導語：平陽霉素注射神經(jīng)影響管理論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的觀察噴射冷凍聯(lián)合平陽霉素注射作用于兔面神經(jīng)頰支后導致的神經(jīng)結(jié)構(gòu)和傳導功能的改變，探討此法用于臨床治療老年人頜面部靜脈畸形時能否導致面癱。方法于一側(cè)兔面神經(jīng)頰支神經(jīng)外膜下注射2mg/ml平陽霉素200μl后，對兔面神經(jīng)頰支行噴射冷凍15～20s，另一側(cè)作為正常對照。采用光學顯微鏡、透射電鏡及神經(jīng)電生理學檢測觀察在處置后1、3、7、14、28、56d兔面神經(jīng)頰支形態(tài)學和傳導功能的變化。結(jié)果白兔均出現(xiàn)不同程度的面神經(jīng)變性和神經(jīng)傳導速度減慢，但這些改變在處置后56d均恢復正常。結(jié)論噴射冷凍和平陽霉素注射所導致面神經(jīng)出現(xiàn)變性及神經(jīng)傳導速度減慢均為可逆性改變，在56d后可以恢復正常。

【關(guān)鍵詞】平陽霉素；冷凍；面神經(jīng)

當靜脈畸形位于老年人面?zhèn)热僦車鷷r，局部進行冷凍與平陽霉素注射能否引起面神經(jīng)的傳導功能改變從而導致面癱尚未見報道。本實驗利用光學顯微鏡、電鏡和神經(jīng)肌電圖儀觀察噴射冷凍聯(lián)合平陽霉素注射作用于兔面神經(jīng)頰支后所導致的面神經(jīng)結(jié)構(gòu)和功能改變，探討將噴射冷凍聯(lián)合平陽霉素注射方法用于臨床治療老年人面頰腮腺區(qū)靜脈畸形的可行性。

1材料與方法

1.1實驗動物選用10只健康日本大耳白兔，雌雄不限，體重每只1.5～2.5kg。由湖北省醫(yī)學實驗中心提供。從湖北省醫(yī)學科學院購買全營養(yǎng)顆粒飼料進行飼養(yǎng)。

1.2實驗方法肌肉注射速眠新0.2～0.4ml（0.2ml/kg）麻醉后施術(shù)，以側(cè)臥位固定于操作臺上。術(shù)野脫毛，碘酒、酒精消毒，鋪巾。取耳前頜下切口，從腮腺嚼肌筋膜的淺面將皮瓣往前翻起，顯露面神經(jīng)頰支。用微量注射器向面神經(jīng)頰支外膜下注入200μl(濃度2mg/ml)藥液，注射點旁用絲線標記;在保護好周圍組織后直視下液氮噴射冷凍15～20s。處置完畢后關(guān)閉傷口。另一側(cè)作為正常對照。術(shù)后動物分籠飼養(yǎng),青霉素80萬單位肌注3d。

1.3標本制作及觀察進行石蠟標本制作和常規(guī)HE染色；采用Bielschowsky改良法。

1.3.1透射電鏡觀察分別于處置后1、3、7、14、28、56d切取處置段1mm3的兔面神經(jīng)頰支標本置于4℃、2.5%戊二醛中固定24h，經(jīng)緩沖液沖洗后用1%四氧化鋨固定1～2h，梯度脫水，滲透，樹脂包埋，超薄切片，透射電鏡下觀察。

1.3.2神經(jīng)的電生理學檢查術(shù)后1、3、7、14、28、56d分別進行面神經(jīng)的電生理學檢測，具體方法如下：在室溫25℃，恒溫臺維持動物肛溫38℃～39℃條件下，采用日本KOHDEN公司MEM3202型肌電圖儀，全麻下記錄各處置組處置前，處置后1、3、7、14、28、56d兔面神經(jīng)頰支誘發(fā)電位。刺激電極置于頰支近中端，記錄電極插入口角處之口輪匝肌，經(jīng)XY記錄儀記錄圖形，得到潛伏期及動作電位波幅并計算神經(jīng)肌肉傳導速度（刺激電極至記錄電極之距離／潛伏期）。參數(shù)設(shè)置：刺激信號為波寬0.1ms單向方波電脈沖，刺激強度5mA，刺激頻率1次／s，刺激電極和記錄電極均為雙極氯化銀針電極，極間距2mm。

1.4統(tǒng)計學方法采用方差分析進行統(tǒng)計學處理。

2結(jié)果

2.1肉眼觀察所有白兔傷口愈合良好，胡須兩側(cè)對稱。切取標本時沿原切口切開，各處置組頰部皮膚、皮下及淺筋膜界限不清，相互黏連,面神經(jīng)頰支失去原有的光澤，周圍包繞纖維結(jié)締組織。

2.2組織學觀察

2.2.1家兔正常面神經(jīng)神經(jīng)外膜連續(xù)圓滑，神經(jīng)束完整，束膜連續(xù)圓滑，束內(nèi)神經(jīng)原纖維與束膜貼合緊密?？v斷面見束內(nèi)神經(jīng)原纖維平行排列且排列緊密，密度均勻，邊緣規(guī)整，神經(jīng)束膜薄而致密；橫斷面可見神經(jīng)原纖維呈圓形或橢圓形，結(jié)締組織較少，髓鞘密度均勻(圖1A)。

2.2.2冷凍聯(lián)合平陽霉素注射處理后第1天，神經(jīng)結(jié)構(gòu)基本正常，部分髓鞘出現(xiàn)脫髓鞘樣變(圖1B);第3、7、14天，可見神經(jīng)束內(nèi)軸突發(fā)生空泡樣變，神經(jīng)纖維潰變明顯(圖1C)；第28天可見變性的神經(jīng)與正常神經(jīng)結(jié)構(gòu)共存(圖1D)；第56天神經(jīng)結(jié)構(gòu)基本正常。

2.3透射電鏡觀察

2.3.1家兔正常面神經(jīng)神經(jīng)纖維的髓鞘呈板層狀排列,包裹中央的軸索，軸索內(nèi)微絲排列規(guī)則均勻。雪旺氏細胞胞體多呈橢圓形，核膜完整，細胞質(zhì)內(nèi)見線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、小泡等(圖2A)。

2.3.2噴射冷凍聯(lián)合平陽霉素注射處理后第1天可見神經(jīng)大體正常，部分髓鞘出現(xiàn)脫髓鞘樣變(圖2B)；第3、7、14天，髓鞘排列嚴重紊亂，空泡樣改變明顯(圖2C)；第28天，可見神經(jīng)破壞新生共存，以破壞為主：變性的神經(jīng)纖維之間可見許多再生軸索，雪旺氏細胞增生(圖2D)；56d時雪旺氏細胞及神經(jīng)結(jié)構(gòu)均正常(圖2E)。圖1家兔面神經(jīng)組織學觀察結(jié)果(HE，×40)

圖2家兔面神經(jīng)透射電鏡結(jié)果(×5000)2.4神經(jīng)電生理學測量所有白兔均可記錄到神經(jīng)電生理信號，在電刺激下白兔的口輪匝肌均有收縮。術(shù)后1、3d組與正常側(cè)比較，神經(jīng)誘發(fā)電位的潛伏期較長、動作電位波幅較低、神經(jīng)肌肉傳導速度較慢，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);術(shù)后7、14d組與正常側(cè)比較，神經(jīng)肌肉傳導速度更慢，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);術(shù)后28、56d，神經(jīng)肌肉傳導速度稍慢但接近正常,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。（見表1）。表1面神經(jīng)頰支神經(jīng)肌肉傳導速度

3討論

Seddon〔1〕根據(jù)病程及感覺恢復狀況將神經(jīng)損傷分為三類：神經(jīng)失用、軸突斷傷和神經(jīng)斷傷。神經(jīng)失用的特點是傳導障礙，沒有軸突變性，傳導功能可迅速完全恢復；軸突斷傷的特點是軸突損傷后繼發(fā)變性和再生，牽拉和壓迫是這種損傷的常見原因，可引起神經(jīng)束內(nèi)水腫或脫髓鞘；神經(jīng)斷傷的特點是神經(jīng)干的結(jié)締組織成分嚴重斷裂，傳導功能恢復障礙〔2〕。Ding等〔3〕對神經(jīng)冷凍后的損傷進行了描述，認為神經(jīng)冷凍后的主要組織學變化是軸突和髓鞘的變性壞死。Brian等〔4〕對16例下頜磨牙后區(qū)角化囊腫先行刮治術(shù)后輔以液氮噴射冷凍治療，術(shù)后經(jīng)過平均為2年6個月的隨訪觀察下齒槽神經(jīng)的感覺功能后發(fā)現(xiàn)：冷凍后2例完全麻木，14例有局部麻木感；自覺麻木感開始恢復的平均時間為91d,16例患者均自覺神經(jīng)感覺逐漸恢復，9例患者感覺已完全恢復正常。本研究在冷凍后早期觀察到的變化為軸突變性、髓鞘腫脹和髓鞘層構(gòu)混亂。由于采取的是15～20s的淺冷凍，未出現(xiàn)明顯的神經(jīng)壞死。冷凍后14d，可見神經(jīng)破壞新生共存，以破壞為主；28d以神經(jīng)再生為主；56d時已基本恢復正常。

神經(jīng)損傷后損傷區(qū)、損傷區(qū)近遠中以及中樞系統(tǒng)出現(xiàn)反應(yīng)，神經(jīng)纖維的再生是依靠近端軸突通過雪旺氏細胞增生所形成的膜管向遠端生長，損傷段內(nèi)及遠端軸突潰變吸收，近端軸突通過損傷段長入，潰變產(chǎn)物通過血循環(huán)排出。神經(jīng)損傷后的變性并非一種消極的退行性變，而是神經(jīng)再生中所進行的一種積極主動的活動。神經(jīng)損傷后雪旺氏細胞表現(xiàn)最為活躍，一方面它可以表現(xiàn)出吞噬細胞的清創(chuàng)功能，另一方面它組成的小管可以引導軸突長入遠側(cè)端的神經(jīng)干。在神經(jīng)修復過程中軸突再生的速度不一致，最初較慢，直至新生軸突越過損傷區(qū)，此時軸突的推進速度可達1～3mm/d，當軸突與感受器形成新的連接時又出現(xiàn)再生速度減慢〔5〕。

神經(jīng)冷凍損傷后再生軸突能否通過損傷區(qū)受很多因素影響，何種因素起主要作用一直存在爭論。很多事實證明，神經(jīng)損傷后再生需要一個良好的微環(huán)境。周圍神經(jīng)微環(huán)境成分主要包括雪旺氏細胞、成纖維細胞、細胞外基質(zhì)和彌散物質(zhì)。這些成分是周圍神經(jīng)能夠再生的重要基礎(chǔ)，這一點已經(jīng)得到實驗證明〔6〕。其中周圍神經(jīng)微環(huán)境中彌散物質(zhì)的性質(zhì)受到較大關(guān)注，被認為可能對神經(jīng)再生有較大影響〔6〕。Williams等〔7〕經(jīng)過較為深入的研究，將周圍神經(jīng)微環(huán)境中初步已知對神經(jīng)再生起作用的物質(zhì)大致分為三類：一類物質(zhì)主要維持神經(jīng)細胞的存活和再生功能稱為神經(jīng)細胞營養(yǎng)因子(NTFs)；一類能夠促進和引導軸索生長，稱為促神經(jīng)軸索生長因子(NPFs)；另一類則是細胞外基質(zhì)成分,可以構(gòu)成引導神經(jīng)組織內(nèi)細胞成份(如雪旺氏細胞)移行的支架。NTFs和NPFs由損傷神經(jīng)斷端分泌，經(jīng)再生管道到達損傷神經(jīng)近側(cè)端，被近側(cè)端吸收通過軸漿逆行運輸?shù)郊毎w，發(fā)揮其促進神經(jīng)生長維持神經(jīng)細胞存活作用?；|(zhì)包括基膜、纖維蛋白結(jié)合素、膠原等，是構(gòu)成細胞貼附的支架。當神經(jīng)損傷后如再生管道存在,首先在管道內(nèi)出現(xiàn)的是一些基質(zhì)前體，通過管內(nèi)液體的介導，在管內(nèi)彌散擴布。在一定的激活因子作用下被激活，聚合成與神經(jīng)縱軸一致的基質(zhì)橋，連接神經(jīng)遠近斷端。而后來自斷端的細胞成分，如雪旺氏細胞、束膜樣細胞和內(nèi)膜細胞等貼附基質(zhì)橋長出，并發(fā)生遠近斷端的匯合，從而促使軸索再生。本研究發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)受損后14d雪旺氏細胞增生活躍，變性的神經(jīng)纖維之間可見許多再生軸索，到56d時神經(jīng)結(jié)構(gòu)和傳導功能已恢復正常.說明噴射冷凍及平陽霉素注射所導致面神經(jīng)出現(xiàn)的變性及神經(jīng)傳導速度的減慢均為可逆性的改變。

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