導(dǎo)語：新生膠囊對腫瘤模型動(dòng)物扶正祛邪論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的驗(yàn)證新生膠囊扶正祛邪的主要藥理作用。方法試驗(yàn)選用ICR小鼠、BALB/C品系裸鼠,建立S180肉瘤腫瘤模型和MGC-803腫瘤模型,觀察口服灌胃新生膠囊對腫瘤小鼠腫瘤的抑制作用,選用S180腹水腫瘤模型小鼠觀察新生膠囊對小鼠生命存活時(shí)間的影響。結(jié)果新生膠囊能顯著抑制S180荷瘤小鼠和BALB/C裸鼠MGC-803移植瘤的生長,與腫瘤模型組比較差異有顯著性(P<0.05)。小鼠灌胃新生膠囊,對S180腹水腫瘤小鼠生命存活時(shí)間與模型組比較差異無顯著性(P>0.05)。但與環(huán)磷酰胺合用,可以延長S180腹水腫瘤小鼠存活時(shí)間,生命延長率為33.2%~38.86%,提示新生膠囊與環(huán)磷酰胺合用對S180腹水小鼠存活時(shí)間有協(xié)同增效作用的趨勢。新生膠囊還具有一定的扶正作用,對注射環(huán)磷酰胺引起的小鼠免疫功能降低有一定的改善,對血流中碳粒的吞噬廓清能力有一定的增強(qiáng)作用。提高吞噬指數(shù)(K),增加血清溶血素含量,與模型組比較差異有顯著性(P<0.05)。結(jié)論新生膠囊具有一定的扶正祛邪、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用。

【關(guān)鍵詞】新生膠囊;S180肉瘤腫瘤模型;MGC-803腫瘤模型;扶正祛邪

新生膠囊是由黃芪、乳香、沒藥等多味中藥組成的中藥復(fù)方制劑,具有清熱解毒、活血消癥、散結(jié)止痛的功效,臨床上用于食管癌、胃癌及惡瘡腫毒等癥的輔助用藥。為驗(yàn)證其主要藥理作用,我們選用ICR小鼠、BALB/C品系裸鼠,建立S180肉瘤腫瘤模型和MGC-803腫瘤模型,觀察新生膠囊扶正祛邪的藥理作用,并以參芪顆粒、注射用環(huán)磷酰胺為陽性對照,試驗(yàn)結(jié)果如下。

1材料

1.1動(dòng)物小鼠:ICR品系,等級:SPF(清潔級);裸鼠:BALB/C品系,等級:SPF。由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。供給源許可證號:SCXK(京)2002-0003。

1.2藥物新生膠囊批號:20040118,含量:每克原藥提取物相當(dāng)3.68g生藥。提供單位:北京中醫(yī)藥大學(xué)。注射用環(huán)磷酰胺生產(chǎn)單位:江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司,產(chǎn)品批號:0208211。臨用時(shí)用生理鹽水配成所需濃度。參芪顆粒生產(chǎn)單位:江西山高制藥有限公司,臨用時(shí)用0.5%羧甲基纖維素鈉配成所需濃度。

1.3瘤株小鼠S180瘤株由中醫(yī)研究院中藥研究所提供;小鼠MGC-803瘤株由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所動(dòng)物室提供。

1.4儀器與試劑TU-1901雙光束紫外可見分光光度計(jì),北京普析通用儀器有限責(zé)任公司制造。

2試驗(yàn)方法

2.1祛邪作用的研究

2.1.1對小鼠S180肉瘤瘤體生長的影響[2]腫瘤模型建立于超凈工作臺中,取S180肉瘤瘤液,以生理鹽水稀釋,顯微鏡下計(jì)算1ml瘤液中活體瘤細(xì)胞數(shù),用生理鹽水稀釋成所需濃度(1.6×107個(gè)/ml),按每只小鼠0.2ml接種于右腋皮下。

取上述健康ICR品系小鼠75只(每次同性別),體重19~21g,無菌條件下,于右側(cè)腋下接種上述配置的S180腫瘤瘤液0.2ml,24h后隨機(jī)分成5組,模型組,新生膠囊大、中、小劑量組,環(huán)磷酰胺陽性對照組,每組15只(分組和給藥劑量見表1)。每天各組小鼠灌胃相應(yīng)藥物0.5ml/20g,連續(xù)給藥8天。陽性對照組小鼠隔日腹腔注射環(huán)磷酰胺20mg/kg。共4次,模型組灌胃同體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液。于末次給藥24h后處死小鼠,稱體重并剝離皮下瘤塊,稱瘤重,計(jì)算各組瘤體重量,并按下列公式計(jì)算抑瘤率,以抑瘤率>30%為有效。

抑瘤率=(1-T/C)×100%(T為給藥組瘤重,C為對照組瘤重)

以上實(shí)驗(yàn)重復(fù)3批。表1新生膠囊對S180肉瘤瘤體生長的影響注:與模型組比較,**P<0.01,*P<0.05

2.1.2對BALB/C小鼠MGC-803肉瘤瘤體生長的影響[2]取上述健康BALB/C品系雌性裸鼠50只,體重13~16g,無菌條件下,于右側(cè)肩后接種MGC-803肉瘤瘤塊3mm×3mm±2mm,24h后隨機(jī)分成5組:模型組,新生膠囊大、中、小劑量組,環(huán)磷酰胺陽性對照組,每組10只(分組和給藥劑量見表2)。每天各組小鼠灌胃相應(yīng)藥物0.1ml/20g,連續(xù)給藥25天。陽性對照組小鼠每隔6天腹腔注射環(huán)磷酰胺20mg/kg,共連續(xù)4次,模型組小鼠灌胃同體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液。于末次給藥24h后處死小鼠,稱體重并剝離皮下瘤塊,稱瘤重,計(jì)算各組瘤體重量,并按下列公式計(jì)算抑瘤率,以抑瘤率>30%為有效。

抑瘤率=(1-T/C)×100%

(T為給藥組瘤重,C為對照組瘤重)

以上實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次。表2新生膠囊對MGC-803肉瘤瘤體生長的影響注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01

2.1.3對S180腹水腫瘤小鼠生命存活時(shí)間的影響[1]取上述健康ICR小鼠75只,按體重隨機(jī)分為5組,無菌條件下,以生理鹽水稀釋S180腹水腫瘤細(xì)胞(1.2×107個(gè)/ml),每只小鼠腹腔注射S180腫瘤腹水液0.2ml,24h后按體重隨機(jī)分為5組(分組、給藥劑量及方法同2.1.1),連續(xù)給藥14天,觀察記錄各組小鼠存活的天數(shù),并計(jì)算生存率。以上實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。見表3。表3新生膠囊對S180腹水腫瘤小鼠存活時(shí)間的影響注:與模型組比較,**P<0.01

2.2扶正作用的研究(對小鼠免疫功能的影響)

2.2.1對荷瘤小鼠免疫器官重量的影響取上述健康ICR雌性小鼠60只,體重20~22g,無菌條件下,于右側(cè)腋下接種S180腫瘤細(xì)胞(1.6×107個(gè)/ml)0.2ml,24h后隨機(jī)分成5組:模型組,新生膠囊大、中、小劑量組,環(huán)磷酰胺陽性對照組,每組12只(分組、給藥劑量見表4)。另設(shè)一組空白對照組,每天各組小鼠灌胃相應(yīng)藥物0.5ml/20g,連續(xù)給藥8天。陽性對照組小鼠隔日腹腔注射環(huán)磷酰胺20mg/kg。共4次,模型組和空白對照組灌胃同體積0.5%羧甲基纖維素鈉溶液。于末次給藥24h后處死小鼠,解剖,稱取胸腺、脾臟重量,按下列公式計(jì)算器官系數(shù)。

胸腺指數(shù)=胸腺(mg)/體重(g)

脾指數(shù)=脾臟(mg)/體重(g)表4新生膠囊對荷瘤小鼠免疫器官的影響注:與模型組比較,**P<0.01;與空白組比較,△△P<0.01

2.2.2對小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能的影響[3](小鼠碳粒廓清法)取健康ICR品系小鼠78只,雌雄各半。按體重隨機(jī)分為6組(分組及給藥劑量見表5),各組小鼠每天分別灌胃相應(yīng)藥物0.5ml/20g體重,連續(xù)14天。除空白對照組外,其余各組小鼠分別于給藥后第8天、10天小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg,造成小鼠免疫功能低下模型,于末次給藥后1h,每只小鼠尾靜脈注射印度墨汁0.1ml/10g體重,分別于注射后1min、5min從小鼠眼靜脈叢取血20μl,溶于2.5ml0.1%Na2CO3溶液中搖勻,照分光光度法,在680nm處測定吸收度(OD)值,最后將小鼠頸椎脫臼處死,分別稱取肝脾重量。按下列公式計(jì)算廓清指數(shù)(K)和校正廓清指數(shù)(a)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算。

K=logOD1-logOD2T2-T1

ɑ=3K×體重/(肝重+脾重)表5新生膠囊對小鼠RES吞噬功能的影響注:與空白對照組比較,△△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05

2.2.3小鼠體液免疫功能的影響(溶血素法)取健康ICR品系小鼠78只,雌雄各半。按體重隨機(jī)分成6組(分組、給藥劑量見表6),每組13只。各組小鼠每天分別灌胃相應(yīng)藥物0.5ml/20g體重,模型組、空白對照組灌胃同體積0.5%CMC-Na溶液,連續(xù)給藥14天。于給藥后第7天,各組按0.2ml/只腹腔注射5%雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液進(jìn)行免疫。第8天、10天除空白對照組小鼠外其他各組小鼠每只腹腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg,造成小鼠免疫功能低下模型。并于免疫后第7天,各組動(dòng)物取血,將血清稀釋100倍。取稀釋血清,與5%雞紅細(xì)胞、10%豚鼠血清(補(bǔ)體)作用后,離心,取上清液于540nm處測定光密度(OD值),各組進(jìn)行比較,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算。表6新生膠囊對小鼠血清溶血素含量的影響注:與空白組比較,△△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01

2.3增效作用的研究(與環(huán)磷酰胺合用對S180腹水小鼠存活時(shí)間的影響)取上述健康ICR小鼠90只,按體重隨機(jī)分為6組,無菌條件下,以生理鹽水稀釋S180腹水腫瘤細(xì)胞(1.2×107個(gè)/ml),每只小鼠腹腔注射S180腫瘤腹水液0.2ml,24h后按體重隨機(jī)分為6組,模型組,新生膠囊大、中、小劑量組,環(huán)磷酰胺5mg/kg、20mg/kg劑量組,各組每天灌胃給藥(藥劑量及方法同2.1.1),同時(shí)新生膠囊各組隔日腹腔注射環(huán)磷酰胺5mg/kg體重,連續(xù)14天,觀察記錄各組小鼠存活的天數(shù)。以上實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次。

2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法以SPSS統(tǒng)計(jì)軟件,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間差異用t檢驗(yàn)。

3試驗(yàn)結(jié)果

3.1祛邪作用的研究(抗腫瘤作用研究)

3.1.1對小鼠S180肉瘤瘤體生長的影響試驗(yàn)結(jié)果表明:S180腫瘤模型小鼠口服新生膠囊大、中劑量組能顯著抑制S180移植瘤的生長,與腫瘤模型組比較差異有顯著性(P<0.01)。結(jié)果見表1。

3.1.2對BALB/C小鼠MGC-803肉瘤瘤體生長的影響試驗(yàn)結(jié)果表明:MGC-803腫瘤模型小鼠口服新生膠囊大、中劑量組能顯著抑制BALB/C小鼠MGC-803移植瘤的生長,與腫瘤模型組比較差異有顯著性(P<0.05)。結(jié)果見表2。

3.1.3對S180腹水腫瘤小鼠生命存活時(shí)間的影響試驗(yàn)結(jié)果表明:S180腹水腫瘤小鼠口服新生膠囊小鼠的存活時(shí)間與模型組比較差異無顯著性(P>0.05)。注射環(huán)磷酰胺組小鼠與模型組比較差異有顯著性(P<0.01),結(jié)果見表3。

3.2扶正作用的研究(對免疫功能的影響)

3.2.1對荷瘤小鼠免疫器官重量的影響試驗(yàn)結(jié)果表明:與模型對照組比較,新生膠囊大、中、小劑量對荷瘤小鼠胸腺、脾臟重量,差異無顯著性(P>0.05)。結(jié)果見表4。

3.2.2對小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能的影響(小鼠碳粒廓清法)試驗(yàn)結(jié)果表明:小鼠灌胃新生膠囊3.15g生藥/kg、1.58g生藥/kg14天后,對環(huán)磷酰胺引起的免疫功能低下,有提高K值(廓清指數(shù))的作用,與模型組比較差異有顯著性(P<0.05),結(jié)果見表5。

3.2.3對小鼠體液免疫功能的影響(溶血素法)試驗(yàn)結(jié)果表明:小鼠口服新生膠囊3.15g生藥/kg、1.58g生藥/kg、0.79g生藥/kg,可提高血清溶血素含量,與模型組小鼠比較差異有顯著性(P<0.05),結(jié)果見表6。

3.3增效作用的研究(與環(huán)磷酰胺合用對S180腹水小鼠存活時(shí)間的影響)結(jié)果表明:新生膠囊大劑量組小鼠合用環(huán)磷酰胺5mg/kg,生命延長率為33.2%,38.86%提示新生膠囊與環(huán)磷酰胺合用對S180腹水小鼠存活時(shí)間有協(xié)同增效作用的趨勢。結(jié)果見表7。表7新生膠囊與環(huán)磷酰胺合用對S180腹水腫瘤小鼠存活時(shí)間的影響注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01

4小結(jié)

新生膠囊是由黃芪、乳香、沒藥、重樓、人工麝香等中藥組成的復(fù)方制劑,具有清熱解毒、活血消癥、散結(jié)止痛的功效,臨床上將用于食管癌、胃癌及惡瘡腫毒等癥的輔助用藥。動(dòng)物試驗(yàn)表明:(1)新生膠囊具有一定的祛邪作用。大、中劑量組能顯著抑制S180荷瘤小鼠和BALB/C小鼠MGC-803移植瘤的生長,與腫瘤模型組比較差異有顯著性(P<0.05)。(2)小鼠灌胃新生膠囊,對S180腹水腫瘤小鼠生命存活時(shí)間與模型組比較差異無顯著性(P>0.05)。但小鼠灌胃新生膠囊3.15g/kg同時(shí)注射環(huán)磷酰胺5mg/kg可以延長S180腹水小鼠存活時(shí)間,生命延長率為33.2%~38.86%,提示新生膠囊與環(huán)磷酰胺合用對S180腹水小鼠存活時(shí)間有一定協(xié)同增效作用趨勢。(3)新生膠囊具有一定的扶正作用。小鼠灌胃新生膠囊,對注射環(huán)磷酰胺引起的免疫功能降低有一定的改善作用,對血流中碳粒的吞噬廓清能力有一定的增強(qiáng)作用。提高吞噬指數(shù)(K)、增加血清溶血素含量,與模型組比較差異有顯著性(P<0.05)。

5討論

腫瘤,尤其是惡性腫瘤是危害人民健康的重大疾病之一,臨床上對腫瘤的治療,無論是放療或是化療,都有一定的副作用,給患者帶來痛苦和肌體免疫力的下降,新生膠囊是中藥復(fù)方制劑,具有清熱解毒、活血消癥、散結(jié)止痛的功效,動(dòng)物試驗(yàn)也表明具有一定的扶正祛邪、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用。這對于臨床上治療腫瘤,減少放化療帶來的痛苦又增加了新的治療途徑。

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