【摘要】目的觀察甲基強(qiáng)的松龍（MP）對(duì)深低溫停循環(huán)（DHCA）大鼠腦N甲基D天門冬氨酸受體R1（NMDAR1）表達(dá)的影響，探討MP對(duì)DHCA大鼠腦保護(hù)作用的機(jī)制。方法制作大鼠DHCA模型。雄性SD大鼠175只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、DHCA模型組和MP處理組。觀察DHCA60min，再灌注2、6、12h及1、2、3、7d時(shí)NMDAR1蛋白表達(dá)的變化以及腦組織超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果免疫組化結(jié)果顯示，DHCA模型組和MP處理組大鼠NMDAR1蛋白表達(dá)均升高，于1d到達(dá)高峰，后逐漸降低，于再灌注7d恢復(fù)至正常水平。MP處理組大鼠再灌注后2、6、12h，1、2d5個(gè)時(shí)間點(diǎn)NMDAR1表達(dá)明顯低于模型組（P<0.01）。腦組織超微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)MP能抑制DHCA腦細(xì)胞凋亡。結(jié)論MP對(duì)DHCA大鼠腦組織具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制之一可能是與抑制NMDAR1蛋白表達(dá)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】深低溫停循環(huán);甲基強(qiáng)的松龍;N-甲基-D-天門冬氨酸受體R1;腦保護(hù);蛋白表達(dá)

深低溫停循環(huán)（deephypothermiccirculatoryar-rest，DHCA）技術(shù)自上世紀(jì)50年代誕生以來(lái)，已廣泛應(yīng)用于復(fù)雜和嚴(yán)重的先天性心臟病及大血管手術(shù)中，但其可能并發(fā)腦損傷的問(wèn)題尚未得到較好解決，DH-CA術(shù)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)病率高達(dá)4%～25%。DHCA手術(shù)后患者近期不同程度出現(xiàn)手足舞蹈癥、抽搐，遠(yuǎn)期出現(xiàn)認(rèn)知障礙，兒童出現(xiàn)智力發(fā)育障礙等神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥［1］。DHCA后腦組織缺血缺氧導(dǎo)致突觸前興奮性氨基酸（EAA）大量釋放和再攝取減少，從而激活突觸后N甲基D天門冬氨酸（NMDA）和α氨基3羥基5甲基4異戊丙酸（AMPA）受體，引起大量K+外流和Na+、Ca2+內(nèi)流，造成滲透分解和Ca2+相關(guān)性損害。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察甲基強(qiáng)的松龍（MP）對(duì)DHCA大鼠腦NMDA受體1（NMDAR1）蛋白表達(dá)的影響，以探討其腦保護(hù)機(jī)制。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

早產(chǎn)兒培育箱、自制大鼠冰窩、水合氯醛（南京市兒童醫(yī)院提供）、MP（美國(guó)輝瑞制藥公司）、NMDA受體R1（SantaCruz公司），羊抗兔即用型SABC免疫組化檢測(cè)試劑盒SA1022（武漢博士德公司）、DAB顯色劑（武漢博士德公司）、多聚賴氨酸（美國(guó)Sigma公司）、熒光倒置顯微鏡（德國(guó)蔡司）、801圖像分析系統(tǒng)（江蘇捷達(dá)）。

【摘要】目的觀察鋁負(fù)荷大鼠腦組織單胺氧化酶B(MAOB)的活性與表達(dá)改變，并探討尼莫地平對(duì)該動(dòng)物模型的影響。方法采用三氯化鋁（AlCl3）(400mg/kg)灌胃大鼠，1次/d，5d/w，持續(xù)3個(gè)月，建立鋁負(fù)荷致大鼠慢性腦損傷的動(dòng)物模型，尼莫地平(80mg/kg)在每次鋁給予4h后灌胃，觀察行為學(xué)、生化酶學(xué)、MAOBmRNA及蛋白表達(dá)水平等指標(biāo)的變化。結(jié)果鋁負(fù)荷能明顯導(dǎo)致大鼠被動(dòng)回避性學(xué)習(xí)記憶能力和空間識(shí)別能力障礙，使其腦組織乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(ChAT)活性顯著降低(P＜0.01)，而膽堿酯酶(AchE)活性顯著升高(P＜0.01)，超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著降低(P＜0.01)，而丙二醛（MDA）含量顯著升高(P＜0.01)，MAOB活性與MAOBmRNA及蛋白表達(dá)水平顯著增加(P＜0.01)；NMDP能明顯改善鋁負(fù)荷大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力障礙，明顯阻遏鋁負(fù)荷大鼠海馬組織ChAT與SOD活性的降低，AchE活性與MDA含量的增高，MAOB活性及其mRNA與蛋白表達(dá)的增加。結(jié)論鋁負(fù)荷致大鼠腦損傷涉及腦組織的MAOB活性與表達(dá)改變；NMDP可能降低鋁負(fù)荷大鼠腦組織MAOB表達(dá)和活性，并增加SOD活性，減少自由基而保護(hù)大鼠慢性腦損傷。

【關(guān)鍵詞】尼莫地平；鋁負(fù)荷大鼠；單胺氧化酶B

由于阿爾茨海默?。ˋD）發(fā)病機(jī)制未明，目前尚缺乏理想的治療手段。尼莫地平是雙氫吡啶類鈣通道拮抗劑，脂溶性高，易通過(guò)血腦屏障，其擴(kuò)張腦血管，改善腦血供應(yīng)等作用已得到肯定并應(yīng)用于臨床，而其對(duì)老年癡呆認(rèn)知記憶障礙的改善作用〔1〕，機(jī)制至今仍不很清楚。有研究報(bào)道單胺氧化酶B（MAOB）的活性改變與神經(jīng)元損傷和神經(jīng)元退變可能有密切關(guān)系〔2，3〕。為探討尼莫地平在改善老年癡呆等導(dǎo)致的認(rèn)知記憶障礙中的作用，本研究擬采用鋁負(fù)荷大鼠腦損傷模型，觀察腦損傷學(xué)習(xí)記憶障礙與腦組織MAOB改變的關(guān)系及尼莫地平對(duì)鋁損傷大鼠腦組織MAOB表達(dá)的影響，為神經(jīng)元退行性疾病的發(fā)病機(jī)制研究奠定實(shí)驗(yàn)與理論基礎(chǔ)，為防治藥物的開發(fā)探尋新方法與新途徑。

1材料與方法

1.1動(dòng)物與分組清潔級(jí)3月齡Wistar大鼠100只，雄性，180～220g，由重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供〔動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(渝)2005002〕。按體重隨機(jī)分成3組，每組10只，即空白對(duì)照(溶劑為0.5%羧甲基纖維素鈉)組，鋁模型(AlCl3400mg/kg)組與尼莫地平組(80mg/kg)，灌胃容積1ml/100g體重。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，鋁模型組死亡2只鼠。

1.2方法

【摘要】目的探討二氮嗪對(duì)深低溫缺血再灌注大鼠的腦保護(hù)作用及其機(jī)制。方法采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈阻斷法制作深低溫缺血再灌注大鼠模型，將306只SD大鼠隨機(jī)分成3組:假手術(shù)組、二氮嗪組和模型組。分別在缺血1h后再灌注2、6、12h及1、2、3、7d斷頭取腦，對(duì)腦組織行含水量檢測(cè)，并采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)腦組織NR1表達(dá)情況。結(jié)果假手術(shù)組腦組織含水量明顯低于二氮嗪組和模型組，二氮嗪組低于模型組，模型組和二氮嗪組腦組織含水量在12h開始升高、1d達(dá)高峰、3d基本恢復(fù)正常，模型組和二氮嗪組NR1均在2h開始升高、1d達(dá)到高峰、7d后基本達(dá)到正常水平，但二氮嗪組NR1表達(dá)水平在2、6、12h及1、2d明顯低于模型組，且兩組NR1表達(dá)水平均高于假手術(shù)組。結(jié)論二氮嗪預(yù)處理對(duì)深低溫缺血再灌注大鼠具有腦保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào)腦組織NR1的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)。

【關(guān)鍵詞】深低溫;腦缺血再灌注;二氮嗪;腦保護(hù);NR1表達(dá);大鼠

腦缺血再灌注損傷及其機(jī)制十分復(fù)雜，至今尚不完全清楚。腦缺血再灌注損傷包括神經(jīng)細(xì)胞壞死和凋亡兩個(gè)方面，其中線粒體ATP敏感性鉀通道被認(rèn)為是關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一［1］。二氮嗪是線粒體ATP依賴性鉀離子通道開放劑，已廣泛應(yīng)用于缺血再灌注心肌保護(hù)方面的研究，而對(duì)腦保護(hù)方面的研究相對(duì)較少。N-甲基天冬氨酸受體（NMDAR）是目前研究最為深入的興奮性氨基酸（EAA）受體之一，是一種離子型EAA受體。目前已證實(shí)，NMDAR是由NR1、NR2A～2D5種亞單位組成的異聚體。其中NR1亞單位是NMDAR的功能單位，NR2是其調(diào)節(jié)單位，只有和NR1組合才表現(xiàn)出活性。NR1基因紊亂就會(huì)使NMDAR的活性喪失。EAA的毒性是通過(guò)受體活性改變而發(fā)揮作用，缺氧缺血能影響NMDAR的數(shù)量和功能，誘導(dǎo)和加強(qiáng)NR1的表達(dá)，上調(diào)NMDAR的數(shù)量?；谏鲜鲅芯勘尘?，本試驗(yàn)主要采用腦缺血再灌注大鼠模型，觀察二氮嗪預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注損傷后腦含水量、形態(tài)學(xué)及NR1的表達(dá)變化來(lái)探討二氮嗪對(duì)深低溫缺血再灌注大鼠是否具有腦保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。

1材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

成年健康SD大鼠306只，雌雄不限，體重200～250g，由南京市兒童醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物飼養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)均符合我國(guó)衛(wèi)生部《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理實(shí)施細(xì)則（1998）》的要求。

【摘要】目的觀察甲基強(qiáng)的松龍（MP）對(duì)深低溫停循環(huán)（DHCA）大鼠腦N甲基D天門冬氨酸受體R1（NMDAR1）表達(dá)的影響，探討MP對(duì)DHCA大鼠腦保護(hù)作用的機(jī)制。方法制作大鼠DHCA模型。雄性SD大鼠175只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、DHCA模型組和MP處理組。觀察DHCA60min，再灌注2、6、12h及1、2、3、7d時(shí)NMDAR1蛋白表達(dá)的變化以及腦組織超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果免疫組化結(jié)果顯示，DHCA模型組和MP處理組大鼠NMDAR1蛋白表達(dá)均升高，于1d到達(dá)高峰，后逐漸降低，于再灌注7d恢復(fù)至正常水平。MP處理組大鼠再灌注后2、6、12h，1、2d5個(gè)時(shí)間點(diǎn)NMDAR1表達(dá)明顯低于模型組（P<0.01）。腦組織超微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)MP能抑制DHCA腦細(xì)胞凋亡。結(jié)論MP對(duì)DHCA大鼠腦組織具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制之一可能是與抑制NMDAR1蛋白表達(dá)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】深低溫停循環(huán);甲基強(qiáng)的松龍;N-甲基-D-天門冬氨酸受體R1;腦保護(hù);蛋白表達(dá)

深低溫停循環(huán)（deephypothermiccirculatoryar-rest，DHCA）技術(shù)自上世紀(jì)50年代誕生以來(lái)，已廣泛應(yīng)用于復(fù)雜和嚴(yán)重的先天性心臟病及大血管手術(shù)中，但其可能并發(fā)腦損傷的問(wèn)題尚未得到較好解決，DH-CA術(shù)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)病率高達(dá)4%～25%。DHCA手術(shù)后患者近期不同程度出現(xiàn)手足舞蹈癥、抽搐，遠(yuǎn)期出現(xiàn)認(rèn)知障礙，兒童出現(xiàn)智力發(fā)育障礙等神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥［1］。DHCA后腦組織缺血缺氧導(dǎo)致突觸前興奮性氨基酸（EAA）大量釋放和再攝取減少，從而激活突觸后N甲基D天門冬氨酸（NMDA）和α氨基3羥基5甲基4異戊丙酸（AMPA）受體，引起大量K+外流和Na+、Ca2+內(nèi)流，造成滲透分解和Ca2+相關(guān)性損害。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察甲基強(qiáng)的松龍（MP）對(duì)DHCA大鼠腦NMDA受體1（NMDAR1）蛋白表達(dá)的影響，以探討其腦保護(hù)機(jī)制。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

早產(chǎn)兒培育箱、自制大鼠冰窩、水合氯醛（南京市兒童醫(yī)院提供）、MP（美國(guó)輝瑞制藥公司）、NMDA受體R1（SantaCruz公司），羊抗兔即用型SABC免疫組化檢測(cè)試劑盒SA1022（武漢博士德公司）、DAB顯色劑（武漢博士德公司）、多聚賴氨酸（美國(guó)Sigma公司）、熒光倒置顯微鏡（德國(guó)蔡司）、801圖像分析系統(tǒng)（江蘇捷達(dá)）。

【摘要】目的觀察五福心腦清對(duì)多發(fā)性腦梗死大鼠的保護(hù)作用。方法采用同種大鼠自然干燥血凝塊頸內(nèi)動(dòng)脈注入制備多發(fā)性腦梗死性癡呆大鼠模型，測(cè)定多發(fā)性腦梗死大鼠血清SOD、MDA的含量，觀察腦組織形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果模型組血清SOD的含量下降，MDA的含量增高；復(fù)方丹參滴丸和五福心腦清各劑量組均可增高SOD的含量，降低MDA的含量。五福心腦清可減輕多發(fā)性腦梗死大鼠腦組織形態(tài)學(xué)改變。結(jié)論五福心腦清對(duì)多發(fā)性腦梗死性癡呆大鼠模型具有保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】五福心腦清；多發(fā)腦梗死性癡呆；SOD；MDA

EffectofWuFuXinNaoQingoncerebralmulti-infarctiondementiaratmodel

【Abstract】ObjectiveTostudytheprotectiveeffectsofWUFUXINNAOQINGoncerebralmulti-infarctiondementia(MID)ratmodel.MethodsThemulti-infarctiondementiamodelwasinducedbyinjectingcruorembolusofthesamekindratsintotheinternalcarotidartery.TheSODandMDAofserumwasmeasured.Andthepathologyofbrainwasobserved.ResultsComparedwiththecontrolgroup，thecontentofSODinserumofthemulti-infarctiondementiaratswasreduced，thecontentofMDAwasincreased.FuFangDanShenDiWanandWuFuXinNaoQingcanreversethecontentofthem.Moreover，themorphologydemonstratedthatFuFangDanShenDiWanandWuFuXinNaoQingcandecreasethepathologicaldestroyofthebrain.ConclusionTheresultsofthisstudysuggestthatWuFuXinNaoQinghaveprotectiveeffectsonmulti-infarctiondementiaratmodel.

【Keywords】WuFuXinNaoQing；cerebralmulti-infarctiondementia；SOD；MDA

血管性癡呆是一系列腦血管因素導(dǎo)致腦組織損害而產(chǎn)生的癡呆癥狀的總稱。在血管性癡呆中，以多發(fā)梗死性癡呆(MID)發(fā)病率最高，且有不斷增高的趨勢(shì)。MID是由于反復(fù)多次腦缺血發(fā)作，或多發(fā)性腦梗死、或一次嚴(yán)重的腦血管病引起的智能減退。由于患者的生活能力下降，嚴(yán)重威脅著老年人的健康和生存質(zhì)量，給家庭和社會(huì)造成了巨大負(fù)擔(dān)，隨著血管性癡呆的發(fā)病率絕對(duì)及相對(duì)地增多，使血管性癡呆的防治研究具有實(shí)際應(yīng)用前景。五福心腦清由精制紅花油、冰片等組成，具有活血化瘀、通絡(luò)開痹等功效。故本實(shí)驗(yàn)通過(guò)用大鼠自體血栓造成的多發(fā)性腦梗死模型，觀察五福心腦清對(duì)此模型的保護(hù)作用。

【摘要】目的研究川芎(CHX)生物堿對(duì)局灶性腦缺血再灌注（I/R）大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及動(dòng)物蘇醒后神經(jīng)功能、腦梗死容積的影響。方法腹腔注射（ip）CHX生物堿50、100、200mg/kg和生理鹽水1w后將其制成局灶性腦大鼠損傷模型，并檢測(cè)血清中的SOD活性、MDA含量，神經(jīng)功能損傷評(píng)分以及腦梗死容積的變化，同時(shí)與假手術(shù)組比較。結(jié)果I/R組與假手術(shù)組相比，血清中的SOD活性降低，MDA含量增加（P＜0.01）。CHX50mg/kg組、CHX100mg/kg組、CHX200mg/kg組與I/R組相比，血清中的SOD活性均升高（P＜0.01），MDA含量均降低（P＜0.05），腦梗死容積明顯縮?。≒＜0.01）；神經(jīng)功能評(píng)分差異顯著（P＜0.05）。結(jié)論CHX生物堿對(duì)腦I/R引發(fā)的自由基損傷有保護(hù)作用，從而減輕腦I/R后腦組織的損害。

【關(guān)鍵詞】川芎生物堿；缺血再灌注；超氧化物歧化酶；丙二醛；自由基

近年來(lái)，人們傾向于采用超早期溶栓治療腦梗死，迅速恢復(fù)局部血供，以達(dá)到理想的治療效果，但缺血再灌注（I/R）損傷可引起一系列復(fù)雜的繼發(fā)改變，導(dǎo)致缺血組織損傷惡化〔1〕。如何防止腦I/R，尋找有效的防治藥物，促進(jìn)腦卒中后中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能恢復(fù)，一直是相關(guān)學(xué)科研究的重點(diǎn)之一。某些中藥如叁附、大黃、川芎等經(jīng)臨床驗(yàn)證可通過(guò)多種環(huán)節(jié)防止缺血性損傷〔2〕,但目前國(guó)內(nèi)有對(duì)照的臨床研究病例數(shù)較少,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察川芎（CHX）中的生物堿對(duì)大鼠腦I/R損傷后血清中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量及動(dòng)物蘇醒后神經(jīng)功能評(píng)分、腦梗死容積大小的影響探討CHX生物堿對(duì)腦I/R損傷的保護(hù)作用，為CHX防治中樞神經(jīng)系統(tǒng)缺血性損傷提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1動(dòng)物分組及給藥方法選擇健康Wistar大鼠50只,體重280～350g，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。編號(hào)：SCXK(吉)20030004，隨機(jī)分成5組，每組10只。CHX生物堿由北華大學(xué)藥學(xué)院中藥研究室制備,用時(shí)調(diào)配至所需濃度。①I/R組（生理鹽水組10ml/kg），腹腔注射（ip）生理鹽水10ml/kg7d，每天1次。②I/R＋CHX50mg/kg組，ipCHX生物堿50mg/kg連續(xù)7d，每天1次。③I/R＋CHX100mg/kg組，ipCHX生物堿100mg/kg連續(xù)7d，每天1次。④I/R＋CHX200mg/kg，ipCHX生物堿200mg/kg連續(xù)7d，每天1次。⑤假手術(shù)組，進(jìn)行手術(shù)而未制造大鼠局灶性腦I/R病理模型。⑥陽(yáng)性對(duì)照組，用葛根素（GGS）5mg/kg，連續(xù)7d，每天1次。除假手術(shù)組外，其余各組用藥7d。后制造大鼠局灶性腦I/R病理模型。

1.2I/R造摸方法大鼠用25％烏拉坦ip（0.3ml/100g）加乙醚吸入麻醉。背位固定，頸右側(cè)切口，暴露右頸總動(dòng)脈（CCA）。向外牽引二腹肌和胸鎖乳突肌，由CCA分叉處向頭端依次游離。電凝頸外動(dòng)脈（ECA）的所有分支。在甲狀腺上動(dòng)脈遠(yuǎn)端結(jié)扎，切斷ECA，使其主干游離備用，然后分離頸內(nèi)動(dòng)脈（ICA）至顱底，結(jié)扎其分支翼腭動(dòng)脈，僅保留ICA入頸主干。用1號(hào)絲線在ECA根部打一松扣，用動(dòng)脈夾暫時(shí)關(guān)閉CCA和ICA，將預(yù)先制備好的尼龍線經(jīng)ECA主干的切口插入至CCA分叉處,將ECA根部的絲線縛緊,以防止其中的尼龍線滑出或出血，然后移去ICA的動(dòng)脈夾，將動(dòng)脈夾緩慢向ICA入頸的方向推進(jìn)，以分叉處為標(biāo)記，推進(jìn)約17mm時(shí)可感到阻力，表明尼龍線的頭端已通過(guò)大腦中動(dòng)脈（MCA）的起始處,到達(dá)較細(xì)的大腦前動(dòng)脈內(nèi)，移去CCA上的動(dòng)脈夾，此時(shí)即完成右側(cè)MCA的阻塞，縫合切口，將尼龍絲的尾端留在皮外，再灌注時(shí)將尼龍線輕輕抽感到阻力時(shí)，表明尼龍線的頭端已回到ECA的主干中，從而實(shí)現(xiàn)MCA的再灌注。術(shù)中及術(shù)后注意保持體溫，室溫保持在20℃～24℃。

【摘要】目的研究銀杏葉提取物(EGb)對(duì)點(diǎn)燃模型幼鼠學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能，對(duì)大鼠海馬乙酰膽堿酯酶（AChE）、膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（ChAT）活性的影響。方法21、35日齡SD大鼠各40只，經(jīng)初篩后隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組、點(diǎn)燃對(duì)照組及EGb大、中、小劑量治療組，采用戊四氮（PTZ）誘導(dǎo)幼鼠點(diǎn)燃模型，以Y型電迷宮及生化檢測(cè)方法，觀察用藥前后大鼠學(xué)習(xí)記憶功能和海馬AChE、ChAT活性的變化。結(jié)果EGb呈劑量依賴性顯著改善實(shí)驗(yàn)大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,并顯著抑制海馬AChE活性、增強(qiáng)ChAT的活性。結(jié)論EGb可以通過(guò)抑制功能腦區(qū)AChE活性、增加ChAT的活性,增強(qiáng)中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)的功能，改善發(fā)育期癲疒間大鼠學(xué)習(xí)記憶功能。

【關(guān)鍵詞】銀杏葉提取物；學(xué)習(xí)記憶；乙酰膽堿酯酶；膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶；點(diǎn)燃模型；大鼠

EffectofextractsofGinkgobilobaleafonthelearning-memoryabilityandtheactivity

ofAChEandChATinthehippocampusinratswithkindling-inducedepilepsy

DUANFangrong,YUANBaoqiang*

(DepartmentofPediatrics,TheAffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollege,Xuzhou,Jiangsu221002,China)

1器材

1.1動(dòng)物KM小鼠，SPF級(jí)，雌雄各半，體重(20±2)g，合格證號(hào)：SCXK（甘）2004-0006-0000025；Wistar大鼠80只，SPF級(jí)，雌雄各半，體重(90±10)g，合格證號(hào)：SCXK（甘）2004-0006-0000025，由甘肅中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2藥物活血定眩丸（由甘肅中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院提供，批號(hào)070501）因丸劑中含有一定量的輔料，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)配制供試樣品濃度達(dá)不到實(shí)驗(yàn)要求的劑量，故采用與丸劑相同工藝方法制得該藥的浸膏（1g浸膏相當(dāng)于2.242g生藥），實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配制成實(shí)驗(yàn)所需濃度用于急性和長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)。

1.3儀器

CD-1200型血細(xì)胞分析儀（美國(guó)，雅培）；ALCYON300型全自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)，雅培）；電子顯微鏡BX60-32FB3-F01型（日本，OLYMPUS）；切片機(jī)RM2135型（德國(guó)，徠卡）；全自動(dòng)組織包埋機(jī)TEC-V.CM-JZ型(日本，櫻花)；自動(dòng)組織脫水劑VIP-JJZ-JZ型（日本，櫻花）。

2方法與結(jié)果［2～4］

【關(guān)鍵詞】大腦中動(dòng)脈閉塞；局灶性腦缺血/再灌注；腦水腫；

摘要：目的：探討短暫性右側(cè)大腦中動(dòng)脈閉塞所致局灶性腦缺血再灌注模型的腦梗死比和腦水腫的變化。方法：線栓法制作大鼠腦缺血/再灌注不同時(shí)間點(diǎn)模型，行TTC染色測(cè)量腦梗死比及干濕稱重法測(cè)量腦含水量。結(jié)果：腦缺血再灌注6h時(shí)大鼠腦組織即有含水量的增加，并隨著時(shí)間的推移呈上升趨勢(shì)，且未損傷側(cè)中段腦組織含水量升高最為顯著。TTC染色在缺血再灌注6h即可見(jiàn)白色梗死灶，梗死比在再灌注72h內(nèi)逐漸增加。結(jié)論：局灶性腦缺血再灌注72h內(nèi)腦梗死比和腦水腫均呈進(jìn)行性加重。

關(guān)鍵詞：大腦中動(dòng)脈閉塞；局灶性腦缺血/再灌注；腦水腫；

腦梗死比缺血性腦損傷（ischemiabraininjury）是危及患者生命的疾病之一。而腦缺血及再灌注引起的腦水腫（hydrocephalus）是影響病人急性期與亞急性期生存的重要因素。較大面積的缺血因腦水腫致病變腦組織體積急劇增大，可誘發(fā)腦疝。缺血后的腦水腫被認(rèn)為是加重腦缺血原有病變，導(dǎo)致腦疝及危及患者生命的主要原因［1~3］。另外，血腦屏障（bloodbrainbarrier,BBB）破壞也是缺血性中風(fēng)繼發(fā)出血的原因，而這也是患者死亡的原因之一。目前缺血后BBB破壞引起血管源性腦水腫（vasogenicbrainedema,VBE）及其對(duì)缺血病變進(jìn)展的影響尚未引起足夠的重視。本實(shí)驗(yàn)旨在進(jìn)一步明確局灶性腦缺血再灌注后腦水腫的時(shí)程變化，為臨床診治提供參考資料。

1材料與方法

11實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料

【關(guān)鍵詞】絞股藍(lán)藥理作用

絞股藍(lán)為葫蘆科多年生攀援草本植物Gynostemmapentaphylla(Thunb.)Makino，又名小苦葉、公羅鍋底、遍地生根等。絞股藍(lán)在我國(guó)藥用歷史悠久，其藥用部位為根狀莖或全草，味甘、苦，性寒，有益氣健脾、化痰止咳之功效；現(xiàn)代研究表明絞股藍(lán)中含有皂苷、氨基酸、黃酮、糖和多種無(wú)機(jī)元素等等，其中皂苷有80多種，6種與人參皂苷相似，絞股藍(lán)的提取物具有抗疲勞、抗缺氧、免疫調(diào)節(jié)、降血脂、降血糖等作用。本文就其藥理作用研究進(jìn)展情況作一綜述，為進(jìn)一步開發(fā)研究提供依據(jù)。

1藥理作用

1.1對(duì)心腦血管系統(tǒng)的作用

1.1.1對(duì)腦循環(huán)系統(tǒng)的作用昆明種小鼠腹腔內(nèi)注射絞股藍(lán)總皂苷（GP）后，小鼠耳廓血管、腦膜血管的血流速度及流量明顯增加，微循環(huán)微鏡下可見(jiàn)小動(dòng)脈血管交通支開放數(shù)明顯增多，證明絞股藍(lán)增加組織血流量與加快血流速度及增加腦動(dòng)脈側(cè)支循環(huán)有關(guān)，對(duì)缺血性腦損傷可呈現(xiàn)較好的防治作用［1］。GP還可明顯抑制谷氨酸引起的Wistar大鼠胚胎大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)NO、H2O2含量的升高，有效地防止線粒體膜電位的下降，從而提高細(xì)胞存活率，減少大腦皮層神經(jīng)元的損傷［2］。絞股藍(lán)提取物還能明顯的改善由東莨菪堿和乙醇造成的大鼠學(xué)習(xí)和記憶的獲取與再現(xiàn)的障礙。

1.1.2對(duì)心臟的作用絞股藍(lán)總皂苷1mg/kg靜脈注射，使麻醉犬動(dòng)脈收縮壓、舒張壓、平均動(dòng)脈壓均顯著升高，明顯增加左室收縮壓(LVSP)、室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)及室內(nèi)壓最大下降速率，20mg/kg靜脈注射，則出現(xiàn)心率減慢，動(dòng)脈收縮壓、舒張壓、平均動(dòng)脈壓、LVSP、-dp/dtmax均降低，呈現(xiàn)劑量大小不同而出現(xiàn)正負(fù)雙向效應(yīng)。絞股藍(lán)總皂苷100mg/kg腹腔注射，能縮小兔冠脈結(jié)扎引起的心肌梗塞范圍，對(duì)大鼠的梗塞心肌，可降低其丙二醛含量，并保護(hù)心肌超氧化物歧化酶活性。絞股藍(lán)皂苷5，10mg/kg靜脈管注射，明顯降低麻醉犬血壓和總外周阻力,也降低腦血管及冠狀血管阻力,增加冠脈流量,減慢心率,使心臟張力-時(shí)間指數(shù)下降,對(duì)心肌收縮性能和泵血功能無(wú)明顯影響。絞股藍(lán)總皂苷5mg/只靜脈注射,可對(duì)抗垂體后葉素引起蟾蜍心電圖T波的降低。絞股藍(lán)皂苷靜脈注射家兔3d后，夾閉腸系膜上動(dòng)脈復(fù)制腸缺血再灌注心肌損傷模型，利用MedlabU/4c生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)采集并分析，發(fā)現(xiàn)與靜脈注射生理鹽水的對(duì)照組比較，絞股藍(lán)皂苷組左心室收縮峰壓（LVSP）、室內(nèi)壓最大上升速率（+dp/dtmax）、室內(nèi)壓最大值（Vpm）均顯著升高，室內(nèi)壓最大下降速率（-dp/dtmax）明顯降低，表明絞股藍(lán)皂苷可明顯改善心肌的收縮功能，對(duì)損傷的心肌有保護(hù)作用［3］。