導(dǎo)語：衰老模型小鼠腦組織管理論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】采用昆明小鼠為實(shí)驗(yàn)對象，通過飼喂不同比例的沙棘粉飼料4周以后，在抗疲勞實(shí)驗(yàn)中，以血清乳酸脫氫酶(LDH)活力、血乳酸(BLA)、肌糖原(MG)、肝糖原(LG)等4個生理參數(shù)為指標(biāo)觀察沙棘粉的抗疲勞效應(yīng)，結(jié)果表明，飼喂4周沙棘粉劑的小鼠，其LDH、LG含量均顯著高于對照組；其抗疲勞時間亦顯著增長，且抗疲勞實(shí)驗(yàn)30min和60min后的血乳酸水平均低于對照組。在檢測小鼠腦組織的MDA和GSH含量時發(fā)現(xiàn)4％～6％劑量沙棘粉能降低MDA含量，提高GSH含量，表明沙棘粉能拮抗D-半乳糖的損傷，達(dá)到維生素相同效果。

【關(guān)鍵詞】沙棘粉；衰老小鼠；腦組織氧化還原物質(zhì)；抗疲勞效果

沙棘制品不僅可以作為餌料中的維生素源，還可制成供人類食用的產(chǎn)品。沙棘果享有“維生素倉庫”和“神秘果”之稱，沙棘果中含有豐富的生物活性物質(zhì)，具有祛痰、利肺、養(yǎng)胃、健脾等功效，對心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗腫瘤、抗衰老、抗炎、抗輻射損傷等方面均有顯著的藥理效應(yīng)［1］?？梢灶A(yù)見，沙棘制品的市場前景十分可觀，而目前我國沙棘資源浪費(fèi)嚴(yán)重。因此開發(fā)利用此資源已迫在眉睫。西部地區(qū)政府及種植戶迫切希望高等學(xué)校、科研院所開展沙棘資源開發(fā)利用的研究，本實(shí)驗(yàn)采用沙棘果的干粉作為實(shí)驗(yàn)材料，通過飼喂昆明鼠4周以后，進(jìn)行其抗疲勞效果的研究，為沙棘資源開發(fā)利用提供基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)參數(shù)。

1材料與方法

1.1動物來源及實(shí)驗(yàn)場所實(shí)驗(yàn)動物選自南京安立默實(shí)驗(yàn)動物繁殖調(diào)劑中心（許可證號SYXK2002-0059），在分組前選用了出生日齡（4周齡）及體重都基本相同的昆明小鼠（雄性）；實(shí)驗(yàn)場所為南京大學(xué)藥業(yè)有限公司動物房（許可證號SCXK2002-0016）。

1.2實(shí)驗(yàn)分組取小白鼠147只，隨機(jī)分成7個大組，每組均為21只，組1作為飼喂添加復(fù)合維生素的對照組，組2作為飼喂無復(fù)合維生素飼料的空白對照組，組3～組7作為飼喂添加比例不同的沙棘粉飼料實(shí)驗(yàn)組，小鼠均單籠飼養(yǎng)4周。

1.3飼喂劑量及配方每日投喂足量飼料和水，各組飼料配方如表1。

1.4LDH活力、BLA、MG、LG含量測試抗疲勞實(shí)驗(yàn)前，從每組取小鼠3只，眼眶放血制血清送檢，測試乳酸脫氫酶（LDH）活力、肌糖原（MG）和肝糖原（LG），LDH活力，參數(shù)King氏法測定［2］。

1.5抗疲勞實(shí)驗(yàn)抗疲勞試驗(yàn)依陳奇方法［3］，將飼喂4周的小組分別取12只按小鼠體重10%負(fù)重砝碼，于水溫25～27℃、40cm深、直徑為20cm的標(biāo)本瓶中游泳，進(jìn)行抗疲勞試驗(yàn)。待其頭部沒入水下5秒時迅速撈起，記錄游泳時間，待其恢復(fù)30min后各取6只眼眶放血，制備血清，待送檢測試BLA，各組剩余6只待其恢復(fù)60min后再眼眶放血，制血漿送檢測試BLA。

考慮到在對每一只鼠的每一次取血操作時，對動物造成不同程度傷害性刺激，由此引起的抗疲勞強(qiáng)度無法保持一致，故而設(shè)計(jì)成每一個實(shí)驗(yàn)測定都分批取樣，進(jìn)行一次性采血。

1.6小鼠腦組織MDA、GSH含量取飼喂4周的小鼠，每組6只，斷頸處死，迅速取出大腦，用冰冷的PBS緩沖液制備10%腦勻漿，離心后取上清液進(jìn)行MDA和GSH含量測定。測定步驟按試劑盒說明書進(jìn)行，MDA、GSH測定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

2結(jié)果

2.1飼喂4周后各組小鼠LDH活力、MG、LG與BLA值見表2。飼喂4周后各組小鼠血液指標(biāo)初始值，各組取6只小鼠眼眶測試MG、LG、BLA和LDH，因這批動物取自抗疲勞動物之前，故稱為初始數(shù)值，表2為測試結(jié)果。

注：表中不同組的相同指標(biāo)中，*表示差異有顯著性；**表示差異有非常顯著性

由表2統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果可知，g3～g5沙棘粉組的小白鼠，其MG和LG含量均顯著大于空白組(P<0.01)，其中維生素組也顯著大于空白組(P<0.01)；BLA含量各組差異無顯著性；g4～g5沙棘粉組和維生素組的LDH活力均顯著大于空白組（P<0.01)，說明4%～6%沙棘粉在提高小鼠的LDH活力方面達(dá)到維生素對照組效果。g6～g7組變化不顯著，說明8%～10%沙棘粉的效果不明顯。

2.2抗疲勞及血乳酸指標(biāo)各組隨機(jī)取12只鼠，做抗疲勞實(shí)驗(yàn)，于其休息30min、60min兩個階段各取6只放血制血清測試BLA含量，各組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行均數(shù)差顯著性檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表3。

注：*表示差異有顯著性；**表示差異有非常顯著性

由表3測試結(jié)果可推算：飼喂2%～6%沙棘粉的小白鼠抗疲勞時間比對照組延長1.17～3.64min，且差異有非常顯著性（P<0.01)；與維生素組相比，不達(dá)顯著性，但維生素組的抗疲勞時間比空白對照組延長3.36min，且差異有非常顯著性（P<0.01)；抗疲勞運(yùn)動后30min和60min血乳酸含量4%～6%組和維生素組，與對照組相比，差異有非常顯著性（P<0.01)。

2.3血乳酸變異級差及其恢復(fù)速度由于各組抗疲勞運(yùn)動前的血乳酸含量初始值不同，故僅僅使用抗疲勞后30min和60min的血乳酸含量差異性還不足以說明動物在疲勞運(yùn)動后乳酸清除速度大小，因此依據(jù)表3與表2可推算各組血乳酸變異級差和恢復(fù)速度，見表4。

注：BLA濃度變異級差：Bt-B0；恢復(fù)速度：(Bt2-Bt1)/(t2-t1)

2.4各組小鼠腦組織MDA、GSH含量灌喂沙棘油后各組小鼠腦組織MDA、GSH含量變化見表5。

注：*表示差異有顯著性；**表示差異有非常顯著性

由表5可以看出，維生素組中，GSH的升高以及MDA的下降相對于空白組都有極其顯著的變化（P<0.01)。g4～g5沙棘粉組的GSH的升高以及MDA的下降相對于空白組也有極顯著的變化，但其余各組變化均不明顯。

3討論

由文鏡等的研究［4］可知，動物疲勞后的BLA降低取決于LDH活力，肌糖原和肝糖原是運(yùn)動能源。從表2可以看到，服用沙棘粉可以提高體內(nèi)糖原含量，從而使機(jī)體抗疲勞能力增強(qiáng)。在初始條件下，LDH活力及肌糖原和肝糖原的測試結(jié)果表明，2%～6%沙棘粉在提高小鼠的LDH活力、肌糖原和肝糖原方面與復(fù)合維生素的效果差異無顯著性；從而也可說明飼喂適當(dāng)劑量沙棘粉的抗疲勞效果與復(fù)合維生素差異無顯著性。表3結(jié)果表明：飼喂2%～6%沙棘粉劑量的小白鼠抗疲勞時間比對照組長，與飼喂復(fù)合維生素組的效果差異無顯著性，表明沙棘對提高小白鼠抗疲勞具有一定效果。劑量在8%～10%時效果不明顯，可能為沙棘粉含量較高導(dǎo)致玉米粉含量下降引起。表4的推算結(jié)果則可以說明疲勞后的2%～6%沙棘粉組BLA下降比對照組快。由表5統(tǒng)計(jì)分析可得，飼喂4%～6%沙棘粉及維生素的小白鼠腦組織GSH含量顯著高于對照組，MDA含量顯著低于對照組。說明沙棘粉對衰老小鼠具有抗衰老作用。

沙棘是目前學(xué)術(shù)界發(fā)現(xiàn)的唯一能把經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會效益集注于一身的作物，沙棘資源的開發(fā)利用研究正日益受到重視。在國際上，那些沒有野生沙棘資源分布的國家，如加拿大、美國、日本、南非等國，近年來對沙棘的研究也十分關(guān)注［5］。目前沙棘的開發(fā)產(chǎn)品主要為沙棘油，其保健功能研究正在被應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、保健食品、化妝品、航空航天醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。沙棘油占沙棘果實(shí)的2%～5%，且提煉復(fù)雜，相比而言，沙棘汁占沙棘果的70%以上，在生產(chǎn)沙棘油過程中，許多豐富的營養(yǎng)成分及生理活性物質(zhì)也富集于沙棘汁中。本實(shí)驗(yàn)充分的證明，適當(dāng)劑量的沙棘粉能夠?qū)游矬w產(chǎn)生一定抗疲勞的作用和抗衰老的作用。因此，未來對沙棘的利用可以不再單單拘泥于沙棘油，沙棘的利用率也能得到大大的提高。我國沙棘總面積居世界各國之首，占世界沙棘總面積的95%［6］。如何開發(fā)利用如此豐富的沙棘資源用于造福人類健康生活仍需要進(jìn)一步地探索和研究。

【參考文獻(xiàn)】

1齊東梅.保健型沙棘果茶的研制.沙棘，2001，14(1)：22－24.

2KingJ.Aroutinemethodfortheestimationoflacticdehydrogenaseactivity.JMedLabTech，1959，16－295.

3陳奇.中藥藥理研究方法學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，1994，624－625.

4文鏡，陳文，王津.金針菇抗疲勞的實(shí)驗(yàn)研究.營養(yǎng)學(xué)報(bào)，1993，15(1)：79－82.

5吉平.沙棘產(chǎn)品的生產(chǎn)技術(shù)現(xiàn)狀及其發(fā)展.沙棘，2001，14(1)：25－30.

6馬英才.國際沙棘學(xué)術(shù)交流會論文集.武漢農(nóng)業(yè)科研中心，1989，9－11.