烏蕨不同部位總黃酮分析論文

時(shí)間:2022-01-14 10:54:00

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烏蕨不同部位總黃酮分析論文

烏蕨[Stenolomachusanum(L.)Ching]為鱗始蕨科植物烏蕨的全草,又名野雞尾、金花草、中華金粉蕨,具有清熱、解毒、利濕、止血的功效[1]。本文就烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位的總黃酮和微量元素含量進(jìn)行比較分析,為烏蕨的進(jìn)一步研究和資源開發(fā)提供依據(jù)。

1儀器與試藥

1.1儀器

WND200A型高速中藥粉碎機(jī)(上海微型電機(jī)廠),BS224S精密電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司),TU1900雙光束紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限公司),IRIS/AP型電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(美國(guó)TJA公司),全自動(dòng)回流消化儀(重慶南岸玻璃儀器廠)。

1.2試藥

蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)為0080-9705);硝酸、高氯酸均為優(yōu)級(jí)純,其他試劑均為分析純,測(cè)微量元素用水為雙蒸水。烏蕨藥材于2008年10月采于杭州九溪,經(jīng)熊耀康教授鑒定為烏蕨Stenolomachusanum(L.)Ching的地上部分,陰干,粉碎,備用。

2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1總黃酮含量測(cè)定[4]

2.1.1對(duì)照品溶液的制備:精密稱取105℃干燥恒重的蘆丁對(duì)照品16.50mg,加60%乙醇溶解定容于50ml容量瓶,得濃度為0.33mg/ml對(duì)照品溶液,備用。

2.1.2供試品溶液的制備:定量稱取烏蕨干燥粗粉5.0g,加16倍量0.1%HCl-60%乙醇回流提取4h,提取1次,提取液減壓濃縮,加60%乙醇定容至25ml,作為供試品溶液備用。

2.1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml,分別置25ml容量瓶中,加入5%NaNO21.0ml,搖勻,放置6min后加入10%Al(NO3)31.0ml,搖勻,放置6min后加入4%NaOH10ml,再加60%乙醇稀釋至刻度,混勻,靜置15min,于510nm處,以相應(yīng)試劑作空白,測(cè)定吸光度,以蘆丁濃度為縱坐標(biāo),以吸光度值為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程:Y=2.778X-0.0775(r=0.9991),結(jié)果表明蘆丁在0.016~0.99mg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.1.4精密度實(shí)驗(yàn):取蘆丁對(duì)照品溶液2.0ml,置25ml容量瓶中,按“2.1.3”項(xiàng)操作,平行測(cè)定5次,結(jié)果其RSD為0.21%,表明精密度良好。

2.1.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn):取同1份樣品溶液5份,分別按“2.1.3”項(xiàng)操作,結(jié)果RSD為0.72%。

2.1.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn):取1份樣品溶液,按上述實(shí)驗(yàn)方法在顯色完全后0、10、20、30、45、60min分別測(cè)定吸光度,結(jié)果RSD為1.08%。實(shí)驗(yàn)表明:供試品溶液在1.0h內(nèi)穩(wěn)定的。

2.1.7加樣回收率實(shí)驗(yàn):取已知總黃酮含量的烏蕨樣品6份,分別精密添加已知濃度的蘆丁對(duì)照品適量。按供試品溶液制備方法制備,按“2.1.3”項(xiàng)操作,測(cè)定總黃酮含量,計(jì)算測(cè)定回收率,結(jié)果平均回收率為99.34%,RSD為1.82%。

2.1.8烏蕨不同部位總黃酮含量的測(cè)定:精密吸取提取液適量,按“2.1.3”項(xiàng)操作,測(cè)定吸光度A,結(jié)果見表1。表1烏蕨根、莖、葉、全草等不同部位總黃酮含量測(cè)定結(jié)果(略)

2.2微量元素含量的測(cè)定[5]

2.2.1供試品溶液的制備:各取藥材約0.5g,精密稱定,置50ml凱氏燒瓶,加8.0ml消化液[V(HNO3)∶V(HClO4)=4∶1],靜置過(guò)夜,加熱回流消化至無(wú)色透明,冷卻后,定量轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,加超純水稀釋至刻度,搖勻,備用。取相同體積的消化液,同法消化,制備空白溶液。

2.2.2混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:分別取各重金屬元素標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量,用5%硝酸溶液制成混合溶液,梯度稀釋,作為混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液備用。

2.2.3測(cè)定方法:儀器工作參數(shù):檢測(cè)器CID的低波段(<265nm)積分時(shí)間:15s;高波段(>265nm)積分時(shí)間:5s;進(jìn)樣蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速:100r/min;進(jìn)樣霧化器氬氣壓力:28psi;輔助氣流量:1.0L/min;高頻發(fā)生器功率:1500W;樣品沖洗時(shí)間:5s;測(cè)定波長(zhǎng)范圍:193.7~407.7nm。

依次將儀器的進(jìn)樣管插入各個(gè)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液中進(jìn)行測(cè)定,以每一濃度測(cè)得的3次讀數(shù)的平均值為縱坐標(biāo),相應(yīng)元素標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),作標(biāo)準(zhǔn)曲線,并進(jìn)行方法學(xué)考察。由各元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算微量元素的含量,測(cè)定結(jié)果見表2。表2烏蕨根、莖、全草、葉等不同部位微量元素含量測(cè)定結(jié)果(略)

3討論

3.1由實(shí)驗(yàn)可知,烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位總黃酮含量分別11.89%、4.47%、3.46%和11.75%,總黃酮含量在葉中較高,而根與莖中總黃酮含量較低。烏蕨富含黃酮類化合物,而黃酮類化合物在臨床上具有預(yù)防血液類疾病、治療冠狀動(dòng)脈硬化、抗癌、抗菌、抗衰老、抗糖尿病等作用,食品上作為甜味劑、天然色素等食品添加劑。因此提取烏蕨中的黃酮類化合物,不單可以用于臨床藥物的研究,也可用于食品與工業(yè)方面。

3.2元素測(cè)定結(jié)果表明,烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位均含有豐富的微量元素,其中含B、Ca、K、Na、P、S等多種常量元素;此外還含Cu、Fe、Zn、Cr、Co等多種人體必需的微量元素。其中K、Fe、Ca、Na等元素含量均較高,其次為Mn、Zn、Cu。而有害元素Pb、As、Cu在地上部分含量較低,根中Pb、As、Cu含量都高出了《藥用植物及制劑進(jìn)口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》(Hg≤0.2μg/g、Pb≤5.0μg/g、As≤2.0μg/g、Cd≤0.3μg/g和Cu≤20.0μg/g),可能是由于本身的沉積或者土壤受到污染造成。

【參考文獻(xiàn)】

[1]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上冊(cè))[S].上海:上海人民出版社,1985:157158.

[2]馬鶯,王靜.功能性食品活性成分測(cè)定[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:253.

[3]吳巧鳳,曾曉艷.蘇州薺苧總黃酮與微量元素含量的測(cè)定[J].廣東微量元素科學(xué),2004,11(9):3437.

【摘要】:[目的]比較烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位總黃酮和元素的含量差異。[方法]采用可見分光光度法測(cè)定不同部位總黃酮的含量;采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(ICPAES法)測(cè)定不同部位元素的含量。[結(jié)果]烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位總黃酮含量分別11.89%、4.47%、3.46%和11.75%,不同藥用部位元素的含量存在一定的差異。[結(jié)論]烏蕨含有豐富的黃酮類化合物和多種元素,具開發(fā)價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】烏蕨;不同部位;總黃酮;元素