尿白細(xì)胞范文
時(shí)間:2023-03-22 02:01:31
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篇1
隨著先進(jìn)醫(yī)療設(shè)備在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的使用,現(xiàn)在臨床檢驗(yàn)室檢查尿常規(guī)基本實(shí)現(xiàn)了儀器自動(dòng)檢測(cè),無論是檢測(cè)項(xiàng)目、檢驗(yàn)速度等方面均較手工操作有了大大改進(jìn),既方便了病人在短時(shí)間內(nèi)得到多項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果,也為檢驗(yàn)人員減輕了工作量。尿液常規(guī)檢驗(yàn)由3項(xiàng)發(fā)展到目前的10項(xiàng),這對(duì)臨床有關(guān)疾病的診斷、治療、療效觀察有重要意義。但在實(shí)踐中,發(fā)現(xiàn)尿分析儀檢測(cè)白細(xì)胞與尿沉渣鏡檢中的白細(xì)胞數(shù)量經(jīng)常出現(xiàn)不一致的現(xiàn)象,尿液白細(xì)胞檢查對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病、前列腺疾病等有著重要價(jià)值,其定量檢測(cè)可直接反映相關(guān)疾病的狀態(tài)。針對(duì)尿液分析儀所得出的假陽性和假陰性等問題,為了更好地使尿液分析儀得出可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),收集了住院患者550例尿液標(biāo)本,采用尿液分析儀與顯微鏡計(jì)數(shù)法對(duì)尿液中白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。
資料與方法
465名健康體檢者,年齡20~28歲,男358人,女107人,均否認(rèn)肝、腎、結(jié)核等病史(女性排除月經(jīng)期)。
方法:取受檢者清晨空腹新鮮小便,分別進(jìn)行儀器分析和顯微鏡檢查(按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》方法操作)。
儀器:FA-150型尿分析儀及配套尿11聯(lián)試紙條、顯微鏡。
結(jié) 果
465標(biāo)本中,儀器檢測(cè)白細(xì)胞異常65例,鏡檢白細(xì)胞異常49例,兩者同時(shí)異常43例,兩者符合率65%;不相符者占35%,其中包括儀器檢測(cè)的假陰性、假陽性及儀器檢測(cè)和鏡檢白細(xì)胞數(shù)量的差異。
討 論
儀器檢測(cè)白細(xì)胞陰性而鏡檢白細(xì)胞陽性,可能是標(biāo)本檢測(cè)前未混勻,或尿液放置過久,白細(xì)胞會(huì)沉淀,造成鏡檢時(shí)尿液濃縮而致白細(xì)胞過多。
儀器檢測(cè)白細(xì)胞陽性而鏡檢白細(xì)胞陰性,可能是尿11聯(lián)試紙的白細(xì)胞模塊中含有吲哚化合物、重氮鹽及其他物質(zhì),而中性粒細(xì)胞含有酯酶能水解吲哚化合物,其產(chǎn)物與重氮鹽反應(yīng)生成紫色物質(zhì),顏色與酯酶活性成正比,借此估計(jì)尿中白細(xì)胞的數(shù)量。當(dāng)粒細(xì)胞破壞、崩解時(shí)試紙也能檢出,而鏡檢則不能檢出,造成白細(xì)胞數(shù)量差異但臨床仍以鏡檢的白細(xì)胞數(shù)為診斷標(biāo)準(zhǔn),而目前尚無法證實(shí)是酯酶還是其他物質(zhì)存在干擾。
當(dāng)尿蛋白含量在3g/L以上或大量葡萄糖,高比重尿時(shí)均會(huì)使試紙條反應(yīng)敏感性降低,而使儀器檢測(cè)白細(xì)胞產(chǎn)生假陰性;此外用藥期間尿中含有一定量頭孢菌素、慶大霉素等時(shí)可使儀器檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生假陰性[1]。
任何引起尿液顏色異常的物質(zhì)如甲醛等都會(huì)使儀器檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)產(chǎn)生假陽性。
試紙條與尿儀不配套的替代品、保存不當(dāng)或過期變質(zhì),均影響結(jié)果。試紙條浸入尿中的時(shí)間,應(yīng)嚴(yán)格遵守說明書上的規(guī)定;在尿中浸時(shí)間過短,反應(yīng)不能充分進(jìn)行,過長(zhǎng)試劑在尿中擴(kuò)散,影響結(jié)果準(zhǔn)確性。
建議:尿10項(xiàng)是半定量檢查法,且尿10項(xiàng)檢查法敏感性高。臨床醫(yī)生在判定結(jié)果的臨床意義上應(yīng)有正確的認(rèn)識(shí),儀器分析只能作為過篩檢查,最終結(jié)果還是應(yīng)以鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)[2]。對(duì)一些微量報(bào)告應(yīng)持慎重態(tài)度,尤其女性患者,應(yīng)結(jié)合臨床癥狀進(jìn)一步復(fù)查。
參考文獻(xiàn)
篇2
關(guān)鍵詞:尿液干化學(xué)儀長(zhǎng)春迪瑞H-800;尿液沉渣儀Sysmex UF-500i;手工鏡檢;紅細(xì)胞;白細(xì)胞
Comparison of Three Methods for Detecting Urine RBC and WBC
CHEN Ze-qin1,LI Bin2
(1.Department of Clinical Laboratory,Weiyuan County Hospital of Traditional Chinese Medicine,Weiyuan 642450,Sichuan,China;
2. Department of Clinical Laboratory, Zigong No.4 People's Hospital,Zigong 643000,Sichuan ,China)
Abstract:Objective To investigate the differences among the urine dry chemical analyzer Changchun DIRUI H-800, urine sediment analyzer Sysmex UF-500i and microscopic checking urine red blood cells(WBC), white blood cells(RBC). Methods Urine red blood cells ,white blood cell of 680 patients were detected by urine analyzer and microscope at the same,and the results were compared and analyzed. Results The positive rate of the urine dry chemical analyzer Changchun DIRUI H-800 is 24.85%,the positive rate of urine sediment analyzer Sysmex UF-500i is 27.35% and that of artificial microscopy is 25.5%.the urine red blood cell microscopic examination and urine sediment analyzer χ2 is 4.09,(P
Key words:Urine dry chemistry analyzer Changchun DIRUI H-800;Urine sediment analyzer Sysmex UF-500i;Manual microscopy ;Red blood cells;White blood cells
尿液通過腎小球?yàn)V過,腎小管重吸收,腎小管和集合管分泌(排泄)通過輸尿管、膀胱、及尿道排出體內(nèi)的代謝廢物、異物、毒物等,同時(shí)調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)代謝及酸堿平衡,借以維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定。尿液分析是診斷泌尿系統(tǒng)疾病的常用方法之一,首次晨尿因隔夜后尿液在體內(nèi)濃縮酸化,有利于異常成分檢出,尿液自動(dòng)化儀器的使用,不但提高了工作效率,而且彌補(bǔ)了人工檢查易漏檢的項(xiàng)目;但有些因素的影響易造成假陽性及假陰性結(jié)果。為進(jìn)一步探討尿液自動(dòng)化儀器和傳統(tǒng)手工鏡檢在尿液分析中的優(yōu)缺點(diǎn),指導(dǎo)臨床實(shí)際工作中正確對(duì)待兩種方法的應(yīng)用,本文對(duì)680例住院患者晨尿在常規(guī)條件下用干化學(xué)、尿沉渣儀對(duì)尿液紅細(xì)胞、白細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)人工鏡檢,并對(duì)結(jié)果比較分析。
1 材料與方法
1.1標(biāo)本來源 隨機(jī)收集我院2015年1月13日~6月26日門診和住院部患者新鮮晨尿680例,同時(shí)進(jìn)行尿液自動(dòng)化儀器和手工鏡檢,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。
1.2試劑與儀器 尿液干化學(xué)儀長(zhǎng)春迪瑞H-800和尿液沉渣儀 Sysmex UF-500i及配套試劑、質(zhì)控品;奧林巴斯顯微鏡、玻片、試管。
1.3方法 每日做標(biāo)本前檢查室內(nèi)質(zhì)控,在控后開始做患者標(biāo)本。標(biāo)本均取合格的晨尿10ml,嚴(yán)格將尿液混勻,倒入試管中上機(jī)(尿液干化學(xué)儀長(zhǎng)春迪瑞H-800和尿液沉渣儀SysmexUF-500i)進(jìn)行檢測(cè),顯微鏡尿沉渣檢查由有豐富經(jīng)驗(yàn)的兩名主管檢驗(yàn)技師分別按第三版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》操作,離心后棄上清液,留下0.2ml沉渣,輕搖混勻,取0.02ml 滴于載玻片上,觀察20個(gè)高倍鏡視野中紅細(xì)胞、白細(xì)胞數(shù),結(jié)果取均值。
1.4評(píng)價(jià)指標(biāo) 尿液干化學(xué)儀隱血測(cè)出1+及以上為陽性、白細(xì)胞測(cè)出1+及以上為陽性;尿沉渣儀紅細(xì)胞0~25/μL范圍內(nèi)為陰性、白細(xì)胞0~25/μL范圍內(nèi)為陰性,超出范圍則視為陽性;尿沉渣鏡檢紅細(xì)胞0~3/高倍鏡、白細(xì)胞0~5/高倍鏡視為陰性,超出范圍則視為陽性。
1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),P
2 結(jié)果
2.1尿液自動(dòng)化儀器與手工鏡檢結(jié)果陽性率比較分析,尿液自動(dòng)分析儀中RBC尿液沉渣儀陽性率最高,而干化學(xué)儀陽性率最低;WBC干化學(xué)儀陽性率最高,而手工鏡檢陽性率最低,見表1。
2.2尿液自動(dòng)化儀器(尿液干化學(xué)儀 長(zhǎng)春迪瑞H-800和尿液沉渣儀 Sysmex UF-500i)與手工鏡檢結(jié)果,經(jīng)χ2檢驗(yàn):表3 尿液紅細(xì)胞鏡檢與尿沉渣儀結(jié)果χ2為4.09,P
2.3尿液自動(dòng)化儀器與手工鏡檢結(jié)果靈敏度及特異性比較分析,尿液RBC尿液沉渣儀靈敏度優(yōu)于干化學(xué)儀,而尿液干化學(xué)儀特異性則更好;尿液WBC干化學(xué)儀靈敏度優(yōu)于尿液沉渣儀,而尿液沉渣儀特異性相對(duì)更好,見表6。
3 討論
血液流經(jīng)腎小球,血漿中的水、電解質(zhì)和小分子有機(jī)物都能由腎小球?yàn)V入腎小囊,形成超原尿,原尿經(jīng)腎小管和集合管的重吸收、分泌、與濃縮稀釋后形成終尿,流經(jīng)腎盂、輸尿管到達(dá)膀胱并儲(chǔ)存,通過尿道排除體外。首次晨尿因?yàn)槟蛞核峄瘽饪s使有形成分富集更利于尿液紅細(xì)胞、白細(xì)胞的檢出。尿液自動(dòng)化儀器的使用使得尿液檢測(cè)成功提速,不僅解放人力,而且與傳統(tǒng)的鏡檢相比,具有快速、操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性好,可質(zhì)量控制等優(yōu)點(diǎn)。尿液沉渣儀Sysmex UF-500i運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)和電阻抗原理,應(yīng)用熒光染料菲啶和羰花青對(duì)對(duì)尿液中各類有形成分進(jìn)行染色,然后經(jīng)激光照射每一有形成分發(fā)出熒光強(qiáng)度、散射光強(qiáng)度及電阻抗大小進(jìn)行綜合分析,得出定量數(shù)據(jù)[1]。但是尿液中有大量真菌時(shí),尿沉渣儀誤將真菌識(shí)別為紅細(xì)胞使紅細(xì)胞假性增高,真菌孢子會(huì)干擾尿液沉渣儀Sysmex UF-500i對(duì)RBC計(jì)數(shù),不會(huì)干擾WBC的計(jì)數(shù)[2]。住院患者因?yàn)榱羧∧蛞哼^程中其它物質(zhì)混入,特別女性患者白帶混入可能使白細(xì)胞假性增高。采用尿沉渣法進(jìn)行檢測(cè)時(shí)易受尿液中的結(jié)晶、細(xì)菌、藥物、白帶等其他混入物的影響從而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽性或假陰性[3]。尿液干化學(xué)儀長(zhǎng)春迪瑞H-800運(yùn)用配套試紙條發(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化,被不同發(fā)光二極管照射后,產(chǎn)生發(fā)射光,反射光由光電管接受,光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電訊號(hào),電訊號(hào)傳送至模擬轉(zhuǎn)換器,轉(zhuǎn)換成數(shù)值,經(jīng)微處理控制器處理,自動(dòng)顯示結(jié)果。尿干化學(xué)法速度快重復(fù)性好可適于大批量標(biāo)本篩檢,顯微鏡法操作繁瑣,但能真實(shí)展現(xiàn)細(xì)胞等有形成分形態(tài)判斷直觀可靠。但是干化學(xué)法易受尿液中維生素C影響而使RBC呈假陰性,而WBC主要檢測(cè)白細(xì)胞酯酶針對(duì)于尿液中粒細(xì)胞可以檢出,淋巴細(xì)胞存在一定局限性[4]。本次實(shí)驗(yàn)中住院部晨尿可能由于放置及運(yùn)送時(shí)間不及時(shí),上機(jī)檢測(cè)白細(xì)胞破壞,白細(xì)胞酯酶仍可結(jié)合于干化學(xué)試紙條,但在鏡檢和尿液沉渣儀上不可檢出使得尿液鏡檢和沉渣儀陽性率減低[5]。干化學(xué)法測(cè)定尿液細(xì)胞時(shí),病患飲食、藥物、PH等因素均可對(duì)結(jié)果造成影響,從而使得檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽性或假陰性。感染而出現(xiàn)的分泌物和某些氧化物的污染如次氯酸鹽可引起干化學(xué)法假陽性,一些疾患如腎病引起尿中紅細(xì)胞破壞、溶血性疾病導(dǎo)致血紅蛋白尿等都能產(chǎn)生假陽性,尿液pH值低、比重低、放置時(shí)間長(zhǎng),尿中紅細(xì)胞就會(huì)開始溶解,也會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果產(chǎn)生[6]。維生素C具有還原性,可競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng),若尿中含有大量的維生素C,可使干化學(xué)法檢測(cè)紅細(xì)胞呈現(xiàn)假陰性[7]。傳統(tǒng)手工鏡檢作為尿液檢測(cè)“金標(biāo)準(zhǔn)”[8],但因?yàn)椴僮髻M(fèi)時(shí),重復(fù)性差,人為因素影響較大,質(zhì)量不可控制等因素在大量標(biāo)本時(shí)受限。尿沉渣法和干化學(xué)法并聯(lián)檢測(cè)尿液的靈敏度最高,但特異度最低;而尿沉渣法和干化學(xué)法串聯(lián)檢測(cè)的特異度最高,但靈敏度最低。對(duì)于尿沉渣及干化學(xué)法結(jié)果有疑問的尿液樣本,需要使用鏡檢法再次復(fù)查,以提高報(bào)告的準(zhǔn)確率[9]。但干化學(xué)法與尿沉渣法同屬儀器測(cè)定,受影響因素較多,不能完全代替顯微鏡檢測(cè),可作為常規(guī)性的檢測(cè)手段。絕大多數(shù)儀器檢測(cè)到的紅細(xì)胞、白細(xì)胞結(jié)果不需要人工復(fù)檢便可以發(fā)出檢測(cè)報(bào)告;而對(duì)于有形成分濃集或形態(tài)異常的標(biāo)本以及尿液含有結(jié)晶或酵母菌的尿液標(biāo)本需要人工顯微鏡鏡檢才能發(fā)出檢測(cè)報(bào)告[10]。在臨床工作中,三種方法應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用并結(jié)合臨床資料,并指導(dǎo)臨床工作中正確對(duì)待兩種儀器方法的應(yīng)用,以真實(shí)反映標(biāo)本情況,提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,為臨床醫(yī)生提供準(zhǔn)確可靠的結(jié)果。
參考文獻(xiàn):
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篇3
河南大學(xué)附屬淮河醫(yī)院檢驗(yàn)科,河南開封 475000
[摘要] 目的 探討不同尿標(biāo)本留取方式對(duì)尿常規(guī)檢驗(yàn)中白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化的影響。方法 選取2013年1月—2014年于我院泌尿外科就診的248例尿路感染患者為研究對(duì)象,采用雙數(shù)字法隨機(jī)分成單次清洗組與多次清洗組,每組各124例。其中單次清洗組通過滅菌注射用水清潔會(huì)陰后取尿液標(biāo)本,前段尿樣歸為A組、中段尿樣歸為B組;多次清洗組在尿液取樣前分別使用滅菌注射用水浸潤(rùn)的紗布、聚維酮碘浸潤(rùn)的紗布及干凈無菌紗布依次清潔外陰,前段尿樣歸為C組、中段尿樣歸為D組。對(duì)比四組尿液樣本細(xì)菌污染情況,記錄沉渣鏡檢后紅細(xì)胞與白細(xì)胞計(jì)數(shù)情況。結(jié)果 ①前段取樣的A、C組尿液培養(yǎng)陽性與陰性對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,中段取樣的B、D組尿液培養(yǎng)陽性與陰性對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);其中A、C組細(xì)菌感染對(duì)比差異明顯,B、D組細(xì)菌感染對(duì)比差異明顯(P<0.05);②單次清洗的A、B兩組白細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比差異明顯(P<0.05);多次清洗后取樣的C、D兩組白細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);四組患者取樣紅細(xì)胞計(jì)數(shù)均無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論 患者在尿樣采集前多次清洗會(huì)陰后取中段尿液作為檢驗(yàn)?zāi)蛞簶颖?,可有效提升?duì)白細(xì)胞與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)的精確性,降低假陽性、假陰性情況發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),減少誤診幾率,具有臨床推廣價(jià)值。
[
關(guān)鍵詞 ] 尿標(biāo)本留取方式;尿常規(guī)檢驗(yàn);白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化
[中圖分類號(hào)] R725
[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A
[文章編號(hào)] 1672-5654(2014)09(c)-0141-02
尿液采集與檢驗(yàn)對(duì)尿路感染患者的診斷與治療具有重要意義[1]。相關(guān)研究證實(shí)[2],傳統(tǒng)尿液采集方案存在多種弊端,如消毒液殘留于尿樣中易造成檢驗(yàn)假陰性現(xiàn)象、取前段尿液樣本使得檢驗(yàn)結(jié)果存在較大誤差,增加誤診風(fēng)險(xiǎn)等,對(duì)尿路感染臨床診治工作的順利開展不利。部分學(xué)者提倡推廣膀胱穿刺尿細(xì)菌培養(yǎng)方案,認(rèn)為該方案檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性最高,誤診幾率最小,但忽視此檢驗(yàn)方法為有創(chuàng)檢測(cè)法,患者接受度較低,不具有臨床廣泛推廣空間。本次研究選取248例尿路感染患者為研究對(duì)象,以探討不同尿標(biāo)本留取方式對(duì)尿常規(guī)檢驗(yàn)中白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化的影響,取得較為理想的效果,具體報(bào)道內(nèi)容如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2013年1月—2014年于我院泌尿外科就診的248例尿路感染患者為研究對(duì)象,采用雙數(shù)字法隨機(jī)分成單次清洗組與多次清洗組兩組,每組各124例。本次受試的124例患者均通過尿常規(guī)與血常規(guī)檢查,其尿菌落計(jì)數(shù)超過105/mL、尿沉渣白細(xì)胞計(jì)數(shù)超過20萬個(gè)/h,被確診為尿路感染,排除尿檢前7 d使用抗生素者;排除非自愿參與本次研究者。所有患者中男153例,女95例;年齡18~66歲,平均(44.6±4.9)歲;兩組患者在一般資料對(duì)比上差異不顯著(P>0.05),具有可比性。
1.2方法
①單次清洗組通過滅菌注射用水清潔會(huì)陰后取尿液標(biāo)本,前段尿樣歸為A組、中段尿樣歸為B組:于護(hù)士指導(dǎo)下清潔雙手,將浸潤(rùn)過滅菌注射用水的無菌紗布從前往后清潔會(huì)陰,后由護(hù)士按照相關(guān)要求將無菌杯交給患者采集尿樣(男性患者站立位,女性患者蹲位),采集到的前段尿樣注明A組,中段尿樣注明B組,均交由護(hù)士及時(shí)送檢。
②多次清洗組在尿液取樣前分別使用滅菌注射用水浸潤(rùn)的紗布、聚維酮碘浸潤(rùn)的紗布及干凈無菌紗布依次清潔外陰,前段尿樣歸為C組、中段尿樣歸為D組:由護(hù)士依次為病患發(fā)放3個(gè)浸潤(rùn)醫(yī)用紗布的一次性杯子,杯a中裝有滅菌注射用水浸潤(rùn)的紗布一塊、杯b中裝有聚維酮碘浸潤(rùn)的紗布一塊、杯c中裝有生理鹽水浸潤(rùn)的紗布一塊,患者在護(hù)士的指導(dǎo)下使用上述三塊紗布依次從前往后清洗會(huì)陰,后由護(hù)士按照相關(guān)要求將無菌杯交給患者采集尿樣(男性患者站立位,女性患者蹲位),采集到的前段尿樣注明C組,中段尿樣注明D組,均交由護(hù)士及時(shí)送檢。
1.3評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)
1.3.1 尿樣培養(yǎng)判斷標(biāo)準(zhǔn) 陽性:革蘭陰性桿菌計(jì)數(shù)超過105cfu/mL或革蘭陽性桿菌計(jì)數(shù)超過104cfu/mL;陰性:尿培養(yǎng)的2 d內(nèi)無細(xì)菌檢出;細(xì)菌污染:檢出菌落種類超過2種[3]。
1.3.2觀察指標(biāo) 對(duì)送檢尿液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及沉渣鏡檢,對(duì)比四組尿液樣本細(xì)菌污染情況、紅細(xì)胞與白細(xì)胞計(jì)數(shù)情況。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采取統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件spss 16.0對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,以(±s)表示,采取t檢驗(yàn);以(%)表示,采取χ2檢驗(yàn);對(duì)比以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 四組患者尿培養(yǎng)結(jié)果對(duì)比情況分析
前段取樣的A、C組尿液培養(yǎng)陽性與陰性對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,中段取樣的B、D組尿液培養(yǎng)陽性與陰性對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);其中A、C組細(xì)菌感染對(duì)比差異明顯,B、D組細(xì)菌感染對(duì)比差異明顯(P<0.05);詳細(xì)見下表1。
2.2四組患者紅細(xì)胞與白細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比情況分析
單次清洗的A、B兩組白細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比差異明顯(P<0.05);多次清洗后取樣的C、D兩組白細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);四組患者取樣紅細(xì)胞計(jì)數(shù)均無明顯差異(P>0.05);詳細(xì)見下表2。
3 討論
尿常規(guī)檢測(cè)因檢測(cè)項(xiàng)目較多且易受到多種外界因素的干擾,其檢測(cè)結(jié)果往往出現(xiàn)假陰性或假陽性現(xiàn)象,對(duì)后續(xù)診斷及治療工作的順利開展不利。為了獲得準(zhǔn)確可靠的尿常規(guī)檢測(cè)結(jié)果,除了醫(yī)護(hù)人員做好本職工作、堅(jiān)持規(guī)范化操作外,患者在尿液樣本采樣途中也需要密切配合[4],以減少誤診幾率,以免延誤寶貴治療時(shí)間。本次研究為尋求最佳尿樣留取方式,以提高尿路感染診斷準(zhǔn)確度,將受試的248例患者分成單次清洗組與多次清洗組兩組,分別給予單次會(huì)陰處清洗消毒與多次清潔消毒方案,發(fā)現(xiàn)多次清潔后取樣的C、D組患者尿檢細(xì)菌感染率均不足A、B組(單次清潔后取樣)的四分之一,表明合理的尿液取樣指導(dǎo)與無菌操作可有效提升尿樣有效性,降低其菌落計(jì)數(shù),以此提高尿檢準(zhǔn)確度。
臨床研究表明[5],實(shí)驗(yàn)室尿常規(guī)檢測(cè)所使用的尿樣最易受到感染的步驟集中在采集環(huán)節(jié)、儲(chǔ)存環(huán)節(jié)與檢驗(yàn)環(huán)節(jié),部分患者于尿檢前服用抗生素類藥物、采集環(huán)節(jié)不按照相關(guān)流程操作、樣本采集后未及時(shí)送檢等均為尿液檢查呈現(xiàn)假陽性或假陰性現(xiàn)象的重要因素。另外,相關(guān)研究表明[6],尿液采集與檢驗(yàn)對(duì)尿路感染患者的診斷與治療具有重要意義。傳統(tǒng)尿液采集方案多需要患者于尿液采樣前使用消毒液清理會(huì)陰處,部分患者在清理完畢后易出現(xiàn)消毒液殘留于尿樣中易造成檢驗(yàn)假陰性現(xiàn)象[7],使得尿常規(guī)檢查結(jié)果產(chǎn)生誤差,不僅增加醫(yī)護(hù)人員工作壓力,還可能延誤病情,錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī),對(duì)患者的健康安全不利。為了盡可能排除外界因素對(duì)尿液樣本有效性干擾,本次研究中采集的尿樣均嚴(yán)格按照相關(guān)操作流程,患者未于監(jiān)測(cè)前服用抗生素,樣本采集后也于第一時(shí)間又值班護(hù)士送至檢驗(yàn)處檢驗(yàn),受試的多次清潔組患者二、三次行外陰消毒使用的碘伏及生理鹽水,均通過相關(guān)研究證實(shí)[8],不會(huì)因其與尿液混合而出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象,使用較為安全。
為了探索取樣時(shí)段是否對(duì)尿檢準(zhǔn)確度造成影響,本次研究還將單次清洗組與多次清洗組按照取樣時(shí)段劃分成四組,A、C兩組為前段取樣,B、D兩組為中段取樣。通過對(duì)比可發(fā)現(xiàn),B、D組尿樣中白細(xì)胞計(jì)數(shù)分別為(6.12±8.21)個(gè)/HP和(6.33±8.44)個(gè)/HP,明顯小于A、C組的(11.33±9.01)個(gè)/HP和(11.59±9.11)個(gè)/HP,說明中段尿液樣本在尿常規(guī)檢測(cè)中更具實(shí)用性與有效性。對(duì)此,筆者認(rèn)為造成這一現(xiàn)象的原因可能與尿液沖洗有關(guān)。即便經(jīng)過取樣前消毒清洗,難免仍舊有少量細(xì)菌殘留,在前段尿液沖洗后,外源性的白細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)干擾得到有效控制[9],使得中段采樣尿液沉渣檢測(cè)結(jié)果更精準(zhǔn)。這一研究結(jié)論與姜小梅[10]等基本一致。
另外,筆者認(rèn)為當(dāng)前多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)出于對(duì)患者隱私及提高工作效率等方面考慮,僅將采樣工具交付患者,鮮有詳細(xì)告知其采樣步驟及注意事項(xiàng),導(dǎo)致患者采樣后樣本感染、變質(zhì),失去原有檢測(cè)價(jià)值。對(duì)此,醫(yī)護(hù)人員應(yīng)當(dāng)充當(dāng)指導(dǎo)者的角色,突顯其責(zé)任意識(shí),本著認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度,通過專業(yè)的指導(dǎo)、輕柔的話語,逐漸消除患者尿液采樣的緊張感與不安感,全程指導(dǎo)患者完成尿液取樣工作,以此提高尿樣有效率,為臨床診治提供真實(shí)有效的依據(jù)。
此外,還有部分學(xué)者提倡推廣膀胱穿刺尿細(xì)菌培養(yǎng)方案,但筆者認(rèn)為該方案雖檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性較高,但為有創(chuàng)診治方案,患者普遍接受度較低,不具有臨床廣泛推廣空間。
綜上所述,患者在尿樣采集前多次清洗會(huì)陰后取中段尿液作為檢驗(yàn)?zāi)蛞簶颖荆捎行嵘龑?duì)白細(xì)胞與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)的精確性,降低假陽性情況發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),減少誤診幾率,具有臨床推廣價(jià)值。
[
參考文獻(xiàn)]
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篇4
【關(guān)鍵詞】 尿液;白細(xì)胞酯酶試驗(yàn);鏡檢白細(xì)胞;分析
隨著尿液分析儀的廣泛使用,干化學(xué)試劑帶法已作為尿液檢驗(yàn)的常規(guī)項(xiàng)目;尿沉渣人工鏡檢耗時(shí)、費(fèi)力,以致有許多工作人員不愿意進(jìn)行此項(xiàng)檢驗(yàn)。筆者使用兩種方法聯(lián)合檢測(cè)286例尿液標(biāo)本,將其中的有關(guān)白細(xì)胞檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果報(bào)告如下。
1 材料與方法
1.1標(biāo)本來源 本院門診以及住院患者共286例,年齡6~69歲,平均29歲。其中男131例,女155例。
1.2 方法 干化學(xué)法白細(xì)胞酯酶試驗(yàn):使用Uritest-200尿液分析儀及其配套試劑,嚴(yán)格按照使用要求及說明,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。取新鮮尿液10 ml,混勻,浸入檢測(cè)試紙條,1 s后取出,放置于儀器內(nèi)自動(dòng)檢測(cè),打印報(bào)告結(jié)果。結(jié)果報(bào)告:(-)、(±)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。本次實(shí)驗(yàn),白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果(±)統(tǒng)計(jì)為陽性。鏡檢白細(xì)胞:留取新鮮尿液標(biāo)本10.0 ml于試管中,在1200~1300 r/min轉(zhuǎn)速條件下,離心 5 min,棄去上清液,留沉渣0.2 ml。充分混勻后,取20ul 滴在載玻片上,加蓋蓋玻片(1.8~1.8 cm ),使用OLYMPUS光學(xué)顯微鏡進(jìn)行檢測(cè)。先以較弱的光線,使用低倍鏡觀察全貌,再用高倍鏡仔細(xì)辨認(rèn)白細(xì)胞(WBC)。結(jié)果報(bào)告:WBC: x 個(gè)/高倍視野(HPF )[1],本次實(shí)驗(yàn),白細(xì)胞:>5個(gè)/HPF 判為陽性。將檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì),比較分析。
2 結(jié)果
見表1。
表1
286例尿液白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)與鏡檢白細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果(例)
白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)鏡檢白細(xì)胞結(jié)果
陽性陰性合計(jì)
陽性17421
陰性3262265
合計(jì) 20266286
干化學(xué)法白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)陽性率為7.3%,鏡檢白細(xì)胞陽性率為7.0%。
3 討論
兩種方法檢測(cè)陽性率相差不大,但是陰性、陽性結(jié)果之間有相互交叉的情況,這與各自不同的實(shí)驗(yàn)原理及其相關(guān)影響因素有著密切的關(guān)系。白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)原理:細(xì)胞胞質(zhì)含嗜苯胺藍(lán)顆粒的細(xì)胞,如中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等均含有白細(xì)胞酯酶,該酶能水解吲哚酚酯,生成吲哚酚和有機(jī)酸,吲哚酚可進(jìn)一步氧化形成靛藍(lán);或吲哚酚和重氮鹽發(fā)生反應(yīng)生成重氮色素,使試帶發(fā)生顏色變化,尿液分析儀檢測(cè)這種變化,從而報(bào)告出相應(yīng)的檢驗(yàn)結(jié)果[2]。鏡檢白細(xì)胞則是利用顯微鏡的放大作用,將細(xì)胞等有形成分呈現(xiàn)于鏡下(如進(jìn)行染色分析,則效果更佳),根據(jù)觀察到的情況,進(jìn)行結(jié)果報(bào)告。至于尿液白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)陽性,鏡檢白細(xì)胞陰性的結(jié)果,可能存在以下原因:(1)陰道分泌物污染可以導(dǎo)尿液白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)致假陽性[1];(2)尿液標(biāo)本放置時(shí)間過長(zhǎng)、低滲尿、高PH尿或者標(biāo)本處置不當(dāng)?shù)?尿液中的白細(xì)胞被破壞,顯微鏡下看不見,或僅見細(xì)胞碎片;(3)尿沉渣內(nèi)白細(xì)胞含量較少且未充分混勻,細(xì)胞分布不均,以至鏡檢結(jié)果陰性。這種現(xiàn)象在白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)結(jié)果為(±)的情形較易出現(xiàn)。尿液白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)結(jié)果陰性,鏡檢白細(xì)胞陽性,其可能原因有 :(1)尿液中蛋白濃度高(>5.0 g/L)、葡萄糖濃度高(大于30.0 g/L)或尿液比密度降低等均可導(dǎo)致白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)假陰性結(jié)果;(2)尿中某些藥物的影響,如尿中高濃度四環(huán)素可以導(dǎo)致白細(xì)胞酯酶試驗(yàn)假陰性;(3)試帶失效、某些因素致白細(xì)胞酯酶試劑靈敏度降低,未能顯示陽性結(jié)果;(4)尿液白細(xì)胞中的單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞不與白細(xì)胞酯酶試劑發(fā)生反應(yīng)。在腎移置患者發(fā)生排異反應(yīng)時(shí),尿中以淋巴細(xì)胞為主或其他病因引起的單核細(xì)胞增多的尿液時(shí),白細(xì)胞酯酶為陰性結(jié)果[3];(5)尿中或者某些上皮細(xì)胞、陰道滴蟲等誤判為白細(xì)胞等;(6)其他人為錯(cuò)誤等。
參 考 文 獻(xiàn)
[1] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社,2006:293-296.
篇5
關(guān)鍵詞:AVE-763尿液有形成分分析儀;鏡檢;紅細(xì)胞;白細(xì)胞
AVE-763尿液有形成分分析儀原理是通過顯微鏡對(duì)流動(dòng)計(jì)數(shù)池中尿液的有形成分的顯微放大,由主機(jī)控制攝像同步裝置對(duì)分布在視野內(nèi)的樣品攝取多幅圖像進(jìn)行分析處理,采用機(jī)器視覺技術(shù),針對(duì)不同性質(zhì)的樣品通過低倍鏡掃描陰性過篩,低倍鏡目標(biāo)定位和高倍鏡跟蹤識(shí)別對(duì)樣品中的有形成分進(jìn)行分析。該儀器具有操作簡(jiǎn)便、自動(dòng)化程度高、檢出率高等優(yōu)點(diǎn),并且較好地解決了尿沉渣難以標(biāo)準(zhǔn)化的問題,但也存在一些干擾因素[1]。本文采用AVE-763尿液有形成分分析儀和鏡檢法共分析了952例住院患者的尿液標(biāo)本,探討使用該儀器測(cè)定紅細(xì)胞和白細(xì)胞的主要干擾因素,現(xiàn)報(bào)告如下:
1資料與方法
1.1一般資料
1.1.1儀器及試劑AVE-763尿液有形成分分析儀,配套試劑(湖南愛威公司)。
1.1.2標(biāo)本來源隨機(jī)收集我院住院患者清潔中段尿952份。
1.2方法用一次性塑料尿杯隨機(jī)收集住院患者清潔中段尿,充分混勻后倒入20ml的專用試管中,嚴(yán)格按照AVE-763尿液有形成分分析儀操作方法進(jìn)行尿液分析,所有標(biāo)本均在取樣后2h內(nèi)完成檢測(cè)。
2結(jié)果
2.1紅細(xì)胞測(cè)定結(jié)果
2.1.1 AVE-763尿液有形成分分析儀檢測(cè)檢出陽性153例,陽性率16.1%。
2.1.2 人工鏡檢檢出陽性101例,陽性率10.6%。
2.2白細(xì)胞測(cè)定結(jié)果
2.2.1 AVE-763尿液有形成分分析儀檢測(cè)檢出陽性91例,陽性率9.6%。
2.2.2人工鏡檢檢出陽性72例,陽性率7.6%。
3討論
AVE-763尿液有形成分分析儀和人工鏡檢紅細(xì)胞不符合的52例標(biāo)本中,20份是有結(jié)晶引起;13份是由上皮細(xì)胞的細(xì)胞核引起;9份是由變形的白細(xì)胞引起;6份由酵母菌引起;4份由大量細(xì)菌引起。一些結(jié)晶的形狀和紅細(xì)胞的形狀非常相似,像尿酸鹽結(jié)晶,草酸鈣結(jié)晶。而上皮細(xì)胞的細(xì)胞核的形態(tài)大小也和紅細(xì)胞極為相似,酵母菌的形態(tài)大小也和紅細(xì)胞類似,但是真菌孢子及酵母菌多無色、折光性強(qiáng),邊緣厚且常連成串,大小不一,有時(shí)可見出芽[2]。一些變形的白細(xì)胞大小也和紅細(xì)胞大小差不多,從而導(dǎo)致儀器分析時(shí)誤認(rèn)從而引起假陽性和假陰性。
AVE-763尿液有形成分分析儀和人工鏡檢紅細(xì)胞不符合的19例標(biāo)本中,經(jīng)鏡檢確認(rèn)8份由小圓細(xì)胞引起;5份是有草酸鹽結(jié)晶引起; 4份是有紅細(xì)胞引起;2份由滴蟲引起。小圓上皮細(xì)胞和滴蟲與白細(xì)胞相似,一些紅細(xì)胞也和白細(xì)胞差不多,而草酸鹽結(jié)晶具有較強(qiáng)的散光強(qiáng)度,從而導(dǎo)致儀器分析時(shí)誤認(rèn)。
近些年,臨床檢驗(yàn)基本已進(jìn)入儀器檢測(cè)時(shí)代,通過顯微鏡人工鏡檢的傳統(tǒng)手工時(shí)代已逐步被取代[3,4]。自動(dòng)化儀器分析法只能起到初步篩查作用,尿液沉渣顯微鏡檢查是尿液分析中不可缺少的檢查手段,標(biāo)準(zhǔn)化的顯微鏡檢查仍然是尿液沉渣分析的金標(biāo)準(zhǔn),具有重要的臨床價(jià)值[5]。
綜上所述,雖然AVE-763尿液有形成分分析儀有很多優(yōu)點(diǎn),但尿液有形成分復(fù)雜,所以儀器根本就不可能完全代替人工鏡檢,故在實(shí)際工作中必須對(duì)一些陽性標(biāo)本進(jìn)行人工審核鏡檢復(fù)查,避免出現(xiàn)一些有形成分的假陽性和假陰性,再發(fā)報(bào)告,以確保提高尿液沉渣檢測(cè)的質(zhì)量保證。
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篇6
[關(guān)鍵詞] 尿沉渣分析儀;顯微鏡鏡檢;假陽性;假陰性
[中圖分類號(hào)] R446.12 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721(2012)03(c)-0077-02
Study on the interference factors of detection of WBC,RBC,CAST by UF-100 urinary sediment analyzer
LIU Weiping YIN Minggang ZHONG Huixiu
Laboratory Department of Zigong First People's Hospital in Sichuan Province, Zigong 643000, China
[Abstract] Objective To discuss the interference factors of detection of WBC, RBC, CAST by UF-100 urinary sediment analyzer. Methods 8 950 cases of midpiece morning urine samples were dectected by UF-100 urinary sediment analyzer and compared with manual microscopy. Results The main false positive factor of detection for WBC, RBC, CAST was ammonium salts (accounts for 35.3%), calcium oxalate crystals (accounts for 40.1%), and viscose rayon (accounts for 38.1%) respectively. The main false negative factor of detection for WBC, RBC, CAST was WBC accumulation (accounts for 59.2%), shadow RBC (accounts for 34.5%) and hyaline cast (accounts for 100.0%) respectively. Conclusion Many interference factors exist in urine for detection of WBC, RBC, CAST by UF-100 urinary sediment analyzer. Therefore, microscopy review standards and result verifying system are supposed to be established to avoid clinical misdiagnosis and mistreatment.
[Key words] Urinary sediment analyzer; Microscopy; False positive; False negative
UF-100型全自動(dòng)尿沉渣分析儀是采用流式細(xì)胞技術(shù)和電阻抗技術(shù),利用細(xì)胞染色技術(shù)對(duì)細(xì)胞核和細(xì)胞膜等成分進(jìn)行染色,根據(jù)尿中各類有形成分產(chǎn)生的散射光脈沖和熒光脈沖的強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間的長(zhǎng)短以及電阻抗信號(hào)的大小來區(qū)分尿內(nèi)紅細(xì)胞(RBC)、白細(xì)胞(WBC)、管型(CAST)等有形成分。但由于尿液有形成分復(fù)雜,影響因素很多,且各檢測(cè)指標(biāo)的形態(tài)、大小、染色性方面存在相似之處,因此該儀器并不能嚴(yán)格區(qū)分尿液各類有形成分,常導(dǎo)致某些檢測(cè)項(xiàng)目存在一定程度的結(jié)果誤判,可出現(xiàn)一定的假陽性和假陰性。如果不予以及時(shí)發(fā)現(xiàn)和糾正,將會(huì)誤導(dǎo)臨床對(duì)疾病的診斷和治療。為了避免臨床誤診和漏診,筆者對(duì)該儀器檢測(cè)的干擾因素進(jìn)行了探討和分析。
1 材料與方法
1.1標(biāo)本來源
隨機(jī)收集2011年6~9月本院住院患者中段晨尿共8 950份,其中,男5 461例,女3 489例。年齡1~86歲。以顯微鏡法作為金標(biāo)準(zhǔn),WBC、RBC、CAST假陽性標(biāo)本數(shù)分別為354、506、569例;假陰性標(biāo)本數(shù)分別為103、151、16例,以假陽性和假陰性標(biāo)本作為研究對(duì)象。
1.2 儀器及試劑
UF-100型尿沉渣全自動(dòng)分析儀(以下簡(jiǎn)稱UF-100) 及配套試劑(日本Sysme公司)。
1.3 方法
用潔凈尿杯收集住院患者中段晨尿,充分混勻后倒入干凈試管約12 mL,先用U F-100進(jìn)行分析,剩余尿液取10 mL做顯微鏡檢查。顯微鏡檢查嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[1]執(zhí)行,每份標(biāo)本均在2 h內(nèi)完成檢測(cè)。UF-100 檢測(cè)結(jié)果按照本實(shí)驗(yàn)室建立的參考范圍進(jìn)行判斷,即紅細(xì)胞
2 結(jié)果
2.1 UF-100檢測(cè)尿液WBC、RBC和CAST的假陽性干擾因素及其分布
導(dǎo)致WBC檢測(cè)假陽性的因素:非晶形鹽類占35.3%(125/354)、小圓上皮細(xì)胞占28.8%(102/354)、酵母菌占18.9%(67/354)、破碎上皮細(xì)胞占15.0%(53/354)、滴蟲2.0%(7/354)。RBC檢測(cè)假陽性的因素分別為:草酸鈣結(jié)晶占40.1%(203/506)、酵母菌占31.4%(159/506)、細(xì)菌占14.2%(72/506)、其他結(jié)晶及非晶形鹽類占10.7%(54/506)、脂肪滴占1.6%(8/506)、卵磷脂小體占1.4%(7/506)、占0.6%(3/506)。CAST假陽性的因素:黏液絲占38.1%(217/569),類圓柱體占26.0%(148/569),上皮細(xì)胞占18.3%(104/569),膿球占16.0%(91/569),菌絲及酵母菌聚集物占1.6%(9/569)
2.2 UF-100檢測(cè)尿液WBC、RBC和CAST的假陰性干擾因素及其分布
導(dǎo)致WBC檢測(cè)出現(xiàn)假陰性的因素有白細(xì)胞聚集和白細(xì)胞粘附,分別占59.2%(61/103)和40.8%(42/103)。導(dǎo)致RBC假陰性的因素:影紅細(xì)胞占34.5%(52/151),紅細(xì)胞高度異形性占31.1%(47/151),紅細(xì)胞碎片占19.2%(29/151)和紅細(xì)胞聚集占15.2%(23/151)。管型假陰性的因素為少量透明管型,占100.0%(16/16)。
3 討論
尿沉渣分析儀是尿液分析中不可缺少的重要篩查儀器,尿液分析結(jié)果的準(zhǔn)確性直接響臨床診斷與鑒別診斷[2]。但是由于儀器本身的局限性,尿液成分復(fù)雜,有諸多影響檢測(cè)的因素,可導(dǎo)致一定的假陽性和假陰性結(jié)果。因此,必須用顯微鏡法對(duì)可疑結(jié)果進(jìn)行復(fù)查確認(rèn)。
本研究結(jié)果表明,白細(xì)胞假陽性的首位因素是非晶形鹽類結(jié)晶包括磷酸鹽和尿酸鹽,占35.3%(125/354),酸性尿液中以非晶形尿酸鹽為主,堿性尿和中性尿中以非晶形磷酸鹽為主。其他依次為小圓上皮細(xì)胞、酵母菌、破碎上皮細(xì)胞和滴蟲。干擾機(jī)制可能是尿中非晶形尿酸鹽或磷酸鹽、小圓上皮細(xì)胞、破碎上皮細(xì)胞等成分的大小及染色程度與白細(xì)胞類似,產(chǎn)生的散射光、熒光及電阻抗信號(hào)與WBC部分重疊[3];酵母菌含有RNA和DNA,熒光強(qiáng)度較高,而干擾白細(xì)胞計(jì)數(shù)。導(dǎo)致白細(xì)胞檢測(cè)假陰性的主要因素有白細(xì)胞聚集和白細(xì)胞黏附。
導(dǎo)致紅細(xì)胞假陽性最主要的因素是草酸鈣結(jié)晶,占40.1%(203/506),干擾機(jī)制為UF-100稀釋液中螯合劑和加溫處理并不能消除尿液標(biāo)本中的草酸鈣結(jié)晶及其他某些鹽類結(jié)晶,而部分草酸鈣結(jié)晶大小與紅細(xì)胞類似而干擾UF-100的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)[4];酵母菌大小形態(tài)與紅細(xì)胞相似而可導(dǎo)致紅細(xì)胞假性增高。細(xì)菌也可引起紅細(xì)胞假陽性,可能是由于細(xì)菌濃度過高,成堆細(xì)菌顆粒與紅細(xì)胞相似[5]。其他結(jié)晶及非晶形鹽類、脂肪滴、卵磷脂小體和等由于染色性、散射光信號(hào)也可干擾RBC檢測(cè)而出現(xiàn)假陽性。導(dǎo)致紅細(xì)胞假陰性最主要的因素是影紅細(xì)胞,其次為紅細(xì)胞高度異形性、紅細(xì)胞碎片和紅細(xì)胞聚集。而假陰性的圖像主要是由于紅細(xì)胞出現(xiàn)變形、皺縮、膨脹等形態(tài)改變,儀器發(fā)生漏檢或?qū)⑵錃w于未分類成分[6]。
導(dǎo)致管型假陽性的首位因素是黏液絲,占38.1%(217/569),其他因素依次為類圓柱體、上皮細(xì)胞、膿球、菌絲及酵母菌聚集物。其干擾機(jī)制主要是由于這些物質(zhì)本身或聚集后形成物的形態(tài)或大小與管型類似,產(chǎn)生的熒光信號(hào)、散射光信號(hào)等與管型接近而導(dǎo)致儀器誤判出現(xiàn)假陽性。
因此,臨床實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行尿沉渣分析時(shí)應(yīng)該制定適合實(shí)驗(yàn)室實(shí)際的鏡檢復(fù)查標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)建立結(jié)果審核制度[7]。也就是說,對(duì)于WBC、RBC、CAST等主要尿沉渣指標(biāo)陽性,或與干化學(xué)分析結(jié)果矛盾的標(biāo)本,應(yīng)該進(jìn)行離心鏡檢,確認(rèn)后再出報(bào)告,以減少假陽性和假陰性結(jié)果對(duì)臨床診治疾病造成誤診和漏診。
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篇7
【關(guān)鍵詞】 蛋白尿; 腎病綜合征; 膜性腎小球腎炎; 動(dòng)物實(shí)驗(yàn); 綜述
蛋白尿是腎病綜合征最常見的表現(xiàn)。人們?cè)缫颜J(rèn)識(shí)到蛋白尿的發(fā)生與腎小球?yàn)V過屏障的異常有密切關(guān)系。腎小球?yàn)V過屏障結(jié)構(gòu)由內(nèi)向外依次為毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、腎小球基底膜(Glomerular basement memberane,GBM)以及位于外側(cè)足細(xì)胞(Podocyte)與足突之間的裂孔隔膜(Slit diaphragm)。由于內(nèi)皮細(xì)胞窗孔直徑較大,幾乎不能限制蛋白質(zhì)的濾過,但其表面覆蓋的陰性蛋白多糖可能起到一定的電荷屏障效應(yīng)。GBM通過表面豐富陰離子電荷和纖維索帶網(wǎng)絡(luò)樣的小孔徑篩網(wǎng)結(jié)構(gòu)發(fā)揮電荷屏障和孔徑屏障的功能。臟層上皮細(xì)胞即足細(xì)胞是位于GBM外側(cè)的一種終末期分化細(xì)胞,其構(gòu)成了避免機(jī)體蛋白丟失的最后一道屏障,足細(xì)胞損傷必然伴隨大量蛋白尿。
在伴有大量蛋白尿的人類腎病和腎病動(dòng)物模型中,足突融合是最主要和最常見的形態(tài)改變,同時(shí)也是一些疾病(如微小病變腎?。┑奶卣餍孕螒B(tài)改變。足細(xì)胞的異常在各種類型的腎病綜合征蛋白尿產(chǎn)生及發(fā)展過程中起重要作用[1]。電子顯微鏡掃描提示被稱為融合的足細(xì)胞形狀改變由指突交錯(cuò)狀足突逐漸均一化,導(dǎo)致細(xì)胞看起來扁平拉長(zhǎng)。這不是相臨細(xì)胞的融合,更準(zhǔn)確說,是每個(gè)足細(xì)胞回縮、變短、增寬。與正常細(xì)胞相比,足突長(zhǎng)度減少70%,寬度增加60%,結(jié)果不正常細(xì)胞形狀包括變平和擴(kuò)展細(xì)胞,這就是足突融合[2]。足突融合不是一個(gè)簡(jiǎn)單被動(dòng)現(xiàn)象,而是一個(gè)需要消耗能量以及起始于足細(xì)胞骨架改變后發(fā)生的積極的過程。
近年來,隨著分子生物學(xué)技術(shù)的飛躍發(fā)展,已經(jīng)相繼發(fā)現(xiàn)多個(gè)特異的由腎小球足細(xì)胞表達(dá)的蛋白分子,將其稱為足細(xì)胞相關(guān)分子(Podocyte associated molecules)。這些分子不但由足細(xì)胞特異表達(dá),而且對(duì)維系正常的足細(xì)胞形態(tài)和功能起著至關(guān)重要的作用。依據(jù)這些分子在足細(xì)胞足突的分布而將其分為三類:主要分布于足突頂部(Apical area)的分子,即足突面向尿囊腔部分所分布的分子;足突裂孔隔膜部的分子,即主要分布在足細(xì)胞足突的裂孔隔膜上的分子;足突基底部分子,即分布在足突與腎小球基膜相附著部位的分子。此外,也有研究者將足細(xì)胞內(nèi)大量的骨架蛋白,尤其是導(dǎo)致蛋白尿或腎病發(fā)生的一些足細(xì)胞表達(dá)的細(xì)胞骨架蛋白分子也歸屬為足細(xì)胞分子。這些分子直接或間接導(dǎo)致或參與足細(xì)胞足突融合及相關(guān)的病理生理過程,導(dǎo)致蛋白尿。Mundel教授認(rèn)為引起足突融合的可能機(jī)制可歸納為如下幾點(diǎn):首先是病變直接干擾了足細(xì)胞的細(xì)胞骨架及其與αactinin4的聯(lián)系破壞;其次是干擾了足突與基膜之間的相互作用;第三是足細(xì)胞頂區(qū)受損,負(fù)電荷屏障破壞;第四是損傷了裂孔隔膜復(fù)合體及其相關(guān)的脂閥(Lipid rafts)[3]。本文將就這些足細(xì)胞相關(guān)分子與足突融合的研究作一些介紹。
1 足突基底部分子與足突融合
足突基底部分子在維持細(xì)胞形狀上起重要作用,它能維持足突與基膜的相互作用和足突的正確定位,其中最主要的分子是α3β1整合素(α3β1integrins)以及Dystroglycan復(fù)合體。已有的研究顯示足細(xì)胞在基膜上的附著破壞能引起足突融合以及足突自基膜脫離或足細(xì)胞的胞體收縮,從而導(dǎo)致濾過屏障破壞引起蛋白尿。黏附分子α3β1整合素是足細(xì)胞貼附于GBM的主要受體,通過α3β1整合素足細(xì)胞貼附于GBM的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白上[4]。文獻(xiàn)報(bào)道,培養(yǎng)的大鼠足細(xì)胞以β1整合素依賴方式與GBM的主要成分Ⅳ型膠原和層黏連蛋白相黏附[5],而在胞漿區(qū)的異二聚體則與細(xì)胞骨架或細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白如Talin,Vinculin,αactinin等相互作用[3]。
α3整合素基因敲除小鼠出現(xiàn)了GBM結(jié)構(gòu)紊亂及正常足突形成缺失[6],抗β整合素抗體可引起蛋白尿的發(fā)生[7],提示整合素在維持正常足細(xì)胞功能中起著重要作用。整合素連接激酶(Integrinlinked kinase,ILK)是一種與整合素相互作用的絲氨酸及蘇氨酸蛋白激酶。腎小球中ILK主要在足細(xì)胞上表達(dá),它通過調(diào)控由整合素介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而影響細(xì)胞之間、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的相互作用,從而調(diào)節(jié)足細(xì)胞生存[810]。在芬蘭型遺傳型腎病綜合征患者、血清腎毒性模型和生長(zhǎng)激素轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型足細(xì)胞中,ILK表達(dá)明顯上調(diào)[11]。ILK過表達(dá)可使足細(xì)胞發(fā)生去分化、高度增生及細(xì)胞骨架重排,并與基質(zhì)脫離。提示ILK表達(dá)增多促進(jìn)并參與了足細(xì)胞損害,可能是導(dǎo)致蛋白尿產(chǎn)生的原因。Dstroglycans(DG)是另一類連接細(xì)胞骨架的細(xì)胞外基質(zhì)受體,介導(dǎo)足細(xì)胞與GBM的黏附[12],它是肌細(xì)胞增強(qiáng)蛋白(Dystrophin)糖蛋白復(fù)合物的重要成員之一。DG作為一類大的前體蛋白而被合成,已證實(shí)它在包括腎臟的許多組織中與基底膜相連α2,βDG與α3β1整合素具有同樣的定位。DG與GBM上的層黏連蛋白、基底膜蛋白多糖相連。在足細(xì)胞融合關(guān)聯(lián)疾病中,微小病變腎病DG水平下降,在局灶節(jié)段腎小球硬化中DG以結(jié)成束的方式重新分布[13]。Kojima等[14]用活性氧損傷足細(xì)胞以及采用魚精蛋白直接分離DG的黏附,最后導(dǎo)致了足突融合的發(fā)生。
2 足細(xì)胞頂區(qū)表面分子與足突融合
足細(xì)胞除了作為靜態(tài)分子篩阻止蛋白尿外,也可以以電荷屏障的方式阻止帶陰電荷的蛋白通過。而這主要?dú)w功于足細(xì)胞頂區(qū)表面分子Podocalyxin和Podoplanin。足細(xì)胞陰電荷水平下降或丟失會(huì)導(dǎo)致足突融合與蛋白尿[15]。Podocalyxin可與足突Factin相互作用以維持足細(xì)胞構(gòu)象穩(wěn)定,這種作用可能是通過Ezrin蛋白介導(dǎo)的[16]。以足突融合為主要表現(xiàn)的嘌呤霉素腎炎模型腎臟Podoplanin的表達(dá)明顯下降[17]。同時(shí)也有研究證實(shí)給大鼠注射抗Podoplanin抗體會(huì)導(dǎo)致足細(xì)胞足突融合和蛋白尿[18]。
3 足細(xì)胞骨架蛋白與足突融合
足細(xì)胞有豐富的肌動(dòng)蛋白(Actin)細(xì)胞骨架。肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架能使足細(xì)胞不斷動(dòng)態(tài)地改變形狀,同時(shí)行使靜態(tài)的功能[19]。足細(xì)胞的細(xì)胞骨架由3種主要成分組成,即微管(Microtubules,直徑24 nm),中間絲(Intermediate filaments,直徑10 nm)和微絲(Microfilaments,直徑7~9 nm)[19]。足細(xì)胞細(xì)胞骨架對(duì)維持足細(xì)胞正常的形態(tài)有重要的作用,同時(shí)也對(duì)維持跨膜蛋白和裂孔隔膜的正常位置有重要作用。在結(jié)構(gòu)破壞的足突內(nèi),Actin網(wǎng)架結(jié)構(gòu)(Meshwork)發(fā)生顯著改變,而足細(xì)胞Actin網(wǎng)架結(jié)構(gòu)的變化是足突融合、消失和蛋白尿發(fā)生的先決條件[20]。
微管是由球形的α和β微管蛋白亞單位組成的異二聚體,它們對(duì)維持主突起的正常結(jié)構(gòu)有重要作用,同時(shí)它們對(duì)足突形成也有重要的作用[21]。成熟的足細(xì)胞在細(xì)胞體和主突起中均表達(dá)中間絲蛋白Vimentin和Desmin[22]。其中,Desmin只在大鼠腎小球表達(dá),在嘌呤霉素腎病足突融合中表達(dá)明顯增高[22];Vimentin可能在足突形成中起必不可少的作用[23]。與細(xì)胞體和主突起的細(xì)胞骨架不同,微絲是細(xì)胞足突主要骨架組成部分,最主要的分子組成是纖維狀肌動(dòng)蛋白(Factin),其相關(guān)蛋白αactinin4,Synaptopodin將Factin交聯(lián)在一起[24]。Factin,αactinin4和Synaptopodin之間在結(jié)構(gòu)和功能上是相互支撐、相互影響的。Factin是一種有極性的機(jī)能結(jié)構(gòu),這種結(jié)構(gòu)使它可以迅速的分支,延伸和解體。Drenckhahn和Franke提出的足突細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)模式是由Factin,αactinin4以及肌動(dòng)蛋白Myosin形成的環(huán)狀微絲束[25]。αactinin4分子是一種Actin微絲交聯(lián)蛋白,可以將松散的肌動(dòng)蛋白交聯(lián)成具有收縮能力的纖維束,對(duì)于錨定纖維束至胞漿膜具有輔助作用。其編碼基因ACTN4的突變引起常染色體顯性遺傳性局灶節(jié)段性腎小球硬化(Focal segmental glomerulosclerosis,F(xiàn)SGS)[26]。在實(shí)驗(yàn)性腎病模型中,它的增加可促使足突融合[27];對(duì)轉(zhuǎn)基因小鼠的研究中進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),表達(dá)突變?chǔ)联瞐ctinin4的小鼠有足突融合以及FSGS的表現(xiàn)[28]。Synaptopodin是一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白,它與足突的actin微絲相連,并且可能有調(diào)節(jié)足突形狀和其運(yùn)動(dòng)的能力[29];一項(xiàng)在兒童患者中的研究也發(fā)現(xiàn),在微小病變腎病、先天性腎病及FSGS患者中Synaptopodin表達(dá)減少[30]。這些研究均直接或間接的說明了骨架蛋白在維持足細(xì)胞形態(tài)中發(fā)揮重要作用,并且以不同的作用方式參與了足突融合。
裂孔隔膜是連接足細(xì)胞相鄰足突的蛋白復(fù)合體。在腎小球疾病伴有足突融合,往往伴有裂孔隔膜的消失。近年來研究發(fā)現(xiàn),裂孔隔膜是由多個(gè)分子組成的復(fù)合體樣結(jié)構(gòu),目前已認(rèn)識(shí)的分子有Nephrin,Podocin,CD2AP,F(xiàn)AT,Pcadherin,Neph13及ZO1等。裂孔隔膜構(gòu)成分子的表達(dá)異常能不同程度的影響裂孔隔膜的完整性,且部分分子的改變與足突融合關(guān)系密切。Benzing和Walz的研究提示裂孔隔膜蛋白不是靜止的,而是經(jīng)常參與了信號(hào)傳導(dǎo)的過程。裂孔隔膜蛋白發(fā)送信號(hào)控制足細(xì)胞的表形、生存、Actin骨架[31]。
4 裂孔隔膜蛋白與足突融合
裂孔隔膜蛋白控制足細(xì)胞形狀可能最終歸于Actin骨架的改變。Nephrin,Podocin與Actin存在著相互作用,注射Nephrin和NEPH1的抗血清可引起補(bǔ)體非依賴性蛋白尿和細(xì)胞骨架的異常,表明SD復(fù)合體的破壞可嚴(yán)重影響Actin細(xì)胞骨架的完整并導(dǎo)致蛋白尿的發(fā)生[32,33]。盡管這些結(jié)果表明SD的信號(hào)傳導(dǎo)對(duì)于細(xì)胞骨架的重塑(Remodeling)和足細(xì)胞形態(tài)的完整起重要作用,但是涉及到向Actin網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)傳遞信號(hào)的SD分子的效應(yīng)蛋白(Effectors)及信號(hào)傳導(dǎo)通路目前并不清楚。已有研究表明參與SD與細(xì)胞骨架間聯(lián)系的接頭蛋白有CD2AP[34],F(xiàn)AT[35],CASK[36]和ZO1[37]。CD2AP不但能與Nephrin的胞內(nèi)功能域相互作用,而且可和Actin相互結(jié)合,可能起到將Nephrin錨定在Actin細(xì)胞骨架上的作用[38,39]。近來發(fā)現(xiàn)的并被定位在足細(xì)胞SD的Densin180可能是SD分子與細(xì)胞骨架之間的重要連接蛋白,因?yàn)橛醒芯勘砻髟谏窠?jīng)元細(xì)胞αactinin可和Densin180相互結(jié)合和作用[40]。此外,新的SD分子鈣調(diào)素依賴絲氨酸蛋白激酶可與Nephrin相互作用并能穩(wěn)定Nephrincadherin復(fù)合體進(jìn)而將其連接到Actin細(xì)胞骨架[36]。FAT1同樣是聚合Actin的組織者,F(xiàn)AT可和ENA/VASP蛋白結(jié)合,而ENA/VASP蛋白直接控制Actin的解聚和聚合[41]。ZO1位于SD插人足突處的胞質(zhì)側(cè)。最近的功能研究表明ZO1除信號(hào)傳導(dǎo)功能外,ZO1還能和Actin細(xì)胞骨架相互作用[42]。盡管ZO1和Actin相互作用的功能意義在體內(nèi)還沒有得到證實(shí),但是ZO1能把NEPH1及其相關(guān)結(jié)合蛋白連接到Actin細(xì)胞骨架,而這對(duì)于足突結(jié)構(gòu)的完整是尤其重要的。因此,SD作為靜態(tài)分子篩及高度動(dòng)態(tài)的功能復(fù)合體,其信號(hào)傳導(dǎo)及對(duì)細(xì)胞骨架的作用、與細(xì)胞骨架的聯(lián)系,對(duì)于維持足細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)及腎小球?yàn)V過屏障的完整功能起關(guān)鍵作用。當(dāng)裂孔隔膜蛋白受損或變異后,除丟失靜態(tài)分子篩外,還有Actin排列的損傷(比如:Actin結(jié)構(gòu)破壞),最終足突融合和蛋白尿。
因此,足突融合是一個(gè)由復(fù)雜機(jī)制構(gòu)成的病理過程,足細(xì)胞分子作為其中一個(gè)重要環(huán)節(jié)參與了足突融合。從上述研究也可以看出,足細(xì)胞許多區(qū)域的分子均與細(xì)胞骨架有直接或間接的相互作用,無論引起足突形態(tài)變化的因素是什么或損傷的部位在何處,大部分情況下均可先影響足細(xì)胞骨架而后引起足突融合的形態(tài)改變,同時(shí)足細(xì)胞分子的改變也能以不同的方式與細(xì)胞骨架發(fā)生作用從而引起足突融合。因此,可以說以肌動(dòng)蛋白為中心的細(xì)胞骨架是各種損傷因素作用于足細(xì)胞引起足突融合的“共同的最后道路”(Common finalpathway)。這些足細(xì)胞分子的研究將為早日明確足突融合的發(fā)生機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
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篇8
【摘要】 目的 觀察全反式維甲酸(ATRA)對(duì)早期和臨床糖尿病腎?。―N)患者尿蛋白和單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)的影響,探討ATRA對(duì)DN的療效。方法 根據(jù)24 h尿微量白蛋白(UMA)的測(cè)定結(jié)果,將2型DN患者分為早期蛋白尿組和臨床蛋白尿組。各組再隨機(jī)分為2組:血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)治療組和ATRA+ARB治療組。在為期24 w的研究中,所有患者均接受纈沙坦80 mg/d。ATRA+ARB治療組加服ATRA 10 mg/d。患者每周監(jiān)測(cè)24 h尿蛋白,進(jìn)行常規(guī)生化檢查,治療前后測(cè)定UMA、尿MCP1、尿肌酐(Ucr)。24 h尿蛋白采用免疫比濁法測(cè)定,UMA和尿MCP1采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定,Ucr采用苦味酸法測(cè)定。結(jié)果 兩治療組不同時(shí)期DN患者,治療前后空腹血糖(Glu)及腎功能變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。早期和臨床DN患者,經(jīng)治療后24 h尿蛋白、UMA/Ucr和尿MCP1/Ucr水平較治療前均明顯下降(P<0.01);ATRA+ARB組與ARB組兩組治療后的情況相比較,前者的24 h尿蛋白、UMA/Ucr和尿MCP1/Ucr水平更低(P<0.05)。治療期間,未觀察到與ATRA明顯相關(guān)的嚴(yán)重不良反應(yīng)。結(jié)論 在應(yīng)用ARB藥物的基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用ATRA能夠更加有效的降低患者的蛋白尿和抑制包括MCP1在內(nèi)的炎性介質(zhì),從而延緩DN的進(jìn)展。
【關(guān)鍵詞】 全反式維甲酸;糖尿病腎病;蛋白尿;單核細(xì)胞趨化蛋白1
蛋白尿既是糖尿病腎病(DN)特征性的臨床表現(xiàn),又是導(dǎo)致腎功能惡化的重要因素,其排出量的多少一定程度上反映了病情的嚴(yán)重程度〔1,2〕。但臨床出現(xiàn)顯性蛋白尿后,DN病變已不可逆轉(zhuǎn),病人預(yù)后較差〔2〕。有研究表明單核細(xì)胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractant protein1,MCP1)可以通過趨化單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞,產(chǎn)生生長(zhǎng)因子等多種介質(zhì)參與腎臟炎癥反應(yīng),使細(xì)胞外基質(zhì)在腎小球和腎小管中堆積,參與DN的發(fā)生、發(fā)展〔3,4〕。同時(shí)MCP1在DN患者尿中排泄增加早于微量白蛋白尿的出現(xiàn)〔5〕。因此,尿MCP1可以作為早期DN的診斷新方法和治療靶點(diǎn)。全反式維甲酸(all trans retinoic acid,ATRA)是維生素A的衍生物,具有調(diào)控生物細(xì)胞增殖、分化的作用。最近的研究發(fā)現(xiàn)ATRA可以保護(hù)腎小球?yàn)V過屏障,減少尿蛋白排泄率,同時(shí)具有調(diào)節(jié)多種生長(zhǎng)因子,抑制細(xì)胞外基質(zhì)合成的作用,可能影響DN的發(fā)生和發(fā)展〔6〕。本文旨在探討ATRA對(duì)DN患者尿蛋白和MCP1的影響,為DN的治療探索新的方法。
1 對(duì)象與方法
1.1 對(duì)象
隨機(jī)選取2007年4月至2008年7月我院腎內(nèi)科及內(nèi)分泌科住院及門診的2型糖尿?。═2DM)患者60例,糖尿病病程(12.4±2.6)年,平均年齡(56.0±4.1)歲,均符合1999年WHO制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)。入選患者24 h尿蛋白<3.5 g,血肌酐(Scr)<442 μmol/L。根據(jù)患者連續(xù)3次24 h尿微量白蛋白(UMA)測(cè)定結(jié)果,將患者分為2組:早期蛋白尿組(24 h UMA 30~300 mg,n=28);臨床蛋白尿組:(24 h UMA>300 mg,n=32)。各組再隨機(jī)平均分為2個(gè)治療亞組:血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)治療亞組和ATRA+ARB治療亞組。研究中血壓控制不佳可以加用鈣離子拮抗劑、β受體阻滯劑等降壓藥?;颊呔駹顟B(tài)正常,同意參與試驗(yàn)研究,并簽署書面知情同意書。排除腎血管狹窄、尿路感染、糖尿病酮癥酸中毒、糖尿病非酮癥高滲性昏迷及乳酸酸中毒、急性心肌梗死、急、慢性心力衰竭、急、慢性心律失常、不穩(wěn)定心絞痛、結(jié)締組織疾病等,近期未服用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)或ARB類藥物。兩組別各治療組病程、年齡、男/女、血壓、空腹血糖(Glu)、Scr無顯著差異,具有可比性(見表1,表2)。表1 早期蛋白尿組不同治療亞組患者一般情況比較(略)表2 臨床蛋白尿組不同治療亞組患者一般情況比較(略)
1.2 方法
所有患者均接受纈沙坦80 mg/d,ATRA+ARB治療組加服ATRA 10 mg/d,共24 w?;颊呙咳毡O(jiān)測(cè)Glu、血壓并記錄不良事件。每周監(jiān)測(cè)血、尿常規(guī)、24 h尿蛋白、尿素氮(BUN)、Scr、電解質(zhì)、肝功能、血脂。治療前后測(cè)定(UMA/尿肌酐(urine creatinine,Ucr)、尿MCP1/Ucr。24h尿蛋白采用免疫比濁法測(cè)定,Ucr采用苦味酸法測(cè)定,UMA和尿MCP1采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定并計(jì)算UMA /Ucr和尿MCP1/Ucr比值,各化驗(yàn)指標(biāo)的測(cè)定均按試劑盒說明進(jìn)行操作。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
數(shù)據(jù)以x±s表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn)。
2 結(jié) 果
2.1 T2DM患者早期蛋白尿組不同亞組檢測(cè)結(jié)果
兩治療組患者治療前后腎功能無明顯差異,治療后Glu較治療前均有下降趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后的24 h尿蛋白、UMA/Ucr及尿MCP1/Ucr水平均較治療前明顯下降(P<0.01),且ATRA+ARB組較ARB組治療后24 h尿蛋白和UMA/Ucr、尿MCP1/Ucr水平更低(P<0.05)。(見表3)。表3 T2DM患者早期蛋白尿組檢測(cè)結(jié)果(略)
2.2 T2DM患者臨床蛋白尿組不同亞組檢測(cè)結(jié)果
兩組患者治療后Glu和腎功能指標(biāo)較治療前均有下降趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組患者治療后的24 h尿蛋白和UMA/Ucr、尿MCP1/Ucr水平較治療前明顯下降(P<0.01);ATRA+ARB組較ARB組治療后,24 h尿蛋白和UMA/Ucr、尿MCP1/Ucr水平更低(P<0.05)。(見表4)。表4 T2DM臨床蛋白尿組化驗(yàn)指標(biāo)結(jié)果(略)
2.3 各治療組出現(xiàn)的不良反應(yīng)比較
各治療組患者血常規(guī)、肝功能、血離子在治療期間均未發(fā)現(xiàn)異常。ATRA+ARB治療組共出現(xiàn)6例消化系統(tǒng)不適癥狀,表現(xiàn)為厭食、惡心、腹脹,給予適量胃腸動(dòng)力藥物后緩解。
3 討 論
DN是糖尿病常見的慢性并發(fā)癥,是影響糖尿病患者預(yù)后的主要因素之一。DN的發(fā)生及發(fā)展是多因素綜合作用的結(jié)果。近年來許多實(shí)驗(yàn)和臨床資料均提示除了腎血流動(dòng)力學(xué)異常、糖化終產(chǎn)物形成外,DN的進(jìn)展還與腎小球?yàn)V過屏障的改變及腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)〔1〕。
蛋白尿排泄量的多少在一定程度上可以反映腎小球?yàn)V過屏障對(duì)血漿蛋白通透能力的高低。有學(xué)者研究表明在高糖刺激下,構(gòu)成足細(xì)胞裂孔膜的nephrin、pcadherin蛋白在早期DN腎小球內(nèi)的表達(dá)降低〔7〕,從而干擾了腎小球基底膜(GBM)結(jié)構(gòu)和功能上的整合性,是DN形成蛋白尿的原因之一。
MCP1是趨化因子家族的一個(gè)主營(yíng)成員,可由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等機(jī)體多種細(xì)胞合成和分泌,具有激活和誘導(dǎo)單核細(xì)胞趨化的雙重功能〔8,9〕。正常人的腎組織中僅有少量MCP1表達(dá),對(duì)保持正常的腎臟功能是必需的。在DN時(shí),升高的血糖和糖基化產(chǎn)物,局部的腎素血管緊張素系統(tǒng)激活以及增多的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子等細(xì)胞因子刺激MCP1生成增加〔10~12〕。過多的MCP1使腎小球中單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),細(xì)胞外基質(zhì)在腎小球和腎小管中堆積,從而參與DN腎小球硬化、腎間質(zhì)纖維化形成以及腎功能的惡化。因此,抑制MCP1的表達(dá)可阻止或延緩DN的進(jìn)展。
ATRA是一種天然的維生素A活性代謝產(chǎn)物,對(duì)多種組織、細(xì)胞有很強(qiáng)的誘導(dǎo)分化和調(diào)控增生的作用。既往主要用于以增生為主的各類腫瘤和皮膚病的治療。近年來研究發(fā)現(xiàn),ATRA對(duì)部分腎臟病亦有治療作用。本實(shí)驗(yàn)室前期研究及國(guó)外學(xué)者實(shí)驗(yàn)證實(shí)ATRA可以激活nephrin、pcadherin的啟動(dòng)子,從轉(zhuǎn)錄水平上使裂孔膜構(gòu)成蛋白表達(dá)升高〔13,14〕,從而阻止蛋白尿的形成。另有學(xué)者研究表明ATRA可以通過下調(diào)MCP1,抑制腎組織中白細(xì)胞的浸潤(rùn),對(duì)DN患者的腎臟起到保護(hù)作用〔15〕。
在本臨床研究中,T2DM患者早期蛋白尿組與臨床蛋白尿組兩組數(shù)據(jù)均顯示,經(jīng)過24 w治療后,ARB治療組患者的24 h尿蛋白、UMA/Ucr和尿MCP1/Ucr水平均明顯下降。證實(shí)ARB藥物能夠減輕患者的蛋白尿,并在一定程度上降低尿MCP1水平,與國(guó)內(nèi)其他學(xué)者報(bào)道相一致〔16〕。同時(shí)發(fā)現(xiàn),與ARB組治療情況相比較,ATRA+ARB組各項(xiàng)指標(biāo)下降更加明顯,提示在應(yīng)用ARB藥物的基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用ATRA能夠更加有效的降低患者的蛋白尿和抑制包括MCP1在內(nèi)的炎性介質(zhì),延緩DN的進(jìn)展。在24 w的臨床研究中,尚未觀察到與ATRA明顯相關(guān)的嚴(yán)重不良反應(yīng),說明ATRA用于治療DN較安全。
本研究結(jié)果證實(shí),ATRA可能通過降低DN患者的蛋白尿和抑制炎性介質(zhì)MCP1延緩DN的發(fā)展,ATRA聯(lián)合ARB治療可能優(yōu)于ARB治療DN。
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篇9
[關(guān)鍵詞] 尿沉渣;紅細(xì)胞;白細(xì)胞;上皮細(xì)胞;管型;
前言
由于尿液中有形成分的定量與定性檢查對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病的早期診斷、病情及治療效果的評(píng)價(jià)和預(yù)后均有重要意義,所以尿常規(guī)檢查是各級(jí)醫(yī)院最常見的檢查之一。由于病人眾多,醫(yī)院每天要產(chǎn)生大量的尿沉渣圖像數(shù)據(jù),在檢驗(yàn)人員有限的情況下,如果醫(yī)生完全憑借肉眼判別其中有形成分的種類,不僅工作上需要大量的檢驗(yàn)人員,而且長(zhǎng)時(shí)間在顯微鏡下觀察會(huì)給檢驗(yàn)人員的眼睛帶來傷害,容易產(chǎn)生疲勞從而造成誤判。此外,人工鏡檢也依賴于診斷醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)、分析能力以及身心狀態(tài)等,個(gè)人差異性很大。隨著科技的不斷進(jìn)步,圖像處理分析技術(shù)和計(jì)算機(jī)輔助診斷技術(shù)迅速發(fā)展起來,為其機(jī)器智能化識(shí)別提供了可能。如何更好地利用計(jì)算機(jī)技術(shù)幫助醫(yī)生快速準(zhǔn)確地做出判斷,是研究人員奮斗的目標(biāo)。
一、 尿沉渣檢查概述
尿沉渣檢查是指對(duì)尿液中各種有病理意義的有形成分的檢查,通過對(duì)尿液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型等有形成分的分析,來檢驗(yàn)一個(gè)人的腎臟及泌尿系統(tǒng)是否有疾病或者損傷。作為醫(yī)院常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目之一,尿沉渣檢查對(duì)臨床泌尿系統(tǒng)疾病診斷、治療檢測(cè)及健康普查具有重要意義。例如:尿液中紅細(xì)胞增多常提示尿路出血,進(jìn)一步檢查紅細(xì)胞的形態(tài)則有助于確定出血是來自腎小球還是下尿路;白細(xì)胞異常提示尿路感染或者腎炎;根據(jù)上皮細(xì)胞增多情況可以判斷各種尿路病變部位;管型增多則預(yù)示著腎小球腎炎,腎功能的衰退等。通過對(duì)各種有形成分的檢測(cè)和數(shù)量變化統(tǒng)計(jì)可以較為準(zhǔn)確的輔助判斷、定位、鑒別及預(yù)測(cè)泌尿系統(tǒng)疾病,所以尿沉渣檢查對(duì)人類的健康起著十分重要的作用。
1.1 主要有形成分
在尿沉渣圖像中,有形成分復(fù)雜各異,其中具有較高臨床價(jià)值的主要是紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型和上皮細(xì)胞。其中每一類由于潛在的各種未知因素又會(huì)呈現(xiàn)出多種多樣的形態(tài)、紋理和色彩,致使尿沉渣圖像中各種成分的表現(xiàn)形式非常復(fù)雜。鑒于本課題主要對(duì)紅細(xì)胞和白細(xì)胞兩種成分進(jìn)行研究,所以在這里對(duì)管型和上皮細(xì)胞只做簡(jiǎn)單了的介紹。四種有形成分的具體形態(tài)分別如下所示:
(1)紅細(xì)胞(RBC)
正常形態(tài)下,紅細(xì)胞呈無色或稍帶淺黃色的具有折光性的細(xì)小圓點(diǎn),由于中心顯著的灰白色而呈指環(huán)狀,缺少內(nèi)部結(jié)構(gòu),如圖 1(a)所示。在高比重尿液中,由于尿液濃縮導(dǎo)致紅細(xì)胞內(nèi)部水分滲出,形態(tài)變小,呈面包圈狀,如圖 1(b)所示。如果嚴(yán)重的話,紅細(xì)胞邊緣會(huì)皺縮,進(jìn)而發(fā)生畸變,如圖 1(c)所示。一般情況下,尿液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)較少,如果出現(xiàn)異常數(shù)量或者異常形態(tài)的紅細(xì)胞,則可能是來自于腎、尿路或者組織的出血,此時(shí)需要進(jìn)一步檢查紅細(xì)胞的形態(tài)來確定出血位置。這主要是根據(jù)來自不同病變位置的紅細(xì)胞通常具有不同的形態(tài)。
a.正常型 b.皺縮型 c.畸變型
圖 1紅細(xì)胞不同形態(tài)
(2)白細(xì)胞(WBC)
白細(xì)胞常為無色,胞核不清楚,胞漿呈顆粒狀,多為嗜中粒細(xì)胞。新鮮尿液中,白細(xì)胞外形完整,漿內(nèi)顆粒清晰可見,常分散存在,如圖2(a)所示。當(dāng)尿液被細(xì)菌分解時(shí),白細(xì)胞呈破碎狀態(tài),多為不規(guī)則形態(tài),胞結(jié)構(gòu)略呈模糊,漿內(nèi)充滿粗大顆粒,核不清楚,如圖2(b)所示。當(dāng)尿液中的白細(xì)胞數(shù)量出現(xiàn)異常時(shí),則預(yù)示著尿路感染或者急性腎小球腎炎等癥狀。
a.正常型 b.破碎型
圖2 白細(xì)胞不同形態(tài)
(3)管型細(xì)胞(CAST)
管型呈直或微彎的圓柱狀,長(zhǎng)短不一,兩邊平行,兩端或一端鈍圓,偶可呈破裂狀,如圖3 所示。尿液中管型的種類比較多,大體上可分為透明管型以及顆粒管型兩大類,其中每類又包含不同的子類別。當(dāng)尿液中管型細(xì)胞較多時(shí),表示腎臟出現(xiàn)了一定的問題。
a.透明管型 b.顆粒管型
圖3 管型的不同形態(tài)
(4)上皮細(xì)胞(EC)
尿液中的上皮細(xì)胞大致分為小圓上皮細(xì)胞、尾形上皮細(xì)胞和鱗狀上皮細(xì)胞三類,如圖4 所示。正常尿液中一般含有少量上皮細(xì)胞,當(dāng)尿液中上皮細(xì)胞較多時(shí),表示腎小管、輸尿管或者膀胱頸部有炎癥病變。
a.小圓上皮細(xì)胞 b. 尾形上皮細(xì)胞 c.鱗狀上皮細(xì)胞
圖4 上皮細(xì)胞的不同形態(tài)
篇10
關(guān)鍵詞: 尿沉渣; 圖像分割; 多信息互補(bǔ); SVM
中圖分類號(hào): TN957.52?34 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A 文章編號(hào): 1004?373X(2013)17?0118?04
0 引 言
尿沉渣檢查是指通過對(duì)尿液中各種有病理意義的有形成分進(jìn)行分析,來檢驗(yàn)一個(gè)人的腎臟及泌尿系統(tǒng)是否有疾病或者損傷。紅白細(xì)胞作為尿沉渣中最具有臨床價(jià)值的兩類細(xì)胞,是必須要進(jìn)行檢查的有形成分。讓計(jì)算機(jī)代替人來完成對(duì)紅白細(xì)胞的自動(dòng)分析,關(guān)鍵在于對(duì)紅白細(xì)胞的分割與識(shí)別。
目前,已經(jīng)出現(xiàn)了許多種分割和識(shí)別方法。在分割上,文獻(xiàn)[1?3]中提出了閾值分割、聚類、邊緣檢測(cè)以及區(qū)域提取等方法。特定地使用某種閾值分割法只能將其中的一部分紅白細(xì)胞分割出來。聚類法是通過檢測(cè)相似點(diǎn)的簇來對(duì)每個(gè)聚類進(jìn)行標(biāo)記,其缺點(diǎn)是聚類數(shù)目事先不可知,而且沒有考慮到不同類別間的交叉性。邊緣檢測(cè)通過確定強(qiáng)度值的突變點(diǎn)的位置來區(qū)分不同的區(qū)域,但是僅僅通過邊緣檢測(cè)并不能取得整體上較滿意的效果。區(qū)域提取存在停止準(zhǔn)則確定困難以及計(jì)算復(fù)雜等缺點(diǎn)。在識(shí)別上,文獻(xiàn)[4?6]中提出了線性分類法、模糊聚類、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)以及支持向量機(jī)等方法。其中線性分類法無法解決非線性問題,模糊聚類法沒有考慮到類別間的交叉,神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)法存在嚴(yán)重的過學(xué)習(xí)問題,無法避免局部極小值,得到的解可能是局部最優(yōu)解。
相比之下,支持向量機(jī)算法是專門為適用于小樣本學(xué)習(xí)問題而提出的通用學(xué)習(xí)算法。它基于結(jié)構(gòu)風(fēng)險(xiǎn)最小化原理,而非傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)最小化原理,從而能兼顧訓(xùn)練誤差和泛化能力[7]。而且SVM不存在過學(xué)習(xí)問題,得到的解是全局最優(yōu)解,有更好的泛化性能。
綜上所述,對(duì)于復(fù)雜的尿沉渣圖像來說,單一地使用某種分割方法很難將尿沉渣中的紅白細(xì)胞全部分割出來。為此,通過研究各種分割方法的優(yōu)點(diǎn),本文提出了三次組合分割算法,將圖像分三層進(jìn)行處理,在每一層中使用不同的算法對(duì)尿沉渣圖像中的紅白細(xì)胞進(jìn)行分割,融合各層分割結(jié)果,從而通過多信息互補(bǔ)的方法得到完整的分割結(jié)果。最后在特征提取的基礎(chǔ)上,對(duì)紅白細(xì)胞使用SVM方法進(jìn)行分類識(shí)別。
1 紅白細(xì)胞分割
結(jié)合尿沉渣圖像的特點(diǎn),本文針對(duì)紅白細(xì)胞提出的三次組合分割算法主要分為三步:頂層分割使用自適應(yīng)Canny邊緣檢測(cè)結(jié)合形態(tài)學(xué)進(jìn)行處理;中層分割使用OTSU法閾值結(jié)合形態(tài)學(xué)進(jìn)行處理;底層分割利用Sobel算子求取圖像的梯度,對(duì)求取的梯度圖進(jìn)行OTSU閾值化,再結(jié)合形態(tài)學(xué)進(jìn)行處理。最后將各層的分割結(jié)果進(jìn)行融合,從而通過多信息互補(bǔ)的方法得到完整的分割結(jié)果。算法整體流程圖如圖1所示。
1.1 頂層分割
1.2 中層分割
OTSU法是在判決分析最小二乘原理的基礎(chǔ)上推導(dǎo)得出,計(jì)算過程簡(jiǎn)單,是一種穩(wěn)定常用的算法。其主要思想是:在對(duì)圖像進(jìn)行閾值分割時(shí),選定的分割閾值應(yīng)使前景區(qū)域的平均灰度、背景區(qū)域的平均灰度與整幅圖像的平均灰度之間差異最大,這種差異用區(qū)域的方差來表示。
1.3 底層分割
經(jīng)過以上兩層分割,尿沉渣圖像中仍舊存在未被分割出來的紅白細(xì)胞。這主要是因?yàn)檫@些細(xì)胞的邊緣相對(duì)模糊,在Canny邊緣檢測(cè)或者Otsu法閾值后無法形成閉合區(qū)域,從而導(dǎo)致前兩層分割失效。針對(duì)此種情況,本文再次進(jìn)行了分割,這里稱為底層分割。在底層分割中,首先利用Sobel算子求取圖像的梯度圖,然后對(duì)梯度圖進(jìn)行Otsu法閾值處理,最后再結(jié)合形態(tài)學(xué)完成最終的分割。
1.4 分割效果
各層的分割效果如圖2中各子圖所示。其中圖(a)為一幅尿沉渣原始圖像,里面含有大量的紅白細(xì)胞。在頂層分割中使用高低閾值自適應(yīng)的Canny邊緣檢測(cè)后的效果如圖(b)所示。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步采用形態(tài)學(xué)處理。主要的處理依次是:使用半徑為1的圓形結(jié)構(gòu)元素對(duì)分割結(jié)果進(jìn)行膨脹處理;使用同樣的結(jié)構(gòu)元素對(duì)膨脹結(jié)果進(jìn)行閉運(yùn)算。這兩步處理的主要目的是封閉一些不閉合的輪廓,使其形成閉合區(qū)域。搜索圖像中的閉合區(qū)域,并進(jìn)行孔洞填充。依據(jù)區(qū)域的幾何特性去除一些明顯的雜質(zhì),比如圓形度,輪廓的粗糙度,面積等。頂層分割結(jié)果如圖(c)所示。在中層使用Otsu閾值后,去除頂層分割結(jié)果得到圖(d)。再結(jié)合形態(tài)學(xué)處理得到中層分割結(jié)果圖(e)。圖(f)為底層分割中使用Sobel算子求取的梯度圖。對(duì)圖(e)進(jìn)行Ostu閾值化,去除以上兩層的分割結(jié)果,并結(jié)合形態(tài)學(xué)處理得到底層分割結(jié)果見圖(g)。將三層的結(jié)果進(jìn)行融合,實(shí)現(xiàn)多信息互補(bǔ),即可得到完整的分割結(jié)果如圖(h)所示。從圖(h)中可以發(fā)現(xiàn),原圖中所有的紅白細(xì)胞基本都已被分割出來。
為了對(duì)整套算法的分割精度進(jìn)行測(cè)試,從樣本圖像中一共選取了60幅尿沉渣圖像進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。通過統(tǒng)計(jì)圖像中實(shí)際存在的紅白細(xì)胞總數(shù)和準(zhǔn)確分割后檢測(cè)到的細(xì)胞總數(shù),計(jì)算相應(yīng)的分割精度。其中分割精度是指準(zhǔn)確分割后檢測(cè)到的細(xì)胞總數(shù)與圖像中實(shí)際存在的細(xì)胞總數(shù)的比值,具體的分割精度見表1。從表1中的數(shù)據(jù)可以看出,整套分割算法的精度完全達(dá)到了醫(yī)用水平。
2 特征提取
為了對(duì)尿沉渣圖像中的紅白細(xì)胞進(jìn)行分類識(shí)別,在完成紅白細(xì)胞的分割以后,要進(jìn)一步提取兩種細(xì)胞的各自特征。提取的特征見表2。
3 紅白細(xì)胞的SVM分類
3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
SVM的基本思路是:首先用某種非線性映射將輸入向量映射到高維特征空間,然后在這個(gè)高維空間中構(gòu)造最優(yōu)超平面,使兩類之間的間隔最大,同時(shí)保證樣本的分類誤差盡可能小。
通過對(duì)分割出的尿沉渣圖像中各有形成分?jǐn)?shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)可以發(fā)現(xiàn),紅細(xì)胞、白細(xì)胞以及其他有形成分的概率比為0.55∶0.3∶0.15,紅細(xì)胞占的比重過大,這就導(dǎo)致紅細(xì)胞被識(shí)別為白細(xì)胞或者其他有形成分的數(shù)目大,導(dǎo)致除紅細(xì)胞之外的有形成分的偽陽率偏高。而且如果僅用一級(jí)分類器,由于樣本極不均衡,過分的強(qiáng)調(diào)分類器向某幾個(gè)類別偏都會(huì)造成不好的結(jié)果。針對(duì)這種情況,為了更好地發(fā)揮SVM的優(yōu)勢(shì),本文采用一對(duì)多SVM設(shè)計(jì)了一種兩級(jí)分類器集成的方法。第一級(jí)分類器主要識(shí)別紅細(xì)胞,將識(shí)別結(jié)果輸入第二級(jí)分類器再繼續(xù)識(shí)別白細(xì)胞。兩級(jí)SVM分類器結(jié)構(gòu)如圖3所示。
3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析
SVM的實(shí)驗(yàn)是在VC 6.0的環(huán)境下進(jìn)行的,算法實(shí)現(xiàn)語言為C/C++,程序平臺(tái)為主頻2.66 GHz的Intel Pentium IV PC。所使用的照片分辨率為576×576,放大倍數(shù)為40倍,未染色,JPG格式。同時(shí)為了進(jìn)行比較,對(duì)文獻(xiàn)[3]中的方法也進(jìn)行了相應(yīng)的實(shí)驗(yàn),基本思路是:在完成特征提取的基礎(chǔ)上,采用兩級(jí)BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的方法進(jìn)行訓(xùn)練和分類。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。表3中評(píng)估的性能指標(biāo)主要有識(shí)別時(shí)間、識(shí)別率、分類器個(gè)數(shù)以及SVM方法中的參數(shù)、支持向量數(shù)等。這里識(shí)別時(shí)間是計(jì)算單個(gè)樣本特征的時(shí)間和用分類器對(duì)其歸類的時(shí)間的綜合,取的是大量樣本識(shí)別時(shí)間的期望。
觀察表3數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn),兩級(jí)SVM所獲得的識(shí)別率和識(shí)別所需的時(shí)間均明顯優(yōu)于其他兩個(gè)實(shí)驗(yàn),這說明本文提出的識(shí)別算法是高效的。這主要有以下幾個(gè)原因:充分利用先驗(yàn)知識(shí)對(duì)紅白細(xì)胞進(jìn)行分割,根據(jù)面積、圓形度等特征去除一些明顯的雜質(zhì),使分割后的成分中只含有紅白細(xì)胞和一些在形態(tài)上和紅白細(xì)胞相近的“雜質(zhì)”。這樣避免了對(duì)一些不必要的成分進(jìn)行識(shí)別。使用兩級(jí)SVM分類器,第一級(jí)對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別,將未被識(shí)別為紅細(xì)胞的成分輸入到第二級(jí)分類器,這樣既減少了樣本數(shù)量且節(jié)約了時(shí)間,同時(shí)由于大部分的紅細(xì)胞都已經(jīng)被識(shí)別出去,也降低了白細(xì)胞的偽陽率,一定程度上克服了樣本的不平衡帶來的不利影響。
4 結(jié) 論
本文結(jié)合尿沉渣圖像的特點(diǎn),實(shí)現(xiàn)了紅白細(xì)胞的自動(dòng)分割與識(shí)別。針對(duì)紅白細(xì)胞提出了三次組合分割算法,該算法按照自頂向下、逐步分割的思想,分階段、有針對(duì)性地進(jìn)行分割,簡(jiǎn)單高效,具有很強(qiáng)的實(shí)用性,分割精度達(dá)到了97.7%。在識(shí)別上,設(shè)計(jì)了兩級(jí)集成的SVM分類器,識(shí)別精度達(dá)到了95.8%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本文設(shè)計(jì)的整套自動(dòng)分割與識(shí)別方法,處理速度快,精度高,具有很強(qiáng)的普適性。
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