導(dǎo)語：如何才能寫好一篇中藥鑒定學(xué)，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

摘要：以激發(fā)學(xué)生興趣，培養(yǎng)實(shí)用技能為教學(xué)目的，從提高教師素質(zhì)和改革教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法及實(shí)驗(yàn)教學(xué)等方面探討了中藥鑒定學(xué)教學(xué)的創(chuàng)新。

關(guān)鍵詞：中藥鑒定學(xué)；教學(xué)；改革

中圖分類號：C420　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號：1673-7717(2007)05-1025-02

中藥鑒定學(xué)是中藥專業(yè)的一門重要專業(yè)課之一，其在中藥畢業(yè)生的知識(shí)架構(gòu)中占有重要地位，因此，在中藥鑒定學(xué)的教學(xué)中，教師怎樣教與學(xué)生如何學(xué)才能產(chǎn)生最佳效果成為中藥鑒定師資團(tuán)隊(duì)思索與探討的課題。

經(jīng)過筆者的探索，取得了一些經(jīng)驗(yàn)，即：提高教師整體素質(zhì)，創(chuàng)新教學(xué)內(nèi)容與方法、激發(fā)與提升學(xué)生興趣、著力培養(yǎng)實(shí)用技能。

1提高教師素質(zhì)　促進(jìn)教師的專業(yè)成長是創(chuàng)新教學(xué)的關(guān)鍵

根據(jù)中藥鑒定學(xué)特點(diǎn)，倡導(dǎo)教師在讀書、集體備課、觀課3個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)突破。

1.1讀書　知識(shí)在更新，學(xué)科是交叉的，這就要求我們的教師具備多學(xué)科、最前沿的知識(shí)架構(gòu)，教師讀書是為了跟上課程的發(fā)展變化，讀書為教師提供足夠的教學(xué)支撐。

1.2觀課　帶著學(xué)習(xí)的意識(shí)，收集自己在教學(xué)中的一些問題和思考，在觀課過程中以別人的優(yōu)勢對照自己的不足，思考如何有針對性地進(jìn)行調(diào)整，這會(huì)使觀課的效益最大化。同時(shí)，觀課前可了解與授課相關(guān)的情況，如學(xué)生知識(shí)基礎(chǔ)、學(xué)習(xí)方法、學(xué)習(xí)習(xí)慣、學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)和勤奮程度等，也可以了解課堂可能存在的問題。有了這些基礎(chǔ)，觀課時(shí)可以有較好的切入角度、層面，也可以帶著對某一問題的思考、探索進(jìn)行觀課。

1.3集體備課　集體備課是一個(gè)發(fā)散思維、集中智慧、整合經(jīng)驗(yàn)、共享資源的教研活動(dòng)過程。集體備課能實(shí)現(xiàn)群體優(yōu)勢和個(gè)性特長的完美結(jié)合。

2改革中藥鑒定教學(xué)

2.1改革教學(xué)內(nèi)容　在“總論”中，將《中藥鑒定學(xué)教學(xué)大綱》全面透徹地介紹給學(xué)生，同時(shí)，讓學(xué)生自己回答中藥鑒定的目的、內(nèi)容、應(yīng)該怎樣學(xué)等；這樣，所有的學(xué)生都從總體上認(rèn)知了中藥鑒定學(xué)，知道了哪些是必須掌握的、哪些是熟悉與了解的；將教學(xué)內(nèi)容的重點(diǎn)放在“各論”每一章的“概述”部分，因?yàn)橹兴庤b定是按藥用部位來分類與分章編排的。在“概述”中，把各個(gè)部位的定義、各類中藥的性狀、組織構(gòu)造及顯微鑒別講透，讓學(xué)生掌握，這樣，學(xué)生就可以對每個(gè)具體的藥材舉一反三，很輕松的學(xué)好。對于具體的每一種藥，壓縮甚至不講其來源、性狀、顯微、理化等傳統(tǒng)內(nèi)容，大量增加該藥的研究進(jìn)展及藥理藥效。同時(shí)，滲透現(xiàn)代生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)的知識(shí)，讓學(xué)生掌握中藥材化學(xué)指紋圖譜及DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)。

2.2改革教學(xué)方法　傳統(tǒng)的教學(xué)方法往往是單向式的教學(xué)，如何在教學(xué)過程中，使學(xué)生真正成為教學(xué)活動(dòng)的主體，發(fā)揮他們的主動(dòng)性和創(chuàng)造性?

第一，充分利用教具。對于這個(gè)學(xué)科來說，最好的教具莫過于樣品藥材本身了。所謂“千聞不如一見”，在進(jìn)行理論知識(shí)學(xué)習(xí)時(shí)，將藥材帶到課堂，理論與實(shí)物同步，這樣既能加深學(xué)生的直觀理解，也可以活躍課堂氣氛，教學(xué)效果特別明顯。同時(shí)，學(xué)院的標(biāo)本中心提供了正品、混偽品及部分藥材的炮制品，有些藥材甚至有原植物的臘葉標(biāo)本和浸制標(biāo)本，每二周組織學(xué)生到標(biāo)本中心實(shí)習(xí)一次，這樣，學(xué)生從原植物到藥材、從混偽品到飲片都有了系統(tǒng)的學(xué)習(xí)，印象深刻、興趣濃厚。

第二，注意講解的趣味性和生動(dòng)性。每一種藥都是來源，產(chǎn)地，加工，氣味，性狀。每一種的性狀都是形狀，顏色，氣味，質(zhì)地等內(nèi)容，學(xué)生難免感到厭煩。因此，對于《中藥鑒定學(xué)》來說，講解如何生動(dòng)而充滿趣味是不得不關(guān)注的一個(gè)問題。在改革教學(xué)內(nèi)容的基礎(chǔ)上，通過綜合應(yīng)用文字、圖片、動(dòng)畫和視頻等多媒體資料來進(jìn)行教學(xué)活動(dòng)，通過多媒體課件，教師可以將大量的信息帶給學(xué)生，還可以通過互聯(lián)網(wǎng)將更加豐富的藥學(xué)前沿信息展現(xiàn)在學(xué)生面前，從而活躍學(xué)生的思維，使課堂教學(xué)活動(dòng)變得生動(dòng)有趣，富有啟發(fā)性、真實(shí)性。有的藥材與章節(jié)，預(yù)先布置下去，讓學(xué)生自己講，讓每一個(gè)學(xué)生都有講授的經(jīng)歷，我們還可以提提問題，和學(xué)生一起溫習(xí)以前的知識(shí)，這樣不僅我們自己鞏固了知識(shí)，也給學(xué)生壓力促進(jìn)他們強(qiáng)化知識(shí)，做到教學(xué)相長、師生互動(dòng)。同時(shí)，注重人文教育，在專業(yè)學(xué)習(xí)中與學(xué)生探討人文內(nèi)容，拉近與學(xué)生的距離，活躍了課堂氣氛，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。

第三，鼓勵(lì)學(xué)生積極參加學(xué)院的藥材識(shí)別競賽。大多數(shù)的學(xué)生，通過大量的藥材識(shí)別活動(dòng)，到最后在全班進(jìn)行比賽，是提高學(xué)習(xí)積極性特別有意義的活動(dòng)。鑒定學(xué)的任課老師給積極識(shí)別藥材的同學(xué)以鼓勵(lì)及獎(jiǎng)勵(lì)。

2.3優(yōu)化實(shí)驗(yàn)內(nèi)容　創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)教學(xué)中藥鑒定實(shí)驗(yàn)一改過去傳統(tǒng)的顯微、理化內(nèi)容，在幾次基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)、熟悉地掌握了中藥的顯微制片技術(shù)、能進(jìn)行中藥的顯微測量、微量升華、熒光觀察等操作技能后，每次中藥鑒定實(shí)驗(yàn)都以專題的形式進(jìn)行。如組織《大黃的生藥學(xué)鑒定》，要求學(xué)生從原植物、性狀、顯微、理化、含量測定等方面進(jìn)行系統(tǒng)的鑒定，實(shí)驗(yàn)報(bào)告以科研論文的形式提交，要求有摘要、關(guān)鍵詞、概述、方法與結(jié)果、討論、參考文獻(xiàn)等內(nèi)容；每次實(shí)驗(yàn)課都要求學(xué)生認(rèn)真實(shí)驗(yàn)，仔細(xì)思考，發(fā)現(xiàn)問題，解決問題，最后如實(shí)記錄實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)果。對于實(shí)驗(yàn)報(bào)告的批改，每次都極其用心，錯(cuò)誤的描述，正確的描述都記錄在案，以便針對具體情況作出具體的輔導(dǎo)。

通過嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練，學(xué)生不僅能提高操作能力，還能迅速提高表述及科研能力。

篇2

關(guān)鍵詞 獨(dú)立學(xué)院 中藥鑒定學(xué) 實(shí)驗(yàn)技能 實(shí)驗(yàn)室開放

中圖分類號：G424 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

“中藥鑒定學(xué)”是中藥學(xué)類專業(yè)的一門主干專業(yè)課，是主要培養(yǎng)學(xué)生鑒別藥材真?zhèn)?、評價(jià)藥材質(zhì)量的應(yīng)用型學(xué)科。它是在繼承傳統(tǒng)中藥鑒別經(jīng)驗(yàn)和使用經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用現(xiàn)代化學(xué)及生物學(xué)的理論和方法，解決中藥的真實(shí)性、安全性、有效性及質(zhì)量問題并實(shí)現(xiàn)中藥材資源可持續(xù)發(fā)展的一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科。本課程的目標(biāo)是讓學(xué)生掌握中藥鑒定的基本理論、基本方法和基本技能，掌握基源鑒別、性狀鑒別、顯微鑒別及理化鑒別方法，為從事中藥的真?zhèn)舞b別、品質(zhì)評價(jià)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定等工作打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。隨著藥材資源的匱乏，各地商農(nóng)為了牟取暴利，越來越多的偽品和假藥正在混入藥材市場，直接給病人或老百姓服用不僅影響效果，耽誤病情，甚至有可能造成更為嚴(yán)重的后果，所以培養(yǎng)一批批能夠辨別藥材真?zhèn)巍⒃u價(jià)藥材優(yōu)劣的應(yīng)用型人才極為重要。

一直以來，獨(dú)立學(xué)院學(xué)生的培養(yǎng)模式不同于普通本科高校，其側(cè)重于培養(yǎng)鍛煉學(xué)生的應(yīng)用與實(shí)踐能力。雖然，幾年的課程安排與普通本科高校基本相似，但由于教學(xué)環(huán)境及學(xué)生認(rèn)知特點(diǎn)等因素的影響，最終培養(yǎng)出的學(xué)生能力卻大不相同。如何使得獨(dú)立學(xué)院學(xué)生未來更好地走向市場服務(wù)社會(huì)，必須加強(qiáng)實(shí)踐訓(xùn)練，或者創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式，以實(shí)踐服務(wù)理論知識(shí)，最終培養(yǎng)出一批批合格的適應(yīng)市場需求的應(yīng)用型人才。對于中藥類專業(yè)學(xué)生而言，在研究中藥之前，必須學(xué)會(huì)鑒別中藥真?zhèn)危u價(jià)中藥質(zhì)量優(yōu)劣，這樣開展接下來的工作才有意義。同時(shí)，學(xué)好“中藥鑒定學(xué)”這門課程也是為了保證未來藥材市場流通規(guī)范，減少假藥劣藥，更好地服務(wù)大眾健康。

綜上，提升獨(dú)立學(xué)院中藥類專業(yè)學(xué)生的藥材快速鑒別能力是中藥鑒定學(xué)課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改革重點(diǎn)。①②本研究以中藥鑒定學(xué)實(shí)驗(yàn)為背景，分別以藥材飲片性狀鑒別、粉末顯微鑒別、粉末制片技術(shù)為考察指標(biāo)，擬對中藥1303班學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)技能打分。課后針對考核成績后20%者開放實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行重復(fù)實(shí)訓(xùn)，并再次考核打分，觀察重復(fù)實(shí)訓(xùn)考核者實(shí)驗(yàn)技能變化。從而評價(jià)開放實(shí)驗(yàn)室與否對獨(dú)立學(xué)院學(xué)生實(shí)驗(yàn)綜合技能提升的重要性。

1 現(xiàn)狀分析

我院中藥學(xué)專業(yè)一直是熱門專業(yè)，培養(yǎng)出的學(xué)生能力也得到市場及各界的諸多認(rèn)可。但近年來，藥品流通、檢測領(lǐng)域人才匱乏，因此加強(qiáng)藥材鑒定方面的教學(xué)與實(shí)踐勢在必行。同時(shí)，在中藥類諸多專業(yè)課中，“中藥鑒定學(xué)”是一門應(yīng)用性很強(qiáng)的專業(yè)課，單靠理論上枯燥無味的講授，是很難讓學(xué)生掌握中藥材鑒別特征及其鑒別技能的，因此需要大量的實(shí)習(xí)、實(shí)踐環(huán)節(jié)幫助學(xué)生去認(rèn)識(shí)。但就之前沿用的教學(xué)計(jì)劃來看，學(xué)生對藥材接觸和應(yīng)用的機(jī)會(huì)太少，實(shí)際觀摩、實(shí)訓(xùn)環(huán)節(jié)嚴(yán)重不足，使得學(xué)生對于課上所學(xué)的知識(shí)停留于抽象化概念，而不能形象深刻地去認(rèn)識(shí)和記憶。同時(shí)，這門課程的藥味極多，需要在一學(xué)期內(nèi)掌握這么多的藥材鑒別知識(shí)對于獨(dú)立學(xué)院學(xué)生來說有諸多困難。而且，即便是一些平時(shí)學(xué)習(xí)成績不錯(cuò)的學(xué)生，在學(xué)完該課程后一段時(shí)間也逐漸忘記所學(xué)的內(nèi)容，畢竟這是一門實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)性學(xué)科。那么，如何改變這種現(xiàn)狀，筆者認(rèn)為，應(yīng)該加強(qiáng)實(shí)踐訓(xùn)練環(huán)節(jié)內(nèi)容，提高學(xué)生的基本操作及藥材鑒別能力，不斷循環(huán)，這樣才能更好更深入地開展教學(xué)，學(xué)生的藥材鑒別及評價(jià)能力才能得到很大提高。

2 實(shí)驗(yàn)方法

以中藥鑒定學(xué)實(shí)驗(yàn)為背景，分別以藥材飲片性狀鑒別、粉末顯微鑒別、粉末制片技術(shù)為考察指標(biāo)，擬對中藥1303班學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)技能打分。開放實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行重復(fù)實(shí)訓(xùn)，并針對每次實(shí)驗(yàn)得分后20%者進(jìn)行再次實(shí)訓(xùn)考核打分，觀察重復(fù)實(shí)訓(xùn)考核者實(shí)驗(yàn)技能變化。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 “中藥鑒定學(xué)”實(shí)驗(yàn)考核之重復(fù)實(shí)訓(xùn)者頻次分布情況

圖1 “中藥鑒定學(xué)”實(shí)驗(yàn)考核之重復(fù)實(shí)訓(xùn)者頻次分布

圖1結(jié)果顯示，該課程在平時(shí)每次實(shí)驗(yàn)考核中，重復(fù)實(shí)訓(xùn)4次的有1位同學(xué)，重復(fù)實(shí)訓(xùn)3次的有3位同學(xué)，重復(fù)實(shí)訓(xùn)2次的有9位同學(xué)，重復(fù)實(shí)訓(xùn)1次的有9位同學(xué)。該結(jié)果表明，改班級中絕大部分學(xué)生都重復(fù)參加過實(shí)訓(xùn)，而僅有少部分學(xué)生由于實(shí)驗(yàn)技能較弱而多次參加重復(fù)實(shí)訓(xùn)。因此，開放實(shí)驗(yàn)室可以在課余時(shí)間使得全班大多數(shù)同學(xué)的實(shí)驗(yàn)技能得到提升，從而較少或不再被列入再次實(shí)訓(xùn)對象中。

3.2 期末實(shí)驗(yàn)綜合考核之重復(fù)實(shí)訓(xùn)考核情況

表1 期末實(shí)驗(yàn)綜合考核之重復(fù)實(shí)訓(xùn)考核情況

表1結(jié)果顯示，在期末實(shí)驗(yàn)綜合考核中，成績列班級后20%的有5位同學(xué)，分別是任同學(xué)、杜同學(xué)、李同學(xué)、劉同學(xué)和高同學(xué)。但是每位同學(xué)的期末實(shí)驗(yàn)原成績都在80分以上，提示經(jīng)過一學(xué)期的實(shí)驗(yàn)室開放和重復(fù)實(shí)訓(xùn)，這些學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技能得到明顯提升。同時(shí)，經(jīng)過再次實(shí)訓(xùn)之后，這五位同學(xué)的實(shí)訓(xùn)后考核成績得到明顯提高，其中有4位同學(xué)（80%）的實(shí)訓(xùn)后考核成績在90分以上。

3.3 平時(shí)實(shí)訓(xùn)頻次分布與期末實(shí)驗(yàn)綜合考核對比分析

在該班級的平時(shí)實(shí)驗(yàn)考核中（圖1），張同學(xué)重復(fù)實(shí)訓(xùn)考核4次，張同學(xué)、曹同學(xué)和王同學(xué)重復(fù)實(shí)訓(xùn)考核3次。這4位同學(xué)相對全班整體而言，實(shí)驗(yàn)技能較薄弱，但是卻未出現(xiàn)在期末重復(fù)實(shí)訓(xùn)考核名單中，提示這些學(xué)生在平時(shí)的課余時(shí)間，積極進(jìn)入到實(shí)驗(yàn)室開放的環(huán)節(jié)中，不斷努力提高自身實(shí)驗(yàn)技能，使得自己最終在期末實(shí)驗(yàn)綜合考核中表現(xiàn)優(yōu)異，脫穎而出。而期末實(shí)驗(yàn)重復(fù)實(shí)訓(xùn)者可能由于平時(shí)實(shí)驗(yàn)技能相對中等或較好，而較少愿意參與到實(shí)驗(yàn)室開放的環(huán)節(jié)中，減少了自己重復(fù)實(shí)訓(xùn)機(jī)會(huì)，日積月累，反被后面的同學(xué)趕超。這說明，無論平時(shí)實(shí)驗(yàn)技能較強(qiáng)或較弱的學(xué)生，都應(yīng)該積極投入到實(shí)驗(yàn)室開放的環(huán)節(jié)中去，利用課余時(shí)間多鍛煉自己的實(shí)訓(xùn)技能，這樣才能使自身的實(shí)驗(yàn)技能得到不斷提高。

4 討論

經(jīng)過一學(xué)期的實(shí)驗(yàn)室開放，班級學(xué)生在藥材鑒定方面的技能得到明顯提升。同時(shí)，該班級整體實(shí)驗(yàn)成績超出以往同專業(yè)或相近專業(yè)學(xué)生，提示開放實(shí)驗(yàn)室的成效顯著。此外，開放實(shí)驗(yàn)室對于處于各個(gè)能力階段的學(xué)生都是有利的。

因此，在今后的中藥鑒定學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，可以加大實(shí)驗(yàn)室開放力度，不斷循環(huán)考核，使得平時(shí)實(shí)驗(yàn)成績較低的學(xué)生能夠在不斷的自主學(xué)習(xí)實(shí)踐中輕松地提高自己的實(shí)驗(yàn)技能，同時(shí)也鼓勵(lì)其他能力相對較強(qiáng)的學(xué)生也參與到實(shí)驗(yàn)室開放的環(huán)節(jié)中去，不斷提高實(shí)訓(xùn)技能。

目前市場中藥材質(zhì)量堪憂，強(qiáng)化對學(xué)生中藥鑒定技能的培養(yǎng)顯得尤為重要。同時(shí)，隨著時(shí)代的不斷發(fā)展，中藥鑒定學(xué)課程教學(xué)面臨很多新的挑戰(zhàn)，我們必須加快教學(xué)改革的步伐，提高教學(xué)效果，創(chuàng)新教學(xué)模式，以適應(yīng)新時(shí)代市場對高素質(zhì)應(yīng)用型中藥專業(yè)人才的需求。對于該課程，積極深入開展該課程的實(shí)踐教學(xué)研究是一項(xiàng)十分緊迫并且意義重大的工作。綜上，開放實(shí)驗(yàn)室對于提升獨(dú)立學(xué)院中藥類專業(yè)學(xué)生藥材快速鑒別能力具有重要的實(shí)踐意義。

*通訊作者：谷巍

基金項(xiàng)目：江蘇省“青藍(lán)工程”（2012）

注釋

篇3

關(guān)鍵詞：建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論；中藥鑒定學(xué)；教學(xué)質(zhì)量

《中藥鑒定學(xué)》是中藥學(xué)專業(yè)的專業(yè)課程之一，隨著科學(xué)的進(jìn)步和時(shí)代的發(fā)展，我們賦予了它新的概念，即研究中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和鑒定方法的應(yīng)用學(xué)科。這個(gè)概念在宏觀上講是兩個(gè)內(nèi)容，一個(gè)是質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，一個(gè)是鑒定方法，二者具有高度的概括性和本質(zhì)的聯(lián)系。研究質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是為了控制和鑒定中藥的質(zhì)量，為中藥的生產(chǎn)、研究和使用提供依據(jù)和保障，提升中藥的管理水平；這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)涵蓋著中藥安全性、有效性和穩(wěn)定性三項(xiàng)指標(biāo)的必備內(nèi)容。研究鑒定方法可使中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不斷提升并趨于完善，是保證質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)，適用的標(biāo)準(zhǔn)是由科學(xué)的方法來實(shí)現(xiàn)的，這里的方法實(shí)際上是一個(gè)體系包涵形態(tài)鑒定法、理化鑒定法和生物鑒定法三大板塊，每一板塊又延伸為多種方法。這種框架的構(gòu)建可以應(yīng)用一種新的學(xué)習(xí)理論來教學(xué)，即建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論。

中藥鑒定學(xué)具有如下特點(diǎn)：一是內(nèi)容多而枯燥，但卻有其內(nèi)在的聯(lián)系和系統(tǒng)性；二是知識(shí)涉及相關(guān)學(xué)科多，但又不失其自身的完整性；三是實(shí)踐性強(qiáng)”。教學(xué)中只有使學(xué)生真正掌握中藥鑒定學(xué)的基本理論、基本方法和基本技能，提高其分析問題、解決問題的能力最終培養(yǎng)出具有終身學(xué)習(xí)能力、現(xiàn)代社會(huì)發(fā)展所需的中藥專業(yè)人才，才能實(shí)現(xiàn)教學(xué)質(zhì)量的提高。鑒于中藥鑒定學(xué)的學(xué)科特點(diǎn)，為了提高教學(xué)質(zhì)量，傳統(tǒng)的在行為主義學(xué)習(xí)理論指導(dǎo)下的教學(xué)模式已經(jīng)不能完全勝任。很多學(xué)者和教學(xué)第一線的教師也在中藥鑒定的教學(xué)中嘗試了多種改革，收獲了一定教學(xué)成果但基本還是以傳統(tǒng)的教學(xué)模式為主，基于建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論的中藥鑒定學(xué)的教學(xué)探索還不多。筆者對建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論指導(dǎo)下的中藥鑒定的教學(xué)進(jìn)行了初步探索與實(shí)踐。

1理論基礎(chǔ)

建構(gòu)主義是一種認(rèn)知理論，其哲學(xué)基礎(chǔ)可以追朔至18世紀(jì)文藝復(fù)興時(shí)代的哲學(xué)家、人文主義者詹巴帝斯塔·維柯，然而對建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論最直接的貢獻(xiàn)是皮亞杰關(guān)于兒童認(rèn)知發(fā)展理論的形成。建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論認(rèn)為學(xué)習(xí)是由學(xué)生的內(nèi)部動(dòng)機(jī)包括好奇心、進(jìn)步的需要、自居作用和同伴間相互驅(qū)動(dòng)的積極主動(dòng)的知識(shí)建構(gòu)過程，即知識(shí)不是通過教師傳授獲得的，是學(xué)習(xí)者在一定的情境即社會(huì)文化背景下，借助于其他人包括教師和學(xué)習(xí)伙伴的幫助，利用必要的學(xué)習(xí)資源，通過意義建構(gòu)的方式獲得的。意義的建構(gòu)是指事物的性質(zhì)、規(guī)律以及事物之間的內(nèi)在聯(lián)系。在學(xué)習(xí)過程中幫助學(xué)生進(jìn)行意義建構(gòu)，就是要幫助學(xué)生對當(dāng)前學(xué)習(xí)內(nèi)容所反映事物的性質(zhì)、規(guī)律以及該事物與其他事物之間的內(nèi)在聯(lián)系達(dá)到較深刻的理解。建構(gòu)主義的核心是強(qiáng)調(diào)學(xué)生主動(dòng)的意義建構(gòu)，因此在教學(xué)過程中教師是主導(dǎo)而不是主體，一切以學(xué)生為主體、為中心，而每一個(gè)環(huán)節(jié)的落實(shí)又離不開教師的主導(dǎo)作用。建構(gòu)主義理論指導(dǎo)下常見的教學(xué)方法有拋錨式、支架式、交互式和隨機(jī)訪問式教學(xué)法。

2教學(xué)目標(biāo)

建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論指導(dǎo)下的中藥鑒定學(xué)教學(xué)目標(biāo)不僅僅局限在“學(xué)習(xí)知識(shí)”的膚淺層面，也就是不僅在于使學(xué)生掌握中藥鑒定的基本理論、基本方法和基本技能。同時(shí)也不只是將目標(biāo)擴(kuò)充至提高學(xué)生分析問題和解決問題能力的層面上。建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論指導(dǎo)下的中藥鑒定學(xué)教學(xué)目標(biāo)是使學(xué)生掌握知識(shí)、培養(yǎng)學(xué)生分析解決問題能力和終生學(xué)習(xí)能力的一個(gè)綜合目標(biāo)。

對于每味藥基原鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定和理化鑒定的這些知識(shí)層面的目標(biāo)一般設(shè)置明確。教師在教學(xué)過程中通常都明確哪些藥需要掌握哪些方面的鑒定知識(shí)。然而學(xué)生僅僅掌握這些知識(shí)是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，也不能適應(yīng)社會(huì)的需要?，F(xiàn)行中藥專業(yè)4年制本科教材全書共載藥500多種，其常用中藥有350多種。即便學(xué)生全部掌握了書中所載中藥的鑒定知識(shí)，并且工作后也沒有遺忘，如果不能利用這些知識(shí)分析解決問題仍然不能勝任從事中藥專業(yè)的工作，更談不上滿足社會(huì)發(fā)展的需求了。一味的追求擴(kuò)大掌握鑒定藥物種類的數(shù)目，僅注重知識(shí)層面的教學(xué)也不符合建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論的基本思想原則。因此，教學(xué)還需要有培養(yǎng)學(xué)生利用中藥鑒定知識(shí)分析解決問題的能力這一目標(biāo)。然而工作中遇到的問題也不是簡單明了的，常常利用已有的知識(shí)還不能或不能完全解決問題。復(fù)雜多變的現(xiàn)實(shí)問題和當(dāng)今飛快的知識(shí)更新速度，如果要培養(yǎng)出適合社會(huì)發(fā)展需求的專業(yè)人才，培養(yǎng)其終生學(xué)習(xí)能力和工作能力就必須是教學(xué)目標(biāo)之一。

所以除了教授知識(shí)更重要的是教授方法，掌握了方法可以不斷地獲取新知識(shí)解決不同的新問題，最終得以實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)目標(biāo)。如我們在大黃的這味藥的鑒定教學(xué)中，要設(shè)置的目標(biāo)除了知識(shí)掌握的目標(biāo)外還需要設(shè)置提高學(xué)生分析解決問題能力的目標(biāo)。例如可以將學(xué)生利用已經(jīng)掌握基原鑒定、性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別和生物鑒別的知識(shí)去區(qū)別正品大黃和土大黃這一能力設(shè)為目標(biāo)。通過培養(yǎng)，學(xué)生能夠?qū)τ谛鲁霈F(xiàn)的不同來源的大黃偽品進(jìn)行鑒別，以及對今后可能出現(xiàn)的新的鑒定方法具備學(xué)習(xí)能力。 

3教學(xué)環(huán)節(jié)

在建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論的深入研究中，目前開發(fā)了拋錨式教學(xué)和支架式教學(xué)等教學(xué)方法。無論是運(yùn)用那種教學(xué)方法，最終都是為了達(dá)到教學(xué)目標(biāo)，提高教學(xué)質(zhì)量。筆者對建構(gòu)主義學(xué)習(xí)理論指導(dǎo)下的中藥鑒定教學(xué)環(huán)節(jié)做了初步探索。

3．1串聯(lián)相關(guān)學(xué)科，設(shè)置認(rèn)知沖突

篇4

一、教學(xué)方法

1.課堂講授

由于《中藥鑒定技術(shù)》總論部分主要介紹了概念、任務(wù)、鑒定方法和當(dāng)前新技術(shù)、新方法等內(nèi)容，因此，這部分主要以教師講授為主，在講授基本理論的同時(shí)，也接受一些當(dāng)前中藥鑒定的新技術(shù)和新方法，為以后學(xué)生進(jìn)一步地學(xué)習(xí)打下基礎(chǔ)。如：中藥指紋圖譜法、DNA分子遺傳標(biāo)記鑒定技術(shù)等。通過講授，使學(xué)生在掌握基本理論的同時(shí)，了解當(dāng)前中藥鑒定技術(shù)的發(fā)展情況。

2.互動(dòng)式教學(xué)

《中藥鑒定技術(shù)》是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的應(yīng)用性學(xué)科，它要求學(xué)生們要有直觀認(rèn)識(shí)，需要大量的中藥材真?zhèn)纹窐?biāo)本的對照學(xué)習(xí)，因此，在教學(xué)過程中主要采用了如下的方法：①以學(xué)生為主體，就是將學(xué)生劃分成幾個(gè)小組，將本堂課要講授的中藥材標(biāo)本發(fā)下去，讓學(xué)生對照書本學(xué)習(xí)，歸納出鑒別要點(diǎn)，教師根據(jù)學(xué)生們的講述進(jìn)行歸納總結(jié)。②以教師為主體，以學(xué)生為輔，先讓學(xué)生們反復(fù)觀看真?zhèn)纹窐?biāo)本，然后教師提問。這樣可以加深學(xué)生們對中藥材鑒別要點(diǎn)的掌握和理解。

3.開放式教學(xué)

由于中藥鑒定是一個(gè)長期而艱巨的任務(wù)，其實(shí)踐性很強(qiáng)，因此必須充分利用現(xiàn)有的條件，便于學(xué)生們的學(xué)習(xí)。①開放實(shí)驗(yàn)室，要想學(xué)好中藥鑒定學(xué)，必須接觸實(shí)際，而開放實(shí)驗(yàn)室能夠保證學(xué)生接觸大量的中藥標(biāo)本，同時(shí)解決實(shí)驗(yàn)課時(shí)間不足的問題，進(jìn)行顯微鑒別和理化鑒別的技能鍛煉，提高學(xué)生的動(dòng)手能力。②開放時(shí)間，主要體現(xiàn)在兩個(gè)方面，一是每周確定兩課時(shí)的輔導(dǎo)時(shí)間，以學(xué)生自學(xué)為主，老師輔導(dǎo)為輔，二是老師的時(shí)間開放，學(xué)生可以隨時(shí)隨地向老師請教，包括學(xué)生在市場發(fā)現(xiàn)一時(shí)難以鑒別的中藥真?zhèn)纹罚伎梢哉埨蠋煹绞袌霈F(xiàn)場鑒別。③利用課余時(shí)間，帶領(lǐng)學(xué)生到植物園進(jìn)行野外教學(xué)，使學(xué)生能夠更好地掌握其形態(tài)鑒別、生長環(huán)境、采集時(shí)間、加工方法、資源保護(hù)、開發(fā)利用等方面的知識(shí)。

二、探索新的教學(xué)模式和方法

1.調(diào)整理論教學(xué)與實(shí)驗(yàn)教學(xué)的比例

根據(jù)職業(yè)教育的培養(yǎng)目標(biāo)，理論講授與實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)課時(shí)的比例為2：1，而在實(shí)際教學(xué)中，《中藥鑒定技術(shù)》的課時(shí)一壓縮再壓縮，一學(xué)期要講完500多頁的一本教材，要讓學(xué)生在很短的時(shí)間內(nèi)學(xué)懂學(xué)會(huì)，難度可想而知。筆者在講授《中藥鑒定技術(shù)》時(shí)，嘗試調(diào)整了理論講授與實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)課時(shí)的比例，由過去的2：1改為1：1，加大了實(shí)踐教學(xué)的比重，學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和實(shí)驗(yàn)?zāi)芰γ黠@增強(qiáng)。

2.性狀鑒定教學(xué)

在講授藥材的性狀鑒定的教程中只講鑒別要點(diǎn)和難點(diǎn)，不把每一種中藥的所有性狀特征都講到。講授的中藥材隨堂配備，每一種中藥準(zhǔn)備原藥材和飲片各一份，這樣有利于觀察中藥的外部形態(tài)和切面特征，上課時(shí)教師講解一個(gè)鑒別要點(diǎn)，學(xué)生要馬上跟著做，眼觀、手摸、鼻聞、口嘗、水試和火燒，每一項(xiàng)都要做到。講完內(nèi)容后，在課堂上隨機(jī)抽查，隨堂打分記錄；另外，在講完一個(gè)或幾個(gè)章節(jié)后，組織學(xué)生進(jìn)行性狀實(shí)驗(yàn)考核，也打分記錄，這些都作為總評成績的一部分。

3.顯微鑒定教學(xué)

講授過程中嘗試將中藥粉末顯微鑒定由單味藥辨認(rèn)改為按組織特征分類鑒別。這樣既增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)性和科學(xué)性，使學(xué)生能夠從中掌握中藥粉末鑒定的規(guī)律性，同時(shí)也節(jié)省了學(xué)時(shí)， 為增設(shè)新的實(shí)驗(yàn)創(chuàng)造條件。所謂按組織特征進(jìn)行分類鑒定，即是將生藥粉末特征分為厚壁組織纖維和石細(xì)胞，導(dǎo)管，分泌組織，保護(hù)組織，細(xì)胞后含物等。在實(shí)驗(yàn)時(shí)每類選擇有典型意義的一到兩種中藥供學(xué)生進(jìn)行觀察鑒別，然后再由教師對每一類進(jìn)行歸納總結(jié)，找出規(guī)律性。例如，在觀察石細(xì)胞時(shí)，讓學(xué)生觀察厚樸分枝狀石細(xì)胞、肉桂馬蹄形石細(xì)胞、苦杏仁近圓形石細(xì)胞，這樣學(xué)生就會(huì)對石細(xì)胞的種類形態(tài)有一個(gè)全面的了解，并在以后的鑒定中加以運(yùn)用。在粉末特征分類鑒定實(shí)驗(yàn)后，我們將幾種生藥粉末發(fā)給學(xué)生，讓大家運(yùn)用學(xué)到的粉末分類知識(shí)，對照教材加以識(shí)別辨認(rèn)。從結(jié)果看，即使課堂上未做過的粉末，絕大多數(shù)學(xué)生均能夠根據(jù)教材提供的特征準(zhǔn)確地加以識(shí)別。對橫切面顯微鑒定，由教師總結(jié)出規(guī)律，掌握共性，記住特殊部分和典型個(gè)例。

4.重視理化鑒定教學(xué)，教學(xué)重點(diǎn)與時(shí)俱進(jìn)

隨著科技的飛速發(fā)展，中藥的研究內(nèi)容也在發(fā)生著日新月異的變化，只要比較一下幾個(gè)版本的藥典就知道變化有多大。這個(gè)變化的特點(diǎn)是應(yīng)用現(xiàn)代技術(shù)全面研究中藥的有效成分及藥理藥效，以全面評價(jià)中藥的質(zhì)量。為了適應(yīng)跨世紀(jì)的中藥學(xué)?？迫瞬诺呐囵B(yǎng)要求以及職業(yè)教育目的，迫切需要改革原來的簡單實(shí)驗(yàn)，開設(shè)一些水平相對較高的綜合性實(shí)驗(yàn)，如：理化鑒別、薄層色譜、紫外分光光度、高效液相色譜等定性定量實(shí)驗(yàn)。其指導(dǎo)思想是讓學(xué)生較全面系統(tǒng)地熟悉各類實(shí)驗(yàn)方法，這不僅僅是這個(gè)學(xué)科的培養(yǎng)需要，還是對以前開設(shè)的課程的一個(gè)大融合。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容體現(xiàn)現(xiàn)代中藥學(xué)的研究內(nèi)容，從形態(tài)特征到成分的定性定量分析、炮制等均有所體現(xiàn)。

5.改革現(xiàn)有的考試方法

多年來，學(xué)校往往用一張?jiān)嚲?、一個(gè)分值就肯定或者否定學(xué)生的學(xué)習(xí)成果，這就造成很多學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中只關(guān)心所謂的考點(diǎn)，死記硬背，導(dǎo)致不少學(xué)生高分低能。考試改革后，即降低筆試成績的比例，加入綜合能力的考查，改革的方法是科目考核成績由總評成績決定，總評成績又包括卷面成績、實(shí)驗(yàn)成績、平時(shí)成績，實(shí)驗(yàn)成績又包括實(shí)驗(yàn)技能、實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)考查成績等，平時(shí)成績包括作業(yè)、提問、測驗(yàn)、課堂紀(jì)律等成績，把這幾部分按比例換算成總評成績。

6.讓學(xué)生參與到教學(xué)活動(dòng)中，發(fā)揮學(xué)生的主體意識(shí)

為學(xué)生授課，不能不顧忌學(xué)生這個(gè)主體的感受，以學(xué)生為中心，給了學(xué)生更大的學(xué)習(xí)空間，并且進(jìn)一步提高了他們的參與熱情。一直以來，教師習(xí)慣于在講臺(tái)上講解，學(xué)生的學(xué)習(xí)處于一種被動(dòng)填鴨狀態(tài)，角色互換，讓學(xué)生主動(dòng)參與到教學(xué)活動(dòng)中來，就能很好地發(fā)揮學(xué)生的主體意識(shí)，如：讓學(xué)生利用課余時(shí)間去查閱相關(guān)資料、制作課件并上臺(tái)講授，講完之后教師再對他們的優(yōu)、缺點(diǎn)進(jìn)行點(diǎn)評。再如，經(jīng)常和學(xué)生交流，了解學(xué)生對課程的意見和建議，根據(jù)學(xué)生的實(shí)際和需要添加或刪除一些講授內(nèi)容，講課盡量朝滿足學(xué)生需要的方向靠近。

7.教書育人，注重道德教育

教師在教會(huì)學(xué)生知識(shí)的同時(shí)，要教會(huì)學(xué)生做人，做一個(gè)有公德、有職業(yè)道德、有專業(yè)才能的人。道德教育，課內(nèi)課外、隨時(shí)隨地地進(jìn)行。經(jīng)常與學(xué)生交流，解決學(xué)生的困惑及難題，糾正學(xué)生的不良習(xí)氣，使學(xué)生樹立正確的價(jià)值觀、人生觀，增強(qiáng)事業(yè)心和責(zé)任感。

8.結(jié)合執(zhí)業(yè)藥師考試，加強(qiáng)中藥鑒定技術(shù)知識(shí)點(diǎn)的重點(diǎn)講解

根據(jù)2012版國家醫(yī)藥安全十二五規(guī)劃，2012年開始新開辦的零售藥店必須配備執(zhí)業(yè)藥師，逾期達(dá)不到要求的“十二五”末即取消售藥資格，所有零售藥店法人或者主要管理者必須具備執(zhí)業(yè)藥師資格。一時(shí)間，醫(yī)藥行業(yè)對執(zhí)業(yè)藥師的重視程度很高，執(zhí)業(yè)藥師缺口嚴(yán)重。在講課時(shí)參考?xì)v年執(zhí)業(yè)藥師考試真題，給學(xué)生講解執(zhí)業(yè)藥師考試題型及難點(diǎn)重點(diǎn)。

篇5

1.1實(shí)物標(biāo)本的選擇

選擇實(shí)物標(biāo)本依托中國藥典，以教材中收載的常用藥材為主。然而，將教材中的藥材品種一一收錄既不現(xiàn)實(shí)、也不必要，應(yīng)根據(jù)教學(xué)大綱的要求和教學(xué)實(shí)際，選擇具有代表性的藥材標(biāo)本。在品種的選擇上要力爭具有代表性，如根和根莖類、莖木類、皮類、花類、果實(shí)種子類、全草類、其它類、動(dòng)物和礦物類藥材等都要涉及;且應(yīng)根據(jù)分類學(xué)涉及代表科屬的藥材，如毛茛科選取了黃連、烏頭、白芍、威靈仙等，分別涉及了黃連屬、烏頭屬、芍藥屬和鐵線蓮屬等;同時(shí)，根據(jù)地方使用習(xí)慣的不同，有意識(shí)收集本地習(xí)用品種，如紫萁貫眾、斷血流等;道地藥材是中藥鑒定技術(shù)中最具特色的，收集實(shí)物標(biāo)本還應(yīng)對道地藥材有所側(cè)重，如安徽的鳳丹皮、宣木瓜、貢菊等?；谝陨纤悸?，我們根據(jù)課程教學(xué)的需要，編寫《中藥鑒定技術(shù)》教學(xué)實(shí)物標(biāo)本目錄，加大收集工作，并應(yīng)用于教學(xué)實(shí)踐中。

1.2實(shí)物標(biāo)本的制作

《中藥鑒定技術(shù)》教學(xué)用實(shí)物標(biāo)本編寫目錄后，根據(jù)目錄進(jìn)行收集和制作工作，主要有三種方法:⑴從市場采購。利用去藥材市場參觀學(xué)習(xí)的機(jī)會(huì)，從市場采購典型的藥材標(biāo)本，主要是一些本地不產(chǎn)的藥材，如人參、大黃等，且經(jīng)過不同批次的采購能得到不同等級和規(guī)格的藥材。⑵與兄弟院校和同行之間交換、交流。通過與同行之間進(jìn)行教學(xué)標(biāo)本的交換和交流，可以擴(kuò)大藥材標(biāo)本的種類，減少收集標(biāo)本花費(fèi)的精力，有利于建立整套標(biāo)本。⑶實(shí)地采集和制作。這是最重要的方法，將收集實(shí)物標(biāo)本與藥用植物學(xué)采藥實(shí)習(xí)等結(jié)合起來，通過實(shí)地采集收集本地地產(chǎn)藥材和習(xí)用品種。例如，我校每年會(huì)到南陵丫山進(jìn)行藥用植物學(xué)采藥實(shí)習(xí)，可收集到牡丹皮、半夏、魚腥草、金蕎麥、桔梗等地產(chǎn)藥材。同時(shí)，還可以利用野外資源調(diào)查的機(jī)會(huì)，搜集各地藥材標(biāo)本，如岳西的茯苓、僵蠶、靈芝，霍山的霍山石斛、天麻，滁州的和全蝎等。通過野外采集，可以準(zhǔn)確鑒定藥材的來源，從而做到在課堂上教授給學(xué)生科學(xué)、準(zhǔn)確的藥材知識(shí)。

1.3影像標(biāo)本的制作

收集的藥材標(biāo)本有時(shí)個(gè)體較小，如冬蟲夏草、半夏、太子參等，使用時(shí)難以滿足教學(xué)需要，還有一些標(biāo)本容易變色變質(zhì)，如黨參、大黃等。如何能給予學(xué)生最真實(shí)的藥材特征，就需要通過制作影像標(biāo)本來完成。顏色是標(biāo)本最重要的特征，在制作影像標(biāo)本時(shí)也容易失真，為此，我們引入了專業(yè)的攝影設(shè)備，同時(shí)邀請專業(yè)的攝影和計(jì)算機(jī)老師，協(xié)助影像標(biāo)本的制作，專業(yè)教師則根據(jù)藥材的鑒別要點(diǎn)提出拍攝意見，如大黃要拍攝斷面的“星點(diǎn)”特征、黃連要拍攝“過橋”特征、冬蟲夏草要特寫頭部特征等。為了增加藥材照片的立體感，還須對藥材的不同面進(jìn)行拍攝，以期得到最完整的藥材性狀特征。同時(shí)，利用野外資源調(diào)查的機(jī)會(huì)，拍攝新鮮藥材的照片，并制作了產(chǎn)地采集、加工等的視頻短片，后期利用專業(yè)軟件制作了《黃山采藥錄》等視屏資料，作為對理論課的補(bǔ)充，在課堂上也收到了較好效果。

2體會(huì)

2.1理論教學(xué)和實(shí)踐教學(xué)應(yīng)選用不同的標(biāo)本理論教學(xué)

一般是大班教學(xué)，對實(shí)物標(biāo)本的需求量較多，標(biāo)本數(shù)量少時(shí)難以顧及到所有同學(xué)，此時(shí)配合影像標(biāo)本的使用，才能取得較好的效果;而像蘇子、菟絲子這些較小的藥材，可以給每位學(xué)生準(zhǔn)備一份標(biāo)本，看著標(biāo)本學(xué)習(xí)和講解才能取得最佳的效果。實(shí)踐教學(xué)一般是小班教學(xué)，學(xué)生和教師互動(dòng)交流的機(jī)會(huì)較多，一般選用實(shí)物標(biāo)本，對于人參、冬蟲夏草等貴重藥材標(biāo)本，也可讓學(xué)生有充分的觀察機(jī)會(huì)。另外，還可以根據(jù)藥材的性質(zhì)制作不同的藥材標(biāo)本，展示于實(shí)踐教學(xué)場所。比如全草類藥材可以制作成臘葉標(biāo)本和彩色照片，懸掛于實(shí)驗(yàn)室墻上，讓學(xué)生在日常學(xué)習(xí)中受到潛移默化的影響。

2.2注意標(biāo)本和影像資料的積累

篇6

【關(guān)鍵詞】榴果黑種草化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.07.681文章編號：1004-7484（2013）-07-4065-01

榴果黑種草為毛茛科黑種草屬植物，新疆地區(qū)是其主產(chǎn)區(qū)。瘤果黑種草具有利尿、活血、解毒、延緩衰老的作用。為了研究黑種草發(fā)揮藥理作用的主要成分。利用各種色譜分離技術(shù)把乙醇提取液進(jìn)行分離純化，得到五種化合物。

1儀器和材料

RY-1G型數(shù)字熔點(diǎn)儀。Autospec-Ultima ETOF型質(zhì)譜儀。Bruker400核磁波譜儀。色譜柱用硅膠、薄層色譜。美國同位素公司氘代試劑，其他試劑均為分析純。

2提取與分離

將榴果黑種草7.5kg用熱的乙醇（體積分?jǐn)?shù)30%）回流提取三次，提取時(shí)間為3個(gè)小時(shí)/次。將提取液進(jìn)行冷凍干燥得到300克的浸膏。把浸膏用適量的溫水溶解，按照順序用石油醚、正丁醇、乙酸乙酯進(jìn)行萃取。取正丁醇萃取物75g過硅膠柱色譜。用三氯甲烷-甲醇（體積比為10：1-1：1）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，所得組分經(jīng)sephadexLH-20、OSD柱處理得到化合物II（150mg），化合物IV（30mg）、化合物V（45mg）。稱?。ㄝ腿∥铮┮宜嵋阴?g過硅膠柱色譜，用三氯甲烷-甲醇（體積比為15：1-1：1）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，得到化合物I（60mg），化合物III（105mg）。

3結(jié)構(gòu)的鑒定

化合物I：白色粉末狀，熔點(diǎn)（mp）287-288℃.醋酐-濃硫酸（Libermann-Burchard）反應(yīng)呈現(xiàn)陽性。紫環(huán)反應(yīng)（Molish）呈現(xiàn)陽性。做KBr壓片IR，譜圖以及EI/MS，所得數(shù)據(jù)與已知物胡蘿卜苷對照，IR譜圖一致、Rf值相同、混合熔點(diǎn)不發(fā)生變化。根據(jù)上述結(jié)果判定此化合物為谷甾醇-3-O-葡萄糖苷。

化合物II：白色結(jié)晶，熔點(diǎn)（mp）222-224℃。醋酐-濃硫酸（Libermann-Burchard）反應(yīng)呈現(xiàn)陽性。紫環(huán)反應(yīng)（Molish）呈現(xiàn)陽性。樣品在薄層板上進(jìn)行酸水解后薄層色譜（TLC）分析顯示有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖。根據(jù)以上理化性質(zhì)和該化合物的H-NMR（300MHz，C5D5N）及C-NMR（75MHZ，C5D5N）的光譜數(shù)據(jù)，參考文獻(xiàn)鑒定該化合物為常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃木糖基-（13）-α-L-吡喃鼠李糖基-（12）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷。

化合物III：白色方晶，熔點(diǎn)（mp）217-219℃。醋酐-濃硫酸（Libermann-Burchard）反應(yīng)呈現(xiàn)陽性。紫環(huán)反應(yīng)（Molish）呈現(xiàn)陽性。樣品在薄層板上進(jìn)行酸水解后薄層色譜（TLC）分析顯示有鼠李糖和阿拉伯糖。根據(jù)以上理化性質(zhì)和該化合物的H-NMR（300MHz，C5D5N）及C-NMR（75MHZ，C5D5N）光譜數(shù)據(jù)，參考文獻(xiàn)鑒定該化合物為常春藤皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（12）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷。

化合物IV：黃色固體，和三氯化鋁發(fā)生反應(yīng)出現(xiàn)黃綠色的熒光，和鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈現(xiàn)陽性。紫環(huán)反應(yīng)（Molish）呈現(xiàn)陽性。樣品在薄層板上進(jìn)行酸水解后薄層色譜（TLC）分析顯示有葡萄糖、山奈酚和半乳糖。根據(jù)以上理化性質(zhì)和該化合物的H-NMR（600MHz，DM.SO-d6）及C-NMR（150MHZ，C5D5N）的光譜數(shù)據(jù)，并參考文獻(xiàn)鑒定鑒定化合物為山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（12）-β-D-吡喃半乳糖基-（12）-β-D-吡喃葡萄苷，此化合物為該種植物中首次分離得到的。

化合物V：白色結(jié)晶，醋酐-濃硫酸（Libermann-Burchard）反應(yīng)呈現(xiàn)陽性。紫環(huán)反應(yīng)（Molish）呈現(xiàn)陽性。樣品在薄層板上進(jìn)行酸水解后薄層色譜（TLC）分析顯示鼠李糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖。根據(jù)以上理化性質(zhì)和該化合物的H-NMR（600MHz，C5D5N）及C-NMR（150MHZ，C5D5N）的光譜數(shù)據(jù)，參考文獻(xiàn)鑒定該化合物為kaempferol3-O-[β-D-glueopyranosyl-（12）-β-D-galactopyranosyl-（12）-glucopyranosyl]此化合物為該屬植物中首次分離得到的。

4結(jié)論

中藥榴果黑種全草甲醇提取液經(jīng)過分離純化得到5種化合物，其中第四五類化合物為首次從該屬植物中分離得到。

參考文獻(xiàn)

[1]國家中醫(yī)藥管理局.中華本草[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999.09.

[2]郝海峰，任麗娟，陳玉武.黑草種子化學(xué)成分研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1996，31（9）：689-694.

篇7

關(guān)鍵詞：直接藥敏試驗(yàn)；常規(guī)藥敏試驗(yàn)；血液細(xì)菌；鑒定與檢驗(yàn)；價(jià)值比較

近年來，由于臨床上抗生素的濫用現(xiàn)象嚴(yán)重，導(dǎo)致耐藥菌的出現(xiàn)進(jìn)而引起抗生素的治療失效[1]。臨床上，做好細(xì)菌的臨床檢驗(yàn)，確定各種細(xì)菌的藥物敏感性具有重要的意義，它是臨床用藥的前提和依據(jù)[2]。隨著現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，越來越多智能化、自動(dòng)化的醫(yī)療儀器已經(jīng)在臨床治療的各個(gè)環(huán)節(jié)中得到廣泛應(yīng)用，為臨床上各種疾病的診斷和治療提供了極大的幫助[3]。先進(jìn)的醫(yī)療儀器具有其檢測特異性和靈敏性的優(yōu)勢，但是通常自動(dòng)化的醫(yī)療機(jī)器往往價(jià)格均較為昂貴，難以在基層醫(yī)院推廣應(yīng)用。藥敏試驗(yàn)法和生化微管法細(xì)菌鑒定目前在基層醫(yī)院的檢測中仍占有重要地位，尤其是對菌血癥及敗血癥患者及時(shí)的獲取有效的抗生素的藥敏結(jié)果具有著重要的臨床治療意義[4-5]。本研究回顧性分析本院2010年10月～2013年10月診斷陽性的血液樣品資料，對陽性樣品進(jìn)行培養(yǎng)后，進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)，比較兩種檢測結(jié)果，探究直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究中485例均為我院2010年10月～2013年10月診斷陽性的血液樣品，全自動(dòng)血培養(yǎng)儀培養(yǎng)（北京伯盛泰科技有限公司，京藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2012第2400316號），細(xì)菌鑒定時(shí)所使用的API鑒定板條（Remel Inc.國食藥監(jiān)械（進(jìn)）字2012第2401104號）。其他儀器及試劑包括： 細(xì)菌鑒定、藥敏綜合板、藥敏紙片（Becton Dickinson and Company，國食藥監(jiān)械（進(jìn)）字2012第2403040號）、MH干粉、血平板（濟(jì)南賽爾生物科技有限公司，魯濟(jì)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2012第1400066號）、巧克力平板（烏魯木齊宏信科創(chuàng)生物科技有限公司，新烏食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2011第1400089號）、麥康凱平板（成都瑞琦科技實(shí)業(yè)有限責(zé)任公司，川食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2011第2400016號）、無菌拭子及一次性無菌注射器。

1.2 方法

1.2.1 直接藥敏試驗(yàn) 從全自動(dòng)血培養(yǎng)儀取出陽性樣本后用無菌注射器抽取部分樣品并加入無菌離心管中，置入離心機(jī)內(nèi)進(jìn)行離心1500rpm，離心5min。然后吸取離心管上層清液置入另一離心管中，3000rpm離心15min，棄去上清后，對沉淀物進(jìn)行0.9%氯化鈉溶液洗滌3次，收集均細(xì)胞黏液行涂片革蘭染色，顯微鏡下觀察細(xì)菌形態(tài)。結(jié)果為常規(guī)菌則接種到MH-平板上，無菌拭子涂抹均勻并貼上藥敏紙片。革蘭氏染色結(jié)果為革蘭陽性球菌（G+）呈鏈狀，則以MH+羊血平板并進(jìn)行初步藥敏試驗(yàn)，根據(jù)結(jié)果選擇適當(dāng)酶試驗(yàn)，最后調(diào)整菌液濃度到6.2×102cfu/L涂到綜合板上行藥敏試驗(yàn)和細(xì)菌鑒定。

1.2.2 常規(guī)藥敏試驗(yàn) 同樣無菌環(huán)境中取陽性樣本接種于各種不同平板，放置于溫度為35℃，5% CO2的孵箱中孵育18～24h后，之后進(jìn)行革蘭染色。同樣根據(jù)染色檢測結(jié)果選擇相應(yīng)的酶試驗(yàn)。

1.3藥敏紙片選擇 一般情況下，革蘭陰性桿菌（G-）多選擇頭孢類抗生素，革蘭氏陽性菌（G+）多選擇β-內(nèi)酰胺類、部分萬古霉素及大環(huán)內(nèi)酯類。

1.4數(shù)據(jù)處理 本研究中所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，表示方法采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，結(jié)果以P

2 結(jié)果

共培養(yǎng)485例陽性樣品，其中直接藥敏試驗(yàn)檢出410例，常規(guī)藥敏試驗(yàn)檢出485例，符合率為84.54%。485例樣品中，革蘭氏陽性菌（G+）87株，占總數(shù)的17.94%；革蘭氏陰性菌（G-）398株，占總數(shù)的82.06%，兩種方法檢測G-菌結(jié)果差異不顯著（P>0.05），見表1。

3 討論

隨著臨床上抗生素使用的增多，不合理的抗生素使用率逐年增高，多重耐藥細(xì)菌感染的患者比例也明顯增高，這往往誘發(fā)患者全身感染性疾病，敗血癥和菌血癥是臨床嚴(yán)重危及患者生命的疾病，因此快速準(zhǔn)確的藥敏試驗(yàn)與細(xì)菌鑒定是臨床診斷和治療的關(guān)鍵。故高效、快速耐藥性試驗(yàn)和細(xì)菌鑒定在臨床治療方面顯得極為重要，從而能快速控制感染，提高患者的治愈率[6]。

目前，臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)以常規(guī)藥敏試驗(yàn)最為常用。其基本原理為臨床定性試驗(yàn)，往往通過測量抑菌環(huán)直徑與抗生素的抑菌濃度來設(shè)計(jì)相關(guān)試驗(yàn)。由于該方法對環(huán)境和設(shè)備等條件要求較高，在臨床推廣方面造成了許多不便；其次常規(guī)藥敏試驗(yàn)檢測所需時(shí)間一般較長，通常在2～3d后才能獲得試驗(yàn)結(jié)果，沒有得到藥敏結(jié)果前，往往只能依靠醫(yī)生臨床經(jīng)驗(yàn)去判斷，選擇相應(yīng)的抗生素進(jìn)行治療，此時(shí)，對于感染多重耐藥性細(xì)菌的患者臨床療效往往較差，并且導(dǎo)錯(cuò)過誤最佳治療時(shí)間，從而加重病情[7]；該方法還存在誤差率偏高，相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，在測量抑菌直徑時(shí)誤差約在±2mm左右[8]，忽略誤差后準(zhǔn)確率約>95%。種種條件均限制常規(guī)藥敏試驗(yàn)快速、高效檢驗(yàn)。

直接藥敏試驗(yàn)最早是1973年提出后便逐漸引起各界學(xué)者的廣泛關(guān)注，1986年美國Fincgold等人再次提出這一說法，他們認(rèn)為直接對臨床患者血液標(biāo)本進(jìn)行藥敏檢驗(yàn)，可達(dá)到快速、高效檢驗(yàn)?zāi)康腫9]。

本研究結(jié)果表明，臨床上采用直接藥敏試驗(yàn)和常規(guī)藥敏試驗(yàn)進(jìn)行血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)，能達(dá)到快速確定病原菌的藥敏特性的目的，從而減少了盲目用藥，提高臨床治愈率和治療效果。

參考文獻(xiàn)：

[1]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.東南大學(xué)出版社，2006，11（3）：739-740.

[2]王亞霞，蘇振杰，任鳳秋.K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法檢測細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)的影響因素分析[J].中國醫(yī)藥指南，2009，7（5）：41-42.

[3]鑫海.Microscan AS-4自動(dòng)微生物分析儀在細(xì)菌室間質(zhì)控中的評價(jià)[J].上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2000，15（1）：22-23.

[4]吳紹蓮，胡辛蘭，池春燕.血培養(yǎng)常見病原菌的變遷和耐藥性分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31（2）：138-140.

[5]漆堅(jiān).全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對血培養(yǎng)陽性標(biāo)本直接鑒定及藥敏試驗(yàn)比較[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，27（5）：397-398.

[6]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility[J].Tweenty-first informational supplement，2012，M100-S2232（3）：62-78.

[7]李慧.兩種細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，38（9）：1705-1706.

篇8

【摘要】 目的研究補(bǔ)腎中藥杜仲含藥血清對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖及定向分化的影響。方法將第4代MSCs以5×106接種于9塊96孔板，3組，每組8孔;2塊6孔板，每板3孔，2 d后換液，加入誘導(dǎo)液。分為空白組、地塞米松組、杜仲組。空白組加入含10%胎牛血清(FBS)的 L-DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，地塞米松組在基礎(chǔ)培養(yǎng)基加入誘導(dǎo)劑(含β甘油磷酸鈉10mmol/L，地塞米松0.1 μmol/L，維生素C 50 mg/L)，杜仲組為含10%杜仲含藥血清的L-DMEM培養(yǎng)基。分別自加誘導(dǎo)液第1天起，采用MTT法測量96孔板細(xì)胞數(shù)，每天1塊板;在第10天取出1塊6孔板做ALP染色;第20天做6孔板茜素紅染色。結(jié)果杜仲含藥血清組OD值呈現(xiàn)出明顯的上升趨勢，而空白組和地塞米松組無明顯上升趨勢;第10天杜仲組及地塞米松組ALP染色陽性，第13天起可見白色鈣結(jié)節(jié)，第20天茜素紅染色陽性。結(jié)論杜仲含藥血清能促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化，并刺激細(xì)胞增殖。

【關(guān)鍵詞】 杜仲; 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 ; 成骨細(xì)胞

Abstract：ObjectiveTo study the generation and directional differentiation of BMSCs induced by Duzhong(eucommia bark ) which can invigorate the kidney. MethodsInoculated quartus generation MSCs in nine ninety six-hole cell culture plates and two six-holes cell culture plates by 5×106 cells per milliliter， all the holes were pided into three groups named blank group， DXM group and Duzhong(eucommia bark ) group ， each group had eight holes or three holes， two days later， changed medium and added new medium. The medium of DXM group contained 10mmol/L β-sodium glycerophosphate， 0.1 μmol/L DXM， 50mg/L vitamin C， that of Duzhong(eucommia bark ) group contained 10% blood serum containing Duzhong(eucommia bark ). Measured cell number of 96-hole plates from the second day to the eighth day， one of the 6-holes plates was colored by AKP staining solution at the tenth day， the last one was colored by alizarin Bordeaux on the twentyth day.ResultsThe OD value of Duzhong(eucommia bark ) group rose obviously， blank group and DXM group had no obvious ascensus; on the tenth day DXM group and Duzhong(eucommia bark ) group were colored masculine; white calcium nodus could be seen on the undersurface of the holes 13days later， which could be colored by alizarin Bordeaux twenty days later. ConclusionBlood serum containing Duzhong(eucommia bark ) can induce BMSCs differentiate to osteoblast and stimulate growth of cells.

Key words：Duzhong(eucommia bark ) ; MSCs; osteoblast

間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSCs ) 是一種多潛能成體干細(xì)胞，主要存在于骨髓，還存在于胚胎時(shí)期間充質(zhì)來源的骨外組織，如皮膚成纖維細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、骨骼肌的衛(wèi)星細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞等。骨髓MSCs ( BMSCs )是骨髓基質(zhì)的組成成分，體外分離培養(yǎng)后，在一定的誘導(dǎo)條件下，具有向成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞等多向分化的能力。在骨組織工程的種子細(xì)胞來源主要有成骨細(xì)胞和BMSCs等。成骨細(xì)胞雖然具有良好成骨活性，但來源有限，大量分離獲取困難，體外大量擴(kuò)增的潛力不足，難以滿足骨組織工程臨床應(yīng)用的需要;BMSCs不僅具有良好的成骨細(xì)胞分化潛能和高成骨活性，而且具有強(qiáng)大的增殖潛能，來源方便，可以滿足自體組織工程。中醫(yī)認(rèn)為，腎主骨，生髓。本實(shí)驗(yàn)擬研究補(bǔ)腎中藥杜仲含藥血清對BMSCs增殖及定向分化的影響。

1 材料與儀器

1.1 動(dòng)物 SPF SD大鼠50只，體重150～200g，雌雄不限，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 試劑 L-DMEM培養(yǎng)基、南美洲胎牛血清(FBS、?？寺?，β甘油磷酸鈉、地塞米松、維生素C、茜素紅、MTT(廣州威佳)，DMSO(sigma)，杜仲(產(chǎn)地云南)，堿性磷酸酶染液、堿性磷酸酶試劑盒(南京建成生物有限公司)，0.25%胰酶(GIBCO公司)。

1.3 器材75cm2培養(yǎng)瓶、96孔板、6孔板(Coning)，酶標(biāo)儀(Thermo)，CO2培養(yǎng)箱 (Heraeus)，注射器針頭濾器，0.22μm濾膜(MILLIpore)，SIGMA-3K15離心機(jī)(sigma)。

2 方法

2.1 杜仲含藥血清的制備取杜仲藥材粗粉150g，加70%乙醇10倍量，加熱回流兩次，1 h/次，過濾，合并濾液，濾液減壓濃縮至300ml，室溫冷卻，4℃冰箱保存?zhèn)溆?。將中藥藥液稀釋?.3g生藥/ml灌胃，1 ml/次，2次/d，連續(xù)給藥4 d，最后一次給藥后1 h經(jīng)腹主動(dòng)脈采血，室溫靜置3 h后置4℃冰箱過夜，2 500 r/min離心20 min，收集上清液，針頭濾器過濾除菌，置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 培養(yǎng)基配制空白組為含10%FBS的 L-DMEM培養(yǎng)基;地塞米松組在空白組基礎(chǔ)上加入誘導(dǎo)劑，其終濃度分別為β甘油磷酸鈉10 mmol/L，地塞米松0.1umol/L，維生素C 50 mg/L;杜仲組在L-DMEM培養(yǎng)基中加入10%杜仲含藥血清。

2.3 MSCs分離培養(yǎng)SD大鼠經(jīng)腹腔10%水合氯醛0.7ml麻醉后，75%酒精浸泡頸部以下軀體5 min，無菌條件下取出雙下肢股骨和脛骨，修潔軟組織后，咬骨鉗修剪骨端，暴露髓腔，10 ml注射器吸取含10%胎牛血清的L-DMEM培養(yǎng)基反復(fù)沖洗髓腔，直到骨質(zhì)外觀微微透亮。75cm2培養(yǎng)瓶收集骨髓沖洗液，放37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。每3天換液1次。

2.4 MSCs傳代當(dāng)細(xì)胞長滿瓶底90%后，0.25%胰酶消化后，以1∶3比例傳代。

2.5 MSCs誘導(dǎo)分化取P4細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞長滿90%后，0.25%胰酶消化制備細(xì)胞懸液后，以每孔150μl ，細(xì)胞密度5×106左右接種于9塊96孔板中，3組，每組8個(gè)復(fù)孔;2塊6孔板，每板3孔，每孔2ml。當(dāng)細(xì)胞長滿瓶底80%以上后換液，加入成骨誘導(dǎo)液。

2.6 MTT測量細(xì)胞數(shù)從加入誘導(dǎo)液24 h后開始測量，每天測一塊96孔板。向96孔板每孔內(nèi)加入5 mg/L的MTT 15 μl，置37℃孵箱培養(yǎng)4 h后，吸出培養(yǎng)液，顯微鏡下可見孔底有黑色甲簪沉積，加入二甲亞楓(DMSO)150μl，搖床振蕩10 min后，酶標(biāo)儀上測量490nm處OD值。取各組平均值繪制細(xì)胞增殖曲線。

2.7 堿性磷酸酶染導(dǎo)培養(yǎng)第10天取出1塊6孔板，吸去培養(yǎng)基， PBS清洗2遍，加入固定液固定10 min后;加入底物，37℃水浴15min，水洗;再加入蘇木素復(fù)染10 min，水洗，晾干，鏡下觀察。

2.8 茜素紅染導(dǎo)培養(yǎng)第20天取出1塊6孔板，吸去成骨細(xì)胞誘導(dǎo)液， PBS 洗3 次，95%酒精固定 10min， 加入 0. 1%茜素紅- Tris- HCL (pH 8. 3) 37℃，30 m in， 鏡下觀察結(jié)果。

3 結(jié)果

3.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察MSCs為成纖維樣細(xì)胞，貼壁后成梭形(見圖1a)。加入誘導(dǎo)液后，空白組細(xì)胞無明顯變化;地塞米松組第5天開始出現(xiàn)細(xì)胞成聚集生長，細(xì)胞體積增大(見圖1b);杜仲含藥血清組從第3天開始出現(xiàn)細(xì)胞成聚集生長，細(xì)胞體積增大(見圖1c)。12 d后地塞米松組和杜仲組見明顯結(jié)節(jié)形成(見圖1d)。

圖1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察

3.2 細(xì)胞增殖曲線見圖2。

圖2 細(xì)胞增殖曲線

可見當(dāng)細(xì)胞貼壁長滿瓶底后，由于接觸抑制，空白組處于一條平緩的曲線，地塞米松組細(xì)胞增殖不如杜仲組明顯。

3.3 堿性磷酸酶染色第10天，經(jīng)細(xì)胞堿性磷酸酶染色，可見細(xì)胞內(nèi)藍(lán)色顆粒，細(xì)胞聚集區(qū)成紫黑色。(見圖3)。

圖3 堿性磷酸酶染色(10×10) 圖4 茜素紅染色(10×10)

3.4 茜素紅染色第20天，茜素紅染色可見紅色結(jié)節(jié)堆積(見圖4)。

4 討論

4.1 杜仲含藥血清的制備血清藥理學(xué)在某種程度上可以克服中藥制劑本身的理化性質(zhì)等不確定因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾， 而且相對接近藥物在體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化的真實(shí)過程。即其具有兩大優(yōu)點(diǎn)：①體現(xiàn)復(fù)方體內(nèi)生化轉(zhuǎn)化效應(yīng);②克服藥物本身理化性質(zhì)對實(shí)驗(yàn)的直接干擾[1]。選用同源性的動(dòng)物制備血清，可以減少因種屬差異而造成的免疫反應(yīng)，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性[2]。有人認(rèn)為含藥血清中原有許多酶、抗體、補(bǔ)體、細(xì)胞因子及其它生物活性物質(zhì)， 它們對體外培養(yǎng)的細(xì)胞、病毒、病原菌以及用于體外實(shí)驗(yàn)的組織器官可能產(chǎn)生直接影響而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果， 影響藥物療效的客觀評價(jià)。血清滅活后可排除這些干擾因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響， 有助于減少血清的非藥理性干擾[3]。但中藥成分復(fù)雜，在體內(nèi)的藥理作用復(fù)雜，非滅活血清更能體現(xiàn)藥物在體內(nèi)的作用，且實(shí)驗(yàn)過程中未見細(xì)胞毒性作用。

4.2 原代MSCs分離培養(yǎng)常用于MSCs分離的方法主要采用密度離心法和全骨髓法，而流式細(xì)胞儀分離法與免疫磁珠法操作繁瑣、費(fèi)用昂貴，并且對細(xì)胞活性影響較大，使用受到限制。本實(shí)驗(yàn)采用全骨髓貼壁分離法，得到形態(tài)均勻一致的MSCs。離心法是根據(jù)間充質(zhì)細(xì)胞與其他細(xì)胞密度不同，用分離液分離的方法。全骨髓法是根據(jù)間充質(zhì)細(xì)胞能在培養(yǎng)瓶中貼壁生長的特點(diǎn)進(jìn)行分離，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與密度離心法所獲細(xì)胞純度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別[4]。全骨髓法操作簡單、設(shè)備要求低、費(fèi)用低廉，血液成分的存在以及其所含的生長因子與促貼附物質(zhì)提供了一個(gè)穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境和營養(yǎng)物質(zhì)，有利于MSCs的貼附與增殖[5];研究表明擴(kuò)增一代、兩代后細(xì)胞純度可以達(dá)到95%和98%[6]。也有人將不同的分離方法合用[7]發(fā)揮更好的作用。

4.3 杜仲含藥血清誘導(dǎo)MSCs的臨床意義骨組織工程學(xué)具有廣闊的臨床應(yīng)用的前景，成為現(xiàn)代骨科學(xué)的研究熱點(diǎn)。BMSCs作為目前最為理想的骨組織工程種子細(xì)胞，對其作用研究的中心任務(wù)則是如何使之在盡可能簡單的條件下定向分化為成骨細(xì)胞，進(jìn)而轉(zhuǎn)化為成熟的骨細(xì)胞。

目前對MSCs定向分化常用的誘導(dǎo)劑由地塞米松、維生素C、β-甘油磷酸鈉組成。而在體外培養(yǎng)中，地塞米松對細(xì)胞增殖具有抑制作用[8]，與本實(shí)驗(yàn)所見相同;臨床上地塞米松具有引起感染、骨壞死、骨質(zhì)疏松等副作用，將會(huì)限制MSCs移植后在體內(nèi)的作為誘導(dǎo)劑的運(yùn)用。杜仲具有補(bǔ)腎、強(qiáng)筋骨的作用，實(shí)驗(yàn)證明具有促進(jìn)MSCs增殖和誘導(dǎo)MSCs向成骨分化的作用。長期的臨床運(yùn)用中，未見杜仲的毒副作用，將其作為體內(nèi)誘導(dǎo)劑具有廣泛的臨床運(yùn)用前景。

總之，目前對于MSCs作為骨組織工程種子細(xì)胞的研究，大多還處于實(shí)驗(yàn)階段，如何能在較短時(shí)間內(nèi)得到足夠的MSCs，并運(yùn)用簡單的方法誘導(dǎo)其向成骨分化，是目前研究的重點(diǎn)。盡管具有補(bǔ)腎、強(qiáng)筋骨作用的杜仲促進(jìn)MSCs分化和增殖作用的機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究，但將其作為MSCs分化誘導(dǎo)劑，用于MSCs移植治療骨折延遲愈合、不愈合、骨壞死等具有光明的前景。

參考文獻(xiàn)

[1] 譚采慶，霍海如，崔曉蘭，等.中藥血清藥理學(xué)研究方法及應(yīng)用[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，1997， 3(6):41.

[2] Lu X J.The several aproach on study of serum pharmacology [J].Primary Journal of Chinese Materia Medica.2003，14(3):51.

[3] 吳水生，張小如，阮時(shí)寶.血清藥理學(xué)研究中含藥血清是否需滅活的探討[J].福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001，11(2)：45.

[4] 丁偉榮，吳曉牧，繞燕飛，等.人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法的比較研究[J].江西醫(yī)藥，2007，42(2)115.

[5] 劉大鵬，艾合麥提·玉素甫，阿孜古麗·吐爾遜，等.骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)和分化誘導(dǎo)[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，27:331.

[6] Pittenger MF， Mackay AM， Beck SC，et al. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells [J].Science， 1999，184(5411):143.

篇9

【關(guān)鍵詞】 中藥鑒定；分子生物學(xué)技術(shù)；免疫法；綜述

近年來，許多新學(xué)科理論和試驗(yàn)技術(shù)不斷滲透到中藥鑒定領(lǐng)域，中藥鑒定技術(shù)有了一定的發(fā)展，現(xiàn)綜述如下。

1 聚類分析法

聚類分析是按照對象的定性或定量特征進(jìn)行分組歸類的一種現(xiàn)代統(tǒng)計(jì)方法。選取不同的模糊相似系數(shù)或長短距離計(jì)算公式，將一批樣品或變量進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，得到不同的動(dòng)態(tài)聚類圖，從數(shù)圖上即可分類、鑒定和評價(jià)藥材質(zhì)量。經(jīng)李慧珍等［1］對馬勃等18種真菌顯微特征聚類分析、蘇薇薇［2］以砂仁及其偽品的紫外光譜為量化特征在計(jì)算機(jī)上用聚類分析法進(jìn)行分析的實(shí)踐，證明該法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與傳統(tǒng)的生物學(xué)方法吻合，顯示了該技術(shù)在中藥鑒定中的廣闊前景。常璇等［3］利用此法對寧夏中寧縣、平羅縣兩地枸杞中銅、鋅、錳、鍺、硒、砷等6種微量元素的含量進(jìn)行了綜合評價(jià)，以比較研究不同產(chǎn)地之間的枸杞。聚類分析結(jié)果表明，該法在整體水平上可區(qū)分不同產(chǎn)地枸杞中6種元素含量，誤判率為0。提示經(jīng)過更多的驗(yàn)證之后，在不同省區(qū)枸杞之間進(jìn)行聚類分析比較研究，可為枸杞道地性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供有價(jià)值的理論依據(jù)。張水寒等［4］應(yīng)用系統(tǒng)聚類法，對20批關(guān)黃柏樣品的HPLCFP中各特征峰的相對峰面積進(jìn)行分析。聚類結(jié)果顯示16、17、18、19、20號樣品為道地藥材樣品，質(zhì)量均較好，且以湖南的道地藥材樣品為好。此方法可用于中藥的鑒別，方法較為簡便，且樣品處理較簡單，這將對中藥質(zhì)量的規(guī)范化起到一定的積極作用。

2 指紋圖譜法

中藥指紋圖譜技術(shù)［5］是指某中藥材或中成藥中所共有的，具有特征性的某類或幾種成分的色譜或光譜的圖譜。即用一定的方法（如HPLC、GC、TLC、HPLCMS、GCMS、FTIR、Xray和UV等），對特定的對象（如中藥材、提取物、飲片、注射液等）和過程進(jìn)行分析，得到的有特征性的相對穩(wěn)定的圖譜。其最大的特點(diǎn)就是通過指紋圖譜的特征性，有效鑒別樣品的真?zhèn)巍Ｄ壳笆褂米疃嗟闹兴幓瘜W(xué)指紋圖譜是采用HPLC法［6］，可提供大量的信息，符合中藥復(fù)雜體系研究的需要。

3 免疫法

不同的動(dòng)植物藥材含有不同的特異蛋白，免疫鑒別即利用該蛋白制備的特異抗體與待檢品中的特異抗原結(jié)合產(chǎn)生沉淀反應(yīng)來鑒別藥材的真?zhèn)巍Ｔ摷夹g(shù)適用于動(dòng)物藥材的鑒別，尤其是親緣關(guān)系比較接近的動(dòng)物藥間的鑒別［7］。國內(nèi)學(xué)者［8］采用免疫電泳法及瓊脂免疫擴(kuò)散法準(zhǔn)確鑒定了虎、豹等多種動(dòng)物的骨骼，還能將豹骨進(jìn)一步鑒定為雪豹、石豹或金錢豹，說明免疫鑒別方法是一種特異性很強(qiáng)的鑒別法。

4 DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)

分子標(biāo)記技術(shù)也稱DNA分子診斷技術(shù)，是基于研究DNA分子由于缺失、插入、易位、倒置、重排或由于存在長短與排列不一的重復(fù)序列等機(jī)制而產(chǎn)生的多態(tài)性的檢測技術(shù)［1］?，F(xiàn)代分子生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，中藥材（不含礦物藥）物種的多樣性是由于其基因多態(tài)性的結(jié)果，而基因多態(tài)性可在分子水平上檢測，它比在形態(tài)、組織和化學(xué)水平上檢測更能代表其變異類型的遺傳標(biāo)記。由于DNA分子標(biāo)記直接分析的是生物的基因型而非表現(xiàn)型，鑒別結(jié)果不受環(huán)境因素、樣品形態(tài)（原品、粉狀或片狀）和材料來源的影響，因此可為中藥品種鑒別提供更加準(zhǔn)確可靠的手段。如：限制性片斷長度多態(tài)性分析技術(shù)（RFLP）；多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）測序技術(shù)；隨機(jī)引物PCR技術(shù)（RAPD）； DNA序列標(biāo)記技術(shù)等。

綜上所述，現(xiàn)代中藥鑒定學(xué)發(fā)展的目標(biāo)是：建立包括聚類分析、基因組成特征、指紋圖譜法、等多層面的中藥鑒定學(xué)科體系，同時(shí)通過這種學(xué)科體系建設(shè)，為尋找和擴(kuò)大新藥源提供可靠的指導(dǎo)資料。

參考文獻(xiàn)

［1］李慧珍，李水福，胡清宇，等.馬勃類18種真菌顯微特征的聚類分析［J］.基層中藥雜志，1996，10（3）： 8.

［2］蘇薇薇.聚類分析法在砂仁及其偽品鑒別分類中的應(yīng)用［J］.數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，1998，11 （2）： 158.

［3］常璇，胡奇林.用聚類分析方法對寧夏中寧縣和平羅縣枸杞中6種元素綜合指標(biāo)的比較研究［J］.寧夏大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2006，27 （3）： 248.

［4］張水寒，郭偉偉，蔡光先.HPLC指紋圖譜結(jié)合系統(tǒng)聚類法對不同產(chǎn)地關(guān)黃柏藥材的分析研究［J］.科技導(dǎo)報(bào)，2006，24（9）： 53.

［5］王睿，徐偉，方翼，等.中藥指紋圖譜研究進(jìn)展［J］.中國藥師，2004，7（10）：764767.

［6］路飚，彭詠梅.HPLC法測定心腦健滴丸中兒茶素和表兒茶素的含量［J］.湖南中醫(yī)雜志，2007，23（1）：7878，83.

篇10

1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與內(nèi)容

1.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在臨床之中對中藥的應(yīng)用以復(fù)方為主,方劑學(xué)同中藥學(xué)均屬于中醫(yī)藥學(xué)中基礎(chǔ)的學(xué)科,是將臨床同理論二者之間進(jìn)行連接的紐帶,因此,在對中藥學(xué)進(jìn)行多學(xué)科性的實(shí)驗(yàn)之中,也需要遵從方藥結(jié)合的方式,將二者有機(jī)地聯(lián)系在一起。在對方劑進(jìn)行選擇時(shí),不僅需要考慮學(xué)生本身屬于初步接觸到專業(yè)課這一特點(diǎn),將組成方劑的藥味設(shè)定在3味至4味便可,最理想的是對某一類疾病進(jìn)行治療的藥方,同時(shí),還能夠?qū)λ幏降寞熜нM(jìn)行保障,中藥藥理學(xué)具有著十分可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,這也能夠有效地增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)的自信心與積極性,還需要保證組成該藥方的藥物能夠?yàn)閷W(xué)生帶來更加理想的感知性,在對藥材進(jìn)行選擇時(shí),應(yīng)盡可能地保障其形狀特點(diǎn)以及質(zhì)地等的多樣化,且需要具有明顯的特征,藥物最好能夠包括礦物藥、植物藥以及動(dòng)物藥等。在對實(shí)驗(yàn)的方法進(jìn)行設(shè)計(jì)時(shí),應(yīng)盡可能地選擇簡明扼要、直觀的教學(xué)方式,通過對不同學(xué)科知識(shí)結(jié)構(gòu)之中一些較為淺顯的要點(diǎn)進(jìn)行抽取,將顯微鏡之下所觀察到的特點(diǎn)以及肉眼所觀察到的特點(diǎn)進(jìn)行結(jié)合,保證對知識(shí)進(jìn)行傳授時(shí)能夠由點(diǎn)到面,形成一個(gè)系統(tǒng)的教學(xué)路線。

1.2實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

貫徹方藥結(jié)合,多學(xué)科感知性的實(shí)驗(yàn)思想,在本次研究中選擇應(yīng)用名方麻杏甘石湯作為研究的內(nèi)容,該藥房主要有種仁、麻黃、根莖、草質(zhì)莖、石膏、杏仁、礦石以及干草組成,具有清肺平喘、辛涼解表等效果,在臨床中主要對外感風(fēng)邪等疾病進(jìn)行治療,研究的主要內(nèi)容是將組成麻杏甘石湯的方藥進(jìn)行鑒定,并對其鎮(zhèn)咳的藥效進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。第一部分:主要對藥用植物的形態(tài)進(jìn)行鑒別。通過專門對藥用植物學(xué)進(jìn)行講授的教師引領(lǐng)學(xué)生在植物園內(nèi)對所種植的藥用植物具體的特征與形態(tài)進(jìn)行觀察。第二部分:對藥材的形狀進(jìn)行鑒別。通過專門對中藥鑒定學(xué)進(jìn)行講授的教師引領(lǐng)學(xué)生到藥標(biāo)本館對藥材的形狀進(jìn)行鑒別,在此過程中,教師應(yīng)引導(dǎo)學(xué)生使用肉眼對干草、麻黃、石膏以及杏仁等藥材的特點(diǎn)與性狀進(jìn)行觀察。第三部分:對藥材進(jìn)行顯微鑒別。通過專門對中藥鑒定學(xué)進(jìn)行講授的教師引領(lǐng)學(xué)生在顯微鏡下對藥材進(jìn)行鑒別與觀察,引導(dǎo)其自行應(yīng)用顯微鏡去對干草、麻黃、石膏以及杏仁等藥材特點(diǎn)與性狀進(jìn)行觀察。第四部分:對方藥藥理進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)。通過專門對中藥藥理學(xué)進(jìn)行講授的教師應(yīng)用麻杏甘石湯對小白鼠進(jìn)行鎮(zhèn)咳,提高學(xué)生自單一的藥、聯(lián)系直至成方,最終完成對方劑藥效的實(shí)驗(yàn),使學(xué)生能夠更加清晰地了解到方劑同中藥之間所存在著的緊密聯(lián)系。

2評價(jià)與思考