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篇1

關(guān)鍵詞：大壩工程；質(zhì)量控制

中圖分類號：O213.1 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：

0前言

大壩工程是水利水電的基礎(chǔ)工程，對水利水電投入生產(chǎn)后的安全與穩(wěn)定起著非常重要的作用，因此確保大壩工程施工質(zhì)量是非常必要的。因此在大壩施工全過程中應(yīng)采取有效的措施，對施工全過程進行控制，確保施工質(zhì)量達到預(yù)期的質(zhì)量目標(biāo)，為投入生產(chǎn)后的可靠運行奠定基礎(chǔ)。

1制定水利水電大壩工程施工質(zhì)量管理措施

針對大壩工程實際建立健全質(zhì)量保證體系，嚴(yán)格按質(zhì)量保證體系要求進行施工，根據(jù)分工負責(zé)、互相協(xié)調(diào)的管理原則，層層落實責(zé)任、風(fēng)險和利益，做到各司其職、各負其責(zé)，使工程全過程、全方位處于質(zhì)量受控狀態(tài)。認真貫徹“預(yù)防為主”和“事先把關(guān)”的質(zhì)量管理方針，調(diào)動一切積極因素，充分發(fā)揮項目部質(zhì)安部門專職質(zhì)檢工程師的作用，以工序質(zhì)量控制為核心，通過設(shè)置工序預(yù)控點，進一步強化工序質(zhì)量的自檢、互檢和交接檢查的管理，做到自檢和專檢相結(jié)合，普檢與抽檢相結(jié)合，確保嚴(yán)格按照施工圖設(shè)計和施工規(guī)范、規(guī)程的要求組織施工，把各種可能發(fā)生的事故消滅在萌芽狀態(tài)。配齊滿足工程施工需要的人力資源和設(shè)備資源。有針對性地組織各類施工人員學(xué)習(xí)，進行必要的施工前崗位培訓(xùn)，以保證工程施工的技術(shù)要求，特殊工種作業(yè)人員須持有效上崗操作證，技術(shù)人員、組織管理人員將熟悉本工程的技術(shù)、工藝要求，了解工程的特點和現(xiàn)場情況，以確保工程施工能正常運轉(zhuǎn)。保證施工中的資料齊全，根據(jù)工程驗收和公司質(zhì)量體系對工程竣工資料和施工管理控制資料的要求，做好各類資料的收集、保存、歸檔工作，保證文件資料控制的有效性和可追溯性，確保工程竣工資料的準(zhǔn)確性、及時性和完整性。合理的施工進度也是保證工程質(zhì)量的必要手段之一，對進度進行合理的計劃和實施，確保實現(xiàn)優(yōu)質(zhì)、高效、低成本的目標(biāo)。加強施工過程的試驗與檢驗也是確保水利水電大壩工程質(zhì)量的關(guān)鍵。

2完善水利水電大壩工程施工的技術(shù)措施

認真學(xué)習(xí)、領(lǐng)會設(shè)計意圖、技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、施工規(guī)范，優(yōu)化施工方案。以優(yōu)化的施工方案要求，進行設(shè)備選型，確保進場設(shè)備的先進性，以先進的施工設(shè)備保證工藝的實施，以科學(xué)的施工工藝保證工程質(zhì)量目標(biāo)的實現(xiàn)。做好圖紙會審及技術(shù)交底，施工前對會審無問題的施工技術(shù)資料按標(biāo)準(zhǔn)要求加蓋“有效文件”、“受控文件”印章，以防圖紙等資料誤用，對所有施工人員將進行書面技術(shù)交底，使之明確標(biāo)準(zhǔn)、操作規(guī)范、注意事項等，并落實在施工全過程中。嚴(yán)格按程序施工，嚴(yán)格執(zhí)行開工報告制度、方案審批制度、隱蔽工程檢查制度、變更設(shè)計批復(fù)制度。不得違背施工程序，超越施工權(quán)限，自行安排施工。對關(guān)鍵工藝、工序?qū)⒂屑夹g(shù)人員跟班作業(yè)，指導(dǎo)、督察，將設(shè)主要負責(zé)人帶班，使質(zhì)量工作的每一環(huán)節(jié)落到實處。測量，根據(jù)設(shè)計圖紙給定的測量基線和坐標(biāo)，利用全站儀、經(jīng)緯儀進行定位和施工放樣，利用水準(zhǔn)儀進行標(biāo)高控制，堅持測量復(fù)核制度，不經(jīng)換手復(fù)核簽字的測量資料不用于指導(dǎo)施工。做好水泥、砂漿、砼、鋼材、石料、砂、碎石等的取樣試驗，確保材料及配合比質(zhì)量。根據(jù)工程的具體要求和特點，組織專業(yè)技術(shù)人員編寫具體的施工組織設(shè)計，嚴(yán)格按照公司質(zhì)量體系程序的內(nèi)容，編寫施工計劃、優(yōu)化施工方案，確定適用、先進的施工設(shè)備并落實配備，施工過程中著重控制手段，檢驗設(shè)備、輔助裝置、資源（包括人力）以達到規(guī)定的質(zhì)量要求，并根據(jù)施工技術(shù)要求，對各重要工序，將分部分項制定詳盡的施工方案，編寫施工工藝，以保證該工程的質(zhì)量達到要求。若工程施工時因客觀原因發(fā)生變化，及時對已制定的施工方案和有關(guān)程序進行修訂和變更，并嚴(yán)格按照質(zhì)量體系控制程序的要求，報送有關(guān)部門論證審批后方可實施，確保程序的科學(xué)性和可行性，并做好變更后的標(biāo)識和記錄工作。開工前做好各部位、各工序的技術(shù)交底工作，確保施工操作的準(zhǔn)確性和規(guī)范性。

3做好水利水電大壩工程施工全過程的質(zhì)量控制

圍堰施工，按監(jiān)理人批準(zhǔn)的施工圖紙進行圍堰和導(dǎo)流建筑物的施工，圍堰施工的上升速度確保滿足安全渡汛標(biāo)準(zhǔn)及擋水的施工斷面要求，并保證圍堰的施工斷面在各種運行工況下處于穩(wěn)定和安全狀態(tài)。施工時，注重基礎(chǔ)巖石開挖爆破對圍堰安全的影響，確保圍堰內(nèi)側(cè)與開挖區(qū)留有一定的距離。土方開挖，壩基、岸坡土方開挖，從上至下分層分段依次進行，施工中隨時作成一定的坡勢，以利排水，開挖過程中盡量避免邊坡穩(wěn)定范圍內(nèi)形成積水。對壩基和岸坡易風(fēng)分化崩解的土層，開挖后不能及時回填的，采取預(yù)留保護層的方法，機械開挖土方時，實際施工的邊坡坡度適當(dāng)留有修坡余量，再人工修整，以滿足圖紙要求的坡度和平整度。在開挖過程中，隨挖隨校核測量開挖平面位置、水平標(biāo)高、控制樁號、水準(zhǔn)點和邊坡坡度是否符合施工圖紙要求，在平地開挖時，在開挖區(qū)周圍設(shè)擋水壩和開挖周邊排水溝及集水坑抽水等措施，阻止外水流入場地，并有效排除積水。石方開挖，石方開挖前，將山坡上所有危石及不穩(wěn)定巖體撬挖排除，開挖采用自上而下，對高度較大的邊坡，分梯段開挖，河床部位開挖深度較大時，采用分層開挖方法，梯段高度根據(jù)爆破的方式，施工機械性能及開挖區(qū)布置等因素確定，垂直邊坡梯段高度不大于10m，隨高開挖高程下降，及時對坡面進行測量檢查以防偏離設(shè)計開挖線，避免形成高邊坡后再進行處理，開挖邊坡的支護在分層開挖過程中逐層進行，上層的支護保證下一層的開挖順利進行。基礎(chǔ)開挖，對鄰近水平建基面，預(yù)留保護層，保護層厚度由現(xiàn)場爆破試驗確定，并采用小炮分層爆破的開挖方法。砼工程質(zhì)量保證措施，模板經(jīng)過結(jié)構(gòu)設(shè)計，保證有足夠的強度和剛變，裝拆方便，能承受砼澆筑和振搗的側(cè)向壓力和振動力，防止產(chǎn)生移位，確保砼結(jié)構(gòu)外形尺寸準(zhǔn)確，并有足夠的密封性，以免漏漿。鋼筋作業(yè)包括鋼筋、鋼筋網(wǎng)、鋼筋骨架和錨筋等的制作加工、綁焊、安裝和預(yù)埋工作。鋼筋采購必須有出廠質(zhì)量保證書，沒有出廠質(zhì)量保證書的鋼筋，不能采購，對使用的鋼筋，將嚴(yán)格按規(guī)定取樣試驗合格后方能使用。鋼筋焊接，操作人員將持證上崗，焊接頭經(jīng)過試驗合格后，才允許正式作業(yè)，在一批焊件中，進行隨機抽樣檢查，并以此作為加強對焊接作業(yè)質(zhì)量的監(jiān)督考核。氣壓焊施焊前，鋼筋端面應(yīng)切平，鋼筋邊角毛刺及端面上的鐵銹、油污等清除干凈，并經(jīng)打磨露出金屬光澤。鋼筋綁扎完畢，經(jīng)過監(jiān)理工程師驗收合格后，方可澆筑砼，在砼澆筑過程中，將派鋼筋工值班，以便及時處理在施工過程中發(fā)生的鋼筋及預(yù)埋移位等問題。砼的質(zhì)量保證措施，根據(jù)砼等級要求進行砼配合比試驗，并將試驗成果申報監(jiān)理工程師審批，監(jiān)理工程師同意后方可使用，使用過程中，將嚴(yán)格按配合比執(zhí)行?；炷翝仓鳂I(yè)應(yīng)連續(xù)進行，如因故發(fā)生中斷，其中斷時間應(yīng)小于前次混凝土的初凝時間，超過中斷時間，則按工作縫處理，并立即向監(jiān)理工程師報告。在澆筑分層的上層砼澆筑前，對下層砼的施工縫面，按監(jiān)理人批準(zhǔn)的方法進行沖毛或鑿毛處理。為避免砼面板表面發(fā)生干縮現(xiàn)象，采取保溫、保濕措施，溫度控制措施，面板砼澆筑時，選擇在相對的低溫時段，砼終凝后鋪蓋草袋。保持長流水養(yǎng)護直至水庫蓄水為止。

篇2

[關(guān)鍵詞] 表沒食子兒茶素沒食子酸酯；HeLa；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

[中圖分類號] R285 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2014）08（c）-0029-05

Effects of EGCG on cell apoptosis in cervical cancer HeLa cells and expression of bcl-2/bax

QIN Jing HONG Li

The Second Department of Gynecology， Renmin Hospital of Wuhan University， Hubei Province， Wuhan 430060， China

[Abstract] Objective To explore the effect of EGCG on cell apoptosis in cervical cancer line HeLa cells and expression of bcl-2/bax. Methods HeLa cells were cultured in vitro， and they were divided into two groups， including control group and experimental group. The control group was received only the culture medium， and the experimental group was treated by EGCG at different concentrations for 24、48、72 h respectively. The cell survival of the two groups were determined by the MTT method； the changes of cell morphology were observed by inverted microscope； apoptosis and cell cycle were analyzed by flow cytometry； the relative activity of caspase-3 was monitored by spectrophotometer； the changes of protein expression of bcl-2 and bax were detected by Western blot. Results From the data of MTT， the cell proliferation of human cervical cancer HeLa cells was inhibited by EGCG （10-100 μg/mL） in a dose-dependent and time-dependent manner. Typical apoptosis morphology of HeLa cells was observed by inverted microscope. Flow cytometry assays showed that EGCG significantly induced apoptosis in HeLa cells. 48 h after treated with EGCG （20， 40， 80 μg/mL）， the apoptosis rate of the experimental group were increased gradually， they were 12.4%， 23.4%， 35.4% respectively， higher than that of the control group （3.3%） obviously. Flow cytometry assays demonstrated that EGCG blocked the cell cycle at the G1 to S transition and decreased the percentage of S-phase cells. The relative activity of Caspase-3 of experimental group were （1.36±0.07）， （1.85±0.06） and （2.45±0.07） respectively， higher than that of the control group （0.93±0.06）， the differences were statistically significant （P < 0.05）. The data of Western blot showed that EGCG down-regulated bcl-2 and up-regulated bax in a dose-dependent manner. Conclusion EGCG can inhibit the proliferation of HeLa cells and promote apoptosis， and the anticancer effect of EGCG may be associated with the down regulation of bcl-2 expression and up regulation of bax expression， as well as the increase of relative activity of Caspase-3. EGCG may be a promising antitumor agent for cancer treatment.

[Key words] EGCG； HeLa cell； Caspase-3

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤，其在全球惡性腫瘤中發(fā)病率高居第2位，病死率居第4位，而在發(fā)展中國家其發(fā)病率和病死率均高居第2位，全球每年有超過25萬患者死于宮頸癌[1]。近年來，宮頸癌發(fā)病率趨于年輕化，嚴(yán)重危害著婦女的健康。宮頸癌患者死亡的主要原因是腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。化療藥物在一定程度上能抑制腫瘤細胞增殖和轉(zhuǎn)移，但傳統(tǒng)的化療藥物毒性大且由于腫瘤耐藥性，臨床上患者療效并不理想，且部分患者難以耐受。因此從天然植物中尋找高效低毒的具有抗腫瘤活性的成分成為了國內(nèi)外研究熱點。綠茶是公認的健康飲料，近年來發(fā)現(xiàn)其富含有抗腫瘤成分，包括表兒茶素（epicatechin，EC）、表兒茶素沒食子酸酯（epicatechin gallate，ECG）、表沒食子兒茶素（epigallocatechin，EGC）和表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）。在這些茶多酚中，EGCG是含量最高且藥理活性最強的單體，其具有廣泛的藥理活性，包括抗腫瘤、降血壓、降脂、降血糖及抗氧化等。研究證實，EGCG對肝癌、乳腺癌、前列腺癌等多種腫瘤均有拮抗作用[2-5]。本研究旨在探討EGCG對宮頸癌HeLa細胞凋亡及bcl-2/bax表達的影響，以期為臨床應(yīng)用提供理論研究基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

人宮頸癌細胞系HeLa細胞購自中國科學(xué)院上海細胞庫；EGCG購于Sigma公司（E4143，純度≥95%）；胎牛血清購自Invitrogen公司；RPMI1640培養(yǎng)液購于杭州四季青生物材料研究所；噻唑藍（MTT）試劑盒購于武漢谷歌生物科技有限公司；AnnexinV/PI細胞凋亡檢測試劑盒購于Bender公司；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase-3）活性檢測試劑盒購于南京凱基生物科技發(fā)展有限公司。Bcl-2、bax抗體購于美國Cell Signaling Technology公司；辣根酶標(biāo)記兔抗山羊IgG購自武漢博士德生物科技有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 細胞培養(yǎng) 將HeLa細胞培養(yǎng)于含10%小牛血清、100 U/mL青霉素、100 μg/mL鏈霉素的PMI1640培養(yǎng)液中，置于37℃，5%CO2，濕度飽和，培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，取對數(shù)生長期細胞用于實驗。

1.2.2 MTT法檢測細胞增殖抑制率 取對數(shù)生長期的HeLa細胞，調(diào)整細胞濃度，以1×104/mL的濃度接種于96孔板，每孔200 μL，待細胞貼壁后分別加入EGCG終濃度為0、10、20、40、60、80、100 μg/mL的培養(yǎng)液，并設(shè)立調(diào)零孔。每個濃度設(shè)5個復(fù)孔，繼續(xù)培養(yǎng)24、48、72 h，于實驗結(jié)束前4 h加入MTT試劑20 μL/孔，繼續(xù)孵育4 h，吸掉上清，加入二甲基亞砜（DMSO）150 μL/孔，搖床上振蕩10 min，結(jié)晶充分溶解后酶標(biāo)儀上檢測570 nm處的吸光值（A值），細胞增值抑制率=[1-（實驗組平均A值-調(diào)零孔A值）/（對照組平均A值-調(diào)零孔A值）]×100%。

1.2.3 顯微鏡下觀察細胞形態(tài) 取對數(shù)生長期細胞，調(diào)整濃度接種于12孔板中，貼壁后加入EGCG終濃度為0、10、20、40、60、80、100 μg/mL的培養(yǎng)液連續(xù)培養(yǎng)24、48、72 h后置于倒置顯微鏡下觀察細胞生長、形態(tài)等情況。

1.2.4 流式細胞儀檢測細胞凋亡 將對數(shù)生長期細胞以1×106/mL濃度接種于6孔培養(yǎng)板內(nèi)，貼壁后分別加入EGCG終濃度分別為0、20、40、80 μg/mL的培養(yǎng)液，培養(yǎng)48 h后，收集細胞，離心固定后加入AnnexinV-FITC和PI，室溫避光染色。篩網(wǎng)過濾后送流式細胞儀檢測。

1.2.5 流式細胞儀檢測細胞周期 細胞接種及分組同上，培養(yǎng)48 h后，收集細胞，70%乙醇4℃固定過夜，37℃水浴30 min，加入PI，4℃避光孵育15 min。篩網(wǎng)過濾后流式細胞儀檢測。

1.2.6 分光光度法檢測Caspase-3活性變化 細胞接種及分組同上，培養(yǎng)48 h后，收集細胞，分別加入預(yù)冷裂解緩沖液，冰浴裂解15 min，1200 r/min離心15 min，取上清按試劑盒說明書操作，酶標(biāo)儀上405 nm測定Caspase-3的酶活性，OD405為樣品中Caspase-3催化產(chǎn)生pNA（p-nitroaniline）產(chǎn)生的吸光度，可反映Caspase-3活性強弱。

1.2.7 Western blot檢測bcl-2、bax蛋白表達變化 細胞接種及分組同上，處理48 h后收集細胞，參照細胞漿蛋白抽提試劑盒說明書進行操作，提取細胞總蛋白，并測定蛋白濃度，蛋白樣品加入1/5體積的5×上樣緩沖液，沸水煮沸5 min，根據(jù)蛋白濃度以每孔20 μg/孔上樣，行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，然后電轉(zhuǎn)至PVDF膜上，用室溫封閉1 h，分別加入1∶1000稀釋的兔抗人bcl-2、bax蛋白，4℃過夜。β-actin作為內(nèi)參，TBST洗膜3次，加入1∶1000稀釋的辣根酶標(biāo)記的兔抗山羊IgG，室溫孵育2 h，同樣洗膜3次，ECL發(fā)光液顯色，觀察各條帶深淺變化。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EGCG對HeLa細胞增殖的影響

如圖1所示，EGCG在10～100 μg/mL范圍內(nèi)均可抑制HeLa細胞增殖，且隨著EGCG濃度的升高和處理時間的延長，增殖抑制作用也逐漸增強，呈濃度和時間依賴效應(yīng)。

圖1 不同濃度表沒食子兒茶素沒食子酸酯對HeLa細胞抑制率的影響

2.2 細胞形態(tài)觀察

顯微鏡下對照組細胞生長旺盛，折光率較高，胞體較大，成梭形或多邊形，胞質(zhì)均勻透明，幾乎無漂浮細胞，且隨培養(yǎng)時間的延長形態(tài)變化不明顯。EGCG處理組的細胞增殖明顯受到抑制，且隨著藥物濃度的增加和處理時間的延長，細胞逐漸變小、變圓、折光率減弱、核濃縮等，部分脫落漂浮于培養(yǎng)瓶中。

2.3 EGCG對HeLa細胞凋亡的影響

流式細胞儀檢測結(jié)果顯示，EGCG能誘導(dǎo)HeLa細胞凋亡。如圖2所示，EGCG（濃度分別為20、40、80 μg/mL）處理HeLa細胞48 h后，細胞凋亡率分別為12.4%、23.4%、35.4%，明顯高于對照組凋亡率（3.3%）。

A：0 μg/mL；B：20 μg/mL；C：40 μg/mL；D：80 μg/mL

圖2 流式細胞儀檢測表沒食子兒茶素沒食子酸酯對HeLa細胞

凋亡率的影響

2.4 EGCG對HeLa細胞周期的影響

流式細胞儀檢測細胞周期數(shù)據(jù)顯示，EGCG濃度分別為0、20、40、80 μg/mL處理HeLa細胞48 h后，能抑制HeLa細胞的G1期行進和G1/S轉(zhuǎn)換，S期細胞比例降低，表示EGCG能夠阻滯細胞周期。見圖3。

A：0 μg/mL；B：20 μg/mL；C：40 μg/mL；D：80 μg/mL

圖3 流式細胞儀檢測表沒食子兒茶素沒食子酸酯

對HeLa細胞周期的影響

2.5 EGCG對HeLa細胞Caspase-3活性的影響

對照組HeLa細胞Caspase-3相對活性為（0.93±0.06），實驗組（EGCG濃度分別為20、40、80 μg/mL）處理HeLa細胞48 h后，HeLa細胞Caspase-3相對活性分別為（1.36±0.07）、（1.85±0.06）、（2.45±0.07）。與對照組比較，EGCG組Caspase-3相對活性升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見圖4。

與0 μg/mL比較，#P < 0.05

圖4 表沒食子兒茶素沒食子酸酯對HeLa細胞半胱氨酸天冬氨酸

蛋白酶相對活性的影響

2.6 EGCG對HeLa細胞bcl-2、bax蛋白表達的影響

EGCG處理HeLa細胞48 h后，結(jié)果顯示隨著EGCG濃度的升高，bax蛋白表達量也逐漸升高，而bcl-2蛋白表達量逐漸降低，灰度值分析顯示，實驗組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見圖5。

A

B

A：Western bloting圖；B：bcl-2和bax灰度值分析；與0 μg/mL比較，#P < 0.05

圖5 表沒食子兒茶素沒食子酸酯對HeLa細胞bcl-2、bax表達的影響

3 討論

細胞凋亡是多細胞機體維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要自我調(diào)節(jié)機制[6]，細胞凋亡與細胞增殖之間的平衡在腫瘤發(fā)生發(fā)展中具有重要意義[7]，細胞凋亡是程序化、多基因調(diào)控的細胞死亡過程，通過誘導(dǎo)細胞凋亡可能是腫瘤治療最有效的途徑之一，因此促進細胞凋亡已經(jīng)成為抗腫瘤研究的熱點。國內(nèi)外細胞實驗和動物實驗證實，EGCG在體內(nèi)外對多種腫瘤細胞的增殖具有抑制作用，并可促進細胞凋亡[8-13]。本研究也發(fā)現(xiàn)，EGCG在10～100 μg/mL濃度范圍均能抑制人宮頸癌HeLa細胞的增殖，且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴及時間依賴效應(yīng)。在倒置顯微鏡下可見到凋亡細胞的形態(tài)；流式細胞儀檢測結(jié)果顯示，EGCG處理HeLa細胞48 h后可誘導(dǎo)凋亡，且隨著藥物濃度的升高細胞凋亡率亦增加，呈濃度依賴效應(yīng)。細胞凋亡研究認為，Caspase家族的激活在細胞凋亡過程中起了關(guān)鍵性作用，被認為是誘發(fā)凋亡的直接效應(yīng)物。已發(fā)現(xiàn)的Caspase家族有10余種，其中Caspase-3是該家族的重要成員，是細胞凋亡過程中的關(guān)鍵酶。本研究發(fā)現(xiàn)，EGCG呈濃度依賴性的增加HeLa細胞Caspase-3相對活性，提示EGCG能抑制細胞增殖，并可能是通過增強細胞Caspase-3活性從而促進細胞凋亡。

為進一步探討EGCG誘導(dǎo)細胞凋亡，本研究檢測bcl-2、bax蛋白表達的變化，研究發(fā)現(xiàn)不同EGCG處理后，HeLa細胞bcl-2表達下調(diào)，bax表達上調(diào)。bcl-2是一種內(nèi)膜蛋白，主要存在于線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和核膜上，bcl-2在多種腫瘤細胞中表達，能通過增強線粒體膜電位，抑制鈣離子釋放，阻止核酸內(nèi)切酶活化，進而發(fā)揮抗凋亡作用；bax屬于bcl-2家族成員，其與bcl-2作用相反，可直接激活死亡效應(yīng)因子Caspase或改變細胞膜通透性引起細胞色素C釋放某些離子和小分子通過細胞膜，進而促進細胞凋亡。細胞bcl-2和bax比例改變可調(diào)節(jié)細胞凋亡[14]，當(dāng)bcl-2占優(yōu)勢時，細胞具有抗凋亡作用；當(dāng)bax過表達時，細胞容易在誘導(dǎo)劑作用下發(fā)生凋亡[15]。

綜上所述，EGCG可抑制HeLa細胞增殖并誘導(dǎo)細胞凋亡，其誘導(dǎo)細胞凋亡機制可能是通過上調(diào)bax蛋白表達并下調(diào)bcl-2蛋白表達，增加細胞Caspase-3活性。

[參考文獻]

[1] Jemal A，Bray F，Center MM，et al. Global cancer statistics [J]. CA Cancer J Clin，2011，61（2）：69-90.

[2] 張金煥，蔡林兒.綠茶提取物茶多酚抗癌作用的研究進展[J].華南國防醫(yī)學(xué)雜志，2012，26（5）：522-523.

[3] 劉曉亮，袁長吉，莊平，等.EGCG對口腔鱗癌細胞增殖及信號傳導(dǎo)通路的影響[J].華中科技大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2013，42（5）：530-534.

[4] 趙剛，李紅，史海濤，等.EGCG對肝癌細胞HepG2凋亡及脂肪酸合酶表達的影響[J].西安交通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2014，35（2）：245-248.

[5] 鄒少娜，林敏，陳波，等.EGCG誘導(dǎo)人胃癌MGC-803細胞凋亡相關(guān)基因的差異表達[J].中國腫瘤臨床，2013，40（13）：758-762.

[6] LaCasse EC，Mahoney DJ，Cheung HH，et al. IAP-targeted therapies for cancer [J]. Oncogene，2008，27（28）：6252-6275.

[7] Huang WS，Wang JP，Wang T，et al. ShRNA-mediated gene silencing of beta-catenin inhibits growth of human colon cancer cells [J]. World J Gastroenterol，2007，13（48）：6581-6587.

[8] Van-Aller GS，Carson JD，Tang W，et al. Epigallocatechingallate （EGCG），a major componet of green tea，is a dual phosphoinositide-3-kinase/mTOR inhibitor [J]. Biochem Biophys Res Commun，2011，406（2）：194-199.

[9] Tudoran O，Soritau O，Balacescu O，et al. Early transcriptional pattern of angiogenesis induced by EGCG treatment in cervical tumor cells [J]. J Cell Mol Med，2012，16（3）：520-530.

[10] Wu LY，De L，Watanabe T， et al. Metabolite modulation of Hela cell response to ENOX-2 inhibitors EGCG and phenoxodiol [J]. Biochm Biophys Acta，2011，1810（8）：784-789.

[11] 范麗萍，沈建箴，付海英，等.沒食子兒茶素沒食子酸酯對人急性單核細胞白血病細胞株U937的作用及機制研究[J].中國實驗血液學(xué)雜志，2010，18（2）：286-290.

[12] Wang H，Bian S，Yang CS，et al. Green tea polyphenol EGCG suppresses lung cancer cell growth through upregulating miR-210 expression caused by stabilizing HIF-1α [J]. Carcinogenesis，2011，32（12）：1881-1889.

[13] 蔣莎莉，羅朝陽，曹慧秋，等.表沒食子兒茶素沒食子酸酯對人結(jié)腸癌HT-29細胞G1期的阻滯作用[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2010，10（18）：3438-3442.

[14] Kim KY，Seol JY，Jeon GA，et al. The combined treatment of aspirin and radiation induces apoptosis by the regulation of bcl-2 and caspase-3 in human cervical cancer cells [J]. Caner Lett，2003，189（2）：157-166.