飼喂蟲草基對(duì)大閘蟹品質(zhì)的影響

時(shí)間:2022-10-04 03:48:18

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飼喂蟲草基對(duì)大閘蟹品質(zhì)的影響

本文作者:郭培紅1陳月明2宋學(xué)宏1孫麗萍1王婷婷1孟祥雨1張磊磊1作者單位:1.蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院2.蘇州市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所

中華絨螯蟹是我國特有的經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的水產(chǎn)品,肉質(zhì)鮮美細(xì)嫩,營(yíng)養(yǎng)豐富,氣味清香濃郁,其獨(dú)特的口味深受國內(nèi)外消費(fèi)者喜愛。蛹蟲草培養(yǎng)殘基(以下簡(jiǎn)稱蟲草基)是人工培養(yǎng)蛹蟲草采摘子實(shí)體后仍布滿菌絲體的培養(yǎng)基,研究表明,蟲草基中含有蟲草素、蟲草多糖、腺苷等蟲草特有的活性物質(zhì)[1,2]。本課題組前期研究表明,蟲草基中除了含有0.07%~0.09%蟲草素、12.05%~13.10%蟲草酸、0.008%~0.010%腺苷等活性物質(zhì)外,還含有11.51%~12.80%粗蛋白、2.34%~2.40%粗脂肪、27.82%~29.60%粗多糖、270~290IU/g的SOD及微量元素等,具有較高的營(yíng)養(yǎng)及藥用價(jià)值。蟲草基對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)及免疫的影響在前期研究中已得到證實(shí)[3],在此基礎(chǔ)上,以中華絨螯蟹常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分,肌肉、血清游離氨基酸及肝胰腺脂肪酸組分作為評(píng)判標(biāo)準(zhǔn),研究蟲草基對(duì)中華絨螯蟹營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響

1材料與方法

1.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)、試驗(yàn)中華絨螯蟹及試驗(yàn)飼料

蟲草基為江蘇康能生物工程有限公司提供,過150目篩;中華絨螯蟹購于常熟市蟹種養(yǎng)殖基地,規(guī)格(4.0±1.0)g,實(shí)驗(yàn)室循環(huán)系統(tǒng)養(yǎng)殖,周期75d。飼料配方參考郭培紅等[3]的蟲草基對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)及免疫影響的研究,能量蛋白比為37~38kJ/gpro;基礎(chǔ)飼料(P0)中按0.25%(P0.25)、0.5%(P0.5)、1.0%(P1)、2.0%(P2)、4.0%(P4)、8.0%(P8)、16.0%(P16)的比例添加蟲草基。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1全蟹、肌肉、肝臟、飼料常規(guī)成分測(cè)定

水分:105℃烘干恒重法[4];粗蛋白:凱氏定氮法[4];飼料粗脂肪:索氏抽提法[4];全蟹、肌肉、肝臟粗脂肪:氯仿-甲醇(體積比2∶1)抽提法[5],樣品為低溫冷凍干燥制得干樣。飼料粗灰分:550℃灼燒法[6];鈣:乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)滴定經(jīng)新型催化劑(雙氧水催化法)分解飼料的方法[6];磷:釩鉬酸銨顯色法[6]。

1.2.2氨基酸及脂肪酸樣品分析處理

1.2.2.1氨基酸測(cè)定采用氨基酸自動(dòng)分析儀分析

S-7130型氨基酸自動(dòng)分析儀,氨基酸測(cè)定條件:離子交換柱:柱長(zhǎng)4.6×60mm;樹脂2622#;反應(yīng)柱柱溫135℃;分離柱柱溫57℃。緩沖液:流速0.400mL/min;柱壓7.000~7.300MPa;茚三酮:流速0.350mL/min,柱壓0.700~0.800MPa。

1.2.2.2脂肪酸測(cè)定采用氣相色譜法

美國CP3800氣相色譜儀,氣相色譜條件:色譜柱為J&WGCColumnPerformanceSummary(30m×0.250mm×0.25μm);氫火焰離子檢測(cè)器(FID),F(xiàn)ID270℃,柱溫采用程序升溫:80℃(3min)-(5℃/min)-240℃(15min),高純氮?dú)鉃檩d氣,分流比60∶1,進(jìn)樣量10μL。

1.3數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,采用SPSS16.0經(jīng)One-WayANOVA分析后進(jìn)行Dun-can氏多重比較法分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性,顯著水平為0.05。

2結(jié)果與分析

2.1飼料、中華絨螯蟹常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分及飼料氨基酸分析

各組飼料及中華絨螯蟹常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分及飼料氨基酸分析分別見表1、表2。由表1可知,飼料水分為8.0%左右,粗脂肪為7.0%左右,粗蛋白含量為37.0%左右,各飼料組常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分基本相同。試驗(yàn)測(cè)得各組飼料中含17種水解氨基酸,不同飼料組氨基酸組成上無差異,但無論是氨基酸總量還是中華絨螯蟹生長(zhǎng)必需氨基酸含量,各試驗(yàn)組均比對(duì)照組有所提高。說明蟲草基的添加提高了飼料氨基酸和中華絨螯蟹生長(zhǎng)必需氨基酸的含量。從表2的養(yǎng)殖結(jié)果分析,全蟹的水分含量為63.38~66.90%,粗蛋白含量為37.98~39.27%,粗脂肪含量為12.10%~16.99%;肌肉中水分和粗蛋白含量最高,分別為77.11%~79.86%和80.04%~84.29%,粗脂肪為9.45%~12.60%;肝胰臟水分、粗蛋白、粗脂肪含量分別為:46.61%~49.39%、7.81%~9.11%和74.28%~79.52%。無論全蟹、肌肉、肝胰腺水分,還是粗蛋白含量,各飼料組間無顯著性差異(P>0.05),但P16組全蟹與肝胰腺的粗蛋白含量有所下降;P5~P16組的全蟹、肌肉、肝胰腺中粗脂肪含量均高于對(duì)照組,其中P0.5、P1、P16組達(dá)顯著水平(P<0.05)。

2.2中華絨螯蟹肌肉、血清游離氨基酸測(cè)定及品質(zhì)分析

采集新鮮的中華絨螯蟹肌肉、血清,測(cè)得其游離氨基酸組成與含量,結(jié)果見表3與表4。由表3可見,肌肉游離氨基酸總量(TAA)為11.50~13.57mg/g,其中主要呈味氨基酸總量(FAA)(Arg、Ala、Gly、Pro)為6.64~7.74mg/g,占肌肉TAA的56.75%~58.43%。與對(duì)照組相比,P0.25、P0.5、P1、P2組中華絨螯蟹肌肉TAA顯著提高(P<0.05);而P4、P8組顯著降低(P<0.05)。當(dāng)飼料中蟲草基添加量從0.25%增加到2.0%時(shí),各試驗(yàn)組的肌肉必需氨基酸(EAA)、限制性氨基酸(LAA)、FAA含量隨蟲草基添加量的增加而增加,其中P1、P2組的綜合效果最好(P>0.05);但當(dāng)添加量超過2.0%時(shí),中華絨螯蟹肌肉游離氨基酸中的EAA、FAA、LAA的含量均低于對(duì)照組(P>0.05)。表4顯示,飼料中添加蟲草基后,中華絨螯蟹血清游離TAA、EAA、FAA、LAA均有明顯增加,其中P1組各指標(biāo)顯著高于P0組(P<0.05)。各試驗(yàn)組中華絨螯蟹血清游離氨基酸在組成上也存在較大差異,中華絨螯蟹攝食后血清19種氨基酸中主要以Ala、Pro、Arg、Tau為主,占血清TAA的50.43%~60.39%,其次是Gly、Met及Cys,占血清TAA的18.22%~23.77%。這幾種氨基酸總量均顯著高于P0組(P<0.05),且P1組最高。

2.3中華絨螯蟹肝胰腺脂肪酸的組成分析

本試驗(yàn)測(cè)定了中華絨螯蟹肝胰腺脂肪酸組成,其結(jié)果見表5。表5顯示,中華絨螯蟹肝胰腺中共檢出28種脂肪酸,其中SFA10種,占脂肪酸總量的23.29%~28.31%;MUFA8種,占總量的39.10%~40.88%;PUFA10種,含量為24.73%~25.96%,∑MUFA+∑PUFA為63.83%~66.50%,明顯高于∑SFA。所有脂肪酸組成中含量最高的是油酸(C18∶1n9),含量達(dá)27.36%~28.84%,其次是棕櫚酸(C16∶0)、亞油酸(C18∶2n6)和棕櫚油酸(C16∶1),其含量分別是16.71%~17.65%、15.16%~16.04%和7.22%~8.14%。EPA+DHA為6.29%~7.80%,∑n-3/∑n-6為0.46~0.58。添加蟲草基后中華絨螯蟹∑MUFA有所提高,且P0.5、P1和P4組顯著高于P0組(P<0.05),但對(duì)中華絨螯蟹肝胰腺的∑PUFA影響不大(P>0.05);各試驗(yàn)組∑n-3均高于P0組,且P0.5組達(dá)顯著性水平(P<0.05);添加蟲草基可提高∑n-3與∑n-6的比值,P1組∑n-3/∑n-6為0.58,顯著高于P0組(P<0.05);P1組EPA+DHA顯著高于P0組(P<0.05)可知,蟲草基的添加還可提高中華絨螯蟹EPA+DHA含量。所以,添加0.5%~1.0%的蟲草基可以提高中華絨螯蟹肝胰腺不飽和脂肪酸含量及必需脂肪酸含量。

3討論

3.1不同飼料組對(duì)中華絨螯蟹常規(guī)成分的影響

本試驗(yàn)的各組飼料常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分基本相同。冒樹泉等[7]報(bào)道中華絨螯蟹對(duì)EAA需求量分別為:Ile1.29%、Leu2.11%、Lys1.88%、Met0.68%、Phe1.86%、Thr1.15%、Val1.40%、Arg2.40%、His0.63%。本試驗(yàn)測(cè)得的飼料必需氨基酸的含量與此基本相符,可以滿足中華絨螯蟹的營(yíng)養(yǎng)需要;當(dāng)適量添加蟲草基(0.25%~2.0%)時(shí),中華絨螯蟹的EAA、LAA的含量有所增加。投喂一定量的蟲草基對(duì)中華絨螯蟹全蟹、肌肉及肝胰腺水分和蛋白質(zhì)含量無顯著影響,但當(dāng)蟲草基添加量達(dá)16%時(shí)中華絨螯蟹的全蟹、肝胰腺粗蛋白含量有所下降。這一結(jié)果說明,適量添加蟲草基(0.5%~1.0%),可提高中華絨螯蟹的非特異性免疫力,維持或促進(jìn)其新陳代謝[3];但蟲草基添加量過多,高含量蟲草素抑制DNA、RNA以及蛋白質(zhì)的合成[8],從而干擾了機(jī)體正常的新陳代謝,降低了肌體的蛋白質(zhì)含量。蟲草基的添加對(duì)全蟹、肌肉及肝胰腺的脂肪含量有明顯提高作用,其中P0.5、P1、P16組達(dá)顯著水平。這主要是添加高濃度蟲草基提高了飼料中粗多糖的含量,在中華絨螯蟹機(jī)體內(nèi)過多的糖類轉(zhuǎn)化為脂肪,而且在蛋白質(zhì)合成受阻的情況下,氨基酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨酶脫胺形成脂肪酸,最終轉(zhuǎn)化為脂肪,因此中華絨螯蟹脂肪含量明顯提高[9]。

3.2不同飼料組對(duì)中華絨螯蟹肌肉及血清游離氨基酸的影響

本研究飼喂不同水平蟲草基飼料后,提高了P0.5至P2組中華絨螯蟹肌肉TAA、EAA、FAA和LAA總量,且肌肉游離TAA顯著性提高。有研究表明,蟹肉味道鮮美與其游離氨基酸含量高有很大關(guān)系[10-11]。陳德慰等[12]研究發(fā)現(xiàn)熟蟹肌肉中主要呈味氨基酸是Glu、Gly、Ala和Arg。楊玲芝等[10]證實(shí)Arg、Ala、Gly、Pro和Tau是中華絨螯蟹可食部分(肌肉、肝臟和性腺)的主要呈味氨基酸。因此,適量添加蟲草基(0.5%~2.0%)可以有效改善中華絨螯蟹的品質(zhì)。中華絨螯蟹血清中的游離氨基酸是蟹體肌肉組織中游離氨基酸和蛋白質(zhì)的主要來源,同時(shí)也反映了中華絨螯蟹對(duì)飼料中氨基酸的吸收狀況[13]。攝食含不同水平蟲草基的飼料后,中華絨螯蟹血清TAA、EAA、FAA及LAA均有所提高,其中P1組和P16組達(dá)顯著性水平。Tau是一種功能性氨基酸,其主要作用是通過調(diào)節(jié)體內(nèi)微量元素的代謝,提高大腦組織中與腦發(fā)育有關(guān)的必需微量元素鋅、銅、鐵及游離氨基酸等的含量,進(jìn)而促進(jìn)大腦中DNA、RNA及蛋白質(zhì)的合成,還可以Tau-Zn/Tau的形式調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞代謝活性[14]。蟲草基的添加提高了中華絨螯蟹血清中Tau含量,且P1、P2組達(dá)顯著水平。因此,飼料中添加蟲草基還可通過增加血清游離氨基酸含量來增加中華絨螯蟹風(fēng)味,提高其營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。

3.3不同飼料組對(duì)中華絨螯蟹肝胰腺脂肪酸的影響

中華絨螯蟹肝胰腺產(chǎn)生香味和香氣的重要組成成分是脂肪酸[15]。添加蟲草基后中華絨螯蟹肝胰腺M(fèi)UFA有所提高,且P0.5、P1和P4組顯著高于P0組;各試驗(yàn)組n-3均高于P0組,且P0.5組達(dá)顯著性水平;P1組中華絨螯蟹EPA+DHA含量顯著高于P0組。

多不飽和脂肪酸的氧化降解產(chǎn)生大量的不同種類的醛,醛對(duì)食品的氣味有重要的影響。高含量的PUFA能夠顯著增強(qiáng)食品的香味,試驗(yàn)測(cè)得P0.5和P1組中華絨螯蟹肝胰腺PUFA含量均高于其它飼料組。Chikuni等[16]還發(fā)現(xiàn),棕櫚油酸(C16∶1)含量和口味之間存在著較高的正相關(guān)(r2=0.963),本次試驗(yàn)中P0.5組中華絨螯蟹的肝胰腺中C16∶1顯著高于對(duì)照組。

n-3與n-6的比值是一個(gè)重要的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)指標(biāo),比值越高則說明該食品越有利于健康。在日常飲食中,n-3多不飽和脂肪酸的攝入量通常低于n-6多不飽和脂肪酸的攝入量,因此,水產(chǎn)品中的高n-3/n-6值更加有利于健康[17]。中華絨螯蟹的n-3/n-6值為0.46~0.58,可有效補(bǔ)充膳食中的n-3系列多不飽和脂肪酸。本試驗(yàn)證明蟲草基的添加可提高n-3/n-6值,且P1組顯著高于對(duì)照組。

所以,添加0.5%~1.0%的蟲草基可以提高中華絨螯蟹肝胰腺不飽和脂肪酸含量及必需脂肪酸含量,提高中華絨螯蟹營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。