導(dǎo)語(yǔ)：艾葉炭化學(xué)成分分析一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

摘要：目的對(duì)艾葉炭中化學(xué)成分進(jìn)行分離及結(jié)構(gòu)鑒定，為炒炭存性理論以及艾葉炭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提升提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法采用回流提取法、CC（柱色譜）、HPLC及NMR對(duì)艾葉炭進(jìn)行提取、分離純化及化合物結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果從艾葉炭中分離出2個(gè)化合物，化合物1為槲皮素，化合物2為二十八烷醇。結(jié)論進(jìn)一步驗(yàn)證了炒炭存性理論，為艾葉炭的活性研究及臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：艾葉炭；槲皮素；二十八烷醇

艾葉炭由菊科多年生草本植物艾（ArtemisiaargyiLévl，etVant）的干燥葉經(jīng)高溫炮制而來(lái)。中藥艾葉被廣泛用作食物和草藥，具有溫經(jīng)止血、散寒止痛的功效。艾葉中含有揮發(fā)油、黃酮類、鞣質(zhì)類、三萜類等多種化學(xué)成分[1-8]，具有抗菌抗病毒、平喘鎮(zhèn)咳祛痰、保肝、抗腫瘤、抗氧化等多種藥理活性作用[9-12]。根據(jù)中藥炒炭存性理論，艾葉高溫炒炭過(guò)程是炭化而非灰化，炒炭后原指標(biāo)性成分桉油精消失[13]，但仍有部分有機(jī)物未炭化，且有新的化學(xué)成分生成[14]。同時(shí)炒炭后難溶性草酸鈣簇晶大幅減少產(chǎn)生游離鈣離子，止血作用明顯增強(qiáng)[15-17]。目前艾葉炭的化學(xué)研究十分稀少，在本課題組前期研究基礎(chǔ)上，艾葉炭地方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已被收載于2020年版《吉林省中藥飲片炮制規(guī)范》第40頁(yè)，本研究旨在對(duì)艾葉炭化學(xué)成分進(jìn)行研究，進(jìn)一步闡明中藥炒炭存性理論并為臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1材料與儀器

1.1藥材艾葉炭為實(shí)驗(yàn)室自制，產(chǎn)品批號(hào)為20200511。艾葉炮制過(guò)程：將艾葉飲片凈選，除去雜質(zhì)、梗及灰屑，揉散置滾筒式炒藥機(jī)中，設(shè)置鍋底溫度為180℃，轉(zhuǎn)速為20r·min-1，待艾葉炒制冒黃煙，取少量水均勻噴灑，翻炒16min左右，待艾葉表面焦黑色，炒干，滅盡火星，取出，放涼得艾葉炭。其外觀呈不規(guī)則碎片，表面為黑褐色，符合2020年版《吉林省中藥飲片炮制規(guī)范》中的艾葉炭標(biāo)準(zhǔn)。1.2試劑與儀器乙腈（HPLC，F(xiàn)isherCo.，美國(guó)），磷酸（HPLC，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，中國(guó)）甲醇（AR，HPLC，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，中國(guó)），正己烷（AR，HPLC，北京化工廠，中國(guó)），乙酸乙酯（AR，HPLC，廣東光華科技股份有限公司，中國(guó)），純化水為實(shí)驗(yàn)室自制；核磁共振光譜儀（1HNMR：400MHz，13CNMR：100MHz，MerkCo.，德國(guó)），使用CDCl3和DMSO-d6為溶劑，高效液相色譜儀（Aglient：1260In?nityII，美國(guó)；Waters：600Controller，Delta600，2487，美國(guó)），精密電子天平（FA1204B上海菁海儀器有限公司，中國(guó)），層析用硅膠（200-300目，青島海洋化工廠，中國(guó)），高效液相色譜柱（SHIMADZUC1810mm×250mm；GSA10250SIL1900110mm×250mm，環(huán)球色譜有限公司，中國(guó)），三用紫外分析儀（ZF-6，安靈股份有限公司，中國(guó)），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（RE-52A，上海亞榮生化儀器廠，中國(guó)），水浴鍋（HH-6，邦西儀器科技上海有限公司，中國(guó)）。

2方法與結(jié)果

2.1提取與分離艾葉炭1.0kg甲醇回流提取2次，每次30min，合并提取液，濃縮得到20.10g提取物。經(jīng)硅膠柱色譜（200～300目），以正己烷-乙酸乙酯（10:0～0:10）溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，經(jīng)TLC檢識(shí)合并相似流分，得到Fr.1-5。將Fr.1通過(guò)半制備正向高效液相色譜法（正己烷:乙酸乙酯=10:1，2.0mL·min-1），分離得到化合物2（68.72mg，Rt35.7min），高效液相色譜圖1B；從Fr.4通過(guò)半制備反向高效液相色譜法（乙腈:0.1%磷酸=55:45，2.0mL·min-1），分離得到化合物1（75.69mg，Rt22.4min），高效液相色譜圖見(jiàn)圖1A。2.2結(jié)構(gòu)鑒定化合物1黃綠色粉末；1HNMR（600MHz，DMSO-d6，TMS），δH：9.58（1H，s，OH-3），12.50（1H，s，OH-5），6.21（1H，d，J=2.0Hz，H-6），10.76（H，s，OH-7），6.42（1H，d，J=2.0Hz，H-8），7.69（1H，d，J=2.2Hz，H-2′），9.35（1H，s，OH-3′），9.30（1H，s，OH-4′），6.90（1H，d，J=8.5Hz，H-5′），7.56（1H，dd，J=8.5Hz，2.2Hz，H-6′）；13C-NMR（150MHz，DMSO，TMS），δC：148.1（C-2），136.2（C-3），176.3（C-4），161.2（C-5），98.6（C-6），164.9（C-7），93.8（C-8），156.6（C-9），103.5（C-10），120.4（C-1′），116.1（C-2′），145.5（C-3′），147.2（C-4′），115.5（C-5′），122.4（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18-19]報(bào)道一致，故鑒定化合物1為槲皮素（Quercetin），化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖2A?；衔?白色粉末；LR-EIMS（m/z，392），1H-NMR（600MHz，CDCl3，TMS），δH：3.59（2H，t，J=6.78Hz，H-1），2.02（H，d，J=5.16Hz，OH-1），1.52（2H，m，H-2），1.29（50H，m，H-3～27），0.85（3H，m，H-28），13C-NMR（150MHz，CDCl3，TMS），δC：63.1（C-1），32.8（C-2），31.9（C-3），29.7（C4～24），27.1（C-25），25.7（C-26），22.7（C-27），14.1（C-28）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20-22]報(bào)道一致，故鑒定化合物2為二十八烷醇（Octacosanol），化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖2B。

3討論

近年來(lái)艾葉以其溫經(jīng)止血為療效被大量開(kāi)發(fā)應(yīng)用，其相關(guān)炮制品也廣泛用于臨床。傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論中炒炭存性是指藥物只能部分炭化，更不能灰化，未炭化部分仍應(yīng)保存藥物的固有氣味。艾葉炭由艾葉高溫炮制而來(lái)，利用傳統(tǒng)性狀和總黃酮含量的雙重綜合評(píng)價(jià)確定180℃為其最佳炮制溫度。炒炭后原指標(biāo)性成分桉油精消失，無(wú)法用其含量評(píng)價(jià)艾葉炭質(zhì)量。同時(shí)，難溶性草酸鈣簇晶大幅減少產(chǎn)生游離鈣離子增加止血作用，這與“炒炭止血”的傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論相一致。因此，對(duì)于艾葉炭中化學(xué)成分尤其是指標(biāo)性成分研究尤為迫切。本研究在從艾葉炭中分離出2個(gè)黃酮類化合物，分別為槲皮素和二十八烷醇，并對(duì)其進(jìn)行了綜合光譜解析，通過(guò)1D&2D光譜對(duì)其進(jìn)行了完整的結(jié)構(gòu)歸屬，糾正了部分?jǐn)?shù)據(jù)的歸屬錯(cuò)誤，不僅為中藥炒炭存性理論提供依據(jù)，同時(shí)，為日后艾葉炭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)一步完善與提升奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

作者：谷樂(lè) 邵信婷 王雪鈺 楊昭怡 段明華 王燁 李勇 單位：長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院