導(dǎo)語(yǔ)：如何才能寫好一篇?jiǎng)游镄袨閷W(xué)方法，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

在一所學(xué)校里，無(wú)論是校園文化建設(shè)還是課堂改革，無(wú)論是學(xué)校規(guī)劃發(fā)展還是學(xué)生養(yǎng)成教育，都需要教師的參與，教師的處事態(tài)度、工作方法將直接影響到學(xué)校工作質(zhì)量。而長(zhǎng)時(shí)間單調(diào)、繁重的教學(xué)生活，或多或少的都會(huì)使教師產(chǎn)生職業(yè)倦怠，因此，如何激發(fā)教師工作的積極性，充分挖掘教師的潛能，就成為每一位學(xué)校管理者不得不面對(duì)的一個(gè)實(shí)際問(wèn)題。

一提到調(diào)動(dòng)教師積極性，很多學(xué)校管理者馬上會(huì)想到通過(guò)多發(fā)獎(jiǎng)金和物質(zhì)獎(jiǎng)品的方法來(lái)激發(fā)教師的工作熱情，這的確是最簡(jiǎn)單、最直接、最容易被教師接受的一種方法。但是對(duì)于義務(wù)教育階段的農(nóng)村中小學(xué)來(lái)說(shuō)，有限的經(jīng)費(fèi)維持平時(shí)的辦公開支還捉襟見肘，根本就拿不出用于獎(jiǎng)勵(lì)教師的“富?！卞X。因此，在農(nóng)村中小學(xué)，我們必須把調(diào)動(dòng)教師積極性的重點(diǎn)放在精神獎(jiǎng)勵(lì)上，讓教師發(fā)自內(nèi)心地去愛教、樂(lè)教、愿意從教。

一、弘揚(yáng)主旋律，宣傳新的教育政策，對(duì)教師們進(jìn)行正面引導(dǎo)

目前國(guó)家的教育理念已經(jīng)開始改變，例如：從提倡教師像蠟燭一樣燃燒自己照亮別人轉(zhuǎn)向鼓勵(lì)中小學(xué)教師發(fā)展自我、成名成家；從大規(guī)模的合校并點(diǎn)轉(zhuǎn)向區(qū)域化、均衡化的教育發(fā)展。十八屆三中全會(huì)更是提出了“立德樹人”的教育理念，改變科目的分值設(shè)置，改變功利化的教育模式，讓教育回歸原生態(tài)。為了提高教師地位，對(duì)教師任職資格制度也進(jìn)行了改革，提高了獲取教師任職資格的門檻，即使師范院校畢業(yè)的學(xué)生也必須通過(guò)國(guó)家統(tǒng)一組織的教師資格考試，才能取得教師任職資格證書。此外，教師職稱制度也在逐步改革，在中小學(xué)教師中已經(jīng)開始增加正高級(jí)職稱的名額。管理者可以通過(guò)這些正面信息的傳達(dá)讓教師知道國(guó)家正在想辦法提高教師待遇，引導(dǎo)他們積極地去對(duì)待教育工作。

二、學(xué)校要建立公平、公正的管理制度，做到規(guī)范化辦學(xué) 學(xué)校的管理制度都是為教學(xué)工作服務(wù)的，涉及學(xué)校所有教師的切身利益。因此，在制定管理制度時(shí)一定要尊重廣大教師的意見。學(xué)校管理制度的制定應(yīng)該分以下幾個(gè)步驟：1調(diào)查研究。制度的制定是為了解決某一方面的問(wèn)題，不調(diào)查不研究就沒有發(fā)言權(quán)，所以第一步就是調(diào)查研究、了解實(shí)情。2．組織教職工委員會(huì)討論，拿出初稿。3．把初稿分發(fā)給教師并征求他們的建議。4．對(duì)教師提出的建議進(jìn)行匯總并提交教職工委員會(huì)再次討論定稿。5．學(xué)校大會(huì)公布實(shí)施。

比如：《沙河五中績(jī)效工資分配方案》就是在教師全員參與的情況下制定的，并且隨著學(xué)校實(shí)情的變化不斷進(jìn)行修改。修改的過(guò)程也是透明的，完全是由教師討論并提出反饋建議，學(xué)校再組織教師代表整理建議，并依照大多數(shù)教師的建議進(jìn)行修改。發(fā)放績(jī)效工資時(shí)，學(xué)校嚴(yán)格按照制度執(zhí)行，對(duì)于分配結(jié)果教師也都能夠欣然接受。．

三、學(xué)校管理者要擺正自己的位置，演好自己的角色，提高自身的素質(zhì)

1．借助榜樣的力量。首先，學(xué)校管理者要做教師的榜樣，要求教師做到的事自己一定要做到、做好。在道德標(biāo)準(zhǔn)、思想作風(fēng)上，要高標(biāo)準(zhǔn)要求自己，做教師生活中的楷模；在教學(xué)工作中，要提高自身的教育教學(xué)研究能力，積極主動(dòng)地參加學(xué)校的各項(xiàng)教學(xué)活動(dòng)，做教師工作中的領(lǐng)路人。其次，從我校教師隊(duì)伍內(nèi)部找典型、樹榜樣，比如我們學(xué)校的崔然老師課堂教學(xué)理念先進(jìn)，善于創(chuàng)新，在教學(xué)改革上常有突破，就可以把她作為課改榜樣；陳捧書老師，埋頭苦干從不計(jì)較工作得失，30年如一日，教學(xué)工作從未放松，可以作為師德楷模。身邊榜樣的力量，更能激發(fā)教師的積極性。

2．學(xué)會(huì)服務(wù)于教師。作為學(xué)校管理者，不應(yīng)高高在上，而應(yīng)多為教師服務(wù)，在生活上關(guān)心他們，在工作上幫助他們，在業(yè)務(wù)上指導(dǎo)他們，融入他們中間去，以此調(diào)動(dòng)他們的積極性，營(yíng)造和諧的工作氛圍。

從人性的角度來(lái)講，一直要求教師把全部精力放在工作中也是不現(xiàn)實(shí)的，對(duì)此，我們大膽提出了“家庭第一，健康第二，工作第三”的口號(hào)。讓教師看到學(xué)校管理者對(duì)他們的愛護(hù)，當(dāng)他們真正感受到學(xué)校管理者的關(guān)心之后，反而會(huì)做到“工作第一，健康第二，家庭第三”。我想這也許就是《孫子兵法》上所說(shuō)的“不戰(zhàn)而屈人之兵”的道理吧！

3．學(xué)會(huì)與教師溝通。教師是小知識(shí)分子，普遍愛面子、自尊心強(qiáng)，在與他們溝通時(shí)要適時(shí)、適地、適度。對(duì)于個(gè)性特別強(qiáng)的教師，要運(yùn)用多種渠道進(jìn)行溝通，要給教師講明道理：要想獲得自尊，就必須自強(qiáng)，要想在工作中做出成就，就必須有勇于獻(xiàn)身的精神，有投入才會(huì)有收獲。不實(shí)在、不踏實(shí)、不努力、不奮斗、不積極的人永遠(yuǎn)得不到別人的尊重。

四、規(guī)劃教師的專業(yè)化發(fā)展，為教師們樹立一個(gè)明確的奮斗目標(biāo)

教師長(zhǎng)年在學(xué)校里閉門教書，從初一教到初三，又從初三教到初一，視野被固定在一個(gè)小范圍內(nèi)，有的教師經(jīng)過(guò)幾輪教學(xué)小有成就沾沾自喜，停步不前，進(jìn)而產(chǎn)生職業(yè)的倦怠。因此，必須要把老師從自滿的“牢籠”中解放出來(lái)，要為教師謀劃專業(yè)發(fā)展之路，促使他們不斷充實(shí)自己、改變自己。

1．給教師一個(gè)明確的奮斗目標(biāo)。學(xué)校管理者在規(guī)劃學(xué)校愿景的時(shí)候，要幫助每位教師找到自己的發(fā)展方向，并制定個(gè)人的發(fā)展計(jì)劃。例如：為了讓教師認(rèn)識(shí)到自身價(jià)值，看到自己的發(fā)展?jié)摿?，學(xué)校每年都要組織一些活動(dòng)，讓教師在活動(dòng)中展示自我，學(xué)會(huì)溝通．找回自信。

篇2

【關(guān)鍵詞】 鐵離子 阿爾采默病 Morris水迷宮 凋亡

Abstract Objective：To examine the behavioral performance and molecular pathological changes induced by higher concentration iron.FeCl3 were injected into intracephalic of rats by embedding a plastic hollow tube into their ventricle of brain.Methods：15 rats were pided into control and experimental groups.Both of the experimental and control rats.A small burrhole was made in the left/right side of the craium with a dental drill.A plastic hollow tube was embedded in the ventricle of brain.After the surgen，F(xiàn)eCl3 were injected into ventricle of brain.Of control tats interval 5 days and 3 times injection were carried out.Then the behavioral performance were examined by Morris water maze and the percentage of early apoptosisin of cells load with AnnexinFITC were testded by flow cytomery.Results：There were ignificant differences in the mean escape latencies：sum of escape distance between exprimental and control rats.Percentage of AnnexinFITC loaded cells that are undering apoptosis in animals treated by iron were higher than that of normals.Conclusion：Injecting higher concentration iron into ventrcle induce damage of study and memory and neuron apoptosis which were the clinic and pathological characteristic of AD.

Key words iron；AD；Morris water maze；apoptosis

阿爾采默病(AD)是一種臨床上以進(jìn)行性智能障礙為特征，病理上以皮層及海馬區(qū)出現(xiàn)老年斑、神經(jīng)纖維纏結(jié)為特征的疾病。近來(lái)，隨著家族性AD病因的揭示，散發(fā)性AD病因的研究日益受到重視，人們發(fā)現(xiàn)環(huán)境、代謝對(duì)散發(fā)性AD的發(fā)生起著重要作用。而飲食(水)因素，特別是一些微量元素與AD病因的關(guān)系日益引起人們的重視。研究通過(guò)在大鼠側(cè)腦室埋管，分別將FeCl3注入大鼠腦室系統(tǒng)，用Morris水迷宮測(cè)定其行為學(xué)改變，用Annexin VFITC染色細(xì)胞，通過(guò)流式細(xì)胞儀測(cè)定大鼠腦組織早期凋亡細(xì)胞百分率，研究大鼠行為學(xué)改變及神經(jīng)元凋亡的發(fā)生，進(jìn)一步探討鐵離子與AD病因之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

實(shí)驗(yàn)對(duì)象為山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供的3月齡雄性SD大鼠18只(起始體重250～280 g)。隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組10只，對(duì)照組8只。實(shí)驗(yàn)期間自由飲食、飲水，分籠飼養(yǎng)。

1.2 行為學(xué)測(cè)定裝置

行為學(xué)測(cè)定裝置由Morris水迷宮及圖像自動(dòng)監(jiān)視系統(tǒng)組成。Morris水迷宮為一直徑120 cm、高50 cm的圓形水池，水深30 cm，水溫23℃。池壁上標(biāo)有東、南、西、北4個(gè)入水點(diǎn)，而將水池分為西南、東南、東北(平臺(tái)所在)、西北4個(gè)象限(記錄時(shí)分別以1～4代表)。在3象限正中距池壁20 cm處固定一直徑為10 cm的圓形透明逃避平臺(tái)，池水沒過(guò)平臺(tái)1 cm。測(cè)定前將鼠頭用染發(fā)劑染黑，向池中加入奶粉使水呈白色不透明。由圖像監(jiān)視系統(tǒng)同步記錄大鼠運(yùn)動(dòng)軌跡。

1.3 動(dòng)物篩選

將鼠面向池壁依次從1，2，4象限放入水池，限時(shí)180 s內(nèi)找到逃避平臺(tái)，并在平臺(tái)上停留2 s，即被認(rèn)為逃避成功。18只大鼠每日上午、下午各進(jìn)行1次行為學(xué)測(cè)定，共測(cè)定5 d 10次，8次(含8次)逃避成功者入選，其余剔出。

1.4 腦室埋管術(shù)

用戊巴比妥鈉(40 mg/kg)經(jīng)腹腔注射麻醉后將鼠置于立體定位儀上將鼠頭固定，參照大鼠立體定位圖譜1旁正中切口，在正中線旁開2 mm，前囟十字縫橫線后1.3～1.8 mm處用牙鉆鉆孔至硬腦膜下3.5 mm，拔鉆后，將長(zhǎng)0.9 cm，直徑1 mm的空心塑料管垂直插入約3 mm，見有透明腦脊液平面，用牙粉固定塑料管，術(shù)后恢復(fù)休息1周。

1.5 給藥方法

實(shí)驗(yàn)組取FeCl3溶液10 μL(5.2 μg/μL)，對(duì)照組取生理鹽水10 μL，分別用微量加樣器經(jīng)腦室埋管緩慢注入大鼠側(cè)腦室。每5 d給藥1次，共給藥3次。

1.6 水迷宮行為學(xué)測(cè)定

實(shí)驗(yàn)組有9只，對(duì)照組有6只大鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)定，共測(cè)定7 d，測(cè)定指標(biāo)有平均潛伏時(shí)間(s)；行程(cm)。

1.7 流式細(xì)胞計(jì)數(shù)

去大鼠大腦額葉皮層組織，以70％冷乙醇固定，將固定組織用機(jī)械法制備成單分散細(xì)胞懸液，低速離心后(700r/min)，用500目濾網(wǎng)棄去團(tuán)塊，調(diào)整細(xì)胞濃度為每個(gè)3×106/個(gè)/mL，加入特異性的早期凋亡細(xì)胞標(biāo)記物Annexin VFITC染色標(biāo)記細(xì)胞15 min后收集1萬(wàn)個(gè)神經(jīng)元細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞早期凋亡百分率。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)用SPSS軟件包進(jìn)行方差分析，用±s表示，將平均潛伏時(shí)間、距離轉(zhuǎn)換成lgX，將早期細(xì)胞凋亡百分率轉(zhuǎn)換成sin－1X，P＜0.05則認(rèn)為有顯著差異。

2 結(jié)

果

實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠平均潛伏時(shí)間、距離、早期凋亡細(xì)胞百分率比較差異顯著(見表1)。表1 兩組平均潛伏距離、時(shí)間及早期凋亡細(xì)胞百分率比較

3 討

論

縱觀近年來(lái)的研究，普遍認(rèn)為早期發(fā)病的AD與遺傳因素有關(guān)，晚期發(fā)病的AD與環(huán)境因素有關(guān)，有報(bào)道指出，AD時(shí)有鐵代謝的參與，腦內(nèi)鐵離子、轉(zhuǎn)鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的變化直接或間接與AD有關(guān)［1］，Connor用免疫組化法檢測(cè)AD患者腦組織中鐵、鐵蛋白及轉(zhuǎn)鐵蛋白含量［2］，發(fā)現(xiàn)老年斑及血管周圍染色呈強(qiáng)陽(yáng)性，同時(shí)這些部位的鐵蛋白染色陽(yáng)性細(xì)胞也明顯增多，另有研究證明，AD患者血漿、腦脊液中鐵結(jié)合蛋白P97增加［3］，并且提出P97濃度作為AD的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。由于AD是以智力減退為特征的病變，研究者常以Morris水迷宮作為檢測(cè)AD動(dòng)物模型的重要手段之一。本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組大鼠在水迷宮行為學(xué)測(cè)定中平均逃避時(shí)間延長(zhǎng)，所走過(guò)的距離增加，說(shuō)明在腦脊液中注入鐵離子可損傷大鼠的行為學(xué)，能引起大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙，這正是AD的重要臨床特征。細(xì)胞凋亡在AD發(fā)病機(jī)制中的作用備受關(guān)注，運(yùn)原位標(biāo)記技術(shù)可證實(shí)AD患者腦中細(xì)胞凋亡的發(fā)生，與年齡相配對(duì)的非AD患者腦中凋亡細(xì)胞明顯增多，細(xì)胞凋亡已成為AD神經(jīng)元死亡的重要途徑。Annexin VFITC是特異性的早期凋亡細(xì)胞發(fā)生的標(biāo)記物［4］，可將早期凋亡細(xì)胞識(shí)別，目前有文獻(xiàn)報(bào)道用此方法作為凋亡診斷指標(biāo)［5］。本研究經(jīng)用此法標(biāo)記大鼠額葉細(xì)胞，觀察到實(shí)驗(yàn)組大鼠細(xì)胞早期凋亡百分率顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組大鼠出現(xiàn)了神經(jīng)元凋亡，而鑒于行為學(xué)障礙及神經(jīng)元凋亡是AD特征性的臨床和病理變化，故推測(cè)腦脊液中高鐵與散發(fā)性AD存在關(guān)聯(lián)。

參考文獻(xiàn)

［1］Markesbery W R.Oxibative stress hypothesis in Alzheimer′s disease［J］.Free Radic Biol Med，1997，23：134147.

［2］杜宇.腦內(nèi)的鐵、轉(zhuǎn)鐵蛋白及轉(zhuǎn)鐵蛋白受體［J］.生理科學(xué)進(jìn)展，1999，30(4)：337340.

篇3

[關(guān)鍵詞]魚類行為，研究動(dòng)態(tài)，發(fā)展

中圖分類號(hào)：S932.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009-914X（2014）46-0125-01

魚類行為學(xué)是一門古老而又年輕的科學(xué)，在動(dòng)物行為進(jìn)化上和漁業(yè)生產(chǎn)發(fā)展中均具有重要意義。近年來(lái)隨著現(xiàn)代漁業(yè)技術(shù)的發(fā)展，人們對(duì)魚類行為的關(guān)注程度越來(lái)越高，其中主要包括魚類與環(huán)境因子的相互作用、魚類對(duì)重金屬或有機(jī)毒物的應(yīng)激反應(yīng)以及魚類群體內(nèi)部個(gè)體間的協(xié)調(diào)機(jī)制等。這直接促進(jìn)了魚類行為學(xué)研究的發(fā)展，使得更多的成果應(yīng)用到生產(chǎn)實(shí)踐中。魚類行為就是指魚類進(jìn)行的各種運(yùn)動(dòng)，是魚類對(duì)環(huán)境變化的外在反應(yīng)，主要包括游泳、攝食、生殖、呼吸等行為；此外，避敵、攻擊、求偶時(shí)改變體色等非運(yùn)動(dòng)形式也列入行為范疇。本文主要介紹魚類行為學(xué)的研究動(dòng)態(tài)和發(fā)展趨勢(shì)，以期為國(guó)內(nèi)學(xué)者開展魚類行為學(xué)研究提供參考依據(jù)。

1.魚類行為學(xué)研究的歷史過(guò)程

動(dòng)物行為學(xué)的研究由來(lái)已久，但直到20世紀(jì)動(dòng)物行為學(xué)才得到了迅速的發(fā)展和延伸。當(dāng)時(shí)的主要研究對(duì)象是鳥類和哺乳類，而對(duì)于魚類的研究和報(bào)道都較少。自從1904年Lyon報(bào)道了魚類的趨流行為以來(lái)，陸續(xù)有學(xué)者開展關(guān)于魚類行為的研究，但并未引起人們的足夠重視。真正魚類行為研究直到上世紀(jì)中葉才逐步發(fā)展起來(lái)，主要是為了適應(yīng)海洋捕撈的發(fā)展需要。在1963年召開的聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織大會(huì)中，Blaxter介紹了魚類在不同光照下對(duì)網(wǎng)具不同部分的反應(yīng)，1970年在冰島雷克亞米克召開的世界性漁具會(huì)議有專門討論魚類行為的論文，1977年國(guó)際水生生物管理中心在意大利召開會(huì)議，專題討論了魚類行為與捕撈業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)的關(guān)系。進(jìn)入上世紀(jì)90年代后，魚類行為的研究引起國(guó)際海洋理事會(huì)的重視，1992年在挪威召開會(huì)議上強(qiáng)調(diào)了魚類行為學(xué)在漁業(yè)資源評(píng)估和漁業(yè)資源管理方面的應(yīng)用，2004年在波蘭召開的漁具工作組會(huì)議上又討論了漁具漁法、魚類行為和魚群的聲波反射強(qiáng)度等?？梢姡嘘P(guān)魚類行為學(xué)的研究領(lǐng)域已經(jīng)從最初的海洋捕撈業(yè)，逐漸擴(kuò)展到生物技術(shù)、信息技術(shù)和資源管理等。

2.魚類行為學(xué)的研究領(lǐng)域

隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和完善，人們對(duì)魚類行為的觀察和探索也不斷取得進(jìn)展。最初只是研究魚類行為在捕撈產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用，其后發(fā)展到研究魚類個(gè)體對(duì)聲響、光照等環(huán)境因子的反應(yīng)，最后發(fā)展到研究魚類群體行為及內(nèi)部機(jī)理。魚類行為學(xué)的研究方向主要分為個(gè)體行為學(xué)和群體行為學(xué)：

2.1 魚類個(gè)體行為學(xué)

個(gè)體行為學(xué)主要是指魚類個(gè)體在外界物理或化學(xué)刺激下所產(chǎn)生的自發(fā)或條件反射行為。主要研究對(duì)象為魚類個(gè)體或者魚群中的獨(dú)立個(gè)體，主要研究方向?yàn)轸~類的趨、魚類的游泳行為和攝食行為等。

2.1.1 魚類的趨

魚類趨通常與環(huán)境因子的改變有關(guān)，如魚類的趨光性、趨流性和趨礁性等，這些行為通常理解為魚類的本能行為，不同魚類面對(duì)光照、溫度、流速甚至顏色的改變均有不同的反應(yīng)和適應(yīng)過(guò)程。王武等研究了水溫與光照對(duì)瓦氏黃顙魚幼魚行為的影響，發(fā)現(xiàn)水溫與光照的變化會(huì)對(duì)瓦氏黃顙魚行為產(chǎn)生顯著影響，過(guò)低的水溫會(huì)減少瓦氏黃顙魚對(duì)外界影響因素的反應(yīng)，而高強(qiáng)度光照會(huì)使瓦氏黃顙魚的游動(dòng)增加，尋求藏匿處。該研究結(jié)果表明瓦氏黃顙魚適合在低光照強(qiáng)度下養(yǎng)殖，增加了瓦氏黃顙魚幼魚的成活幾率，成功將魚類行為學(xué)應(yīng)用于養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域。羅清平等[3]對(duì)孔雀魚幼苗在光場(chǎng)中的行為反應(yīng)進(jìn)行分析，得出孔雀魚幼苗對(duì)短波長(zhǎng)的藍(lán)、綠光趨向性最強(qiáng)，相應(yīng)的照度范圍為1500～2000lx，而對(duì)長(zhǎng)波長(zhǎng)的紅、黃光表現(xiàn)出避光性。該研究結(jié)果在孔雀魚工廠化養(yǎng)殖中得到應(yīng)用，主要利用其趨光性特點(diǎn)進(jìn)行定時(shí)定量投餌，也可以利用其避光性的特點(diǎn)對(duì)其進(jìn)行驅(qū)趕，以提高清潔、分箱或捕撈等操作的效率。張碩等分析了黑幼魚的趨流性，測(cè)定了黑幼魚的感應(yīng)流速、喜好流速和極限流速，并定量分析了黑幼魚體長(zhǎng)與流速之間的關(guān)系，為今后學(xué)者開展遺傳育種或增殖放流相關(guān)研究提供科學(xué)依據(jù)。

2.1.2 游泳行為與攝食行為

魚類在長(zhǎng)期的進(jìn)化演變中，體形和游泳能力反映出魚類對(duì)環(huán)境的某種適應(yīng)性，觀察和研究魚類的游泳行為是魚類行為學(xué)的重要內(nèi)容。Marie-Laure等[9]早在1999年便利用聲學(xué)遙感裝置對(duì)養(yǎng)殖虹鱒魚的游泳行為進(jìn)行研究，結(jié)果表明在不同養(yǎng)殖密度條件下，虹鱒魚的行為差異顯著，在高密度下具有較高的行動(dòng)水平。Hanson等對(duì)黑鱸在自然環(huán)境中的游泳行為進(jìn)行研究，并對(duì)于個(gè)體間的游泳相似性進(jìn)行分析，得出了黑鱸在自然狀態(tài)下的游泳行為習(xí)性。由于這次實(shí)驗(yàn)實(shí)在自然條件下進(jìn)行的，所以非常具有實(shí)用價(jià)值。

2.2 魚類群體行為學(xué)

自然界中，許多動(dòng)物以群居的形式存在。群體生活的好處在于有利于發(fā)現(xiàn)食物、抵御敵害和繁衍等。有統(tǒng)計(jì)表明，80%的魚類均以聚集成群的形式進(jìn)行棲息、索餌和洄游，這是魚類經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期自然選擇的一種適應(yīng)性，對(duì)魚類生存起著十分有利的作用。魚類群體行為學(xué)以整個(gè)魚群為研究對(duì)象，主要研究方向?yàn)轸~群的形成機(jī)制和魚群的行為模擬等。ANNE等[17]研究了魚類早期的經(jīng)驗(yàn)對(duì)魚類集群的影響，認(rèn)為魚群能否成功聚集及逃避捕食危害，多數(shù)取決于早期的經(jīng)驗(yàn)，這在魚類行為學(xué)的研究中，具有突破性價(jià)值，該項(xiàng)研究也可以應(yīng)用于人工培育魚類的早期馴養(yǎng)。日本學(xué)者M(jìn). Zheng等從魚群對(duì)逃避捕食造成影響的角度出發(fā)，利用模型研究了魚群對(duì)捕食者的行為反應(yīng)，得出了不同情況下魚類的被捕食概率，魚群通常是某些個(gè)體行為對(duì)整個(gè)魚群發(fā)出訊息，并成功逃避捕食者的追捕。

3.魚類行為學(xué)的發(fā)展趨勢(shì)

魚類行為學(xué)發(fā)展至今，研究領(lǐng)域已經(jīng)從水產(chǎn)捕撈學(xué)逐漸拓展到生理學(xué)、生態(tài)學(xué)甚至計(jì)算機(jī)學(xué)。其未來(lái)發(fā)展趨仍會(huì)借助現(xiàn)代科技手段，對(duì)魚類行為的原理、方式和結(jié)果進(jìn)行更加精確的分析研究。隨著基因遺傳學(xué)的不斷發(fā)展，更多的學(xué)者將該項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于種群多樣性、個(gè)體性狀性和行為差異性的研究，魚類行為學(xué)也可以借鑒該項(xiàng)技術(shù)，對(duì)個(gè)體和群體行為的內(nèi)在因素進(jìn)行探索與表達(dá)，如研究魚類游泳姿態(tài)的差異性，雌、雄魚求偶行為的基因表達(dá)等。

近年來(lái)，隨著人工智能或仿真影像技術(shù)的發(fā)展，魚類行為研究者們也開拓了研究的新思路和方法，人工智能在魚類行為方面應(yīng)用的典型是涂曉媛魚，這是一種以計(jì)算機(jī)動(dòng)畫為條件，具備人工生命的魚類。涂曉媛魚具有自主性，可以根據(jù)外界環(huán)境變化作出不同反應(yīng)。該種技術(shù)的應(yīng)用具備廣闊前景，許多不具備的實(shí)驗(yàn)條件在計(jì)算機(jī)上便可完成。仿真影像技術(shù)可以將魚類的相對(duì)位置在計(jì)算機(jī)上精確顯示出來(lái)，不僅可以應(yīng)用于魚群個(gè)體間的相對(duì)距離研究，而且可以應(yīng)用于魚群與漁船、礁體之間的相對(duì)位置研究。魚類行為學(xué)會(huì)隨著社會(huì)科技的不斷進(jìn)步更加繁榮地發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

[1] 何大仁，俞文釗譯.（普羅塔索夫 B. P.著）.魚類的行動(dòng).北京：科學(xué)出版社，1984.

篇4

目的實(shí)驗(yàn)觀察針刺對(duì)抑郁模型大鼠行為學(xué)的影響。方法以 220 V，0.8 mA的方波刺激Wistar大鼠15 s，間隔45 s/次，共60次，總刺激時(shí)間15 min，進(jìn)行不可逃避的前休克動(dòng)物（pre-shocked animals）制作，形成學(xué)習(xí)無(wú)助大鼠模型，采用Open-Field法進(jìn)行動(dòng)物行為學(xué)敞箱實(shí)驗(yàn)及條件回避實(shí)驗(yàn)，觀察針刺對(duì)模型大鼠行為學(xué)的影響。結(jié)果針刺對(duì)學(xué)習(xí)無(wú)助模型大鼠水平及垂直運(yùn)動(dòng)均有明顯改善，且顯著提高大鼠的逃避成功次數(shù)、縮短逃避潛伏期（P

【關(guān)鍵詞】 針灸療法 抑郁癥

Abstract：ObjectiveTo observe the effect of acupuncture on behavior changes in the Wistar rats of depression.Methods40 male Wistar rats were randomly pided into 4 groups，namely acupuncture group， drug group， model group and normal control group.The rats were stimulated 15 minutes by quadratal wave of 220v， 0.8mA to make Wistar rat model of studying helplessness.The animal behavioral spacious box testing and conditioned avoidance testing were performed with the method of Open-Field.Results The crossing and rearing score of model rats were obviously improved and the time of successful avoidance was obviously enhanced by acupuncture，as well as shorten avoidance latent period（P

Key words：Acupuncture and moxibustion therapy; Depression

抑郁癥是一種常見的情緒障礙性疾病，表現(xiàn)為一種持久的抑郁狀態(tài)，以心境低落、軀體不適和睡眠障礙等為主要癥狀［1］。是危害全人類身心健康的常見病，其終生患病率為6.1%～9.5%［2］。據(jù)專家預(yù)測(cè)，到2020年，精神疾病在人們的疾病負(fù)擔(dān)中將列首位，而抑郁癥則占精神科疾病的47%［3］。抑郁癥及其治療引起內(nèi)外廣大學(xué)者的廣泛重視。本研究旨在通過(guò)觀察針刺對(duì)抑郁模型大鼠行為學(xué)的影響，評(píng)定針刺抗抑郁療效。

1 器材

1.1 藥品多慮平：南京白敬宇制藥廠產(chǎn)品，批號(hào)：20040912。

1.2 動(dòng)物（200±20）g Wistar雄性大鼠，由山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：魯動(dòng)質(zhì)字：20040816。

1.3 器材“華佗”牌32號(hào)1.0寸針灸針，蘇州醫(yī)療用品廠產(chǎn)品；穿梭箱：山東中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)研究室提供，根據(jù)文獻(xiàn)介紹制備［4］，大鼠穿梭箱有兩室，每室30 cm×30 cm× 20 cm，可人為開閉，箱底為不銹鋼柵條，條間距離為1 cm，兩室柵條可錯(cuò)時(shí)通電，一室與刺激器接通時(shí)，另一室為安全室；敞箱：根據(jù)文獻(xiàn)介紹，自行制備［5］，標(biāo)準(zhǔn)為40 cm×80 cm×80 cm，周壁、底面為黑色，底面以白線劃分為面積相等的25塊。

2 方法

2.1 模擬臨床建立大鼠學(xué)習(xí)無(wú)助模型將大鼠放入穿梭箱，中間通道關(guān)閉，通過(guò)底部的金屬柵條給予220V，0.8 mA的方波刺激，刺激15 s，間隔45 s/次，共60次，總刺激時(shí)間15 min，進(jìn)行不可逃避的電休克即前休克動(dòng)物（pre-shocked animals）制作［1］。

2.2 分組及給藥(200±20)g Wistar雄性大鼠40只，按體重均衡隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥多慮平組、針刺組，每組10只?？瞻捉M及模型對(duì)照組分別給予涼開水1 ml/100 g，ig；多慮平對(duì)照組給予多慮平3 mg/kg，生理鹽水配成30%水溶液1 ml/100g·ig ；空白對(duì)照組大鼠只放入穿梭箱內(nèi)而不進(jìn)行電刺激，時(shí)間相同。第2天除重復(fù)進(jìn)行前一天實(shí)驗(yàn)并開始給藥，連續(xù)給藥14 d。最后一次給藥后24 h，采用Open-Field法進(jìn)行動(dòng)物行為學(xué)敞箱實(shí)驗(yàn)及條件回避實(shí)驗(yàn)，記錄并統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

2.3 針刺取穴及操作方法針刺組根據(jù)《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［6］大鼠穴位定位方法，選擇百會(huì)、內(nèi)關(guān)、神庭、三陰交穴，并參照人和動(dòng)物的穴位解剖結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，在動(dòng)物針灸穴位圖譜的基礎(chǔ)上，于大鼠前正中線上，額頂骨縫交界線前方處定位神庭穴。其他穴位仿人取穴。針刺方法: 穴位常規(guī)消毒，百會(huì)穴向前斜刺，神庭穴向上斜刺，進(jìn)針深度約為0.2 cm。內(nèi)關(guān)直刺0.3 cm，三陰交直刺0.2 cm。每穴行均勻捻轉(zhuǎn)刺激30 s，留針10 min，每日治療1次，連續(xù)14 d。最后一次治療后24 h，采用Open-Field法進(jìn)行動(dòng)物行為學(xué)敞箱實(shí)驗(yàn)及條件回避實(shí)驗(yàn)，記錄并統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

2.4 敞箱實(shí)驗(yàn)將各組大鼠依次放入自制敞箱，以動(dòng)物穿越底面塊數(shù)為水平運(yùn)動(dòng)（crossing）得分，直立次數(shù)為垂直運(yùn)動(dòng)（rearing）得分，記錄其水平運(yùn)動(dòng)、垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)，每只動(dòng)物測(cè)定1次，測(cè)定時(shí)間為3 min/次，記錄水平運(yùn)動(dòng)得分和垂直運(yùn)動(dòng)得分情況。

2.5 條件回避實(shí)驗(yàn)（conditioned avoidance testing）繼敞箱實(shí)驗(yàn)后，大鼠放入穿梭箱后適應(yīng)5 s，進(jìn)行鈴聲刺激，非條件刺激為足電休克0.8 mA，在鈴聲響起3 s后開始方波輸出電刺激，當(dāng)動(dòng)物逃到安全室后停止鈴聲和刺激，如未能逃避時(shí)刺激達(dá)30 s時(shí)停止。1次/min，共進(jìn)行30次，刺激間隔為27 s。測(cè)定回避成功次數(shù)和逃避潛伏期。 動(dòng)物在鈴聲開始3 s內(nèi)逃到安全室，記錄回避成功一次，逃避潛伏期為0；刺激后才逃避的，其潛伏期記錄是從刺激開始到逃避完成的時(shí)間；到最后未能逃避的，則潛伏期為30 s。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用 ±s表示，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)、q檢驗(yàn)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用四格表的確切概率法檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1 針刺對(duì)學(xué)習(xí)無(wú)助模型大鼠敞箱實(shí)驗(yàn)的影響

3.1.1 水平運(yùn)動(dòng)針刺組、多慮平組、空白組均優(yōu)于模型組。結(jié)果見表1。

表1 對(duì)大鼠水平運(yùn)動(dòng)的影響（略）

為避免統(tǒng)計(jì)學(xué)上第2類錯(cuò)誤，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，本組數(shù)據(jù)采用q檢驗(yàn)。結(jié)果見表2。

表2 q檢驗(yàn)結(jié)果（略）

由此可見，空白組與模型組有顯著性差異，說(shuō)明此造模方法成功；針刺組及多慮平組與模型組有顯著性差異，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而前兩組與空白組的差異及前兩組間的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明針刺與多慮平均有改善抑郁模型大鼠水平運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的作用，且二者作用相似。

3.1.2 垂直運(yùn)動(dòng)各處理因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物垂直運(yùn)動(dòng)的影響無(wú)顯著差異。結(jié)果見表3。

表3 對(duì)大鼠垂直運(yùn)動(dòng)的影響（略）

為避免統(tǒng)計(jì)學(xué)上第2類錯(cuò)誤，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，本組數(shù)據(jù)采用q檢驗(yàn)。結(jié)果見表4。

表4 q檢驗(yàn)結(jié)果（略）

由此可見，各處理因素對(duì)大鼠的垂直運(yùn)動(dòng)的影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3.2 針刺對(duì)學(xué)習(xí)無(wú)助模型大鼠條件回避實(shí)驗(yàn)（conditioned avoidance testing）的影響

3.2.1 回避成功空白組、多慮平對(duì)照組、針刺組大鼠，回避成功次數(shù)較多。結(jié)果見表5。

表5 回避成功次數(shù)（略）

本組數(shù)據(jù)采用q檢驗(yàn)。結(jié)果見表6。

表6 q檢驗(yàn)結(jié)果（略）

由此可見，模型組與空白組具有非常顯著性差異，說(shuō)明造模成功。針刺組與模型組有顯著性差異，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明針刺可以顯著提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的回避成功次數(shù)，同時(shí)與多慮平組差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多慮平組與模型組有非常顯著性差異，說(shuō)明多慮平可以明顯提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的回避成功次數(shù)，但仍與空白組有顯著性差異。

3.2.2 回避潛伏期空白組、多慮平對(duì)照組、針刺組，回避成功較多，部分回避不成功的大鼠回避潛伏期也較短。結(jié)果見表7。

表7 回避潛伏期基本數(shù)據(jù)（略）

本組數(shù)據(jù)采用q檢驗(yàn)。結(jié)果見表8。

表8 q檢驗(yàn)結(jié)果（略）

由此可知，模型組與空白組具有非常顯著性差異，說(shuō)明模型成功；針刺和用藥組與模型組都具有非常顯著性差異，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而針刺與用藥組之間的差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；這兩組與空白組間的差異也不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即針刺與多慮平均可使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的由于抑郁狀態(tài)而影響的回避潛伏期的改變恢復(fù)正常。

4 討論

抑郁癥屬祖國(guó)醫(yī)學(xué)“郁證”范疇。綜合歷代醫(yī)家文獻(xiàn)，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)抑郁癥的特點(diǎn)和診斷標(biāo)準(zhǔn)的認(rèn)識(shí)，認(rèn)為情志不舒是抑郁癥的主要致病因素，肝氣郁結(jié)、氣郁傷神為其主要病機(jī)，屬標(biāo)本俱實(shí)之癥，其病位在肝，涉及心神，肝郁傷神是抑郁癥發(fā)病的關(guān)鍵。因?yàn)榍橹静皇婵捎绊懜蔚氖栊构δ?，而致肝氣郁結(jié)，氣機(jī)不暢，久郁心神不得所養(yǎng)而致傷神，從而出現(xiàn)精神抑郁、胸脅脹痛、易怒易哭等癥狀，故治療當(dāng)以疏肝理氣、解郁安神為主。方中神庭為督脈穴位，督脈入絡(luò)腦，與腦相連，腦居顱內(nèi)，為元神之府，故取之可以起到寧心安神，醒神開竅之功效；百會(huì)亦為督脈穴位，是諸陽(yáng)經(jīng)與督脈的交會(huì)穴，能清利頭目；三陰交屬足太陰脾經(jīng)經(jīng)穴，有調(diào)理、健壯脾胃的功能，取之可健脾和胃、補(bǔ)益氣血；內(nèi)關(guān)為手厥陰心包經(jīng)絡(luò)穴，氣通三焦，三焦主氣，取之可寬胸理氣、行氣開郁。諸穴合用，共奏理氣、解郁、安神之功效。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為第二信使系統(tǒng)及其最初接收胞外信號(hào)的G蛋白都與抑郁癥的病理生理有密切的關(guān)聯(lián)［7］。近年的研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥的發(fā)生還與細(xì)胞免疫功能降低，免疫細(xì)胞數(shù)目減少或免疫細(xì)胞因子水平升高有關(guān)。此外 ，5-羥色胺和去甲腎上腺素的降低也與抑郁癥的發(fā)病密切相關(guān)［8，9］。

我們實(shí)驗(yàn)觀察了針刺對(duì)抑郁模型大鼠行為學(xué)的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：針刺可以顯著改善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的水平運(yùn)動(dòng)(P0.05)。在本實(shí)驗(yàn)中，各處理因素對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠垂直運(yùn)動(dòng)的影響，不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；條件回避實(shí)驗(yàn)提示針刺可顯著提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的逃避成功次數(shù)(P0.05）。對(duì)于未逃避成功的實(shí)驗(yàn)大鼠，針刺也可以顯著縮短其逃避潛伏期(P0.05)。說(shuō)明針刺可明顯改善抑郁癥狀，為臨床治療抑郁癥提供了新的思路和方法，但針刺抗抑郁機(jī)理以及最佳療程等諸多問(wèn)題還需在今后的實(shí)驗(yàn)和臨床研究中進(jìn)一步探討。

參考文獻(xiàn)

［1］ 沈漁村.精神病學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1998： 358.

［2］ 郭克鋒.抑郁癥患者的治療難度預(yù)測(cè)性研究［J］.現(xiàn)代康復(fù)，2001，5（8上）：48.

［3］ 李 輝，針刺治療抑郁癥的現(xiàn)狀［J］.遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，6(1):26.

［4］ 徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理試驗(yàn)方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：811.

［5］ 張有志，聶惠民，張德昌，等.柴胡加龍骨牡蠣湯等經(jīng)方治療抑郁癥的動(dòng)物行為學(xué)研究［J］.中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2001，7（7）：30.

［6］ 林文注，王 佩．實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：277.

［7］ 炎 彬，杜力軍.抑郁癥分子生物學(xué)研究進(jìn)展［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2005，2（2）：138.

篇5

摘要：目的觀察頭頂一顆株注射液對(duì)快速老化大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及血、肝、腎、海馬、腦皮質(zhì)抗氧化酶的影響。方法采用氟哌啶醇造成實(shí)驗(yàn)大鼠獲得性記憶缺失動(dòng)物模型，用電跳臺(tái)法觀察對(duì)照組、模型組、頭頂一顆株注射液高、中、低劑量組大鼠行為學(xué)變化，測(cè)定各組大鼠血及肝、腎、海馬、腦皮質(zhì)等組織超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)含量。結(jié)果與模型組比較頭頂一顆株注射液各劑量組能維持實(shí)驗(yàn)大鼠學(xué)習(xí)記憶成績(jī)，多種組織SOD，GSH-Px 顯著升高，高、中劑量組作用尤其明顯(P

關(guān)鍵詞：頭頂一顆株； 學(xué)習(xí)； 記憶； 抗氧化酶； 超氧化物歧化酶； 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶

Effects of Trillium tschonoskii Maxim on Learning and Memory and Anti-oxidase in Rats

Abstract：ObjectiveTo study the effect of Trillium tschonoskii Maxim injection on the learning and memory and on the expression of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) in serum， liver， kidney， hippocampus， cortex of aging rats.MethodsRats were randomly pided into five groups， control group， model group， Trillium tschonoskii maxim injection small dose group， middle dose group and large dose group. Rat model of acquired memory deficiency induced with haloperidol was employed. Electricity stimulated jumping stand was used for observation on rat behavior change and meanwhile concentrations of SOD and GSH-Px in different organs of the animal were detected.ResultsIn contrast with model groups， Trillium tschonoskii maxim injection at different dosage could maintain learning and memory， significantly increase the concentrations of SOD and GSH-Px in different tissue of the rats.(P

Key words：Trillium tschonoskii Maxim; Learning； Memory； Anti-oxidase； Superoxid dismutase; Glutathione peroxidase

頭頂一顆株又稱延齡草Trillium tschonoskii Maxim，為百合科延齡草屬植物，以根入藥，含有薯蕷皂素、甾醇、甾酮等化學(xué)成分，具有鎮(zhèn)靜、止痛、止血作用，主要用于治療眩暈頭痛、神經(jīng)衰弱、跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)、崩漏等疾?。?］。 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能退行性病變是人體衰老的關(guān)鍵，并與代謝產(chǎn)生的氧自由基（oxygen free radicals）慢性損傷或抗氧化酶不足密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)用頭頂一顆株注射液腹腔注射，通過(guò)對(duì)各組大鼠行為學(xué)觀察和組織SOD，GSH-Px含量測(cè)定，探討頭頂一顆株注射液對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及抗氧化酶的影響，從而進(jìn)一步探討其改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能抗衰老作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 頭頂一顆株注射液制備頭頂一顆株由恩施中藥材生產(chǎn)GAP（質(zhì)量管理規(guī)范）示范基地提供，采用水提醇沉法制成含生藥30%的注射液，瓶裝密封消毒備用。

1.2 藥品與儀器氟哌啶醇注射液(湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn))， SOD、GSH-Px試劑盒（由南京建成生物工程研究所提供），回避反應(yīng)箱（由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院病理生理系提供），GL-20G II型高速低溫離心機(jī)，UV-2450分光光度儀，水浴箱。

1.3 電跳臺(tái)行為學(xué)訓(xùn)練及測(cè)試實(shí)驗(yàn)裝置為30 cm×30 cm回避反應(yīng)箱，箱底為銅柵，可通刺激電流。另有一高5 cm，頂端直徑為5 cm的橡膠圓臺(tái)作為避電擊平臺(tái)，固定放置在箱內(nèi)一角的銅柵上，大鼠可在圓臺(tái)上停留以回避電擊。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，先將大鼠輕放于回避反應(yīng)箱內(nèi)，使其適應(yīng)3~5 min，以消除探究反應(yīng)。爾后底部銅柵通電（36 V）2 s，大鼠在受電擊刺激中逐漸學(xué)會(huì)跳上平臺(tái)回避電擊。多數(shù)大鼠可能再次或多次跳至銅柵上，受到電擊后又重新跳回平臺(tái)，如此訓(xùn)練3 min，并記錄每只鼠受電擊數(shù)或犯錯(cuò)次數(shù)，以此作為學(xué)習(xí)成績(jī)。末次給藥后，再測(cè)試行為學(xué)改變，記錄3 min各鼠跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)和第一次跳下平臺(tái)的潛伏期。

1.4 動(dòng)物分組與用藥雄性Wistar大鼠50只，鼠齡40~50周，體重300~350 g，由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、頭頂一顆株高劑量組、中劑量組和低劑量組，每組10 只。模型組按1 g/kg體重腹腔注射氟哌啶醇注射液，頭頂一顆株高、中、低劑量組分別在注射氟哌啶醇的同時(shí)，按7.2，3.6，1.8 g/kg體重腹腔注射頭頂一顆株注射液，對(duì)照組每天等量腹腔注射生理鹽水，Bid，連續(xù)用藥7 d。

1.5 組織SOD，GSH-Px測(cè)定行為學(xué)測(cè)試結(jié)束后斷頸處死大鼠，迅速取血及各種組織，血液離心取血清，組織制成10%勻漿，備用。SOD，GSH-Px測(cè)定，按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，蛋白定量采用雙縮脲法測(cè)定。

1.6 統(tǒng)計(jì)方法所有結(jié)果都用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用±s表示，在對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)個(gè)別數(shù)據(jù)不符合ANOVA比較的要求，而用非參數(shù)進(jìn)行比較分析。

2 結(jié)果

2.1 頭頂一顆株對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響 電跳臺(tái)行為學(xué)測(cè)試結(jié)果顯示，頭頂一顆株各劑量組與模型組比較均能延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)大鼠的跳臺(tái)潛伏時(shí)間，減少3 min犯錯(cuò)次數(shù)， 高、中劑量尤其明顯(P

2.2 頭頂一顆株對(duì)大鼠血及組織SOD，GSH-Px影響從表2和表3可見：頭頂一顆株注射液各劑量組與模型組比較均能提高血液、海馬、腦皮質(zhì)及肝腎SOD，GSH-Px表達(dá)值，高、中劑量組作用明顯(P

表1 頭頂一顆株對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響（略）

與模型組比較，*P

表2 頭頂一顆株對(duì)大鼠血及組織SOD的影響（略）

與模型組比較，*P

表2 頭頂一顆株對(duì)大鼠血及組織GSH-Px的影響 （略）

與模型組比較，*P

3 討論

衰老（Senility）是人體一種全身性生理變化過(guò)程，各系統(tǒng)、器官、組織和細(xì)胞都會(huì)出現(xiàn)這種過(guò)程，其機(jī)制復(fù)雜，并與多種因素有關(guān)。Lustbader等研究發(fā)現(xiàn)，阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制與氧化應(yīng)激有關(guān)，氧化應(yīng)激通過(guò)氧自由基損傷神經(jīng)元細(xì)胞，促進(jìn)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡或死亡，引起神經(jīng)系統(tǒng)功能減退［2］。SOD和GSH-Px是重要的抗氧化酶系，普遍存在于人體各組織中，包括血液、肝臟、線粒體和細(xì)胞質(zhì)，有對(duì)抗自由基損傷和清除氧自由基、降低細(xì)胞內(nèi)H2O2水平、減少自由基和過(guò)氧化物蓄積的作用。氧自由基被SOD轉(zhuǎn)變?yōu)镠2O2后，GSH-Px可繼續(xù)作用在H2O2上，使之轉(zhuǎn)變成完全無(wú)害的水和氧。因此SOD，GSH-Px表達(dá)變化，已成為檢測(cè)衰老因素最為敏感和可靠的指標(biāo)［3］。已有實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道，根據(jù)氟哌啶醇可使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生僵住癥(強(qiáng)直性昏厥，catalepsy)的原理，用氟哌啶醇進(jìn)行大鼠腹腔注射，對(duì)SOD和GSH-Px有抑制作用，是很好的動(dòng)物老化造模劑［4］。本實(shí)驗(yàn)用氟哌啶醇造模，觀察、探討頭頂一顆株對(duì)大鼠行為學(xué)變化及在不同組織對(duì)SOD，GSH-Px表達(dá)作用的影響，結(jié)果表明：頭頂一顆株能維持實(shí)驗(yàn)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，顯著提高實(shí)驗(yàn)大鼠血、肝、腎、海馬、腦皮質(zhì)SOD，GSH-Px表達(dá)量，具有上調(diào)抗氧化酶表達(dá)、改善記憶抗衰老作用。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 謝宗萬(wàn)，范崔生，朱兆儀，等. 全國(guó)中草藥匯編，第2版［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：225.

［2］ Lustbader JW， Cirilli M， Lin C， et al. ABAD directly links Abeta to mitochondrialtoxicity in Alzheimer's disease［J］. Science，2004，304(5669):448.

篇6

關(guān)鍵詞：頤腦解郁方；抑郁；行為；免疫組化；5－羥色胺；去甲腎上腺素

中圈分類號(hào)：R－33　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A　文章編號(hào)：1673－7717(2008)07－1446－03

抑郁癥(Depression)是指以顯著而持久的情緒低落、活動(dòng)能力減退、思維與認(rèn)知功能遲緩為臨床主要特征的一類心境障礙。其發(fā)病率、傷殘率、復(fù)發(fā)率均較高，嚴(yán)重危害人們的心身健康。WHO指出，21世紀(jì)人類面對(duì)的最大疾息是精神疾病，而抑郁癥是其中的重點(diǎn)。對(duì)抑郁癥的研究已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視。目前西藥對(duì)抑郁癥的治療仍存在著起效慢、療程長(zhǎng)、副作用大、藥價(jià)昂貴、部分患者對(duì)抗抑郁劑治療無(wú)效等不盡人意之處。近年來(lái)根據(jù)中醫(yī)辨證論治的原則，對(duì)癥用藥，具有一定的優(yōu)勢(shì)。因此從中醫(yī)藥的角度對(duì)抑郁癥的病因病機(jī)、治則治法進(jìn)行理論性總結(jié)和探討，并結(jié)合療效確切的中藥復(fù)方對(duì)中醫(yī)藥治療抑郁癥進(jìn)行藥效學(xué)觀察和機(jī)理方面的探討，具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。本研究采用行為學(xué)及免疫組織化學(xué)方法，探討了頤腦解郁方對(duì)抑郁狀態(tài)模型大鼠行為學(xué)及腦內(nèi)5－羥色胺、去甲腎上腺素的影響。

1　材料與方法

1．1　動(dòng)物及分組

二級(jí)雄性Wistar大鼠，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證編號(hào)：SCXK(京)2002－0003。飼養(yǎng)1周(早7：00－19：00光照，19：00－次日7：00黑暗)，體重達(dá)250－300g，用OPEN－FIELD法進(jìn)行行為評(píng)分…，選擇評(píng)分相近的大鼠，隨機(jī)分為正常組、模型組、治療組、對(duì)照組，每組10只。

1．2　造模方法

正常組：每籠5只飼養(yǎng)，正常飲食飲水。模型組：參照文獻(xiàn)，采用慢性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)法，每籠1只飼養(yǎng)，進(jìn)行為期21天的慢性不可預(yù)見的應(yīng)激，造成大鼠慢性應(yīng)激抑郁模型。治療組：參照文獻(xiàn)建立慢性應(yīng)激抑郁狀態(tài)大鼠模型，造模結(jié)束后開始灌胃給藥，每日1次，連續(xù)6周。對(duì)照組：參照文獻(xiàn)建立慢性應(yīng)激抑郁狀態(tài)大鼠模型，造模結(jié)束后開始灌服生理鹽水，每日1次，連續(xù)6周。以上各組動(dòng)物在相互隔離的環(huán)境下飼養(yǎng)。

1．3　藥物

頤腦解郁方(北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室鑒定)，使用前按照灌胃劑量煎藥濃縮，濃度0.62g生藥/mL，貯存于4℃冰箱中備用，臨用前加熱。

1．4　實(shí)驗(yàn)儀器及試劑

大鼠行為觀察曠野箱(自制)；SMG－2型大鼠水迷宮反應(yīng)箱，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所；Polyvar萬(wàn)能顯微鏡，美國(guó)；Leitz石蠟切片機(jī)，德國(guó)；CMIAS8真彩病理圖像分析系統(tǒng)，北京航空航天大學(xué)。

免疫組化染色試劑盒，濃縮型DAB試劑盒，兔抗5－HT，北京中山生物技術(shù)有限公司。兔抗NE，Serologicals公司。

1．5　動(dòng)物處理及切片處理

中藥灌胃6周后，進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試(蔗糖水試驗(yàn)，曠野試驗(yàn)，迷宮法試驗(yàn))。然后予100g/L水合氯醛(400111g/kg)麻醉，取腦，用100mL/L的中性甲醛溶液固定。石蠟包埋，Leitz石蠟切片機(jī)進(jìn)行石蠟切片，片厚6um。

1．6　免疫組織化學(xué)染色(ABC法)

采用ABC法，主要步驟如下：切片入10mL/L甲醇H2O2液，室溫30min。蛋白酶K消化，37℃30min。正常羊血清，室溫30min。兔抗5－HT(1：80)，兔抗NE(1：300)，4℃過(guò)夜。生物素化二抗工作液，37℃2h。辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液，37℃2h。0.05％DAB－0.01％H2O2液顯色。脫水，透明，封片。

1．7　圖像分析與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

每組隨機(jī)取3張片子，每張片子在大腦額葉皮質(zhì)及海馬CA1－CA4區(qū)各取3個(gè)視野，采用CMIAS8真彩病理圖像分析系統(tǒng)對(duì)5－HT、NE陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行測(cè)量分析，統(tǒng)計(jì)每個(gè)場(chǎng)的面密度。

1．8　統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS for windows 10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以平均差±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間差異采用單因素方差分析(ANOVA)。

2　結(jié)果

2．1　頤腦解郁方對(duì)模型大鼠行為學(xué)的影響

蔗糖水試驗(yàn)中，模型組、治療組、對(duì)照組大鼠在治療前蔗糖水?dāng)z入量與正常組相比，均明顯減少，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。治療組大鼠治療后蔗糖水?dāng)z入量明顯增加，與對(duì)照組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表1。

曠野試驗(yàn)中對(duì)照組、模型組大鼠水平及垂直得分均小于正常組，有顯著性差異(P＜0.01)。反映了對(duì)照組和模型組大鼠活動(dòng)性減少，興趣缺乏。治療組大鼠水平走格數(shù)與站立次數(shù)明顯增加，水平得分和垂直得分均高于對(duì)照組，與對(duì)照組相比，有顯著差異(P＜0.01)。見表2。

水迷宮法試驗(yàn)中，模型組、對(duì)照組大鼠游到終點(diǎn)的時(shí)間延長(zhǎng)，錯(cuò)誤次數(shù)增加，與正常組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或0.01)，反映模型組、對(duì)照組大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力下降。治療組大鼠游出時(shí)間明顯縮短，錯(cuò)入盲端次數(shù)減少，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或0.01)。見表3、表4。

2．2　頤腦解郁方對(duì)模型大鼠腦額葉皮質(zhì)及海馬5－HT的影響

正常組大鼠腦皮質(zhì)內(nèi)可見I－Ⅵ層均有5－HT陽(yáng)性細(xì)胞，形態(tài)、大小規(guī)則，細(xì)胞層次清晰，5－HT表達(dá)在細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，呈深棕色，核區(qū)呈陰性，海馬CA1－CA4區(qū)錐體細(xì)胞層均表達(dá)5－HT，大多呈錐體形。模型組大鼠腦額葉皮質(zhì)和海馬錐體細(xì)胞層的5－HT陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量也明顯減少，細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，間隙增大，排列疏松不齊，表達(dá)明顯減弱。對(duì)照組大鼠皮質(zhì)和海馬錐體細(xì)胞層5－HT的表達(dá)明顯減弱。治療組大鼠皮質(zhì)Ⅱ－V層及海馬錐體細(xì)胞層均有5－HT的表達(dá)，且與對(duì)照組相比，5－HT的表達(dá)明顯增強(qiáng)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量也明顯增多。結(jié)果表明頤腦解郁方能促進(jìn)抑郁模型大鼠腦皮質(zhì)、海馬5－HT的表達(dá)。見表5。

2．3　頤腦解郁方對(duì)模型大鼠腦額葉皮質(zhì)及海馬NE的影響

正常組大鼠腦皮質(zhì)內(nèi)可見I－Ⅵ層均有NE陽(yáng)性細(xì)胞，但主要集中在Ⅱ－Ⅵ層，NE表達(dá)在細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，呈深棕色，核區(qū)呈陰性，同時(shí)血管壁也有表達(dá)。模型組大鼠

腦皮質(zhì)及海馬NE的表達(dá)與正常組相比，出現(xiàn)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)減弱。對(duì)照組大鼠腦皮質(zhì)及海馬NE表達(dá)明顯減弱。NE陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量也明顯減少且顏色變淺。治療組大鼠大腦額葉皮質(zhì)NE表達(dá)在Ⅱ－V層，且與對(duì)照組大鼠比較，NE的表達(dá)明顯增強(qiáng)，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量也明顯增多，顏色明顯加深。說(shuō)明頤腦解郁方能夠促進(jìn)抑郁模型大鼠皮層及海馬NE的表達(dá)。見表6。

3　討論

中樞5－HT能和NE能系統(tǒng)與情感活動(dòng)關(guān)系密切。目前研究認(rèn)為，腦內(nèi)去甲腎上腺素能系統(tǒng)調(diào)節(jié)睡眠和覺醒、學(xué)習(xí)和記憶、選擇性注意、應(yīng)激反應(yīng)以及獎(jiǎng)賞系統(tǒng)的功能。5－羥色胺在中樞具有調(diào)節(jié)情感、睡眠、警覺、記憶、食欲、等多種功能，可以增加行為活動(dòng)和自發(fā)學(xué)習(xí)積極性。腦內(nèi)去甲腎上腺素(NE)和5－羥色胺(5－HT)之間的平衡失調(diào)，即5－HT和(或)NE一種或數(shù)種神經(jīng)遞質(zhì)(生物胺)出現(xiàn)了神經(jīng)生化上的失衡或功能缺陷，導(dǎo)致傳遞功能受損，從而引起抑郁。

Papes(1937)提出了大腦的情緒回路，認(rèn)為大腦皮質(zhì)、海馬是調(diào)節(jié)情緒功能的兩個(gè)主要區(qū)域。Starkstein等和Robinson等認(rèn)為，腦卒中后抑郁是病灶破壞了NE能神經(jīng)元和5－HT能神經(jīng)元及其徑路，使這2種遞質(zhì)低下而導(dǎo)致抑郁狀態(tài)的發(fā)生。因?yàn)镹E能和5－HT能神經(jīng)元胞于腦干，其軸突通過(guò)丘腦及基底神經(jīng)節(jié)投射到達(dá)額葉皮質(zhì)及邊緣系統(tǒng)。5－HT神經(jīng)元的密集處中縫核群和去甲腎上腺素神經(jīng)元的密集處藍(lán)斑核之間有豐富的神經(jīng)聯(lián)系。目前研究認(rèn)為，腦內(nèi)去甲腎上腺素能系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)睡眠和覺醒、學(xué)習(xí)和記憶、選擇性注意、應(yīng)激反應(yīng)以及獎(jiǎng)賞系統(tǒng)的功能。5－羥色胺在中樞具有調(diào)節(jié)情感、睡眠、警覺、記憶、食欲、等多種功能，可以增加行為活動(dòng)和自發(fā)學(xué)習(xí)積極性。PSD的發(fā)生可能與大腦損害引起NE和5－HT之間的平衡失調(diào)有關(guān)。病灶累及上述部位時(shí)，就有可能影響區(qū)域內(nèi)的去甲腎上腺素能和5－羥色胺能的神經(jīng)通路，使去甲腎上腺素和5－羥色胺含量下降，從而導(dǎo)致抑郁。

篇7

關(guān)鍵詞：慢性疲勞綜合征 慢性束縛

Chronicity weary synthesis drafts the big mouse to make mold two method comparison

Mei Rongjun Wei Xiaoli

Abstract:Objective:Discusses the barrel fetter law to send the big mouse chronicity with the fetter law to make the mold wearily the comparison. Methods:30 male Wistar big mice divide into the barrel fetter group stochastically,puts up the fetter group and the control group,each group of each 10,use the chronic fetter the way to establish the big mouse chronicity weary synthesis to draft the model,observes each group of big mouses strength to use up the swimming experiment. Results:The barrel fetter group compares the fetter group big mouses behavior study target closer chronicity state of fatigue,also the death quantity are few. Conclusion :Establishes the more ideal chronic weary animal model support fetter law to surpass the barrel fetter law.

Keywords:The chronic weary synthesis drafts The chronic fetter

【中圖分類號(hào)】R-3 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1008-1879(2010)12-0002-01

本課題組［1］確立較為理想的動(dòng)物模型是研究CFS的基礎(chǔ)，本觀察通過(guò)對(duì)兩種常見慢性束縛造模方法的比較，尋找更合理的造模方法。

1 材料與方法

1.1 材料。

1.1.1 動(dòng)物。健康雄性Wistar大鼠30只,清潔級(jí),體重160g~200g，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境:清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng),溫度20℃~28℃,濕度35%~70%,噪聲

1.1.2 主要儀器及造模用具。儀器：水迷宮（研究室設(shè)備）。桶束縛法:用硬塑料瓶特制束縛筒，管狀,長(zhǎng)18 cm直徑5.2 cm,其瓶口為通氣口。大鼠頭向通氣口置入后,調(diào)節(jié)封口束縛大鼠活動(dòng)空間。大鼠束縛架：為木制，底座寬10cm、長(zhǎng)20cm、厚1cm，四角鐵釘、大鼠四肢捆綁彈力帶。

1.2 方法。

大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3d后,隨機(jī)分為桶束縛組、架束縛組與正常組，每組10只，10只/籠,自由進(jìn)食飲水。造模期間,桶束縛組與架束縛組每天各束縛1次,晚上六點(diǎn)開始。束縛時(shí),使桶束縛組大鼠鉆進(jìn)束縛筒內(nèi),調(diào)節(jié)到其不產(chǎn)生強(qiáng)烈反抗的緊張程度,平放在大鐵臺(tái)上。將架束縛組大鼠束縛于特制的鼠束縛架上。桶束縛時(shí)間為4小時(shí)，架束縛時(shí)間為3小時(shí)。束縛過(guò)程中,正常組動(dòng)物在同一環(huán)境,不予以進(jìn)食水。造模2周，桶束縛組死亡2只。結(jié)束后,立即開始行為學(xué)的測(cè)定。

2 力竭游泳實(shí)驗(yàn)觀察

3組動(dòng)物均于造模前一天及造模的第14天(造模最后1d)進(jìn)行,記錄大鼠從入水到游泳至力竭的時(shí)間(2次游泳法,取均值)。力竭游泳時(shí)水深為50cm、水溫(28±1)℃,將事先標(biāo)記好的大鼠同時(shí)置入游泳池,記錄大鼠從入水到游泳至力竭(頭部沉入水中10秒中不能浮出水面為力竭標(biāo)準(zhǔn))的時(shí)間。

3 結(jié)果

本觀察選擇力竭游泳實(shí)驗(yàn)評(píng)定動(dòng)物模型,造模后架束縛組大鼠力竭游泳時(shí)間時(shí)間明顯減少,與正常組對(duì)比有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(*P

篇8

【摘要】 ［目的］探討電針對(duì)SD大鼠的行為學(xué)的影響。［方法］健康SD大鼠30只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組（簡(jiǎn)稱正常組）10只，模型對(duì)照組（簡(jiǎn)稱模型組）10只，電針加模型組（簡(jiǎn)稱電 針組）10只三組；正常組采用大平臺(tái)法造模；模型組采用小平臺(tái)法造模，電針組造模同模型組，給予每日1次的電針治療。采用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法，觀察針灸的抗睡眠剝奪作用。［結(jié)果］電針能明顯改變其行為學(xué)指標(biāo)。［結(jié)論］電針可以改善其行為學(xué)，這種作用可能與電針促進(jìn)神經(jīng)內(nèi)分泌免疫學(xué)機(jī)制有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 電針；大鼠睡眠剝奪（SD）；行為學(xué)；百會(huì)；三陰交

Abstract： ［Objective］ To investigate the effects of REMl sleep deprivation （SD） on actions to investigate the efficacy of application of electroacupuncture for treating sleep deprivation.［Methods］Thirty healthy SD rats randomly allocated to three groups （normal control，model （A1），electrotreatment groups）.The rats of model （A1）group and electrotreatment group were induced in male rats by housing them on small platforms overwater，normalcontrol group rats were on big platforms overwater.After electrotreatment for electrotreatment groups，the changes of normal status and Open Field Test were measured with all rats.［Results］Electroacupuncture treatment can improve the actions.［Conclusion］Application of electroacupuncture can produce a fighting effect on sleep deprivation.The effect may be related to promoting the nerval endocrine cytokine of electroacupuncture.

Key words：electroacupuncture; rats sleep deprivation; actions;Baihui; San yinjiao

睡眠剝奪（sleep deprivation，SD）是指由于某些原因?qū)е碌乃杷邤?shù)量被迫減少［1］。本研究通過(guò)觀察針刺對(duì)睡眠剝奪大鼠行為學(xué)的影響。探索針刺改善失眠等睡眠障礙患者臨床癥狀的作用機(jī)理。

1 SD大鼠模型的建立

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康SpragueDawley（SD）大鼠30只，雌、雄各半，體重200～250g，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境溫度：（20±2）℃；濕度：60％～80％；水溫：保持在20℃左右。

1.2 主要儀器設(shè)備

小平臺(tái)（20個(gè)）：根據(jù)文獻(xiàn)［2］制成30cm×30cm×40cm鼠箱，睡眠剝奪裝置為圓柱形，正中立一直徑6cm，高8cm的小平臺(tái)，從箱底注水，使水面離平臺(tái)約1cm。每天早晚8：30更換鼠箱中的水。上午8∶00～11∶00之間在安靜的房間內(nèi)進(jìn)行觀察記錄。將大鼠置于中心方格內(nèi)，記錄大鼠在3min曠場(chǎng)內(nèi)的活動(dòng)，徹底清潔敞箱后再進(jìn)行下1只大鼠的觀察。

1.3 動(dòng)物造模

采用小平臺(tái)水環(huán)境法，剝奪箱為30cm×30cm×40cm大小的塑料水箱，正中立一直徑6cm圓形平臺(tái)，箱中注滿水，水面距平臺(tái)面約1.0cm。大鼠在平臺(tái)上可自由進(jìn)食進(jìn)水，如果睡眠，會(huì)因?yàn)榧埩λ沙诙淙胨?，因而造成SD。為排除隔離、限制活動(dòng)和水環(huán)境造成的應(yīng)激影響，我們采用了大平臺(tái)水環(huán)境法，其平臺(tái)直徑為18.0cm，大鼠在平臺(tái)上可以睡眠，其他環(huán)境與小平臺(tái)水環(huán)境法相同。SD期間持續(xù)燈光照射，室內(nèi)溫度控制在18℃～22℃。每天更換箱中的水，水溫保持在20℃左右。正常組（大平臺(tái)組）單獨(dú)籠養(yǎng)，自然晝夜光照，電針組條件同睡眠剝奪組，共持續(xù)9d。結(jié)果:健康SpragueDawley（SD）大鼠30只，成功造模28只，實(shí)驗(yàn)大鼠在造模過(guò)程中死亡兩只。其中正常組9只，電針組10只，模型組9只。

1.4 實(shí)驗(yàn)分組及處理

SD動(dòng)物模型成功28只，按照隨機(jī)分組的原則，分為正常組（即大平臺(tái)組）、電針組、模型組。

正常對(duì)照組（簡(jiǎn)稱正常組）：9只，采用大平臺(tái)，大鼠在已注水平臺(tái)上可以自由進(jìn)食飲水和睡眠；并在電針組治療時(shí)，用與電針組相同方法進(jìn)行抓放、固定，但不針刺。試驗(yàn)期間持續(xù)燈光照射，室溫（20±2）℃。

模型對(duì)照組（簡(jiǎn)稱模型組）：10只，采用小平臺(tái)水環(huán)境法。將大鼠放于已注水的小平臺(tái)上，大鼠在平臺(tái)上可自由進(jìn)食飲水，如果睡眠，會(huì)因?yàn)榧埩λ沙诙淙胨小Ｓ嗤＝M。

電針加模型組（簡(jiǎn)稱電針組）：9只，從試驗(yàn)第2天開始，于每天上午9∶00針刺針灸組大鼠“百會(huì)”、“三陰交”，選用1寸30號(hào)毫針，電針，留針20min。穴位定位：根據(jù)李忠仁編著的《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物穴位定位。電針治療儀：采用G6805I型電針儀（青島生產(chǎn)）;電針刺激參數(shù)：頻率100HZ；電壓24V；波形：疏密波；強(qiáng)度：以大鼠能安靜耐受為度，約為2mA； 療程：1次/d，共治療9d。余同模型組。

2 電針SD大鼠一般狀況的影響

模型組與電針組在早期均表現(xiàn)為興奮性增高，易激惹，對(duì)外界的反應(yīng)性及攻擊性增強(qiáng)，但72h后，可見身體明顯消瘦、精神萎靡、反應(yīng)遲鈍、警覺力下降等現(xiàn)象。而電針組在72h后大鼠并無(wú)身體明顯消瘦、精神萎靡、反應(yīng)遲鈍、警覺力下降等現(xiàn)象。正常組全程全部精神活潑、穩(wěn)定；活動(dòng)如常；抓取時(shí)反抗較劇，咬人；自48h起全部對(duì)照動(dòng)物耳廓、雙目和四肢末顏色呈淡粉紅色；144～216h，本組鼠毛由正常變?yōu)槁钥蓍?、潮濕?/p>

3 電針對(duì)SD大鼠的曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的影響

3.1 指標(biāo)檢測(cè)方法

各組動(dòng)物每天按組處理，并于處理后30min放入曠場(chǎng)中，測(cè)試其水平得分、垂直得分和中央格停留時(shí)間。曠場(chǎng)箱為木質(zhì)箱，底面為12m 的正方形，劃為25個(gè)面積相等的小方格，箱高40cm，周壁涂成黑色。測(cè)試時(shí)，將大鼠置于曠場(chǎng)測(cè)試箱底面中心，觀察其3min內(nèi)的行為。觀察指標(biāo)：以大鼠在中央格（即不靠近周壁的9個(gè)格子）停留的時(shí)間為中央格停留時(shí)間（time of staying in center），以大鼠穿越底面的方格數(shù)為水平得分（crossing core ），以后肢站立的次數(shù)為垂直得分（rearing core）。記錄各組動(dòng)物每天的垂直活動(dòng)得分、水平活動(dòng)得分和中央格內(nèi)停留時(shí)間。并觀察動(dòng)物修飾行為和大小便次數(shù)。每只動(dòng)物僅做一次行為測(cè)定，每次試驗(yàn)后，清洗曠場(chǎng)周壁及底面，以免上次動(dòng)物余留的信息影響下次測(cè)試結(jié)果。

3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1、2及圖2～4。 表 1 不同時(shí)間大鼠在曠場(chǎng)反應(yīng)中的水平得分（s）（略）表2 不同時(shí)間大鼠在曠場(chǎng)反應(yīng)中的水平得分（s）（略）

圖1及表1、2所示：正常組與電針組相比較，水平得分比較無(wú)意義，P=0.507（P>0.05）；正常組與模型組比較有極顯著差異，P=0.001（P

圖2及表3、4所示：正常組與電針組相比較，垂直得分比較無(wú)意義，P=0.681（P>0.05）；正常組與模型組比較有極顯著差異，P=0.002（P

從圖3、表5及表6可知，正常組與模型組比較有極顯著差異（P

4 討論

4.1 關(guān)于SD動(dòng)物模型的選擇

睡眠剝奪動(dòng)物模型是引起失眠較理想的研究睡眠的手段。本研究采用小平臺(tái)水環(huán)境法進(jìn)行SD表明：平臺(tái)面積與大鼠體重量之比為1∶1時(shí)不會(huì)產(chǎn)生SD，故本研究中大平臺(tái)直徑為18.0cm，在實(shí)驗(yàn)前后大平臺(tái)組體重?zé)o明顯變化，說(shuō)明其應(yīng)激水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于SD組。水環(huán)境和隔離對(duì)動(dòng)物確實(shí)產(chǎn)生一定的應(yīng)激作用，這從曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得分可知。由曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得知，與正常組相比，大鼠SD后精神行為表現(xiàn)出一定的興奮性，修飾行為或“洗臉”行為增多。我們知道修飾行為常發(fā)生于產(chǎn)生矛盾或害怕的情境中［3］，說(shuō)明SD環(huán)境使大鼠情緒非常緊張恐懼，攻擊行為增多。SD時(shí)間短，表現(xiàn)為一定的興奮，72h以后則有抑制趨勢(shì)。正常組由于一定的應(yīng)激作用，興奮性較高，并且沒有SD的影響，所以曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)得分優(yōu)于其他各組。由于大鼠SD后興奮性的提高，隨著SD時(shí)間的延長(zhǎng)，剝奪程度加深。

4.2 電針對(duì)SD大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的影響

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)（Open Field Test）是目前最常用的一種動(dòng)物心理實(shí)驗(yàn)方法，用來(lái)研究新環(huán)境中自發(fā)活動(dòng)（Spontaneous Activity）和探究行為（Explore behavior），檢驗(yàn)受試動(dòng)物在新環(huán)境下探究行為和適應(yīng)性。

從測(cè)試結(jié)果可知，正常組動(dòng)物的水平得分及垂直得分呈下降趨勢(shì)，表明動(dòng)物活動(dòng)性下降。實(shí)驗(yàn)中觀察到，正常組動(dòng)物生活相對(duì)安逸，又因?yàn)闀鐖?chǎng)測(cè)試在白天進(jìn)行，正是大鼠的相對(duì)安靜時(shí)間，故而動(dòng)物不愛活動(dòng)；實(shí)驗(yàn)的后期尤其如此；這可能也同其對(duì)曠場(chǎng)環(huán)境的逐步熟悉有關(guān)［4］。但與此同時(shí)，正常組動(dòng)物表現(xiàn)機(jī)敏、反應(yīng)靈活、目光有神、空間識(shí)別能力強(qiáng)。模型組動(dòng)物卻不如此，水平得分及垂直得分均有很大的波動(dòng)，在SD192h時(shí)仍相當(dāng)高，在最后一次測(cè)試時(shí)仍在增加。此時(shí)動(dòng)物極為疲憊，體力己衰弱而殆盡，行走時(shí)表現(xiàn)方向感極差。與此同時(shí)，電針組動(dòng)物則表現(xiàn)較為穩(wěn)定，波動(dòng)比較小。

中央格停留時(shí)間反映動(dòng)物對(duì)環(huán)境的認(rèn)知能力。正常動(dòng)物會(huì)避開空曠環(huán)境，迅速離開中央格，沿周邊活動(dòng)。如果對(duì)新環(huán)境的認(rèn)知能力差，則停留在中央格的時(shí)間就會(huì)延長(zhǎng)。從我們的測(cè)試結(jié)果來(lái)看，正常組大鼠在中央格的停留時(shí)間日益減少；事實(shí)上，這組動(dòng)物在放入曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱后通常會(huì)迅速離開中央地帶，行至角落或箱壁下，整理毛發(fā)，偶爾站立，少有行走。模型組動(dòng)物經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間SD，對(duì)環(huán)境的認(rèn)知能力明顯下降，常反復(fù)穿越中央地帶并在其中逗留，呆在中央格中的時(shí)間不斷增長(zhǎng)。電針組動(dòng)物的中央格停留時(shí)間則有不同程度的下降，提示電針可以改善睡眠剝奪大鼠的空間認(rèn)知能力。

此外，曠場(chǎng)行為測(cè)試指標(biāo)還包括理毛時(shí)間（修飾時(shí)間）和排便次數(shù)。理毛是動(dòng)物滿足的表現(xiàn)；排便多則反映了動(dòng)物的緊張程度高。由于我們采用改良多平臺(tái)水環(huán)境法造模，接受SD的動(dòng)物常常水濕毛發(fā)，放入曠場(chǎng)中時(shí)欲將其毛發(fā)舔干而使理毛時(shí)間增加，從而對(duì)結(jié)果產(chǎn)生干擾。本實(shí)驗(yàn)中，接受SD的動(dòng)物雖然與正常動(dòng)物有同樣的進(jìn)食進(jìn)水機(jī)會(huì)，但由于中樞、軀體雙重應(yīng)激的影響，食欲明顯下降，尤其是實(shí)驗(yàn)后期，進(jìn)食顯著減少，因此，排便次數(shù)作為考察指標(biāo)的準(zhǔn)確性特異性也不強(qiáng)。故而我們沒有將這兩項(xiàng)作為考察藥物作用效果的指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

［1］Drummond SP，Brown GG.The effects of total sleep deprivation on cerebral Responses to cognitive performance［J］.Neuropsychopharmacology，2001，25（5）：68.

［2］Mendelson W.B，Guthrie R.D，et al.The flowerpot technique of rapid eye movement sleep deprivation［J］.Pharmacol Behave，1974，2：553556.

篇9

關(guān)鍵詞：安宮牛黃丸；缺血性中風(fēng)；大腦中動(dòng)脈梗死大鼠模型；細(xì)胞因子

中圖分類號(hào)：R743 R289.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-1349（2011）06-0710-03The Protective Effect of Angong Niuhuang Pill on Experimental Cerebral Ischemia

Liu Zongtao,Sha Dike,Liu Yuanxin,et al

The Affiliated Hospital of Traditional Chinese Medicine,Xinjiang Medical University （Urumqi 830000）

Abstract：Objective To investigate the protective effect of Angong Niuhuang pill on experimental cerebral ischemia and its mechanism.Methods Rats were randomly divided into five groups：Sham group,model group,Angong Niuhuang pill group,western medicine group,Chinese traditional medicine with western medicine group.The models with focal cerebral ischemia of rat were established by the suture occluded method.Neurology evaluation was studied at 6 h,24 h,48 h and 72 h after middle cerebral artery occlusion（MCAO）and cerebral ischemia.The coefficient of brain and water content in whole brain were examined.The level of serum interleukin 10 （IL-10） in abdominal aorta was detected by enzyme linked in ununosorbent assay.Results Within four days of MCAO,different degrees of motion disturbances were observed in all rats except sham group.The coefficient of brain,the water content of whole brain and the level of serum IL-10 were obviously increased （P

Key words：Angong Niuhuang pillischemic apoplexymiddle cerebral artery occlusioncytokine缺血性中風(fēng)，西醫(yī)屬于缺血性腦血管病范疇，是由于血管阻塞引起腦缺血損傷而致局灶或全腦的功能障礙。具有發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高和復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn)，是威脅人類健康的重大疾病之一。中醫(yī)認(rèn)為，中風(fēng)其本在肝腎虧虛，其標(biāo)在風(fēng)、火、痰、瘀、虛；它們?cè)诎l(fā)病過(guò)程中相互影響，相互作用，臨床出現(xiàn)煩躁神昏譫語(yǔ)，此乃為腦血管意外急性期的關(guān)鍵所在【sup】［1］【/sup】。Framingham流行病學(xué)研究結(jié)果,65%的中風(fēng)為大腦中動(dòng)脈供血區(qū)的血管堵塞所致,與之相應(yīng),大腦中動(dòng)脈區(qū)局部缺血模型是實(shí)驗(yàn)性腦梗死研究中最常用的一種模型,其中大腦中動(dòng)脈（MCA）線栓模型應(yīng)用最為廣泛【sup】［2］【/sup】 。因此本實(shí)驗(yàn)采用MCA線栓法造成局灶性腦缺血大鼠模型，探討中藥制劑安宮牛黃丸灌胃配合西藥甘露醇與呋塞米針靜脈給藥對(duì)缺血性中風(fēng)急性期大鼠腦水腫變化規(guī)律、血清細(xì)胞因子及神經(jīng)行為學(xué)改變的影響，為中西醫(yī)結(jié)合并治,多途徑給藥治療缺血性中風(fēng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 健康雄性SD大鼠60只,3月齡，體重250 g～300 g,由新疆實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK［新］2003-0003號(hào)環(huán)境溫度控制在25℃～30℃飼養(yǎng)，空氣濕度維持在（50±5）%，用燈照使動(dòng)物體溫維持在（37.5±0.5） ℃。

1.2 藥物與試劑 安宮牛黃丸由北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠提供（國(guó)藥準(zhǔn)字Z11020076，批號(hào)9013181），實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配制成所需濃度；20%甘露醇、胞磷膽堿鈉注射液，由上海旭東海普藥業(yè)有限公司提供。呋塞米（速尿）由上海美優(yōu)制藥有限公司提供。白細(xì)胞介素（IL）-10定量ELISA試劑盒，購(gòu)于上海瑞齊生物科技有限公司（批號(hào)20101221）。

1.3 儀器 顯微手術(shù)器械（上海醫(yī)療手術(shù)器械廠）；電子分析天平（MC,京制0000249號(hào),北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；TGL-16C臺(tái)式高速離心機(jī)（金壇市醫(yī)療儀器廠制造）；酶標(biāo)分析儀（美國(guó)伯樂(lè)公司制造，X Mark）；參照文獻(xiàn)【sup】［3］【/sup】，選用4-0尼龍線,栓線直徑為0.25 mm～0.28 mm。

1.4 方法

1.4.1 動(dòng)物分組與給藥 將SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、安宮牛黃丸組（中藥組）、西藥組、中西藥組；假手術(shù)組、模型組均給予等容量生理鹽水3 mL灌胃；安宮牛黃丸組給予3 mL安宮牛黃丸溶解液灌胃治療；西藥組給予20%甘露醇2.625 mL、速尿0.42 mg尾部靜脈注射；中西藥組在西藥組治療的基礎(chǔ)上加用安宮牛黃丸（將1.134 g安宮牛黃丸加入54 mL水中溶解稀釋）；每只3 mL溶解液灌胃。動(dòng)物造模后連續(xù)灌胃給藥4 d，于末次給藥后分別處死。

1.4.2 大鼠局灶性腦缺血模型的建立 參照文獻(xiàn)采用線栓法制備大腦中動(dòng)脈（MCA）局灶性腦缺血模型【sup】［4］【/sup】:大鼠腹腔注射麻醉（即阿托品、氯胺酮、安定各2 mL、4 mL、4 mL，稀釋至20 mL，0.75 mL/100 g）后,仰臥固定,頸部正中切口,鈍性分離甲狀腺，將其上翻并用無(wú)菌紗布保護(hù)，分離右側(cè)頸總動(dòng)脈（common carotid artery，CCA）、頸內(nèi)動(dòng)脈（internal carotid artery，ICA）、頸外動(dòng)脈（externa1 carotid artery，ECA）,并在ECA、ICA分叉處結(jié)扎ECA,右側(cè)CCA剪口約0.2 mm的側(cè)“V”字形切口，插入頭端燒成圓鈍形直徑為0.28 mm的尼龍線,使線栓經(jīng)過(guò)CCA分叉處進(jìn)入ICA，到達(dá)MCA起始處，進(jìn)線長(zhǎng)度約（18.5±0.5） mm,感覺有阻力時(shí)即停止插入，并向外稍拉出一點(diǎn)即可實(shí)現(xiàn)MCA起始端堵塞MCA所有的血液來(lái)源,然后將CCA連同尼龍魚線一起結(jié)扎，扎緊備線，甲狀腺?gòu)?fù)位，關(guān)閉并縫合皮膚切口。假手術(shù)組大鼠接受相似手術(shù)處理，但是不插入線栓?？p合皮膚,實(shí)現(xiàn)MCAO造模完成。動(dòng)物入選標(biāo)準(zhǔn)（按Longa五級(jí)評(píng)分法【sup】［5］【/sup】取神經(jīng)功能行為評(píng)分為1分、2分、3分、4分的動(dòng)物）：選擇蘇醒后左上肢屈曲、行走時(shí)向左側(cè)旋轉(zhuǎn)或左側(cè)肢體癱瘓的大鼠為栓堵成功者進(jìn)行實(shí)驗(yàn),否則視為栓堵失敗,棄之不用。模型成功后，分別于MCAO后6 h、24 h、48 h、72 h進(jìn)行神經(jīng)功能行為評(píng)分；大鼠在斷頭處死前取血清檢測(cè)IL-10含量:各組大鼠麻醉后腹主動(dòng)脈取血法分別取全血約5 mL，室溫下放置20 min，然后以2 500 r/min離心10 min，小心吸取上清液即為血清標(biāo)本（溶血標(biāo)本不用），常溫下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 觀察指標(biāo)及測(cè)定方法

1.5.1 神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分測(cè)定 動(dòng)物蘇醒后，按Longa法【sup】［5］【/sup】對(duì)其神經(jīng)功能行為進(jìn)行5分制評(píng)分：0分，無(wú)明顯神經(jīng)病學(xué)癥狀；1分，不能完全伸展左側(cè)前爪；2分，向左側(cè)旋轉(zhuǎn)；3分，行走時(shí)向左側(cè)傾倒；4分，不能自行行走。

1.5.2 腦系數(shù) 動(dòng)物稱重,造模給藥4 d后斷頭取腦,沿腦橋上界水平切斷,取全腦稱重,腦系數(shù)全腦重÷體重×100%。

1.5.3 腦組織含水量的測(cè)定 造模給藥4 d后斷頭取腦，去除小腦、嗅球、低位腦干等，用濾紙吸干表面水分，稱量腦濕重，105 ℃烘烤24 h至恒重，精確稱量干重，采用Elliot【sup】［6］【/sup】公式計(jì)算腦組織含水量。

1.5.4 血清IL-10含量測(cè)定 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)IL-10含量，具體操作步驟參照試劑盒說(shuō)明書。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用SPSS 17.0軟件做統(tǒng)計(jì)分析；組間比較用單因素方差分析及Student-Newman-Keuls test統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié) 果

2.1 一般狀態(tài) 假手術(shù)組大鼠麻醉蘇醒后精神好，反應(yīng)靈活，活動(dòng)度大，全部存活，未見明顯對(duì)側(cè)肢體活動(dòng)障礙。其余各組術(shù)后4 d精神均較造模前差，反應(yīng)遲鈍，飲食較前減少，自潔能力下降，扎堆蜷縮，均出現(xiàn)不同程度的肢體活動(dòng)障礙，而以模型組為甚；其中模型組、西藥組、中西藥組分別有2只大鼠造模后半小時(shí)左右死亡；中藥組有1只大鼠造模后昏迷不醒，于第2天死亡。

2.2 體重指數(shù) 大鼠造模前稱重（g）為基礎(chǔ)值，造模后第1天、第2天、第3天、第4天分別稱重，取各時(shí)間點(diǎn)體重與基礎(chǔ)值之比,即體重指數(shù)。與模型組比較，各組動(dòng)物術(shù)后均有體重漸回升的過(guò)程；而假手術(shù)組體重上升較明顯，與其他各組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.3 神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分 假手術(shù)組大鼠都沒有神經(jīng)功能行為學(xué)癥狀，而模型組、中藥組、西藥組、中西藥組大鼠則有不同程度的神經(jīng)功能行為學(xué)表現(xiàn)。與模型組大鼠比較，中藥組、西藥組、中西藥組均可降低大鼠的神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分（P

2.4 各組對(duì)局灶性腦缺血大鼠腦水腫的影響（見表3） 與模型組比較，其他各組大鼠腦系數(shù)、腦組織含水量明顯降低（P

表3 各組對(duì)大鼠腦系數(shù)、腦組織含水量的影響（x±s）%

2.5 各組對(duì)局灶性腦缺血大鼠血清IL-10的影響（見表4） 與假手術(shù)組比較，各造模組IL-10均明顯升高（P

表4 各組對(duì)大鼠血清IL-10表達(dá)的影響（x±s）ng/L

3 討 論

安宮牛黃丸是我國(guó)傳統(tǒng)藥物中久負(fù)盛名的良方，是中醫(yī)治療中風(fēng)之要藥。安宮牛黃丸出自清代吳鞠通《溫病條辨》，素有“救急癥于即時(shí)，挽垂危于頃刻”的美譽(yù)，由牛黃、水牛角濃縮粉、麝香、珍珠、朱砂、雄黃、黃連、黃芩、梔子、郁金、冰片等11味藥組成。具有清熱解毒、豁痰開竅的功效，主治熱病、邪入心包、高熱驚厥、神昏譫語(yǔ)。臨床研究表明，安宮牛黃丸制劑具有改善缺血性中風(fēng)急性期神經(jīng)功能缺損情況的作用【sup】［7］【/sup】。對(duì)于急性中風(fēng)患者，安宮牛黃丸配合常規(guī)西醫(yī)綜合搶救治療明顯優(yōu)于單純常規(guī)綜合搶救治療【sup】［8］【/sup】。

IL-10作為一種抗炎性細(xì)胞因子，在缺血性腦損傷中具有腦保護(hù)作用。其保護(hù)作用是通過(guò)縮小腦梗死灶范圍，減緩炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡而發(fā)揮的【sup】［9］【/sup】。本試驗(yàn)結(jié)果顯示模型組大鼠血清IL-10升高，推測(cè)可能是動(dòng)物在受到應(yīng)激性損傷之后機(jī)體的自身保護(hù)機(jī)制而引起的；安宮牛黃丸組大鼠血清IL-10升高顯著，與單純西藥甘露醇、呋塞米、胞磷膽堿靜脈用藥療效未見明顯差別，而中西藥合用大鼠血清IL-10水平升高更為顯著，從而最終保護(hù)腦細(xì)胞，改善神經(jīng)功能缺損癥狀，降低缺血性中風(fēng)大鼠的死亡率、致殘率；這提示改變抗炎性因子IL-10的分泌為安宮牛黃丸對(duì)局部腦缺血大鼠腦損傷保護(hù)作用的機(jī)制之一。總之，雖然傳統(tǒng)中藥安宮牛黃丸給藥途徑受限,但仍是具有特殊功效的良藥，其與西藥聯(lián)用也許會(huì)提高臨床療效。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 周仲瑛，金實(shí)，李明富.中醫(yī)內(nèi)科學(xué)［M］.北京:北京中醫(yī)藥出版社，2006：322.

［2］ Hossmann KA.Cerebral ischemia:Models,methods and outcomes［J］.J Nneuropham,2007,55（3）:257-270.

［3］ 楊彥玲,陳雅慧.大鼠大腦中動(dòng)脈線栓法制備局灶性腦缺血模型的研究現(xiàn)狀［J］.臨床神經(jīng)電生理學(xué)雜志，2007，16（6）：374-376.

［4］ Takaba H,Fukuda K,Yao H.Substrain differences,gender,and age of produced by distal middle cerebral artery occlusion［J］.Cell Mol Neurobiol,2004,24:589-598.

［5］ Longa EZ,Weinstein PR,Carlson S,et al.Reversible middle cerebral artery occlusion［J］.Stroke,1989,20:84-91.

［6］ 李強(qiáng),王愛岳,劉運(yùn)生.HIF-1α在腦出血灶周的表達(dá)及其與腦水腫的關(guān)系［J］.中國(guó)耳鼻咽喉顱底外科雜志，2007，13（3）:161-163.

［7］ 李可建.安宮牛黃丸制劑治療缺血性中風(fēng)急性期隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)的系統(tǒng)評(píng)價(jià)［J］.陜西中醫(yī)，2006,27（7）：804-807.

［8］ 羅清運(yùn).安宮牛黃丸治療急性中風(fēng)32例療效觀察［J］.中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2009，18（10）：45.

［9］ Danton GH，Dietrieh WD.Inflammatory mechanisms after ischaemia and stroke［J］.Neuro Pathol Exp Neurol，2003，62:127-136.

篇10

本書分為3個(gè)部分。第1部分為機(jī)器人學(xué)中的行為層次結(jié)構(gòu)。介紹了如何通過(guò)設(shè)計(jì)一個(gè)機(jī)器人來(lái)處理行為分層結(jié)構(gòu)問(wèn)題。該過(guò)程涉及部分仿生技術(shù)，該階段最主要的貢獻(xiàn)是建立了很實(shí)用的智能技術(shù)產(chǎn)品。本章節(jié)重點(diǎn)介紹了行為層次結(jié)構(gòu)中很重要但是常常被忽略的兩個(gè)特征，即它對(duì)于探究行為的影響以及促使復(fù)雜領(lǐng)域規(guī)劃成本的降低。本章還給出了4個(gè)分層增強(qiáng)學(xué)習(xí)的例子來(lái)說(shuō)明行為層次結(jié)構(gòu)在探究及表征研究中的關(guān)鍵作用。通過(guò)學(xué)習(xí)給出的實(shí)例，我們有效驗(yàn)證了行為分層在人工以及現(xiàn)實(shí)世界中至關(guān)重要的作用。

第2部分為動(dòng)物行為學(xué)中的層次結(jié)構(gòu)。介紹了用于理解真實(shí)世界中動(dòng)物行為的層次結(jié)構(gòu)計(jì)算模型。該模型在一定程度上解答了科學(xué)研究中關(guān)于動(dòng)物智能行為分層的疑問(wèn)。本部分著重探討了動(dòng)物行為學(xué)中如下的研究熱點(diǎn)：1.模塊化的多臂控制模型。包括電機(jī)控制中的可計(jì)算問(wèn)題、感官冗余、大腦的模塊化和層次結(jié)構(gòu)、模塊化和層次化模型；2.電機(jī)控制中的泛化與干擾問(wèn)題。包括程序記憶的鞏固、生物系統(tǒng)中的干擾和泛化、多任務(wù)學(xué)習(xí)等；3.一個(gè)累積學(xué)習(xí)機(jī)器人的模型框架。內(nèi)容包括條件約束、感官運(yùn)動(dòng)映射模型、構(gòu)造映射模型、進(jìn)化行為訓(xùn)練，最后闡述了目前所面臨的研究挑戰(zhàn)等；4.分布式自適應(yīng)控制架構(gòu)中的知識(shí)層次積累。包括分布式自適應(yīng)控制描述、活性和環(huán)境控制系統(tǒng)的互補(bǔ)作用、空間信息集成等。

第3部分為動(dòng)物腦層次結(jié)構(gòu)。介紹了動(dòng)物腦層次結(jié)構(gòu)相關(guān)的計(jì)算模型，從而為未來(lái)的智能機(jī)器人解決實(shí)際問(wèn)題奠定了一定的基礎(chǔ)。本部分涵蓋如下內(nèi)容：1.智能計(jì)算假說(shuō)。包括線程的特點(diǎn)及其局限性、皮質(zhì)層次結(jié)構(gòu)、基底核層次結(jié)構(gòu)、大腦皮層結(jié)構(gòu)整合；2.分層強(qiáng)化學(xué)習(xí)和任務(wù)分解。包括分層增強(qiáng)學(xué)習(xí)、潛在的神經(jīng)機(jī)制、識(shí)別有效子目標(biāo)等；3.大腦中分層運(yùn)動(dòng)功能的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型。包括構(gòu)造運(yùn)動(dòng)功能的分層動(dòng)態(tài)模型、調(diào)制高層次運(yùn)動(dòng)程序、學(xué)習(xí)運(yùn)動(dòng)序列以及分層建模未來(lái)所面臨的挑戰(zhàn)。