木瓜籽鎮(zhèn)咳祛痰研究論文
時(shí)間:2022-01-14 10:40:00
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一、實(shí)驗(yàn)材料
1.動(dòng)物。清潔級(jí)昆明種小鼠,體重(22.0±2.0)g,雌雄兼用,由吉林大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
2.木瓜籽提取液的制備。宣木瓜購(gòu)自湖北宣城水果批發(fā)市場(chǎng),經(jīng)吉林大學(xué)藥學(xué)院張靜敏教授鑒定為宣木瓜。去果肉,取木瓜籽1kg,用75%的乙醇加熱回流提取3次,每次2小時(shí),過(guò)濾,合并濾液,除去乙醇以后制成1L的溶液(簡(jiǎn)稱(chēng)原液),取原液100ml,稀釋成500ml(簡(jiǎn)稱(chēng)稀釋液)。
3.儀器和試劑。鹽酸依普拉酮片,上海衡山制藥有限公司,批號(hào):070510;氨水,分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號(hào),070102;氯化銨,分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號(hào),060520;722型光柵分光光度計(jì),山東高密彩虹分析儀器有限公司;梅特勒AB135-S十萬(wàn)分之一天平,德國(guó);HH-42快速恒溫?cái)?shù)顯水箱,常州國(guó)華電器有限公司;其它試劑購(gòu)于北京化工。
4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多變量方差分析及T檢驗(yàn)。
二、方法
1.鎮(zhèn)咳作用研究。為研究木瓜籽提取物對(duì)小鼠鎮(zhèn)咳作用的影響,選取昆明種小鼠雌雄各20只,隨機(jī)分成4組,每組10只。用藥組分別灌胃原液和稀釋液20ml/kg,對(duì)照組灌胃等量生理鹽水,陽(yáng)性組直接用鹽酸依普拉酮(20mg/kg)灌胃給藥。連續(xù)給藥3d,末次給藥1h后,將每只小鼠分別置于引咳籠中,使小鼠接受飽和氨水的噴霧刺激5s,從噴霧氨水開(kāi)始計(jì)時(shí),以腹肌收縮,張嘴為準(zhǔn),觀察和記錄小鼠的刺激潛伏期及2min內(nèi)咳嗽次數(shù)。
2.祛痰作用研究。為研究木瓜籽提取物的祛痰作用,采用酚紅氣管排泌法。
(1)酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制。用天平精確城區(qū)酚紅0.100g,加5%NaHCO3溶液至1000ml容量瓶中。分別吸取此酚紅溶液0.25,0.5,0.75,1.00,1.25,1.50,1.75,2.00ml于容量瓶中,加水稀釋至滿(mǎn)刻度,用722分光光度計(jì)于546nm波長(zhǎng)下測(cè)其吸光度,得回歸方程x=0.2257+5.3268y,r=0.9990,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
(2)選取昆明種小鼠雌雄各20只,隨機(jī)分成4組,每組10只。用藥組分別灌胃原液和稀釋液20ml/kg,對(duì)照組灌胃等量生理鹽水,陽(yáng)性組氯化銨組(2.0g/kg)灌胃給藥。每只小鼠灌胃給藥30min后,腹腔注射5%酚紅生理鹽水溶液10ml/kg,30min后脫臼處死,剝離氣管周?chē)M織,剪下自甲狀軟骨至氣管分支處的一段氣管,放入盛有1ml蒸餾水的試管中,再加入1mol/LNaOH溶液0.1ml,以1ml蒸餾水/0.1mlNaOH溶液為空白,546nm處測(cè)量溶液的吸光度(A)。
三、結(jié)果
1.鎮(zhèn)咳作用
結(jié)果見(jiàn)表1。原液組、稀釋組能顯著抑制氨水誘發(fā)小鼠的咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù),顯示其具有鎮(zhèn)咳作用,且呈現(xiàn)量效關(guān)系。
2.祛痰實(shí)驗(yàn)
結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn),原液組及稀釋液組的木瓜籽的乙醇提取物均能增加小鼠氣管的酚紅排泌量,呈現(xiàn)量效關(guān)系,原液組效果優(yōu)于氯化銨陽(yáng)性對(duì)照組,提示木瓜籽具有祛痰作用。
四、討論
采用抑制氨水誘咳的方法,研究了木瓜籽乙醇提取物的鎮(zhèn)咳作用。本實(shí)驗(yàn)首次發(fā)現(xiàn)了木瓜籽乙醇提取物的鎮(zhèn)咳作用,這可能與提取物中的酚苷類(lèi)成分有關(guān);采用酚紅氣管排泌法研究了木瓜籽乙醇提取物的祛痰作用,實(shí)驗(yàn)表明木瓜籽有祛痰作用,但作用不如鎮(zhèn)咳那樣顯著??赡芘c提取部位有關(guān),需要進(jìn)一步活性篩選。
本文從鎮(zhèn)咳祛痰兩方面對(duì)木瓜籽潤(rùn)肺化痰的功效進(jìn)行了初步藥理研究。結(jié)果表明,高劑量組效果明顯高于低劑量組,顯示出了鎮(zhèn)咳祛痰活性,但其量效關(guān)系及鎮(zhèn)咳祛痰有效成分還需進(jìn)一步研究。由于木瓜籽多被扔倒,甚為可惜,經(jīng)過(guò)研究可發(fā)現(xiàn),一方面利于變廢為寶,一方面又促進(jìn)開(kāi)發(fā)其新的藥理活性。本實(shí)驗(yàn)為最終闡明木瓜籽潤(rùn)肺化痰作用物質(zhì)基礎(chǔ)提供了藥理實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
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【關(guān)鍵詞】木瓜籽鎮(zhèn)咳祛痰
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