導(dǎo)語(yǔ)：牛大力祛痰分析論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1材料與方法

1.1動(dòng)物SPF級(jí)KM小鼠，體質(zhì)量18～22g;SPF級(jí)豚鼠，體質(zhì)量250～300g，均由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK粵20030001。

1.2受試藥物牛大力水提物由廣州中醫(yī)藥大學(xué)藥理教研室提供，濃縮液濃度為1g/mL，使用時(shí)用蒸餾水稀釋成不同的濃度。

1.3藥品、試劑與儀器美沙芬由廣州白云山光華制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：727008;氨茶堿由天津力生制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：784136;氨水由廣東光華化學(xué)廠有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20070806;酚紅由上海三愛(ài)思試劑有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：0040309;枸櫞酸由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號(hào)：00605032;醋酸由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號(hào)：06040204;氫氧化鈉由天津市百世化工有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：006730;UNICO7200型光柵分光光度計(jì)由尤尼柯(上海)儀器有限公司提供;YLS6B智能熱板儀由山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站生產(chǎn);超聲霧化器由江蘇魚(yú)躍醫(yī)療設(shè)備有限公司生產(chǎn)。

1.4牛大力對(duì)小鼠酚紅祛痰的影響[2]取KM小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，即空白組，陽(yáng)性對(duì)照組，牛大力水提物高(20g·kg-1·d-1)、中(10g·kg-1·d-1)、低(5g·kg-1·d-1)劑量給藥組。陽(yáng)性對(duì)照組以沐舒坦30mg·kg-1·d-1灌胃，空白組給予等容積蒸餾水，連續(xù)5d。于末次給藥后30min，腹腔注射50g/L酚紅生理鹽水溶液0.5mL/只，30min后小鼠脫頸椎處死，剝離氣管周?chē)M織，剪下自甲狀軟骨下至氣管分支處一段氣管放入盛有2mL生理鹽水的試管中，剪開(kāi)浸泡10min后，加1mol/LNaOH溶液0.1mL，離心取上清液采用紫外分光光度計(jì)于波長(zhǎng)546nm處測(cè)定吸光度D值。

1.5牛大力對(duì)家鴿氣管纖毛運(yùn)動(dòng)的影響[3]取家鴿50只，隨機(jī)分為5組，分別為空白組，陽(yáng)性對(duì)照組，牛大力水提物高(16g·kg-1·d-1)、中(8g·kg-1·d-1)、低(4g·kg-1·d-1)劑量給藥組。陽(yáng)性對(duì)照組以20mg·kg-1·d-1劑量的沐舒坦灌胃，空白組給予等容積蒸餾水，連續(xù)3d。末次給藥后手持家鴿頸部拉直與水平面平行，拔除頸部毛，不麻醉，背位固定，沿頸中線切開(kāi)，剝離氣管，將周?chē)浗M織分離清楚，使氣管自甲狀軟骨至胸骨段充分暴露，并小心將氣管表面外膜剝離干凈，于末次給藥后0.5、1、2h以5號(hào)針頭從靠心臟端插入氣管，使針頭靠近氣管內(nèi)壁推入0.05mL中華墨汁，觀察1min內(nèi)墨汁沿氣管向前運(yùn)動(dòng)的距離。

1.6牛大力對(duì)小鼠氨水引咳的鎮(zhèn)咳作用[4-5]分組和給藥方法同1.4項(xiàng)下。陽(yáng)性對(duì)照組按美沙芬10mg·kg-1·d-1灌胃，空白組給予等容積蒸餾水，連續(xù)5d。末次給藥1h后將小鼠放入玻璃鐘罩內(nèi)，用超聲霧化器將濃氨水均勻地噴入玻璃鐘罩內(nèi)，噴霧10s，立即取出小鼠，觀察和記錄小鼠的咳嗽潛伏期和4min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

1.7牛大力對(duì)豚鼠枸櫞酸引咳的鎮(zhèn)咳作用[6]采用豚鼠枸櫞酸引咳法(序貫法)，以175mg/L枸櫞酸在玻璃鐘罩內(nèi)連續(xù)噴霧90s，觀察5min內(nèi)咳嗽次數(shù)進(jìn)行篩選，咳嗽次數(shù)小于10次者棄除。將篩選合格的豚鼠分為5個(gè)組，分別為空白組，陽(yáng)性對(duì)照組，牛大力水提物高(16g·kg-1·d-1)、中(8g·kg-1·d-1)、低(4g·kg-1·d-1)劑量給藥組。陽(yáng)性對(duì)照組以8mg·kg-1·d-1美沙芬灌胃，空白組給予等容積蒸餾水，連續(xù)5d。于末次給藥后1h(美沙芬0.5h)，按預(yù)選方法，用枸櫞酸引咳，觀察豚鼠自噴霧開(kāi)始至出現(xiàn)咳嗽的潛伏期及噴霧停止后5min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

1.8牛大力對(duì)豚鼠的平喘作用[7-8]取250～300g豚鼠，按整體噴霧致喘法，用4g/L磷酸組胺與20g/L氯化乙酰膽堿以體積比1：2混合液超聲霧化器噴霧25s致喘，挑選潛伏期在150s內(nèi)出現(xiàn)哮喘的豚鼠為合格的敏感動(dòng)物。將合格豚鼠分為5個(gè)組，分別為空白組，陽(yáng)性對(duì)照組，牛大力水提物高(16g·kg-1·d-1)、中(8g·kg-1·d-1)、低(4g·kg-1·d-1)劑量給藥組。陽(yáng)性對(duì)照組以氨茶堿1.2g·kg-1·d-1劑量灌胃，空白組給予等容積蒸餾水，連續(xù)7d。于末次給藥后1h(氨茶堿0.5h)，按預(yù)選方法記錄各組動(dòng)物出現(xiàn)哮喘的潛伏期。

1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行T檢驗(yàn)分析。

2結(jié)果

2.1牛大力對(duì)小鼠酚紅祛痰的影響表1結(jié)果表明，牛大力水提物能顯著增加小鼠氣管酚紅排泌量，與空白組比較差異有顯著性意義(P<0.05)，隨著劑量的增加，祛痰作用增強(qiáng)，呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系。提示牛大力水提物具有較好的祛痰作用。

2.2牛大力對(duì)家鴿氣管纖毛運(yùn)動(dòng)的影響表2結(jié)果表明，牛大力水提物高劑量組藥后1h炭末推進(jìn)距離與空白組比較差異有顯著性意義(P<0.05)，表明其對(duì)家鴿氣管纖毛運(yùn)動(dòng)有明顯的影響。

2.3牛大力對(duì)小鼠氨水引咳的鎮(zhèn)咳作用表3結(jié)果表明，牛大力水提物能顯著延長(zhǎng)咳嗽潛伏期，減少咳嗽次數(shù)，與空白組比較差異有顯著性意義(P<0.05或P<0.01)。提示牛大力水提物對(duì)氨水誘導(dǎo)的小鼠咳嗽有較好的鎮(zhèn)咳作用。

2.4牛大力對(duì)豚鼠枸櫞酸引咳的鎮(zhèn)咳作用表4結(jié)果表明，不同劑量的牛大力水提物均能延長(zhǎng)枸櫞酸引咳豚鼠的咳嗽潛伏期，減少豚鼠5min內(nèi)的咳表1各組對(duì)小鼠酚紅祛痰的影響表2各組對(duì)家鴿氣管纖毛運(yùn)動(dòng)的影響表3各組對(duì)小鼠氨水引咳的鎮(zhèn)咳作用比較嗽次數(shù)，以高劑量組效果顯著，與空白組比較差異有顯著性意義(P<0.05)。提示牛大力水提物對(duì)枸櫞酸引咳的豚鼠有一定的鎮(zhèn)咳作用。

2.5牛大力對(duì)豚鼠的平喘作用表5結(jié)果表明，不同劑量的牛大力水提物對(duì)組胺-乙酰膽堿誘發(fā)的哮喘有明顯的保護(hù)作用，能使引喘潛伏期顯著延長(zhǎng)，與空白組比較差異有顯著性意義(P<0.01)。提示牛大力水提物有較好的平喘作用。表4各組對(duì)豚鼠枸櫞酸引咳的鎮(zhèn)咳作用表5各組對(duì)豚鼠的平喘作用比較

3討論

到目前為止，有關(guān)牛大力對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病的藥理研究尚未見(jiàn)報(bào)道，臨床證明其對(duì)慢性支氣管炎有一定療效，本實(shí)驗(yàn)從鎮(zhèn)咳、袪痰和平喘三個(gè)方面對(duì)其進(jìn)行了初步研究，目的為其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供可靠的藥理學(xué)依據(jù)。

慢性支氣管炎是由于感染或非感染因素引起的氣管、支氣管黏膜及其周?chē)M織的一種慢性非特異性炎癥，臨床主要表現(xiàn)為咳、喘、痰癥狀，因而鎮(zhèn)咳、祛痰和平喘在慢性支氣管炎的癥狀控制中起重要的作用。文獻(xiàn)報(bào)道[9]化學(xué)物質(zhì)氨水、枸櫞酸可通過(guò)刺激呼吸道感受器，引起支氣管平滑肌收縮，興奮引發(fā)神經(jīng)沖動(dòng)，激活腦內(nèi)咳嗽中樞從而引起咳嗽反射。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明牛大力水提取物能顯著抑制氨水引發(fā)小鼠咳嗽反應(yīng)次數(shù)及枸櫞酸引起豚鼠咳嗽反應(yīng)次數(shù)，延長(zhǎng)咳嗽潛伏期，說(shuō)明該藥可作用于有關(guān)的化學(xué)感受器，保護(hù)支氣管黏膜免受刺激，達(dá)到鎮(zhèn)咳效果。痰是由氣管、支氣管的腺體和杯狀細(xì)胞所分泌，它的存在是引起咳嗽以致喘息的重要原因。痰液的清除有賴(lài)于黏液膠的物理特性和黏液、氣道及纖毛之間的相互作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明牛大力水提取物能增加小鼠氣管酚紅排出量，加速家鴿氣管黏膜的黏液纖毛運(yùn)動(dòng)，表明其可促進(jìn)腺體分泌，使分泌量增加，稀釋痰液從而達(dá)到化痰祛痰作用。中醫(yī)認(rèn)為哮喘是宿痰內(nèi)伏于肺，遇誘因而引發(fā)，使痰阻氣道，肺失肅降，氣道攣急。文獻(xiàn)報(bào)道[10]組胺可通過(guò)興奮體內(nèi)H1和H2組胺受體產(chǎn)生廣泛而復(fù)雜的生理和病理作用。本實(shí)驗(yàn)采用磷酸組胺和氯化乙酰膽堿混合液復(fù)制豚鼠哮喘模型，主要是由于在哮喘急性發(fā)作時(shí)，這兩種物質(zhì)是導(dǎo)致氣管痙攣收縮的主要介質(zhì)，結(jié)果表明，牛大力水提取物對(duì)組胺-乙酰膽堿誘發(fā)的哮喘有保護(hù)作用，能對(duì)抗組胺、乙酰膽堿等過(guò)敏介質(zhì)引起的氣管、支氣管收縮，明顯延長(zhǎng)哮喘潛伏期。綜上所述，牛大力水提取物具有止咳、祛痰及平喘作用。

【摘要】[目的]觀察牛大力的祛痰、鎮(zhèn)咳及平喘作用。[方法]通過(guò)小鼠氣管酚紅法、家鴿纖毛運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)、小鼠濃氨水引咳法、豚鼠枸櫞酸引咳法及豚鼠組胺-乙酰膽堿超聲霧化法觀察牛大力的祛痰鎮(zhèn)咳平喘作用。[結(jié)果]牛大力能顯著增加小鼠氣管酚紅排泌量，促進(jìn)家鴿氣管內(nèi)墨汁運(yùn)動(dòng)，減少氨水引發(fā)小鼠和枸櫞酸引發(fā)豚鼠咳嗽反應(yīng)的次數(shù)，延長(zhǎng)咳嗽潛伏期，對(duì)抗組胺-乙酰膽堿引起的豚鼠支氣管哮喘(均P<0.05或P<0.01)。[結(jié)論]牛大力具有一定的祛痰、鎮(zhèn)咳及平喘作用。

【關(guān)鍵詞】牛大力/藥理學(xué)慢性支氣管炎/中藥療法疾病模型動(dòng)物小鼠豚鼠家鴿

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