蕴康脑偕褪鞘故ノ侥芰Φ幕钚蕴坑梦锢?、化學(xué)或生物化學(xué)等方法，將所吸附的物質(zhì)除去，恢復(fù)其吸附能力，以便重新用于吸附操作的過程。國(guó)內(nèi)外學(xué)者提出了各種活性炭再生工藝技術(shù)，如溶劑再生法，熱再生法，濕式氧化法等。溶劑再生法就是利用活性炭，溶劑與被吸附質(zhì)三者之間的相平衡關(guān)系，通過改變溫度、溶劑的pH值等條件打破吸附平衡，將吸附質(zhì)從活性炭上脫附下來。溶劑再生法一般比較適用于那些可逆吸附，如對(duì)高濃度、低沸點(diǎn)有機(jī)廢水的吸附。它的針對(duì)性較強(qiáng)，往往一種溶劑只能脫附特定污染物，而水處理過程中的污染物種類繁多，變化不定，因此一種特定溶劑的應(yīng)用范圍較窄。San Miguel等介紹活性炭的熱再生法，吸附飽和的活性炭通過干燥、高溫炭化和活化3個(gè)階段而得到再生?；钚蕴坎粌H是一種強(qiáng)的吸附劑，而且還是一種強(qiáng)的吸波材料，因此常與微波技術(shù)相結(jié)合而應(yīng)用與環(huán)保領(lǐng)域。微波的“體加熱”，誘導(dǎo)催化，選擇性和快速無滯后性是使其受青睞的主要原因。

kedding和Gitchel等人提出并進(jìn)行了濕式氧化法再生活性炭的研究工作。研究發(fā)現(xiàn)，該方法具有不需要脫水過程，炭的損失率較低和二次污染低等顯著優(yōu)點(diǎn)。濕式氧化法主要研究思路是在活性炭投入吸附前，預(yù)先在活性炭上負(fù)載具有催化氧化作用的物質(zhì)，以降低活性炭有機(jī)吸附質(zhì)的分解溫度，從而能有效地實(shí)現(xiàn)低溫再生和在線操作。

2、再生效果評(píng)價(jià)

活性炭的孔結(jié)構(gòu)和比表面積可通過BET氮吸附容量法測(cè)定，進(jìn)而分析其吸附能力；也可通過測(cè)定活性炭對(duì)指定溶液的吸附等溫線來比較其吸附性能大小。如采用苯酚靜態(tài)再吸附法，即通過測(cè)定苯酚質(zhì)量濃度獲得的吸附等溫線，進(jìn)而求得吸附容量，再確定活性炭再生效率。更有研究對(duì)測(cè)試方法作了改進(jìn)，由測(cè)試吸附等溫線改為測(cè)試有機(jī)物吸附值。

四、活性炭應(yīng)用與發(fā)展趨勢(shì)

我國(guó)的煤基活性炭技術(shù)大致經(jīng)歷了三個(gè)發(fā)展階段，包括單種煤生產(chǎn)活性炭、配煤生產(chǎn)活性炭以及催化活化生產(chǎn)活性炭?，F(xiàn)在，以煤作為原料的活性炭已經(jīng)在石化、食品、化工、電力等眾多領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用，而其出眾的對(duì)污染物的吸附能力也使它被廣泛的應(yīng)用在城市污水處理、工業(yè)廢水處理以及對(duì)水源的凈化中去，尤其是活性炭的脫硫技術(shù)更是在近年來得到了極大的發(fā)展。除此之外，在原料煤的處理方面，我國(guó)正在研究開發(fā)煤的深度脫灰技術(shù)，這對(duì)擴(kuò)展活性炭的應(yīng)用領(lǐng)域具有十分重要的意義。煤基活性炭應(yīng)用前景非常樂觀，因此，更要利用我國(guó)豐富的煤資源，加大對(duì)煤基活性炭應(yīng)用的開發(fā)和研究，為煤基活性炭的使用提供機(jī)會(huì)，從而使我國(guó)的煤基活性炭的發(fā)展取得更大的成就。

結(jié)束語：

在活性炭生產(chǎn)用原料煤處理方面，我國(guó)正在研究開發(fā)煤的深度脫灰技術(shù)(由于活性炭在食品、醫(yī)藥、化工、軍事等領(lǐng)域應(yīng)用時(shí)，對(duì)其中無機(jī)質(zhì)的種類和數(shù)量均有一定的要求，因?yàn)檫@些礦物質(zhì)或是使催化劑中毒、或是造成吸附分離產(chǎn)品在外觀品質(zhì)的劣質(zhì)化。尋求合理的方法脫除灰分，替代木質(zhì)活性炭在傳統(tǒng)領(lǐng)域的應(yīng)用，具有十分重要的意義。

參考文獻(xiàn)：

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[2]王秀芳。張會(huì)平，肖新顏，等．高比表面積活性炭研究進(jìn)展．功能材料，2005。36(7)：975―977．

篇5

學(xué)習(xí)成績(jī)不是非常好，但我卻在學(xué)習(xí)的過程中收獲了很多。首先是我端正了學(xué)習(xí)態(tài)度。在我考進(jìn)大學(xué)時(shí)，腦子里想的是好好放松從重壓下解放出來的自己，然而很快我就明白了，大學(xué)仍需努力認(rèn)真的學(xué)習(xí)?？吹街車耐瑢W(xué)們拼命的學(xué)習(xí)，我也打消了初衷，開始大學(xué)的學(xué)習(xí)旅程。其次是極大程度的提高了自己的自學(xué)能力。由于大學(xué)的授課已不再像高中時(shí)填鴨式那樣，而是一節(jié)課講述很多知識(shí)，只靠課堂上聽講是完全不夠的。這就要求在課下練習(xí)鞏固課堂上所學(xué)的知識(shí)，須自己鉆研并時(shí)常去圖書館查一些相關(guān)資料。日積月累，自學(xué)能力得到了提高。再有就是懂得了運(yùn)用學(xué)習(xí)方法同時(shí)注重獨(dú)立思考。要想學(xué)好只埋頭苦學(xué)是不行的，要學(xué)會(huì)“方法”，做事情的方法。古話說的好，授人以魚不如授人以漁，我來這里的目的就是要學(xué)會(huì)“漁”，但說起來容易做起來難，我換了好多種方法，做什么都勤于思考，遇有不懂的地方能勤于請(qǐng)教。在學(xué)習(xí)時(shí)，以“獨(dú)立思考”作為自己的座右銘，時(shí)刻不忘警戒。隨著學(xué)習(xí)的進(jìn)步，我不止是學(xué)到了公共基礎(chǔ)學(xué)科知識(shí)和很多專業(yè)知識(shí)，我的心智也有了一個(gè)質(zhì)的飛躍，能較快速的掌握一種新的技術(shù)知識(shí)，我認(rèn)為這對(duì)于將來很重要。在學(xué)習(xí)知識(shí)這段時(shí)間里，我更與老師建立了濃厚的師生情誼。老師們的諄諄教導(dǎo)，使我體會(huì)了學(xué)習(xí)的樂趣。我與身邊許多同學(xué)，也建立了良好的學(xué)習(xí)關(guān)系，互幫互助，克服難關(guān)?，F(xiàn)在我已經(jīng)大四，正在做畢業(yè)設(shè)計(jì)，更鍛煉了自我的動(dòng)手和分析問題能力，受益匪淺。

一直在追求人格的升華，注重自己的品行。我崇拜有巨大人格魅力的人，并一直希望自己也能做到。在大學(xué)生活中，我堅(jiān)持著自我反省且努力的完善自己的人格。四年中，我讀了一些名著和幾本完善人格的書，對(duì)自己有所幫助，越來越認(rèn)識(shí)到品行對(duì)一個(gè)人來說是多么的重要，關(guān)系到是否能形成正確的人生觀世界觀。所以無論在什么情況下，我都以品德至上來要求自己。無論何時(shí)何地我都奉行嚴(yán)于律己的信條，并切實(shí)的遵行它。平時(shí)友愛同學(xué)，尊師重道，樂于助人。以前只是覺得幫助別人感到很開心，是一種傳統(tǒng)美德。現(xiàn)在我理解道理，樂于助人不僅能鑄造高尚的品德，而且自身也會(huì)得到很多利益，幫助別人的同時(shí)也是在幫助自己?；仡櫵哪?，我很高興能在同學(xué)有困難的時(shí)候曾經(jīng)幫助過他們，相對(duì)的，在我有困難時(shí)我的同學(xué)們也無私的伸出了援助之手。對(duì)于老師，我一向是十分敬重的，因?yàn)樗麄冊(cè)谖裔葆宓臅r(shí)候指導(dǎo)幫助我。如果沒有老師的幫助，我可能將不知道何去何從。我現(xiàn)在領(lǐng)悟到，與其說品德是個(gè)人的人品操行，不如說是個(gè)人對(duì)整個(gè)社會(huì)的責(zé)任。一個(gè)人活在這個(gè)世界上，就得對(duì)社會(huì)負(fù)起一定的責(zé)任義務(wù)，有了高尚的品德，就能正確認(rèn)識(shí)自己所負(fù)的責(zé)任，在貢獻(xiàn)中實(shí)現(xiàn)自身的價(jià)值。

社會(huì)實(shí)踐能力有了很大提高。大學(xué)四年中，我參加了不少的校內(nèi)活動(dòng)和做過一些社會(huì)實(shí)踐。參加校內(nèi)的活動(dòng)可以認(rèn)識(shí)到更多的同學(xué)，也就增加了與其他同學(xué)交流和向其學(xué)習(xí)的機(jī)會(huì)，鍛煉了自己的交際能力，學(xué)到別人的長(zhǎng)處，認(rèn)清自己的短處。此外，還一直做班委和寢室長(zhǎng)，對(duì)自己既是壓力又是動(dòng)力。我喜歡做一些社會(huì)活動(dòng)，會(huì)讓大學(xué)生活更豐富多彩，做過家教、志愿者、推銷員和設(shè)計(jì)員等，有時(shí)會(huì)感到累些，但樂此不彼。

體育成績(jī)一向很好。我的體質(zhì)并非很出色，可是通過我的練習(xí)和對(duì)體育項(xiàng)目的理解，還是能很好的完成體育課的教授項(xiàng)目。我喜歡運(yùn)動(dòng)，基本對(duì)所有運(yùn)動(dòng)都感興趣，尤其是足球。在四年之后的今天，我的球技有了質(zhì)的提高，腳法和意識(shí)。我是從高一開始接觸足球，起步比較遲，可進(jìn)步很快，總能在同一水平的伙伴中踢一段時(shí)間后脫穎而出。我認(rèn)為這可能是由于抱定了要踢好的決心，也許還有那么點(diǎn)運(yùn)動(dòng)天賦。踢足球不僅鍛煉了身體，而且增強(qiáng)了團(tuán)隊(duì)精神和集體榮譽(yù)感。

個(gè)人認(rèn)為這個(gè)世界上并不存在完美的人，每個(gè)人都有自己的優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)，但關(guān)鍵是能否正視并利用它們。四年來，我不斷的自我反省，歸納了一些自己的優(yōu)缺點(diǎn)。

我的優(yōu)點(diǎn)是誠(chéng)實(shí)、熱情、性格堅(jiān)毅。我認(rèn)為誠(chéng)信是立身之本，所以我一直是以言出必行來要求自己的，答應(yīng)別人的事一定按時(shí)完成，記得有好幾次，同學(xué)或老師約了我見面，我答應(yīng)以后必定按時(shí)到達(dá)指定約會(huì)地點(diǎn)，即使有急事也從不失約，給他們留下了深刻的映像。由于待人熱情誠(chéng)懇，所以從小學(xué)到大學(xué)一直與同學(xué)和老師相處得很好，而且也很受周圍同學(xué)的歡迎，與許多同學(xué)建立起深厚的友誼。在學(xué)習(xí)知識(shí)的同時(shí)，我更懂得了，考慮問題應(yīng)周到，這在我的畢業(yè)論文設(shè)計(jì)中充分展示了出來。我這個(gè)人有個(gè)特點(diǎn)，就是不喜歡虎頭蛇尾，做事從來都是有始有終，就算再難的事也全力以赴，追求最好的結(jié)果，正因?yàn)槿绱?，我把自己的意志視為主要因素，相信只要有恒心鐵棒就能磨成針。一個(gè)人最大的敵人不是別的什么人，而是他本身。這么多年來，我一直都是在跟自己作戰(zhàn)，準(zhǔn)確地說，是和自己的意志戰(zhàn)斗?，F(xiàn)在回想起來，我確實(shí)比以前堅(jiān)毅了許多，但我不會(huì)松懈下來的。以上這些優(yōu)點(diǎn)，是我今后立身處世的根本，我應(yīng)該繼續(xù)保持，并不斷以此鞭策自己奮發(fā)向上。超級(jí)秘書網(wǎng)

我個(gè)人認(rèn)為自己最大的缺點(diǎn)就是喜歡一心兩用甚至多用。急功近利，喜歡一口氣學(xué)許多東西，但是貪多嚼不爛，即使最后都能學(xué)會(huì)，也已經(jīng)搞得自己很疲勞。如今想想，這樣其實(shí)并不好，正所謂貴在精而不在廣。如果我一段時(shí)期內(nèi)專注于一種學(xué)問，不求博但求精，相信一定能更深刻的理解并掌握這門知識(shí)。自從我發(fā)現(xiàn)自己有這個(gè)缺點(diǎn)和問題后，我常常警戒自己，步入社會(huì)后也不能一心兩用。

篇6

中圖分類號(hào)：G623.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1671-0568（2014）24-0098-02

一、背景導(dǎo)讀

《確定位置》是義務(wù)教育課標(biāo)本北師大版小學(xué)數(shù)學(xué)四年級(jí)上冊(cè)第六單元的第1課時(shí)，屬于空間與圖形領(lǐng)域的內(nèi)容，是在學(xué)生已經(jīng)掌握并會(huì)運(yùn)用前、后、左、右、上、下、第幾、東、南、西、北等一維空間的方位詞語描述物體所在位置的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步學(xué)維空間的確定，描述物體所在的位置。

在本節(jié)課中，筆者根據(jù)教學(xué)目標(biāo)調(diào)整了教學(xué)內(nèi)容，緊密結(jié)合學(xué)生熟悉的生活環(huán)境——教室來開展教學(xué)活動(dòng)，這樣學(xué)生更感興趣，學(xué)習(xí)更加投入。在實(shí)際情境中，學(xué)生用數(shù)對(duì)的方法表示位置過渡到在方格圖中用數(shù)對(duì)表示，是本節(jié)課的一個(gè)教學(xué)難點(diǎn)。在這個(gè)環(huán)節(jié)上充分發(fā)揮多媒體的優(yōu)勢(shì)，將一個(gè)具體的情境（淘氣班的座位圖）抽象為方格圖，讓學(xué)生更能直觀理解和接受。最后選取生活中幾個(gè)運(yùn)用數(shù)對(duì)知識(shí)的例子，進(jìn)一步開闊學(xué)生視野、拓展學(xué)生思維，讓他們體會(huì)到數(shù)學(xué)與生活的密切聯(lián)系，感受數(shù)學(xué)知識(shí)在生活中的應(yīng)用。

二、片斷與反思

[片斷一]創(chuàng)設(shè)情境，導(dǎo)入新課

師：很高興和大家一道學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)！老師希望通過今天的學(xué)習(xí)和大家成為好朋友，你們?cè)敢夂臀医慌笥褑幔吭诎嗬?，你有好朋友嗎？（學(xué)生踴躍舉手）請(qǐng)把他的名字告訴我，我來猜他的位置。

生：我的好朋友是XXX。（師隨意指認(rèn)幾位同學(xué)，都不對(duì)）

師：哎呀！老師猜了幾次都沒有猜對(duì)，你能提示一下嗎？

生：他在第3組。

師：你說的第3組是從老師的左邊還是右邊數(shù)起呢？

生：我是從我的左邊、老師的右邊數(shù)起的。

師：如果把從同學(xué)們左邊起的第一列定為第一組，第二列定為第二組，其他依次為第三、第四、第五……第八組，那你再說說他在第幾組，好嗎？

生：他在第5組。

師：（根據(jù)學(xué)生目光有意錯(cuò)指）是他嗎？（生搖了搖頭）他嗎？（生還是搖頭）

師：（故作懊惱地）老師還是猜不到，你能再給一點(diǎn)提示嗎？

生：他在第5組的第4個(gè)。

師（故意走到豎條的隊(duì)尾）：是這一位同學(xué)嗎？

生：不是。

師：他不正是第5組第4個(gè)嗎？

生：是從前往后數(shù)第4個(gè)。

師：那就一定是他了?。ㄈ嗤瑢W(xué)點(diǎn)了點(diǎn)頭）

師：看來，要想確定一個(gè)人的位置，不僅需要知道他在第幾組，還需要知道他在第幾個(gè)。今天，我們就一起來研究如何確定位置。（板書課題）

[反思]

教師巧妙地利用“希望通過今天的學(xué)習(xí)我們能成為好朋友！”“你們?cè)敢夂臀医慌笥褑?？”“在班里，你的好朋友是誰？”“告訴他的名字，我來猜他的位置！”這些貼近學(xué)生實(shí)際、親切自然的話語以及猜朋友的活動(dòng)，拉近了師生的情感距離，激發(fā)了學(xué)生興趣。看似隨意地交流，實(shí)則為師生開展學(xué)習(xí)搭建了一個(gè)平臺(tái)，是推進(jìn)教學(xué)順利進(jìn)行的基礎(chǔ)，不經(jīng)意間向?qū)W生滲透著坐標(biāo)系的思想：確定位置首先要確定觀察的順序或方向。

[片斷二]合作交流，探究新方法

師：有誰愿意向大家介紹你的好朋友？

生：我的好朋友是王馨悅，她在第3組的第5個(gè)。

師：好！請(qǐng)這位同學(xué)站起來，好嗎？（師走過去，摸著他的頭）認(rèn)識(shí)你很高興，老師希望也能和你成為朋友！同學(xué)們，你們能用自己的方法在白紙上表示出她在教室的位置嗎？（學(xué)生自主嘗試，師巡視后，組織學(xué)生交流）

師：誰愿意把你的方法展示給同學(xué)們看看？

生：我是用文字表示的：王馨悅位于教室的第3組第5個(gè)。

師：還有沒有不同的方法？

生：老師，我是用圖來表示的（如圖1），我用一個(gè)“X”代表一個(gè)人，我們班有8組同學(xué)，就畫了8條“X”，按照我們剛才確定的順序，王馨悅在第3組第5個(gè)的位置，將第3組第5個(gè)“X”換成“”，“”代表的人就是王馨悅。

師：這位同學(xué)的方法特別直觀，而且特別說明他是按我們剛才的順序確定王馨悅的位置，這樣一眼就能看清楚王馨悅坐在哪里了。你們還有其它方法嗎？

生：老師，我是用畫格子的方法表示的（如圖2）。我用豎行的格子表示組數(shù)，用橫行的格子代表在第幾排。王馨悅在第3組第5個(gè)，就在第3列第5行方格內(nèi)打了一個(gè)點(diǎn)，表示她就坐在這里。

師：剛才很多同學(xué)都介紹了自己的方法，你更喜歡哪種？說說你的理由。

生：我喜歡圖表的方法，因?yàn)橛脠D表表示非常直觀。

生：我喜歡文字表示的方法，因?yàn)橛梦淖趾?jiǎn)單、快捷。

生：我也喜歡圖表的方法，不過我喜歡的理由和X X X同學(xué)不同，我覺得用圖表表示不僅能知道某個(gè)同學(xué)坐在哪兒，還能知道教室里有多少同學(xué)，其他同學(xué)又是怎樣分布的……

師：同學(xué)們都說得非常好。上面幾種方法都有自己的優(yōu)點(diǎn)，但是大家能不能用我們數(shù)學(xué)的方式來表示位置呢？

生：可以用數(shù)來表示。

師：好，把你的想法寫在黑板上吧！

（生寫出了3.5，其他學(xué)生受到了啟發(fā)，紛紛寫出：3/5 5、3等表示方法）

師：正如同學(xué)們寫的那樣，在數(shù)學(xué)中，我們可以用一對(duì)數(shù)表示某個(gè)點(diǎn)在平面上的位置。一般把表示第幾組的數(shù)寫在前面，把表示第幾個(gè)的數(shù)寫在后面，中間用逗號(hào)隔開，用括號(hào)將這兩個(gè)數(shù)括起來，這種表示方法就是我們數(shù)學(xué)中的“數(shù)對(duì)”。如王馨悅在教室的第3組第5個(gè)，用數(shù)對(duì)表示就是（3，5）。（師板書）

師：跟其他方法相比，用數(shù)對(duì)的方法表示位置有什么特點(diǎn)呢？

生：用數(shù)對(duì)的方法表示位置，很有數(shù)學(xué)味！

生：它很簡(jiǎn)捷明了。

……

[反思]

世界上沒有兩片樹葉是完全一樣的，由于生活經(jīng)驗(yàn)和認(rèn)知水平的差異，學(xué)生解決問題的思維方式也不盡相同，方法也就各種各樣。在這個(gè)環(huán)節(jié)，讓學(xué)生用自己的方法表示班上某個(gè)同學(xué)在教室的位置，有的用文字、有的用圖形、有的用符號(hào)、有的用數(shù)對(duì)……通過交流討論，認(rèn)為采用數(shù)對(duì)的方法表示某個(gè)同學(xué)在教室的位置更簡(jiǎn)捷，更有數(shù)學(xué)味。這一過程是讓學(xué)生經(jīng)歷解決問題多樣化到策略化的過程，也是讓學(xué)生經(jīng)歷從生活問題到建立數(shù)學(xué)模型的學(xué)習(xí)過程。

[片斷三]鞏固提高，應(yīng)用新知識(shí)

（CAI課件呈現(xiàn)情境）

師：同學(xué)們真棒！很快找到了自己的新座位。老師這里有一幅淘氣班上的座位圖，你能從圖中找到淘氣并用數(shù)對(duì)表示他的位置嗎？

生：淘氣的位置是（6，4）。（師板書）

師：你是從哪邊數(shù)起的呢？

生：從左往右數(shù)。

師：對(duì)，我們通常是按照觀察者的角度從左往右數(shù)。笑笑呢？

生：是（2，1）。（師板書）

師：我們把從左往右每一組用一條豎線表示，把從前往后數(shù)的每排用橫線表示，那么豎線和橫線相交的點(diǎn)就是每個(gè)同學(xué)在教室的位置。得到這樣一幅方格圖（CAI課件閃爍，將班級(jí)座位圖抽象成方格圖），你能用數(shù)對(duì)的方法表示淘氣的位置嗎？（請(qǐng)學(xué)生在電腦上找一找）

師：你是怎樣找的呢？

生：我先找從左往右的第6條線，再在這條線上從下往上數(shù)到第4條線，這兩條線的交點(diǎn)就是淘氣的位置。

師：笑笑呢？

生：我先找從下往上數(shù)的第1條橫線，再找從左往右數(shù)的第2條豎線，這兩條線的交點(diǎn)就是笑笑的位置。（生邊說師邊演示）

[反思]

從生活實(shí)際到數(shù)學(xué)世界，由座位圖變成方格圖，將教室里的一個(gè)個(gè)人變成平面上的一個(gè)個(gè)點(diǎn)，學(xué)生要經(jīng)歷從具體到抽象的過程。為了更好地突破這個(gè)轉(zhuǎn)變，運(yùn)用多媒體課件演示，讓學(xué)生動(dòng)手操作，親身感受點(diǎn)在坐標(biāo)系的意義和表示方法，學(xué)生在操作中掌握了運(yùn)用二維空間來描述物體所在位置的方法。

[片斷四]拓展延伸，開闊新視野

師：數(shù)對(duì)的知識(shí)在生產(chǎn)、生活和科學(xué)技術(shù)中有著廣泛的應(yīng)用，老師這里收集了幾個(gè)例子，我們一起來看看！

生：好。（課件演示）

1.在武漢市市政地圖中找黃鶴樓的位置。（出示黃鶴樓的圖片）

師：這是一張武漢市城區(qū)地圖，你能根據(jù)黃鶴樓圖片上的數(shù)對(duì)（，）很快找到黃鶴樓的位置嗎？（分析數(shù)對(duì)中字母和數(shù)字的意義，再引導(dǎo)學(xué)生找到黃鶴樓的位置）

2.在中國(guó)地圖中確定北京的位置。（出示中國(guó)地圖）

師：同學(xué)們注意看，在地圖上有許多豎線和橫線。我們把連接兩極點(diǎn)的豎線叫做經(jīng)線，垂直于經(jīng)線的橫線圈叫做緯線，根據(jù)經(jīng)緯線可以準(zhǔn)確確定地球上任何一點(diǎn)的位置。如北京在北緯40°，東經(jīng)116°，根據(jù)這兩條線準(zhǔn)確地確定北京的位置。（電腦演示北京位置的確定）

3.神舟六號(hào)回收。

師：同學(xué)們，我國(guó)發(fā)射的神舟六號(hào)載人飛船已經(jīng)成功返回，你們知道它返回時(shí)降落在哪里嗎？

生：降落在內(nèi)蒙古的四王子旗草原上。

師：對(duì)。我們知道草原那么遼闊，飛船返回是在凌晨，天還很黑。可是地面搜尋人員是怎樣在較短的時(shí)間內(nèi)迅速而又準(zhǔn)確地找到它呢？（學(xué)生也感到納悶）

生：運(yùn)用全球定位儀可以很快找到。

師：對(duì)，我們很多同學(xué)可能聽說過全球定位系統(tǒng)，它就是運(yùn)用衛(wèi)星等探測(cè)手段探測(cè)到物體的位置后，用數(shù)對(duì)的方法來表示。這樣就能準(zhǔn)確地找到目標(biāo)。其實(shí)，用數(shù)對(duì)表示位置的例子在日常生活中還有許多應(yīng)用，我們將在今后進(jìn)一步學(xué)習(xí)。今天這節(jié)課就學(xué)到這里。謝謝同學(xué)們，再見！

[反思]

篇7

【關(guān)鍵詞】新生兒窒息　臍血　血清心肌酶　缺氧

新生兒窒息是臨床產(chǎn)科常見的疾病之一，窒息缺氧引起新生兒腦、心、肺、腎、胃腸等多器官內(nèi)臟損害，因此，新生兒窒息及其并發(fā)癥成為新生兒死亡的主要原因之一[1]。新生兒窒息是新生兒娩出后1min內(nèi)，由于無自主呼吸或無法建立自主規(guī)律呼吸，發(fā)生的低氧血癥、混合性酸中毒，有2/3的新生兒窒息是胎兒宮內(nèi)窘迫的延續(xù)。本文旨在探析新生兒窒息早期臍血中血清心肌酶的變化與缺氧的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1 一般資料 ①觀察組：2008年2月-2009年6月共66例新生兒窒息患兒，其中男38例、女28例；胎齡36-42周，平均38.5周；診斷均符合第6版《兒科學(xué)》[2]的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)臨床診斷、CT檢查排除顱內(nèi)出血。②對(duì)照組：抽取2008年2月-2009年6月共66例健康新生兒，無窒息史、無神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，其中男37例、女29例；胎齡36-42周，平均38.8周。對(duì)比兩組新生兒的胎齡、性別比例、分娩方式、體重等一般情況，差異無顯著性（P>0.05），具有可比性。

1.2 儀器與試劑 全自動(dòng)生化分析儀（日本OLYMPUS 2700），心肌酶譜檢測(cè)試劑（日本OLYMPUS公司生產(chǎn)）。

1.3 方法

1.3.1 新生兒窒息判斷 所有患兒娩出后迅速進(jìn)行1min Apgar評(píng)分，以Apgar評(píng)分≤7分者為新生兒窒息。

1.3.2 臍血采集 胎兒娩出后用備好的肝素化注射器抽取臍靜脈血4ml，靜置1小時(shí)后離心，分離血清置-20℃冰箱中保存。

1.3.3 臍血血清心肌酶測(cè)定 用全自動(dòng)生化分析儀，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，采用速率法檢測(cè)心肌酶譜的活性檢測(cè)。心肌酶譜檢測(cè)項(xiàng)目包括乳酸脫氫酶（LDH）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）和肌酸激酶心肌同工酶（CKMB）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS12.0軟件進(jìn)行分析，采用t檢驗(yàn)，以P

2　結(jié)果

觀察組患兒的心肌酶譜（LDH、AST、CK、CKMB）活性測(cè)定結(jié)果顯著高于對(duì)照組，差異有顯著性（P

表1 兩組新生兒臍血血清心肌酶活性檢定結(jié)果（x±s，U/L）

*與對(duì)照組相比，差異有顯著性（P

3　討論

新生兒窒息是圍產(chǎn)新生兒最為常見的癥狀，本質(zhì)是缺氧引起的低氧血癥，缺氧導(dǎo)致炎性介質(zhì)大量釋放，可引起新生兒全身性多臟器損傷，心肌受損可能導(dǎo)致心衰，嚴(yán)重者死亡。據(jù)國(guó)內(nèi)調(diào)查報(bào)道顯示，新生兒窒息大多數(shù)為胎兒宮內(nèi)窘迫的延續(xù)，其發(fā)病本質(zhì)是缺氧[3]。正常情況下，新生兒心肌細(xì)胞主要以有氧代謝為主，對(duì)缺氧非常敏感。凡是能造成胎兒缺氧或新生兒缺氧的因素，均可引起新生兒窒息，缺氧狀態(tài)導(dǎo)致心肌無氧酵解過程中所產(chǎn)生的酸性代謝物質(zhì)大量堆積，進(jìn)而細(xì)胞內(nèi)酸中毒，致使心肌細(xì)胞ATP大量減少，造成心肌損害。

心肌細(xì)胞能量代謝發(fā)生障礙，消耗大量ATP，心肌細(xì)胞通透性發(fā)生改變，使心肌酶大量釋放到血液中，通過檢測(cè)血清AST、LDH、CK、CKMB五項(xiàng)心肌酶活性指標(biāo)可檢測(cè)缺氧缺血性心肌受損。在五項(xiàng)指標(biāo)中，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）在心肌細(xì)胞中含量較多[4]。AST及LDH-L廣泛分布于體內(nèi)，特異性不強(qiáng)，以腎和骨骼肌含量較多；90%以上CK主要存在骨骼肌中，其次是心肌細(xì)胞、腦組織；CKMB主要分布于心肌細(xì)胞的胞漿內(nèi)，在心肌以外組織中含量較低，屬于心肌特異性同工酶。CKMB在血清中含量較少，故一般認(rèn)為血清CKMB大于總活性的6%以上可作為心肌受損的特異性指標(biāo)。

新生兒心肌細(xì)胞修復(fù)能力和再生能力強(qiáng)，故早期心肌受損可通過及時(shí)有效治療，有效逆轉(zhuǎn)病情，阻止其惡化，對(duì)于提高患兒的生存質(zhì)量具有關(guān)鍵作用。本調(diào)查結(jié)果顯示，新生兒窒息患兒臍血中的心肌酶譜測(cè)定水平明顯高于健康新生兒，尤其是CKMB含量的升高最為明顯，故新生兒血液中心肌酶譜及其同工酶的活性測(cè)定能夠作為診斷心肌損害的重要指標(biāo)，用于早期診斷新生兒窒息心肌損害，及時(shí)采取有效治療方案以降低并發(fā)癥發(fā)生率及死亡率。

參 考 文 獻(xiàn)

[1]傅川林.新生兒窒息多器官系統(tǒng)損害的研究進(jìn)展[J].臨床兒科雜志，2002，20（8）：506.

[2]楊錫強(qiáng).兒科學(xué)[M].人民衛(wèi)生出版社，2005:118-119.

篇8

內(nèi)生菌（endophyte）廣泛存在于植物各器官、組織的細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間隙，具有豐富的宿主植物種類多樣性、在宿主植物組織中分布多樣性以及功能多樣性的特點(diǎn)，國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究報(bào)道很多，但未見道地藥材基原鳳丹的內(nèi)生菌研究報(bào)道。鑒于植物內(nèi)生菌種類很大程度上受制于植物本身的生理特點(diǎn)和周邊的環(huán)境，而中藥材又歷來重視道地性，本研究對(duì)鳳丹根部?jī)?nèi)生菌進(jìn)行分離、鑒定和抑菌實(shí)驗(yàn)研究，在為生產(chǎn)實(shí)踐服務(wù)的同時(shí)也為道地藥材鳳丹的研究積累科學(xué)資料

1材料與方法

1.1供試樣品

2012年7―10月，在鳳丹的果期和地上部分漸枯期，選擇安徽銅陵順安正常生長(zhǎng)的三年生植株，參考平行線取樣法，開挖30～40 cm的土壤剖面，去除表層土后收集根樣：采集的根樣用錫箔紙包裹好帶回實(shí)驗(yàn)室置放4℃冰箱備用。

按常規(guī)方法準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基（NA）、馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基（PDA）；液體發(fā)酵培養(yǎng)基為上述培養(yǎng)基不加瓊脂

1.2內(nèi)生菌分離與純化

取鳳丹根樣洗凈，晾干并進(jìn)行表面消毒.取200 μL最后一次沖洗液涂布至相應(yīng)平板中，檢測(cè)表面消毒效果

在無菌狀態(tài)下將處理完畢后的鳳丹根樣品切成0.2 cm×0.2 cm長(zhǎng)段（片）置于PDA培養(yǎng)基、28℃下靜置培養(yǎng)5～10d，挑取植物組織周圍的菌落轉(zhuǎn)接入PDA斜面中并純化；同時(shí)，將上述根樣置于NA培養(yǎng)基、37℃下靜置培養(yǎng)48 h，培養(yǎng)基中可見菌落形成時(shí)挑取植物組織周圍的菌落轉(zhuǎn)接入牛肉膏培養(yǎng)基斜面中并純化。

1.4抑菌試驗(yàn)

供試菌株金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌、毛霉、黑線炭疽菌、青霉、西瓜枯萎病原菌、鏈格孢霉菌，由安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物研究室提供。

2結(jié)果與分析

2.1鳳丹內(nèi)生菌的種類構(gòu)成

2.1.1內(nèi)生真菌 結(jié)合形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果（表1），將內(nèi)生真菌ITS序列在NCBI網(wǎng)站上用BLAST軟件進(jìn)行序列比對(duì)并利用MEGA 5.05采用Neighbor-Join-ing法構(gòu)建鳳丹內(nèi)生真菌系統(tǒng)發(fā)育樹（圖1）。

2.1.2內(nèi)生細(xì)菌 結(jié)合生理生化鑒定結(jié)果（表2），將內(nèi)生細(xì)菌16SrDNA序列在NCBI網(wǎng)站上用BLAST軟件進(jìn)行序列比對(duì)并利用MEGA 5.05采用Neigh-bor-Joining法構(gòu)建鳳丹內(nèi)生細(xì)菌系統(tǒng)發(fā)育樹（圖2）。

2.1.3不同生長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)生菌分布及其多樣性 實(shí)驗(yàn)共分離得到內(nèi)生菌129株：內(nèi)生真菌58株，其中果期的內(nèi)生真菌35株、分離率為27.1%，地上部分漸枯期的內(nèi)生真菌23株、分離率為17.8%：內(nèi)生細(xì)菌71株，其中果期的內(nèi)生細(xì)菌42株、分離率為32.6%，地上部分漸枯期的內(nèi)生細(xì)菌29株、分離率為22.5%。果期與地上邵分漸枯期根樣中內(nèi)生菌種類和數(shù)量基本一致（表3）。

結(jié)合形態(tài)特征、ITS序列分析和系統(tǒng)發(fā)育分析，所得58株鳳丹內(nèi)生真菌隸屬4屬、6種：革菌屬Thanatephorus 1種、青霉屬Penicillum 1種、鐮刀菌屬Fusarium 3種、赤霉屬Gibberella 1種，優(yōu)勢(shì)屬鐮刀菌屬Fusarium，共有45株，占到77.6%，而鐮刀菌屬中的F.oxvsporum與F.purpurogenum為鳳丹的優(yōu)勢(shì)真菌，分別占分離內(nèi)生真菌總菌株的44.9%，24.1%。

結(jié)合內(nèi)生細(xì)菌生理生化鑒定結(jié)果、16S rDNA序列分析和系統(tǒng)發(fā)育分析，所得內(nèi)生細(xì)菌71株隸屬3屬9種，其中芽孢桿菌屬Bacillus 6種、土壤桿菌屬Agrobacterium 1種、假單胞桿菌Pseudomonas屬2種。58株9種內(nèi)生細(xì)菌以芽孢桿菌屬Bacillus為優(yōu)勢(shì)屬，占到81.8%，芽孢桿菌屬中B.megaterium為鳳丹根部?jī)?yōu)勢(shì)細(xì)菌，其次B.cereus，它們分別占分離內(nèi)生細(xì)菌總菌株的32.4%，14.1%。

2.2內(nèi)生菌對(duì)病原菌的抑制作用

2.2.1病原細(xì)菌 菌活性大小根據(jù)抑菌圈直徑劃分為強(qiáng)（>15 mm）、中（10～15 mm）、弱（5～10mm）。在鳳丹內(nèi)生菌中，對(duì)金色葡萄球菌有較強(qiáng)抑制作用的內(nèi)生細(xì)菌有P.chlororaphis，內(nèi)生真菌有F.oxysporum’F.nematophilum’Gibberella intermedia’抑菌圈直徑分別達(dá)到25.0，19.0，18.1，10.3 mm。內(nèi)生細(xì)菌B.megaterium對(duì)枯草桿菌的抑菌圈直徑達(dá)到24.0 mm。內(nèi)生真菌F.nematophilum不僅對(duì)金色葡萄球菌具有較強(qiáng)抑制作用，對(duì).大腸桿菌的抑菌圈直徑也達(dá)到了20.2 mm（表4）。

2.2.2病原真菌 鳳丹內(nèi)生菌中，有8株內(nèi)生菌對(duì)病原真菌有不同程度的抑制作用

其中對(duì)黑線炭疽菌抑制效果好的有內(nèi)生真菌Thanatephorus cucumer-is，F(xiàn).nematophilum，抑菌率分別達(dá)到82.6%，83.3%：G.intermedia對(duì)其也有一定抑制效果（抑制率為31.0%）：所分離內(nèi)生細(xì)菌并不抑制黑線炭疽菌的生長(zhǎng)。對(duì)西瓜枯萎病原菌有抑制效果有內(nèi)生細(xì)菌P.chlororaphis、內(nèi)生真菌T.cucumeris，G.inter-media，抑菌率分別為80.0%，61.7%，53.2%。內(nèi)生細(xì)菌P.chlororaphis、內(nèi)生真菌T.cucumeris，F(xiàn).nematophilum對(duì)毛霉也具有一定的抑制效果，抑菌率分別為84.9%，39.6%，78.6%。內(nèi)生真菌F.nematophilum對(duì)青霉的抑菌率最高，達(dá)到90.6%。內(nèi)生真菌P.purpurogenum，F(xiàn).nematophilum對(duì)鏈格孢霉的抑菌率分別為74.3%.65.7%（表5）。

3討論

季節(jié)株齡甚至宿主（植物）生長(zhǎng)的環(huán)境等因素可以影響到植物內(nèi)生菌分離的數(shù)量和種類。從鳳丹果期、地上部分漸枯期中分離出來的內(nèi)生菌種類與數(shù)量相對(duì)穩(wěn)定。鳳丹果期內(nèi)生真菌和細(xì)菌的數(shù)量都相對(duì)高于地上部分漸枯期，而且除內(nèi)生真菌赤霉菌只在果期分離出外，從這2個(gè)時(shí)期分離得到的內(nèi)生菌種類基本相同。這可能是由于鳳丹的果期環(huán)境溫度更適合內(nèi)生菌繁殖有關(guān)。

篇9

【關(guān)鍵詞】 生活飲用水； 氯化消毒副產(chǎn)物； 測(cè)定； 產(chǎn)生條件

中圖分類號(hào) R123 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2015）22-0160-01

doi：10.14033/ki.cfmr.2015.22.091

氯化消毒一直以來都是對(duì)飲用水進(jìn)行消毒的主要對(duì)策，這種技術(shù)的應(yīng)用在一定程度上有效預(yù)防了消化道傳染病的傳播和流行，使數(shù)以萬計(jì)的人免于傷寒、菌痢、甲肝等消化道傳染病的威脅，是社會(huì)飲水衛(wèi)生事業(yè)邁入新的里程碑的關(guān)鍵舉措。但是，隨著社會(huì)科技的不斷進(jìn)步以及檢測(cè)手段的豐富，荷蘭科學(xué)家發(fā)現(xiàn)這種消毒方式之中存在著大量的副產(chǎn)物，且這些物質(zhì)能夠在人體內(nèi)潛伏很長(zhǎng)時(shí)間，產(chǎn)生遠(yuǎn)期危害。這一觀點(diǎn)一經(jīng)證實(shí)，也引起了人們對(duì)生活飲用水消毒方法的進(jìn)一步思考。為了減少其對(duì)人體的危害，找到真正提升飲用水衛(wèi)生質(zhì)量的有效對(duì)策，文章就這些副產(chǎn)物產(chǎn)生的條件簡(jiǎn)單概述，并找到了測(cè)定的最佳方法。

1 氯化消毒副產(chǎn)物概況

氯化消毒副產(chǎn)物簡(jiǎn)稱DBPs，是飲用水氯化消毒過程中水中的有機(jī)物與消毒劑相互反應(yīng)產(chǎn)生的鹵代化合物。主要由三鹵甲烷（THMS）類、鹵乙酸（HAAS）、氯化酚、鹵代酮等物質(zhì)組成，大量流行病學(xué)調(diào)查表明，長(zhǎng)期飲用氯化消毒的飲用水，死于消化和泌尿系統(tǒng)的癌癥的危險(xiǎn)性增加，并和其他癌癥的死亡率存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)的關(guān)系。說明這些危害物，能夠給人們的身體帶來危害，具有潛在致癌性，長(zhǎng)期飲用會(huì)引起遠(yuǎn)期病變。在對(duì)這種副產(chǎn)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定的時(shí)候，一般采用氣相色譜法和反相高效液相色譜法進(jìn)行研究[1]。

2 生活飲用水中氯化消毒副產(chǎn)物測(cè)定方法以及產(chǎn)生條件

眾所周知，采用氯化消毒方法對(duì)生活飲用水進(jìn)行檢測(cè)，會(huì)產(chǎn)生大量不同的副產(chǎn)物質(zhì)。由于這些副產(chǎn)物的特性、構(gòu)造、組成等的差異，就使得它們的產(chǎn)生條件不盡相同，在對(duì)其進(jìn)行測(cè)定的時(shí)候也要選用不同的方法。下面就來簡(jiǎn)單談?wù)劼然井a(chǎn)生的不同副產(chǎn)物測(cè)定的具體對(duì)策和產(chǎn)生條件，從而提高飲用水衛(wèi)生質(zhì)量[2]。

2.1 鹵乙酸

鹵乙酸是飲用水氯化消毒副產(chǎn)物中對(duì)人體健康危害較大的一種，是確認(rèn)致癌物。在有些地區(qū)飲水質(zhì)量檢測(cè)中，得出其致癌系數(shù)高達(dá)90%以上，是所有副產(chǎn)物中致癌指數(shù)最高的一種。目前對(duì)飲水質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)的方法，普遍都能夠運(yùn)用于該產(chǎn)物的測(cè)定，如氣質(zhì)聯(lián)用、氣相色譜、毛細(xì)管電泳、離子色譜等手段都符合檢測(cè)條件。但是，由于不同地區(qū)水質(zhì)的差異，在對(duì)其進(jìn)行具體方法運(yùn)用的過程中要適當(dāng)?shù)倪M(jìn)行選擇。鹵乙酸的生成是伴隨著檢測(cè)溫度升高、氯化劑用量增大、pH值降低以及腐殖酸濃度增加而出現(xiàn)的，在采用氯化消毒手段進(jìn)行消毒的過程中，適當(dāng)加入腐殖酸，是減少該物質(zhì)生成的有效對(duì)策[3]。

2.2 氯化酚

氯化消毒過程中的工業(yè)污染和天然有機(jī)物是生產(chǎn)氯化酚的主要條件。該物質(zhì)在飲用水中的含量很小，但對(duì)人類的身體健康卻存在著巨大的威脅。有關(guān)該種副產(chǎn)物的檢測(cè)報(bào)道不勝枚舉，檢測(cè)手法也多種多樣，不過在具體應(yīng)用之前都要做好樣品的富集工作，而反相高效液相色譜法是使用最為廣泛也最有效的方法。它能夠?qū)λ畼又械穆确拥母患蜐饪s量進(jìn)行分析，并使兩者達(dá)到科學(xué)分離的目的，適用于大規(guī)模檢測(cè)，能夠滿足人們對(duì)飲用水的衛(wèi)生要求。

2.3 腐殖酸

腐殖酸是鹵乙酸生成的重要前提物質(zhì)，自從DBPs從消毒引用水中檢測(cè)出來以后，世界各國(guó)逐漸發(fā)現(xiàn)了將近500多種不同類型的該項(xiàng)副產(chǎn)物。據(jù)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，飲用水中的DBPs物質(zhì)多與腐殖酸、藻類及其代謝產(chǎn)物、蛋白質(zhì)和污染物的產(chǎn)生有關(guān)。在對(duì)其進(jìn)行測(cè)定的過程中可以適當(dāng)?shù)母淖儹h(huán)境溫度、腐殖酸濃度、消毒劑投入數(shù)值、溶液PH數(shù)值以及反應(yīng)時(shí)間等來進(jìn)行測(cè)定，從而準(zhǔn)確得出具體的副產(chǎn)物，以供接下來的試驗(yàn)[4]。

總而言之，由于社會(huì)經(jīng)濟(jì)、科技的迅猛發(fā)展，傳統(tǒng)的氯化消毒方法中存在的弊端被逐漸檢測(cè)了出來，其中三鹵甲烷、鹵乙酸、氯化酚、鹵代酮等副產(chǎn)物對(duì)人體的危害也越來越明確。為了保證我們國(guó)家的飲水衛(wèi)生質(zhì)量，促進(jìn)人們身體健康，國(guó)家相關(guān)部門一定要做好氯化消毒副產(chǎn)物的測(cè)定工作，選擇最恰當(dāng)?shù)姆椒ㄓ枰詸z測(cè)，明確各種有害物質(zhì)產(chǎn)生的條件，并找到切實(shí)可行的對(duì)策予有效去除氯消毒后水中形成的鹵代有機(jī)物，從而確保人民群眾的用水安全，為我國(guó)飲用水事業(yè)的全面進(jìn)步奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1]張霞，楊路平.離子色譜法測(cè)定飲用水中氯化消毒副產(chǎn)物的方法研究[J].中國(guó)消毒學(xué)雜志，2010，27（1）：5-9.

[2]胡江濤.生活飲用水中氯化消毒副產(chǎn)物測(cè)定及產(chǎn)生條件研究[D].成都：四川大學(xué)，2005.

[3]陳鑫.黃浦江為水源的水廠不同工藝點(diǎn)和管網(wǎng)水中THMs、HAAs消毒副產(chǎn)物生成模型和轉(zhuǎn)歸模型的建立[D].上海：復(fù)旦大學(xué)，2010.

篇10

【關(guān)鍵詞】 CD3分子； 單鏈抗體

【Abstract】 The genes encoding antibody heavy and light chain variable regions (VH and VL) were cloned by RTPCR from OKT3 hybridoma cells， which produced antiCD3 moleclonal antibody. The VH and VL genes were fused and become a single chain Fv (scFv). The scFv gene was cloned into pCANTAB5E vector and expressed on bacterial phage surface. By three panning rounds， we have obtained two singlechain antibodys that specific for CD3. The antiCD3 scFv will be a reagent for diagnosis and therapy of immunodisorder

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實(shí)驗(yàn)資料

雜交瘤細(xì)胞OKT3來自ATCC.質(zhì)粒 pCANTAB5E，大腸桿菌TG1和HB2151，內(nèi)切酶SfiI和NotI， 可變區(qū)引物均購(gòu)自Pharmacia公司.Taq DNA聚合酶，mRNA磁性分離試劑盒購(gòu)自Promega公司.以分泌抗CD3單克隆抗體的鼠雜交瘤細(xì)胞OKT3為原始材料，采用Promega公司試劑盒，從大約107細(xì)胞中分離和純化mRNA，合成cDNA第一鏈.通過RTPCR分別擴(kuò)增出重鏈可變區(qū)（VH）和輕鏈可變區(qū)（VL）基因. 為了加強(qiáng)抗體輕、重鏈可變區(qū)（Fv）的穩(wěn)定性和更好地維持抗體分子內(nèi)結(jié)合抗原區(qū)的空間構(gòu)象，在VH和VL基因之間用一段編碼(Gly4Ser)3的DNA序列把二者連接起來， 構(gòu)成抗體可變區(qū)單鏈融合基因.為了把單鏈抗體基因插入pCANTAB5E 質(zhì)粒，我們以單鏈抗體基因?yàn)槟０?，引入一?duì)含SfiI和 NotI 酶切位點(diǎn)的引物， 再次 PCR 擴(kuò)增.擴(kuò)增產(chǎn)物Mr約720，基因大小與預(yù)測(cè)的單鏈抗體基因相符合（圖1）.把單鏈抗體基因插入到表達(dá)載體pCANTAB5E所含的噬菌體外殼蛋白g3p基因中. 轉(zhuǎn)化大腸桿菌TG1感受態(tài)細(xì)胞后，在輔助噬菌體M13K07的作用下，單鏈抗體和外殼蛋白g3p以融合蛋白的形式表達(dá)于噬菌體的表面，形成一個(gè)抗CD3單鏈抗體文庫(kù).以外周血單核細(xì)胞為抗原，用ELISA方法鑒定噬菌體抗體的免疫活性.首先用細(xì)胞分離液分離外周血T細(xì)胞，然后包被在經(jīng)多聚賴氨酸處理過的96孔酶聯(lián)板上.分別與重組噬菌體抗體溫育1 h，用PBS淋洗3次后，加入HRP標(biāo)記的抗M13噬菌體抗體溫育1 h， 再用PBS淋洗3次，加入底物進(jìn)行顏色反應(yīng).用酶標(biāo)儀在490nm處檢測(cè)每孔的吸收值.挑選陽性克隆，感染大腸桿菌，獲得培養(yǎng)上清，再進(jìn)行免疫活性鑒定.經(jīng)過三輪親合－感染－擴(kuò)增的免疫篩選過程，使CD3重組噬菌體抗體得到富極. 隨機(jī)挑選12個(gè)重組噬菌體抗體克隆進(jìn)行ELISA檢測(cè).從中選出免疫活性最強(qiáng)的兩株陽性克隆.把這兩株陽性克隆的基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌HB2151，經(jīng)IPTG 誘導(dǎo)培養(yǎng)后，可在上清中收集可容性單鏈抗體.ELISA進(jìn)一步證明該抗體能夠特異識(shí)別外周血單核細(xì)胞和淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞，而不結(jié)合黑色素瘤細(xì)胞和人宮頸癌細(xì)胞(圖2).說明單鏈抗體保留了原單克隆抗體的抗原特異性.

1:1 kb標(biāo)準(zhǔn)分子量；2:抗體VL基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；3：重組質(zhì)粒經(jīng)XbaI和BamHI雙酶切，鑒定VL基因；4：抗體VH基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；5：重組質(zhì)粒經(jīng)XhoⅠ和HindⅡ雙酶切，鑒定VH基因.

圖1

瓊脂糖凝膠分析PCR產(chǎn)物和重組載體酶切產(chǎn)物鑒定（略）

可溶性單鏈抗體結(jié)合外周血單核細(xì)胞（PBC）和淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞（MOLT4），但不結(jié)合黑色素瘤細(xì)胞（A375）和人宮頸癌細(xì)胞（Hela）.

圖2

ELISA檢測(cè)單鏈抗體免疫活性（略） 轉(zhuǎn)貼于 　2

討論

單鏈抗體被認(rèn)為是具有抗原結(jié)合能力的最小功能單位［1］.它在某些應(yīng)用方面比完整抗體具有更多的優(yōu)越性，如免疫原性較小，組織滲透性好， 在組織和血液中的清除率快，容易與其他功能分子重組，形成多功能抗體［2-4］.另外，單鏈抗體能夠在原核系統(tǒng)中高效表達(dá)，有利于大批量生產(chǎn).CD3分子是T淋巴細(xì)胞膜上特有的重要信號(hào)分子之一 ［5，6］.抗CD3單鏈抗體與其他功能分子結(jié)合所形成的雙功能抗體在免疫調(diào)節(jié)和腫瘤治療方面以顯示出良好的應(yīng)用前景［7，8］.我們構(gòu)建了抗CD3單鏈抗體基因，利用噬菌體展示技術(shù)表達(dá)單鏈抗體，通過免疫篩選，獲得CD3特異基因工程抗體.該抗體為雙功能抗體和重組免疫毒素的研制打下了基礎(chǔ).

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