導(dǎo)語：丙肝患者IgM特異性激活補(bǔ)體類循環(huán)免疫合物的檢測及意義一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【關(guān)鍵詞】肝損傷

摘要:目的:探討丙肝患者體內(nèi)igm特異性激活補(bǔ)體類循環(huán)免疫復(fù)合物（即IgM/C3-TCIC）的變化及其意義。方法:采用捕捉法ILISA，對(duì)丙肝患者血清中的IgM/C3-TCIC進(jìn)行檢測，并將其與患者的性別、年齡、病程及谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:80例丙肝患者血清中有52例檢測呈陽性，IgM/C3-TCIC的陽性率為65.0%。IgM/C3-TCIC的陽性率與ALT相關(guān)，在ALT升高組IgM/C3-TCIC的陽性率要顯著高于ALT正常組（P<0.05）;而與患者的病程、性別及年齡則均無明顯相關(guān)（P>0.05）。結(jié)論:丙肝患者體內(nèi)IgM/C3-TCIC可能直接參與了對(duì)肝組織損傷的過程，其病理意義值得重視。

關(guān)鍵詞:丙肝病毒（HCV）;IgM/C3-TCIC;ELISA;肝損傷

自雙特異性循環(huán)免疫復(fù)合物（Two-component-determinedcirculatingimmunecomplexes，TCIC）的概念提出以來，其病理生理意義的研究受到廣泛重視［1～3］。本研究采用捕捉法ELISA，對(duì)丙肝患者血清中的IgM特異性激活補(bǔ)體類免疫復(fù)合物（即IgM/C3-TCIC）進(jìn)行檢測，旨在闡明這類雙特異性循環(huán)免疫復(fù)合物在丙肝患者體內(nèi)的變化及其臨床意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

羊抗人C3抗血清，羊抗人IgM抗血清均為上海生物制品研究所產(chǎn)品，經(jīng)硫銨-DEAE32層檢提取IgG組分。酶抗體為本室自制，采用簡易過碘酸鈉法［4］將HRP（辣根過氧化物酶，Sigma）標(biāo)記到抗人IgM的羊IgG組分上。

1.2實(shí)驗(yàn)對(duì)象

實(shí)驗(yàn)組包括80例丙型肝炎患者血清標(biāo)本（其中男性37例，女性43例），對(duì)照組包括115例健康人血清標(biāo)本（其中男性50例，女性65例）。

1.3IgM/C3-TCIC的檢測捕捉法ELISA的操作步驟如下:用0.1M，pH9.6的碳酸緩沖液將抗人C3的羊IgG稀釋至7.5ug/ml，加入反應(yīng)板，每孔0.1ml，4℃18～24小時(shí)，用0.01M，pH7.4PBS-T洗滌3次，加入用生理鹽水按1∶75稀釋的血清標(biāo)本，每孔0.1ml，4℃18～24小時(shí)，同上洗滌;用含2.5%兔血清的PBS-T將HRP-抗人IgM的羊IgG作1∶1000稀釋，每孔0.1ml，37℃1小時(shí)，同上洗滌;加入TMB-H2O2底物溶液，每孔0.1ml，37℃避光反應(yīng)45min;2M的H2SO4終止反應(yīng)，最后在BIO-RAD680全自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國產(chǎn)品）上測OD值。每塊反應(yīng)板分別以混合人血清和以羊血清的作陽陰性對(duì)照。以陽、陰對(duì)照血清OD值的20次均值，按下面的公式對(duì)實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的OD值進(jìn)行校正:被檢標(biāo)本OD校正值=陽、陰性對(duì)照血清20次OD均值之差陽、陰性對(duì)照血清實(shí)測OD均值之差×被檢標(biāo)本復(fù)孔實(shí)測OD均值。

2結(jié)果

2.1IgM/C3-TCIC的陽性界值采用捕捉法ELISA檢測115例健康人血清標(biāo)本，由于CIC與年齡有關(guān)［1］，故以不同年齡組計(jì)算X和SD，以X±2SD為陽性臨界值，≥X±2SD者為升高的陽性標(biāo)本，結(jié)果如表1。

表1正常人IgM/C3-TCIC的陽性界值（略）

2.2丙肝患者IgM/C3-TCIC的陽性率采用捕捉法ELISA對(duì)80例丙肝患者的IgM/C3-TCIC進(jìn)行檢測，結(jié)果有52例呈陽性，陽性率為65.0%。對(duì)不同年齡組之間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)15～、30～、40～和50～年齡組IgM/C3-TCIC的陽性率依次為66.7%、63.5%、64.5%和66.7%，相互之間均無顯著性差異（P>0.05），如表2所示。此外，不同性別之間IgM/C3-TCIC的陽性率亦無明顯差異。表2丙肝患者IgM/C3-TCIC的陽性率

2.3丙肝患者血清ALT與IgM/C3-TCIC陽性率的關(guān)系比較ALT升高組與正常組中IgM/C3-TCIC的陽性率，結(jié)果如表3。表3丙肝患者ALT與IgM/C3-TCIC陽性率之間的關(guān)系

2.4丙肝患者的病程IgM/C3-TCIC陽性率的關(guān)系80例丙肝患者按病程又分為兩組:病程不足20天的患者歸為一組，共有37例;病程超過20天的患者歸為另一組，共有43例。各組中IgM/C3-TCIC的陽性率見表4?？梢钥闯?，IgM/C3-TCIC的陽性率在長病程組明顯高于短病程組，兩者之間具有極顯著性差異（P<0.01）。表4丙肝患者病程與IgM/C3-TCIC陽性率之間的關(guān)系

3討論

針對(duì)丙肝患者體內(nèi)循環(huán)免疫復(fù)合物（CIC）的研究已有報(bào)道［5～7］，然而這些報(bào)道大都只從非特異性CIC的角度進(jìn)行研究，并未對(duì)復(fù)合物中的不同組分及其意義進(jìn)行深入探討。本研究采用捕捉法ELISA，以羊抗人C3的IgG為捕捉抗體，然后分別以HRP標(biāo)記的抗人IgM的IgG為指標(biāo)抗體，檢測丙肝患者血清中IgM特異性激活補(bǔ)體類CIC，即IgM/C3-TCIC，旨在探討該類雙特異性CIC在丙型肝炎患者體內(nèi)的變化及其臨床意義。通過對(duì)115例健康人血清的IgM/C3-TCIC進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)健康人血清中該類雙特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的水平可達(dá)0.77±0.14，且在不同年齡組之間存在一定差異。因此，我們以不同年齡組IgM/C3-TCIC的X±2SD為陽性臨界值，≥X±2SD者確定為升高的陽性標(biāo)本。據(jù)此對(duì)80例丙肝患者IgM/C3-TCIC的陽性率進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有52例呈陽性，陽性率為65.0%。15～、30～、40～和50～年齡組IgM/C3-TCIC的陽性率依次為66.7%、63.5%、64.5%和66.7%，相互之間均無顯著性差異（P>0.05）。此外，不同性別之間IgM/C3-TCIC的陽性率亦無明顯差異。此外，通過比較IgM/C3-TCIC與患者病程的關(guān)系，結(jié)果表明IgM/C3-TCIC的陽性率與患者的病程并無明顯關(guān)系。進(jìn)一步將IgM/C3-TCIC的檢測結(jié)果與患者的ALT水平進(jìn)行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)IgM/C3-TCIC的陽性率與ALT明顯相關(guān)，在ALT異常組IgM/C3-TCIC的陽性率顯著高于ALT正常組（P<0.05）。由于ALT為肝臟損傷的敏感指標(biāo)，因此推測IgM/C3-TCIC可能直接參與了導(dǎo)致肝組織損傷的過程，其病理意義值得重視。

參考文獻(xiàn)

1彭宣憲.雙特異性免疫復(fù)合物的研究進(jìn)展.上海免疫學(xué)雜志，1996，16（5）:315～317.

2彭宣憲，萬雅各，張文軍，等.甲型肝炎的免疫球蛋白-補(bǔ)體循環(huán)免疫復(fù)合物.病毒學(xué)報(bào)，1995，11（3）:203～207.

3王三英，楊天賜，彭宣憲.Ig/Ig雙特異性免疫復(fù)合物定量及免疫調(diào)節(jié)作用.中國公共衛(wèi)生，2002，18（6）:712～714.

4李思光，彭宣憲，張文軍，等.IgM類HBsAg免疫復(fù)合物與乙肝肝損害關(guān)系初探.江西科學(xué)，1997，15（3）:154～157.

5TsaiJF，JengJE，ChangWY，etal.CirculatingimmunecomplexesinchronichepatitisC.JMedVirol，1995，46（1）:12～17.

6TsaiJF，MargolisHS，JengJE，etal.CirculatingimmunecomplexesinchronichepatitisrelatedtohepatitisCandBvirusesinfection.ClinIm-munolImmunopathol，1995，75（1）:39～44.

7SansonnoD，DammaccoF.HepatitisCvirus，cryoglobulinaemia，andvasculitis:immunecomplexrelations.LancetInfectDis，2005，5（4）:227～236.