導(dǎo)語(yǔ)：楓香樹葉抗菌活性分析論文一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的探討楓香樹葉的體外抗菌活性。方法采用瓊脂擴(kuò)散法和試管連續(xù)稀釋法測(cè)定楓香樹葉對(duì)常見致病菌和條件致病菌的體外抗菌活性及最低抑菌濃度(MIC)。結(jié)果楓香樹葉對(duì)大腸埃希菌、白假絲酵母菌無抗菌作用；楓香樹葉對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌皆有抗菌作用，抑菌圈直徑在13～25mm之間。不同方法提取的藥液的抗菌作用有明顯差別，其中楓香樹葉水煎液抗菌作用最好，對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度分別為0.5，1，0.5，0.5，0.25g/ml。結(jié)論楓香樹葉對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌有較好的抗菌作用。

【關(guān)鍵詞】楓香樹葉；抗菌活性；最低抑菌濃度

Abstract：ObjectiveToresearchantimicrobialactivityofLiquidambarformosanaHance''''sleaf.MethodsBymethodsofagarplatediffusionsandtubecontinuousdilution,tomeasureantimicrobialactivityandminimalinhibitoryconcentration(MIC)ofLiquidambarformosanaHance''''sleafagainstpathogenandconditionedpathogen.Results(1)LiquidambarformosanaHance''''sleafhadnotantimicrobialactivityonE.coli,S.albicans.(2)LiquidambarformosanaHance''''sleafhadantimicrobialactivityagainstS.aureus,S.epidermidis,S.flexneri,SalmonellaTyphi,P.aeruginosa,thediameterofbacteriostaticcirclewasbetween13and25millimetre.Theantimicrobialactivitywassignificantdifferentindifferentextracteddrugliquid,amongwhichtheantimicrobialactivityofwaterextractionofLiquidambarformosanaHance''''sleafwasthebest,theminimalinhibitoryconcentrationagainstS.aureusS.epidermidis,S.flexneri,SalmonellaTyphi,P.aeruginosa,is0.5，1，0.5，0.5，0.25g/ml,respectively.ConclusionLiquidambarformosanaHance''''sleafhasgoodantimicrobialactivityagainstS.aureus,S.epidermidis,S.flexneri,SalmonellaTyphiandP.aeruginosa.

Keywords：LiquidambarformosanaHance''''sleaf；Antimicrobialactivity；Minimalinhibitoryconcentration

隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，耐藥菌株逐年增多，目前金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素G的耐藥菌株高達(dá)90%以上［1］，尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcusaureus,MRSA）已經(jīng)成為醫(yī)院內(nèi)感染最常見的致病菌［2］。有些細(xì)菌甚至產(chǎn)生多重耐藥，如致病性大腸埃希菌約40%的菌株對(duì)鏈霉素、氯霉素、四環(huán)素、青霉素等多種抗生素產(chǎn)生耐藥性［3］；銅綠假單胞菌對(duì)許多抗生素具有天然或獲得耐藥性［4］，這給臨床治療帶來極大的困難，如何有效防治細(xì)菌感染及控制細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生與散播是一項(xiàng)長(zhǎng)期、復(fù)雜、艱巨的任務(wù)，因而尋找和研制有效的抗菌藥物非常必要。本文采用瓊脂擴(kuò)散法和試管連續(xù)稀釋法進(jìn)行體外抗菌實(shí)驗(yàn)及最低抑菌濃度（MIC）的測(cè)定，以探討楓香樹葉對(duì)常見致病菌和條件致病菌的體外抗菌活性?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1材枓與方法

1.1菌株來源金黃色葡萄球菌（ATCC25923），白色葡萄球菌（ATCC12228），大腸埃希菌（ATCC25922），福氏志賀氏菌（ATCC27891），傷寒沙門氏菌（ATCC14028），銅綠假單胞菌（ATCC27853），購(gòu)于北京生物制品鑒定所。白假絲酵母菌（ATCC14053），北大醫(yī)院真菌菌種保藏中心（北京）提供。

1.2楓香樹葉采自江西贛南山區(qū)，采藥時(shí)間在5～6月之間。

1.3藥液的制備

1.3.150%乙醇煎液取楓香樹葉（生藥）40g，洗凈，加適量50%乙醇溶液浸泡30min，加熱至100℃30min，過濾。藥渣再加適量50%乙醇溶液，加熱100℃30min，過濾。將兩次濾液合并，用文火濃縮至10ml（即每毫升藥液含4g生藥）。

1.3.2水煎液用蒸餾水代替50%乙醇溶液按上述方法制備藥液。

1.3.350%乙醇浸液取楓香樹葉（生藥）40g，洗凈搗碎，與蒸餾水10ml混勻浸泡2h，過濾，再經(jīng)濾菌器濾過除菌，制成4g/ml的生藥。

1.3.4水浸液用蒸餾水代替50%乙醇溶液按上述方法制備藥液。

1.4方法

1.4.1菌液的制備將金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大腸埃希菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌接種于普通瓊脂平板上，置37℃溫箱中培養(yǎng)18h，用無菌生理鹽水配成每毫升相當(dāng)于3億的菌濃度（金黃色葡萄球菌和白色葡萄球菌配成每毫升相當(dāng)于9億的菌濃度）。將白假絲酵母菌接種于沙氏瓊脂平板上，置37℃溫箱中培養(yǎng)48h，用無菌生理鹽水配成1×108CFU/ml。

1.4.2瓊脂擴(kuò)散法用無菌棉簽沾取菌液在普通瓊脂平板上（白假絲酵母菌用沙氏瓊脂平板）作均勻密集劃線，待菌液干燥后，用外徑5mm的打孔器打孔，每孔加藥液200μl，平放在37℃溫箱中培養(yǎng)24h（白假絲酵母菌培養(yǎng)48h）觀察結(jié)果，測(cè)量抑菌圈直徑。抑菌圈直徑取兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的平均值。

1.4.3試管連續(xù)稀釋法［5］根據(jù)抑菌實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，選取敏感菌測(cè)定楓香樹葉水煎液對(duì)其的最低抑菌濃度。取小號(hào)試管7支，編號(hào)。第1步每支管各加1ml肉湯培養(yǎng)基。然后在第1管加1ml藥液，用吸管在第1管吹吸數(shù)次，使藥液與肉湯培養(yǎng)基混勻，取出1ml加于第2管，混均取出1ml加于第3管，如此稀釋至第6管棄去1ml，第7管不加藥液作為對(duì)照。第3步每管加菌液50μl，混勻，置37℃溫箱中培養(yǎng)24h。然后從每管中取出一接種環(huán)接種于普通瓊脂平板上，再繼續(xù)培養(yǎng)24h，觀察結(jié)果。以無細(xì)菌生長(zhǎng)的最高稀釋濃度為該藥液的最低抑菌濃度。

2結(jié)果

2.1楓香樹葉的各種提取液對(duì)大腸埃希菌、白假絲酵母菌無抗菌作用。

2.2楓香樹葉的各種提取液對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌皆有抗菌作用，抑菌圈直徑在13～25mm之間。結(jié)果見表1。不同方法提取的藥液的抗菌作用有明顯差別，其中楓香樹葉水煎液抗菌作用最好，50%乙醇煎液次之，50%乙醇浸液較差。

2.3楓香樹葉水煎液對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度（MIC）分別為0.5，1，0.5，0.5，0.25g/ml。結(jié)果見表2。

表1楓香樹葉幾種藥液的抑菌圈直徑（略）

表2各試管楓香樹葉水煎液的最低抑菌濃度（略）

－表示無細(xì)菌生長(zhǎng)；＋表示有少量細(xì)菌生長(zhǎng)；＋＋表示有較多細(xì)菌生長(zhǎng)；＋＋＋表示有大量細(xì)菌生長(zhǎng)

3討論

楓香樹葉為金縷梅科植物楓香樹LiquidambarformosanaHance的樹葉［6，7］?！吨兴幋筠o典》記載楓香樹葉有止血、治疔瘡、治痢疾、治產(chǎn)后風(fēng)和小兒臍風(fēng)之功效［7］。民間有用楓香樹葉治風(fēng)濕，治中暑，治痢疾；文獻(xiàn)［8］報(bào)道楓香樹葉中含有人體必需10種無機(jī)元素并有治療糖尿病和降血壓的作用；但楓香樹葉在抗菌作用方面國(guó)內(nèi)外未見文獻(xiàn)報(bào)道。本研究為楓香樹葉作為抗菌新藥的開發(fā)提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，楓香樹葉對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、傷寒沙門氏菌、銅綠假單胞菌均有明顯的抗菌作用。不同方法提取的藥液的抗菌作用有明顯差異，其中楓香樹葉水煎液抗菌作用最好，50%乙醇煎液次之，50%乙醇浸液較差，這可能與不同方法提取的藥液的有效成分不同有關(guān)。由于中藥粗提物中含有多種化學(xué)成分，成分與藥理作用復(fù)雜，并且受多種因素的影響。本文只做了楓香樹葉的粗提液，有關(guān)楓香樹葉有效成分的提取與分析有待進(jìn)一步研究。

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