導(dǎo)語：如何才能寫好一篇麥冬的作用，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

1、石斛味甘、淡、微苦，性微寒。歸胃、肺、心、腎經(jīng)。體堅質(zhì)潤。滋陰清熱，養(yǎng)胃生津，潤肺止咳，益腎明目。主治熱病傷津，虛熱不退，胃陰不足，口干咽燥、脘痛干嘔、肺燥咳嗽，腰膝酸軟，陰傷目暗。本品甘涼清潤，主入胃腎，作用重在中下二焦，既清胃熱生津止渴，又滋腎陰退熱明目，為津傷口渴、陰虛目暗良藥。

2、麥冬養(yǎng)陰生津，潤肺清心。用于肺燥干咳，虛癆咳嗽，津傷口渴，心煩失眠，內(nèi)熱消渴，腸燥便秘，咽白喉，心陰不足之心悸易驚及熱病后期熱傷津液等證。

3、二者搭配在一起泡茶可以達(dá)到不錯的養(yǎng)陰和胃和理氣解郁效果，比較適合有慢性胃炎的人群服用，當(dāng)然，如果有胃部燥熱的情況選擇服用它效果也非常不錯。

（來源：文章屋網(wǎng) ）

篇2

【關(guān)鍵詞】 麥冬多糖；降血糖；血清胰島素；高血糖;糖化血紅蛋白

麥冬是百合科多年生沿階草屬植物麥門冬的干燥塊根。文獻(xiàn)報道單味麥冬全草可治療糖尿病。為了進(jìn)一步探討麥冬降血糖作用及其有效部位，筆者研究了麥冬多糖對正常小鼠和糖尿病模型小鼠血糖水平的影響，為臨床實驗提供依據(jù)。

1 實驗材料

試藥：麥冬多糖：麥冬塊莖1 kg、80％乙醇回流提取，去醇取渣水煎提取3次，合并濃縮成500 ml，用95％乙醇醇析，取醇析物用丙酮洗滌3次，合并50℃烘干，即得麥冬多糖(麥冬提取物，OTE)。使用時用蒸餾水配制成所需濃度灌胃；優(yōu)降糖片：天津市力生制藥廠(批號：040502)；拜糖平片：北京拜爾醫(yī)藥保健有限公司(批號：040601)；岱I一胰島素放射免疫分析藥盒，中國原子能科學(xué)研究院同位素研究所。鏈脲霉素：美國Sigma公司，糖化血紅蛋白試劑盒(微柱法)：寧波市慈城生化試劑廠。

動物：NIH小鼠，體質(zhì)量18～22 g；NOD小鼠，體質(zhì)量25～35 g；SD大鼠，體質(zhì)量180~220 g，雌、雄各半，由廣東省醫(yī)用試驗動物場提供，合格證號，粵證：040609。

儀器：怡成血糖測試儀及測定試紙，北京怡成生物電子技術(shù)有限公司。

統(tǒng)計學(xué)分析：計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示；組間比較采用t檢驗。

2 實驗方法與結(jié)果

2．1 對正常動物血糖的影響 對小鼠血糖的影響NIH小鼠，50只，雌、雄各半，空腹6 h后，測定血糖，根據(jù)血糖值及動物性別均衡隨機(jī)分為5組，分別灌胃給予下列藥物；②正常對照組(蒸餾水)；②優(yōu)降糖組(2．5 mg/kg)：③、③、⑤麥冬多糖低、中、高劑量組(75、150、300 mg/kg)。連續(xù)給藥7 d，給藥體積按20 ml/kg，第7天給藥前空腹6 h，給藥后1 h動物取血，用怡成血糖測試儀測定動物血糖值。實驗結(jié)果見表1。

結(jié)論:麥冬多糖(75、150、300 ml/kg)，對正常小鼠血糖無明顯影響。

2．2 對自發(fā)性高血糖及血清胰島素的影響對小鼠血糖的影響NOD小鼠，空腹6 h后，測定血糖，選擇血糖值高于11．1 mmog/L。動物50只，隨機(jī)分為5組，分別灌胃給予下列藥物：①對照組(蒸餾水)；②優(yōu)降糖組(2．5 mg/kg)；③、④、⑤麥冬多糖低、中、高劑量組(75、150、300 mg/kg)。連續(xù)給藥14 d，用怡成血糖測試儀測定動物血糖值，用放射免疫法測定血清胰島素，結(jié)果見表2、3。

結(jié)論：NOD小鼠口服麥冬多糖(75、150、300 mg/kg)，能降低血糖及升高血清胰島素。

2．3 對鏈脲霉素誘發(fā)高血糖大鼠血糖值及糖化血紅蛋白的影響。

2．3．1 對大鼠血糖及糖化血紅蛋白的影響SD大鼠，禁食不禁水24 h后，小劑量靜脈推注鏈腺霉素25 mg/kg，1次/周，同時加高熱量飼料喂養(yǎng)誘發(fā)Ⅱ型糖尿病，于第2次注射后l周測定血糖，選擇空腹血糖(FBG)≥7．8 mmol/L的大鼠50只，進(jìn)行實驗。隨機(jī)分為5組，每組10只，分別給予下列藥物：①高血糖模型組(蒸餾水)；②拜糖平組(2．5 mg/kg)；③麥冬多糖低劑量組(75 mg／kg);④麥冬多糖中劑量組(150 mg／kg)；⑤麥冬多糖高劑量組(300 mg／kg)。另設(shè)正常對照大鼠10只(灌胃等體積蒸餾水)。按以上劑量灌胃給予實驗藥物，連續(xù)14 d，第14天給藥前空腹12 h，于末次給藥后l h測定血糖及糖化血紅蛋白。實驗結(jié)果見表4、5。

2．3．2 對大鼠口服蔗糖后血糖的影響實驗方法同 2．3．1。按以上劑量灌胃給予試驗藥物，連續(xù)14 d，第14天給藥前空腹6 h，按以上劑量給藥的同時藥物中含蔗糖0．125 g/ml，給藥體積技20 ml／kg。用怡成血糖測試儀測定給蔗糖后0． 5、1、2 h血糖值。實驗結(jié)果見表6。

結(jié)論：麥冬多糖對鏈脲霉素引起的高血糖大鼠，口服給藥后，具有降低血糖及糖化血紅蛋白的作用。并且能推遲大鼠口服蔗糖后血糖升高時間及降低血糖峰濃度。

3 討論

3．1 麥冬多糖是麥冬塊莖的主要提取物，具有麥冬的藥性，有很高的醫(yī)用價值，本文實驗結(jié)果表明：其對正常小鼠血糖無明顯影響，但能推遲大鼠口服蔗糖后血糖升高時間，能降低自發(fā)性高血糖及升高血清胰島素：能降低鏈脲霉素誘發(fā)高血糖大鼠的血糖及糖化血紅蛋白

糖尿病的口服藥物治療臨床仍為西藥為主如優(yōu)降糖(格列本脲)，拜糖平(阿卡波糖)等但由于其毒副作用大，患者往往很難長期服用，中藥毒副作用小，但起效一般較慢，因此研究開發(fā)，單味高效中藥將成為今后研究熱點。本實驗以麥冬塊莖提取物作其降血糖作用的藥效學(xué)觀察研究，為臨床提供了一些實驗依據(jù)。

3．2 文獻(xiàn)報道麥冬多糖l00～200 mg／kg 有明顯降糖作用［5］，麥冬的水提物和正丁醇提取物均可降低糖尿病家兔的血糖［6］。這麥冬提取物，有從全草，有從其干葉、有從其干燥塊莖用不同工藝提取出來。其主要化學(xué)成分有甾體皂甙，高異黃酮類化合物，各種類型的多糖。筆者采用麥冬塊莖、醇提后水煎再用高濃乙醇醇析丙酮洗滌，50℃干后的多糖，即筆者用的麥冬多糖，以低、中、高3個劑量與常用降糖西藥優(yōu)降糖，拜糖平對照進(jìn)行動物小鼠和大鼠降血糖的藥效學(xué)實驗，取得初步結(jié)果。

3．3 麥冬多糖 筆者還將進(jìn)一步分離分析其化學(xué)成分，實驗研究到底是多聚糖、某一單糖或者單萜糖苷哪種多糖所起的藥理作用。其降血糖作用機(jī)制又如何等，也希望同行共同研究突破。使這麥冬多糖降血糖新中藥能更好更早造福于人類。

參考文獻(xiàn)

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4 張均田.現(xiàn)代藥理實驗方法.醫(yī)科大學(xué)中固協(xié)和醫(yī)科大學(xué)，1998，981.

5 吳忠忱.中藥活性成分的降血糖作用及其治療Ⅱ型糖尿病研究進(jìn)展.中國中藥雜志，1998，23(2)：118-120.

篇3

1資料與方法

1. 1一般資料選取本院2010年1月~2013年12月收治的20例的主動脈夾層動脈瘤患者為研究對象。入組條件：①患者無聽力、視力、智力、言語溝通障礙；②患者能夠配合臨床醫(yī)師完成問卷調(diào)查；③患者無聽力、視力、智力、言語溝通障礙, 并簽署書面知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者由腎實質(zhì)病變、腎動脈狹窄、嗜鉻細(xì)胞瘤、原發(fā)性醛固酮增多癥、庫欣綜合征和主動脈縮窄等繼發(fā)性高血壓；②患者伴發(fā)糖尿病、慢性支氣管炎、冠心病等其他可能影響治療效果的疾病；③患者不愿意參加本次研究并堅持在門診隨訪6月。其中, 男12例, 女8例；年齡為42~65歲, 平均年齡為(54.75±7.83)歲。在性別構(gòu)成和平均年齡方面, 兩組患者具有可比性, 差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1. 2護(hù)理方法對照組僅接受主動脈夾層動脈瘤圍手術(shù)期血壓控制常規(guī)管理, 包括：在患者手術(shù)前應(yīng)用降壓藥降低患者主動脈壁的壓力, 防止夾層進(jìn)一步發(fā)展和動脈瘤的破裂；在患者術(shù)后用降壓藥抑制患者左心室的收縮力, 降低患者搏動性的張力, 促進(jìn)患者的恢復(fù)和防止再發(fā)動脈夾層；硝普鈉的合理使用, 劑量準(zhǔn)確、現(xiàn)配現(xiàn)用, 12 h更換且避光。觀察組患者則在上述護(hù)理的基礎(chǔ)上加用以下護(hù)理措施：①組織科室護(hù)理人員進(jìn)行業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)：在開展優(yōu)質(zhì)護(hù)理活動之前, 一方面加強(qiáng)科室全體護(hù)理人員學(xué)習(xí)優(yōu)質(zhì)護(hù)理活動和精髓, 讓護(hù)理人員領(lǐng)悟到的優(yōu)質(zhì)護(hù)理活動和精髓貫穿于患者圍手術(shù)期血壓控制護(hù)理過程中, 另外, 一方面加強(qiáng)護(hù)理人員對患者圍手術(shù)期血壓控制護(hù)理方面知識的培訓(xùn), 加強(qiáng)護(hù)理人員對患者圍手術(shù)期血壓控制相關(guān)知識的了解, 為全面系統(tǒng)的為患者進(jìn)行優(yōu)質(zhì)護(hù)理活動做好鋪墊； ②歡笑干預(yù)：主動脈夾層動脈瘤患者因疼痛而顯著影響患者的血壓控制情況, 為此, 護(hù)理人員可通過每天講幽默笑話的方式讓患者保持樂觀情緒；③優(yōu)化患者疼痛的管理：轉(zhuǎn)移疼痛是新興的止痛方法之一。告知患者可通過視覺分散法(看電視、讀小說等)和聽力分散法(聽音樂、聽故事等)來降低患者的疼痛程度, 必須時可以考慮止痛藥。

1. 3觀察指標(biāo)觀察兩組患者圍手術(shù)期血壓變化情況和患者護(hù)理滿意度(采用護(hù)理工作滿意度調(diào)查表來調(diào)查患者護(hù)理服務(wù)滿意程度, 主要調(diào)查患者對護(hù)理態(tài)度和護(hù)理方式的滿意度, 每個維度總分為100, 滿意程度分為非常滿意、基本滿意度、不滿意三個等級(80~100分為非常滿意, 60~79為基本滿意,

1. 4統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件包分析本研究收集的數(shù)據(jù), 采用t檢驗分析計量資料, 采用 Wilcoxon 秩和檢驗分析等級資料, 采用χ2檢驗分析計數(shù)資料。在雙側(cè)檢驗的情況下, 以P

2結(jié)果

2. 1兩組患者圍手術(shù)期血壓變化情況比較觀察組患者圍手術(shù)期血壓控制情況顯著優(yōu)于對照組的, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義, (P

表1兩組患者圍手術(shù)期血壓控制情況比較( x-±s)

組別 n 平均收縮壓(mmHg) 平均舒張壓(mmHg)

對照組 10 152.76±10.29 96.29±6.85

觀察組 10 128.12±8.45 82.18±5.27

t 5.852 5.163

P

2. 2兩組患者護(hù)理滿意度比較觀察組患者護(hù)理滿意度顯著高于對照組的, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P

表2兩組患者護(hù)理滿意度比較［n (%)］

組別 n 不滿意 基本滿意 非常滿意

對照組 10 4 2 4

觀察組 10 9 1 0

Z 6.256

P

3討論

篇4

［摘要］

目的:研究白楊素(chrysin)對離體大鼠主動脈肌源性反應(yīng)的影響，并探討其作用機(jī)制。方法:分離SD大鼠主動脈，采用離體血管環(huán)灌流裝置觀察chrysin對血管環(huán)的基礎(chǔ)張力及對60mmol/LKCl預(yù)收縮血管的舒張作用，并結(jié)合不同抑制劑處理，探討其作用于血管環(huán)的可能機(jī)制。結(jié)果:Chrysin(10－6mol/L、3×10－6mol/L、10－5mol/L、3×10－5mol/L和10－4mol/L)對基礎(chǔ)狀態(tài)血管無明顯影響，但對60mmol/LKCl預(yù)收縮的血管環(huán)具有濃度依賴性舒張作用，并且去內(nèi)皮組舒張作用弱于內(nèi)皮完整組(P＜0.05)。NOS抑制劑L-NAME(10－4mol/L)處理血管后，chrysin的舒張血管作用部分被抑制(P＜0.05)，COX抑制劑吲哚美辛(10－5mol/L)處理血管后無明顯抑制作用。鉀通道阻滯劑4-氨基吡啶(10－3mol/L)、氯化鋇(10－4mol/L)、格列苯脲(10－5mol/L)和四乙胺(10－3mol/L)預(yù)孵后，chrysin舒張血管作用均被部分抑制(P＜0.05)。Chrysin(10－6mol/L、10－5mol/L和10－4mol/L)可濃度依賴性抑制2．5mmol/LCaCl2引起的主動脈收縮。結(jié)論:Chrysin能夠濃度依賴性舒張大鼠主動脈，其作用機(jī)制可能與促進(jìn)一氧化氮釋放、激活4種K+通道及減少細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度有關(guān)。

［關(guān)鍵詞］

白楊素;主動脈環(huán);一氧化氮合酶;環(huán)氧合酶;鉀通道;鈣

白楊素(chrysin)是從紫葳科植物木蝴蝶中提取的一種天然食源性黃酮，廣泛存在于多種植物、蜂蜜和蜂膠中［1-3］。Chrysin具有廣泛的藥理學(xué)作用，包括抗病毒［4］、抗高血糖［5］、抗高血壓［6］、抗腫瘤［7］、抗糖尿病腎?。?］等，是合成抗癌、抗菌、防治心腦血管疾病、降血脂、消炎等藥物的原料。血管疾病是目前影響人類健康的主要疾病之一，導(dǎo)致血管產(chǎn)生疾病的原因多樣，其中大部分是由于病變使管腔狹窄，繼而發(fā)生受供器官或肢體的缺血以至壞死。大量臨床資料表明，chrysin對動脈粥樣硬化、高血壓等血管疾病有治療作用［5-6，9］，但其具體作用機(jī)制尚不明確。本實驗利用離體器官恒溫灌流系統(tǒng)，觀察chrysin對大鼠離體主動脈環(huán)靜息張力及對氯化鉀(KCl，60mmol/L)預(yù)收縮血管的舒張作用，同時，通過研究chrysin對去內(nèi)皮、一氧化氮合酶(nitricoxidesyn-thase，NOS)抑制劑、環(huán)氧合酶(cyclooxygenase，COX)抑制劑、鉀離子通道抑制劑等引起的血管收縮作用的影響，進(jìn)一步探討其舒張血管作用的可能機(jī)制，為chrysin的臨床應(yīng)用及進(jìn)一步研究、利用及開發(fā)新藥提供理論依據(jù)。

一、材料和方法

1實驗動物Sprague-Dawley成年雄性大鼠，體重200～240g，由山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，許可證號為SCXK(晉)2009-0001。動物飼養(yǎng)環(huán)境溫度為22～23℃，濕度50%～55%，自由攝食飲水。

2主要試劑乙酰膽堿(acetylcholine，ACh)、苯腎上腺素(phenylephrine，PE)、氯化鋇(BaCl2)、四乙胺(tetra-ethylammonium，TEA)、4-氨基吡啶(4-aminopyridine，4-AP)、格列本脲(glibenclamide，Gli)、左旋硝基精氨酸甲酯(L-nitroarginiemethylester，L-NAME)、吲哚美辛(indometacin，Indo)、二甲基亞砜(dimethylsulpho-xide，DMSO)和HEPES均購自Sigma;白楊素購自大連美侖生物;其余試劑均為分析純，購自武漢博士德公司。

3實驗儀器PowerLab生物信號采集分析系統(tǒng)、DMT張力記錄儀(澳大利亞埃德公司);HSS-1B數(shù)字式超級恒溫泵(成都儀器廠);微量加樣器(上海求精生化試劑儀器有限公司);精密天平(北京賽多利斯儀器有限公司);PHS-3C精密pH計(上海雷磁);Sartorius-BS124S精密天平(北京賽多利斯)。

4主要方法

4．1血管環(huán)的制備大鼠斷頭處死后，立刻取其主動脈，置于4℃100%O2飽和的PSS液中，PSS液具體成分為:NaCl144mmol/L，KCl5.8mmol/L，CaCl22.5mmol/L，MgCl24.2mmol/L，Glucose11.1mmol/L，HEPES5mmol/L，pH7.4。去除離體主動脈周圍結(jié)締組織及脂肪后，剪成長度3mm～4mm的血管環(huán)。主動脈環(huán)隨機(jī)分為去內(nèi)皮組和內(nèi)皮完整組，去內(nèi)皮組采用與血管內(nèi)徑相適的棉棒去除其內(nèi)壁的內(nèi)皮細(xì)胞，內(nèi)皮完整組不做處理。將制備好的主動脈環(huán)用2根不銹鋼微型掛鉤貫穿血管管腔，將離體主動脈水平懸掛在10mL浴漕內(nèi)，下方固定，上方以一細(xì)鋼絲連于張力換能器。Powerlab生物信號測定系統(tǒng)記錄血管張力變化。浴管內(nèi)持續(xù)通以100%O2、37℃的PSS液5mL。調(diào)整基礎(chǔ)張力至2g，平衡1h，每15min換1次PSS溶液。

4．2血管內(nèi)皮功能檢測所有血管環(huán)用60mmol/LKCl進(jìn)行刺激，待其穩(wěn)定后，即連續(xù)2次刺激所引起的收縮幅度差別小于5%，用PE(10－6mol/L)預(yù)收縮，收縮平穩(wěn)后加入10－5mol/L的Ach，舒張幅度不超過收縮幅度的5%時，認(rèn)為內(nèi)皮去除完全［10］。

4．3Chrysin對大鼠主動脈環(huán)基礎(chǔ)張力的影響待血管環(huán)穩(wěn)定后，按照濃度累加法加入chrysin(10－7mol/L、10－6mol/L、10－5mol/L、10－4mol/L和10－3mol/L)或等量的PSS液，觀察不同濃度的chrysin對大鼠主動脈血管環(huán)基礎(chǔ)張力的影響。

4．4Chrysin對KCl預(yù)收縮的內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組血管環(huán)的影響血管環(huán)穩(wěn)定后，內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組加入60mmol/LKCl，收縮達(dá)坪值后，分別累積加入chrysin(10－6mol/L、3×10－6mol/L、10－5mol/L、3×10－5mol/L和10－4mol/L)，對照組加入相同劑量的PSS液。以60mmol/LKCl誘發(fā)的主動脈環(huán)最大收縮幅度作為100%，計算在加入不同濃度chrysin后舒張百分比變化，建立濃度效應(yīng)曲線。

4．5L-NAME和Indo對chrysin舒張作用的影響用L-NAME(10－4mol/L)或Indo(10－5mol/L)孵育內(nèi)皮完整的血管環(huán)30min，以KCl預(yù)收縮，觀察chrysin(10－6mol/L、3×10－6mol/L、10－5mol/L、3×10－5mol/L和10－4mol/L)對血管的舒張作用，對照組加入相同劑量PSS液。以高鉀誘發(fā)的最大收縮幅度為100%，建立濃度效應(yīng)曲線。

4．6鉀通道阻斷劑對chrysin舒張作用的影響用4-AP(10－3mol/L)、BaCl2(10－4mol/L)、Gli(10－5mol/L)或TEA(10－3mol/L)孵育內(nèi)皮完整的血管環(huán)30min，高鉀預(yù)收縮，觀察chrysin對血管環(huán)的舒張作用，對照組加入相同劑量PSS液。以高鉀誘發(fā)的最大收縮幅度為100%，建立濃度效應(yīng)曲線。

4．7Chrysin對外鈣內(nèi)流引起主動脈收縮的影響血管環(huán)穩(wěn)定后，用含EGTA的無鈣PSS液洗脫血管環(huán)。20min后，當(dāng)血管環(huán)張力回到基線時，將浴液更換為不含EGTA的無鈣PSS液。10min后，將浴液換為無鈣的60mol/LKCl，孵育10min，向浴槽內(nèi)加入2.5mmol/LCaCl2，待血管環(huán)收縮達(dá)穩(wěn)定的坪臺時，仍然用含EGTA的無鈣PSS液去洗脫。20min后，當(dāng)血管環(huán)張力再次回到基線時，將浴液更換為不含EGTA的無鈣PSS液。10min后，向浴槽內(nèi)分別加入chrysin(10－6mol/L、10－5mol/L和10－4mol/L，chrysin一直存在于浴槽內(nèi))，孵育15min，然后將浴液換為無鈣的60mmol/LKCl，孵育10min，再次向浴槽內(nèi)加入2.5mmol/LCaCl2。以孵育chrysin前含鈣液中60mmol/LKCl的收縮幅度為100%。

5統(tǒng)計學(xué)處理結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。采用GraphPadPrism6作圖，采用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計分析，兩樣本之間比較采用t檢驗，多組間比較釆用one-wayANOVA及SNK法進(jìn)行顯著性檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。通過非線性回歸計算IC50值(抑制50%最大收縮時所需要的藥物濃度)或RC50值(產(chǎn)生50%舒張時所需要的藥物濃度)。

二、結(jié)果

1Chrysin對大鼠主動脈環(huán)基礎(chǔ)張力的影響Chrysin(10－7mol/L、10－6mol/L、10－5mol/L、10－4mol/L和10－3mol/L)對基礎(chǔ)狀態(tài)血管張力無明顯影響，見圖1。Chrysin對60mmol/LKCl預(yù)收縮的血管環(huán)產(chǎn)生濃度依賴性的舒張作用，并且內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組chrysin(10－4mol/L)的最大舒張率分別是(99.69±3.78)%和(58.94±9.62)%，RC50值分別為6.38×10－6mol/L和1.64×10－5mol/L;空白對照組幾乎對血管環(huán)張力沒有影響。兩兩比較，差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P＜0.01)，見圖2。

2L-NAME和Indo對chrysin舒張作用的影響Indo(10－5mol/L)組中，chrysin(10－4mol/L)最大舒張率是(94.10±10.18)%，RC50值為8.35×10－6mol/L，與對照組相比對chrysin的舒張作用無明顯影響;而L-NAME(10－4mol/L)組中，chrysin(10－4mol/L)最大舒張率是(63.04±8.67)%，RC50值為4.81×10－5mol/L，與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P＜0.05)，見圖3。

3鉀通道阻斷劑對chrysin舒張作用的影響B(tài)aCl2(10－4mol/L)、TEA(10－3mol/L)、4-AP(10－3mol/L)和Gli(10－5mol/L)分別可以特異性阻斷KIR通道、KCa通道、KV通道及KATP通道。在鉀通道阻斷劑的基礎(chǔ)上，chrysin的最大舒張率分別為71.06%±8.95%、66.21%±14.65%、49.41%±5.69%和53.40%±8.99%;RC50值分別為3.16×10－5mol/L、4.43×10－5mol/L、9.72×10－5mol/L和4.43×10－5mol/L。結(jié)果表明BaCl2、TEA、Gli和4-AP均能抑制chrysin的舒張血管作用(P＜0.05)，見圖4。

4Chrysin對外鈣內(nèi)流引起主動脈收縮的影響在無鈣液中，60mmol/LKCl幾乎不引起主動脈發(fā)生收縮，加入2.5mmol/LCaCl2后，血管發(fā)生收縮，且其收縮幅度與之前正常PSS液中60mmol/LKCl引起的收縮幅度基本相當(dāng)。提前孵育chrysin(10－6mol/L、10－5mol/L和10－4mol/L)可濃度依賴性地抑制2.5mmol/LCaCl2引起的血管收縮，其IC50值為4.84×10－5mol/L，見圖5。

三、討論

血管疾病主要包括心血管疾病、腦血管疾病和周圍血管疾病，具有發(fā)病率高、致死率高和致殘率高的特點，危害極大。資料表明，chrysin是一種黃酮類化合物，具有抗氧化、抗焦慮、抗炎癥、抗腫瘤、化療增敏等多種藥理作用［9，11-13］，而其抗氧化以及抗炎作用被認(rèn)為對動脈粥樣硬化、糖尿病等引起的心血管病變具有抑制作用，但其對血管的具體作用機(jī)制尚不明確。課題組已經(jīng)證明chrysin對大鼠離體腎動脈具有舒張作用［14］。本實驗旨在研究chrysin對大鼠主動脈的作用及作用機(jī)制，結(jié)果顯示chrysin對SD大鼠主動脈靜息張力無明顯影響，對KCl預(yù)收縮的內(nèi)皮完整血管環(huán)和去內(nèi)皮血管環(huán)均有顯著舒張作用，并且對內(nèi)皮完整血管環(huán)的舒張作用更明顯，呈劑量依賴性。因此，chrysin對血管的舒張作用可能由兩部分組成，部分作用于血管內(nèi)皮，部分直接作用于血管平滑肌。

血管內(nèi)皮可通過釋放血管舒張因子和血管收縮因子主動調(diào)節(jié)血管張力。其中內(nèi)皮細(xì)胞釋放的NO和前列環(huán)素是調(diào)節(jié)血壓的主要因子，在維持血管基礎(chǔ)張力的過程中發(fā)揮重要的作用［15］。本實驗應(yīng)用非特異性一氧化氮合酶抑制劑L-NAME作用于大鼠主動脈環(huán)后，chrysin的血管舒張作用部分被阻斷，提示NO參與chrysin的舒張血管作用。前列環(huán)素通過激活腺苷酸環(huán)化酶，進(jìn)而可以激活cAMP依賴性的蛋白激酶A，從而介導(dǎo)其舒張血管等生理效應(yīng)。前列環(huán)素由花生四烯酸在血管內(nèi)皮細(xì)胞COX和前列環(huán)素合酶的作用下生成，其中，COX是花生四烯酸代謝過程中的重要限速酶之一。然而Indo對chrysin的舒張作用無明顯影響，提示chrysin的舒張作用和前列環(huán)素?zé)o關(guān)。Ca2+是導(dǎo)致血管平滑肌收縮的重要因子，通過細(xì)胞內(nèi)釋放和細(xì)胞外流入產(chǎn)生，Ca2+內(nèi)流途徑主要有受體調(diào)控的鈣通道和電壓依賴性鈣通道［16-17］。高鉀引起血管平滑肌收縮機(jī)制是由于細(xì)胞外高濃度K+引起細(xì)胞膜去極化，電壓依賴性鈣通道開放，從而促使細(xì)胞外液中或與細(xì)胞膜疏松結(jié)合的Ca2+內(nèi)流，因此K+通道活性的改變可使血管平滑肌細(xì)胞膜電位超極化或去極化，是參與血管舒張和收縮調(diào)節(jié)的重要機(jī)制。

篇5

[關(guān)鍵詞] 彩色多普勒超聲; 短暫性腦缺血發(fā)作; 頸動脈; 椎動脈

[中圖分類號] R743.31;R445.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)11-68-03

Application on Color Doppler Ultrasonography in Carotid Artery Transient Ischemic Attack

CHANG Hong

Department of Ultrasound,Lvshun Municipal People’s Hospital,Dalian 116041,China

[Abstract] ObjectiveTo evaluate the changes of carotid artery and vertebral artery in transient ischemic attack(TIA)by using color Doppler ultrasonography and analyze the value of color doppler ultrasonography in the diagnosis of TIA. MethodsWe assigned 126 cases of TIA as TIA group and 100 healthy subjects as control group. Intima-media thickness(IMT),stenosis rate,plaque of common carotid artery(CCA)and internal carotid artery(ICA),and hemodynamics of cervical part of vertebral artery(VA)were detected by using color Doppler ultrasonography. ResultsThere were significant differences in most of the examined items of CCA and ICA between the two groups. There was a significant difference in vertebral artery peak systolic flow velocity between the two groups and 7 cases showed steal phenomenon in transient ischemic attack group. ConclusionColor Doppler ultrasonography plays an important role in the diagnosis of TIA.

[Key words]Color Doppler ultrasonography; Transient ischemic attack; Carotid artery;Vertebral artery

短暫性腦缺血發(fā)作(TIA)是常見缺血性腦血管病之一,是腦梗死的預(yù)警信號。有過TIA的患者將有1/3～2/3會在未來1～5年內(nèi)發(fā)生腦梗死。因此,積極預(yù)防TIA在臨床上具有重要意義[1]。頸動脈粥樣硬化是缺血性腦血管疾病的重要病因之一[2],本文應(yīng)用彩色多普勒超聲對126例TIA患者進(jìn)行頸部血管檢查,旨在探討頸部動脈病變的檢出在TIA診斷中的應(yīng)用價值。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選擇我院2008年1～12月間臨床診斷為TIA但腦CT檢查正常的患者共126例,其中男性74例,女性52例,年齡38～92歲,平均年齡(66.8±2.8)歲。臨床癥狀包括一過性頭暈、眼黑蒙、肢體功能異常、言語障礙等,其臨床癥狀在數(shù)分鐘至24h內(nèi)完全消失,不遺留任何神經(jīng)系統(tǒng)障礙,病史3個月～5年。健康對照組為2008年1～12月間來我院進(jìn)行常規(guī)體檢者100例,其中男性54例,女性46例,年齡42～83歲,平均年齡(62.5±3.8)歲,均排除各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

1.2 檢查技術(shù)

應(yīng)用phillips HD11和GE多維星彩色多普勒超聲診斷儀,寬頻線陣探頭,頻率7.5~12MHz。受檢者仰臥位,頸后墊薄枕,充分暴露頸部。探頭直接置于頸部兩側(cè)探查頸總動脈(CCA)、頸內(nèi)動脈(ICA)、頸段椎動脈(VA),分別于頸動脈分叉上、下1.5cm處測量CCA 和ICA的血管的中內(nèi)膜厚度(IMT),以>1.0mm為增厚。另外觀察各血管有無硬化斑塊,以IMT>1.2mm并向管腔內(nèi)突出為斑塊形成,觀察頸動脈血管走行情況及有無管腔狹窄并計算狹窄率(狹窄率%=1-殘余管腔/實際管腔×100%),觀察椎動脈管腔血流充填情況,測定雙側(cè)椎動脈收縮期峰值流速(Vs)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS16.0統(tǒng)計分析軟件,計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。樣本間均數(shù)比較采用t檢驗,構(gòu)成比的比較采用卡方檢驗,P

2 結(jié)果

126例TIA患者及100例健康對照組成員均獲得滿意圖像,兩組間性別構(gòu)成比及年齡無明顯差異(P>0.05)。在CCA及ICA所探查到的單側(cè)的CCA及ICA斑塊形成情況、雙側(cè)CCA及ICA狹窄率大于50%情況在兩組間無明顯差異(χ2=1.66,P>0.05)。見表1。其余各觀測項目在兩組的比率均有明顯差異(χ2=4.50,P

3 討論

研究表明,TIA的發(fā)生與動脈粥樣硬化有著密切的聯(lián)系,TIA的發(fā)生與多種因素有關(guān),如微栓子、腦外盜血綜合征、動脈炎、血管走行異常等,其中頸動脈顱外段粥樣硬化斑塊是頸動脈系統(tǒng)TIA 的重要原因之一。有文獻(xiàn)報道,68%缺血性腦血管病伴有嚴(yán)重的頸動脈狹窄,在發(fā)生缺血性腦梗塞的病因中,60%起因為頸動脈狹窄所致的血流動力學(xué)障礙[3]。有研究表明,脂類代謝異常、平滑肌細(xì)胞增殖和炎癥因子刺激相互作用和影響是引起動脈硬化各種病因改變的重要機(jī)制[4]。高血壓、糖尿病、膽固醇增高、吸煙等多種因素也對內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生不良影響[5]。頸動脈病變部位多發(fā)生在湍流和血流沖擊較大的部位,如頸動脈分叉部上學(xué)約2cm米范圍內(nèi),如圖1。動脈粥樣硬化斑塊潰破,易導(dǎo)致循環(huán)血小板沉積,沉積的血小板及斑塊內(nèi)的膽固醇結(jié)晶可脫落隨血流進(jìn)入顱內(nèi),引起顱內(nèi)小血管閉塞而發(fā)病,引起短暫發(fā)作的單肢無力、單肢體偏癱、偏身感覺障礙、偏盲或失語等癥狀。因栓子微小,容易溶解消失或進(jìn)入血管末梢,所以患者出現(xiàn)的一系列臨床癥狀一般在24h內(nèi)緩解或消失,不留任何神經(jīng)障礙癥狀。

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動脈粥樣硬化常累及全身的大中型動脈,而頸動脈是好發(fā)部位。應(yīng)用彩色多普勒超聲檢查,可以直觀而準(zhǔn)確地觀察血管管徑及管壁情況,并用脈沖多普勒觀察血液動力學(xué)參數(shù),為頸動脈硬化提供可靠的信息,是目前臨床中評價頸動脈病變的重要手段。本研究通過對126 例TIA者頸動脈超聲檢查發(fā)現(xiàn),頸部血管的動脈粥樣斑塊的形成與短暫性腦缺血發(fā)作具有很大的相關(guān)性。

頸動脈扭曲,是指頸動脈的過度彎曲,先天性常見,也可能為動脈硬化晚期血管產(chǎn)生延長和彎曲所致,常見于頸內(nèi)動脈顱外段或頸總動脈[6]。工作中發(fā)現(xiàn),部分患者特別是反復(fù)發(fā)作、而較快緩解后無遺留癥狀的患者,常在彩超檢查中發(fā)現(xiàn)頸動脈有迂曲、扭曲現(xiàn)象。以前,人們常認(rèn)為扭曲常發(fā)生的部位是頸總動脈,但我們工作中發(fā)現(xiàn),頸總動脈扭曲現(xiàn)象程度一般較輕,而且達(dá)到發(fā)生TIA程度的也相對較少,而對一些癥狀較典型的患者,頸內(nèi)動脈有的可有明顯的異常走行現(xiàn)象,形態(tài)各異,可呈“C”、 “S””、“Z”等形態(tài),有的甚至可呈小于30°的銳角,成角處兩側(cè)呈不同顏色血流信號,如圖2有的成角處可有不同程度的狹窄,可探及增快的血流頻譜。

鎖骨下動脈盜血綜合征是因無名動脈或鎖骨下動脈在其發(fā)出椎動脈之前管腔狹窄,當(dāng)病人手部活動時,顱內(nèi)血液經(jīng)椎動脈倒流入同側(cè)鎖骨下動脈,引起腦缺血癥狀。本研究中,10.32%的受檢者出現(xiàn)椎動脈血流量減少或消失,5.56%的受檢者出現(xiàn)椎動脈盜血,彩色多普勒超聲不僅可以檢測到椎動脈內(nèi)與同側(cè)頸動脈方向相反的血流頻譜,如圖3,還可以探及鎖骨下動脈、椎動脈開口前的局部阻塞性改變。

彩色多普勒超聲檢查費(fèi)用低、無創(chuàng)傷、操作方便有助于預(yù)測TIA的發(fā)病風(fēng)險,動態(tài)觀察動脈粥樣硬化的發(fā)展與消退,準(zhǔn)確地診斷頸動脈病變。總之,彩超檢查具有簡便、無創(chuàng)、直觀、真實可靠的特點,可以清晰地顯示頸動脈管腔回聲、內(nèi)-中層厚度、粥樣斑塊的回聲特征、數(shù)目和部位,并能了解管腔狹窄程度及狹窄處血流動力學(xué)改變,并可長期動態(tài)觀察,為臨床提供有價值的診斷依據(jù),針對性干預(yù)治療,達(dá)到預(yù)防卒中再發(fā)的目的。

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篇6

【摘要】 目的 探討人參二醇組皂苷（PDS）的抗動脈粥樣硬化作用及機(jī)制。方法 Wistar大鼠45只，隨機(jī)分為對照組、模型組、PDS組，每組15只。對照組大鼠喂飼普通飼料，模型組及PDS組大鼠采用高脂飲食加維生素D3（總量7×105 U/kg，分別于第1周和第6周腹腔注射）建立大鼠動脈粥樣硬化模型。PDS組大鼠高脂喂養(yǎng)同時每日1次PDS（100 mg·kg-1·d-1）灌胃，每周稱重1次并根據(jù)體重變化調(diào)整給藥量；對照組及模型組大鼠以相應(yīng)生理鹽水灌胃。11 w后頸動脈采血檢測血脂水平，光鏡下觀察主動脈弓形態(tài)學(xué)變化，免疫組化染色法檢測胸主動脈細(xì)胞間黏附分子1（ICAM1）的表達(dá)。結(jié)果 與模型組比較，PDS給藥組TC、LDLC和AI明顯降低（P＜0.01，P＜0.05），血清甘油三酯、高密度脂蛋白水平無明顯差異。光鏡下模型組血管壁多處可見典型粥樣硬化斑塊，藥物組血管壁結(jié)構(gòu)變化輕微，局部僅見內(nèi)皮脫落；對照組血管壁光滑完整，未發(fā)生病理變化。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，模型組陽性細(xì)胞率與對照組比較明顯升高（P＜0.01）；與模型組比較，PDS組陽性細(xì)胞率明顯降低（P＜0.01）；而PDS組陽性細(xì)胞率與對照組無明顯差異。結(jié)論 PDS具有預(yù)防動脈粥樣硬化形成的作用，通過下調(diào)主動脈ICAM1的表達(dá)量，抑制AS的形成。

【關(guān)鍵詞】 人參二醇組皂苷；動脈粥樣硬化；細(xì)胞間黏附分子1

動脈粥樣硬化(AS)是許多心腦血管疾病的病理基礎(chǔ)，其形成原因相當(dāng)復(fù)雜，目前關(guān)于AS的病因認(rèn)為是由損傷、炎癥、免疫功能障礙三者相結(jié)合作用的結(jié)果〔1〕。近年來傳統(tǒng)中藥在抗AS中仍發(fā)揮著獨(dú)特的優(yōu)勢，體現(xiàn)出中醫(yī)整體觀念，具有靈活組方、因人制宜、副作用小的治療特色。人參是五加科植物的根莖，有強(qiáng)健身體、益智明目、安神止驚、延年益壽的作用〔2〕?，F(xiàn)代研究表明，人參的主要活性成分為人參皂苷(PDS)，具有降血脂、抗脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、提高機(jī)體免疫力、預(yù)防感染等作用〔3〕。目前有關(guān)PDS對預(yù)防AS形成的研究報道甚少。本研究采用食餌法建立大鼠AS模型，觀察PDS對血脂及細(xì)胞間黏附分子1（ICAM1）表達(dá)的影響，旨在為AS及冠心病的預(yù)防提供新的思路，同時也為開發(fā)抗AS新藥提供有價值的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物

選用Wistar健康大鼠45只，體重180～230 g，雌雄不限，由吉林大學(xué)實驗動物中心提供。隨機(jī)分為對照組、模型組、PDS組，每組15只。在動物房普通清潔環(huán)境下分籠飼養(yǎng)，溫度18℃～22℃，濕度55%±5%，每日光照/黑暗各12 h。

1.2 方法

1.2.1 藥品及試劑

PDS苷由吉林大學(xué)病理生理學(xué)教研室饋贈，膽固醇、豬膽鹽（北京化學(xué)試劑公司產(chǎn)品），維生素D3（蘇州第六制藥廠），丙基硫氧嘧啶（上海復(fù)星朝暉藥業(yè)有限公司產(chǎn)品），兔抗鼠ICAM1多克隆抗體（北京博奧森生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品），免疫組化檢測試劑盒（北京博奧森生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品），7020型全自動生化分析儀（日本日立公司），WC/0905恒溫箱（重慶實驗設(shè)備廠），石蠟切片機(jī)（德國來斯），BS21OS電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），-80℃超低溫冰箱（MDFU4086S，日本三洋集團(tuán)股份有限公司）。

1.2.2 模型制備

采用維生素D3與高脂飼料相結(jié)合制備大鼠高脂血癥與AS模型〔4〕。模型組與PDS組每日飼喂高脂飼料（高脂飼料配方：82.5%普通飼料，2%膽固醇，0.5%豬油，5%白糖），同時于第1、6周分別腹腔注射VD37×105 U/kg，共2次，丙基硫氧嘧啶每日50、0.4 ml/kg灌胃1次。對照組飼喂普通標(biāo)準(zhǔn)飼料，每只20～25 g/d。通過大鼠血清TC、LDL水平及動脈粥樣硬化指數(shù)（AI）及主動脈壁的病理組織學(xué)變化判定動脈粥樣硬化模型制備是否成功。

1.2.3 給藥方法

PDS組在造模同時每日預(yù)防性給予PDS灌胃1次(100 mg/kg體重)，每周根據(jù)體重增長及時調(diào)整給藥劑量；正常組、模型組以等量生理鹽水灌胃。連續(xù)11 w。

1.2.4 標(biāo)本采集

于實驗第11周末頸動脈取血，每只大鼠取血清約2 ml分裝于4個EP管，置-80℃冰箱冷凍備用；主動脈血管取材做病理石蠟切片；免疫組織化學(xué)染色方法檢測ICAM1的表達(dá)。免疫組化染色陽性結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：胞漿、核膜出現(xiàn)棕黃色細(xì)顆粒為陽性，提示有ICAM1表達(dá)。陽性細(xì)胞率的計算：在400倍光鏡下觀察動脈組織免疫組化染色結(jié)果，每張切片隨機(jī)選取10個視野作為觀察區(qū)，每個區(qū)域計數(shù)100個細(xì)胞，計數(shù)陽性細(xì)胞總數(shù)，與1 000相比，比值為陽性細(xì)胞率。

1.3 統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件分析，分類變量資料采用χ2檢驗；雙變量等級資料采用Spearman等級相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 PDS對血脂的影響

與模型組比較，PDS組大鼠血清TC、LDLC水平顯著降低（P＜0．01），AI明顯降低（P＜0.05）；三組血清TG、HDLC水平無顯著差異。見表1。表1 PDS對大鼠TC、TG、LDLC、HDLC含量及AI的影響(略)

2.2 AS形態(tài)學(xué)觀察

光鏡下對照組大鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)扁平，排列緊密，內(nèi)膜光滑完整；中膜數(shù)層彈性膜和平滑肌細(xì)胞排列規(guī)則，血管壁厚度均勻。模型組血管壁見內(nèi)膜多處灶性增厚，平滑肌細(xì)胞向內(nèi)膜牽移，可見大量泡沫細(xì)胞，有典型粥樣斑塊形成，纖維帽深部彈性纖維斷裂，平滑肌細(xì)胞受壓萎縮，有大量脂質(zhì)、壞死崩解物并發(fā)生鈣鹽沉積，中膜變薄。PDS組血管壁三層結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)膜無明顯增厚，血管內(nèi)皮細(xì)胞總體完整，偶有損傷脫落。彈性膜與平滑肌細(xì)胞排列較整齊（圖1）。

2.3 PDS對胸主動脈ICAM1表達(dá)的影響

對照組ICAM1表達(dá)陽性細(xì)胞率為4.1%；模型組為26.3%；PDS組為5.8%。模型組與對照組比較，ICAM1在主動脈內(nèi)膜及泡沫細(xì)胞表達(dá)顯著增加（P＜0.01），染色明顯加深；PDS組與模型組比較，ICAM1表達(dá)明顯減少（P＜0.01），染色明顯減輕。PDS組陽性細(xì)胞率與對照組相比無明顯差異，陰性對照切片未見陽性著色(圖2)。

3 討 論

AS是以富含脂肪的斑塊在大動脈壁聚積為特征的系統(tǒng)疾病，是心腦血管病的主要病理基礎(chǔ)〔5〕。AS病因病理復(fù)雜，目前尚未完全闡明，但已知與血脂異常、高血壓、糖尿病、肥胖、吸煙等因素有關(guān)，最重要的誘導(dǎo)因素是血脂異常，主要表現(xiàn)為LDL 和VLDL水平升高以及HDL水平下降。所以，降低LDL和/或升高HDL都是調(diào)血脂藥的重要靶標(biāo)。

人參的藥理學(xué)有兩個顯著特點:(1)人參具有多靶點作用，但幾乎無毒性及不良反應(yīng)；(2)其作用機(jī)制主要是調(diào)動機(jī)體內(nèi)因，動員神經(jīng)保護(hù)機(jī)制、免疫機(jī)制而發(fā)揮作用〔2〕。人參的化學(xué)成分中PDS是其主要有效成分，研究表明，PDS可調(diào)節(jié)血脂，能夠降低TC和LDLC，減少動脈內(nèi)膜脂質(zhì)形成，具有明顯的降脂、抗AS作用，與有關(guān)報道一致〔6〕。

ICAM1做為一種細(xì)胞表面單鏈糖蛋白，血管內(nèi)皮是其主要的靶細(xì)胞，主要介導(dǎo)單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞黏附、聚集，促進(jìn)AS的炎癥過程。研究證實，在正常情況下，ICAM1很少表達(dá)或不表達(dá)，由于血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，在炎癥刺激因子等因素影響下，ICAM1可廣泛表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞表面〔7〕。ICAM1表達(dá)增加時，促進(jìn)白細(xì)胞黏附于血管內(nèi)皮細(xì)胞以及通過內(nèi)皮細(xì)胞遷移〔8〕，在主動脈硬化發(fā)生中有重要作用。有文獻(xiàn)報道，氧化型低密度脂蛋白可以上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞ICAM1的表達(dá)，這可能是誘導(dǎo)單核細(xì)胞浸潤的始動因素〔9〕。單核細(xì)胞可在ICAM1的作用下黏附于內(nèi)皮細(xì)胞表面并進(jìn)入內(nèi)皮下，轉(zhuǎn)化為巨噬細(xì)胞，吞噬脂質(zhì)尤其是氧化型LDL，轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞，參與AS的形成，同時ICAM1還可介導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）的分化與遷移〔10〕。VSMC遷移入內(nèi)膜，由收縮型轉(zhuǎn)化為合成型VSMC，并增生、分泌大量膠原纖維和蛋白多糖等基質(zhì)，使內(nèi)膜增厚，管壁變硬，是粥樣斑塊形成的重要環(huán)節(jié)。Gerhard等應(yīng)用黏附分子抑制劑在不影響血脂的前提下通過抑制內(nèi)皮ICAM1的表達(dá)，抑制了單核細(xì)胞黏附及其趨化作用和吞噬作用，最終能有效阻止高脂飲食誘導(dǎo)的斑塊形成，提示黏附分子對血管損傷的獨(dú)立機(jī)制〔11〕。本研究表明，PDS通過下調(diào)主動脈內(nèi)皮ICAM1的蛋白表達(dá)，抑制單核細(xì)胞向內(nèi)膜浸潤和免疫黏附，減少泡沫細(xì)胞的生成，抑制中膜VSMC向內(nèi)膜遷移、增殖，從而起到抗AS的作用。

綜上，PDS能夠抑制粥樣斑塊的形成，具有抗AS的作用，其機(jī)制與PDS降脂作用、下調(diào)內(nèi)皮ICAM1的表達(dá)有密切關(guān)系，其更多的作用機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

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9 李強(qiáng)翔，鐘惠菊.葛根素對糖尿病大鼠血脂和主動脈細(xì)胞間黏附分子1表達(dá)的調(diào)控〔J〕.中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué)，2006；15（11）：9813.

篇7

【摘要】 目的了解天冬膠對大鼠接種Walker-256癌肉瘤經(jīng)肝動脈灌注時對機(jī)體功能的影響。方法將SD大鼠分為生理鹽水組、天冬膠組、天冬膠加5-FU組、5-FU組和碘油組，于肝接種Walker-256瘤株10 d后分別經(jīng)肝動脈灌注給藥。給藥結(jié)束2 d和7 d后分別處死各組部分大鼠，比較各組大鼠體重和血常規(guī)、肝腎功能變化。結(jié)果天冬膠組和天冬膠加5-FU組大鼠的體重變化最?。?-FU組WBC下降顯著（P

【關(guān)鍵詞】 中藥； 天冬膠； 動脈注射； 動物實驗； 毒副作用

肝癌是消化系統(tǒng)發(fā)生率最高的惡性腫瘤，經(jīng)動脈化療栓塞(trans-arterial chemotherapy and embolization， TACE)的方法，已廣泛應(yīng)用于治療不能切除的肝癌，但TACE 對肝臟的損害也不容忽視。中藥天冬具有獨(dú)特的功效價值，本實驗比較了作為血管栓塞劑的天冬膠及含化療藥天冬膠混合液與化療藥、碘油對大鼠肝臟種植Walker-256癌肉瘤動脈灌注時其對機(jī)體及肝腎功能的影響作用。

1 材料

肝臟移植瘤模型制作，以荷Walker-256癌肉瘤腹水型SD大鼠（上海醫(yī)工院研究所提供）為種鼠進(jìn)行腹水傳代。在本實驗前5～6 d將腫瘤腹水接種于大鼠腋下形成實體瘤。再取實體瘤切割成大小約1 mm×1 mm×1 mm，植入體重約200 g清潔級雄性SD大鼠（購于上海實驗動物中心）的肝臟。

2 方法

2.1 動物模型處理腫瘤移植后第10天，將大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別剖腹，肝動脈穿刺注入加適量泛影葡胺溶脹的自制天冬膠（天冬膠組），天冬膠加5-FU (天冬膠加5-FU組)；5-FU(5-FU組)；碘化油（碘油組），生理鹽水（鹽水組），各組藥物劑量約0.5 ml/kg。剔除不到分組時間的死亡大鼠，各組于給藥后第2天、第7天分別處死5只大鼠。在治療前和處死前分別取血3 ml，檢測血常規(guī)和肝腎功能。

2.2 觀察指標(biāo)

2.2.1 大鼠體質(zhì)量及一般情況觀察各組給藥前及處死前分別稱重一次，觀察各組大鼠的體重變化及大鼠的精神狀態(tài)、活動情況、毛色等。

2.2.2 大鼠治療前后血常規(guī)及肝腎功能各組大鼠治療前及處死前檢測血常規(guī)及肝腎功能各項指標(biāo)。ALT，AST，TBIL，ALKP，肌酐，尿素氮等測定均采用美國Abbott AEROSET全自動生化儀，酶動力學(xué)法檢測。

2.2.3 統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS11.5進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，所得每組數(shù)據(jù)值用±s表示，統(tǒng)計學(xué)采用t檢驗，以P

3 結(jié)果

3.1 腫瘤接種成活情況整個實驗中，腫瘤接種成活率100%。接種后第10天開腹見肝臟腫塊呈圓形或橢圓形，表面灰白色，尚未見腹水。在進(jìn)行肝動脈插管過程中，先后死亡十余只大鼠，均為分離血管時插管時動脈斷裂失血所致。腫瘤移植后第10天，觀察接種腫瘤處，見有白色疤痕，局部肝組織隆起。有的腫塊外生生長，呈灰白色，有的腫塊與腹壁粘連，故無法測量腫瘤的實際大小。

3.2 各組大鼠治療前后的一般情況、體重變化及治療前后體重差比較見表1。造模前大鼠神態(tài)安逸，行動敏捷，被毛光澤，食量較大且穩(wěn)定，體重增長迅速；而造模后大鼠則逐漸出現(xiàn)精神萎靡，懶于行動，被毛失澤，食量減少，體重增長緩慢。治療后天冬膠組和天冬膠加5-FU組大鼠的體重變化最小，其一般情況也較好，食量、進(jìn)水量及活動尚可，精神較好，無聳毛等情況；而5-FU組大鼠體重最下降明顯，并出現(xiàn)消瘦、聳毛、精神萎靡、活動少、食量、進(jìn)水量減少等情況。表1 各組大鼠治療前后體質(zhì)量變化比較（略）

3.3 各組大鼠治療前后血常規(guī)及肝腎功能的比較見表2～4。

4 討論

TACE的作用機(jī)制在于，肝癌的血供90%左右來于肝動脈，而正常肝組織肝動脈血供僅占25%，因此，栓塞肝動脈可導(dǎo)致腫瘤組織因缺血而大量壞死，對正常肝組織則損傷較輕。大多數(shù)研究表明，TACE在引起肝癌大面積壞死，使腫瘤體積縮小方面的療效已經(jīng)得到充分肯定［1］。但是，TACE也有著不可避免的負(fù)面影響，如可以導(dǎo)致肝臟功能的損害［2］，肝硬變程度加重或以前沒有肝硬變而出現(xiàn)肝硬變［3］，抑制機(jī)體免疫功能，針對TACE的不利影響研究合理的治療模式是必要的。表2 各組大鼠治療前后血常規(guī)的比較（略）

本次實驗結(jié)果顯示，各組大鼠治療前體重比較無顯著性差異（P>0.05），治療后體重均較治療前有所下降，這可能與手術(shù)創(chuàng)傷有關(guān)。治療后天冬膠組和天冬膠加5-FU組大鼠的體重變化最小，其一般情況也較好，而5-FU組大鼠體重最下降明顯，一般情況較差；碘油組和生理鹽水組界于兩組之間。治療2 d后天冬膠組體重下降幅度顯著小于5-FU組，比較其體重變化有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。但各組治療前后自身比較則提示5-FU組WBC下降顯著（P0.05）。第2天時天冬膠加5-FU組與生理鹽水組治療后比較RBC和HGB下降顯著（P0.05），治療后5-FU組ALT、AST等指標(biāo)有所增高，天冬膠加5-FU組在第2天時治療前后的ALT下降顯著（P0.05）。碘油組在2天時治療前后的ALKP 增長顯著（P0.05）。治療后各組大鼠腎功能無顯著差異（P>0.05）。

盡管經(jīng)肝動脈灌注給藥，由于藥物的首過效應(yīng)使靶器官內(nèi)藥物量的攝取多，而流經(jīng)身體其他部位的藥量少，從而使全身的毒副作用減輕。但本實驗結(jié)果表明化療藥物5-FU經(jīng)肝動脈灌注仍然對動物機(jī)體有一定的毒副作用，而中藥天冬膠則無明顯影響。天冬膠在改善大鼠的生存質(zhì)量方面優(yōu)于5-FU，5-FU組大鼠的生存質(zhì)量甚至不如生理鹽水組和單純的碘油栓塞組。中藥天冬膠和5-FU合用能夠降低化療藥物的毒副作用，改善大鼠的生存質(zhì)量，這對如肝癌這樣惡性程度高、進(jìn)展快的腫瘤來說顯得尤為重要。李永健等［4］通過采用統(tǒng)一辨證標(biāo)準(zhǔn)和資料處理方法的臨床流行病學(xué)調(diào)研方案，對介入患者各證候進(jìn)行統(tǒng)計分析，發(fā)現(xiàn)介入會傷陰、助熱、生濕。介入組病人陰虛等證型明顯增多，他們并認(rèn)為“陰虛可能為肝癌所特有的，……要重視保護(hù)陰液?！倍於亲剃幖哑?，作為栓塞劑可以直接保護(hù)被化療藥物損傷的肝陰，這也許是其與化療藥物合用后改善大鼠身體機(jī)能的原因之一。表3 各組大鼠治療前后肝功能的比較（略）表4 各組大鼠治療前后腎功能的比較（略）

上述研究表明，中藥天冬膠副作用小于一般化療藥，天冬膠和化療藥聯(lián)合使用降低了對正常肝組織的損害，減輕化療藥物的副作用，并有保肝功效，這是常用栓塞劑碘油所不具備的作用。天冬膠本品生物相容性好，可作為血管內(nèi)注射劑使用［5］。開發(fā)利用天冬膠這類中藥血管栓塞劑在治療腫瘤中具有重要意義，這在國內(nèi)外尚未見類似的研究報道。

參考文獻(xiàn)

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篇8

關(guān)鍵詞：抑制IL-17活性短肽疫苗；ApoE-/-小鼠；動脈粥樣硬化；斑塊面積

動脈粥樣硬化（AS）及其心血管并發(fā)癥嚴(yán)重威脅人類健康?，F(xiàn)代研究證實，動脈粥樣硬化是一種緩慢進(jìn)展性自身免疫性血管疾病。T淋巴細(xì)胞是介導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答的主要免疫細(xì)胞[1]，按照其功能不同可以分為多種亞群，如Th1、Th2、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）等。以往的研究證實，AS動物模型和冠心病患者體內(nèi)存在Th1細(xì)胞功能亢進(jìn)和Treg細(xì)胞功能減低，抑制Th1細(xì)胞功能可以延緩AS進(jìn)程[2-3]。

最近研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體存在一種新型的不同于Th1和Th2的CD4+效應(yīng)性T細(xì)胞，該細(xì)胞特異性的產(chǎn)生白介素17（IL-17），稱為Th17細(xì)胞。有研究表明，冠心病患者和AS小鼠體內(nèi)存在Th17細(xì)胞功能亢進(jìn)，應(yīng)用抗IL-17抗體干預(yù)可以顯著減少AS斑塊面積，提示IL-17在AS發(fā)病中起到重要促進(jìn)作用。因此，有理由針對IL-17這一靶點，進(jìn)行免疫學(xué)干預(yù)，為AS的防治提供新思路。我們的前期實驗篩選設(shè)計了4條IL-17肽段（0001、0002、0003、0004），通過實驗證明了所制備的IL-17疫苗（0002）所產(chǎn)生的抗體具有高度的特異性、穩(wěn)定性及中和活性，并發(fā)現(xiàn)此短肽疫苗能有效引起小鼠的免疫反應(yīng)。為了研究IL-17疫苗對動脈粥樣硬化的治療作用，我們將篩選出短肽免疫ApoE-/-小鼠，進(jìn)行該疫苗對動脈粥樣硬化的有效性以及安全性實驗。

1資料與方法

1.1 實驗動物 SPF級近交系C57BL/6J背景ApoE-/-小鼠，購自Jackson試驗室（Bar Harbor， Maine， 美國），由北京大學(xué)實驗動物中心繁殖。

1.2主要試劑 冰凍切片及油紅O染色：①O.C.T包埋劑；②4%多聚甲醛：多聚甲醛粉（sigma） 4 g，PBS 100 mL，水浴加熱攪拌助溶，調(diào)節(jié)pH至7.2～7.6，4℃避光保存?zhèn)溆?；③油紅O儲備液：油紅O（sigma）0.5 g，異丙醇100 mL，倒入燒瓶內(nèi)，水浴中加熱溶解，靜置冷卻后過濾，4℃避光保存；④油紅O工作液：油紅O儲備液 3份，蒸餾水 2份，混合后靜置10 min，過濾后避光保存。

1.3動物模型及基本情況 本實驗遵循實驗動物倫理委員會的相關(guān)規(guī)定，并得到華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實驗動物研究委員會審核及認(rèn)可。8 w齡雄性ApoE-/-24只，SPF環(huán)境中普食飲食喂養(yǎng)，分兩組，一組用生理鹽水腹腔注射，一組用IL-17疫苗（0002）腹腔注射，注射劑量見表1，分別于0、2、4、6 w共免疫4次，測體重，8 w后心室采血處死，血清50 uL每份分裝保存于-20℃冰箱。以自動分析儀檢測血清中血脂含量，包括：總膽固醇（TC），甘油三酯（TG）及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），見表1。

1.4油紅染色及動脈粥樣硬化斑塊面積計算 小鼠采血處死后，快速分離其心臟及相連的部分升主動脈，小心剃除包裹的脂肪及結(jié)締組織，PBS沖洗干凈后，濾紙吸干，4%多聚甲醛中固定12～24 h，濾紙吸干，刀片齊左右心耳下緣平面橫斷，棄心尖部心臟，以心底面朝上主動脈部朝下的方向O.C.T包埋于鐵托上，置于冰凍切片機(jī)速凍10 min左右待包埋劑凍硬，開始對主動脈根部進(jìn)行連續(xù)切片，切片厚10 um，從主動脈瓣環(huán)出現(xiàn)開始計數(shù)至瓣環(huán)消失，每200 um處取一切片用于油紅O染色。染色后的切片在帶攝像頭顯微鏡下拍照，單人盲法，用IMAGEPRO PLUS software（IPP）計算每片切片斑塊面積，再計算每只小鼠所有切片的平均面積。油紅O染色步驟如下：①冰凍切片于新鮮配制的60%異丙醇中漂洗20～30 s；②新鮮配制油紅O工作液中染色時間15～30 min；③于60%異丙醇漂洗，去多余油紅；④蒸餾水稍洗；⑤蘇木素中復(fù)染10～15 s；⑥1%新鮮配制氨水中返藍(lán)5～10 s；⑦自來水沖洗3～5 min；⑧于顯微鏡下拍照。

1.5統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件，數(shù)值變量以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。兩組間比較采用t檢驗，P

3結(jié)果

3.1體重及血脂 在8 w的普食喂養(yǎng)過程中，小鼠均生長良好。與對照相比，腹腔注射IL-17疫苗（0002）并沒有對ApoE-/-小鼠的體重及血脂造成影響，見表2。

3.2 IL-17疫苗減少斑塊面積 本次實驗中，8 w齡雄性普食喂養(yǎng)8 w，分別于0、2、4、6 w對IL-17疫苗（0002）與對照組共免疫4次，處死小鼠對兩組ApoE-/-小鼠主動脈根部冰凍切片并行油紅O染色并分析斑塊面積，結(jié)果表明，IL-17疫苗（0002）治療組斑塊面積明顯較對照組?。?.13±0.04 vs 0.25±0.05 mm2，P

IL-17疫苗（0002） 對照組

圖1

圖2 主動脈根部斑塊面積統(tǒng)計圖

3討論

有研究表明以IL-17抗體處理的動脈粥樣硬化自發(fā)小鼠，與對照組相比病理改變程度有所減輕，而臨床上也證實了IL-17抗體能改善同為Th17細(xì)胞為主導(dǎo)作用的銀屑病的早期臨床癥狀?；谝陨侠碚摵蛯嵺`基礎(chǔ)，我們認(rèn)為基于IL-17活性位點設(shè)計的IL-17疫苗，能通過在體誘導(dǎo)IL-17中和性抗體的產(chǎn)生而達(dá)到阻斷動脈粥樣硬化進(jìn)展的作用。 我們通過IL-17疫苗（0002）主動免疫ApoE-/-小鼠而抑制其體內(nèi)IL-17 功能，結(jié)果表明IL-17疫苗（0002）在未影響小鼠體重及血脂情況下顯著的減少斑塊面積（P

參考文獻(xiàn)：

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篇9

【關(guān)鍵詞】硫化氫（H2S）；先天性心臟?。–HD）；肺動脈高壓（PH）

【文章編號】1004-7484（2014）07-4266-02

先天性心臟?。╟ongenitalheartdisease， CHD）是指胎兒時期心臟及大血管發(fā)育受阻或失常所造成的心血管畸形。左向右分流型先天性心臟病占先天性心臟病的60%～70%，絕大多數(shù)需要手術(shù)修補(bǔ)或?qū)Ч芙槿胫委?。肺動脈高壓（pulmonary hypertension， PH）是左向右分流型先天性心臟病的一組重要并發(fā)癥，其發(fā)生發(fā)展及嚴(yán)重程度直接影響CHD患者的病情、手術(shù)療效及預(yù)后，因而預(yù)防肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展并逆轉(zhuǎn)有非常重要的意義。新型氣體信號分子硫化氫（hydrogen sulfide， H2S）是近年來新發(fā)現(xiàn)的具有擴(kuò)張血管、抑制平滑肌細(xì)胞增殖的血管活性物質(zhì)。那么，在CHD合并PH患者血漿H2S水平與正常小兒有何差異？它與PH的發(fā)生有何關(guān)系？目前尚不清楚。本研究意在探討H2S在CHD合并PH患者血漿中的變化及意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象

采集我院心臟外科2010年10月～2013年5月間收治的48例左向右分流的先天性心臟?。–HD）患者，男26例，女22例；年齡4個月～28歲，平均5.37±3.84歲；其中室間隔缺損（VSD）21例，房間隔缺損（ASD）11例，動脈導(dǎo)管未閉（PDA）8例，VSD+ASD 3例，VSD+PDA 2例，ASD+PDA 3例。

1.2 分組

對患者術(shù)前均采用VIVID7型彩色多普勒血流顯像儀進(jìn)行常規(guī)經(jīng)胸超聲心動儀檢查，取胸骨旁左室長軸、大動脈短軸、心間四腔、胸骨上窩及劍突下等常用標(biāo)準(zhǔn)切面仔細(xì)探查，按超聲三階段分析法判斷心臟方位及結(jié)構(gòu)畸形，明確血流動力學(xué)紊亂程度[1]。同時經(jīng)由心腔與大血管壓力階差估測患兒肺動脈收縮壓（pulmonary artery systolic pressure， PASP），在不合并肺動脈瓣狹窄及右室流出道梗阻時，肺動脈收縮壓等于右室收縮壓。通過多普勒超聲測量收縮期右室與右房壓差來估測右室收縮壓。按照改良的柏努力公式右房右室壓差約等于4V2，V是右房室瓣最大返流速度（m/s）。右室收縮壓=4V2+右房壓，右房壓以5mmHg計算，從而間接判斷PASP[2]。按照PASP分為三組：A組，無肺動脈高壓組（PASP

1.3 標(biāo)本采集

所有病人采集橈動脈血5ml。將2ml血注入含肝素鈉的試管中并充分搖勻，將3ml血注入不含抗凝劑的干燥試管中。置入4℃度冰箱放置2小時內(nèi)后在4℃下3000轉(zhuǎn)/分，離心15分鐘，分離出血漿和血清，-80℃低溫冰箱保存待測。

1.4 H2S測定方法

采用去蛋白分光光度法[3]。從-80℃凍存狀態(tài)下取出待測血清，立即于37℃水浴融化15min。吸0.1ml待測血清，放入盛有0.5ml 1%的醋酸鋅和2.5ml蒸餾水的試管內(nèi)，然后迅速加入0.5ml含20mmol/L的N，N-二甲基一對苯二胺硫酸鹽和7.2mol/L的HC1混合液，以及0.4ml含30mmol/L的FeCl3和1.2 mol/L的HCl混合液，混勻，室溫下孵育20min，最后加入1m110%的三氯醋酸除去血漿中的蛋白，離心，分離上清，用酶標(biāo)儀檢測其670nm下的吸光度。將稀釋成不同濃度的NaSH繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，血漿H2S濃度根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法和分析

所有數(shù)據(jù)均用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包錄入和處理，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ±S）形式描述。組間的比較采用單因素方差分析， P

2 結(jié)果

2.1 無PH組、輕度PH組及中重度PH組3組間血漿H2S含量比較

無PH組、輕度PH組及中重度PH組三組間血漿H2S含量分別為（54.30±5.34μmol/L）、（37.70±0.97μmol/L）、（27.44±2.85μmol/L），方差分析表明三者在統(tǒng)計學(xué)上有顯著差異（F=10.797，P

2.2 無PH組、輕度PH組及中重度PH組3組間血漿H2S含量兩兩比較

輕度PH組血漿H2S含量低于無PH組血漿H2S含量，有統(tǒng)計學(xué)差異（P

3 討論

H2S長期以來一直被認(rèn)為是一種有毒氣體，近10年來，隨著對機(jī)體內(nèi)源性氣體信號分子研究的深入，發(fā)現(xiàn)機(jī)體內(nèi)源性生成的H2S氣體能夠抑制平滑肌細(xì)胞增殖、發(fā)揮舒血管效應(yīng)，調(diào)節(jié)神經(jīng)、消化及心血管系統(tǒng)功能的作用。被認(rèn)為可能是繼NO、CO之后又一種新的氣體信號分子。H2S只由平滑細(xì)胞產(chǎn)生[4]。催化內(nèi)源性的H2S生成的酶主要是磷酸吡多醛5?-磷酸依賴性酶，包括胱硫醚-β-合成酶（cystathionine -β-sythase， CBS）、胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase， CSE）。神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要存在有CBS，而沒有CSE表達(dá)，而回腸、肝臟以及腎臟則同時存在有CBS和CSE，在主動脈、肺動脈、腸系膜動脈、尾動脈和門靜脈上有CSE表達(dá)而無CBS分布。因此，CBS和CSE的表達(dá)具有組織特異性。心血管組織內(nèi)源性H2S主要通過CSE的催化產(chǎn)生。內(nèi)源性的H2S主要是半胱氨酸代謝產(chǎn)生的，半胱氨酸是由蛋氨酸代謝生成，但同時還生成同型半胱氨酸，同型半胱氨酸在CSE催化作用下與絲氨酸結(jié)合，生成胱硫醚，后者進(jìn)一步分解為半胱氨酸和α-酮丁酸和H2S，提示內(nèi)源性H2S與同型半胱氨酸可能在調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)的作用中有一定的聯(lián)系。

石琳[5]等研究發(fā)現(xiàn)H2S可舒張大鼠血管平滑肌，降低動脈壓，并發(fā)現(xiàn)H2S具有抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖的作用[6]，通過動物實驗發(fā)現(xiàn)高肺血流量所致PH大鼠中，血漿H2S含量降低[7]；張春雨[8]等研究揭示，在大鼠低氧性PH時內(nèi)源性H2S體系下調(diào)；補(bǔ)充H2S對低氧誘導(dǎo)的PH和肺血管結(jié)構(gòu)重構(gòu)有明顯的緩解作用，提示內(nèi)源性H2S體系下調(diào)是低氧性PH及肺血管結(jié)構(gòu)重構(gòu)的重要機(jī)制之一。那么，在CHD合并PH患者體內(nèi)H2S是如何變化的呢？本文結(jié)果揭示，左向右分流型CHD患者血漿H2S含量均隨PH增高而降低，各組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義，結(jié)合相關(guān)性分析，在血漿H2S含量與PASP呈負(fù)相關(guān)，與石琳等[9]研究相符；發(fā)生上述變化的原因還不清楚，既往研究表明高肺血流可致肺動脈CSEmRNA表達(dá)下降[10]，因此推測在高肺血流所致PH形成過程中，CSE基因在轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)受抑制是H2S水平下降的可能原因。

從本研究可以看出，H2S參與了肺循環(huán)的生理及病理生理過程，對PH的發(fā)生，同時，測定血漿H2S也可作為判斷肺動脈高壓嚴(yán)重程度的一種實驗方法。

通過既往對于H2S的動物實驗研究，認(rèn)為在PH形成過程中，H2S可能通過以下方式調(diào)節(jié)肺血管結(jié)構(gòu)重構(gòu)：（1）H2S調(diào)節(jié)肺動脈平滑肌舒張；（2）H2S抑制肺血管平滑肌細(xì)胞增殖[11]；（3）H2S誘導(dǎo)肺動脈平滑肌細(xì)胞凋亡[12]；（4）H2S調(diào)控肺動脈壁膠原蛋白的降解[12]。在CHD繼發(fā)PH的過程中，由于內(nèi)源性H2S體系下調(diào)，影響其調(diào)節(jié)肺血管結(jié)構(gòu)重構(gòu)的功能，從而加劇PH形成。在動物實驗中，外源性補(bǔ)充NaSH可以升高肺組織中H2S含量，降低肺動脈壓力、緩解肺血管結(jié)構(gòu)重建[13]。那么外源性補(bǔ)充NaSH或H2S是否能緩解高肺血流性PH的形成？ 在已形成PH后補(bǔ)充H2S是否可以使已升高的肺動脈壓下降？以上問題為研究PH形成機(jī)制和治療提供新的思路， 還需要進(jìn)一步更大樣本的研究和探討。

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篇10

【關(guān)鍵詞】 動脈硬化 美托洛爾 卡維地洛 超氧化物歧化酶 丙二醛

［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the mechanism of carvedilol and metoprolol in different doses against arterosclerosis and compare their therapeutic effect. MethodsMale New Zealand white rabbits (n=40) were randomly and evenly pided into five groups: normal group， highfatdiet group， lowdosemetoprolol group， highdosemetoprolol group and cavedilol group. Ten weeks later， levels of serum superoxide dismutase (SOD) and malondiadehede (MDA) were measured. Expression of PCNA and NFkBp65 in aorta was detected by immunohistochemistry.ResultsCompared with the normal group， lower level of serum SOD and higher level of serum MDA were found in the highfatdiet group （F=8.40，41.22;q=3.81，11.27;P0.05）， but higher levels of serum SOD and lower levels of serum MDA were found in carvedilol group， compared with the other four groups （q=1.13－9.45， P

［KEY WORDS］arteriosclerosis; metoprolol; carvedilol; superoxide dismutase; malondiadehede

動脈粥樣硬化(AS)是許多心腦血管疾病的基礎(chǔ)性病理表現(xiàn)，也是中老年人常見疾病之一，嚴(yán)重威脅著人類的健康。氧化損傷是AS病變過程中核心環(huán)節(jié)，而平滑肌細(xì)胞的遷移增殖是斑塊形成、管腔狹窄的直接原因。β受體阻滯劑抗AS作用近年來逐步受到重視［1］。國外BCAPS和ELVA兩項研究初步揭示了β受體阻滯劑具有不依賴于其降血壓作用的抗AS效應(yīng)，但其作用機(jī)制尚待進(jìn)一步研究［2］。本實驗經(jīng)高脂飲食加免疫損傷血管內(nèi)皮制備家兔動脈粥樣硬化模型，通過給予卡維地洛和不同劑量美托洛爾，觀察其對AS病變過程中脂質(zhì)過氧化損傷、血管壁增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）以及核因子kBp65(NFkBp65)活化的影響，進(jìn)一步闡述其抗AS作用機(jī)制，并對二者的療效進(jìn)行對比，從而為臨床治療AS病人提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物

美托洛爾由阿斯利康制藥有限公司提供，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H32025390；卡維地洛由齊魯制藥有限公司提供，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字H20000100。

1.2 主要試劑

PCNA和NFkBp65及相關(guān)SP試劑盒購自武漢博士德生物工程研究所。

1.3 主要儀器

上海精密儀器廠721型分光光度計，美國Lambert公司石蠟切片機(jī)，日本Olympus公司顯微照相裝置，德國歐波同公司VIDAS 21圖像分析系統(tǒng)。

1.4 實驗動物分組

健康雄性新西蘭大耳白兔40只（購于華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實驗動物學(xué)部，合格證號：醫(yī)動字第19025號），體質(zhì)量（2.50±0.25）kg，分籠飼養(yǎng)。隨機(jī)分為正常組(A組)、高脂組(B組)、小劑量美托洛爾組(C組)、大劑量美托洛爾組(D組)以及卡維地洛組(E組)，每組8只。

1.5 AS模型的制備及藥物干預(yù)

家兔適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，除正常組外，其余4組均一次性經(jīng)耳緣靜脈注射牛血清清蛋白250 mg/kg，然后均行高脂飲食。高脂飼料配方為：1 g膽固醇+5 g豬油+94 g普通飼料。另外，小、大劑量美托洛爾組每日清晨分別行美托洛爾10、20 mg/kg灌胃，卡維地洛組每日清晨行卡維地洛10 mg/kg灌胃，正常組每天給以100 mg普通飼料喂養(yǎng)。各組連續(xù)喂養(yǎng)10周，飼養(yǎng)過程中小、大劑量美托洛爾組各有1只家兔死于腹瀉，高脂組有1只家兔死于過敏性休克。

1.6 血液標(biāo)本的采集及檢測

喂養(yǎng)10周后，各組動物均以250 g/L烏拉坦溶液4 mL/kg腹腔麻醉，沿胸骨正中線縱向剖開胸腔暴露心臟，直視下行右心室穿刺抽血。采用黃嘌呤氧化法檢測血清超氧化物歧化酶（SOD）的活性，硫代巴比妥酸比色法檢測丙二醛(MDA)的含量，各操作步驟嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.7 局部病理標(biāo)本的取材及檢測

高脂組、小劑量美托洛爾組、大劑量美托洛爾組及卡維地洛組動物均在主動脈弓病變處取材，大小約1.0 cm×0.5 cm；正常組亦在主動脈弓處取材，大小約1.0 cm×0.5 cm。標(biāo)本分別放入40 g/L中性多聚甲醛中固定，逐步脫水、透明、浸蠟、包埋制成蠟塊。每一標(biāo)本連續(xù)切片2張，分別用于PCNA及NFkBp65免疫組化檢測，各操作步驟嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.8 結(jié)果判斷

PCNA及NFkBp65陽性表達(dá)主要在細(xì)胞核內(nèi)，呈棕褐色。VIDAS 21計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)檢測一定面積陽性信號面積值和陽性信號平均吸光度，并計算二者乘積，即積分吸光度。測定時每一病理切片在高倍鏡(400倍)下隨機(jī)取10個視野，取其平均值。

1.9 統(tǒng)計學(xué)分析

統(tǒng)計結(jié)果采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行方差分析，組間比較采用q檢驗；變量間比較采用相關(guān)分析。

2 結(jié)

果

2.1 SOD和MDA水平檢測

與正常組比較，高脂組血清SOD活性明顯降低，MDA含量增加，差異有顯著意義（F=8.40、41.22，q=3.81、11.27，P0.05）；與高脂組及小、大劑量美托洛爾組比較，卡維地洛組血清SOD活性明顯升高，血清MDA含量明顯下降（q=1.13～9.45，P

2.2 免疫組化檢測

高脂組動物血管壁PCNA和NFkBp65的表達(dá)較正常組明顯增加（F=138.46、78.67，q=54.32、32.59，P

3 討

論

AS為一較為復(fù)雜的病理學(xué)過程，其核心機(jī)制為脂質(zhì)過氧化損傷血管壁，而平滑肌細(xì)胞的遷移增殖是斑塊形成、管腔狹窄的直接原因。以往的研究結(jié)果表明，交感神經(jīng)興奮可致AS，而β受體阻滯劑可通過其抑制交感神經(jīng)的作用發(fā)揮抗AS作用［3］。COMET研究顯示，卡維地洛降心率作用是美托洛爾的2倍，因此本實驗大劑量美托洛爾與卡維地洛采用了等效劑量。

3.1 美托洛爾與卡維地洛對脂質(zhì)過氧化的影響

SOD與MDA是反映AS進(jìn)展過程中氧化損傷的可靠指標(biāo)。SOD是體內(nèi)維持氧自由基產(chǎn)生與滅活的主要酶類，是清除氧自由基的“清道夫”；MDA是脂質(zhì)過氧化生成的一種醛基，AS時其在血液中含量直接反映出氧化損傷的程度。本實驗結(jié)果顯示，美托洛爾抗氧化作用較弱，而卡維地洛卻有明顯的抗氧化效應(yīng)。目前的研究表明，卡維地洛抗氧化作用的機(jī)制主要表現(xiàn)為：①抑制內(nèi)源性抗氧化劑維生素E（Vit E）和谷光苷肽的清除。②與細(xì)胞膜上的Fe3+螯合，從而阻止由DHF/Fe3+ADP和Fe/Vit C介導(dǎo)的氧自由基產(chǎn)生，以及由其所致的細(xì)胞膜上的LDL氧化［4］。③作用于膜磷脂，降低膜對自由基的親和性，并能鑲嵌在脂質(zhì)雙層膜較深的位點上，使咔唑基接近脂質(zhì)氧化的非飽和脂肪酸側(cè)鏈的位點，從而發(fā)揮其抗氧化作用。④卡維地洛的代謝產(chǎn)物（SB211475和SB209995）抗氧化作用是卡維地洛的30～80倍，是Vit E的1 000～10 000倍。

3.2 美托洛爾與卡維地洛對PCNA和NFkBp65表達(dá)的影響

PCNA即增殖細(xì)胞核抗原，又稱周期素，主要表達(dá)于處在增殖狀態(tài)的細(xì)胞。細(xì)胞周期受PCNA控制，它作為生長因子的感受器，與周期蛋白依賴性激酶結(jié)合為外源信號的整合器，誘導(dǎo)蛋白磷酸化，從而調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程［5，6］。NFkB是將信息從胞漿傳至胞核引起相應(yīng)基因表達(dá)的重要的轉(zhuǎn)錄因子，它是由多肽鏈P65和P50蛋白亞基構(gòu)成二聚體，本文即通過檢測NFkBp65以明確AS病變中NFkB的活化程度。靜止?fàn)顟B(tài)時NFkB位于細(xì)胞質(zhì)中，當(dāng)機(jī)體受到外界因素刺激時，在蛋白激酶核蛋白磷酸酶的作用下，抑制性kB(IkB)發(fā)生磷酸化，從NFkB二聚體上解離，NFkB得以激活，并移位入細(xì)胞核，與DNA鏈上調(diào)控眾多因子轉(zhuǎn)錄的啟動位點特異結(jié)合，啟動基因轉(zhuǎn)錄［7］。有研究表明，在有絲分裂原（AngⅡ、FGF等）誘發(fā)的平滑肌細(xì)胞增殖的過程中，存在蛋白激酶C（PKC）NFkB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，NFkB活化后可以結(jié)合在細(xì)胞cyclin D1的啟動子而激活其轉(zhuǎn)錄，從而介導(dǎo)平滑肌細(xì)胞的增殖［8］。本實驗結(jié)果顯示，NFkBp65與PCNA呈正相關(guān)，也說明了NFkB可介導(dǎo)平滑肌細(xì)胞的增殖。美托洛爾抑制NFkB活化可能與其β受體阻斷作用有關(guān)。有研究表明，交感神經(jīng)興奮可通過激活細(xì)胞內(nèi)PKC的途徑而發(fā)揮促平滑肌細(xì)胞增殖的作用［9］，而美托洛爾可通過阻斷β受體抑制交感神經(jīng)興奮，從而抑制PKCNFkB通路介導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞增殖?？ňS地洛抑制NFkB活化的作用，一方面可能與其阻斷α、β受體而抑制交感神經(jīng)興奮有關(guān)，另一方面其較強(qiáng)的抗氧化效應(yīng)也發(fā)揮了重要的作用。HINZ等［10］研究顯示，氧自由基可使IkB磷酸化降解而游離出NFkB進(jìn)入核內(nèi)，從而發(fā)揮其促平滑肌細(xì)胞增殖的作用。卡維地洛強(qiáng)烈的抗氧化作用，可清除AS病變過程中氧化損傷所釋放的氧自由基，進(jìn)而阻斷其NFkB的活化，由此可抑制平滑肌細(xì)胞增殖。

總之，美托洛爾與卡維地洛具有明顯的抗AS效應(yīng)，并且可通過抑制NFkBp65的活化而阻斷平滑肌細(xì)胞的增殖。美托洛爾抗AS效應(yīng)呈劑量依賴性，而卡維地洛因具有明顯的抗氧化作用其抗AS效應(yīng)優(yōu)于美托洛爾。

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