導(dǎo)語(yǔ)：如何才能寫(xiě)好一篇多喜歡你，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

最后建議，其實(shí)今天也還是我去關(guān)注一下他最近說(shuō)的聽(tīng)的是什么歌，吧，然后當(dāng)時(shí)就是有看到他最近一家訂的那一首歌叫做多喜歡你其實(shí)就是一種科，這一總覺(jué)得有一些總局的自己當(dāng)時(shí)其實(shí)也是要唱給她聽(tīng)的，因?yàn)楫?dāng)時(shí)的話建議其實(shí)對(duì)這首也是忙得感情的，畢竟是一種小到大都很喜歡這一首歌，然后再加上當(dāng)時(shí)自己的心情是很好的，就是這個(gè)特別適合見(jiàn)伊對(duì)他常和表達(dá)的那一種形式，是說(shuō)里面有一些情景是我們兩個(gè)人沒(méi)有發(fā)生，可能是繼續(xù)希望說(shuō)在那一種情境，可以在我們兩個(gè)人身上在線就這一當(dāng)時(shí)其實(shí)也是有去給他唱這首歌的，我自己總覺(jué)得可能是有這樣一首歌存在的，但是就去找記錄的話，就沒(méi)有找到這首歌了，就覺(jué)得可能也是自己也參加了擁抱的時(shí)候是自己當(dāng)時(shí)想要穿給他們看，但是后來(lái)自己沒(méi)有辦法培養(yǎng)就沒(méi)有去給他發(fā)送這一首歌了吧。

然后就建議其實(shí)昨天就前幾天不是去看了一下他的那個(gè)喜歡的視頻嗎，那里面不是有一首歌說(shuō)可以反映一下他現(xiàn)在是已經(jīng)有幾個(gè)女孩子出現(xiàn)在他的身邊了嗎？然后現(xiàn)在的話又看到他總是要聽(tīng)這一首歌，其實(shí)要是他真的去唱這首歌了，然后要是這一首歌也經(jīng)過(guò)分享，然后他就實(shí)錘了他，是真的有新的女孩子出現(xiàn)了，就自己去了解去對(duì)于他來(lái)說(shuō)的話真的就是現(xiàn)在的女孩子做事情是真的很緊張的，就總覺(jué)得其實(shí)我們兩個(gè)人吧在彼此的眼中都是那種生命意境可能特別多，然后隨時(shí)都可以脫單的那一種，就在他的心目中自己也是這樣子的一種人，但是實(shí)際情況真的是一個(gè)不是這樣子的一種，然后以及他在自己的心目中也是那種身邊的異性朋友很多，然后只要他愿意去踏開(kāi)一步之后的人都愿意去和他成為對(duì)象的這一種感覺(jué)，但是呢，他當(dāng)時(shí)要否定了自己這樣子的想法，這樣子的認(rèn)為。

所以可能他也會(huì)對(duì)自己產(chǎn)生一些誤會(huì)吧，會(huì)覺(jué)得自己用的是情侶頭像，可能也是因?yàn)橛辛藢?duì)象，然后自己又因?yàn)樗吹竭@些視頻，而且他收藏了這些視頻他喜歡的那一些歌曲可能又會(huì)覺(jué)得他是已經(jīng)有對(duì)象了，可能我們兩個(gè)人真的就就沒(méi)有任何可以重新開(kāi)始的這種，就像現(xiàn)在說(shuō)從現(xiàn)在來(lái)看，即便他沒(méi)有新的女孩只能出現(xiàn)，即便這一圈面沒(méi)有被他誤會(huì)，說(shuō)自己已經(jīng)果斷向他承受，我們兩個(gè)人不會(huì)有任何的可能，但是自己還是會(huì)覺(jué)得至少就我自己知道說(shuō)人家一直都是單身，雖然說(shuō)自己還是從朋友他們身上看到的時(shí)候，其實(shí)在變丑之后，人家一直保持單身，也不是一定是對(duì)那段感情的懷念，也不一定是放不開(kāi)那一個(gè)人。

篇2

安語(yǔ)琳轉(zhuǎn)身看安墨軒正睡得老香了，好心的沒(méi)打擾他。要是打擾了她還能逃課嗎。

趁著安墨軒睡覺(jué)的期間，走出教室。拿出手機(jī)查詢(xún)了新語(yǔ)學(xué)校的地圖，突然發(fā)現(xiàn)一個(gè)地方是逃課的好地點(diǎn)還不會(huì)讓人發(fā)現(xiàn)。

來(lái)到學(xué)校后面的假山處，望著幾米多高的墻壁，她從背包里拿出一雙攀巖鞋，哈哈。天下小女子唯有安語(yǔ)琳聰明也。安語(yǔ)琳輕松的翻過(guò)墻，這種小事在家里她是經(jīng)常做的。

咚。落地聲響起：“耶，成功了！”安語(yǔ)琳興奮的說(shuō)道。望了望那高高的墻，她邪邪一笑說(shuō)：“拜拜了。”

躲在假山后面的風(fēng)凌飛看著剛才安語(yǔ)琳一氣呵成的動(dòng)作，便知道這個(gè)女孩的功夫不淺。

腦子里突然冒出一個(gè)壞壞的想法，想要捉弄一下她。“對(duì)了，有了，哈哈。”風(fēng)凌飛瞇縫著眼看向剛才安語(yǔ)琳翻過(guò)的墻，玩味的說(shuō)道：“安語(yǔ)琳，是你惹到的我哦？這是你應(yīng)該得的。”

剛回到教室，便看見(jiàn)安墨軒向他走來(lái)。

“風(fēng)同學(xué)，請(qǐng)問(wèn)你有沒(méi)有見(jiàn)到安語(yǔ)琳同學(xué)啊。”安墨軒著急的問(wèn)道，該死的，她怎么就睡著了啊，她要是貪玩到很晚才回家，他不就死了嗎？

“沒(méi)有。”哼，他為什么要告訴安墨軒。

“謝謝啊。”安墨軒不好意思地笑了笑，便急忙著出去找。

安墨軒以為安語(yǔ)琳會(huì)在小表哥那里瘋呢，便急忙地跑向教導(dǎo)樓，去到之后發(fā)現(xiàn)沒(méi)有，還被小表哥瞪了一眼，原因就是撞破了小表哥和女人風(fēng)流的情景。

安墨軒怎么也沒(méi)想到安語(yǔ)琳會(huì)逃課。而且安語(yǔ)琳會(huì)在外邊玩的高高興興。

齊茵茵今天才剛回國(guó)，還沒(méi)休息，便被安語(yǔ)琳拉出來(lái)了。

“茵茵姐，我們現(xiàn)在要去哪里??？”安語(yǔ)琳手里拿著羊肉串，大大咧咧的說(shuō)道。

齊茵茵好笑的看著安語(yǔ)琳的模樣，寵溺地說(shuō)道；“你想去哪？”

安語(yǔ)琳輕輕舔舐舌頭，抿著小嘴甜甜一笑道：“偶想去、、、酒、、吧。”聲音愈來(lái)愈小。

“不行。”齊茵茵想也沒(méi)想的一口拒絕了，像她這樣的女孩子怎么能去那種場(chǎng)所呢。

“茵茵姐，我的好茵茵姐，好嫂子。”既然叫茵茵姐不管用還是叫嫂子吧。嘿嘿，安語(yǔ)琳想。

齊茵茵受不了安語(yǔ)琳的軟磨硬泡，最終答應(yīng)她等到夜色降臨的時(shí)候去酒吧玩。

兩個(gè)人玩了一下午才分開(kāi)。

“呼呼呼，好驚險(xiǎn)啊，不知道老哥知道后會(huì)不會(huì)把我給劈了。”安語(yǔ)琳翻過(guò)假山后的墻，心驚肉跳的說(shuō)道。

安語(yǔ)琳一路小跑到教學(xué)樓，一路安安靜靜，看來(lái)上課紀(jì)律很好嘛。

走到了自己所在的班級(jí)，咦，她怎么聽(tīng)見(jiàn)班里紀(jì)律好亂哦，腳步向前走過(guò)去，看到教室門(mén)是半掩著的，便伸手打開(kāi)。彭。一個(gè)東西的掉落聲。

“誰(shuí)干的，媽的。”竟然敢在門(mén)上當(dāng)桶水，害的她全身濕漉漉的。

安語(yǔ)琳用手捋了下濕漉漉的發(fā)絲，拂去水珠。

抬起頭，看到全班的學(xué)生靜悄悄的，目不轉(zhuǎn)睛地看著她，仿佛在期待她的下一步。頓時(shí)，她怒了，略有略無(wú)的瞟了一眼全班同學(xué)，最后視線定格在某男身上，他正在趴頭睡覺(jué)，世俗與他無(wú)關(guān)的樣子。

篇3

書(shū)房?jī)?nèi)

安語(yǔ)琳趴在電腦前，靜靜的看著電腦上的畫(huà)面。里面，一個(gè)男子剛從浴室出來(lái)，身著浴袍，發(fā)絲不時(shí)地滴下水珠，剛毅俊美的面龐，薄唇，直挺的鼻梁，胸前微露的腹肌，簡(jiǎn)直就是花美男一個(gè)。

安語(yǔ)琳看著電腦前的畫(huà)面，說(shuō)道：“沒(méi)想到風(fēng)凌飛還挺爺們?。?rdquo;

沒(méi)錯(cuò)，這個(gè)花美男就是我們風(fēng)王子，當(dāng)然風(fēng)王子是想不到偶們的女主會(huì)偷偷的把他家的攝像偷偷轉(zhuǎn)到她的電腦里的。

安語(yǔ)琳截取這段視頻，重新申請(qǐng)ID號(hào)，登錄新語(yǔ)高中網(wǎng)站首頁(yè)，把剛才截取的視頻傳入學(xué)校網(wǎng)站，并且附給起了一個(gè)響當(dāng)當(dāng)?shù)臉?biāo)題：新語(yǔ)花美男風(fēng)凌飛---澡后欲照。

端起電腦旁的咖啡，心情愉悅的品味著。

五分鐘后，安語(yǔ)琳如之前呆在電腦前，心情愉悅的看著剛才傳入視頻的點(diǎn)擊率，不錯(cuò)，看來(lái)他還很出名嗎，才幾分鐘視頻點(diǎn)擊率就高達(dá)幾千。

整個(gè)新語(yǔ)學(xué)校才多少人啊。小學(xué)部，初中部，高中部加起來(lái)不過(guò)四五千人。

從這就能看出風(fēng)凌飛的人氣到底有多高了。

安語(yǔ)琳看著視頻點(diǎn)擊率，手指了指視頻中的男主角說(shuō)：“也不虧今天為了你而拒絕和茵茵姐去酒吧玩了。”

(作者有話；這話你也好意思說(shuō)。語(yǔ)琳；怎么不敢了，哼)

淺水灣別墅區(qū)XXX號(hào)

一陣電話鈴聲打斷了正在忙于工作的風(fēng)凌飛。

“允楓？”看著手機(jī)顯示的人名，一陣疑惑，大半夜的打電話有什么事啊。

“喂，楓，什么事。”接電話的同時(shí)手指尖還忙于電腦鍵盤(pán)之間。

“你現(xiàn)在登錄學(xué)校網(wǎng)站，看看就知道了。”登錄學(xué)校網(wǎng)站做什么，他從來(lái)不會(huì)做這么無(wú)聊的事情的。

“。就這事嗎？”

歐允楓聽(tīng)見(jiàn)風(fēng)凌飛的聲音，便覺(jué)得真是皇上不急急死太監(jiān)，急說(shuō)：“那里面有你的視頻，點(diǎn)擊率都打上千了，幸好學(xué)校網(wǎng)站是允許外校登錄的。”

“我的視頻，我能有什么視頻??？”

“你洗完澡的視頻。”他在也淡定不下了，脫口而出。

風(fēng)凌飛退出工作網(wǎng)頁(yè)，登錄他從來(lái)也沒(méi)登錄的學(xué)校網(wǎng)站，他的視線流轉(zhuǎn)與一個(gè)響當(dāng)當(dāng)?shù)臉?biāo)題；新語(yǔ)花美男風(fēng)凌飛---澡后浴照。

點(diǎn)擊打開(kāi)觀看，畫(huà)面里，一個(gè)男子剛從浴室出來(lái)，身著浴袍，發(fā)絲不時(shí)地滴下水珠，剛毅俊美的面龐，薄唇，直挺的鼻梁，胸前微露的腹肌，高挺的身高。

那不是他是誰(shuí)。

向下瀏覽，想知道是誰(shuí)傳上網(wǎng)的，卻是匿名者發(fā)表的。

下意識(shí)的追蹤匿名者ID號(hào)，卻發(fā)現(xiàn)電腦竟在此時(shí)黑屏，過(guò)了五秒鐘后，電腦畫(huà)面出現(xiàn)一只小豬，畫(huà)面里的小豬身邊是不是的冒著泡泡，小凌飛，你看我可愛(ài)嗎。他看到小豬在沖著他笑。

幸好他沒(méi)喝水，不然他絕對(duì)會(huì)噴。

看來(lái)這個(gè)人應(yīng)該是個(gè)高手，不然以他高超的電腦技術(shù)會(huì)追蹤不了。

“楓，給我追蹤這個(gè)人。”電話還沒(méi)有掛斷，歐允楓在另一端都感覺(jué)到前所未有的冷漠。

“呃，凌，我和睿我們都追蹤過(guò)了，最后都追蹤不了，查不到最后來(lái)源，而且…”而且他和宣睿猜測(cè)這是會(huì)是安語(yǔ)琳做的呢。

“而且什么，說(shuō)。”語(yǔ)氣冷漠的讓氣氛不由自主的變得壓抑。

感受到風(fēng)凌飛的態(tài)度發(fā)生改變，歐允楓怕風(fēng)凌飛一氣之下拿著他和宣睿來(lái)開(kāi)刷，快速的說(shuō)道：“我們只是猜測(cè)這件事可能會(huì)是安語(yǔ)琳做的，誰(shuí)讓你下午澆了人家一桶水呢。”

“還有我們查了她的身份，發(fā)現(xiàn)一些東西怎么查都差不來(lái)。”

篇4

不用浪費(fèi)腦細(xì)胞去猜想，這家伙肯定對(duì)妻子產(chǎn)生審美疲勞了。果然，接下來(lái)他說(shuō)，我和她，怎么真的變成了左手和右手，沒(méi)有感覺(jué)了。

說(shuō)實(shí)話，看多了男人有錢(qián)就變壞的例子，也清楚身邊有很多夫妻，表面上挺好，其實(shí)早就陷入了婚姻危機(jī)，只是因?yàn)楹⒆拥戎T多因素，繼續(xù)維系一個(gè)完整的外殼。但這位朋友不同，在我印象中，他是那么憨厚的一個(gè)人，努力賺錢(qián)養(yǎng)家，夫唱婦隨，是很和睦的一對(duì)。

更主要的是，即使事隔多年，我依然記得，朋友當(dāng)初的戀愛(ài)，曾遭到女方家人的極力阻撓。因?yàn)榧依镏挥幸粋€(gè)寶貝女兒，父母舍不得她嫁那么遠(yuǎn)。

那時(shí)青春年少，朋友一次次跑到女友家，不管如何遭受冷遇，甚至難堪，他都堅(jiān)決不肯退卻，我記得有一次，他憂郁地跟我們說(shuō)：“就像一首歌里唱的，莫名我就喜歡她。沒(méi)有理由，喜歡就是喜歡，無(wú)法放手……”

僵持了有三年吧，朋友終于如愿娶得美人歸，這么多年了，他在生意場(chǎng)上摸爬滾打，努力賺錢(qián)養(yǎng)家，是圈子里有名的“好好先生”，如果說(shuō)，連他這樣的男人，都會(huì)發(fā)生感情風(fēng)波，不知會(huì)打擊多少女人對(duì)婚姻的信心。

朋友說(shuō)，他沒(méi)有外遇，她也沒(méi)有，只是日子乏味得要命，話說(shuō)得越來(lái)越少，曾經(jīng)那么活潑的一個(gè)她，怎么變成了這樣？

我說(shuō)，你應(yīng)該從自己身上找找原因，比如，你在外面那樣談笑風(fēng)生，回到家對(duì)她是不是也這樣？你有多久，不曾給過(guò)她一個(gè)深情的擁抱？當(dāng)她精心為你烹調(diào)了一桌飯菜，你是不是習(xí)慣了坐下來(lái)享用，而吝嗇于說(shuō)聲謝謝？

他就笑著說(shuō)，還真是的，有時(shí)候累了一天，回家什么也不想說(shuō)了。我說(shuō)，可你有沒(méi)有想過(guò)，她把地板擦得晶亮，把床單和被子都曬出陽(yáng)光的芬芳，桌上每一道菜，全是你愛(ài)吃的。你如此忽視她的感受，天長(zhǎng)日久，她的心，早被你用冷漠的軟刀子，劃出了一道又一道傷痕，越來(lái)越麻木，你憑什么還要求她對(duì)你熱情似火？

篇5

親愛(ài)的，我喜歡你，但你不必自得，因?yàn)椴皇悄愕膬?yōu)秀使我傾心，我只是沉迷于和你在一起的感覺(jué)。

魚(yú)是那么依戀水，并不見(jiàn)得水有多么出眾，只是魚(yú)離不開(kāi)水，離不開(kāi)與水一起生活的感覺(jué)。我喜歡你不像魚(yú)喜愛(ài)水，因?yàn)槲铱梢栽跊](méi)有你的日子里繼續(xù)存在并活下去。

我喜歡你是寂靜的，淡淡的心情，猶如漂浮不定的云彩，隨你的心情而陰晴。這種感受并不需要人知道，也不容許別人窺探，這是我的世界，我明鏡清澈的湖泊怎容許有一絲波紋。也許你也不知道，不知道——是個(gè)遙遠(yuǎn)的距離，近隔咫尺卻好似一輩子也走不到一起。因?yàn)槟悴恢溃晕覀兙拖穹肿\(yùn)天平兩端的砝碼，我不敢逾越，怕你因此從我世界里隱去。

含淚的幸福，在狹窄的小窩里也依然自得。也許你體會(huì)得到。

我喜歡你，是寂靜的。如水般清澈，宛若蒼穹般淡藍(lán)。與你一起，天就是藍(lán)的，因?yàn)槟憔褪翘?yáng)，陰霾從不敢將你我靠近。

篇6

【關(guān)鍵詞】 環(huán)孢菌素A; 漢防己甲素; K562/A02細(xì)胞; 多藥耐藥

化療是目前治療腫瘤的重要手段之一，而多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)是導(dǎo)致化療失敗的主要原因。P-糖蛋白(P-gp)介導(dǎo)的MDR是目前腫瘤MDR研究最多的主要機(jī)制之一，研究表明，其表達(dá)與細(xì)胞強(qiáng)大的藥物外排能力有關(guān)［1］。環(huán)孢菌素A(CsA)是一種免疫抑制劑，可調(diào)節(jié)P-gp的功能，抑制P-gp的過(guò)度表達(dá)，逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞MDR［2］；漢防己甲素(Tetrandrine， Tet)是中藥粉防己塊根中的主要成分，是一種非特異性的Ca2+通道阻滯劑，研究表明它可以調(diào)節(jié)多種P-gp介導(dǎo)的MDR細(xì)胞株的耐藥［3］。兩種藥物單獨(dú)應(yīng)用在體外實(shí)驗(yàn)中得到了一定的逆轉(zhuǎn)耐藥效果，但聯(lián)合應(yīng)用逆轉(zhuǎn)MDR國(guó)內(nèi)外尚無(wú)相關(guān)報(bào)道。為了尋求有效低毒的聯(lián)合耐藥逆轉(zhuǎn)劑，為臨床治療白血病提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，我們以白血病細(xì)胞系K562及其耐藥細(xì)胞系K562/A02為實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，研究聯(lián)合應(yīng)用以上兩種藥物對(duì)MDR的逆轉(zhuǎn)作用。

1 材料和方法

1.1 細(xì)胞系和培養(yǎng)條件

敏感株K562及MDR株K562/A02由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液學(xué)研究所提供，敏感細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清1640培養(yǎng)液中，K562/A02培養(yǎng)于含2 μmol·L- 1阿霉素、10 %胎牛血清1640培養(yǎng)液中，于實(shí)驗(yàn)前1周停用阿霉素。兩種細(xì)胞均置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中，2～3 d傳代1次。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材、藥物及試劑

LDZ522離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠)，SartoriusBS110S天平(北京賽多利斯天平有限公司)，HZ28201K恒溫振蕩器(太倉(cāng)市科教器材廠)，Model 550酶標(biāo)儀(日本BIO2RAD公司)， FACSCAL BUR流式細(xì)胞儀(FCM，美國(guó)BD公司)，柔紅霉素（DNR，意大利Farmitalia公司），CsA (瑞士山德士公司)，Tet（江西銀濤藥業(yè)有限公司），四甲基偶氮唑鹽(MTT，Sigma公司，用PBS配制成5 g·L-1），胎牛血清(Hyclone公司)，RPMI 1640培養(yǎng)液(GIBCO公司)。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)分組 實(shí)驗(yàn)時(shí)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，細(xì)胞密度按不同實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行調(diào)整:(1)對(duì)照組為K562或K562/A02細(xì)胞懸液;(2)DNR組為細(xì)胞懸液中加入一定劑量的DNR；(3)DNR加Tet組為細(xì)胞懸液中加入一定劑量的DNR和Tet；(4)DNR加CsA組為細(xì)胞懸液中加入一定劑量的DNR和CsA；(5)DNR加Tet加CsA組為細(xì)胞懸液中加入一定劑量的DNR、Tet和CsA。

1.3.2 MTT法測(cè)定逆轉(zhuǎn)劑對(duì)DNR細(xì)胞毒性影響 參照文獻(xiàn)及試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的耐藥株和敏感株細(xì)胞，加入逆轉(zhuǎn)劑(單用或聯(lián)合，CsA終濃度1 mg·L-1，Tet終濃度2.5 mg·L-1)作用1 h，按所設(shè)梯度加入不同濃度DNR，每個(gè)濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔。血清培養(yǎng)液為調(diào)零孔組，不加藥的細(xì)胞懸液為空白對(duì)照組，接種于96孔板，每孔含2×105個(gè)細(xì)胞懸液200 μl。置于37 ℃、5% CO2 培養(yǎng)箱孵育48 h后取出，加MTT反應(yīng)液20 μl，繼續(xù)培養(yǎng)4 h后于平板離心機(jī)上3 000 r·min-1離心10 min，棄上清，每孔加150 μl二甲亞砜溶解，微量振蕩器混勻，酶標(biāo)儀上測(cè)定540 nm波長(zhǎng)的吸光度(A)。計(jì)算細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率:

生長(zhǎng)抑制率(％)=(1-實(shí)驗(yàn)孔A值/對(duì)照孔A值)×100%。

IC50 = 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率為50%時(shí)的藥物濃度

耐藥倍數(shù)= 耐藥細(xì)胞IC50/ 敏感細(xì)胞IC50

實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，每次設(shè)3個(gè)復(fù)孔，取平均值為最終結(jié)果。

1.3.3 FCM檢測(cè)細(xì)胞凋亡率 取K562/A02細(xì)胞，終濃度2×105 ml-1，根據(jù)實(shí)驗(yàn)分組分別加藥(單用或聯(lián)合，DNR終濃度1 mg·L-1，CsA終濃度1 mg·L-1，Tet終濃度0.1 mg·L-1)，另設(shè)K562/A02對(duì)照組和只加DNR（1 mg·L-1）的K562/A02細(xì)胞對(duì)照組，分別孵育48 h后收集細(xì)胞，用4 ℃預(yù)冷的PBS洗滌兩次，用1 ml blot buffer重懸細(xì)胞，各加入AnnexinⅤ-FITC 10 μl，另外設(shè)空白對(duì)照和FITC對(duì)照，常溫避光15 min，洗滌細(xì)胞后在FCM上檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。

1.3.4 FCM檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)DNR濃度 取K562/A02細(xì)胞株，終濃度2×105 ml-1，分組加藥，分別孵育48 h，另設(shè)K562細(xì)胞及不加逆轉(zhuǎn)劑K562/A02細(xì)胞對(duì)照組，分別加入DNR(終濃度1 mg·L-1)，置于37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱孵育2 h，冷PBS液洗3次，1 500 r·min-1離心5 min，棄上清，用FCM測(cè)定細(xì)胞內(nèi)DNR相對(duì)熒光強(qiáng)度，此值與DNR濃度成正比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

運(yùn)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，顯著性檢驗(yàn)采用單因素方差分析，P

2 結(jié)

果

2.1 CsA和Tet的濃度選擇

CsA

2.2 逆轉(zhuǎn)劑處理前后DNR對(duì)K562和K562/A02細(xì)胞的毒性作用

DNR對(duì)K562/A02細(xì)胞和K562細(xì)胞的IC50分別為21.22和0.27 mg·L-1，耐藥倍數(shù)為79。用CsA（1 mg·L-1）處理后， DNR對(duì)K562 /A02細(xì)胞的IC50為7.83 mg·L-1，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為2.71。Tet(0.1 mg·L-1)處理K562 /A02細(xì)胞后DNR IC50為5.32 mg·L-1，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為3.39。兩藥聯(lián)合對(duì)DNR作用K562 /A02細(xì)胞的IC50值為2.32 mg·L-1，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為9.11。逆轉(zhuǎn)劑對(duì)K562 /A02細(xì)胞的DNR毒性有明顯影響(P0.10，表2)。表1 DNR分別聯(lián)合CsA和Tet及三藥聯(lián)合對(duì)K562/A02細(xì)胞毒性作用表2 DNR分別聯(lián)合CsA和Tet及三藥聯(lián)合對(duì)K562細(xì)胞毒性作用

轉(zhuǎn)貼于 2.3 Annexin Ⅴ檢測(cè)細(xì)胞凋亡

Annexin Ⅴ凋亡情況見(jiàn)圖1。

圖1 不同藥物及藥物聯(lián)合處理后K562/A02細(xì)胞的凋亡率（48 h，Annexin Ⅴ法）

2.4 FCM檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)DNR濃度

未加逆轉(zhuǎn)劑的K562/A02耐藥株細(xì)胞內(nèi)DNR相對(duì)熒光強(qiáng)度為103，而K562敏感株為522，前者是后者的19%，K562/A02經(jīng)CsA(1 mg·L-1)、Tet(0.1 mg·L-1)及CsA(1 mg·L-1)加Tet(0.1 mg·L-1)聯(lián)合作用48 h， 細(xì)胞內(nèi)DNR熒光強(qiáng)度分別為310、339和515，分別為K562敏感株的60%、65%和98%。CsA處理組、Tet處理組及CsA 聯(lián)合Tet處理組，細(xì)胞內(nèi)DNR濃度均增加，兩藥聯(lián)合組增加顯著，與K562/A02對(duì)照組間有顯著性差異(P

3 討

論

腫瘤MDR的產(chǎn)生是多種因素共同作用的結(jié)果，目前研究表明，最主要的有以下幾個(gè)方面：(1)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞內(nèi)藥物外排機(jī)制，包括 P-gp、多藥耐藥相關(guān)蛋白、肺耐藥蛋白、乳腺癌耐藥蛋白等ATP超家族介導(dǎo)的MDR，它們具有細(xì)胞膜離子“泵”樣作用，可以將細(xì)胞內(nèi)的藥物“泵”到細(xì)胞外，使細(xì)胞內(nèi)藥物濃度降低從而產(chǎn)生耐藥［4-6］。(2)酶類(lèi)介導(dǎo)的MDR，包括糖基化神經(jīng)酰胺合成酶、拓樸異構(gòu)酶Ⅱ、谷胱苷肽S轉(zhuǎn)移酶-π、磷酸激酶C等［7-9］。(3)細(xì)胞凋亡基因介導(dǎo)的MDR，包括p53基因突變、bcl-2原癌基因過(guò)表達(dá)等［10］。(4)其他，包括腫瘤細(xì)胞抗凋亡能力增強(qiáng)，DNA修復(fù)功能增強(qiáng)和微環(huán)境耐藥(microenvironment resistance)等［11］。其中，P-gp過(guò)表達(dá)是腫瘤MDR中研究得最為廣泛和深入的機(jī)制之一，成為臨床克服多藥耐藥主要的靶點(diǎn)和觀察指標(biāo)。

國(guó)內(nèi)外眾多實(shí)驗(yàn)室通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)了多種MDR逆轉(zhuǎn)劑，如鈣離子通道阻滯劑、鈣調(diào)蛋白抑制劑、親脂性化合物、蛋白激酶C抑制劑、免疫抑制藥物等，能克服腫瘤臨床耐藥和提高化療療效。但這些耐藥逆轉(zhuǎn)劑在臨床上卻存在著對(duì)心血管系統(tǒng)的副作用、免疫抑制作用、肝腎毒性，或在耐受劑量下逆轉(zhuǎn)活性不高等不足。目前，聯(lián)合使用逆轉(zhuǎn)劑已成為耐藥逆轉(zhuǎn)研究的發(fā)展趨勢(shì)。合理使用不同作用機(jī)制、毒副反應(yīng)無(wú)疊加的兩種或多種耐藥逆轉(zhuǎn)劑不但可起到協(xié)同增敏作用，而且可降低單一逆轉(zhuǎn)藥物劑量， 減少副作用， 提高耐受性［12］。

本實(shí)驗(yàn)以尋求低毒高效的聯(lián)合逆轉(zhuǎn)劑為目的，對(duì)CsA和中藥Tet共同作用逆轉(zhuǎn)MDR進(jìn)行體外研究。通過(guò)MTT預(yù)實(shí)驗(yàn)，CsA在5 mg·L-1及以下濃度、Tet在1 mg·L-1 及以下濃度， 對(duì)K562細(xì)胞系及K562/A02細(xì)胞系均無(wú)直接細(xì)胞毒性，我們選用1 mg·L-1 CsA和0.1 mg·L-1 Tet時(shí)發(fā)現(xiàn)，兩藥不能增強(qiáng)化療藥物DNR對(duì)K562細(xì)胞系的殺傷作用，但能明顯增強(qiáng)DNR對(duì)K562/A02細(xì)胞系的殺傷作用。本研究顯示，CsA及Tet均可以增加白血病細(xì)胞的凋亡率，同時(shí)可以明顯增加細(xì)胞內(nèi)DNR的濃度，并且兩藥聯(lián)合時(shí)作用更強(qiáng)，為臨床聯(lián)合應(yīng)用耐藥逆轉(zhuǎn)劑提供了理論依據(jù)?？傊幬锏穆?lián)合應(yīng)用逆轉(zhuǎn)白血病細(xì)胞MDR，既可減少藥物的毒副作用，又增強(qiáng)了逆轉(zhuǎn)效果，它具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。

參考文獻(xiàn)

［1］SAUNA Z E， SMITH M M， MULLER M， et al. The mechanism of action of multidrug-resistance-linked P-glycoprotein［J］. J Bioenerg Biomembr， 2001， 33:481-491.

［2］HE L，LIU G Q. Interaction of multidrug resistance reversal agents with P-glycoprotein ATPase activity on blood-brain barrier［J］. Acta Pharmacol Sin， 2002， 23:423-429.

［3］LI J，XU L Z， HE K L， et al. Reversal effects of nornegestrol acetate on multidrug resistance in adriamycin-resistant MCF J breast cancer line［J］. Breast Cancer Res， 2001，3 (4):253.

［4］SCHDERT T， KURBOCHER C M. Induction of MDR1 gene expression by antieoplatic agents in ovarin cancer cell lines［J］.Anticancer Res， 2002， 22 (4):2199-2202.

［5］GOTTESMAN M M. Mechanisms of cancer drug resistance［J］. Annu Rev Med， 2002， 53 (1):615-627.

［6］程堅(jiān)，陳寶安.白血病多藥耐藥相關(guān)基因臨床研究新進(jìn)展［J］.東南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2007，26(3):225-229.

［7］李江濤，彭淑牖，劉穎斌，等.糖基化神經(jīng)酰胺合成酶及相關(guān)基因的表達(dá)與人膽囊癌多藥耐藥［J］.中華普通外科雜志，2005，20(6):382-383.

［8］SCOTTO K W. Transcriptional regulation of ABC drug transporters［J］.Oncogene， 2003， 22 (17):7496-7511.

［9］TSURUO T， NAITO M， TOMIDA A， et al. Molecular targeting therapy of cancer:drug resistance， apoptosis and survival signal ［J］. Cancer Sci， 2003， 94 (1):15-21.

［10］GADDUCCI A， COSIO S， MURACA S， et al. Molecular mechanisms of apoptosis and chemosensitivity to platinum and paclitaxel in ovarian cancer:biological data and clinical implications［J］. Eur J Gynaecol Oncol，2002，23(5):390-396.

篇7

2、真正喜歡你的人，他會(huì)主動(dòng)發(fā)信息或者打電話給你，因?yàn)樗芟肽?。他?huì)在乎你的一舉一動(dòng)，因?yàn)樗滤S時(shí)會(huì)失去你。他看到你心情不好，就會(huì)來(lái)安慰你，盡管你對(duì)他發(fā)脾氣，他還是忍了。他會(huì)對(duì)你說(shuō)些他的秘密，有些連他最好的朋友也不知道的秘密。愛(ài)的最高境界是經(jīng)得起平淡的流年。

3、最會(huì)暖人的，原來(lái)是地球。它創(chuàng)造引力，把你我都留在身邊。只是它太濫情，對(duì)所有人都一樣！愛(ài)，就要特殊化。

4、我們都像小孩，胡鬧是因?yàn)橐蕾?lài)，禮貌，是因?yàn)槟吧?，主?dòng)，是因?yàn)樵诤?，你最后?ài)上的都是肯花時(shí)間陪你聊天的人。 喜歡不喜歡你，其實(shí)表現(xiàn)得很明顯，只是你用心發(fā)現(xiàn)了沒(méi)有；真正喜歡你的人，在你面前會(huì)慢慢變成話嘮。

5、當(dāng)我有一天突然發(fā)現(xiàn)，你是唯一一個(gè)拿最美好的青春，來(lái)陪我過(guò)苦日子的人。這也許就是真正喜歡你的人吧

6、不要為了取悅誰(shuí) 而迷失自己 有人喜歡你長(zhǎng)發(fā)的樣子 有人喜歡你短發(fā)的樣子 于是你開(kāi)始猶豫是該留長(zhǎng)發(fā)還是剪短發(fā)然而你忽略了 真正喜歡你的人喜歡你所有的樣子

7、真正喜歡你的人，最好的方式：是經(jīng)營(yíng)好自己，給對(duì)方一個(gè)優(yōu)質(zhì)的愛(ài)人。相愛(ài)時(shí)，你千萬(wàn)不要喜歡其他人，不要對(duì)愛(ài)你的人太過(guò)刻薄，每個(gè)人都有脾氣，為你忍下所有的怒氣，僅僅因?yàn)槟莻€(gè)人比你更心疼你。遠(yuǎn)比那些只會(huì)給你風(fēng)花雪月的人來(lái)得更長(zhǎng)久。

8、真實(shí)的喜歡不會(huì)讓你覺(jué)得是在撩你，真正喜歡你的人大多小心翼翼。

9、真正喜歡你的人，相愛(ài)時(shí)，ta懂你說(shuō)的每一句話，而且ta懂你的欲言又止，更懂你的口是心非。你不必逞強(qiáng)，不必說(shuō)謊，懂你的人，自然會(huì)知道你原本的模樣。你千萬(wàn)不要喜歡其他人。不要去傷害喜歡你的人，可以不愛(ài)但請(qǐng)不要傷害。

10、真正喜歡你的人，絕不是嘴上說(shuō)說(shuō)而已。也不是什么禮物可以替代的。真正喜歡你的人，無(wú)論多忙，總不會(huì)忘了你。和你聊天，也不會(huì)只聊自己的事。

11、但凡死纏爛打的人，大都不是真的很喜歡你，那只是在和自己賽跑。真正喜歡你的人，做不到死纏爛打，因?yàn)樽宰鸩辉试S。喜歡就是想把最好的一切給對(duì)方，包括尊嚴(yán)。多少淺淺淡淡的深情，是旁人看不懂的深情。

12、我們都過(guò)了耳聽(tīng)愛(ài)情的年紀(jì)了，能遇見(jiàn)一個(gè)兩情相悅的人不容易，真正喜歡你的人，絕對(duì)不會(huì)僅僅只跟你聊得來(lái)，有時(shí)候懂得遠(yuǎn)比愛(ài)來(lái)得重要。

13、“有人喜歡你綁著頭發(fā)的樣子，有人喜歡你披著頭發(fā)的樣子，于是你猶豫不決是應(yīng)該綁著還是披著，可是你忽略了真正喜歡你的人喜歡你所有的樣子。一個(gè)人最幸福的時(shí)刻，就是找對(duì)了人，他縱容你的習(xí)慣，并愛(ài)著你的一切。相信時(shí)間總會(huì)把對(duì)你最好的人留在最后，畢竟喜歡是一陣風(fēng)，而愛(ài)是細(xì)水常流。”

篇8

大家都不喜歡你啊，因?yàn)槟悴缓猛?，而且有那么麻煩，天天都要做，真的真的，現(xiàn)在的學(xué)生們都不喜歡你。是非常不喜歡你。

我知道，作業(yè)，是為了大家好，上課加上作業(yè)，真的完美搭配。

可是，也不能過(guò)量啊，太多太多會(huì)影響我們的心情，影響我們的休息，很煩，作業(yè)……作業(yè)……

我至今不明白，為什么會(huì)有作業(yè)，那些老師也真的是，天天都這么多，按客家話來(lái)說(shuō)，就是：難頂啊…………

篇9

其實(shí)很多男孩子都不知道，女孩子從來(lái)不會(huì)真正去生他們的氣，因?yàn)樗钦娴南矚g他在乎他。

其實(shí)很多男孩子都不知道，女孩子只會(huì)對(duì)自己喜歡的男生嘮嘮叨叨，也只會(huì)對(duì)自己喜歡的人耍性子。

你要知道，假若她不喜歡你，她根本不會(huì)來(lái)在乎你關(guān)心你，怕你做錯(cuò)事情。

你要知道，假若她不喜歡你，她根本不會(huì)對(duì)你發(fā)火不會(huì)沖你撒嬌讓你哄她，在別人面前她都是淑女。

你要知道，假若她不喜歡你，你根本就沒(méi)有本事讓她哭泣，讓她即使生氣也不會(huì)超過(guò)2天。

而這一切都只是因?yàn)樗矚g你，而這一切都因?yàn)槟氵€不夠在意她不夠懂她。

于是，你們時(shí)常爭(zhēng)吵，你認(rèn)為她脾氣不好，她認(rèn)為你不夠遷就她。

于是，你們總是冷戰(zhàn)，你以為她不喜歡你，她以為你不在乎她。

于是，你們總是莫名其妙的彼此錯(cuò)過(guò)，也許擦身而過(guò)，本身就是一種悲傷著的無(wú)奈與幸福。

要知道，凄美依然是美的一種，并且美的絢麗悲涼而滄桑，那是更加的美。

因?yàn)樗矚g你，所以她偶爾沖你發(fā)火，時(shí)常對(duì)你撒嬌。

因?yàn)樗矚g你，所以她才會(huì)生你的氣；而又因?yàn)橄矚g你，她才不會(huì)去生氣很久。

你可知道，每個(gè)女孩子的心都是水晶做的，晶瑩剔透，但是很容易就碰傷摔碎。

你可知道，每個(gè)女孩子都是不設(shè)防的，你那么輕易就闖進(jìn)她的心，走的時(shí)候卻只留下傷害。

她從來(lái)都不知道，這個(gè)世界上根本沒(méi)有可以讓她哭的人，因?yàn)檎嬲档盟薜哪莻€(gè)根本舍不得讓她哭。

她會(huì)很矜持，她會(huì)很驕傲，她會(huì)很冷淡，她總是嘴里說(shuō)著你走開(kāi)，心里卻一直叫你留下。

請(qǐng)你張開(kāi)你的耳朵，也請(qǐng)你打開(kāi)你的心，去聽(tīng)她心里真正的呼喚，而不是她嘴里的口是心非。

她會(huì)看著你轉(zhuǎn)身，然后她跟著你轉(zhuǎn)身，當(dāng)側(cè)身而過(guò)的時(shí)候，你看不見(jiàn)她的淚，滂沱在臉上心里。

如果你喜歡她，請(qǐng)你多陪她；如果你喜歡她，請(qǐng)你多寵她；如果你喜歡她，請(qǐng)你多讓她。

如果你喜歡她，請(qǐng)你去聽(tīng)聽(tīng)她內(nèi)心的聲音，那是吶喊——請(qǐng)擁抱她。

在愛(ài)情里，總是彼此傷害，彷佛這樣才能證明自己愛(ài)得激烈愛(ài)到轟轟烈烈。

可是，愛(ài)情里沒(méi)有孰對(duì)孰錯(cuò)；愛(ài)情里更加沒(méi)有你比我多我比你少。

你愛(ài)她，她愛(ài)你，如此就已經(jīng)足夠。不要試圖讓彼此的傷害，讓彼此更加脆弱悲傷。

你們彼此相愛(ài)，你們需要的是溫暖是幸福是甜蜜是快樂(lè)，不是傷害。

不要用沉默宣戰(zhàn)，不要互不相讓?zhuān)灰裁丛挾疾恢v就冷漠離去。

要知道，你離去的時(shí)候，你的眼睛起了霧，她的眼角泛著淚光。

越是安靜戰(zhàn)火就越傳，這是冷戰(zhàn)也是彼此的傷害——無(wú)論是怎么的復(fù)合，那些傷口曾經(jīng)存在，抹不去。

請(qǐng)跟她一個(gè)擁抱，用你的擁抱去化解她心里的悲傷與眼角的淚水。

她喜歡你，她絕對(duì)不會(huì)拒絕你的擁抱，她只會(huì)害怕你的冷漠轉(zhuǎn)身無(wú)聲安靜。

請(qǐng)記住，相愛(ài)的人不要輕易宣戰(zhàn)，因?yàn)槔鋺?zhàn)帶來(lái)的傷害，超出你的預(yù)計(jì)。

也請(qǐng)記住，只要你喜歡她，沒(méi)有什么是你接受不了的，只要你喜歡她，就喜歡她的一切一切。

那么她所有的小性子所有的壞脾氣所有的臭毛病，在你眼里都是撒嬌。

篇10

我總愛(ài)把臥室弄得亂七八糟的，你進(jìn)來(lái)就會(huì)說(shuō):“這么臟兮兮的，誰(shuí)也不會(huì)喜歡你?！?/p>

我總愛(ài)在吃飯的時(shí)候挑三揀四，沒(méi)有葷菜就吃不香，你看到了就會(huì)說(shuō):“吃個(gè)飯還這么挑剔，誰(shuí)也不會(huì)喜歡你?！?/p>

我總愛(ài)在做作業(yè)的時(shí)候抱怨作業(yè)多，而且特別難，你聽(tīng)到了就會(huì)說(shuō):“做個(gè)作業(yè)還這么啰嗦，誰(shuí)也不會(huì)喜歡你?！?/p>

晚上，一個(gè)人躺在床上，膽小的不敢睡，你走了過(guò)來(lái)，沒(méi)有聽(tīng)到那熟悉的話語(yǔ)，而是鉆進(jìn)了我的被窩

原來(lái)，你是唯一一個(gè)喜歡我的人