導(dǎo)語：胃癌患者腫瘤組織管理論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

［摘要］目的研究血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF）在胃癌患者血清及腫瘤組織中的表達(dá)情況，探討其臨床意義。方法應(yīng)用ELISA法對60例非腫瘤疾病手術(shù)患者和60例胃癌患者術(shù)前、術(shù)后血清VEGF水平進(jìn)行定量測定，并應(yīng)用免疫組化法測定腫瘤組織的VEGF。結(jié)果胃癌患者術(shù)前血清VEGF高于對照組（P＞0.05）。兩組術(shù)后較術(shù)前升高，腫瘤組術(shù)后較術(shù)前升高（P＜0.05）。腫瘤組術(shù)前血清VEGF水平、腫瘤組織中的VEGF與漿膜受累、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床病理分期有關(guān)。腫瘤組術(shù)后隨訪30～36個(gè)月中出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和死亡的患者，術(shù)前VEGF表達(dá)較其他患者升高（P＜0.05）。結(jié)論血清VEGF水平及腫瘤組織中的VEGF與胃癌的浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)，檢測血清VEGF及腫瘤組織中的VEGF對胃癌浸潤、轉(zhuǎn)移程度和預(yù)后的判斷有重要意義。

［關(guān)鍵詞］胃腫瘤；微轉(zhuǎn)移；血管內(nèi)皮生長因子

ExpressionandsignificanceofVEGFinserumandtumortissueingastriccancer

ZHOUHai-yin，LIJian，QIAOShi-ming，etal.DepartmentofGeneralSurgery，TheCentralHospitalofYangpuDistrict，Shanghai200090，China

［Abstract］ObjectiveToevaluatetheclinicalsignificanceofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)expressioninserumandtumortissueingastriccancerpatients.MethodsThepre-operationalandpost-operationallevelsofserumVEGFweremeasuredbyELISAkitin60casesofgastriccancerand60casesofnon-carcinomaasthecontrolgroup，theexpressionoftumortissueVEGFwasmeasuredbyimmunohistochemicalassay.ResultsThepre-operationallevelofserumVEGFingastriccancerwashigherthanthatinthecontrolgroup(P＞0.05).Thepost-operationallevelofserumVEGFwasincreasedinbothgroups，especiallyinthetumorgroup(P＜0.05).TheexpressionofVEGFinserumandtumortissuewaspositivelycorrelatedwithtumorinvasiondepth，lymph-nodemetastasisandclinicalpathologicalstage.Afollowupof30～36monthsrevealsthepre-operationallevelofserumVEGFoftumorrecurrenceanddeathinpatientswashigherthantheothersinthetumorgroup(P＜0.05).ConclusionTheexpressionofserumVEGFandtumortissueVEGFiscloselycorrelatedwithinvasionandmetastasisofgastriccancer.SerumVEGFandtumortissueVEGFassaymaybeusedtopre-operativelypredictinvasionandmetastasisandusedtoevaluateprognosis.

［Keywords］stomachneoplasm;micrometastasis;vascularendothelialgrowthfactor

腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移是血管新生依賴性的。在腫瘤血管生成過程中，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）是目前了解的功能最強(qiáng)大的特異性血管生長調(diào)節(jié)因子，各種轉(zhuǎn)化生長因子、表皮生長因子、IL-6、IL-12、野生型P53及一些原癌基因均可上調(diào)VEGF產(chǎn)生促血管活性［1］，故VEGF可能為促血管活性因子的最后共同道路［2］。本研究通過對胃癌患者手術(shù)前后血清VEGF的定量測定及腫瘤標(biāo)本中VEGF表達(dá)情況，探討其與臨床病理及腫瘤預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)分析報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇我院普外科2002年11月～2003年5月期間住院接受手術(shù)治療的胃癌患者60例，其中男33例，女27例，年齡35～85歲，中位年齡68歲。其中Ⅰ期8例，Ⅱ期15例，Ⅲ期34例，Ⅳ期3例。對照組選擇同期住院手術(shù)的非腫瘤患者60例。

1.2方法

1.2.1血清標(biāo)本采集在術(shù)前、術(shù)后第7天和術(shù)后6個(gè)月每月1次分別抽取清晨空腹靜脈血3ml，離心分離血清，置于-20℃凍存待測。

1.2.2血清VEGF定量檢測采用雙抗體夾心ELISA法，樣本中的VEGF與酶標(biāo)板上的抗人VEGF單抗結(jié)合，再與結(jié)合有生物素的抗人VEGF抗體結(jié)合，經(jīng)辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，與酶底物反應(yīng)染色，在492nm測定與VEGF濃度相對應(yīng)的OD值。以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)的VEGF含量。

1.2.3腫瘤組織VEGF檢測腫瘤組織經(jīng)常規(guī)固定、石蠟包埋、切片后，采用Envision二步法染色。一抗采用鼠抗人VEGF單克隆抗體。腫瘤組織VEGF以腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。VEGF判斷標(biāo)準(zhǔn)：（-）為無瘤細(xì)胞著色，（+）為著色瘤細(xì)胞數(shù)＞10%。

1.2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用SPSS11.0軟件做統(tǒng)計(jì)分析，P＜0.05為差異有顯著性。

2結(jié)果

2.1圍手術(shù)期血清VEGF水平比較圍手術(shù)期兩組血清VEGF水平見表1。從表1可見，術(shù)前腫瘤組血清VEGF水平雖高于對照組，但差異無顯著性（P＞0.05）。術(shù)后兩組血清VEGF均較術(shù)前明顯升高（P＜0.05）。腫瘤組術(shù)后血清VEGF較對照組明顯增加，兩組差異有顯著性（P＜0.05）。

2.2腫瘤組術(shù)前血清VEGF與腫瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系腫瘤組術(shù)前血清VEGF與腫瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系見表2。從表2可見，腫瘤組織細(xì)胞中的VEGF表達(dá)陽性患者的血清VEGF水平雖高于表達(dá)陰性者，但差異無顯著性（P＞0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者血清VEGF水平顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P=0.003）；腫瘤侵犯漿膜的患者血清VEGF水平顯著高于漿膜未受累者（P=0.037）；臨床分期為Ⅲ和Ⅳ期患者血清VEGF水平顯著高于Ⅰ和Ⅱ期者（P=0.029）。

注：*TNM分期根據(jù)新國際T.N.M胃癌分期轉(zhuǎn)換為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期

2.3隨訪術(shù)后60例均得到隨訪，5例Ⅰ期和2例Ⅱ期患者術(shù)后未化療而未得到術(shù)后隨訪時(shí)的外周血（隨訪至今均存活），其余53例患者有術(shù)后6個(gè)月共6次隨訪的血清檢測結(jié)果。隨訪30～36個(gè)月，在53例患者中11例死亡，5例出現(xiàn)轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，其余37例無瘤存活，死亡及轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的患者術(shù)前的血清VEGF水平高于無瘤存活的患者（見表3），且差異有顯著性（P＜0.05）。死亡11例中7例術(shù)后VEGF持續(xù)高水平表達(dá)，5例表達(dá)量逐漸升高；5例出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的患者，其中3例術(shù)后血清VEGF水平持續(xù)高表達(dá)，并且表達(dá)量升高；37例無瘤存活者中21例術(shù)后VEGF水平持續(xù)低表達(dá)，6例升高后轉(zhuǎn)低，10例術(shù)后VEGF水平出現(xiàn)逐漸升高，目前正密切隨訪中。

3討論

VEGF是一種特異的作用于內(nèi)皮細(xì)胞的多功能因子，作為一個(gè)重要的促血管生成因子，在原位誘導(dǎo)血管生成的作用十分強(qiáng)大［3］。VEGF作為內(nèi)皮細(xì)胞特異有絲分裂原刺激內(nèi)皮細(xì)胞增生、促使血管滲漏、刺激細(xì)胞遷移，導(dǎo)致纖維蛋白原外滲進(jìn)入腫瘤間質(zhì)而促成腫瘤浸潤組織的血管生成，從而形成腫瘤內(nèi)部高密度的微血管網(wǎng)。VEGF還能刺激淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增生，增加腫瘤高血源性和高淋巴源擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)［4］。VEGF還可通過誘導(dǎo)Bcl-2的表達(dá)、激活有絲分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase，MAPK）和抑制c-JNK(c-jun-NH3-kinase）而抗腫瘤細(xì)胞凋亡。

本研究結(jié)果顯示，腫瘤侵犯漿膜、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期較晚的患者血清VEGF水平顯著升高，提示血清VEGF水平在一定程度上反映腫瘤進(jìn)展的程度。Lissoni等研究指出，晚期惡性腫瘤伴有VEGF內(nèi)源性分泌增加，提示血清VEGF水平升高，則預(yù)后較差。Hyodo的研究發(fā)現(xiàn)，在胃腸腫瘤中，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的血清VEGF較無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者明顯增高，且轉(zhuǎn)移患者化療前VEGF水平低者化療效果及生存期較升高者好。Kumar等的研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌淋巴結(jié)陽性患者的血清VEGF比陰性者明顯升高。Fujisaki發(fā)現(xiàn)血清VEGF水平與Duke’s分期顯著相關(guān)。Celen等報(bào)道診斷結(jié)直腸腫瘤VEGF的敏感性高于CEA等腫瘤標(biāo)志物［5］。

術(shù)前腫瘤組血清VEGF水平雖高于對照組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，術(shù)后兩組血清VEGF均較術(shù)前升高，但腫瘤組較非腫瘤組更為明顯，這可能與手術(shù)創(chuàng)傷、術(shù)后傷口生長及創(chuàng)面修復(fù)有關(guān)。在隨訪血清VEGF水平變化中，我們發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及死亡組術(shù)前的血清VEGF較無瘤存活組明顯升高，可以反映腫瘤病變的嚴(yán)重程度。復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及死亡組圍手術(shù)期的血清VEGF水平有升高，但差異無顯著性，這可能為術(shù)前除原發(fā)腫瘤以外，微轉(zhuǎn)移灶分泌入循環(huán)血中的VEGF占較大比例，手術(shù)清除了原發(fā)灶，但對于微轉(zhuǎn)移灶無效，手術(shù)創(chuàng)傷及術(shù)后修復(fù)使VEGF水平升高，又促進(jìn)了微轉(zhuǎn)移灶的進(jìn)一步發(fā)展，因此我們認(rèn)為血清VEGF是特異性較高的微轉(zhuǎn)移檢測指標(biāo)。

腫瘤組織中VEGF陽性表達(dá)率亦隨腫瘤侵犯漿膜、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期進(jìn)展而增加。本研究顯示，血清VEGF水平和腫瘤組織中VEGF陽性表達(dá)率兩者之間無顯著相關(guān)，這可能與血清VEGF反映全身組織的VEGF水平，而腫瘤組織中VEGF陽性表達(dá)率僅反映局部腫瘤組織中VEGF有關(guān)。盡管如此，無論是術(shù)前血清VEGF水平或腫瘤組織中VEGF陽性表達(dá)都與腫瘤的轉(zhuǎn)移、分期及預(yù)后密切相關(guān)。故檢測血清VEGF是判斷腫瘤分期和預(yù)報(bào)胃癌術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)及生存的獨(dú)立指標(biāo)之一［6］，定期檢測血清VEGF水平的變化還可以對腫瘤治療效果及腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移提供依據(jù)。

隨著對VEGF研究的深入，可以設(shè)想通過VEGF和VEGF受體抗體的功能阻斷，阻止腫瘤血管生成，可能成為抑制腫瘤生長和預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移的生物靶點(diǎn)之一。

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