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【關(guān)鍵詞】二異丙酚；肝；再灌注損傷；琥珀酸脫氫酶；腺苷三磷酸

Protectiveroleofpropofolagainsthepaticischemiareperfusioninjuryanditseffectonsomebiochemicalindicatorsinrabbits

【Abstract】AIM:Toinvestigatetheprotectiveroleofpropofolagainsthepaticischemiareperfusioninjury(HIRI)andtheeffectofpropofolonsomebiochemicalindicatorsinrabbitsinvivo.METHODS:Fortyrabbitswererandomlydividedinto4groupswith10animalseach.TheywereHIRImodelgroup(groupA),HIRIplus2mL/(kg・h)normalsodiumgroup(groupB),HIRIplus8mg/(kg・h)propofolgroup(groupC),andshamoperationgroup(groupD).Theactivityofsuccinodehydrogenase(SDH),ATPcontentinhepatictissueandserumalanineaminotransferase(ALT),aspartateaminotransferase(AST)contentwereassayedafterreperfusionfor30minand60min.RESULTS:SDHactivityinhepatictissueingroupAandBdecreasedsignificantlycomparedwiththatingroupD(P<0.05)andtherewasnodifferencebetweengroupCandD(P>0.05)afterreperfusionfor30minand60min;ATPcontentinhepatictissuedecreasedingroupA,B,CcomparedwithgroupD(P<0.05),butthedecreaseddegreeofgroupCwasmuchsmallerthangroupAandBatthesametime(P<0.05);serumALT,ASTlevelsincreasedingroupA,B,CcomparedwithgroupD(P<0.01,P<0.05).CONCLUSION:PropofolcanenhancetheactivityofSDHinmitochondriaduringischemiareperfusionandincreasetheATPcontentinhepatictissue,thusshowingtheprotectiveeffectagainstHIRI.

【Keywords】propofol;liver;reperfusioninjury;succinatedehydrogenase;adenosinetriphosphate

【摘要】目的：探討麻醉藥異丙酚對兔在體肝臟缺血再灌注損傷(HIRI)保護(hù)作用及部分生化指標(biāo)的影響.方法：40只家兔隨機(jī)分為四組,每組10只,分別為缺血再灌注組（A組），缺血再灌注加生理鹽水2mL/（kg・h）組（B組）,缺血再灌注加異丙酚8mg/（kg・h）組（C組）和假手術(shù)對照組（D組）.各組于再灌注后30min及60min時(shí)測定肝組織中琥珀酸脫氫酶（SDH）活性、ATP含量以及血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量.結(jié)果：再灌注后30min及60min時(shí),A,B兩組肝組織中SDH活性與D組比較明顯降低(P<0.05),C組與D組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；A,B,C組肝組織中ATP含量與D組比較均降低(P<0.05),但C組的降低程度小于同時(shí)間點(diǎn)的A,B兩組(P<0.05)；A,B,C組血清ALT,AST水平均高于D組(P<0.01,P<0.05).結(jié)論：異丙酚能增強(qiáng)缺血再灌注時(shí)肝細(xì)胞線粒體中SDH的活力,增加肝組織中ATP的含量,對HIRI有保護(hù)作用.

【關(guān)鍵詞】二異丙酚；肝；再灌注損傷；琥珀酸脫氫酶；腺苷三磷酸

0引言

肝臟缺血再灌注損傷(hepaticischemiareperfusioninjury,HIRI)機(jī)制復(fù)雜,以往大量研究證明與氧自由基（OFR）損害、線粒體功能異常、能量代謝障礙、鈣離子超載、微循環(huán)障礙、中性粒細(xì)胞浸潤、內(nèi)毒素作用等因素有關(guān).本實(shí)驗(yàn)通過建立家兔HIRI模型,觀測麻醉藥異丙酚對肝細(xì)胞線粒體中SDH活力的影響,對缺血再灌注肝組織中ATP含量的影響,以及ALT和AST水平的變化,旨在探索異丙酚對在體HIRI的保護(hù)作用及機(jī)制,為臨床肝移植術(shù)中應(yīng)用異丙酚麻醉和保護(hù)移植肝功能提供理論依據(jù).

1材料和方法

1.1材料西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物中心提供健康雄性家兔40只,兔齡6mo左右,體質(zhì)量2.0~2.5kg,隨機(jī)分為4組,每組10只.A組為缺血再灌注組,B組缺血再灌注加生理鹽水組，C組缺血再灌注加異丙酚組，D組假手術(shù)對照組.術(shù)前12h禁食,自由飲水.

1.2方法

1.2.1麻醉與模型建立將各組兔用30g/L戊巴比妥鈉（1.0mL/kg）耳緣靜脈緩慢注射麻醉后,仰臥固定于手術(shù)臺上.行頸內(nèi)動脈插管,持續(xù)監(jiān)測平均動脈壓（MAP）,并行同側(cè)頸內(nèi)靜脈置管,接肝素帽待用.A,B,C實(shí)驗(yàn)組經(jīng)兔上腹部正中切口,暴露肝門,用無損傷動脈夾鉗閉肝門,完全阻斷肝血流30min后除去動脈夾實(shí)施再灌注,再灌注后30min,60min取標(biāo)本待測.D組只手術(shù)而不用動脈夾鉗閉肝門.

1.2.2用藥B,C兩組由微量注射泵經(jīng)頸內(nèi)靜脈分別持續(xù)輸注生理鹽水2mL/（kg・h）和異丙酚8mg/（kg・h）直至術(shù)畢.異丙酚為瑞典AstraZenecaS.P.A.生產(chǎn)制造(200mg/支).

1.2.3肝組織中SDH活性和ATP含量的測定各組分別于再灌注后30,60min時(shí)取左外葉肝組織少許,生理鹽水洗去血液,中性濾紙吸干,準(zhǔn)確稱取肝組織0.2g,冰浴中制成勻漿,分別按試劑盒步驟,測定SDH活性和ATP含量.

1.2.4下腔靜脈血ALT,AST含量測定各組分別于再灌注后30,60min時(shí)經(jīng)下腔靜脈抽取靜脈血4mL左右,置于37℃水浴箱中1h,血液凝固后3000r/min,4℃離心10min分離血清,-70℃保存?zhèn)溆?全自動生化分析儀測定.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：實(shí)驗(yàn)結(jié)果以x±s表示,使用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析處理.組間比較采用單因素方差分析及LSDt兩兩比較,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2結(jié)果

2.1肝組織中SDH活性再灌注后30,60min時(shí),A,B兩組肝組織中SDH活性與D組比較降低(P<0.05),C組與D組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05,表1).

表1各組肝組織中SDH的活性（略）

P<0.05vsD.

2.2肝組織中ATP含量與D組比較,A,B,C組肝組織中ATP含量于再灌注后30,60min時(shí)均降低(P<0.05),但C組的降低程度小于同時(shí)間點(diǎn)的A,B兩組(P<0.05,表2).

表2各組肝組織中ATP的含量（略）

aP<0.05vsD,bP<0.01vsD,cP<0.05vsC.

2.3血清ALT,AST含量與D組比較,A,B,C實(shí)驗(yàn)組血清ALT,AST于再灌注后30,60min時(shí)均升高(P<0.05),但C組的升高程度低于同時(shí)間點(diǎn)的A,B兩組（P<0.01,表3).

表3各組血清ALT,AST含量（略）

aP<0.05vsD,bP<0.01vsD,dP<0.01vsC.

3討論

我們研究表明,異丙酚能增強(qiáng)缺血再灌注時(shí)肝細(xì)胞線粒體中SDH的活力,增加肝組織中ATP的含量,對HIRI有保護(hù)作用.HIRI是肝移植術(shù)、肝葉切除術(shù)及嚴(yán)重肝臟創(chuàng)傷手術(shù)等常涉及的共同病理生理變化,直接影響患者的恢復(fù)及術(shù)后生存率.其發(fā)生機(jī)制復(fù)雜,與OFR損害、線粒體功能異常、能量物質(zhì)耗竭、鈣離子超載、微循環(huán)障礙等因素有關(guān)［1-3］.在肝臟缺血再灌注過程中,OFR大量生成引起強(qiáng)烈的脂質(zhì)過氧化反應(yīng),造成細(xì)胞膜基本特性改變,蛋白質(zhì)（酶）活性喪失等.線粒體的脂質(zhì)雙層膜中不飽和脂肪酸含量比細(xì)胞膜多,對過氧化更敏感.而線粒體中的大部分酶活性有賴于膜的完整性,因此膜結(jié)構(gòu)的變化必然影響線粒體酶系的作用.SDH是線粒體內(nèi)膜呼吸酶系的關(guān)鍵酶之一,其活性的變化可以直接反應(yīng)呼吸鏈的正常功能.在本實(shí)驗(yàn)中缺血再灌注后各時(shí)間段A組肝組織中SDH活力明顯低于D組(P<0.05)，說明呼吸鏈的正常功能受到明顯的影響.同時(shí),缺血缺氧、線粒體受損引起氧化磷酸化過程障礙和ATP合成急劇下降,各種離子泵的功能不能維持,細(xì)胞離子穩(wěn)態(tài)失衡,導(dǎo)致細(xì)胞急劇水腫和細(xì)胞內(nèi)鈣超載,啟動引起肝損傷的鏈鎖反應(yīng)［4-5］.再灌注時(shí),由于肝臟微循環(huán)障礙,缺血缺氧繼續(xù)存在,能量代謝障礙進(jìn)一步加重,導(dǎo)致能量衰竭,最終引發(fā)肝臟一系列病理生理改變.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：缺血再灌注后各時(shí)間段A組肝組織中ATP含量明顯低于D組(P<0.01),也證明ATP匱乏在HIRI中起著重要作用,而改善肝細(xì)胞能量代謝有助于HIRI的防治.

新型靜脈麻醉藥異丙酚是近年用于研究保護(hù)臟器IRI最多的藥物之一.它具有很強(qiáng)的親脂性,能迅速而廣泛地從血液分布到各器官和身體各部位的組織中去,已在臨床上廣泛應(yīng)用.研究認(rèn)為它對心、腦、腎等重要臟器IRI有很好的保護(hù)作用［6-7］,除了能直接作用于血管平滑肌,有擴(kuò)張周圍血管、增加血流、改善循環(huán)的作用外還具有抗氧化作用.它的酚羥基結(jié)構(gòu)與OFR清除劑類似,在生物體中可直接與OFR反應(yīng)生成2,6二異丙基苯氧基團(tuán),使OFR滅活,從而抑制自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)［8］.

本實(shí)驗(yàn)建立家兔HIRI模型,并設(shè)假手術(shù)對照組排除手術(shù)創(chuàng)傷引起應(yīng)激反應(yīng)的干擾,通過測定ALT,AST釋放量反應(yīng)在HIRI中肝細(xì)胞膜的受損情況；測定肝組織中SDH活性變化反應(yīng)線粒體呼吸鏈?zhǔn)艿降挠绊?；測定肝組織中ATP含量變化反應(yīng)肝臟的能量代謝情況,同時(shí)觀察靜脈給予異丙酚后對上述指標(biāo)的影響.結(jié)果顯示：異丙酚組肝細(xì)胞中轉(zhuǎn)氨酶的釋放量比缺血再灌注組和生理鹽水組少,而肝組織中SDH的活性以及ATP的含量比缺血再灌注組和生理鹽水組高,表明異丙酚能通過減少OFR的生成、降低OFR水平,減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng),提高細(xì)胞抗氧化損傷的能力,穩(wěn)定肝細(xì)胞膜的功能,減輕膜受損程度,增強(qiáng)肝細(xì)胞線粒體中SDH的活力,維持線粒體功能的穩(wěn)定；提高肝組織中ATP的含量,改善缺血肝臟的能量代謝,防止肝細(xì)胞水腫、細(xì)胞內(nèi)鈣超載和肝臟微循環(huán)障礙等的發(fā)生,從而抑制了HIRI的生化反應(yīng)和病理過程,多種途徑有效地防治了HIRI.

【參考文獻(xiàn)】

［1］南菁，杜錫林，馬慶久，等.大鼠肝臟缺血/再灌注損傷早期一氧化氮的變化及其作用［J］.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,26(11):983-985.

［2］王生蘭.肝缺血再灌注損傷的機(jī)制及藥物保護(hù)作用［J］.青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,26(1):63-66.

［3］姚宇鋒，項(xiàng)建斌，蔡端.肝臟缺血再灌注損傷發(fā)生機(jī)制研究進(jìn)展［J］.肝膽胰外科雜志,2005,17(3):249-251.

［4］HatanakaN,KamijkeW,ShimizuS,etal.Ca2+releasefrommitochondrialinducescytosiolicenzymeleakageinanoxisliver［J］.JSurgRes,1995,58:485.

［5］MasiniA,GallesiD,GiovanniniF,etal.Membranepotentialofhepaticmitochondrialaftercutecocaineadministrationinrattheroleofmithochondrialreducedglutathione［J］.Hepatology,1997,25:305.

［6］張大志,田玉科.丙泊酚對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制［J］.臨床麻醉學(xué)雜志,2004,20(9):572-573.

［7］郭建榮，丁節(jié)清，胡馨.丙泊酚對大鼠腦缺血再灌注損傷后海馬線粒體ATP含量和ATP酶活性的影響［J］.臨床麻醉學(xué)雜志,2005,21(10):716-718.

［8］趙健英,黃磷,欒永,等.異丙酚對肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用［J］.中華麻醉學(xué)雜志,2002,22(2):94-96.