導(dǎo)語(yǔ)：痛平膏藥理作用研究論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢(xún)客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的觀察痛平膏的主要藥理作用，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法用熱板法、醋酸法致疼痛小鼠模型，觀察其鎮(zhèn)痛作用；用角叉菜膠、二甲苯致大、小鼠急性炎癥模型，考察其抗炎作用；采用葡聚糖致微循環(huán)障礙小鼠模型，研究痛平膏的活血作用。結(jié)果痛平膏可提高動(dòng)物因熱刺激致痛的痛閾值，減少因醋酸刺激而發(fā)生扭體反應(yīng)的動(dòng)物只數(shù)；對(duì)角叉菜膠致大鼠足趾腫脹有抑制作用，可減輕二甲苯致小鼠耳腫脹的腫脹度；對(duì)靜脈注射葡聚糖溶液引起的小鼠微循環(huán)障礙，有明顯的改善作用。結(jié)論痛平膏具有鎮(zhèn)痛、抗炎和活血的藥理作用。

【關(guān)鍵詞】痛平膏；鎮(zhèn)痛作用；抗炎作用；活血作用

【Abstract】ObjectiveTostudytheprincipalpharmcodynamicsofTongpingointmentandprovideexperimentaldataforclinicalapplication.MethodsMethodsofaceticacid-inducedwrithingandhot-platetestinmicewereusedtostudytheanalgesiceffect.Modelsofacuteinflammatoryreactionsofxylene-inducedmouseearedemaandcarrageen-pastern-inducedratpawedemawereperformedtostudytheanti-inflammatoryeffects.TopreparethemodelofmouseearsmicrocirculatorydisturbancebyintravenousinjectionofdextransolutionforobservingpromotingbloodcirculationeffectofTongpingointment.ResultsThepainthresholdwasremarkablyimprovedandthenumberofwrithingmiceinducedbyaceticacidweredecreased.Tongpingointmentsignificantlysuppressedcarrageen-pastern-inducedratpawedemaandxylene-inducedmouseearedema.Themicrocirculatorydisturbanceinducedbyinjectingdextransolutionwasamelioratedmarkedly.ConclusionTongpingointmentmanifestedanalgesiceffect，anti-inflammatoryandpromotingbloodcirculationeffectsobviously.

痛平膏是由骨碎補(bǔ)、防風(fēng)、乳香、沒(méi)藥等多味中藥組成的外用中藥復(fù)方制劑。具有舒筋活血、祛風(fēng)散寒、消腫止痛的功效。臨床可用于頸椎、關(guān)節(jié)痛、風(fēng)濕痛、骨質(zhì)增生痛等癥。為獲得臨床用藥的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，采用動(dòng)物模型觀察其鎮(zhèn)痛、抗炎和活血作用。

1材料

1.1動(dòng)物SD品系大鼠，SPF級(jí)，♂，140±10g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證號(hào)：SCXK（京）2002－0003；ICR品系小鼠，SPF級(jí)，♀♂，體重19±1g、28±1g（♂，用于抗炎試驗(yàn)），由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供；昆明種小鼠，SPF級(jí)，♀♂，體重19±1g，由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，許可證號(hào)：SCXK11－00－0010。

1.2藥品、試劑痛平膏，批號(hào)：020801，由北京百草藥業(yè)提供；扶他林乳劑，批號(hào)：01193，北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)；酸痛靈噴劑，批號(hào)：XSH00200，廈

1.3儀器熱板測(cè)痛儀，型號(hào)：GJ-8402，由浙江寧海白石電子醫(yī)藥儀器廠(chǎng)生產(chǎn)；光學(xué)顯微鏡，型號(hào)：XSZ-H，重慶光學(xué)儀器廠(chǎng)生產(chǎn)。

2方法及結(jié)果

2.1分組及給藥動(dòng)物分為痛平膏大、中和小劑量組、空白對(duì)照組、酸痛靈噴劑組、扶他林乳劑組。痛平膏各組劑量分別為0.36、0.18和0.09g生藥/cm2，酸痛靈噴劑組為0.36ml/cm2，扶他林乳劑組為0.1g/cm2，空白對(duì)照組給予生理鹽水。

2.2鎮(zhèn)痛試驗(yàn)

2.2.1對(duì)熱板法致小鼠疼痛的影響［1］因雄性小鼠受熱陰囊觸及熱板，可出現(xiàn)假性結(jié)果，所以本試驗(yàn)采用雌性小鼠。本次試驗(yàn)采用一次性給予動(dòng)物供試品及對(duì)照品，觀察其藥理作用。

取體重為19±1g的ICR種小鼠，♀，健康。試驗(yàn)前1日，先篩選合格小鼠，每次1只放在加熱至恒溫的鐵板（55℃）上，小鼠自放在熱板上，至出現(xiàn)因熱刺激而舔后足所需的時(shí)間（s），作為該鼠的痛閾值，出現(xiàn)舔足反應(yīng)后將小鼠取下。凡舔后足時(shí)間小于5s或大于30s或跳躍者棄之不用。間隔1h，重復(fù)測(cè)定其正常痛閾值，取兩次正常痛閾平均值，作為該鼠的給藥前基礎(chǔ)痛閾值，以平均值不超過(guò)30s為合格。將合格小鼠隨機(jī)分為6組，并將小鼠背部的被毛去除（面積約1cm2）。試驗(yàn)當(dāng)日，將適量供試品及對(duì)照品涂抹于橡皮膏上，固定在小鼠的背部，以不影響其舔后足為度。在給藥后不同的時(shí)間點(diǎn)，將小鼠放在加熱至恒溫（55℃）的鐵板上，觀察其發(fā)生因熱刺激而出現(xiàn)的舔足反應(yīng)時(shí)間，小鼠出現(xiàn)舔足反應(yīng)后，迅速將小鼠取下，以避免燙傷。痛閾值測(cè)定時(shí)間點(diǎn)分別為給藥后0.5、1、2、4、6h。本試驗(yàn)觀察受試物的鎮(zhèn)痛作用及時(shí)效關(guān)系。以受試動(dòng)物出現(xiàn)因熱刺激而舔后足反應(yīng)的時(shí)間（痛閾值）為觀察指標(biāo)，對(duì)所得的試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。同時(shí)按下式計(jì)算各劑量組動(dòng)物鎮(zhèn)痛百分率。結(jié)果見(jiàn)表1。

鎮(zhèn)痛百分率=給藥組動(dòng)物痛閾值-空白對(duì)照組動(dòng)物痛閾值〖〗空白對(duì)照組運(yùn)動(dòng)痛閾值×100%

表1痛平膏對(duì)熱板法致小鼠疼痛模型的影響(x±s，n=10)

注：與空白對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01，括號(hào)內(nèi)為各給藥組動(dòng)物的鎮(zhèn)痛百分率。

2.2.2對(duì)醋酸致小鼠疼痛的影響［1］取體重為19±1g的ICR種小鼠，♀♂，健康，共84只。本次試驗(yàn)采用一次性給予動(dòng)物供試品及對(duì)照品，觀察其藥理作用。試驗(yàn)前1日，將受試動(dòng)物的腹部被毛去除（面積約1cm2）。試驗(yàn)當(dāng)日，按體重隨機(jī)分成6組，涂抹于橡皮膏上，固定在小鼠的腹部，給藥1h后，將橡皮膏去除，避免影響小鼠的扭體反應(yīng)。用生理鹽水新鮮配置0.6％的醋酸溶液，按0.1ml/10g的劑量，腹腔注射給予小鼠。以給予醋酸后15min內(nèi)，各組受試動(dòng)物出現(xiàn)扭體反應(yīng)的只數(shù)為觀察指標(biāo)，并進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，與模型對(duì)照組比較，組間差異是否有顯著性。同時(shí)按下式計(jì)算各劑量組動(dòng)物的扭體反應(yīng)發(fā)生率和鎮(zhèn)痛百分率。結(jié)果見(jiàn)表2。

扭體反應(yīng)發(fā)生率=發(fā)生扭體反應(yīng)的動(dòng)物數(shù)〖〗該組動(dòng)物的總數(shù)×100%

鎮(zhèn)痛百分率=模型對(duì)照組扭體反應(yīng)鼠數(shù)-給藥組扭體反應(yīng)鼠數(shù)〖〗模型對(duì)照組扭體反應(yīng)鼠數(shù)×100%

表2痛平膏對(duì)醋酸致小鼠疼痛模型的影響（n=14）

注：與模型對(duì)照組比較。

2.3抗炎試驗(yàn)

2.3.1對(duì)角叉菜膠致大鼠足趾腫脹的影響［2］因目前不能確證性別對(duì)炎癥模型的影響，且雌激素有抗炎和免疫抑制作用，故選擇雄性大鼠作為本試驗(yàn)的受試動(dòng)物。取體重為140±10g的SD種大鼠，♂，健康，共50只。試驗(yàn)前1日，將試驗(yàn)用大鼠右后腿內(nèi)側(cè)的被毛去除（面積約1cm2）。試驗(yàn)當(dāng)日，按體重隨機(jī)分成5組，分別為模型對(duì)照組，扶他林乳劑組，痛平膏大劑量組、中劑量組、小劑量組。分別測(cè)量每只大鼠右后肢正常踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)，作為造模前的基礎(chǔ)值。測(cè)量正常周長(zhǎng)后，在右后肢的內(nèi)側(cè)皮膚，分別給予各組動(dòng)物適量受試品和對(duì)照品，用橡皮膏固定。給藥30min后，分別在大鼠右后肢足跖皮下注射1％角叉菜混懸液0.1ml/只致炎。在致炎后1、2、4、6h，各測(cè)量一次右側(cè)踝關(guān)節(jié)的周長(zhǎng)。以各組動(dòng)物致炎后與致炎前的踝關(guān)節(jié)周長(zhǎng)之差（腫脹度）為觀察指標(biāo)，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，按下式計(jì)算腫脹抑制率。結(jié)果見(jiàn)表3。

腫脹抑制率=模型對(duì)照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹率〖〗模型對(duì)照組平均腫脹度×100%

表3痛平膏對(duì)角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響(x±s，n=10)

注：與模型對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01，括號(hào)內(nèi)為各給藥組動(dòng)物的腫脹抑制率，“-”表示腫脹度大于模型對(duì)照組。

2.3.2對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響［2］取體重為28±1g的ICR種小鼠，♂，健康，共60只。試驗(yàn)當(dāng)日，按體重隨機(jī)分成5組，分別為模型對(duì)照組，扶他林乳劑組，痛平膏大劑量組、中劑量組、小劑量組。每鼠左耳外側(cè)涂100％二甲苯0.02ml致炎，致炎后30min，在致炎的左耳內(nèi)側(cè)，涂抹適量受試品和對(duì)照品。致炎2h后，將小鼠斷頸處死，清理剩余藥物，沿耳廓基線(xiàn)剪下兩耳，用打孔器分別在同一部位打下圓耳片，用電子天平稱(chēng)重。以每鼠的左耳片與右耳片重量之差（腫脹度）為觀察指標(biāo)，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，與模型對(duì)照組比較組間差異的顯著性。按下列公式計(jì)算腫脹抑制率。結(jié)果見(jiàn)表4。

腫脹抑制率=模型對(duì)照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度〖〗模型對(duì)照組平均腫脹度×100%

表4痛平膏對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響（x±s，n=10）

注：與模型組比較**P<0.01

2.4活血作用試驗(yàn)［1］取體重為19±1g的昆明種小鼠，雌雄各半，健康，共60只。試驗(yàn)共分6組，空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，痛平膏扶他林乳劑組，痛平膏大劑量組、中劑量組和小劑量組。試驗(yàn)前1日，將受試小鼠的背部被毛去除（面積約1cm2）。試驗(yàn)當(dāng)日，分別給予適量的受試品和對(duì)照品，用橡皮膏固定在背部。給藥30min后，用1％戊巴比妥鈉溶液0.05ml/10g腹腔麻醉。剪去耳廓背側(cè)的細(xì)毛，并將小鼠腹部向下固定在顯微鏡的載物臺(tái)上，使鼠耳固定，調(diào)節(jié)顯微鏡（放大倍數(shù)為10×10），直至可以清楚地觀察小鼠耳廓微循環(huán)情況。固定視野，調(diào)節(jié)測(cè)微尺的位置，使其可以測(cè)量血管直徑的變化。給藥35min時(shí)，觀察小鼠耳廓選定部位的微小動(dòng)、靜脈的管徑，此測(cè)定值為造模前基礎(chǔ)值（A、V），并選擇血液流態(tài)相似的微小靜脈，用于觀察造模后血液流態(tài)的改變。給藥40min時(shí)，除空白對(duì)照組動(dòng)物外，均按0.3ml/20g的劑量從尾靜脈注射葡聚糖溶液（25mg/ml），空白對(duì)照組給予同體積生理鹽水注射液。分別在造模后10、20、30min時(shí)，連續(xù)觀察小鼠耳部選定的同一位置，記錄微動(dòng)、靜脈管徑及血液流態(tài)的變化。以各組動(dòng)物造模前與造模后的微動(dòng)、靜脈管徑的差值（△A、△V）為觀察指標(biāo)，同時(shí)對(duì)微靜脈血液的流態(tài)進(jìn)行評(píng)分，并作為觀察指標(biāo)，對(duì)試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。評(píng)分的標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表5

表5微靜脈血液的流態(tài)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

分值流態(tài)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)4分線(xiàn)粒流血流快速，成直線(xiàn)，但有沙粒感3分粒線(xiàn)流血流較快，成直線(xiàn)，但明顯有沙粒感2分粒流血流快，成直線(xiàn)，可區(qū)分細(xì)胞1分粒緩流血流緩慢，明顯區(qū)分細(xì)胞?？梢?jiàn)細(xì)胞團(tuán)試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6。

表6痛平膏對(duì)葡聚糖溶液致小鼠耳廓微循環(huán)障礙的影響（x±s，n=10，μm）

注：與模型組比較*P<0.05，**P<0.01

注：與模型組比較*P<0.05，**P<0.01

3討論

炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對(duì)損傷因子所發(fā)生的防御反應(yīng)，其局部臨床特征是紅、腫、熱、痛和功能障礙。為研究痛平膏的主要的藥理作用，本實(shí)驗(yàn)分別采用鎮(zhèn)痛、抗炎和微循環(huán)障礙的經(jīng)典動(dòng)物病理模型進(jìn)行觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，痛平膏可提高動(dòng)物因熱刺激致痛的痛閾值，減少因醋酸刺激而發(fā)生扭體反應(yīng)的動(dòng)物只數(shù)；對(duì)角叉菜膠致大鼠足趾腫脹有抑制作用，可減輕二甲苯致小鼠耳腫脹的腫脹度；對(duì)靜脈注射葡聚糖溶液引起的小鼠微循環(huán)障礙，有明顯的改善作用。痛平膏對(duì)動(dòng)物炎癥、疼痛模型和微循環(huán)障礙模型均具有明顯的抗炎、鎮(zhèn)痛和活血作用，為臨床用于炎癥反應(yīng)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

痛平膏是外用制劑，其吸收方式和作用時(shí)間與常用的口服制劑有較大的區(qū)別，為獲得較完整的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)中盡量測(cè)定其作用時(shí)間，以獲得時(shí)－效曲線(xiàn)，供臨床使用參考。

【參考文獻(xiàn)】

1陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)研究方法學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，1993，360－361；377－378；502－503.

2徐叔云，卞如濂，陳修.藥理試驗(yàn)方法學(xué)，第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002，911-913