導(dǎo)語：人參蛋白的抗輻作用探索一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

摘要：目的研究人參蛋白的抗輻射損傷作用。方法以60Co-γ射線一次性照射小鼠全身，觀察人參蛋白對(duì)照射小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)，骨髓細(xì)胞微核數(shù)，紅細(xì)胞超氧化物歧化酶（SOD）活性，肝臟丙二醛（MDA）含量以及胸腺、脾臟指數(shù)的影響。結(jié)果人參蛋白能增加輻射后小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)，減少骨髓細(xì)胞微核數(shù)，增加紅細(xì)胞SOD活性，抑制肝臟MDA含量升高，提高胸腺及脾臟臟體指數(shù)。結(jié)論人參蛋白對(duì)γ射線所致小鼠輻射損傷有較好的保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞：人參蛋白；小鼠；輻射損傷

人參為五加科植物人參PanaxginsengC.A.Meyer的干燥根。大量研究顯示，人參單味藥及復(fù)方藥均具有明顯的抗輻射作用［1］，但目前研究大多針對(duì)人參皂苷及多糖類，認(rèn)為皂苷與多糖是人參抗輻射作用的主要成分［2～6］，對(duì)于蛋白類成分抗輻射研究未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過觀察人參蛋白對(duì)輻射小鼠損傷的保護(hù)作用，為進(jìn)一步研究人參蛋白的抗輻射作用奠定基礎(chǔ)。

1材料與儀器

1.1藥物5年生人參購(gòu)自吉林靖宇縣，為五加科植物人參(PanaxgisengC.A.Mey.的干燥根。人參蛋白樣品為本實(shí)驗(yàn)室制備，經(jīng)Bradford蛋白含量試劑盒法測(cè)定蛋白含量為80%。

1.2動(dòng)物

由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的ICR小鼠，雄性，體質(zhì)量18～22g。動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：10-1023。

1.3儀器與試劑

貝克曼-庫爾特5分類血球計(jì)數(shù)儀，Backman公司；XS-212-201雙目光學(xué)顯微鏡，Jnoec公司；UVmini-1240型紫外可見分光光度計(jì)，Shimadzu公司；SOD試劑盒、MDA試劑盒，南京建成生物研究所。

2方法

2.1動(dòng)物分組

取40只小鼠，隨機(jī)分為4組，即正常對(duì)照組，輻射對(duì)照組，人參蛋白高劑量組（1mg/g）及人參蛋白低劑量組（0.5mg/g）。各組均為灌胃給藥，1ml/次，對(duì)照組灌服等體積蒸餾水。連續(xù)給藥7d后，除正常對(duì)照組外，其余3組均實(shí)施一次性60Co-γ射線全身照射，照射劑量為2Gy。

2.2外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)

照射后24h尾靜脈采血20μl，加入到0.38ml2%HAc溶液中，充分混勻，加入血球計(jì)數(shù)板中，在顯微鏡下讀取白細(xì)胞(WBC)個(gè)數(shù)。

2.3骨髓細(xì)胞微核計(jì)數(shù)

照射后24h小鼠頸椎脫臼處死，取胸骨，用止血鉗擠出骨髓液與玻片一端的小牛血清混勻，常規(guī)涂片。涂片自然干燥后放入甲醇中固定5～10min。將固定好的涂片放入Giemsa應(yīng)用液中，染色10～15min。立即用蒸餾水沖洗，晾干，鏡檢。選擇細(xì)胞完整、分散均勻、著色適當(dāng)?shù)膮^(qū)域，在油鏡下觀察。以有核細(xì)胞形態(tài)完好作為判斷制片優(yōu)劣的標(biāo)準(zhǔn)。

2.4紅細(xì)胞SOD活性及肝臟MDA含量測(cè)定

小鼠頸椎脫臼處死后，立即眼球取血并剝?nèi)「闻K。全血經(jīng)生理鹽水沖洗，冷雙蒸水混合、95％乙醇振蕩、三氯甲烷抽提制備SOD抽提液，按照試劑盒說明書測(cè)定SOD活力。肝組織經(jīng)生理鹽水沖洗，磷酸鹽緩沖液勻漿制成5％組織勻漿液，取上清按照試劑盒說明測(cè)定MDA含量。

2.5臟體指數(shù)計(jì)算照射24h后，分別對(duì)各受試小鼠進(jìn)行稱重。小鼠處死后分別取出胸腺和脾臟稱量，計(jì)算胸腺、脾臟的臟體指數(shù)比。

2.6數(shù)據(jù)處理與分析數(shù)據(jù)以±s表示，組間差異按Poisson分布進(jìn)行t檢驗(yàn)。

3結(jié)果

3.1人參蛋白對(duì)輻射小鼠血液白細(xì)胞數(shù)及骨髓細(xì)胞微核數(shù)的影響

顯微鏡下讀取計(jì)數(shù)板中白細(xì)胞個(gè)數(shù)，計(jì)算計(jì)數(shù)池中4個(gè)大方格中白細(xì)胞總數(shù)：白細(xì)胞數(shù)（109/L）=4個(gè)大方格中白細(xì)胞總數(shù)/4×稀釋倍數(shù)×107；每只動(dòng)物計(jì)數(shù)1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞，計(jì)算骨髓細(xì)胞微核率，以千分率表示。結(jié)果見表1。表1人參蛋白對(duì)白細(xì)胞數(shù)及骨髓微核數(shù)的影響（略）

由表1可見，輻射對(duì)照組與正常對(duì)照組比較，WBC數(shù)明顯降低，微核率明顯升高，說明造模成功。人參蛋白組較輻射對(duì)照組小鼠WBC數(shù)明顯增多，微核率明顯降低，說明人參蛋白可對(duì)抗輻射所致白細(xì)胞數(shù)降低及微核數(shù)升高。

3.2人參蛋白對(duì)輻射小鼠SOD活性及MDA含量的影響按照試劑盒方法分別測(cè)定紅細(xì)胞SOD活性及肝臟MDA含量，并按照試劑盒所示公式進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果見表2。表2人參蛋白對(duì)SOD活性及MDA含量的影響（略）

由表2可見，輻射對(duì)照組與正常對(duì)照組比較，SOD活性明顯降低、MDA含量明顯升高，說明造模成功。人參蛋白組與輻射對(duì)照組比較，SOD活性明顯升高，且成一定量效關(guān)系，說明人參蛋白可對(duì)抗輻射所致SOD活性降低；MDA含量雖無明顯變化但有降低趨勢(shì)，且成一定量效關(guān)系，說明人參蛋白可能具有抑制小鼠MDA含量升高的作用。

3.3人參蛋白對(duì)輻射小鼠胸腺及脾臟指數(shù)的影響

小鼠處死后稱取胸腺、脾臟重量，并與處死前當(dāng)天小鼠體質(zhì)量進(jìn)行比較，計(jì)算臟體系數(shù)比。結(jié)果見表3。表3人參蛋白對(duì)胸腺及脾臟指數(shù)的影響（略）

由表3可見，輻射對(duì)照組與正常對(duì)照組比較，胸腺及脾臟指數(shù)明顯降低，說明造模成功。人參蛋白組與輻射對(duì)照組比較，胸腺指數(shù)及高劑量脾臟指數(shù)明顯升高，說明人參蛋白可對(duì)抗輻射所致胸腺及脾臟指數(shù)降低，且成一定量效關(guān)系。

綜上，給予人參蛋白能有效預(yù)防γ射線照射引起的小鼠白細(xì)胞數(shù)減少、骨髓微核數(shù)增加、紅細(xì)胞SOD活性降低及胸腺、脾臟指數(shù)降低，對(duì)MDA含量升高雖無明顯抑制作用，但有一定抑制趨勢(shì)。

4討論

輻射對(duì)生物體的危害較大，可以直接作用于DNA、蛋白質(zhì)及酶類，使分子變性、細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞；也可以作用于機(jī)體內(nèi)水分子，使其產(chǎn)生大量的具有強(qiáng)氧化性能的自由基，致使機(jī)體代謝紊亂，引起免疫、神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)節(jié)功能障礙等一系列病變［7］。外周血白細(xì)胞數(shù)減少、骨髓細(xì)胞微核數(shù)增高、血或組織中SOD活性降低等均為一次性全身γ射線照射引起輻射損傷的主要表現(xiàn)。白細(xì)胞又稱白血球，作為免疫系統(tǒng)的一部分幫助身體抵抗傳染病以及外來的東西，白細(xì)胞急劇減少可引起血液病等多種免疫性疾病。微核是在細(xì)胞有絲分裂后期沒有進(jìn)入細(xì)胞核而留在細(xì)胞質(zhì)中的染色體或片段，它在末期以后，單獨(dú)形成一個(gè)或幾個(gè)規(guī)則的次核，由于比核小得多故稱微核。微核的多少直接反映染色體的損傷程度，也間接代表機(jī)體受輻射損傷的狀況。另外，正常組織受到輻射后，會(huì)產(chǎn)生大量自由基，后者作用于生物膜引起脂質(zhì)過氧化，造成生物膜功能和代謝的改變。SOD作為機(jī)體組織主要清除自由基的抗氧化酶，其活力的高低可間接反映機(jī)體清除自由基的能力；MDA是脂質(zhì)過氧化的主要產(chǎn)物，其含量高低反映機(jī)體的自由基水平和氧化應(yīng)激水平［8］。

本實(shí)驗(yàn)中人參蛋白能明顯抑制受照小鼠的白細(xì)胞數(shù)減少、微核數(shù)增多、SOD活性降低、MDA含量增加，說明人參蛋白對(duì)輻射損傷小鼠具有很好的保護(hù)作用。同時(shí)，人參蛋白提高使受照小鼠的胸腺、脾臟指數(shù)增加，反映了人參蛋白有提高免疫力的作用。綜上，我們認(rèn)為，人參蛋白具有有效防治輻射對(duì)機(jī)體損傷的作用，且認(rèn)為人參蛋白的抗輻射作用可能與其增強(qiáng)免疫力，清除自由基作用密切相關(guān)。對(duì)于人參蛋白的其他作用機(jī)理，我們正在進(jìn)一步研究中。

【參考文獻(xiàn)】

［1］鄔蓉,高守紅,辛海量.人參抗輻射損傷研究概況［J］.藥學(xué)實(shí)踐雜志,2007,25(6):364.

［2］姜建華,張學(xué)進(jìn),王育麗.人參皂苷對(duì)60Co照射小鼠不良反應(yīng)的影響［J］.浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志,2005,15(11):682.

［3］IvanovaT,HanY,SonHJ,eta1.AntimutageniceffectofpolysaccharideginsanextractedfromPanaxginseng［J］.FoodChemToxieol,2006,44(4):517.

［4］金光輝,劉樹錚,劉揚(yáng),等.人參組甙對(duì)紫外線輻射致皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞損傷的保護(hù)作用［J］.中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志,2002,22(6):420.

［5］劉麗波,孫曉玲,張海英,等.人參三醇組苷對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞染色體輻射的防護(hù)作用［J］.吉林大學(xué)學(xué)報(bào),2002,28(2):l38.

［6］李校坤,林灼鋒,黃亞東,等.人參三醇組甙抗輻射作用的研究［J］.中藥材,2002,25(11):805.

［7］吳紅星,楊劍婷.抗輻射劑的研究現(xiàn)狀［J］.放射免疫學(xué)雜志,2005,18(1):58.

［8］崔鳳梅,聶繼華,李建祥,等.黑風(fēng)蜂膠抗輻射損傷的實(shí)驗(yàn)研究［J］.工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病,2006,32(5):283.