摘要幽門螺桿菌（Hp）作為胃炎、胃十二指潰瘍、胃癌、胃淋巴瘤等疾病的重要致病因素已被廣泛確認(rèn)。作為非侵入性細(xì)菌，它引起炎癥及免疫應(yīng)答以及進(jìn)一步的病理損害是重要的致病機(jī)理，而Hp菌苗也存在免疫保護(hù)和免疫損傷兩方面的作用。本文就Hp菌苗與宿主免疫等相關(guān)問題作一簡(jiǎn)要綜述，目的在于為完善Hp菌苗的研究提供理論基礎(chǔ)。

幽門螺桿菌（Hp）作為慢性胃炎、胃十二指腸潰瘍、胃癌、胃淋巴瘤發(fā)生發(fā)展中的重要致病因素已為大量研究證實(shí)，其致病機(jī)理包括Hp的尿素酶、蛋白酶、脂酶、磷脂酶A、趨化因子及細(xì)胞空泡毒素（VacA）等直接致病，也包括Hp引起宿主的炎癥及免疫應(yīng)答致病[1]。本文主要就Hp菌苗與宿主的免疫應(yīng)答及相關(guān)問題的研究進(jìn)展作一簡(jiǎn)要綜述。

hp與菌苗研究

Hp感染是世界范圍的，而且是終身感染。新近研究顯示，口服菌苗可誘導(dǎo)針對(duì)Hp感染的保護(hù)性免疫，并且菌苗可治愈已存在的HP感染性病變，從而表明用菌苗治療Hp感染是可行的[2]。用霍亂毒素（CT）B亞單位或大腸桿菌不耐熱毒素（LT）作粘膜佐劑的Hp抗原誘導(dǎo)免疫已獲成功，即Hp對(duì)宿主自然免疫應(yīng)答的抵抗能被瓦解。成功用作Hp菌苗的抗原有Hp細(xì)胞裂解產(chǎn)物、尿素酶、VacA、熱休克蛋白和過氧化物酶等。免疫學(xué)研究及動(dòng)物模型也證實(shí)口服免疫不僅可以預(yù)防而且能治愈Hp感染，并且鼻內(nèi)及結(jié)腸免疫均可引起胃粘膜的免疫保護(hù)[3]。新近Ghiara等用重組VacA或細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白（CagA）作抗原，減毒的大腸桿菌LT突變體作為佐劑，成功地根除了小鼠模型中的慢性Hp感染，并證明該治療性菌苗對(duì)Hp再感染有同樣有效的免疫防御作用[4]?？傊瓾p作為非侵入性細(xì)菌，定居于胃粘膜表面，可引起機(jī)體的免疫及炎癥反應(yīng)。面對(duì)機(jī)體強(qiáng)大的免疫應(yīng)答，Hp仍能繼續(xù)生存并致病，其機(jī)理尚不清楚。免疫效應(yīng)分子必須進(jìn)入胃粘膜表面，才能中和和殺傷Hp。目前認(rèn)為該作用與胃分泌液中出現(xiàn)抗Hp特異性分泌型IgA抗體相關(guān)。這種抗體也在感染的動(dòng)物及人體中出現(xiàn)，所以細(xì)胞免疫效應(yīng)在防御或治療Hp感染中的作用仍需進(jìn)一步研究。另外，了解Hp逃逸免疫效應(yīng)分子的機(jī)理以及Hp菌苗誘導(dǎo)宿主的免疫保護(hù)及免疫損傷的機(jī)理，將為更有效的菌苗篩選提供可能。最近報(bào)道對(duì)Hp感染的易感性與小鼠中主要組織相容性復(fù)合體（MHC）位點(diǎn)直接相關(guān)，這是否適用于菌苗設(shè)計(jì)也需進(jìn)一步研究證實(shí)[5]。

hp與宿主免疫

Hp誘導(dǎo)宿主免疫應(yīng)答的途徑，目前認(rèn)為包括Hp可溶性產(chǎn)物的被動(dòng)吸收，上皮細(xì)胞直接內(nèi)吞細(xì)菌抗原，抗原通過被破壞的胃上皮進(jìn)入組織激發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答[6]。粘膜對(duì)不同Hp免疫應(yīng)答的差異是決定病變后果的重要因素。其中包括B細(xì)胞及相應(yīng)的IgG、IgM的體液免疫應(yīng)答，以及在Hp感染相關(guān)慢性活動(dòng)性胃炎病變局部出現(xiàn)T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的細(xì)胞免疫應(yīng)答[1]。

摘要對(duì)全菌體滅活菌苗（WCV）防治傳染病已進(jìn)行了廣泛的研究，WCV是預(yù)防疾病的一種經(jīng)濟(jì)、安全、有效的方法，但WCV的缺點(diǎn)是，胃腸外免疫能引起不良反應(yīng)，而口服免疫常需大劑量，縣免疫力短暫。近期研究表明，能提高WCV免疫原性和增強(qiáng)口服免疫應(yīng)答的新方法極有希望提高這些菌苗的效力。

動(dòng)物模型和人研究顯示，WCV口服或胃腸外免疫均具有免疫原性，也具有預(yù)防呼吸道、腸道和全身性細(xì)菌感染的效力。雖然僅百日咳WCV被普遍應(yīng)用，但其他WCV也具有普遍應(yīng)用的潛力。本文報(bào)道了WCV研制的進(jìn)展，重點(diǎn)闡述了制備更優(yōu)質(zhì)菌苗制劑的可能性。

腸道菌苗

空腸彎曲菌

空腸彎曲菌是引起胃腸炎的主要原因，估計(jì)全世界每年發(fā)病4億多例。某些地區(qū)的罹患率高達(dá)2.5萬~4萬/10萬。這種病原菌感染的主要后遺癥是Guillain-Rarré綜合征。一種傳統(tǒng)的空腸彎曲菌菌苗已在動(dòng)物中進(jìn)行試驗(yàn)，這種菌苗（福馬林和加熱共同滅活，3劑）通過口飼給予小鼠，每劑間隔2天，并以大腸桿菌不耐熱腸毒素（LT，25μg）為佐劑。免疫后4周在口服攻擊模型中評(píng)估各種劑量的含和不含佐劑菌苗（105、107或109個(gè)細(xì)菌）的效力。用活空腸彎曲菌（108個(gè)細(xì)菌，100×半數(shù)定居量）攻擊動(dòng)物，并監(jiān)測(cè)排菌情況。最大劑量菌苗和較小劑量含LT菌苗能預(yù)防定居，含或不含佐劑的菌苗均能預(yù)防細(xì)菌全身播散。兩種配方的菌苗接種小鼠后，均檢得空腸彎曲菌特異性血清IgA和IgG升高，但僅在含LT菌苗免疫小鼠中檢得腸道IgA。

這種菌苗還在恒河猴中進(jìn)行試驗(yàn)。猴子間隔14天接種2劑1010空腸彎曲菌菌苗加0.5~1000μgLT，未見不良反應(yīng)。部分動(dòng)物在6周時(shí)接受1劑加強(qiáng)免疫。不管菌苗（福馬林滅活）是否含LT，接種者對(duì)空腸彎曲菌的特異性T細(xì)胞應(yīng)答均增強(qiáng)。由于初免程序后已獲得最大應(yīng)答，因此無需加強(qiáng)免疫。免疫后7天，IgA分泌細(xì)胞在含LT菌苗接種動(dòng)物中增多。

摘要幽門螺桿菌（Hp）作為胃炎、胃十二指潰瘍、胃癌、胃淋巴瘤等疾病的重要致病因素已被廣泛確認(rèn)。作為非侵入性細(xì)菌，它引起炎癥及免疫應(yīng)答以及進(jìn)一步的病理損害是重要的致病機(jī)理，而Hp菌苗也存在免疫保護(hù)和免疫損傷兩方面的作用。本文就Hp菌苗與宿主免疫等相關(guān)問題作一簡(jiǎn)要綜述，目的在于為完善Hp菌苗的研究提供理論基礎(chǔ)。

幽門螺桿菌（Hp）作為慢性胃炎、胃十二指腸潰瘍、胃癌、胃淋巴瘤發(fā)生發(fā)展中的重要致病因素已為大量研究證實(shí)，其致病機(jī)理包括Hp的尿素酶、蛋白酶、脂酶、磷脂酶A、趨化因子及細(xì)胞空泡毒素（VacA）等直接致病，也包括Hp引起宿主的炎癥及免疫應(yīng)答致病[1]。本文主要就Hp菌苗與宿主的免疫應(yīng)答及相關(guān)問題的研究進(jìn)展作一簡(jiǎn)要綜述。

hp與菌苗研究

Hp感染是世界范圍的，而且是終身感染。新近研究顯示，口服菌苗可誘導(dǎo)針對(duì)Hp感染的保護(hù)性免疫，并且菌苗可治愈已存在的HP感染性病變，從而表明用菌苗治療Hp感染是可行的[2]。用霍亂毒素（CT）B亞單位或大腸桿菌不耐熱毒素（LT）作粘膜佐劑的Hp抗原誘導(dǎo)免疫已獲成功，即Hp對(duì)宿主自然免疫應(yīng)答的抵抗能被瓦解。成功用作Hp菌苗的抗原有Hp細(xì)胞裂解產(chǎn)物、尿素酶、VacA、熱休克蛋白和過氧化物酶等。免疫學(xué)研究及動(dòng)物模型也證實(shí)口服免疫不僅可以預(yù)防而且能治愈Hp感染，并且鼻內(nèi)及結(jié)腸免疫均可引起胃粘膜的免疫保護(hù)[3]。新近Ghiara等用重組VacA或細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白（CagA）作抗原，減毒的大腸桿菌LT突變體作為佐劑，成功地根除了小鼠模型中的慢性Hp感染，并證明該治療性菌苗對(duì)Hp再感染有同樣有效的免疫防御作用[4]。總之Hp作為非侵入性細(xì)菌，定居于胃粘膜表面，可引起機(jī)體的免疫及炎癥反應(yīng)。面對(duì)機(jī)體強(qiáng)大的免疫應(yīng)答，Hp仍能繼續(xù)生存并致病，其機(jī)理尚不清楚。免疫效應(yīng)分子必須進(jìn)入胃粘膜表面，才能中和和殺傷Hp。目前認(rèn)為該作用與胃分泌液中出現(xiàn)抗Hp特異性分泌型IgA抗體相關(guān)。這種抗體也在感染的動(dòng)物及人體中出現(xiàn)，所以細(xì)胞免疫效應(yīng)在防御或治療Hp感染中的作用仍需進(jìn)一步研究。另外，了解Hp逃逸免疫效應(yīng)分子的機(jī)理以及Hp菌苗誘導(dǎo)宿主的免疫保護(hù)及免疫損傷的機(jī)理，將為更有效的菌苗篩選提供可能。最近報(bào)道對(duì)Hp感染的易感性與小鼠中主要組織相容性復(fù)合體（MHC）位點(diǎn)直接相關(guān)，這是否適用于菌苗設(shè)計(jì)也需進(jìn)一步研究證實(shí)[5]。

hp與宿主免疫

Hp誘導(dǎo)宿主免疫應(yīng)答的途徑，目前認(rèn)為包括Hp可溶性產(chǎn)物的被動(dòng)吸收，上皮細(xì)胞直接內(nèi)吞細(xì)菌抗原，抗原通過被破壞的胃上皮進(jìn)入組織激發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答[6]。粘膜對(duì)不同Hp免疫應(yīng)答的差異是決定病變后果的重要因素。其中包括B細(xì)胞及相應(yīng)的IgG、IgM的體液免疫應(yīng)答，以及在Hp感染相關(guān)慢性活動(dòng)性胃炎病變局部出現(xiàn)T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)的細(xì)胞免疫應(yīng)答[1]。

1試管苗保存

從田間種植的種質(zhì)資源選擇具有典型品種特性的健康植株（從形成壯苗到盛花期均可以?。?，取1.5～2.0cm有腋芽的莖段7～10個(gè)，用清水沖洗1～2h，然后置于超凈工作臺(tái)上，用1‰的升汞水溶液浸泡8～10min，若莖段較粗則增加至12min左右。用滅菌的鑷子將莖段分次取出，每次取出1～2個(gè)，在滅菌水中徹底清洗3～4次，放入普通的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)（特別注意每次從升汞中取莖段要用無菌的鑷子）。分次取出莖段可以使莖段在升汞中的處理時(shí)間有一個(gè)梯度，保證至少有1個(gè)已經(jīng)成為無菌苗。由于種質(zhì)資源數(shù)量比較多，這樣做就會(huì)大大降低工作量，提高工作效率。將處理好的莖段放在組培苗生長(zhǎng)間，補(bǔ)充光照。保持生長(zhǎng)間的溫度在20～25℃。無菌苗形成過程中，天天進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)污染苗后挑出并進(jìn)行高壓滅菌，以防備造成試管苗生長(zhǎng)間的整體污染。無菌苗形成后，在無菌條件下，將無菌苗繼續(xù)在普通MS培養(yǎng)基上擴(kuò)繁1次，每1～2個(gè)莖段放入含3%的甘露醇MS培養(yǎng)基的試管中進(jìn)行保存，一般每1個(gè)資源至少要保存3管，這樣取用非常方便?？刂品N質(zhì)資源保存庫的溫度在15～20℃，每周對(duì)資源庫進(jìn)熏蒸消毒1次，防止試管苗二次污染。在這種條件下，每1代試管苗可以保存120～150d，在此期間，要定期檢查試管苗的情況。由于受到了甘露醇及繼代過多或是環(huán)境因素的影響，有些資源早期就會(huì)玻璃化，一旦發(fā)生這種情況，應(yīng)立即將玻璃化的試管苗轉(zhuǎn)移到普通的MS培養(yǎng)基上，20～30d就可以形成新的試管苗繼續(xù)保存。

2田間種植保存

以試管苗保存約2年，試管苗會(huì)表現(xiàn)出明顯的退化，例如整體的玻璃化，生長(zhǎng)極緩，甚至在繼代后不能形成新的試管苗，這就需要進(jìn)行1次田間種植以重新獲得試管苗保存。在當(dāng)?shù)伛R鈴薯播種時(shí)間的前1個(gè)月，將已退化的試管苗種質(zhì)資源轉(zhuǎn)入普通培養(yǎng)基中，擴(kuò)繁1代15～20株形成比較壯的組培苗，定植在育苗缽，置于溫室或網(wǎng)棚中，每份資源至少擴(kuò)繁15株以上，溫室或網(wǎng)棚中的管理與微型薯溫室生產(chǎn)相同。待植株根系較發(fā)達(dá)長(zhǎng)出7～10片葉時(shí)，將其移入室外進(jìn)行煉苗5～10d，然后帶土移入大田。這種移栽苗因長(zhǎng)勢(shì)較弱，所以要求大田土壤疏松，灌溉條件好，肥料充足，并要嚴(yán)防人畜破壞。大田移栽時(shí)，每個(gè)資源選到10株壯苗移入大田，每個(gè)資源種植1行，株行距為30cm×65cm，剩余的不要丟棄，可以作補(bǔ)苗用。田間管理要做到早除草、早培土、早防病，加強(qiáng)肥料的充足供給，花期前可追施1次壯苗肥，壯苗肥為尿素，施用量控制在75～105kg/hm2。并可以以30倍磷酸二氫鉀水溶液作為葉面肥進(jìn)行噴施，定期進(jìn)行病蟲害防治。植株健壯后，以具有典型品種特性的健康植株作為試管苗的來源。

在馬鈴薯種質(zhì)資源的保存過程中，田間種植與試管苗保存是相互結(jié)合、密不可分的，是一個(gè)循環(huán)往復(fù)的過程。由于種質(zhì)資源少則幾百份，多則幾千份，所以種質(zhì)資源可以多點(diǎn)保存，也可以分期分批保存，每年種植一部分，試管保存一部分，來年可以反過來，這樣可以經(jīng)濟(jì)合理地搭配人力和物力。

參考文獻(xiàn)

1試管苗保存

從田間種植的種質(zhì)資源選擇具有典型品種特性的健康植株（從形成壯苗到盛花期均可以?。?.5～2.0cm有腋芽的莖段7～10個(gè)，用清水沖洗1～2h，然后置于超凈工作臺(tái)上，用1‰的升汞水溶液浸泡8～10min，若莖段較粗則增加至12min左右。用滅菌的鑷子將莖段分次取出，每次取出1～2個(gè)，在滅菌水中徹底清洗3～4次，放入普通的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)（特別注意每次從升汞中取莖段要用無菌的鑷子）。分次取出莖段可以使莖段在升汞中的處理時(shí)間有一個(gè)梯度，保證至少有1個(gè)已經(jīng)成為無菌苗。由于種質(zhì)資源數(shù)量比較多，這樣做就會(huì)大大降低工作量，提高工作效率。將處理好的莖段放在組培苗生長(zhǎng)間，補(bǔ)充光照。保持生長(zhǎng)間的溫度在20～25℃。無菌苗形成過程中，天天進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)污染苗后挑出并進(jìn)行高壓滅菌，以防備造成試管苗生長(zhǎng)間的整體污染。無菌苗形成后，在無菌條件下，將無菌苗繼續(xù)在普通MS培養(yǎng)基上擴(kuò)繁1次，每1～2個(gè)莖段放入含3%的甘露醇MS培養(yǎng)基的試管中進(jìn)行保存，一般每1個(gè)資源至少要保存3管，這樣取用非常方便?？刂品N質(zhì)資源保存庫的溫度在15～20℃，每周對(duì)資源庫進(jìn)熏蒸消毒1次，防止試管苗二次污染。在這種條件下，每1代試管苗可以保存120～150d，在此期間，要定期檢查試管苗的情況。由于受到了甘露醇及繼代過多或是環(huán)境因素的影響，有些資源早期就會(huì)玻璃化，一旦發(fā)生這種情況，應(yīng)立即將玻璃化的試管苗轉(zhuǎn)移到普通的MS培養(yǎng)基上，20～30d就可以形成新的試管苗繼續(xù)保存。

2田間種植保存

以試管苗保存約2年，試管苗會(huì)表現(xiàn)出明顯的退化，例如整體的玻璃化，生長(zhǎng)極緩，甚至在繼代后不能形成新的試管苗，這就需要進(jìn)行1次田間種植以重新獲得試管苗保存。在當(dāng)?shù)伛R鈴薯播種時(shí)間的前1個(gè)月，將已退化的試管苗種質(zhì)資源轉(zhuǎn)入普通培養(yǎng)基中，擴(kuò)繁1代15～20株形成比較壯的組培苗，定植在育苗缽，置于溫室或網(wǎng)棚中，每份資源至少擴(kuò)繁15株以上，溫室或網(wǎng)棚中的管理與微型薯溫室生產(chǎn)相同。待植株根系較發(fā)達(dá)長(zhǎng)出7～10片葉時(shí)，將其移入室外進(jìn)行煉苗5～10d，然后帶土移入大田。這種移栽苗因長(zhǎng)勢(shì)較弱，所以要求大田土壤疏松，灌溉條件好，肥料充足，并要嚴(yán)防人畜破壞。大田移栽時(shí)，每個(gè)資源選到10株壯苗移入大田，每個(gè)資源種植1行，株行距為30cm×65cm，剩余的不要丟棄，可以作補(bǔ)苗用。田間管理要做到早除草、早培土、早防病，加強(qiáng)肥料的充足供給，花期前可追施1次壯苗肥，壯苗肥為尿素，施用量控制在75～105kg/hm2。并可以以30倍磷酸二氫鉀水溶液作為葉面肥進(jìn)行噴施，定期進(jìn)行病蟲害防治。植株健壯后，以具有典型品種特性的健康植株作為試管苗的來源。

在馬鈴薯種質(zhì)資源的保存過程中，田間種植與試管苗保存是相互結(jié)合、密不可分的，是一個(gè)循環(huán)往復(fù)的過程。由于種質(zhì)資源少則幾百份，多則幾千份，所以種質(zhì)資源可以多點(diǎn)保存，也可以分期分批保存，每年種植一部分，試管保存一部分，來年可以反過來，這樣可以經(jīng)濟(jì)合理地搭配人力和物力。

參考文獻(xiàn)

1試管苗保存

從田間種植的種質(zhì)資源選擇具有典型品種特性的健康植株（從形成壯苗到盛花期均可以?。?.5～2.0cm有腋芽的莖段7～10個(gè)，用清水沖洗1～2h，然后置于超凈工作臺(tái)上，用1‰的升汞水溶液浸泡8～10min，若莖段較粗則增加至12min左右。用滅菌的鑷子將莖段分次取出，每次取出1～2個(gè)，在滅菌水中徹底清洗3～4次，放入普通的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)（特別注意每次從升汞中取莖段要用無菌的鑷子）。分次取出莖段可以使莖段在升汞中的處理時(shí)間有一個(gè)梯度，保證至少有1個(gè)已經(jīng)成為無菌苗。由于種質(zhì)資源數(shù)量比較多，這樣做就會(huì)大大降低工作量，提高工作效率。將處理好的莖段放在組培苗生長(zhǎng)間，補(bǔ)充光照。保持生長(zhǎng)間的溫度在20～25℃。無菌苗形成過程中，天天進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)污染苗后挑出并進(jìn)行高壓滅菌，以防備造成試管苗生長(zhǎng)間的整體污染。無菌苗形成后，在無菌條件下，將無菌苗繼續(xù)在普通MS培養(yǎng)基上擴(kuò)繁1次，每1～2個(gè)莖段放入含3%的甘露醇MS培養(yǎng)基的試管中進(jìn)行保存，一般每1個(gè)資源至少要保存3管，這樣取用非常方便?？刂品N質(zhì)資源保存庫的溫度在15～20℃，每周對(duì)資源庫進(jìn)熏蒸消毒1次，防止試管苗二次污染。在這種條件下，每1代試管苗可以保存120～150d，在此期間，要定期檢查試管苗的情況。由于受到了甘露醇及繼代過多或是環(huán)境因素的影響，有些資源早期就會(huì)玻璃化，一旦發(fā)生這種情況，應(yīng)立即將玻璃化的試管苗轉(zhuǎn)移到普通的MS培養(yǎng)基上，20～30d就可以形成新的試管苗繼續(xù)保存。

2田間種植保存

以試管苗保存約2年，試管苗會(huì)表現(xiàn)出明顯的退化，例如整體的玻璃化，生長(zhǎng)極緩，甚至在繼代后不能形成新的試管苗，這就需要進(jìn)行1次田間種植以重新獲得試管苗保存。在當(dāng)?shù)伛R鈴薯播種時(shí)間的前1個(gè)月，將已退化的試管苗種質(zhì)資源轉(zhuǎn)入普通培養(yǎng)基中，擴(kuò)繁1代15～20株形成比較壯的組培苗，定植在育苗缽，置于溫室或網(wǎng)棚中，每份資源至少擴(kuò)繁15株以上，溫室或網(wǎng)棚中的管理與微型薯溫室生產(chǎn)相同。待植株根系較發(fā)達(dá)長(zhǎng)出7～10片葉時(shí)，將其移入室外進(jìn)行煉苗5～10d，然后帶土移入大田。這種移栽苗因長(zhǎng)勢(shì)較弱，所以要求大田土壤疏松，灌溉條件好，肥料充足，并要嚴(yán)防人畜破壞。大田移栽時(shí)，每個(gè)資源選到10株壯苗移入大田，每個(gè)資源種植1行，株行距為30cm×65cm，剩余的不要丟棄，可以作補(bǔ)苗用。田間管理要做到早除草、早培土、早防病，加強(qiáng)肥料的充足供給，花期前可追施1次壯苗肥，壯苗肥為尿素，施用量控制在75～105kg/hm2。并可以以30倍磷酸二氫鉀水溶液作為葉面肥進(jìn)行噴施，定期進(jìn)行病蟲害防治。植株健壯后，以具有典型品種特性的健康植株作為試管苗的來源。在馬鈴薯種質(zhì)資源的保存過程中，田間種植與試管苗保存是相互結(jié)合、密不可分的，是一個(gè)循環(huán)往復(fù)的過程。由于種質(zhì)資源少則幾百份，多則幾千份，所以種質(zhì)資源可以多點(diǎn)保存，也可以分期分批保存，每年種植一部分，試管保存一部分，來年可以反過來，這樣可以經(jīng)濟(jì)合理地搭配人力和物力。

論文關(guān)鍵詞馬鈴薯；種質(zhì)資源；保存

論文摘要馬鈴薯種質(zhì)資源非常豐富，要科學(xué)合理的利用馬鈴薯種質(zhì)資源，保存是一個(gè)關(guān)鍵性環(huán)節(jié)。就馬鈴薯種質(zhì)資源的2種保存方法，即試管苗保存方法和田間種植保存方法進(jìn)行了探討，旨在為馬鈴薯種質(zhì)資源保存工作提供參考。

第一條根據(jù)*第二十一條、第二十二條規(guī)定，特制訂本辦法。

第二條新生物制品系指我國(guó)未生產(chǎn)過的制品和未經(jīng)批準(zhǔn)生產(chǎn)的制品。已批準(zhǔn)生產(chǎn)的制品，凡有重大的生產(chǎn)工藝改革或改換用于制備活疫苗、活菌苗的毒種或菌種亦屬本辦法管理范圍。

第三條凡在國(guó)內(nèi)進(jìn)行新生物制品研究、生產(chǎn)、檢定、經(jīng)營(yíng)、使用、監(jiān)督管理的單位和個(gè)人都必須遵守本辦法。

第二章新生物制品的分類和命名

第四條新生物制品按生物制品管理要求分以下幾類：

第一類：減毒的活菌苗、活疫苗。

摘要：在“雙一流”建設(shè)的重任下，為培養(yǎng)我國(guó)生物制藥產(chǎn)業(yè)的高層次人才，對(duì)東北林業(yè)大學(xué)生物制藥原理與技術(shù)課程進(jìn)行教學(xué)改革，優(yōu)化課程內(nèi)容體系，選擇智慧型教學(xué)平臺(tái)“雨課堂”，完善課程評(píng)價(jià)體系，并在課程教學(xué)過程中立德樹人，灌輸“防勝于治”的理念，讓同學(xué)們把愛惜身體，敬畏生命作為一生的追求。

關(guān)鍵詞：雙一流；生物制藥原理與技術(shù)；教學(xué)改革；雨課堂

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的持續(xù)增長(zhǎng)以及人口老齡化程度的加深，人們對(duì)健康的追求日益增加，拉動(dòng)了市場(chǎng)對(duì)醫(yī)藥產(chǎn)品的需求，特別是生物藥品，我國(guó)已是全球最大的生物藥品消費(fèi)市場(chǎng)。癌癥、糖尿病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和高血壓等病的發(fā)病率不斷升高，生物藥品在防治這些疾病方面有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，其藥理活性可達(dá)普通藥物的幾十倍，針對(duì)性強(qiáng)，毒副作用相對(duì)較小[1]。自2013年以來，我國(guó)生物藥品制造研發(fā)人員折合工時(shí)不斷增加。但是，目前我國(guó)生物制藥產(chǎn)業(yè)緊缺高層次專業(yè)人才，特別是擁有創(chuàng)新能力的拔尖人才[2]。高層次人才缺失是制約我國(guó)生物制藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸。中國(guó)特色“雙一流”建設(shè)的重任是培養(yǎng)拔尖創(chuàng)新人才，嚴(yán)把本科教育質(zhì)量關(guān)。抓好本科教育，是推動(dòng)高等教育內(nèi)涵式發(fā)展的一個(gè)重要舉措。“雙一流”建設(shè)政策在技術(shù)核心上的突破，是堅(jiān)持科教融合、產(chǎn)教融合，推進(jìn)學(xué)科、專業(yè)、課程一體化建設(shè)[3]。在學(xué)科、專業(yè)和課程的關(guān)系中，課程是基石，來自于學(xué)科，是人才培養(yǎng)模式的核心要素[4]。在“雙一流”建設(shè)洪流中，要充分發(fā)揮大學(xué)教師的獨(dú)特作用，從生物制藥前沿性的學(xué)科知識(shí)中選擇最有價(jià)值的部分納入課程，構(gòu)建系統(tǒng)、科學(xué)、前沿的生物制藥原理與技術(shù)課程體系，再把這些課程知識(shí)有效地傳授給學(xué)生，培養(yǎng)出勝任我國(guó)生物制藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的具有創(chuàng)新能力的實(shí)用型和復(fù)合型人才。

一、生物制藥原理與技術(shù)課程改革的必要性

生物制藥是一門融合生物學(xué)、免疫學(xué)和藥學(xué)的多學(xué)科交叉的新興學(xué)科，是當(dāng)今醫(yī)藥發(fā)展方向中最重要及活躍的領(lǐng)域，生物醫(yī)藥制造行業(yè)是近年及未來醫(yī)藥工業(yè)持續(xù)高速增長(zhǎng)的領(lǐng)頭羊[5]。國(guó)家發(fā)展改革委員會(huì)根據(jù)《中華人民共和國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展第十三個(gè)五年規(guī)劃綱要》和《“十三五”國(guó)家戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃》，為加快推動(dòng)生物產(chǎn)業(yè)成為國(guó)民經(jīng)濟(jì)的支柱產(chǎn)業(yè)，特別編制了《“十三五”生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃》，其中，構(gòu)建生物醫(yī)藥新體系是重點(diǎn)發(fā)展的領(lǐng)域，重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)把握精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)模式，推動(dòng)藥物研發(fā)革命的趨勢(shì)性變化，立足基因技術(shù)和細(xì)胞工程等先進(jìn)技術(shù)帶來的革命性轉(zhuǎn)變，加快新藥研發(fā)速度，提升藥物品質(zhì)，更好滿足臨床用藥和產(chǎn)業(yè)向中高端發(fā)展的需求。國(guó)家對(duì)生物醫(yī)藥重視起來，因此，也對(duì)相關(guān)專業(yè)和課程的設(shè)置提出了更高的要求。生物制藥原理與技術(shù)課程是我院生物技術(shù)專業(yè)的專業(yè)核心課程，生物科學(xué)專業(yè)及國(guó)家生命科學(xué)與技術(shù)人才培養(yǎng)基地班的專業(yè)選修課程。本課程是我院開設(shè)的唯一一門與生物醫(yī)藥相關(guān)的課程，是學(xué)生打開生物醫(yī)藥神奇作用的窗口，是學(xué)生學(xué)習(xí)生物醫(yī)藥相關(guān)知識(shí)的重要載體。為此，積極進(jìn)行生物制藥原理與技術(shù)的課程改革，夯實(shí)學(xué)生的生物制藥基礎(chǔ)知識(shí)和基本技能，拓展學(xué)生的視野，增強(qiáng)學(xué)生對(duì)前沿知識(shí)和發(fā)展動(dòng)態(tài)的了解，引導(dǎo)學(xué)生把所學(xué)到的知識(shí)融會(huì)貫通，深度思考如何將生物制藥基本原理應(yīng)用到生產(chǎn)實(shí)踐中，并能夠分析和解決生產(chǎn)實(shí)際中出現(xiàn)的問題，是我們?cè)谏镏扑幵砼c技術(shù)課程教學(xué)中所應(yīng)追求的目標(biāo)。

二、生物制藥原理與技術(shù)教學(xué)內(nèi)容的改革

哮喘患兒的氣道常持續(xù)存在過敏性炎癥和氣道高反應(yīng)性，即使接觸到一些對(duì)健康兒童無害的輕微刺激亦會(huì)激發(fā)哮喘發(fā)作，而隨著哮喘的反復(fù)發(fā)作，上述病變逐步加重，最終導(dǎo)致氣道重塑，形成不可逆的病變，貽害終身。

因此，哮喘的預(yù)防非常重要。預(yù)防措施包括非藥物預(yù)防、藥物預(yù)防和開展宣教活動(dòng)。

一、兒童支氣管哮喘的非藥物預(yù)防

控制屋塵螨滋生①使用防螨織品制成的床上用品或?qū)⒋踩?、枕頭和棉被裝入不滲透螨的封套內(nèi)。②每周用熱清水(55～60℃)洗被褥、床單、毛毯和其他床上用品，在陽光下曬干或用烘干器烤干。③不使用地毯。④用塑料、皮革或簡(jiǎn)單不著色的木材制成家具，不用纖維填充的家具。⑤用帶濾網(wǎng)的吸塵器清除地毯上的塵螨，真空吸塵器應(yīng)保存在相對(duì)密封的櫥柜中，使用高效粒子空氣過濾器或雙層厚度的濾紙進(jìn)行過濾。⑥小兒玩兒的軟型(布制)尤其帶絨毛的玩具應(yīng)摒棄或每周將玩具先冷凍再用水煮沸1次。⑦空調(diào)注意保持清潔，用祛濕器使室內(nèi)相對(duì)濕度維持在＜50%。⑧用化學(xué)除螨劑。⑨用易洗材料的面料制成窗簾。

消滅蟑螂定期徹底打掃房間，保持清潔，用噴霧殺蟲劑消滅蟑螂。噴射殺蟲劑時(shí)，確?；純翰辉谑覂?nèi)，以免吸入帶有刺激性氣霧劑而誘發(fā)哮喘。清除真菌經(jīng)常打掃所有潮濕區(qū)域，祛除發(fā)霉物品，降低室內(nèi)濕度，室內(nèi)用除濕器或空調(diào)，保持相對(duì)濕度＜50%。不養(yǎng)寵物不養(yǎng)貓狗等寵物，若患兒異?？釔鄄辉父钌釀t寵物不能留在臥室內(nèi)，并應(yīng)每周洗澡?？刂剖覂?nèi)空氣污染最重要的措施是避免被動(dòng)或禁止主動(dòng)吸煙，患兒雙親應(yīng)戒煙。廚房?jī)?nèi)應(yīng)裝排油煙機(jī)，經(jīng)常維修燃燒設(shè)備，不用木材燒火，煤爐應(yīng)遠(yuǎn)離臥室。

避免與室外變應(yīng)原及污染物接觸①當(dāng)花粉和真菌孢子在空氣中飄揚(yáng)的季節(jié)盡量少開門窗，呆在室內(nèi)，有條件者用空調(diào)或空氣過濾器，以減少變應(yīng)原的吸入。②空氣污染嚴(yán)重的區(qū)域，患兒應(yīng)減少在寒冷、干燥時(shí)期做戶外活動(dòng)。③減少或避免與灰塵、濃煙和油漆接觸。④避免與呼吸道感染患者接觸。⑤盡可能在潔凈的室內(nèi)生活，外出前先吸短效支氣管擴(kuò)張劑以預(yù)防哮喘發(fā)作。

摘要：目的研究外界培養(yǎng)條件的變化對(duì)紅花離體培養(yǎng)過程中不同發(fā)育階段培養(yǎng)物的影響。方法以紅花種子誘導(dǎo)的無菌苗子葉為外植體，分別接種至含有不同碳氮源、不同PH值、不同溫度、不同濕度和不同光照的培養(yǎng)基中，觀察其生長(zhǎng)情況。結(jié)果通過實(shí)驗(yàn)篩選出蔗糖濃度為3%，KNO3濃度為MS培養(yǎng)基中KNO3濃度的2倍，最佳pH為6.2，紅花離體培養(yǎng)體系在24℃，30%的相對(duì)濕度，16h光照，8h黑暗交替培養(yǎng)的條件下，最利于紅花的分化。結(jié)論3%的蔗糖作為碳源，最適合愈傷組織的生長(zhǎng);2倍于MS培養(yǎng)基中的KNO3含量有利于愈傷組織的生長(zhǎng)和不定芽的分化;pH值為6.2時(shí)，最適宜紅花不同階段培養(yǎng)物的生長(zhǎng);24℃為紅花離體培養(yǎng)的最適溫度，生根時(shí)的溫度為21℃較好;濕度為50%時(shí)，適于愈傷組織鮮重積累，30%的濕度適于不定芽分化和生根;黑暗培養(yǎng)利于鮮重積累，16h光照，8h黑暗交替培養(yǎng)有利于不定芽的分化，8h光照，16h黑暗交替培養(yǎng)有利于生根。

關(guān)鍵詞：紅花愈傷組織;不定芽;蔗糖;氮源;pH值;溫度;濕度;光照

紅花為菊科一年或二年生雙子葉草本植物，喜溫暖、干燥氣候，抗寒性強(qiáng)，耐鹽堿。紅花全身是寶，花、籽粒、莖葉、秸稈等均可綜合利用，是一種集藥材、油料、染料為一體的特種經(jīng)濟(jì)作物。由于紅花無性快繁體系很難建立，并且目前國(guó)內(nèi)對(duì)紅花離體培養(yǎng)的研究很少，因此本文通過改變不同的培養(yǎng)條件來研究紅花無性快繁體系的建立，以期有利于紅花的資源保護(hù)、擴(kuò)大繁殖和進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

一、材料與方法

1.1材料紅花種子由新疆塔城種子公司提供;實(shí)驗(yàn)以采收后1年后的紅花種子不同日齡無菌苗子葉作為外植體。

1.2方法紅花種子，經(jīng)70%酒精清洗30s，0.1%升汞表面滅菌10min,無菌水洗4～5次，接種到種子萌發(fā)培養(yǎng)基:1/2MS+1.5%蔗糖+1mg·L-1GA中，取接種7日齡的紅花無菌苗子葉作為外植體,分別接種至含有不同碳氮源、不同pH值、不同溫度、不同濕度和不同光照的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基和中;培養(yǎng)一段時(shí)間后，測(cè)定愈傷組織的鮮重增長(zhǎng)量。