小議金標法與滴度法的應(yīng)用及效果觀察

時間:2022-04-08 09:13:00

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小議金標法與滴度法的應(yīng)用及效果觀察

【摘要】目的探討金標法以及TRUST滴度法檢測梅毒螺旋體的效果。方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗,甲苯胺紅滴度法(TRUST)對147例臨床樣本進行初級篩選試驗,并對初篩結(jié)果陽性的49例血清進行金標法梅以及毒螺旋體檢驗。結(jié)果酶聯(lián)免疫吸附試驗滴度法(TRUST)試驗陽性的49例樣本中,金標法陽性46例,二者的符合率為93.88%。結(jié)論金標法與(TRUST)滴度法其靈敏度、特異性無顯著性差異(P>0.05),可以聯(lián)合應(yīng)用于臨床中梅毒的檢測,提高檢出率。

【關(guān)鍵詞】梅毒;抗體;金標法;滴度法

大量的臨床資料以及有關(guān)的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,在我國梅毒的發(fā)病率有逐年上升的趨勢[1~2]。因此,開發(fā)出一種簡便的、快速的同時具有較高靈敏度及特異性的檢查方法,對于該種疾病的預(yù)防、治療以及篩查大量的獻血者無疑具有十分重要的意義。對篩查者進行血清學(xué)檢測是診斷梅毒的重要依據(jù)之一,在梅毒的診斷、治療以及研究上具有非常重要的意義。因此,本院將金標法,TRUST滴度法分別應(yīng)用于對梅毒的檢測,由于TPPA是公認的比較好的梅毒抗體的確認方法,因此分別對樣本進行檢測,在以TPPA結(jié)果進行對比,觀察其結(jié)果的一致性,現(xiàn)將分析報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

本組標本選擇作者單位2006年4月以來143例,先對臨床樣本進行初級篩選試驗,再對初篩結(jié)果呈陽性的49例血清,進行金標法以及梅毒螺旋體檢驗。其中男性26例,女性23例,年齡18~78歲,平均年齡(48±26.5)歲。

1.2檢測試劑

甲苯胺紅TRUST試劑(上海榮盛生物工程有限公司。批號20010301);金標法試劑(上??迫A生物。批號:200110225);TPPA試劑(上海實業(yè)科華生物技術(shù)有限公司。批號:200110201)

1.3方法

梅毒螺旋抗體檢測:采集上述的試劑盒中所要求的血清(漿)樣本,并且按照試劑盒的說明分別進行檢測。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。配對計數(shù)資料采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

根據(jù)相關(guān)文獻,TPPA是公認的較好的梅毒抗體確認方法,以其結(jié)果為標準。其中,采用金標法試劑的假陽性率為4.00%(2/50),假陰性率為12.40%(12/97);TRUST滴度法試劑的假陽性率為6.25%(3/48),假陰性率為35.05%(34/99)。TRUST滴度法和金標法之間在假陽性之間無明顯的區(qū)別(χ2值分別為0.43,0.41,P>0.05),TRUST滴度法的假陰性率明顯高于金標法(7.08,6.97,P<0.01)。表1金標法和TRUST滴度法陽性例數(shù)比較

3討論

梅毒螺旋體檢測,以此明確患者受血前或術(shù)前的情況,是如今醫(yī)學(xué)發(fā)展的必經(jīng)步驟,是新的《醫(yī)療事故處理條例》實行舉證責(zé)任倒置的參照。在傳染性指標的檢測中,選擇初篩試驗時,試驗的靈敏度很重要,敏感性差的,易出現(xiàn)漏檢,不適合篩選獻血者及輸血前患者各傳染性指標的檢測。

梅毒螺旋體侵入機體后產(chǎn)生兩種抗體:為心磷脂抗體及抗密螺旋體抗體,檢測前者的方法,目前,在國內(nèi)最為常用的是RPR和TRUST滴度法,且長期以來成為篩查檢測獻血者的主要方法。機體感染梅毒螺旋體后,產(chǎn)生特異性抗螺旋體抗體(TPAb)及非特異性的抗類脂質(zhì)抗體。梅毒特異性抗體出現(xiàn)早、消失慢,即使經(jīng)正規(guī)的抗梅毒治療,仍然檢出了特異性抗體,甚至可終生檢出[3]。據(jù)文獻[4]報道,人體感染梅毒螺旋體后,血清中產(chǎn)生的抗螺旋體抗體相對與抗類脂質(zhì)抗體早[5]。

膠體金免疫層析法即金標法,是近幾年發(fā)展起來的繼三大標志免疫檢測之后一種新的免疫檢測技術(shù)[6]。該試驗的原理是將各種試劑逐一固定在同一張試紙條上,檢測標本列于試紙條的一端,一種試劑溶解后,通過毛細血管作用移動,與條上另外的試劑接觸發(fā)生反應(yīng),像層析一樣[7]。

TPPA檢測血清中的梅毒螺旋體抗體,特異性好、靈敏度高,已是目前公認的檢測梅毒血清試驗方法;但因試劑較貴,檢測用時較長。金標法,采用了純化重組基因的梅毒抗原,膠體金作為其指示標記,硝酸纖維素膜上進行反應(yīng),雙抗原夾心法原理為基礎(chǔ),快速定性的檢測人血清(血漿)中的梅毒螺旋體特異性抗體,其特異性、靈敏度與TPPA相近,符合率為93.88%(46/49),從而替代TPPA作為快速梅毒血清確證試驗。但是血清(血漿)中特異性梅毒螺旋體抗體濃度過低時,梅毒螺旋體抗體膠體金法會產(chǎn)生假陰性反應(yīng),這就需要與TPPA方法結(jié)合,再進行綜合的判斷。

本實驗結(jié)果顯示,金標法其特異性和TPPA相比無顯著差異,且明顯好于TRUST法。TRUST滴度法和金標法之間在假陽性之間無明顯的區(qū)別,但是TRUST滴度法的假陰性率明顯高于金標法,由于金標法檢測在老年患者中存在較高的假陽性率,因此在初篩試驗陽性時,必須進一步選擇TRUST試驗并結(jié)合臨床進行綜合分析,才能做出準確診斷。金標法試劑成本低,符號顯示結(jié)果明確,操作簡便,可分批或單人份檢測,結(jié)果易保存。因此,采用靈敏特異的梅毒螺旋體抗體診斷金標法可以完全與TRUST滴度法相互替代。作為大批量標本梅毒篩查的理想方法,又可以作為診斷試驗。

【參考文獻】

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