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【關(guān)鍵詞】薄層液基細(xì)胞涂片

脫落細(xì)胞學(xué)檢查是臨床病理診斷的重要手段，一張高質(zhì)量的細(xì)胞涂片，能提高惡性病變檢出率。本院近年采用薄層液基細(xì)胞涂片技術(shù)（LPT），改進(jìn)細(xì)胞涂片方法，取得較好的效果。報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1一般資料

隨機(jī)取本院2006年1月至2007年1月送檢標(biāo)本痰液、胸腹水、尿液及宮頸涂片計(jì)957例份，其中男523例，女434例。每例做常規(guī)涂片2張以作對(duì)照。

1.2離心機(jī)，振蕩器。

1.3液基細(xì)胞試劑

購(gòu)自利普公司，由2004年4月通過(guò)美國(guó)FDA認(rèn)證。

1.4常規(guī)細(xì)胞涂片

取宮頸刮片或痰液含血性或灰白粘稠區(qū)制成涂片2張；取胸腹水10ml，1000轉(zhuǎn)/min，離心10min，棄上清液，混勻沉淀物后涂片，干燥后95％酒精固定15min，HE染色后鏡檢。

1.5薄層液基細(xì)胞涂片

取宮頸刮出物或痰液含血性及灰白粘稠區(qū)入細(xì)胞基液，混勻靜置30min；取胸腹水、尿液等體液標(biāo)本50ml，2000轉(zhuǎn)/min，離心10min，棄上清液，混勻沉淀置入細(xì)胞基液30min，含血性物較多的可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間。在備用試管內(nèi)倒入4ml清洗液，再加入含標(biāo)本（痰液、胸腹水、尿液等）的細(xì)胞基液，緩慢倒入，可見(jiàn)到分層現(xiàn)象。離心2000轉(zhuǎn)/min，10min，棄上清液，振蕩器混勻，加入等量的液基細(xì)胞涂片液，混勻涂片。干燥后95％酒精固定15min，HE染色后鏡檢。

2結(jié)果

957例液基細(xì)胞標(biāo)本共檢出惡性瘤細(xì)胞（含可疑）109例，宮頸18例為異常上皮細(xì)胞，本組就薄層液基細(xì)胞涂片與常規(guī)細(xì)胞涂片在靈敏度方面和鏡下特征進(jìn)行比較。

2.1胸腹水共檢407例，液基涂片檢出惡性瘤細(xì)胞（含可疑）73例，常規(guī)涂片64例，靈敏度提高12.3％；痰液共檢164例，液基涂片檢出陽(yáng)性數(shù)8例，常規(guī)涂片6例，靈敏度提高25％；尿液共檢229例，液基涂片檢出陽(yáng)性28例，常規(guī)涂片18例，靈敏度提高35.7％；宮頸涂片157例，液基涂片報(bào)告鱗狀上皮異常18例，常規(guī)涂片16例，靈敏度提高11.1％。見(jiàn)表1。表1兩種涂片方法對(duì)各種脫落細(xì)胞標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果比較（略）

2.2鏡下特征比較

(1)使用傳統(tǒng)方法制作的痰液涂片（宮頸涂片）較厚，粘液、雜質(zhì)及壞死物含量較多，細(xì)胞缺乏完整性，結(jié)構(gòu)模糊不清。漿膜腔積液涂片細(xì)胞堆積較厚，分布不均，含較多紅細(xì)胞，有紅染的背景（圖1）。(2)用薄層液基制作的涂片細(xì)胞面積縮小，涂片背景干凈；紅細(xì)胞大多消失，痰液和宮頸

涂片中粘液溶解；細(xì)胞層次分明，胞核胞質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰（圖2）。

3討論

脫落細(xì)胞學(xué)檢查是一項(xiàng)方便簡(jiǎn)單的檢查方法，它有利于癌癥篩查、早期發(fā)現(xiàn)癌癥、指導(dǎo)治療等。傳統(tǒng)的病理細(xì)胞學(xué)制片均采用直接涂片，推片或離心后涂片，制出的涂片細(xì)胞分布不均，重疊，背景含粘液、紅細(xì)胞、雜質(zhì)、壞死細(xì)胞等，影響鏡檢，陽(yáng)性檢出率低。本組痰檢和尿液檢測(cè)靈敏度較低，主要是標(biāo)本取材不正確，痰液內(nèi)雜質(zhì)、粘液、炎性細(xì)胞過(guò)多，過(guò)厚而影響診斷；尿液中本身細(xì)胞含量較少，離心不徹底，涂片過(guò)稀導(dǎo)致細(xì)胞很少，缺乏有效的診斷細(xì)胞數(shù)。目前應(yīng)用的薄層液基細(xì)胞技術(shù)，挑取的細(xì)胞量較傳統(tǒng)細(xì)胞多，采取標(biāo)本后放入保存液中，及時(shí)軟化粘液和固定以保存細(xì)胞，加入清潔液通過(guò)分層離心技術(shù)去除標(biāo)本中的粘液、紅細(xì)胞及其他非細(xì)胞碎片，加入細(xì)胞后振蕩將細(xì)胞團(tuán)塊分散，形成單個(gè)細(xì)胞樣本，最后將細(xì)胞均勻地涂在載玻片上，進(jìn)行固定和染色。涂片時(shí)用細(xì)胞混懸液約30ul在玻片上涂成直徑1cm大小圓形分布區(qū)域，這樣使被檢細(xì)胞集中，數(shù)量多，易于閱片。LPT與常規(guī)制片方法比較，改善了樣本收集率，并使細(xì)胞均勻的分布在載玻片上，提高了檢出的陽(yáng)性率。該技術(shù)不僅保存細(xì)胞的完整性，還保全了細(xì)胞抗原性，由于采集的細(xì)胞全部存放于細(xì)胞保存液內(nèi)而不被自溶及污染，可多量涂片進(jìn)行免疫組化染色及原位分子雜交［1］（圖3）。

薄層液基技術(shù)制片的優(yōu)良性，可明顯提高癌癥確診率，能為臨床提供可靠的診斷依據(jù)。在篩查宮頸癌方面，優(yōu)于傳統(tǒng)的巴氏涂片，采用TBS報(bào)告系統(tǒng)國(guó)際診斷標(biāo)準(zhǔn)，以得到了普遍認(rèn)可［2］。該技術(shù)用于痰液、尿液、漿膜腔積液也能提高惡性細(xì)胞檢出率,為臨床治療提供可靠的診斷依據(jù)。但LPT技術(shù)也有不足之處，成本較高，不能在基層醫(yī)院普及。在技術(shù)方面一些問(wèn)題還有待改進(jìn)，如細(xì)胞固縮等。

【參考文獻(xiàn)】

1孫小蓉，朱香芬，李華芬，等.介紹一種低耗高質(zhì)的液基薄層子宮頸細(xì)胞制片新方法.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2005，21（2）：232～234.

2顧美皎.TBS系統(tǒng)中異常上皮細(xì)胞的診斷和處理.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2003，19（8）：466.