導(dǎo)語(yǔ)：丙泊酚對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠肺組織TNF一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【關(guān)鍵詞】丙泊酚；內(nèi)毒素；肺瘤壞死因子；

摘要：目的：觀察丙泊酚對(duì)內(nèi)毒素(LPS)誘導(dǎo)大鼠肺組織腫瘤壞死因子α(tnfα)、白細(xì)胞介素1β(IL1β)釋放的影響。方法：將雄性Wistar大鼠60只隨機(jī)分為正常對(duì)照組(C組，輸注生理鹽水)、LPS對(duì)照組(L組，股靜脈注射LPS5mg／kg后輸注生理鹽水)和丙泊酚處理組(Lp組，股靜脈注射LPS5mg／kg后立即輸注丙泊酚10mg・kg-1・h-1)。按預(yù)設(shè)時(shí)相分別于1h、2h、3h、4h時(shí)間點(diǎn)放血處死各組動(dòng)物，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)肺組織細(xì)胞因子TNFα、IL1β水平的變化。結(jié)果：L組大肺組織中TNFα、IL1β水平與C組相比較顯著增高(P<0.05或P<0.01），經(jīng)丙泊酚處理后，此作用得到部分逆轉(zhuǎn)。結(jié)論：丙泊酚能抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠肺組織細(xì)胞因子TNFα、IL1β水平上升。

關(guān)鍵詞：丙泊酚；內(nèi)毒素；肺瘤壞死因子；

白細(xì)胞介素1內(nèi)毒素(LPS)侵入機(jī)體，引起腫瘤壞死因子α(TNFα)、白細(xì)胞介素1β(IL1β)、白細(xì)胞介素8(IL8)、細(xì)胞間粘附因子(ICAM1)等炎癥介質(zhì)過(guò)度表達(dá)，是導(dǎo)致急性肺損傷的一個(gè)重要因素［1，2］。近年來(lái)，已證實(shí)丙泊酚具有良好的抗氧化和抑制細(xì)胞因子的功能，然而，關(guān)于丙泊酚對(duì)內(nèi)毒素所致肺部炎癥的保護(hù)作用及其分子作用機(jī)理至今尚未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附注(ELISA)觀察丙泊酚對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠肺組織TNFα、IL1β釋放的影響，旨在探討它們之間的關(guān)系。

1材料和方法

11實(shí)驗(yàn)材料

健康雄性Wistar大鼠60只，由武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，體重(200±50)g。丙泊酚(英國(guó)阿斯利康公司)；LPS(E.coliLPSserotype0111:B4)(美國(guó)Sigma公司)；大鼠TNFαELISA試劑盒(美國(guó)R&D公司)；大鼠IL1βELISA試劑盒(美國(guó)Bender公司)；WZS50FZ微量輸液泵(德國(guó)B／Braun公司)。

12動(dòng)物模型和實(shí)驗(yàn)分組

實(shí)驗(yàn)大鼠以1%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔注射行基礎(chǔ)麻醉。隨機(jī)分為3組：①正常對(duì)照組(C組)：實(shí)驗(yàn)中單純給予生理鹽水，首次劑量為1ml/kg，隨后以1ml・kg-1・h-1持續(xù)靜脈滴注；②LPS對(duì)照組(L組)：股靜脈注射LPS(5mg/kg)后，持續(xù)靜脈輸注生理鹽水(1ml・kg-1・h-1)；③丙泊酚處理組(Lp組)：股靜脈注射LPS(5mg/kg)后，立即輸注丙泊酚(10mg/kg的誘導(dǎo)劑量，隨后以10mg・kg-1・h-1的速度持續(xù)靜脈輸注)。按預(yù)設(shè)時(shí)相在1h、2h、3h、4h各時(shí)間點(diǎn)放血處死大鼠，立即開(kāi)胸取肺，-70℃保存。

13細(xì)胞因子的測(cè)定

取右肺稱重后置于勻漿緩沖液中，以每克組織加入10ml緩沖液的比例加入緩沖液。緩沖液中含蛋白酶抑制劑混合物，包括1mmol/LPMSF；1μg/mlleupeptin;1μg/mlaprotinin溶于含0.5%Triton×100的PBS中(pH72)。標(biāo)本勻漿后，以15000g離心10分鐘，取上清，使用大鼠ELISA試劑盒分別檢測(cè)細(xì)胞因子TNFα和IL1β的含量。

14統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析和t檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P<0.05為差異有顯著性。

2結(jié)果

21丙泊酚對(duì)大鼠肺組織TNFα水平的影響

與C組相比，L組大鼠肺組織TNFα水平顯著上升，2h即達(dá)到峰值，此后迅速下降，但仍高于C組；Lp組大鼠肺組織TNFα水平也高于C組，但其上升幅度遠(yuǎn)低于L組，峰值延后，出現(xiàn)在3h，3h、4h點(diǎn)時(shí)L和Lp兩組間均無(wú)顯著性差異。見(jiàn)圖1。

22丙泊酚對(duì)大鼠肺組織IL1β水平的影響

與C組相比，L組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺組織IL1β水平均顯著增高，經(jīng)丙泊酚處理后則明顯降低，見(jiàn)圖2。圖1肺組織勻漿中TNFα水平的變化圖2肺組織勻漿中IL1β水平的變化

3討論

急性肺損傷(ALI)發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，患病率和死亡率居高不下，一直是臨床重癥監(jiān)護(hù)中的治療難點(diǎn)。就其發(fā)病機(jī)理而言，目前普遍認(rèn)為，前炎癥介質(zhì)(TNFα、IL1β、IL8等)、粘附分子(ICAM1、P選擇素等)及細(xì)胞因子的過(guò)量生成起關(guān)鍵作用［1，2］。革蘭氏陰性細(xì)菌敗血癥是臨床急性肺損傷的常見(jiàn)原因之一，其內(nèi)毒素脂多糖(LPS)中的類脂A具有極強(qiáng)的生物學(xué)活性，誘使細(xì)胞因子的釋放和激活。LPS作為一種致傷因素，可直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，使血管通誘性增加，大量富含蛋白質(zhì)的液體由肺血管溢出，形成肺間質(zhì)水腫和肺泡水腫，影響氣體交換和血氧合功能，造成組織缺氧，從而造成對(duì)機(jī)體的損害。因此，本實(shí)驗(yàn)在股靜脈注射LPS(5mg/kg)后應(yīng)用ELISA實(shí)驗(yàn)方法，分別觀察了LPS誘導(dǎo)的大鼠肺組織TNFα和IL1β釋放的變化。結(jié)果顯示，LPS致傷后，肺組織TNFα、IL1β水平顯著增高，提示生物活性介質(zhì)的過(guò)度表達(dá)在內(nèi)毒素所致肺部炎癥的發(fā)病過(guò)程中起到重要作用。

丙泊酚作為一種新型麻醉鎮(zhèn)靜藥已廣泛應(yīng)用于臨床，其對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)作用逐漸被人們所接受，并已證實(shí)有良好的抗氧化和抑制細(xì)胞因子的功能。Mikawa等［3］已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了異丙酚能夠抑制中性粒細(xì)胞的吞噬作用以及活性氧的釋放；Crozier等［4］發(fā)現(xiàn)異丙酚和阿芬太尼靜脈麻醉時(shí)可抑制腹式子宮切除術(shù)患者血漿中IL6的釋放；Galley等［5］證明異丙酚可抑制體外經(jīng)LPS誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞中IL8的產(chǎn)生；Taniguchi等［6］也發(fā)現(xiàn)了異丙酚可降低內(nèi)毒素血癥時(shí)血清TNFα、IL6、IL10水平及中性粒細(xì)胞的活化。本實(shí)驗(yàn)首次觀察了丙泊酚對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠肺組織TNFα、IL1β釋放的影響，發(fā)現(xiàn)丙泊酚能對(duì)動(dòng)物肺組織中炎癥因子TNFα、IL1β的釋放產(chǎn)生抑制效應(yīng)的，這可能是丙泊酚發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能，對(duì)急性肺損傷起到保護(hù)效應(yīng)的作用機(jī)制之一，這將為急性肺損傷的臨床治療提供一定的理論依據(jù)，但其詳細(xì)作用機(jī)理尚有待于進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

1ArmstrongL,MillarAB.Relativeproductionoftumournecrosisfactoralphaandinterleukin10inadultrespiratorydistresssyndrom.Thornx,1997,52:442~446.

2ThomasRM.LungcytokinesandARDS.Chest,1999,116:2~8.

3MikawaK,AkamatsuH,NishinaK,etal.Propofolinhibitshumanneutrophilfunctions.AnesthAnalg,1998,87:695~700.

4CrozierTA,MullerJE,QuittkatD,etal.Effectofanaesthesiaonthecytokineresponsestoabdominalsurgery.BrJAnaesth,1994,72:280~285.

5GalleyEF,DubbelsAM,WebsterNR.Theeffectofmidazoamandpropofoloninterleukin8fromhumanpolymorphonuclearleukocytes.AnesthAnalg,1998,86:1289~1293.

6TaniguchiT,YamamotoK,OhmotoN,etal.Effectsofpropofolonhemodynamicandinflammatoryresponsestoendotoxemiainrats.CritCareMed,2000,28:1101~1106.