導(dǎo)語：如何才能寫好一篇醫(yī)學(xué)影像技術(shù)方向，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)主要課程

主要課程：主干學(xué)科：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)。主要課程：物理學(xué)、電子學(xué)基礎(chǔ)、計算機原理與接口、影像設(shè)備結(jié)構(gòu)與維修、醫(yī)學(xué)成像技術(shù)、攝影學(xué)、人體 解剖學(xué)、診斷學(xué)、內(nèi)科學(xué)、影像診斷學(xué)、介入放射學(xué)、影像物理、超聲診斷、放射診斷、核素診斷、核醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)影像解剖學(xué)、腫瘤放療治療學(xué)、B超診斷學(xué)。

主干學(xué)科：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)。

醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)就業(yè)方向

醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)培養(yǎng)適應(yīng)我國社會主義現(xiàn)代化建設(shè)和醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展需要的，德、智、體全面發(fā)展，具有基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)影像必備的基本理論知識和基本技能，從事臨床影像檢查、診斷與治療技術(shù)工作的高級技術(shù)應(yīng)用性專門人才。

醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)學(xué)生畢業(yè)后主要崗位為：b超醫(yī)生、軟件實施工程師、b超醫(yī)師、放射科醫(yī)生、放射科醫(yī)師、臨床醫(yī)學(xué) 臨床藥學(xué) 醫(yī)學(xué)影像學(xué)和護理學(xué)應(yīng)往屆畢業(yè)生、售前工程師、健管中心醫(yī)生、彩超醫(yī)生、放射科技師、物理師、超聲科等。

醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)培養(yǎng)要求

1.掌握基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、電子學(xué)的基本理論、基本知識;

2.掌握醫(yī)學(xué)影像學(xué)范疇內(nèi)各項技術(shù)(包括常規(guī)放射學(xué)、CT、核磁共振、DSA、超聲醫(yī)學(xué)、核醫(yī)學(xué)、介入醫(yī)學(xué)等)及計算機的基本理論和操作技能;

3.具有運用各種影像診斷技術(shù)進行疾病診斷的能力;

4.熟悉有關(guān)放射防護的方針、政策和方法，熟悉相關(guān)的醫(yī)學(xué)倫理學(xué);

5.了解醫(yī)學(xué)影像學(xué)各專業(yè)分支的理論前沿和發(fā)展動態(tài)。

篇2

【關(guān)鍵詞】醫(yī)學(xué)影像技術(shù) 開放式實驗

教學(xué)

【中圖分類號】G【文獻標(biāo)識碼】A

【文章編號】0450-9889（2013）07C-

0145-02

醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)是一門實踐性很強的專業(yè)，不僅要求學(xué)生掌握基礎(chǔ)理論知識，而且要求學(xué)生進行大量的實踐活動，以培養(yǎng)具有創(chuàng)新意識和實踐能力的專業(yè)人才。實驗教學(xué)對于提高學(xué)生的綜合素質(zhì)、培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新精神與實踐能力具有特殊的作用，對于激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣、促進學(xué)生將知識轉(zhuǎn)化為能力、逐步地完成由學(xué)習(xí)者到實踐者的轉(zhuǎn)化，具有不可替代的作用。本文以柳州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校為例，對醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)實施開放式實驗教學(xué)進行探析。

一、醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)實驗教學(xué)現(xiàn)狀

第一，醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)課程多，時間短。柳州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)學(xué)生在校學(xué)習(xí)時間為2年，學(xué)生既要學(xué)習(xí)醫(yī)學(xué)影像課程如影像診斷學(xué)、超聲診斷學(xué)等，又要學(xué)習(xí)影像技術(shù)課程如醫(yī)學(xué)影像檢查技術(shù)、影像電子學(xué)技術(shù)等，總共30多門課程。理論課學(xué)時多，實驗教學(xué)學(xué)時少，為了完成教學(xué)任務(wù)，教師基本上是采取“滿堂灌”的方式。第二，醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)實驗設(shè)備比較昂貴，專業(yè)性強，實驗室購置專業(yè)設(shè)備多為單臺套購置，如B超、X線機等，部分學(xué)生沒有操作機會。第三，高校不斷擴招，學(xué)生人數(shù)迅速增加，實驗設(shè)備的補充跟不上學(xué)生人數(shù)的增長，人均實驗面積少。在教師進行實驗指導(dǎo)時，出現(xiàn)因人數(shù)多造成實驗室擁擠，導(dǎo)致部分學(xué)生無法看清實驗演示的現(xiàn)象。

二、實施開放式實驗教學(xué)的必要性、作用與意義

以前，柳州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校學(xué)生實驗課的時間由教務(wù)處統(tǒng)一安排，以專業(yè)劃分的自然班為單位進入實驗室，實驗內(nèi)容、實驗項目統(tǒng)一確定，學(xué)生沒有太多的選擇，按照實驗要求和步驟完成，缺少發(fā)揮的空間，不能調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性，更無法激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)造性?！督逃康炔块T關(guān)于進一步加強高校實踐育人工作的若干意見》明確提出實踐教學(xué)方法改革是推動實踐教學(xué)改革和人才培養(yǎng)模式改革的關(guān)鍵。醫(yī)學(xué)影像技術(shù)是技能性很強的專業(yè)，采用傳統(tǒng)的實踐教學(xué)模式無法適應(yīng)人才培養(yǎng)的需要，因此，必須實施開放式的實驗教學(xué)。實施開放式實驗教學(xué)具有以下作用與意義。第一，有利于提高學(xué)生的實踐能力，培養(yǎng)創(chuàng)造性人才。實施開放式實驗教學(xué)，學(xué)生可以利用課余時間選擇感興趣的實驗內(nèi)容、課題或設(shè)想進行驗證、探索。它將豐富和更新教學(xué)內(nèi)容，不僅對提高教學(xué)質(zhì)量，加強教學(xué)效果具有重要意義，而且能夠進一步調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性和主動性，活躍學(xué)生的思維，擴大學(xué)生的視野，逐步提高學(xué)生對實驗研究中各種現(xiàn)象的觀察、分析能力和獨立思考、獨立解決問題的能力，啟發(fā)了學(xué)生的創(chuàng)新意識，有利于培養(yǎng)學(xué)生的獨立工作能力、創(chuàng)新能力，有利于培養(yǎng)創(chuàng)造性的人才。第二，對師資建設(shè)有積極的促進作用。學(xué)生選擇實驗內(nèi)容的空間越大，在設(shè)計實驗方案、進行開放實驗中就會發(fā)現(xiàn)更多更深更廣泛的問題。這就要求實驗師資隊伍（教師、實驗技術(shù)人員）不斷學(xué)習(xí)掌握更多的新知識，經(jīng)常參與實驗課題的開發(fā)研究工作，調(diào)整教學(xué)方法。實驗教學(xué)向分層次、多元化教學(xué)發(fā)展，向能力素質(zhì)教育轉(zhuǎn)變。第三，有利于提高現(xiàn)有設(shè)備的使用效率。開放式實驗教學(xué)必然要求實驗室開放，開放時間長、內(nèi)容多。有些設(shè)備不受空間、時間和課程的限制，這將會極大地提高現(xiàn)有設(shè)備的利用效率。在目前儀器設(shè)備不足的情況下，應(yīng)確保實驗教學(xué)質(zhì)量，發(fā)掘?qū)嶒炇业臐摿Γ⑴涮椎墓芾碇贫?，真正地實現(xiàn)開放使用和資源共享。

三、開放式實驗教學(xué)的實施

（一）制定實驗開放管理制度。為了更好地推動開放式實驗教學(xué)的開展，確保開放實驗教學(xué)順利進行，必須從學(xué)校實際出發(fā)，以滿足《高等教育法》的具體要求，制定切實可行的管理規(guī)章制度，規(guī)范開放式實驗教學(xué)的管理。一是健全實訓(xùn)中心管理制度。目前柳州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校已成立醫(yī)學(xué)影像實訓(xùn)中心，實行實訓(xùn)中心主任負(fù)責(zé)制，每個中心有多名實驗員進行管理。二是制定開放式實驗教學(xué)管理文件。制定《開放實驗教學(xué)管理暫行辦法》、《開放實驗教學(xué)的儀器設(shè)備管理辦法》、《開放實驗室安全制度》、《開放實驗室預(yù)約辦法》、《實驗教學(xué)的儀器設(shè)備管理制度》。三是制定支持開放式實驗教學(xué)的激勵政策。要確保開放實驗教學(xué)順利進行，必須調(diào)動實驗人員的積極性，按實驗教學(xué)的工作量計算課酬。對實驗室管理實行流值班。

（二）修改和補充實驗教學(xué)內(nèi)容，改革實驗教學(xué)項目，提高創(chuàng)新性項目的比重。目前醫(yī)學(xué)影像技術(shù)專業(yè)的實驗項目絕大部分是專業(yè)基礎(chǔ)性實驗，包括演示性實驗、驗證性實驗、基本操作技術(shù)訓(xùn)練等，綜合性和設(shè)計性的項目較少，實驗項目缺乏創(chuàng)新性，學(xué)生實驗的積極性不能被有效激發(fā)。針對這種狀況，在實驗教學(xué)內(nèi)容的安排方面，盡量做到在基礎(chǔ)實驗上，改革實驗教學(xué)項目，開放實驗教學(xué)的內(nèi)容應(yīng)該比常規(guī)實驗教學(xué)的內(nèi)容更新穎、層次更高、形式更靈活，提高創(chuàng)新性項目比重，鼓勵學(xué)生自己設(shè)計實驗，逐步提高實驗教學(xué)層次。例如，在醫(yī)學(xué)物理課程實驗測定液體粘滯系數(shù)中，按照實驗要求只用掌握奧氏粘度計測定液體粘滯系數(shù)的原理和方法。這個實驗屬于專業(yè)基礎(chǔ)性實驗，實驗的步驟也很簡單，學(xué)生很容易操作，學(xué)生實驗積極性不高。為了有效激發(fā)學(xué)生實驗的積極性，柳州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校增大了難度。將這個實驗擴展為掌握奧氏粘度計和沉降法測定液體粘滯系數(shù)的原理和方法并比較兩種測量法的優(yōu)缺點，分析誤差來源，探討如何進行誤差處理。學(xué)生通過實驗加深了對理論知識的理解，并把基本理論知識運用到實驗中，強化了專業(yè)知識理論的理解和實驗基礎(chǔ)。在完成這些實驗的基礎(chǔ)上，柳州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校進一步加大實驗的難度，即討論液體粘度的大小與溫度的關(guān)系。粘度的大小取決于液體的性質(zhì)與溫度，溫度升高，粘度將迅速減小。測定液體在不同溫度的粘度有很大的實際意義。讓學(xué)生繼續(xù)研究變溫粘滯系數(shù)測量與分析。實驗室提供例蓖麻油，在室溫附近溫度改變，粘滯系數(shù)改變情況下分析，欲準(zhǔn)確測量液體的粘度，必須精確控制液體溫度。通過修改和補充實驗教學(xué)內(nèi)容，改革實驗教學(xué)項目，激發(fā)學(xué)生實驗的積極性。

（三）與學(xué)生畢業(yè)論文相結(jié)合，讓學(xué)生進行設(shè)計研究型實驗。由教師根據(jù)學(xué)科最新發(fā)展動態(tài)，擬定畢業(yè)論文題目，學(xué)生根據(jù)自身的能力選定畢業(yè)論文題目，進行設(shè)計研究型實驗。設(shè)計研究型實驗主要對高年級學(xué)生開放，要求學(xué)生必須具備一定的專業(yè)知識。學(xué)生在教師的指導(dǎo)下，組建課題小組，查閱相關(guān)資料，制訂實驗方案；學(xué)生利用學(xué)校實驗室開展科研實踐，由學(xué)生處理實驗數(shù)據(jù)，分析實驗結(jié)果，撰寫實驗報告，形成畢業(yè)論文。每年向高年級學(xué)生公布畢業(yè)論文題目，讓學(xué)生選擇。柳州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校曾經(jīng)公布的題目有：計算機輔助診斷超聲內(nèi)鏡圖像在胰腺癌診斷中的應(yīng)用、兒童肱骨髁上骨折解剖影像學(xué)研究及相關(guān)治療的系統(tǒng)評價、頸椎融合與非融合術(shù)后鄰近節(jié)段退變的臨床研究、基于CT圖像的腎上腺三維重構(gòu)研究、腰椎穩(wěn)定性與腰背肌退變相關(guān)性的研究、股骨頭壞死DSA血管形態(tài)和平片骨質(zhì)硬化的相關(guān)性、雙源CT評價索拉非尼影響兔VX2肝癌血管生成的實驗研究、小兒病毒性腦炎頭顱CT與MRI的比較、超聲彈性成像評價肝臟射頻消融范圍的研究、腦白質(zhì)疏松癥MR圖像病變區(qū)域分割方法研究及量化分析，等等，共有30多項。此外，學(xué)生可以自己開發(fā)一些研究項目進行設(shè)計研究。這種方式讓學(xué)生帶著任務(wù)去學(xué)習(xí)，學(xué)生有一定的壓力，同時課題是由學(xué)生自己選擇，可以激發(fā)學(xué)生的興趣，調(diào)動學(xué)生的積極性，使學(xué)生變被動學(xué)習(xí)為主動學(xué)習(xí)，這對培養(yǎng)具有較高科研能力和創(chuàng)新思維能力的高素質(zhì)人才具有促進作用。

【參考文獻】

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[2]陳華，劉官元.大學(xué)物理開放式實驗教學(xué)的實踐與探索[J].中國冶金教育，2009（5）

[3]劉虹.論開放式實驗教學(xué)對培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新能力的重要性[J].長春工業(yè)大學(xué)學(xué)報（高教研究版），2012（1）

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關(guān)鍵詞：子宮肌瘤益氣活血方血液流變病理組織形態(tài)苯甲酸雌二醇黃體酮

abstract Object：To investigate effects of Yiqihuoxue（YQHX） on the experimental model of uterine leiomyoma in rat. Methods：70 Wistar unpregnancy female rats were randomly divided into 3 groups： model group， positive control group， therapy group.Estradiol benzoate and progesterone were administrated by intramuscular injection once a day to establish rat hysteromyma model for a week.Then Yiqihuoxue（YQHX） of different concentrations（40g/kg，10g/kg） and fuizhi fuling pellet（GFP） as positive medicine（0.465g/kg） were administrated to these rats for five weeks.After five weeks，these rats were killed to determine blood rheology index and uterus modulus.Patho-histomorphology of uterus was also detected. Results：Yiqihuoxue（YQHX） restrained the excess proliferation of the smooth muscle of uterus and suppressed uterus dilation of rat hysteromyma models.YQHX also improve the coagulatant state of blood. Conclusion：Yiqihuoxue（YQHX） has preventive and therapeutic function to hysteromyoma.

Keywords： Hysteromyoma，Yiqihuoxue（YQHX），Hemorrheology，pathohistology，benzestrofol，flavolutan

中圖分類號：R737.33 文獻標(biāo)示碼：B 文章編號：1004-7484（2010）12-0002-04

子宮肌瘤，又稱為子宮平滑肌瘤，是女性生殖系統(tǒng)最常見的良性腫瘤，多見于30～50歲婦女，有報道患病率可高達70%～80%[1]。目前子宮肌瘤病因和發(fā)病機制尚不清楚，已有研究結(jié)果顯示，雌激素水平過高是促進子宮肌瘤生長的主要因素。臨床對于有生育要求或不宜手術(shù)的患者，常用促性腺激素釋放激素（GnRh-α）、米非司酮、三苯氧胺等藥物給予治療。這些藥物有一定療效，但副作用較多。

中醫(yī)藥在治療子宮肌瘤上有著獨特的理論和方法。益氣活血方由黃芪、水蛭、黨參、莪術(shù)、甘草等組成，能夠明顯改善子宮肌瘤癥狀，遏制肌瘤生長或使其消散，表現(xiàn)出非手術(shù)治療的優(yōu)勢。本文在實驗動物上進一步觀察其對子宮肌瘤的治療作用，為該藥的開發(fā)應(yīng)用和深入探討其作用機制奠定基礎(chǔ)

1材料與方法

1.1藥物及試劑

益氣活血方：南京中醫(yī)藥大學(xué)藥物深加工研究中心煎制。桂枝茯苓膠囊，批號：060710，江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。苯甲酸雌二醇注射液，批號：060302，上海通用藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。黃體酮注射液，批號：060813，浙江仙琚制藥股份有限公司生產(chǎn)。檸檬酸鈉，批號：20040228，上海實意化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)。

1.2動物及造模

Wistar大鼠，雌性，180～220g，由南京中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號：SYXK[蘇]2002-0123。

動物隨機分為5組，即對照組、模型對照組、陽性對照組、益氣活血方高劑量組、益氣活血方低劑量組，每組10只。除對照組外，其余各組肌肉注射苯甲酸雌二醇0.2mg/只，1次/日，共5周。第4周起同時肌肉注射黃體酮0.9mg/只，1次/日，共2周。對照組肌肉注射相同劑量的高溫滅菌花生油，1次/日，共5周。

于造模第2周起同時灌胃給藥。益氣活血方高低、劑量組分別為10g/kg/d、2g/kg/d；陽性藥桂枝茯苓膠囊0.465g/kg/d，對照組、模型對照組灌胃給予相同體積的蒸餾水，均灌胃給藥，給藥體積10ml/kg，連續(xù)給藥4周。

1.3觀察指標(biāo)

各組大鼠于末次給藥后禁食8h，稱重后頸總動脈取血，進行血液流變學(xué)檢測，LG-R-80血液粘度儀測定不同切變率下的血液粘度。

頸椎脫臼處死，取子宮，觀察子宮大體形態(tài)、色澤、質(zhì)地等，稱重并計算子宮系數(shù)（子宮系數(shù) = 子宮重量（g）/大鼠體重（g）），10%福爾馬林固定，常規(guī)取材，脫水，石蠟包埋，制片（4μm厚），HE染色，在光學(xué)顯微鏡下閱片，進行組織病理學(xué)觀察，根據(jù)病變程度不同，進行分級。分組標(biāo)準(zhǔn)為“-”：子宮肌層未見增厚，未見有炎性浸潤，結(jié)構(gòu)正常?！?”：子宮肌層增厚不明顯，輕度炎性浸潤?！?+”：子宮肌層輕度增厚，炎細(xì)胞浸潤較明顯?！?++”：子宮肌層明顯增厚，炎細(xì)胞浸潤較重。

實驗結(jié)果應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。根據(jù)觀察指標(biāo)及數(shù)據(jù)的不同，計量資料以±S表示，采用獨立樣本的t檢驗，等級分組資料采用秩和檢驗。

2結(jié)果

2.1益氣活血方對大鼠子宮系數(shù)的影響

大鼠處死后解剖發(fā)現(xiàn)，對照組大鼠的子宮顏色鮮亮，宮體纖細(xì)。其他各組大鼠（雌孕激素負(fù)荷造模的大鼠）子宮顏色偏淡，較無光澤，未見明顯結(jié)節(jié)或腫塊，但宮體明顯增粗。

表1益氣活血方對子宮肌瘤模型大鼠子宮重量及子宮系數(shù)的影響

組別 大鼠體重（g） 子宮重量（×10-2g） 子宮系數(shù)（×10-3）

對照組 260.4±27.5 62.6±20.4* 2.43±1.04**

模型組 232.7±23.1 95.6±40.7 4.72±1.90

陽性藥組 233.0±15.6 67.4±26.0 3.18±0.94*

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高劑量組 236.6±20.4 71. 5±26.3 3.11±1.11*

低劑量組 226.3±28.2 80.1±27.8 3.79±1.18

與模型組比較*：P

由表1可見，與對照組比較，模型組子宮重量和子宮系數(shù)明顯增加（P＜0.01）。與模型組比較，陽性藥組及益氣活血方高中劑量組對子宮重量影響無明顯差異（P>0.01），陽性藥組、高劑量組對子宮系數(shù)的影響有統(tǒng)計學(xué)差異（P

2.2益氣活血方對子宮子宮肌瘤模型大鼠子宮病理組織學(xué)的影響

如表2所示，模型組動物子宮增生明顯，與對照組比較，差異顯著（P

表2益氣活血方對子宮肌瘤模型大鼠子宮組織病理學(xué)的影響

組別 例數(shù)

（只） － + ++ +++ P值

（與模型組比較）

對照組 10 7 3 0 0

模型組 12 0 2 3 7 --

陽性藥組 13 0 6 5 2

高劑量組 13 0 4 3 6

低劑量組 12 0 5 2 5 >0.05

2.3血液流變學(xué)檢測

頸總動脈取血后，抗凝后血液經(jīng)江蘇省中醫(yī)院藥理研究室進行血液流變學(xué)檢測，送檢過程中模型對照組2例因血液凝固未能檢測，其余結(jié)果見表3-3、表3-4。

與對照組比較，模型組相在各切變率下的全血粘度值及血漿粘度值方面均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.01），顯示模型組大鼠的血液處于高凝狀態(tài)。與模型組比較，益氣活血方高劑量組在切變率200（1/S）、30（1/S）、1（1/S）下的全血粘度值方面的差異有統(tǒng)計學(xué)意義，表明益氣活血方能夠改善血凝狀態(tài)。

表3益氣活血方對血液流變學(xué)的影響（±S）

組 別 例數(shù)

（只） 全血粘度 血漿粘度

切變率100

切變率200 切變率 30 切變率 5 切變率 1

對照組 10 3.35±0.60* 4.12±0.83* 6.27±1.55* 14.23±3.74* 1.26±0.06*

模型組 10 4.49±0.57 5.76±0.86 9.42±1.87 19.00±3.20 1.42±0.09

陽性藥組 13 4.29±0.55 5.41±0.81 8.56±1.70 18.50±4.24 1.35±0.10

高劑量組 13 3.93±0.40* 5.00±0.65* 8.03±1.64* 13.08±2.54* 1.35±0.11

低劑量組 12 4.08±0.45 5.12±0.70 8.42±1.65 18.29±3.83 1.42±0.15

與模型組比較*：P

3討論

子宮肌瘤屬于中醫(yī)“瘕”的范疇，而“血瘀”是自發(fā)現(xiàn)本病以來最常用的一種病因病機理論。益氣活血方由黃芪、水蛭、黨參、莪術(shù)、茜草、甘草等組成，全方性味平和，補中有行，行中有散，攻補兼施，標(biāo)本兼顧，氣血同調(diào)，從而收到益氣固本，活血化瘀，消散結(jié)之功。

近年來，藥理研究表明，黃芪主要含有甙類、多糖、氨基酸及微量元素。黃芪能增強網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，增強機體免疫，促進機體的代謝，還具有鎮(zhèn)靜、安定和明顯的止痛作用[4]，用于本方有利于增強機體的免疫能力，起到“扶正”的作用。活血化瘀藥物三棱、莪術(shù)、茜草等具有改善微循環(huán)，增加網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吸附能力和白細(xì)胞的吞噬能力，促進炎癥滲出物的吸收，促進血腫包快的消散和吸收，通過調(diào)節(jié)子宮平滑肌的收縮功能，促進蛻膜、瘀血及其它殘留組織的完全排出，起到調(diào)經(jīng)、止血、止痛、消腫等作用，且具有抗雌激素樣作用，抑制子宮平滑肌的增生。本方運用大量活血化瘀藥物，正是利用它們的上述功效，不僅有利于促進體內(nèi)包塊的消散；還通過調(diào)節(jié)子宮平滑肌的收縮功能，促進體內(nèi)“瘀滯”的排出；利用它們的雌激素拮抗作用，從根本上抑制了子宮平滑肌的增生，從而遏制了肌瘤的發(fā)生和發(fā)展。因此，本方以“益氣化瘀”為本，選用益氣健脾、化瘀消的藥物，是有堅實的現(xiàn)代藥理學(xué)基礎(chǔ)的。

Fujii[5]等報道，用外源性雌激素可誘導(dǎo)產(chǎn)生腹膜播散性平滑肌瘤樣病變，并有病理切片予以確認(rèn)。本研究中，我們采用“雌孕激素”造模方法針對靶器官“子宮”進行造模，發(fā)現(xiàn)模型大鼠的子宮肌層確實有不同程度的增生，與已有的報道一致。已有大量文獻報道，桂枝茯苓膠囊對子宮肌瘤有確切的療效[6][7][8]，我們將其作為陽性藥物，與實驗受試藥益氣活血方不同劑量進行對比試驗，通過對模型大鼠的病理改變情況、子宮體積、子宮重量、子宮系數(shù)的改變情況進行對比，發(fā)現(xiàn)高劑量的益氣活血方能夠拮抗子宮肌層的瘤樣增生（P

祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為，子宮肌瘤的形成與血液運行不暢、瘀血內(nèi)阻有關(guān)，臨床辨證也通常將“瘀血內(nèi)阻”作為本病的必然發(fā)病機理之一?，F(xiàn)代研究表明，中醫(yī)學(xué)血瘀證的實質(zhì)是血液處于濃、粘、凝、聚的高凝狀態(tài)，從而使全身或局部血液循環(huán)發(fā)生障礙而產(chǎn)生一系列疾病，這即是血瘀證產(chǎn)生的病理基礎(chǔ)。而血液流變學(xué)是一門研究血液及其組成成分流動變形規(guī)律的科學(xué)，是衡量血瘀證程度的一項重要指標(biāo)，因此，血液流變可作為血瘀證病理變化的一個客觀指標(biāo)，并可作為反應(yīng)各種藥物活血化瘀療效、改善血液循環(huán)障礙、增加血流量的一個評定指標(biāo)[9][10]。已有資料表明，子宮肌瘤患者血液流變性已呈高凝狀態(tài)，子宮肌瘤患者存在高粘滯血癥[11]。本研究顯示，模型組大鼠血液的全血高切變率和低切變率的粘度值、血漿粘度值與空白組相比均有顯著差異（P

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篇4

【關(guān)鍵詞】  直腸腫瘤;放射治療;血管內(nèi)皮生長因子;微血管密度

the influence of chemotherapy and radiotherapy before operation on the colorectal tumor angiogenesis and its clinical significance

    wang yongbing, miao xudong, huang sheng, et al. pudong new area people’s hospital, shanghai 201200, china

    [abstract]  objective  to research the influence of chemotherapy and radiotherapy before operation on the microvessel density (mvd) and vascular endothelial growth factor (vegf) gene expression of colorectal cancer. methods  seventyeight patients who suffered from lower colorectal cancer were divided into 2 groups randomly. patients in the therapy group received radiotherapy for 40 grays as well as folfox4 chemotherapy for twice, then operation therapy 46 weeks after the end of radiotherapy. patients in the control group received operation directly after admission. all the specimen obtained from operation underwent the routine pathologic study as well as gene expression analysis of vegf and mvd in tumor tissues. a semiquantitative method was used to score the gene expression of vegf, and the weidner method was used to count the mvd. results  scores of gene expression of vegf in the therapy group were 1.05 0.35, while it were 1.91 0.78 in the control group(p＜0.01). counts of mvd in the therapy group were 12.6±3.45, and 23.8±7.67 in the control group(p＜0.00). the rate of tumor shrinking, resection and anus sparing of the therapy group were all significantly higher than those of the control group. conclusion  chemotherapy and radiotherapy before operation can repress the gene expression of vegf and mvd in tumor tissues, and had downstaging effect before operation.

    [key words]    colorectal tumor; radiation therapy; vascular endothelial growth factor (vegf); microvessel density (mvd)

    局部浸潤和復(fù)發(fā)是影響直腸癌手術(shù)切除和預(yù)后的關(guān)鍵因素，微血管生成在腫瘤的浸潤和復(fù)發(fā)中起重要作用，如何抑制腫瘤微血管生成，提高直腸癌手術(shù)切除和減少復(fù)發(fā)是近年研究的熱點[1]。本研究對照分析術(shù)前放化療對直腸腫瘤血管生長因子和微血管密度的改變，發(fā)現(xiàn)術(shù)前放化療對其有積極的影響，現(xiàn)報告如下。

    1  資料和方法

    1.1  一般資料  2004年1月至2007年6月南通大學(xué)第二附屬醫(yī)院和上海市第八人民醫(yī)院收治直腸癌患者78例，男45例，女35例，年齡42～75歲，平均(2.3±7.82)歲。腸鏡病理確診為直腸癌（距3～7 cm），術(shù)前hildebrandt 和feifel法超聲分期為t3、t4期，無糖尿病和嚴(yán)重高血壓（可能影響微血管）。隨機將本組病例分為兩組：治療組（術(shù)前放化療組）37例，和對照組（直接手術(shù)組）41例。兩組的年齡、病理、超聲分期無統(tǒng)計學(xué)差異。

    1.2  標(biāo)本獲得  治療組病例入院后先予放療，放療設(shè)備為美國ge公司醫(yī)用電子直線加速器，10mvx射線，采用前后對穿固定野照射。照射范圍上界為腰5骶1，下界為閉孔下緣，兩側(cè)為髂外1 cm，前后兩野對穿照射；劑量：2 gy/次，5次/周，連續(xù)4周，總計量為40 gy，同時folfox4方案化療2次，放療結(jié)束后4～6周手術(shù)。對照組入院后檢查無手術(shù)禁忌證即行手術(shù)。兩組手術(shù)方式視術(shù)中情況行doxin、miles、park、hatman或腸造瘺，獲得的病理標(biāo)本在常規(guī)石蠟切片的同時做vegf和mvd免疫組化測定。

    1.3  實驗方法及步驟

    1.3.1  實驗試劑  vegf單克隆抗體、 viii因子相關(guān)抗原(fviiiag)多克隆抗體及鏈霉菌抗生物素蛋白－過氧化物酶免疫組織染色試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)公司。

    1.3.2  實驗步驟  取以上病例術(shù)后根治標(biāo)本，經(jīng)10%福爾馬林固定，在腫瘤深處和邊緣切取標(biāo)本進行常規(guī)石蠟包埋，5 μg 厚連續(xù)切片，分別進行he染色及免疫組化染色。切片經(jīng)二甲苯脫臘后，酒精梯度水化，入0.3%h2o2 30 min阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性，然后入0.01 mmol/l、ph為6.5的94℃枸櫞酸鹽緩沖液15 min以暴露修復(fù)抗原，降至室溫后，羊血清封閉10 min以封閉非特異性抗原，分別滴加鼠抗人ⅷ因子相關(guān)多克隆抗體（1∶100稀釋），鼠抗人vegf單克隆抗體（1∶200稀釋）后4℃冰箱過夜，次日洗去一抗后，再依次加入二抗、三抗工作液各37℃孵育1 h，洗去后經(jīng)dab工作液顯色10 min，蘇木素復(fù)染30 s,脫水，透明，封片。實驗嚴(yán)格按說明書操作，用pbs代替一抗作陰性對照，用已知陽性切片作陽性對照。

    1.3.3  結(jié)果判定  vegf的判斷使用半定量計分方法[2]，vegf表達陽性為胞質(zhì)染成黃色顆粒，以細(xì)胞陽性百分率得分之和進行判定，隨機選擇5個高倍視野（×400）進行判斷:無染色計為0分，淺黃色計為1分，棕黃色計為2分，黃褐色計為3分，并統(tǒng)計表達陽性率。微血管計數(shù)采用weidner[3]計分法：①fviiiag多克隆抗體陽性以血管內(nèi)皮細(xì)胞呈棕色或棕黃色為標(biāo)準(zhǔn)。②切片在100倍光鏡下挑選微血管分布密度最高區(qū)域，在200倍光鏡下計數(shù)5個不重復(fù)視野中被cd34染成棕黃色的微血管數(shù)，取其平均值作為mvd，每個與鄰近微血管明顯分離的陽性染色的血管內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮細(xì)胞簇都視為獨立的微血管，只要結(jié)構(gòu)不相連，其分支結(jié)構(gòu)也計作一個血管計數(shù)，而直徑大于8個紅細(xì)胞的血管，有厚的平滑肌的血管和硬化區(qū)的血管不在計數(shù)范圍內(nèi)。

    1.4  統(tǒng)計學(xué)處理  采用spss12.0專用統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，率的比較采用χ2檢驗，評價vegf、mvd與臨床資料的關(guān)系時采用獨立樣本t檢驗，相關(guān)性分析采用 spearman相關(guān)分析,統(tǒng)計結(jié)果以p＜0.05為差異有顯著性。

    1.5  結(jié)果

    1.5.1  直腸癌組織形態(tài)變化  放化療后直腸癌組織大體檢查表現(xiàn)為癌灶表面較光滑干凈，癌組織質(zhì)地較硬，纖維化明顯，與周圍組織有一個比較明顯的界線，光鏡下可見癌組織大部分為纖維組織，可見壞死癌細(xì)胞，癌細(xì)胞數(shù)明顯較對照組少，殘存癌細(xì)胞散在或巢狀，小片狀分布在纖維組織中。治療反應(yīng)i級為壞死或癌細(xì)胞消失超過整個病灶的1/3，共5例；ii級反應(yīng)為壞死或癌細(xì)胞消失超過整個病灶的2/3，但仍有存活的癌細(xì)胞，共29例；iii級反應(yīng)為整個病灶全部壞死和/或被纖維組織取代，伴或不伴肉芽組織形成，沒有存活的癌細(xì)胞，共3例。

    1.5.2  直腸癌組織中微血管形態(tài)和密度變化  直腸癌組織中微血管染色呈棕紅色，絕大部分為管腔樣結(jié)構(gòu)，治療組和對照組癌組織中微血管形態(tài)明顯不同，治療組微血管管徑大小較一致，管腔明顯較對照組小，微血管數(shù)量較少，mvd值治療組為12.6±3.45，對照組23.8±7.67，p＜0.01。見表1和圖1。表1  手術(shù)后兩組mvd比較比較

    1.5.3  直腸癌細(xì)胞vegf表達的情況  vegf在細(xì)胞漿和細(xì)胞膜中表達，治療組染色較淡呈棕黃色，表達陽性率為(27±7.3)%，對照組呈棕紅色，表達陽性率為(57±18.7)%；分值治療組1.05±0.35,對照組1.91±0.78, p＜0.01。見表2和圖2。表2  術(shù)后兩組vegf表達值比較（±s）

    1.5.4  手術(shù)結(jié)果  治療組根治性手術(shù)率為94.59%（35/37），對照組為78.04%(32/41)，p＜0.05；治療組保率為86.48%(32/37)，對照組為68.29%，p＜0.01。經(jīng)1～3年隨訪，手術(shù)后1年治療組局部復(fù)發(fā)率為5.43%(2/37),對照組為12.19%(5/41), p＜0.01。生存率兩組無顯著性差異(91.89% v.s.87.80%,p＞0.05)。

    2  討  論

    2.1  vegf的臨床意義  腫瘤血管的形成受多種血管生長因子所調(diào)節(jié)，vegf被認(rèn)為是最重要的因子。vegf是一種相對分子質(zhì)量為34～46 ku的二聚體糖蛋白，它有4種分子變異，分別含121、165、189和206個氨基酸，其中前兩者易達靶細(xì)胞，并表達于多種組織中[3]。vegf可由各種腫瘤細(xì)胞和某些正常細(xì)胞產(chǎn)生，并可通過旁分泌方式與位于血管內(nèi)皮細(xì)胞或某些腫瘤細(xì)胞表面的vegf受體（flt1和kdr/dflt1）特異性結(jié)合，直接刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖，改變內(nèi)皮細(xì)胞基因的活化方式，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達蛋白網(wǎng)的水解酶，間質(zhì)膠原酶和組織因子，在原位誘導(dǎo)血管的生成，并且有利于癌細(xì)胞脫落進入血管或向鄰近纖維蛋白和結(jié)締組織基質(zhì)擴散，為腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移創(chuàng)造條件，因此，vegf對腫瘤新生血管生成和間質(zhì)產(chǎn)生具有重要意義，特別是實體瘤的關(guān)系密切。

    2.2  mvd的臨床意義  腫瘤細(xì)胞的快速增殖能力依賴于微血管網(wǎng)絡(luò)的不斷擴張，腫瘤血管來源有兩種，一種為宿主血管腫瘤化，即來自正常組織延伸的微血管或殘存腫瘤內(nèi)的宿主血管逐漸變?yōu)槟[瘤血管；另一種為腫瘤新生血管，即由腫瘤本身產(chǎn)生細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)瘤體生成血管。伴隨著血管發(fā)生，癌灶生長迅速，腫瘤新生血管缺乏或僅有基底膜片段，新生血管為腫瘤細(xì)胞脫落進入血循環(huán)提供了開放門戶，腫瘤血管密度越大癌細(xì)胞脫落進入血循環(huán)的概率越大，血管生成與直腸癌浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，許多研究表明血管生成的定量指標(biāo)mvd能反映直腸癌血管尤其是新生血管的生成情況，可作為腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移及預(yù)后的獨立指標(biāo)[4,5]。

    2.3  放化療對mvd及vegf的影響  術(shù)前放化療是直腸癌主要輔助治療手段之一，放射線可直接作用于腫瘤細(xì)胞及周圍新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的dna分子鏈，導(dǎo)致dna鏈的斷裂，并可增加組織細(xì)胞的自由基產(chǎn)生，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞和新生血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞和新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，使腫瘤的mvd密度明顯下降，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞缺血壞死。另一方面，由于放療使腫瘤細(xì)胞凋亡，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的vegf明顯減少，使腫瘤組織的vegf表達明顯下降，反過來使腫瘤的微血管形成速度大大下降，減少腫瘤細(xì)胞的血供，延緩腫瘤生長，加速腫瘤凋亡。化療本身有相同作用，并有放射增敏作用，兩者同時使用，產(chǎn)生疊加作用，并可抑制全身轉(zhuǎn)移。本課題中放療組mvd值顯著低于對照組（p＜0.01），且微血管形態(tài)也有明顯差異，治療組微血管管徑趨向一致，管腔明顯較對照組小。血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖能力較強，因而對放射線敏感性較強，容易被放射線殺滅，術(shù)前放療使癌組織內(nèi)微血管減少，降低癌組織血供，這對減少術(shù)中癌細(xì)胞播散也具有重要意義。本研究發(fā)現(xiàn)放射治療后癌組織中vegf表達的程度和百分比均較直接手術(shù)組明顯下降(p＜0.01)。因此，我們認(rèn)為放射治療后癌組織中微血管的變化一方面與放射線直接造成血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷有關(guān)，另一方面與vegf表達明顯下降、使腫瘤微血管內(nèi)皮細(xì)胞失去vegf刺激有關(guān)。從手術(shù)方式和術(shù)后初步隨訪結(jié)果，可以明顯看到，術(shù)前放化療組的保肛率達86.48%，明顯高于對照組的68.29%（p＜0.05）。初步的隨訪結(jié)果顯示，術(shù)前放化療組的療效優(yōu)于對照組。

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篇5

關(guān)鍵詞：醫(yī)學(xué)影像；存儲與傳輸系統(tǒng)；PACS

一、PACS簡介

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，醫(yī)院的診療工作越來越多地依賴于現(xiàn)代化的檢查結(jié)果。像X光檢查、CT、B超、胃鏡腸鏡、血管造影等影像學(xué)檢查的應(yīng)用也越來越普遍。在傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)影像系統(tǒng)中，影像的存儲介質(zhì)是膠片、磁帶等，這樣使用中存在諸多問題。如圖像存儲介質(zhì)所占的空間不斷增加，給存放和查找?guī)砹藝?yán)重的問題；各種不同檢查的圖像分別存放，臨床醫(yī)生要同時參考一個病人不同檢查所產(chǎn)生的影像時往往借閱和查找困難；傳統(tǒng)圖像存儲和管理只在本院進行，異地會診困難; CT等圖像硬拷貝到膠片上，保留的只是操作醫(yī)師認(rèn)為有用的信息，圖像無法做后期處理，固定的窗寬、窗位已經(jīng)丟失了大部分原始信息等。因此，傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)影像管理方法已經(jīng)無法適應(yīng)現(xiàn)代醫(yī)院中對如此大量和大范圍醫(yī)學(xué)影像管理的要求。采用數(shù)字化影像管理方法來解決這些問題已經(jīng)得到公認(rèn)。醫(yī)學(xué)影像存儲與傳輸系統(tǒng)（即PACS）應(yīng)運而生。

PACS由圖像信息的獲取、傳輸、存檔和處理等部分組成。圖像信息的處理由計算機中心完成。計算機的容量、處理速度和可接終端的數(shù)目決定著PACS的大小和整體功能。軟件則關(guān)系到檢索能力、編輯和圖像再處理的功能。

二、醫(yī)學(xué)影像存儲系統(tǒng)需求分析

醫(yī)學(xué)影像的存儲一直是PACS的一項關(guān)鍵技術(shù)，也是制約PACS應(yīng)用與發(fā)展的瓶頸。近幾年計算機存儲技術(shù)發(fā)展很快，新的技術(shù)和思想不斷出現(xiàn)。存儲設(shè)備的價格也以每年30%的速度下降。存儲技術(shù)理念已滲入到PACS解決方案中。

1.傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)圖像的保存和處理方式存在的問題

主要問題列舉如下：①保存膠片需要很大的存放空間。為了提高膠片的利用價值，不得不建立膠片庫來儲存數(shù)量龐大的影像膠片，這就是所謂的“歸檔”，指對膠片的管理。管理難度與數(shù)量同步增長，耗費大量財力、物力和空間。②常規(guī) X 射線攝影沿用膠片增感屏系統(tǒng)，成像后有膠片記錄，需暗室沖洗，在顯影、定影、沖洗、烘干、歸檔等環(huán)節(jié)上要耗費大量的人力和財力。③膠片庫手工管理效率低，資料查詢的速度慢，圖像傳遞需要大量時間，效率低，不能滿足臨床需要，如遇急診就更嚴(yán)重。④易將膠片歸錯檔，使資料的查找和利用效率降低。⑤傳統(tǒng) X 射線膠片更不便實現(xiàn)實時或快速異地會診。⑥膠片的丟失，損壞和變質(zhì)所引起的信息丟失也是一個難以解決的問題。⑦即使是一個管理制度十分完善的醫(yī)院，因借出、會診等丟失膠片也不可避免，給資料的再次利用和科研工作帶來不便。⑧把 CT等圖像拷貝到膠片上，保留的只是操作醫(yī)師認(rèn)為有用的信息，圖像無法后期處理，固定的窗寬、窗位已經(jīng)丟失了大部分原始信息。

2.對存儲介質(zhì)容量的需求分析

臨床上對病人影像的回溯按照訪問量可以分成3類：第一是短期數(shù)據(jù)的回溯，無論影像科室自己還是臨床方面最關(guān)心當(dāng)前病人的影像，短期數(shù)據(jù)的標(biāo)志為3個月內(nèi)的數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)的回訪占總訪問量的90%；第二是對當(dāng)前病人的前期存檔圖像的回訪，病人又來醫(yī)院看病了，臨床醫(yī)生需要翻閱他以前的影像資料，這種回訪大約占9%；第三是個別的影像查詢，占回訪的不足1%。系統(tǒng)必須具備必要的響應(yīng)速度，高響應(yīng)速度是PACS系統(tǒng)是否具有生命力最為重要的因素之一。從點擊病人姓名到顯示出第一幅圖像的時間，這段時間越短越好，應(yīng)限制在10秒以內(nèi)。

從信息源數(shù)據(jù)形態(tài)來看，可分為：原有 X 射片、CT 膠片等介質(zhì)形態(tài)掃描轉(zhuǎn)換為數(shù)字影像；直接由CR、CT、DSA 等數(shù)字化影像檢查設(shè)備產(chǎn)生的數(shù)字影像；由胃鏡、腸鏡、腹腔鏡、宮腔鏡、喉鏡、纖支鏡等內(nèi)窺鏡及顯微鏡、B 超等檢查設(shè)備產(chǎn)生的視頻模擬影像轉(zhuǎn)換為數(shù)字影像；從其他數(shù)據(jù)格式的數(shù)字影像轉(zhuǎn)換而來。影像數(shù)據(jù)一旦形成就不會再改變，對影像的標(biāo)注、解釋等可通過另外保存數(shù)據(jù)實現(xiàn)。

三、醫(yī)學(xué)影像存儲系統(tǒng)系統(tǒng)設(shè)計

系統(tǒng)采用全院影像集中存儲與管理結(jié)構(gòu)，同時在各級工作站、分級管理服務(wù)器、分中心服務(wù)工作站冗余存儲當(dāng)前影像數(shù)據(jù)和進行影像管理。

1.存儲系統(tǒng)硬件構(gòu)成

①中心服務(wù)器：影像主服務(wù)器采用兩臺服務(wù)器構(gòu)成，一臺為主服務(wù)器，一臺為備份服務(wù)器。二者均采用雙CPU、4G內(nèi)存的微機服務(wù)器。在硬件設(shè)計上采用全冗余策略，一旦主服務(wù)器出現(xiàn)硬件故障，系統(tǒng)自動切換到備份服務(wù)器，保證PACS的正常運行。②分中心服務(wù)器：分級管理服務(wù)器，設(shè)在放射科、核醫(yī)學(xué)科、超聲科三個主要影像檢查科室。分中心服務(wù)器采用單CPU、3G內(nèi)存、300G磁盤空間的微機服務(wù)器。③診斷工作站、采集工作站、游覽工作站：CPU P4 3.0G、80G硬盤、512M內(nèi)存，雙屏或三屏顯示器。顯示器分三種檔次：專業(yè)顯示器、21 英寸 SONY500 顯示器、普通 17 純平顯示器。④分發(fā)服務(wù)器：CPU P4 3.0G、80G硬盤、256M內(nèi)存，單屏顯示器。

2.存儲設(shè)計方案

在醫(yī)院影像集中存儲和管理的總體結(jié)構(gòu)下，采用多級存儲結(jié)構(gòu)，即系統(tǒng)在影像集中存儲與管理區(qū)域內(nèi)，再分為影像在線存儲與管理、影像近線存儲與管理、影像離線存儲與管理三級結(jié)構(gòu)。①在線存儲：用于存儲正在使用的影像數(shù)據(jù)。采用磁盤陣列在線保存數(shù)據(jù)，容量為980GB，集中存儲全院100天內(nèi)在線影像。②近線存儲：用于存儲經(jīng)常使用的影像數(shù)據(jù)。使用磁帶庫(LTO)保存近線數(shù)據(jù)，容量最少為18TB，集中存儲全院5年內(nèi)在線影像，供各科室醫(yī)生快速地從網(wǎng)絡(luò)中調(diào)閱、查詢。③離線存儲：用于存儲歸檔的影像數(shù)據(jù)。使用LTO磁帶，按需求選擇無損壓縮/有損壓縮格式，人工將磁帶按序存放在影像檔案柜中，永久性海量存儲影像數(shù)據(jù)。各科室醫(yī)生對離線存儲的病人歷史影像及相關(guān)信息可以進行調(diào)閱。醫(yī)生發(fā)出調(diào)閱指令，主服務(wù)器在判明指令權(quán)限后，由系統(tǒng)管理員從影像檔案柜中取出相應(yīng)磁盤，放入磁帶庫中，由主服務(wù)器自動發(fā)指令給來源工作站。若調(diào)閱指令無調(diào)閱權(quán)限,主服務(wù)器會提示管理員此調(diào)閱者缺少相應(yīng)的操作權(quán)限，同時拒絕工作。

3.存儲鏡像管理

在服務(wù)器數(shù)據(jù)庫中建立病人ID號與影像內(nèi)容及存儲位置對照表；當(dāng)數(shù)據(jù)庫不可用時，手工切換到替代數(shù)據(jù)庫保證PACS的正常工作，待數(shù)據(jù)庫恢復(fù)可用后同步更新數(shù)據(jù)。

4.存儲管理策略

第一級，在線存儲設(shè)備：存儲介質(zhì)以磁盤陣列和磁盤為代表，存儲介質(zhì)一直處于在線狀態(tài)，隨時可以存取，具有讀取速度快，吞吐量大等優(yōu)點，存儲3個月內(nèi)全院各類檢查的影像。醫(yī)院的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)宜采用扁平模式，所有的影像設(shè)備都直接連接到服務(wù)器，在服務(wù)器上統(tǒng)一管理和備份，避免了多級分布存儲的數(shù)據(jù)遷移和備份造成過高的管理代價。由于這一級的查詢速度是關(guān)鍵，所以選用磁盤陣列。

第二級，近線存儲設(shè)備：存儲介質(zhì)以磁帶庫為代表，用于PACS系統(tǒng)和影像數(shù)據(jù)備份。其共同特點：第一，在任一時刻，設(shè)備中只有少數(shù)幾個存儲介質(zhì)處于在線狀態(tài)，而大多數(shù)存儲介質(zhì)是離線的，當(dāng)需要的數(shù)據(jù)在這些離線的存儲介質(zhì)中時，需要把這些存儲介質(zhì)加載到驅(qū)動器里，與在線存儲相比這往往需要較長的時間。第二，對數(shù)據(jù)的定位以及讀取時間也比磁盤要長。第三，設(shè)備中的離線存儲介質(zhì)，通過控制機械手自動加載到驅(qū)動器中。我們認(rèn)為磁帶具有讀寫速度快，單盤超高容量，以及單位容量低成本的特點，是備份存儲方案的首選。

第三級，為離線存儲，海量存儲，當(dāng)磁帶離開磁帶庫后，對磁帶只能進行手工管理，當(dāng)數(shù)據(jù)存儲在這些介質(zhì)上，需要手工將所需磁帶加入磁帶庫中，數(shù)據(jù)才能讀、寫。對于這一級而言，一個完善的永久存檔方案是PACS系統(tǒng)“長治久安”的重要保障，其容量變得非常重要，而且管理要高度自動化，查詢速度也應(yīng)保持在5min以內(nèi)，因此存儲方式的選擇尤其重要。綜合比較各種因素，選擇具有使用壽命長、容量大、查詢及讀寫速度快等性質(zhì)的LTO磁帶庫作為永久存儲設(shè)備。

4.可靠性和穩(wěn)定性

為了保證系統(tǒng)的可靠性和穩(wěn)定性，首先要采用UNIX系統(tǒng)，因為在目前Windows NT系統(tǒng)還不是很穩(wěn)定的情況下，UNIX仍然是服務(wù)器上較理想的操作系統(tǒng)。其次采用功能強大、可靠穩(wěn)定的商業(yè)數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)ORACLE來建立數(shù)據(jù)庫。

在程序設(shè)計方面，則采用父/子多層進程的方法。

服務(wù)器在收到并承認(rèn)一個應(yīng)用請求后，就產(chǎn)生一個子進程，由子進程來處理這個請求。如果在通訊中產(chǎn)生任何網(wǎng)絡(luò)問題或由于程序的漏洞，使得子進程異常中斷,則父進程不受任何影響，服務(wù)器可以繼續(xù)工作。另外將一個大的應(yīng)用進行分割處理,中間通過一個隊列來連接，例如圖像存儲就分為圖像接收和數(shù)據(jù)插入數(shù)據(jù)庫操作兩部分。圖像接收進程將接收的圖像文件加入到一個隊列,而數(shù)據(jù)插入進程從隊列中取出圖像文件。這樣就降低程序漏洞出現(xiàn)的可能性和防止網(wǎng)絡(luò)傳輸與數(shù)據(jù)庫操作的相互干擾。同時,由于采用父、子進程和隊列的方法，服務(wù)器的各個進程之間以流水線的方式工作。服務(wù)器根據(jù)進來的多個請求分別產(chǎn)生子進程，這些子進程和服務(wù)器主進程同時并發(fā)運行，由較大的應(yīng)用分割產(chǎn)生的各個進程也是并發(fā)運行。這樣就可最大限度消除圖像通訊、存儲及查詢中的瓶頸效應(yīng)，提高了服務(wù)器的工作性能。

作者單位：四川師范大學(xué)信息技術(shù)學(xué)院

參考文獻：

[1]林日增.PACS:數(shù)字化、無膠片化影像新紀(jì)元[J].臨床放射學(xué)雜志，2002,1: 478-480.

篇6

關(guān)鍵詞 老年性癡呆 學(xué)習(xí)記憶能力 清心開竅方 實驗研究

老年性癡呆(簡稱AD)是老年人的常見病、多發(fā)病。其首要癥狀是智力、記憶力、感官定向能力、判斷力、語言思維能力不可逆的進行性退化，并常伴有性格改變。該病的發(fā)病率隨年齡增長而增加，65歲以上的老年人口中約占5％，75歲以上的老年人中則上升為20％。AD目前已成為繼心臟病、腫瘤和中風(fēng)之后的第四位死亡原因，由于其發(fā)病的隱匿性和不可逆性，給家庭和社會帶來很大負(fù)擔(dān)與危害。清心開竅方已運用臨床多年，療效確定?，F(xiàn)將其對AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力和腦組織ChaT和AchE活性的影響總結(jié)如下。

1、材料

1.1 動物：SD雄性大鼠80只，清潔級，體重90～115g，購自中國科學(xué)院上海實驗動物中心。購后飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)內(nèi)。飼養(yǎng)條件：溫度控制在20～25℃，濕度40％～70％。光照12小時明，12小時暗，飼以60鉆輻照全價營養(yǎng)顆粒飼料和高壓滅菌水，墊料每周更換兩次。

1.2 藥物與試劑：分述如下。

1.2.1　藥物：清心開竅方湯劑藥物組成：生地、麥冬、白芍、石菖蒲、丹皮、茯神、苦參各6g，陳皮4g，知母5g等，制成含生藥濃度為0.91g/ml藥液。用真空塑料袋包裝，儲存于4℃冷藏室，灌胃劑量為8.7ml/kg。雙益平：50μg/片，上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號為：051001，用前配制，濃度為：3.5μg/ml，灌胃劑量為10ml/kg。Aβ1―40：500μg/瓶，Sigma公司生產(chǎn)，產(chǎn)品號：A1075，批號為：104K4771。用前加200μl注射用水溶解，濃度為2.5μg/μl，置于37℃恒溫水槽中孵育1周。

1.2.2　試劑：乙酰膽堿酯酶(AchE)測試盒、乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(ChaT)測試盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3　主要儀器：水迷宮設(shè)備：Morris水迷宮視頻分析系統(tǒng)(上海吉量軟件科技有限公司生產(chǎn))，通過電腦同步記錄大鼠運動軌跡。圖象處理系統(tǒng)為DigBehv動物行為分析系統(tǒng)。訓(xùn)練期間迷宮外參照物保持不變。722型分光光度計(上海第三分析儀器廠生產(chǎn))。5417R離心機(德國EPPENDORF公司生產(chǎn))。

2、方法

2.1 動物分組及造模：SD雄性大鼠80只，體重90～115g。動物購來后秤重，隨機分為正常對照組、假手術(shù)組、模型組、陽性治療組、預(yù)防組和治療組6組，每組10只。具體處理如下：①正常對照組：正常飼喂2周后，用生理鹽水灌胃3周；②假手術(shù)組：正常飼喂2周后，雙側(cè)腦內(nèi)注射滅菌注射用水，再用生理鹽水灌胃3周；③模型組：正常飼喂2周后，雙側(cè)腦內(nèi)注射Aβ1―40，再用生理鹽水灌胃3周；④陽性治療組：正常飼喂2周后，雙側(cè)腦內(nèi)注射Aβ1―40，再用雙益平(10ml/kg/d)灌胃3周。⑤預(yù)防組：正常飼喂同時用清心涼血開竅方灌胃給藥，2周后，雙側(cè)腦內(nèi)注射Aβ1―40，再用清心涼血開竅方灌胃給藥3周；⑥治療組：正常飼喂2周后，雙側(cè)腦內(nèi)注射A131―40，再用清心涼血開竅方灌胃給藥3周。

雙側(cè)腦內(nèi)注射法：雙側(cè)腦內(nèi)注射用由第二軍醫(yī)大學(xué)生理教研室研制的江灣I型C腦立體定位儀。左右海馬定位P3.0mm，L2.0mm，H3.0mm。氯胺酮(0.1～0.2ml/100g)腹腔麻醉，用立體定向儀固定頭部，酒精棉球局部消毒，剪開頭頂皮膚，暴露頭骨，經(jīng)初步定位后，用骨鉆鉆開頭骨，于前囟后3.0mm，左右旁開2.0mm進針，深3.0mm緩慢注入2μ Aβ1―40，雙側(cè)共4μl，5min內(nèi)注射完畢，留針5min后緩慢退出(正常對照組不注射，假手術(shù)組注射等量的滅菌用注射用水)，縫合頭皮，最后肌肉注射青霉素，操作完畢后將其放回籠盒，注意觀察麻醉未醒的大鼠，防止其窒息死亡。

2.2　觀測指標(biāo)：分述如下。

2.2.1 水迷宮試驗：全部給藥結(jié)束后開始水迷宮測試。訓(xùn)練時選擇一個入水點，將大鼠面向池壁放入水中，圖象處理系統(tǒng)將觀察并記錄大鼠在水中游泳尋找并爬上平臺的路線圖、所需時間(即大鼠找到平臺所需時間)。設(shè)定最長游動時限為70秒，如果大鼠在70s內(nèi)未找到平臺，需將其引至平臺并停留10s，這時所需時間記為70s。每天訓(xùn)練2次，共6天。

2.2.2　AchE、ChaT的測定：按試劑盒要求進行。

2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計：實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，兩個樣本比較采用t檢驗，多個樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，按統(tǒng)計學(xué)規(guī)定，P

3、實驗結(jié)果

3.1 清心開竅方對癡呆大鼠水迷宮訓(xùn)練成績的影響(x±s)：結(jié)果見表1。從表1可見，與模型組比較：陽性治療組第5、6天有顯著性差異(P

3.2 清心開竅方對癡呆大鼠ChaT、AchE的影響(x±s)：結(jié)果見表2。與模型組比較：陽性治療組ChaT活性明顯升高，有顯著差異(P

假手術(shù)組比較，AchE活性高，說明腦內(nèi)注射淀粉樣蛋白Aβ1―40對大鼠腦內(nèi)AchE活性有影響；預(yù)防組、治療組、陽性治療組與正常組和假手術(shù)組比較，雖無顯著差異，但測定值水平有高低差別，說明雙益平和清心開竅方均可以影響癡呆大鼠的AchE活性，預(yù)防組和治療組比陽性治療組作用明顯。

4、討論

祖國醫(yī)學(xué)將AD歸屬于呆病、文癡、善忘、郁證、癲證等范疇，認(rèn)為其病位在腦，與心腎肝脾關(guān)系密切。其主要病機分為虛實兩端。虛證以肝腎陰虧、心脾氣虛及陽虛為主；實證以痰、瘀、火、郁為主。臨床治療多以補腎填精、活血通竅、益氣養(yǎng)血、清熱滌痰開竅等為治療大法。清心開竅方具有清心涼血、開竅清腦作用，臨床運用多年，療效顯著，本次實驗研究也證實了其治療AD的良好作用。

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[關(guān)鍵詞] XE-2100血液分析儀；血液?。谎“鍦y定；準(zhǔn)確性

[中圖分類號] R558 [文獻標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）26-53-02

The Impact of Platelet Counting Setected by XE-2100 Automatic Hematology Analyzer in Hematological Patients

PENG Songqing WU Xiaolai

Department of Laboratory，Shengzhou City People's Hospital in Zhejiang Province Shengzhou City，Shengzhou 312400，China

[Abstract] Objective To analyze the accuracy of electric impedance （PLT-I） method and optical （PLT-O） method for platelets counting by XE-2100 hematology analyzer in hematological patients. Methods The blood samples from 50 healthy person and 150 hematological patients were collected for platelet counting. The platelet of these samples were simultaneously assayed by PLT-I method and PLT-O method with reference to manual counting. Results When the blood from healthy person was assayed by PLT-I method and the determination of platelet PLT-O， the result of platelet counting was not significant different in comparison with manual counting（P＞0.05）. When the blood from hematological patients was assayed by PLT-I method and PLT-O，the result of platelet counting by PLT-O method was no significant different compared with manual counting（P＞0.05）， whereas the result of platelet counting by PLT-I method was significantly different compared with manual counting （P＜0.05）. Conclusion Blood platelets from hematological patients were assayed by XE-2100 hematology analyzer； PLT-O method has a good accuracy.

[Key words] XE-2100 hematology analyzer； Blood disease； Platelet counting； Accuracy

目前各種型號的血液分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床，實驗室對血液分析儀器的要求也在逐漸提高，而為實驗室和臨床關(guān)注的有核紅細(xì)胞、幼稚白細(xì)胞、異常血小板等測定的正確性問題，已成為臨床檢驗工作者關(guān)注的焦點。臨床工作中有一部分標(biāo)本特別是血液病患者標(biāo)本存在巨大血小板、血小板聚集、小紅細(xì)胞及細(xì)胞碎片等干擾血小板計數(shù)[1，2]，從而影響血小板測定結(jié)果的正確性。本文旨在比較和分析XE-2100血液分析儀PLT-I法和PLT-O法對某些血液病患者血小板測定的準(zhǔn)確性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

1.1.1 健康組 50例為健康體檢未發(fā)現(xiàn)異常的健康者，其中女25例、男25例，平均年齡37歲。

1.1.2 血液病患者組 150例為2008年1月～2011年3月在嵊州市人民醫(yī)院門診及住院患者，其中再生障礙性貧血（AA）20例，男8例、女12例，平均年齡39歲；缺鐵性貧血（IDA）女性患者30例，平均年齡36歲；特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）女性患者20例，平均年齡47歲；急性粒細(xì)胞性白血病（AML）20例，男14例、女6例，平均年齡50歲；慢性粒細(xì)胞性白血?。–ML）20例，男13例、女7例，平均年齡61歲；多發(fā)性骨髓瘤（MM）20例，男15例、女5例，平均年齡59歲；惡性淋巴瘤20例，男7例、女13例，平均年齡56歲，上述所有患者均診斷明確。

1.2 儀器與試劑

XE-2100血液分析儀、配套試劑（上?？迫A公司）及全血質(zhì)控品（日本東亞公司）。CX21型Olympus顯微鏡（歐林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會社）；牛鮑改良血細(xì)胞計數(shù)板；20μL微量采血管；EDTA-K2抗凝真空采血管（浙江康是公司）。血小板計數(shù)液（草酸銨法稀釋液）按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版配制[3]。

1.3 方法

1.3.1 采血 用EDTA-K2抗凝真空采血管采健康者及血液病患者肘靜脈血2mL，充分混勻。

1.3.2 血液分析儀和手工顯微鏡法血小板測定 先在XE-2100血液分析儀用PLT-I法和PLT-O法檢測血小板，再用顯微鏡法按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程計數(shù)血小板[3]，每份標(biāo)本2次計數(shù)，誤差小于10%，取均值與PLT-I法、PLT-O法結(jié)果相比較。

1.3.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件處理，血小板測定結(jié)果以（χ±s）表示，組間比較用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 PLT-I法、PLT-O法血小板計數(shù)精密度結(jié)果

見表1。兩種血小板測定方法精密度（CV）均在儀器容許范圍內(nèi)，但是PLT-O法CV高于PLT-I法。其中儀器血小板測定精密度容許范圍CV＜4.0%。

2.2 XE-2100血液分析儀PLT-I法、PLT-O法與顯微鏡法血小板計數(shù)結(jié)果比較

健康者在XE-2100血液分析儀上用PLT-I法和PLT-O法測定血小板與顯微鏡法比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；血液病患者PLT-O法測定血小板與顯微鏡法比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）， 但PLT-I法測定血小板與顯微鏡法比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），測定結(jié)果見表2。

3 討論

血小板測定是臨床血液性疾病診斷最重要的全血指標(biāo)之一，由于血小板體積小，容易發(fā)生粘附、聚集和變性破壞，而且檢測時干擾因素較多，常難以得到正確的計數(shù)結(jié)果。許多儀器（如電阻抗型血細(xì)胞分析儀）測定血小板有較好的重復(fù)性，但對巨大血小板、血小板凝集、小紅細(xì)胞或細(xì)胞碎片等標(biāo)本往往無法得到準(zhǔn)確的結(jié)果。顯微鏡法計數(shù)血小板操作繁瑣且費時，重復(fù)性差，不適合大批量操作，因此靈敏、快速、準(zhǔn)確地檢測血小板具有重要的實際臨床意義。

本文對XE-2100血液分析儀PLT-I法與PLT-O法在某些血液病患者中血小板計數(shù)的準(zhǔn)確性進行了比較和分析。XE-2100測定血小板有兩種檢測方法，即電阻抗法（PLT-I法）和熒光染色激光散色法（PLT-O法）。PLT-I法采用紅細(xì)胞/血小板檢測通道，利用鞘流電阻原理檢測血小板，其優(yōu)點鞘流電阻法檢測的顆粒數(shù)多，能達到20~25萬顆粒，而且檢測時沒有細(xì)胞并行，因此檢測的重復(fù)性較好，無需特殊試劑因而經(jīng)濟實用，缺點是檢測的顆粒信號不能反映體積（2～20 fl）以外的其他方面的信息，如標(biāo)本中存在的小紅細(xì)胞、細(xì)胞碎片、細(xì)菌、雜物等，依靠體積信號辨別則無法解決。PLT-O法采用血小板/網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測通道，采用的光源為633nm波長的半導(dǎo)體激光束，染料為Plymethine（聚次甲基）和Oxazine（惡嗪），因血小板體積較小，但是顆粒中存在少量RNA，可被染料輕微著色而激發(fā)出熒光，同時通過前向散射光檢測顆粒大小、熒光強度反映細(xì)胞內(nèi)核酸的含量，對于巨大血小板或凝集塊、細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞等特殊標(biāo)本則更能取得準(zhǔn)確的結(jié)果，因此對血液病患者標(biāo)本檢測時有較好的正確性，但是PLT-O法檢測的顆粒一般僅4~6萬個，重復(fù)性會略遜于PLT-I法。

骨髓造血功能指標(biāo)之一是血小板的數(shù)量和質(zhì)量，正確的血小板結(jié)果對血液病的診斷、治療及預(yù)后有著重要意義[4]。臨床實際工作中可用PLT-I法作為常規(guī)標(biāo)本檢測，當(dāng)遇到某些血液病患者或一些特殊標(biāo)本（如混有大型血小板或小球性紅細(xì)胞時或細(xì)胞碎片等），儀器屏幕和報告單上會有一標(biāo)記“&”提示PLT-I結(jié)果可信度低（血小板異常），建議使用PLT-O法再次檢測，使血小板結(jié)果更加可信，這樣可節(jié)約試劑成本、降低復(fù)查次數(shù)，但在一些特殊病例如EDTA依賴性的血小板聚集時應(yīng)與顯微鏡法復(fù)核，使結(jié)果更準(zhǔn)確、可靠。

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篇8

【摘要】 ：目的 通過檢測小鼠外周血γ-干擾素(γ-IFN)水平，探討益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方對病毒性擴張型心肌病小鼠的作用機制。方法 Balb/c小鼠210只，隨機分為4組，空白組30只，模型組及中藥高、低劑量組各60只。采用多次腹腔注射柯薩奇B3m病毒的方式，建立重復(fù)感染的早期病毒性擴張型心肌病動物模型。中藥高、低劑量組用益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方治療，于治療4周后觀測小鼠心肌病理形態(tài)學(xué)改變、死亡率、體重、心臟質(zhì)量指數(shù)變化，雙抗體夾心ELISA法測定外周血γ-IFN水平。結(jié)果 益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方能促進病毒性擴張型心肌病小鼠γ-IFN誘生，中藥高、低劑量組與模型組實驗結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理有顯著差異。結(jié)論 益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方具有抗病毒、調(diào)節(jié)免疫功能的作用。

【關(guān)鍵詞】 益氣養(yǎng)陰　活血化瘀方　γ-干擾素　病毒性擴張型心肌病　柯薩奇B3m病毒

Abstract：Objective To investigate the effect of the prescription of Yiqiyangyin Huoxuehuayu on the mice model with viral dilated cardiomyopathy by examining the levels of serum γ-IFN. Methods Replicated the animal models of early viral dilated cardiomyopathy by injecting the CVB3m virus to the peritoneal cavity of the Balb/c mice. Two hundred and ten Balb/c mice were pided into 4 groups at random：blank group， model group， high and low dose traditional Chinese medicine group. The blank group has 30 mice. The other three group has 60 mice each. The mice of high dose traditional Chinese medicine group and low dose traditional Chinese medicine group were treated with the prescription of Yiqiyangyin Huoxuehuayu. The change of pathomorphology in the cardiac muscle tissue， the rate of death， the weight change and the cardiac weight index were observed after 4 weeks of the treatment. At the same time， ELISA method was used to exam the levels of serum γ-IFN. Results The prescription of Yiqiyangyin Huoxuehuayu can induce the expression of serum γ-IFN in the mice with viral dilated cardiomyopathy. The mean level of serum γ-IFN of the high dose traditional Chinese medicine group and low dose traditional Chinese medicine group were significantly higher than that of the model group. Conclusions The prescription of Yiqiyangyin Huoxuehuayu can inhibit the viral replication and regulate the immunologic function.

Key words：the prescription of Yiqiyangyin Huoxuehuayu；γ-IFN；viral dilated cardiomyopathy；CVB3m

擴張型心肌病是一種常見的特發(fā)性心肌病，以左心室或雙心室擴大、心肌收縮力明顯降低為特征。其病因及發(fā)病機制尚未闡明，且目前尚無有效的防治方法，預(yù)后極差。近年研究表明，多數(shù)擴張型心肌病與病毒感染及自身免疫反應(yīng)有關(guān)[1-2]，且已發(fā)現(xiàn)病毒性心肌炎可演變?yōu)閿U張型心肌病。益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方治療擴張型心肌病臨床收到較好的療效。本實驗通過對病毒性擴張型心肌病小鼠外周血γ-干擾素(γ-IFN)水平測定，探討益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方防治病毒性擴張型心肌病的作用機理。

1 實驗材料

1.1 病毒

柯薩奇B3m病毒(Nancy株，哈爾濱醫(yī)科大學(xué)克山病研究所提供)，在Hela細(xì)胞中傳代，凍融3次，離心(2 000 r/min×10)，上清液分裝，在Hela細(xì)胞中測50%組織感染率(TCID50)為10-7， -70 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 藥物

益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方由黃芪、紅參、生地黃、麥冬、五味子、川芎、丹參、板藍根、大青葉等藥物組成。中藥經(jīng)水提取，制成浸膏，含水量為21%。用蒸餾水稀釋，調(diào)整濃度為82%，即相當(dāng)于每1 mL懸液中含原藥材4.3 g，備用，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)制劑室提供。

1.3 動物

雄性Balb/c小鼠210只，3～4周齡，購自北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心，動物合格證號：SCXK-(軍)。分籠飼養(yǎng)，每籠10只，室溫(26±3)℃，均食用普通飼料。

2 實驗方法

2.1 造模及分組

210只3～4周齡雄性Balb/c小鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機分為4組：空白組30只，模型組 、中藥高劑量組、中藥低劑量組各60只。模型組、中藥高劑量組、中藥低劑量組均于實驗的第1、8、15、22、36、50日分別給予腹腔注射RML640液稀釋的0.1 mL×10-4 TCID50 CVB3m、0.1 mL×10-3 TCID50 CVB3m、0.2 mL×10-3 TCID50 CVB3m、0.1 mL×10-3 TCID50 CVB3m、0.1 mL×10-3 TCID50 CVB3m、0.1 mL×10-3 TCID50 CVB3m?？瞻捉M于實驗的第1、8、15、22、36、50日均給予同體積的RML640液。

2.2 給藥及取材

各組均于末次病毒注射后10 d，即實驗的第60日開始灌胃給藥。中藥高劑量組、中藥低劑量組分別給予益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方混懸液灌胃，中藥低劑量組10.35 g/(kg·d)，中藥高劑量組20.7 g/(kg·d)，以上給藥劑量均為原藥材量。模型組和空白組灌以同體積蒸餾水，每日1次，連續(xù)4周。實驗結(jié)束時，用電子天平稱取小鼠體重。無菌摘取小鼠眼球取血，3 000 r/min離心，取血清，-70 ℃保存待用。之后處死小鼠，無菌取心臟，4 ℃預(yù)冷生理鹽水沖洗血污，濾紙吸干，電子天平稱取心臟重量。剪取部分心肌組織，置4%多聚甲醛中固定，常規(guī)包埋，做病理檢驗。

轉(zhuǎn)貼于

2.3 指標(biāo)檢測

根據(jù)相應(yīng)ELISA試劑盒說明書操作(試劑盒購于博士德生物工程有限公司)；測定心臟與體重的比值，即心臟與體重質(zhì)量比(mg/g)，作為心臟肥大指標(biāo)；光鏡電鏡觀察心肌組織。

2.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料應(yīng)用x±s表示，多組均數(shù)間的比較應(yīng)用方差分析，兩兩比較應(yīng)用q檢驗，樣本率的比較用χ2檢驗。

3 結(jié)果

3.1 各組小鼠死亡率

(見表1)表1 各組小鼠死亡率比較（略）注：與空白組比較，P

3.2 各組小鼠心肌組織病理形態(tài)學(xué)改變

空白組小鼠心肌組織結(jié)構(gòu)正常。光鏡下，模型組小鼠心肌纖維排列紊亂、斷裂，心肌細(xì)胞肥大，空泡變性，血管充血出血，少量炎細(xì)胞浸潤，間質(zhì)纖維化明顯。電鏡下，模型組小鼠心肌超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn)為心肌細(xì)胞核變大，可見雙核仁，核膜明顯不規(guī)則，線粒體明顯增多，增生的線粒體嵴為板層體，同時也可見線粒體嵴融合，肌節(jié)結(jié)構(gòu)不清，肌絲溶解、斷裂，M線消失，間質(zhì)膠原纖維增生明顯，間質(zhì)纖維母細(xì)胞增生活躍。中藥低劑量組及中藥高劑量組小鼠心肌組織結(jié)構(gòu)改變均較模型組輕微。

3.3 各組小鼠體重、心臟質(zhì)量指數(shù)變化

(見表2)表2 各組小鼠體重、心臟質(zhì)量指數(shù)變化(略)注：與空白組比較，P

3.4 各組小鼠外周血γ-干擾素水平變化

(見表3)表3 各組小鼠外周血γ-IFN水平比較(略)注：與空白組比較， P

4 討論

近年來研究發(fā)現(xiàn)，擴張型心肌病與病毒持續(xù)感染和自身免疫病變有關(guān)，后者包括細(xì)胞免疫和體液免疫。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，擴張型心肌病與T細(xì)胞功能變化、T細(xì)胞亞群比例異常及細(xì)胞因子分泌異常密切相關(guān)，Th2水平升高，輔助B細(xì)胞產(chǎn)生心肌自身抗體，造成免疫異常[3]。γ-IFN作為重要的細(xì)胞因子，在擴張型心肌病病程發(fā)展中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用[4]：促進Th0細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化[5]，通過抑制白細(xì)胞介素-4的產(chǎn)生，阻滯Th2的增殖分化[6]，調(diào)整Th1/Th2比例，從而抑制體液免疫，調(diào)節(jié)自身免疫；γ-IFN還可通過誘導(dǎo)抗病毒蛋白直接抑制病毒復(fù)制[7]；活化NK細(xì)胞，形成IFN-NK系統(tǒng)[8]，抵御病毒感染；誘導(dǎo)一氧化氮產(chǎn)生，而發(fā)揮抗病毒、擴張血管保護心肌作用[9]。有研究發(fā)現(xiàn)，擴張型心肌病小鼠外周血中γ-IFN水平較低[10]，可能使Th1/Th2比例異常更加難以糾正，體液免疫損傷加重。本實驗檢測模型組γ-IFN水平較空白組明顯降低，與文獻報道一致，中藥高劑量組及中藥低劑量組γ-IFN水平較模型組明顯升高，且其病理改變均較模型組輕微，證實益氣養(yǎng)陰、活血化瘀方對病毒性擴張型心肌病有一定的防治作用。其作用機制可能與調(diào)節(jié)機體免疫水平，誘生體內(nèi)γ-IFN、抗病毒復(fù)制、糾正Th1/Th2比例異常進而減輕體液免疫損害有關(guān)，其深入機理有待進一步研究。

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篇9

[關(guān)鍵詞]干燥綜合征；NOD小鼠；養(yǎng)陰益氣活血中藥；Fas/FasL

干燥綜合征（Sjogren′s syndrome，SS）是一種侵犯唾液腺、淚腺等外分泌腺的慢性系統(tǒng)性自身免疫性疾病。多見于40～50歲的女性，女性與男性比例為9∶1[1]。臨床主要表現(xiàn)為口干、眼干、關(guān)節(jié)酸痛、便秘、皮膚干燥、鼻腔干燥等癥狀，嚴(yán)重者影響患者生活質(zhì)量。目前干燥綜合征的病因和發(fā)病機制尚不清楚。有研究[2]發(fā)現(xiàn)Fas/FasL在SS患者唇腺組織細(xì)胞和導(dǎo)管上皮內(nèi)大量表達，浸潤的淋巴細(xì)胞內(nèi)很少表達FasL。提示Fas/FasL在SS唇腺腺胞及導(dǎo)管上皮細(xì)胞內(nèi)的異常表達可能是SS患者唾液腺破壞的一個重要機制。通過前期臨床研究觀察，運用中藥養(yǎng)陰益氣活血中藥配合西藥治療SS療效確切[3-4]。動物實驗研究表明，其具有改善NOD小鼠唾液分泌量、減少飲水量以及改善小鼠頜下腺淋巴病理浸潤的作用[5]，同時能調(diào)節(jié)小鼠血清和頜下腺Th1型細(xì)胞因子TNF-α和Th2型細(xì)胞因子IL-1β水平[6]。為此，通過研究中藥養(yǎng)陰益氣活血煎劑對干燥綜合征NOD小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL蛋白及其mRNA表達的影響，以進一步明確其治療干燥綜合征的可能機制。

1材料

1.1動物 選擇NOD小鼠32只及Balb/C小鼠8只，8周齡，雌性，均為SPF級，于無特殊病菌的恒溫恒濕度條件下喂養(yǎng)。實驗動物均由上海斯萊克動物實驗中心提供，動物合格證號2007000512526。

1.2藥品 中藥養(yǎng)陰益氣活血煎劑（由太子參24 g、白芍15 g、玉竹12 g、五味子10 g、黃精15 g、烏梅10 g、紅景天15 g、腫節(jié)風(fēng)12 g、青蒿15 g、桑椹12 g等中藥組成），所有中藥飲片均購于浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院中藥房，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥實驗室煎制濃縮而成。制備方法：將藥物按組方比例混合，裝入三角燒瓶中，加10倍量水浸泡1 h，電磁爐加熱煮沸后，改用文火煎煮2 h，過濾藥液；藥渣再加8倍量水煮沸1 h，藥渣共煎煮2次，合并3次濾液，濃縮成質(zhì)量濃度為6 g?mL-1的藥液，4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。硫酸羥氯喹片（上海中西制藥有限公司，批號091008），用蒸餾水稀釋成含生藥量3 g?L-1。

1.3試劑 兔抗鼠Fas，F(xiàn)asL多克隆抗體（一抗）（美國Santa Cruz公司）；Sp-9001（北京中杉金橋分裝Zymed，18 mL，批號861208）；Pv-9003（北京中杉金橋分裝Zymed，3 mL，批號861129）；Fas，F(xiàn)asL原位雜交檢測試劑盒（武漢博士德公司）；原位雜交檢測試劑盒（武漢博士德公司）；原位雜交專用PBS（武漢博士德公司）；反轉(zhuǎn)錄試劑盒（TAKARA公司）。

2方法

2.1動物分組 將32只NOD小鼠隨機分為4組，即模型組、中藥組、羥氯喹組、中西藥組，每組8只。Balb/C小鼠8只做為正常對照組。實驗動物均喂養(yǎng)于無特殊病菌的恒溫恒濕度條件下，飲水瓶給水。

2.2給藥方法 對照組和模型組每天正常飼養(yǎng)。各給藥組在正常飼養(yǎng)基礎(chǔ)上，于實驗開始后每天定時給藥1次，給藥量按動物與人等效劑量換算表計算（相當(dāng)于臨床人用藥劑量9倍）。中藥組每天按照100 g?kg-1劑量分別灌胃養(yǎng)陰益氣活血煎劑0.4 mL。羥氯喹組每天按照60 mg?kg-1劑量灌胃羥氯喹片稀釋液0.4 mL；中西藥組每天分別灌胃中藥+羥氯喹（養(yǎng)陰益氣活血煎劑50 g?kg-1+羥氯喹60 mg?kg-1）0.4 mL。實驗進行8周后處死小鼠，解剖摘取雙側(cè)頜下腺進行指標(biāo)檢測。實驗至第2周，中藥組有1只小鼠死亡，經(jīng)解剖后發(fā)現(xiàn)是因灌胃不當(dāng)引起食管損傷而死。

2.3免疫組化法檢測小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL含量 動物給藥喂養(yǎng)8周后，處死后摘取雙側(cè)頜下腺組織，采用免疫組化SP法檢測小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL含量，具體步驟嚴(yán)格按照說明書操作。采用多功能真彩色細(xì)胞圖象分析管理系統(tǒng)進行圖像分析，選取400倍圖像，細(xì)胞質(zhì)或胞膜著棕黃色為陽性表達細(xì)胞。選擇有意義的組織相，經(jīng)登錄、編號、采集、分析、讀取數(shù)據(jù)。隨機選取5個視野進行平均吸光度測定，取其平均值作為該切片的代表值進行統(tǒng)計分析。

2.4Real-time PCR法檢測小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL mRNA的表達 以GAPDH為內(nèi)參，實驗過程按試劑盒說明書進行，具體步驟如下：用Trisol試劑盒提取頜下腺總RNA，取1 μL進行RT-PCR分析。Fas引物序列為上游5′-AGGCCGCCCGCTGTTTTC-3′，下游5′-ACGAACCCGCCTCCTCAGC-3′，產(chǎn)物長度145 bp，Tm值60；FasL引物序列為上游5′-GCCGCCACTGACCCCTCTAA-3′，下游5′-CCACACTCCTCGGCTCTTTT -3′，產(chǎn)物長度242 bp，Tm值60；GAPDH引物序列為上游5′-AAATGGTGAAGGTCGGTGTG-3′，下游5′-TGAAGGGGTCGTTGATGG-3′，產(chǎn)物長度108 bp，Tm值60。PCR反應(yīng)參數(shù)為94 ℃ 5 min，再將反應(yīng)條件變?yōu)?4 ℃ 15 s，60 ℃ 45 s，循環(huán)擴增40次。60 ℃檢測熒光值。

Fas，F(xiàn)asL及內(nèi)參GAPDH分別在2個管中同時進行反應(yīng)，除探針和引物外，2管中加入的RNA模板和其他反應(yīng)試劑均一致。通過ABI 7500定量PCR儀器取其循環(huán)閾值均值（Ct值），描述各組基因的擴增曲線和溶解曲線。結(jié)果采用相對定量分析法[7]：2-ΔΔCt法進行計算mRNA相對表達量，以各組ΔCt值進行統(tǒng)計學(xué)分析，同時本實驗以模型組做為未處理組，與其他各組進行對照比較。

ΔCt=實驗組目的基因Ct值-該組內(nèi)參基因Ct值，ΔΔCt=實驗組（目的基因Ct-內(nèi)參基因Ct）-模型組（目的基因Ct-內(nèi)參基因Ct），ΔCt值越小表示Fas，F(xiàn)asL mRNA在頜下腺組織中的表達越高，而2-ΔΔCt值越高，表明樣本中Fas，F(xiàn)asL mRNA相對于模型組表達量越大。

本實驗結(jié)果顯示，所有樣本中Fas，F(xiàn)asL mRNA顯示呈指數(shù)增長，并達到平臺期，擴增效率較高。熒光定量Fas及FasL mRNA PCR產(chǎn)物的熔解曲線表現(xiàn)為單一的峰值，表明擴增產(chǎn)物單一，避免了檢測過程中假陽性結(jié)果。

2.5統(tǒng)計學(xué)分析 實驗數(shù)據(jù)用SPSS 15.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料采用±s表達，組間比較采用One-Way ANOVA 檢驗方法，結(jié)果以P

3結(jié)果

3.1各組小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL蛋白表達比較 免疫組織化學(xué)陽性染色顯示Fas，F(xiàn)asL表達呈棕黃色顆粒。對照組小鼠頜下腺組織偶見Fas，F(xiàn)asL表達，模型組小鼠頜下腺細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜，及導(dǎo)管上皮可見較多的Fas和FasL蛋白表達。各給藥組小鼠頜下腺組織細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、導(dǎo)管上皮等可見部分散在Fas和FasL蛋白表達，明顯少于模型組。各組小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL平均吸光度比較見表1。模型組小鼠頜下腺組織Fas以及FasL蛋白表達均高于其他各組（P

3.2養(yǎng)陰益氣活血方藥對NOD小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL mRNA表達的影響 模型組小鼠頜下腺組織Fas mRNA相對表達量均高于其他各組（P

4討論

Fas系統(tǒng)是目前研究較為深入的一類與細(xì)胞凋亡（apoptosis，APO）有關(guān)的基因。Fas/FasL作為介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的一對蛋白質(zhì)，是調(diào)控細(xì)胞凋亡的重要因子，在人體細(xì)胞凋亡、免疫赦免、維護機體穩(wěn)態(tài)平衡有重要的生理功能[8]。研究顯示[9]pSS患者唇腺腺泡上皮細(xì)胞（AEC）和導(dǎo)管上皮細(xì)胞（DEC）細(xì)胞凋亡率及Fas/FasL蛋白表達較正常人顯著升高，且二者呈正相關(guān)，提示唇腺組織細(xì)胞凋亡可能是Fas/FasL途徑介導(dǎo)的。Saegusa[10]發(fā)現(xiàn)在原發(fā)性干燥綜合征動物模型中，唾液腺組織CD4（+）T細(xì)胞浸潤，出現(xiàn)很大比率Fas配體，唾液腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞不斷的產(chǎn)生Fas。均提示Fas/FasL途徑介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡可能是pSS唇腺組織功能失調(diào)的原因之一。

目前SS治療方法主要是采取措施改善癥狀，控制和延緩病情進展，根據(jù)病情進行局部治療或系統(tǒng)治療，而中醫(yī)藥配合西藥在治療SS方面有一定的優(yōu)勢，取得了較好臨床療效。在長期的臨床觀察中發(fā)現(xiàn)，SS患者辯證以氣陰兩虛兼有血瘀為多見，故運用養(yǎng)陰、益氣、活血的方法治療SS與之相應(yīng)。中藥養(yǎng)陰益氣活血方具有滋腎養(yǎng)陰、益氣生津、活血化瘀之功，有效針對陰虛氣虛兼血瘀病機，達到治療SS之目的。臨床運用中西醫(yī)結(jié)合治療后，患者臨床癥狀明顯緩解，同時改善SS患者機體的細(xì)胞免疫、體液免疫以及炎癥過程，減輕自身免疫性炎癥，有效緩解SS的病情[3]。通過臨床研究發(fā)現(xiàn)，本方藥還能改善SS患者生活質(zhì)量和整體狀況[4]。故有必要更深入研究其具體作用機制。

本研究結(jié)果顯示，模型組小鼠頜下腺組織Fas以及FasL蛋白表達均高于其他各組，提示SS頜下腺組織存在Fas及FasL的高表達，促進細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞浸潤而使頜下腺受損而發(fā)病，說明細(xì)胞凋亡在SS發(fā)病中有一定的作用。正常組FasL表達明顯低于羥氯喹組；而與中藥組、中西藥組相比無顯著性差異。表明中藥養(yǎng)陰益氣活血方藥能降低干燥綜合征NOD小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL蛋白表達。模型組小鼠頜下腺組織FasL mRNA表達均高于對照組、中藥組、中西藥組；中西藥組表達明顯低于羥氯喹組。提示中藥養(yǎng)陰益氣活血煎劑和羥氯喹均能夠降低NOD小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL mRNA的表達，中藥與羥氯喹合用效果更好。說明中藥養(yǎng)陰益氣活血煎劑可能通過下調(diào)干燥綜合征NOD小鼠頜下腺組織Fas，F(xiàn)asL及其mRNA表達來調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，從而改善頜下腺組織的損害，達到有效治療。

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Effect of nourishing Yin， strengthening Qi and activating blood decoction on

Fas/FasL in salivary glands of NOD mice with sjogren′s syndrome

and their mRNA expression

WU Guo-lin1， LI Tian-yi2*， LU Wen-wen1， YU Guo-you1， FAN Yong-sheng2

（1. First Affiliated Hospital， Medical College， Zhejiang University， Hangzhou 310003， China；

2. Zhejiang Chinese Medicine University， Hangzhou 310053， China）

[Abstract] Objective： To observe the effect of nourishing Yin， strengthening Qi and activating blood decoction on Fas/FasL in salivary glands of NOD mice with Sjogren′s syndrome and their mRNA expression. Method： Thirty-two NOD mice were randomly divided into the model group， the traditional Chinese medicine group （TCM group， orally given 0.4 mL nourishing Yin， strengthening Qi and activating blood decoction as per 100 g?kg-1 everyday）， the hydroxychloroquine group （given 0.4 mL hydroxychloroquine as per 60 mg?kg-1 everyday）， the traditional Chinese medicine and western medicine group （TCM WM group， given nourishing Yin， Strengthening Qi and activating blood decoction 50 g?kg-1and hydroxychloroquine 60 mg?kg-1， 0.4 mL everyday）， with eight mice in each group. Eight Balb/C mice were selected as the normal control group （normal group）. All of mice were killed after eight weeks， and their submaxillary glands were dissected. The expression levels of Fas/FasL were examined by immunohistochemical method， and the FasL mRNA was detected by RT-PCR. Result： The expression levels of Fas/FasL in salivary glands of the model group were higher than that of other groups （P

篇10

【摘要】

目的：觀察清胰化積(Qingyi Huaji， QYHJ)方對人胰腺癌CFPAC1細(xì)胞系裸小鼠移植瘤的抑瘤作用及血清白細(xì)胞介素6（interleukin6，IL6）、白細(xì)胞介素8（interleukin8，IL8）和腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factorα，TNFα）表達水平的影響。方法：40只裸小鼠右前肢腋部皮下移植胰腺癌瘤塊建立荷瘤模型。造模成功的裸小鼠隨機分為模型組、卡培他濱組、低劑量(36 g/kg)清胰化積方組和高劑量(72 g/kg)清胰化積方組，每組10只，分別采用含阿拉伯膠的檸檬酸緩沖液、卡培他濱混懸液及清胰化積方藥液灌胃。治療5周后，眼眶取血，酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血清IL6、IL8和TNFα含量；脫頸椎處死裸小鼠，剝?nèi)∧[瘤，稱取質(zhì)量，測量腫瘤直徑，計算抑瘤率。結(jié)果：低劑量清胰化積方組CFPAC1裸小鼠移植瘤質(zhì)量下降，與模型組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P

【關(guān)鍵詞】 胰腺癌; 復(fù)方; 白細(xì)胞介素6; 白細(xì)胞介素8; 腫瘤壞死因子α; 裸小鼠

Pancreatic carcinoma is a common malignant tumor in digestive system with rapid progress and high incidence of metastasis. At the time of diagnosis， most patients with pacreatic carcinoma have already been at the advanced stage with a 5year survival rate less than 5%［1］. A study in Cancer Hospital of Fudan University with 134 patients of advanced pancreatic cancer suggested an effective tumor inhibition role of Qingyi Huaji (QYHJ) decoction， a compound traditional herbal medicine. The results showed that the 1， 3 and 5year survival rates were 25.0%， 14.1% and 8.4%， respectively， with a median survival time of 7.6 months. Sixteen patients survived for more than 3 years (5 survived for more than 5 years) ［2， 3］. The survival rates were higher than the results in other similar studies with Western medicine. Although indicated with an effective tumor inhibition function， the mechanism of QYHJ decoction has hot been further explored yet. It has been reported that serum cytokine levels and its immunomodulatory effects are closely related to the development of pancreatic cancer［4］. In this study， we investigated the effects of QYHJ decoction on tumor inhibition and serum levels of interleukin6 (IL6)， interleukin8 (IL8) and tumor necrosis factorα (TNFα) in nude mice with transplanted tumors of human pancreatic cancer.

1 Materials and methods

1.1 Experimental materials

1.1.1 Cell culture and animals

Human pancreatic adenocarcinoma cell line CFPAC1 was purchased from the Institute of Biochemistry and Cell Biology， Shanghai Institute for Biological Sciences， Chinese Academy of Sciences. According to the protocol of American Type Culture Collection (ATCC)［5］， the cell line was cultured in Iscove’s modified Dulbecco’s medium (IMDM) supplemented with 10% fetal bovine serum， sodium pyruvate and 4(2hydroxyethyl)1piperazineethanesulfonic acid (HEPES) in a humidified atmosphere containing 5% CO2 at 37 ℃. Female 5weekold BALB/cnu/nu mice， SPF grade (Certification No. 122)， weighing from 18 to 22 g， were purchased from Shanghai Experimental Animal Center of the Chinese Academy of Sciences.

1.1.2 Therapeutic medication

QYHJ decoction， composed of Baihuasheshecao (Herba Hedyotidis) 30 g， Banzhilian (Herba Scutellariae Barbatae) 30 g， Moyu (Rhizoma Amorphophalli Rivieri) 30 g， Jiaogulan (Herba seu Radix Gynostemmatis) 30 g and Baidoukou (Fructus Amomi Rotundus) 6 g， was provided by Jiangyin Tianjiang Pharmaceutical Co.， Ltd. (Jiangsu， China). According to body surface area conversion table between humans and mice， herb medication were prepared in QYHJ decoction groups at a dose of 36 g/kg or 72 g/kg， which including the crude drug of 1.8 g/mL and 3.6 g/mL， respectively， and oral administration was 0.4 mL/d per 20 g body weight for nude mice. Capecitabine (F. HoVmanLa Roche， Shanghai， 0.5 g/tablet， certification No. H20073024) was crushed and dissolved in 100 mL citrate buffer (pH 6.0， 40 mmol/L) containing 5% (w/v) Arabic gum［6］.

1.1.3 Main reagents and instruments

Sunrise F039300A microplate reader was provided by TECAN， Switzerland; enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) kits of IL6， IL8 and TNFα were purchased from Shanghai Senxiong BioTechnology Co.， Ltd.， China; IMDM was purchased from Gibco Company， USA， (lot No. 12200036); fetal bovine serum was provided by PAA Company， Austria (lot No. A151081479).

1.2 Methods

1.2.1 Preparation of mice model

CFPAC1 cells in logarithmic growth phase were prepared as single cell suspension at a concentration of 1×107 cells/mL and were subcutaneously inoculated into the right flank of five nude mice at a dose of 2×106 cells. Three weeks later， mice were sacrificed by cervical dislocation when the xenografts size reached 1 cm in diameter. Tumors were excised from mice， cut into small pieces and transplanted subcutaneously into the right forelimb armpit of another 40 nude mice.

1.2.2 Experimental grouping and medication

Seven days after transplantation， as the mean size of the tumors was about 0.4 cm in diameter， mice were randomly pided into untreated group (Arabic gum)， capecitabine group， lowdose QYHJ decoction group (36 g/kg) and highdose QYHJ decoction group (72 g/kg)， with 10 mice in each group. For untreated group， citrate buffer solution (containing 5% Arabic gum) was administered by gavage， 0.4 mL per mouse， once a day for 5 weeks; for capecitabine group， capecitabine suspension 0.4 mL per mouse by gavage， once a day， 5 days per week， 3 weeks continuously［7］; for lowdose QYHJ decoction group， 1.8 g/mL QYHJ 0.4 mL per mouse (36 g/kg)， once a day for 5 weeks; for highdose QYHJ decoction group， 3.6 g/mL QYHJ 0.4 mL per mouse (72 g/kg)， once a day for 5 weeks［8］.

1.3 Experimental detection

1.3.1 Observation of general condition

Fur color， motility， nutritional status， body weight， mental condition and tumor size of the nude mice were observed and recorded daily.

1.3.2 Tumor volume changes

The maximal and minimal diameters of the tumor were measured by a vernier caliper once a week. Tumor volume and the inhibition rate were calculated according to calculation formula of tumor volume (V): V=1/2 (maximal diameter×minimal diameter2) and inhibition rate of tumor volume=(1－average tumor volume of treatment group/average tumor volume of control group)×100%. The growth curve was drawn according to the tumor volume measured daily.

1.3.3 Tumor inhibition rate

Mice were sacrificed 1 day after the last time of treatment. Tumor weight was estimated and the tumor inhibition rate was calculated. Tumor growth inhibition rate=(1－average tumor weight of treatment group/average tumor weight of control group)×100%。

1.3.4 Detection of serum levels of IL6， IL8 and TNFα Concentrations of serum IL6， IL8 and TNFα were examined by ELISA， using blood sample from eye socket which was stored at room temperature for 30 min， centrifuged (1 000×g) for 15 min， and then cryopreserved at －80 ℃.

1.4 Statistical analysis

Statistical analysis was carried out with STATA software (version 10.0， College Station， Texas， USA). The measurement data were presented as x±s. One way analysis of variance was used to compare the differences between groups (Symmetry transformation was used for nonnormal distribution or variance nonhomogeneity of the data)， and the pairwise comparison was performed with Sidak method. Linear regression analysis was used to evaluate the correlation between cytokine level and tumor weights. Scatterplot graphs were created， and regression equations were built up. For all tests， P values less than 0.05 were considered statistically significant.

2 Results

2.1 General condition of the nude mice

During the first four weeks after successful modeling， nude mice in each group had balanced appearances， agile movements， flexible responses and increased body weights. As the tumor volume increased， life status of the mice worsened gradually， especially for untreated group. Two mice in the untreated group appeared as dark fur， loss of weight and energy at the fifth week. No deaths were observed until the mice were sacrificed. The whole body weight changes of nude mice showed an increasing tendency， however without significant differences between groups at each time point (P>0.05， Table 1).Table 1 Body weight of nude mice in four groups(略)

2.2 Effects of QYHJ decoction on volume of transplanted tumors

Tumor with size of grain rice， could be detected immediately after the tumor pieces were subcutaneously transplanted into the nude mice. Primary tumor mass size was measurable after one week， with 100% successful modeling. At the initial stage， transplanted tumors were characterized with slow growth， spherical or hemispherical appearance， and movable. The tumors became harder gradually， with different inpidual size. After treatment， the average volumes of tumor in the capecitabine group， and lowdose and highdose QYHJ groups were less than that in the untreated group， and the inhibition rates of tumor volume were 38.24%， 16.18% and 13.24% in those three groups respectively. There was no statistical difference for tumor volume between groups (P>0.05， Table 2 and Figure 1). Table 2 Tumor volumes and growthinhibition rates of nude mice in different groups（略）

2.3 Effects of QYHJ decoction on tumor weights

Tumor weight decreased significantly in the capecitabine and lowdose QYHJ groups as compared with the untreated group (P0.05) and between the QYHJ groups and the capecitabine group (P>0.05， Table 3).Table 3 Tumor weights and growthinhibition rates of nude mice in different groups（略）

2.4 Effects of QYHJ decoction on serum levels of IL6， IL8 and TNFα Compared with the untreated group， serum levels of IL6 and TNFα in the high and lowdose QYHJ groups decreased significantly (P

2.5 Correlation of tumor weights and serum levels of IL6， IL8 and TNFα As mentioned above， there were statistical differences in serum levels of IL6， IL8 and TNFα between the QYHJ groups and the untreated group. The relationships between transplanted tumor weight and serum levels of cytokines were further analyzed. The result showed a positive linear correlation between tumor weight and serum level of IL6 in all groups (R2=0.32， P

3 Discussion

QYHJ decoction is a Chinese herbal compound based on the pathological mechanism of “noxious dampness， toxic heat and accumulation of pathogenic dampness， heat and toxin” for pancreatic cancer in traditional Chinese medicine［9］. The product is made from Chinese herbs by using Moyu as monarch drug， which can reduce phlegm and resolve masses， detoxify and relieve swellings， dissipate blood stasis and relieve dyspepsia. Both Baihuasheshecao and Banzhilian are used as ministerial drugs， with the function of heatclearing and detoxifying， removing dampness and deswelling， and activating blood analgesia. Jiaogulan is used as an adjuvant drug of strengthening healthy qi and disintoxication， resolving phlegm and anticancer. Baidoukou is used as the messenger drug for dissipating dampness to normalize stomach and promoting qi circulation to alleviate middle energizer. Clinical studies showed that QYHJ decoction was effective in advanced pancreatic cancer patients by heatclearing and detoxifying， removing dampness and deswelling， regulating qi and dissipating blood stasis［2， 3］. We previously found that QYHJ decoction could inhibit the proliferation of human pancreatic cancer cell line SW1990 in vivo， and tumor weight in QYHJ group was significantly lower than that in the negative control group (P

The results suggested that inhibition rates of tumor weight in the low and highdose QYHJ groups were 34.4% and 32.8% respectively， with statistical significance for the lowdose group when compared with the untreated group (P0.05). Moreover， heterogeneous changes were noticed in the capecitabine group and the QYHJ group with central necrosis， but no obvious tumor necrosis was detected in the untreated group. Therefore， disproportionate relation of tumor volume and weight may be due to internal necrosis in some tumor tissues or the possibility of measurement errors in the body surface.

The results showed that serum levels of IL6， IL8 and TNFα in the QYHJ groups were significantly lower than those in the untreated group (P

TNFα has the function of killing or inhibiting cancer cells， but in current study we observed that the higher the serum TNFα level， the heavier the tumor weight， which indicated an acceleration of TNFα secretion accompanying with the growth of tumor. As the tumor volume increased， serum TNFα level showed an increasing trend accordingly; and the decreased TNFα level revealed that tumor was under control to a certain extent. Serum TNFα level and its relationship with tumor progression remains to be elucidated.

IL6 is a cytokine with the function of multiple immunoregulation. Many tumor cells may produce and secrete IL6. Some studies showed that 174G/C IL6 gene polymorphism influenced circulating IL6 levels. Increased IL6 serum level may be positively correlated with tumor size and the presence of liver metastases in patients with pancreatic adenocarcinoma (P

In the present study， serum IL6 level in untreated group was the highest. No significant difference was found between the capecitabine group and the untreated group， while the difference was statistically significant in the low and highdose QYHJ groups as compared with the untreated group (P

In the process of tumor development， high expression levels of cytokines such as IL6， IL8 and TNFα are usually signals of progression of disease or poor prognosis. They are closely related to the occurrence of cancer cachexia. In the present study， serum IL6， IL8 and TNFα levels in transplanted tumor of human pancreatic cancer cell line CFPAC1 in nude mice were linearly positively correlated with tumor weight. As tumor weights in QYHJ groups were significantly lower than that in the untreated group， cytokine levels were correspondingly lower. The results demonstrated that serum levels of IL6， IL8 and TNFα were important indicators for evaluating the sensitivity of pancreatic cancer to treatment of QYHJ decoction.

In conclusion， conventional dose of QYHJ decoction (36 g/kg) has an obvious antitumor effect on the subcutaneously transplanted tumors of human pancreatic carcinoma in nude mice. The mechanism may be related to downregulation of cytokines such as IL6， IL8 and TNFα.

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