導(dǎo)語(yǔ)：米蝦性腺分化時(shí)間及特點(diǎn)一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

本文作者：甄勝濤穆淑梅劉濤郭明申康現(xiàn)江作者單位：河北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院

十足目(Decapoda)甲殼動(dòng)物的生殖策略是復(fù)雜多樣的，表現(xiàn)為雌雄異體、雌雄生殖腺相繼出現(xiàn)在同一個(gè)體、雌雄同體，甚至孤雌生殖［1－2］。性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象在這類動(dòng)物中也很普遍［3］。甲殼動(dòng)物性腺分化時(shí)伴隨其他性征的出現(xiàn)，大多與生殖行為相關(guān)。

雄性第一腹肢的內(nèi)肢常常發(fā)生特化，在形狀、大小、剛毛的著生與否和其他腹肢不同，在雌雄交配的過(guò)程中發(fā)揮作用，被稱作生殖肢。雄性成熟個(gè)體第二腹肢的內(nèi)肢基部會(huì)出現(xiàn)雄性附肢［4］。這些特征使我們可以對(duì)活體進(jìn)行性別鑒定，并對(duì)性腺分化情況進(jìn)行推測(cè)［5］。

中華鋸齒米蝦是一種小型經(jīng)濟(jì)蝦類，隸屬甲殼綱十足目匙指蝦科(Atyidae)新米蝦屬，在河北省白洋淀產(chǎn)量豐富。范成功［6］與楊炎等［7］先后描述了此物種雌雄性腺分化及發(fā)育過(guò)程中生殖細(xì)胞的大小和形態(tài)的變化，且觀點(diǎn)基本一致，但是在雌雄性腺出現(xiàn)時(shí)間的確定上存在很大的差異。孫世杰等［8］描述了該物種成熟個(gè)體雄性第一腹肢內(nèi)肢卵圓形且無(wú)剛毛的特點(diǎn)。

本研究旨在闡明該物種性征分化過(guò)程中生殖細(xì)胞的變化特征，確定性腺分化的時(shí)間以及雄性第一腹肢的發(fā)育特征，為深入研究?jī)?nèi)外性征發(fā)育規(guī)律奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

中華鋸齒米蝦于2011年4月中旬購(gòu)于河北省保定市東風(fēng)橋市場(chǎng)，挑取抱卵的雌性米蝦(體長(zhǎng)3.0～3.2cm)分別單獨(dú)飼養(yǎng)于直徑15cm的圓形水缸內(nèi)，室溫18～26℃，待自然孵化后移除親蝦，自幼蝦孵化發(fā)育10d后開(kāi)始取材，每?jī)商烊〔囊淮?，直至幼蝦發(fā)育40d。每次取材30只用于體長(zhǎng)測(cè)定后及時(shí)放回，取10只于顯微鏡下對(duì)幼蝦的第一腹肢進(jìn)行觀察拍照，之后將幼蝦在Bouin’s液中固定，進(jìn)行常規(guī)石蠟切片、染色和顯微拍照，切片厚度5～7μm。

2結(jié)果與分析

孵化后發(fā)育10～12d的幼體體長(zhǎng)4.5～4.8mm，生殖腺內(nèi)細(xì)胞數(shù)量少，位于腸系膜的上方，直徑5μm左右，略大于附近的腸道細(xì)胞，圓形，細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核難于區(qū)分，周圍有少量的間質(zhì)細(xì)胞，這些細(xì)胞染色較深，此時(shí)的生殖細(xì)胞推測(cè)是原始生殖細(xì)胞(圖版1－A)。孵化后發(fā)育12～18d的幼體體長(zhǎng)4.8～5.6mm，性腺體積增大，生殖細(xì)胞增大，直徑6～9μm，有的細(xì)胞形狀不規(guī)則，明顯大于周圍的腸道細(xì)胞，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)的界限逐漸清晰，核質(zhì)比小，這些特征符合卵原細(xì)胞的性質(zhì)(圖版1－B)。此時(shí)期所有幼蝦的第一腹肢的內(nèi)肢都具有剛毛，但是剛毛數(shù)量略有差異。孵化后發(fā)育18～22d的幼體體長(zhǎng)5.6～6.3mm，生殖細(xì)胞直徑(10±2)μm，此時(shí)的生殖腺出現(xiàn)兩種類型。

類型1:生殖細(xì)胞形狀不規(guī)則，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)界限明顯，核質(zhì)比較前一時(shí)期有所增加，出現(xiàn)明顯卵原細(xì)胞的特征，間質(zhì)細(xì)胞減少直至消失，這些卵原細(xì)胞周圍出現(xiàn)少量的濾泡細(xì)胞(圖版1－C)。

類型2:生殖細(xì)胞形狀橢圓形或者不規(guī)則，但數(shù)量少，被一些間質(zhì)細(xì)胞包圍，這些細(xì)胞具有明顯的前一時(shí)期細(xì)胞的特征，細(xì)胞體積大，但是核質(zhì)界限不明顯，細(xì)胞有分裂的趨勢(shì)。類似于間質(zhì)細(xì)胞類型的細(xì)胞大量增多，有的形成球狀，染色較深。卵巢特征逐漸消失，而精巢的特征逐漸明顯(圖版1－D，E)。

此時(shí)期幼蝦的第一腹肢的內(nèi)肢有的變?yōu)槁褕A型，剛毛在其基部有一根或者沒(méi)有，可以明顯地看出為生殖肢(圖版2－A);其余的幼蝦其第一腹肢內(nèi)肢比前一時(shí)期增大，剛毛數(shù)量比生殖肢多(圖版2－B)?；蟀l(fā)育22～28d幼體，體長(zhǎng)6.3～7.2mm，連續(xù)取材并進(jìn)行組織學(xué)切片觀察發(fā)現(xiàn)，兩種類型生殖腺特征差異更加明顯，類型1確定為卵巢，類型2確定為精巢。

類型1:生殖細(xì)胞形狀圓形或者橢圓形，體積繼續(xù)增大，直徑14～16μm，核質(zhì)比增大，核內(nèi)充滿空隙，遺傳物質(zhì)呈點(diǎn)狀分布。濾泡細(xì)胞增多，包圍著卵原細(xì)胞并形成2～3個(gè)卵巢腔，腔內(nèi)有1～2個(gè)卵原細(xì)胞?？梢源_定該類型的性腺為卵巢(圖版1－F)。

類型2:直徑較大的類卵原細(xì)胞消失，性腺呈球形且充滿間隙，生殖細(xì)胞個(gè)體小，染色較深。推測(cè)此時(shí)的生殖細(xì)胞為早期的精原細(xì)胞，標(biāo)志精巢分化的完成［6］。可以確定該類型的性腺為精巢(圖版1－G)。

此時(shí)期雄性的生殖肢與雌性的第一腹肢內(nèi)肢都有所增大，雄性生殖肢的發(fā)育也更加成熟，呈卵圓形，上無(wú)剛毛附著，而雌性腹肢變化不大，兩者差異更加明顯。孵化后發(fā)育28～40d的幼體，體長(zhǎng)7.2～8.5mm。此時(shí)期卵巢內(nèi)卵原細(xì)胞發(fā)育為卵母細(xì)胞，核質(zhì)比減小(圖版1－H)。精巢也有了進(jìn)一步的分化，出現(xiàn)了大量的精原細(xì)胞，排列緊密，染色較深(圖版1－I)。

3討論

中華鋸齒米蝦的卵巢分化時(shí)間早于精巢，這與已有研究的結(jié)論［6－7］一致。之后，在幼體發(fā)育20d左右時(shí)出現(xiàn)兩種類型的性腺。楊炎等［7］在幼體發(fā)育10d時(shí)發(fā)現(xiàn)早期卵巢的分化，到23d時(shí)發(fā)現(xiàn)卵巢分化已經(jīng)完成，并且此時(shí)出現(xiàn)了早期的精巢，即幼體發(fā)育23d之前全部為卵巢特征的性腺。但是他們沒(méi)有觀察到卵巢向精巢轉(zhuǎn)化的過(guò)程。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)幼體發(fā)育18～22d為中華鋸齒米蝦雌雄性腺分化的關(guān)鍵時(shí)期，一部分幼蝦性腺繼續(xù)沿著卵巢方向發(fā)育，一部分出現(xiàn)了精巢的特征。可以說(shuō)在精巢分化時(shí)間上與楊炎等［7］的觀察結(jié)果接近，而范成功［6］在幼體發(fā)育50d觀察到卵巢開(kāi)始分化，90d精巢開(kāi)始分化，這種差異可能是由于取材時(shí)間不同造成的，蝦類的性腺發(fā)育成熟需要一定的有效積溫［9］。中華鋸齒米蝦在每年的4～5月和9月會(huì)出現(xiàn)較多的抱卵米蝦，盡管楊炎等［7］的取材時(shí)間為10月份，但培養(yǎng)溫度控制在26℃左右，與本實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)室溫接近，推測(cè)范成功［6］的取材時(shí)間為當(dāng)年的下半年且為自然溫度培養(yǎng)，而9月份本地區(qū)的平均氣溫為20℃左右并逐漸下降，所以該時(shí)期幼蝦性腺獲得相同有效積溫所需要的時(shí)間要長(zhǎng)。

已有研究一致認(rèn)為中華鋸齒米蝦是雌雄異體、雌性先熟［6－8］，本實(shí)驗(yàn)支持這一結(jié)論。甲殼動(dòng)物性分化的過(guò)程中，促雄腺起著重要作用，雄性性腺的分化是由促雄腺分泌的促雄激素介導(dǎo)的［10］。血淋巴內(nèi)促雄激素的減少會(huì)導(dǎo)致處于性腺分化關(guān)鍵時(shí)期的雄性發(fā)育為兼性個(gè)體，甚至分化為卵巢而出現(xiàn)性反轉(zhuǎn)的現(xiàn)象［11－12］。由此推測(cè)中華鋸齒米蝦早期性腺都是朝卵巢方向發(fā)育的，當(dāng)幼蝦發(fā)育到18～22d時(shí)，雄性個(gè)體的促雄腺發(fā)育成熟并分泌足夠的促雄激素，使卵巢樣的性腺扭轉(zhuǎn)朝精巢方向分化，于是出現(xiàn)了精巢發(fā)育過(guò)程中的類卵巢階段。本實(shí)驗(yàn)觀察到雄性生殖肢出現(xiàn)在幼體發(fā)育20d左右，其內(nèi)肢與雌性第一腹肢內(nèi)肢相比缺少剛毛且為卵圓形，與推測(cè)的精巢出現(xiàn)的時(shí)間吻合并證實(shí)了孫世杰等［8］對(duì)雌雄第一腹肢特征的觀察結(jié)果。