冬蟲(chóng)夏草抗體形成細(xì)胞的促進(jìn)作用論文

時(shí)間:2022-09-26 11:04:00

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冬蟲(chóng)夏草抗體形成細(xì)胞的促進(jìn)作用論文

摘要:目的觀察冬蟲(chóng)夏草對(duì)小鼠抗體形成細(xì)胞的作用。方法用100%濃度冬蟲(chóng)夏草浸出液定期給小鼠灌胃,然后進(jìn)行小鼠抗體產(chǎn)生能力檢測(cè)、特異玫瑰花環(huán)結(jié)形成細(xì)胞檢測(cè)(SRFC)、血清IgG檢測(cè)。結(jié)果用藥組以上3項(xiàng)免疫學(xué)指標(biāo)均增高。結(jié)論冬蟲(chóng)夏草有明顯促進(jìn)抗體形成細(xì)胞的作用。

關(guān)鍵詞:冬蟲(chóng)夏草;免疫功能;小鼠

冬蟲(chóng)夏草,始載于《本草綱目拾遺》。因其冬季為蟲(chóng),夏季為草,故名。為麥角菌科真菌冬蟲(chóng)夏草Cordycepssinensis(Berk.)Sacc,寄生蝙蝠蛾科昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)上的子座及幼蟲(chóng)尸體的復(fù)合體。主產(chǎn)于四川阿壩藏族自治州松潘、理縣、茂汶羌族自治縣、甘孜藏族自治州、德格、道孚、青海玉樹(shù)、果洛藏族自治州及同德、同仁,云南中甸、德欽、麗江納西族自治縣等地,均為野生。主要功效:益腎補(bǔ)肺,止血化痰,止嗽定喘。本實(shí)驗(yàn)主要研究冬蟲(chóng)夏草對(duì)抗體形成細(xì)胞作用,旨在為冬蟲(chóng)夏草的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

一、器材與方法

1.1儀器和藥物

低溫冷凍離心機(jī)(Beckman,美國(guó));美國(guó)Multiskan產(chǎn)全自動(dòng)酶標(biāo)儀;恒溫水浴箱(上海);電泳儀(上海);100目不銹鋼網(wǎng)。冬蟲(chóng)夏草(購(gòu)于附屬醫(yī)院中藥房),取100g加水1000ml,文火煎煮2h,去渣濃縮為100ml(濃度為100%)備用。

1.2動(dòng)物及分組

取BALB/C純系小鼠24只,體重18~22g,雌雄各半,隨機(jī)分為兩組,每組12只,Ⅰ組為生理鹽水對(duì)照組,Ⅱ組為藥物實(shí)驗(yàn)組。

1.3方法

Ⅰ組用生理鹽水灌胃,1次/d,0.5ml/(次·只);Ⅱ組用冬蟲(chóng)夏草液灌胃,1次/d,0.5ml/(次·只),共灌10次。

1.4檢測(cè)項(xiàng)目

1.4.1定量溶血分光光度測(cè)定法(QHS)

本法體外測(cè)定B細(xì)胞產(chǎn)生分泌抗體裂解紅細(xì)胞所釋放的血紅蛋白量(以O(shè)D值表示),其結(jié)果可反映機(jī)體體液免疫功能。實(shí)驗(yàn)第5天分別將5%的綿羊紅細(xì)胞0.2ml注入各組小鼠腹腔內(nèi)。第11天頸椎脫臼處死小鼠,常規(guī)取脾臟,然后脾細(xì)胞計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞濃度至1×107/ml,平均每組每只小鼠設(shè)3支試管,每管依次加脾細(xì)胞懸液,0.2%綿羊紅細(xì)胞(SRBC),1∶10新鮮豚鼠血清(補(bǔ)體)各1ml混勻。另外分別設(shè)補(bǔ)體、脾細(xì)胞以及SRBC對(duì)照管各3支,置37℃水浴溫育1h,2000r/min離心5min。取上清液用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板于全自動(dòng)酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,作為QHS反應(yīng)值。

1.4.2特異玫瑰花環(huán)形成細(xì)胞檢測(cè)(SRFC)

取脾細(xì)胞0.1ml(1×107/ml),1%SRFC0.1ml,小牛血清0.1ml,試管內(nèi)混勻,4℃放置2h,加結(jié)晶紫溶液20μl,計(jì)數(shù)500個(gè)淋巴細(xì)胞,求出SRFC/106脾細(xì)胞的形成率。

1.4.3血清IgG檢測(cè)

采用對(duì)流免疫電泳實(shí)驗(yàn),摘除小鼠眼球取血,分離血清,取不同稀釋度血清10μl加入陰極端瓊脂板孔中,將瓊脂板陽(yáng)極端孔內(nèi)加入羊抗鼠IgG(1∶32)10μl,將對(duì)流免疫電泳通電30min后觀察結(jié)果,以血清最高稀釋度仍有明顯沉淀線為準(zhǔn)。結(jié)果以稀釋度表示。公務(wù)員之家

二、結(jié)果

2.1冬蟲(chóng)夏草對(duì)抗體形成細(xì)胞的影響

表1結(jié)果顯示,用藥組可促進(jìn)抗體細(xì)胞形成,與對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.05)。表1冬蟲(chóng)夏草對(duì)抗體形成細(xì)胞的影響(略)

2.2冬蟲(chóng)夏草對(duì)SRFC的影響

表2結(jié)果顯示,用藥組SRFC產(chǎn)生明顯增強(qiáng),與對(duì)照組相比有非常顯著性差異(P<0.01)。表2冬蟲(chóng)夏草對(duì)SRFC的影響(略)

2.3冬蟲(chóng)夏草對(duì)小鼠IgG的影響

表3結(jié)果顯示,用藥組可明顯促進(jìn)IgG產(chǎn)生,與對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.01)。表3冬蟲(chóng)夏草對(duì)小鼠IgG的影響(略)

三、討論

冬蟲(chóng)夏草是臨床上常用的中藥?,F(xiàn)代藥理研究證實(shí),冬蟲(chóng)夏草能顯著增加小鼠血清溶菌酶的含量,極顯著地提高綿羊紅細(xì)胞的滴度,也能提高巨噬細(xì)胞的吞噬功能,提高淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和自然玫瑰花環(huán)形成率,且能明顯增加血清IgG的含量。尚有抗心肌缺血和心律失常的作用、抗應(yīng)激作用、抗衰老作用、抗炎作用及抗腎衰作用。本研究重點(diǎn)從細(xì)胞及分子水平探討冬蟲(chóng)夏草對(duì)抗體形成細(xì)胞,IgG分子的影響。實(shí)驗(yàn)證明,冬蟲(chóng)夏草能增強(qiáng)小鼠抗體形成(B細(xì)胞)活性,促進(jìn)B細(xì)胞分化、增殖為漿細(xì)胞;藥物組與對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.05),冬蟲(chóng)夏草組SRFC數(shù)目明顯高于對(duì)照組,與對(duì)照組相比有非常顯著性差異(P<0.01),冬蟲(chóng)夏草可使小數(shù)血清IgG含量增加,與對(duì)照組相比有非常顯著性差異(P<0.01)。提示如機(jī)體免疫功能下降者可口服冬蟲(chóng)夏草以增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,預(yù)防某些疾病。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為臨床應(yīng)用冬蟲(chóng)夏草提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】

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