1選擇性弱（指對(duì)兩種以上真菌有作用）、具有殺滅真菌作用的中草藥

有些中草藥，表現(xiàn)出對(duì)多種真菌的強(qiáng)大抑制或殺滅作用。土槿皮、高良姜、牡丹皮乙醇提取物在較低濃度（1mg/ml）時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。肉豆蔻、肉桂、丁香、防己、桂枝、黃柏、急性子、萆解、知母、黃連、菖蒲，乙醇提取物1～10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。紫苑、徐長卿、藿香、黃芩、鶴虱、丹參［1］、川芎［2］乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。蛇床子、莪術(shù)、鵝不食草、地骨皮、補(bǔ)骨脂、威靈仙、木香乙醇提取物1～10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長；夜交藤、生地榆乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、啤酒酵母(GL-7)的生長；訶子、白術(shù)、紫草、青木香、甘草、當(dāng)歸乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用。細(xì)辛、馬齒莧、紅花、海桐皮、茜草、蒿本、白芷、白蘚皮、羌活、魚腥草、紫花地丁乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用［1］。5%羌活水提物對(duì)8種致病性淺部真菌有明顯抑制作用，平均MIC為11．88%［3］。茵陳蒿、郁金、獨(dú)活乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長，對(duì)啤酒酵母(GL-7)有強(qiáng)大抑制作用。姜黃、大黃乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制啤酒酵母(GL-7)生長，對(duì)白色念珠菌、威克海姆原藻，有明顯抑制作用［1］。姜黃揮發(fā)油和姜黃水浸出液對(duì)13種常見致病真菌最低抑菌濃度為1．50～0．08%和2．50～0．16%［4］。大黃的抗真菌作用僅表現(xiàn)在抗皮膚癬菌方面，MIC較高(50～100mg/ml)［5］，對(duì)白色念珠菌和新生隱球菌的MIC為100．0、25．0mg/ml［6］，其水煎劑對(duì)馬拉色菌的MIC為250mg/ml［7］。東北刺人參揮發(fā)油對(duì)紅色毛癬菌、犬小孢子菌、須癬毛癬菌、紫色毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌等常見皮膚癬菌的MIC為0．06%～0．13%，MF(最低殺菌濃度)為0．13%～0．25%［8］。生姜乙醇提取物對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬菌，MIC為0．06%～0．13%，MFC為0．13%～0．25%［9］。五倍子乙醇提取物1mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌生長，對(duì)威克海姆原藻有明顯抑制作用［1］。蒼術(shù)萃取浸出液對(duì)斷發(fā)癬菌等10種不同真菌的MIC和MFC（50％藥物浸出液乳劑體積／100ml）在1．0～4．0之間［10］。

2選擇性強(qiáng)（指僅對(duì)一種真菌有作用）、具有殺滅真菌作用的中草藥

八角茴香乙醇提取物1mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長；野菊花、忍冬藤、青蒿、蘆薈、骨碎補(bǔ)、萊菔子、老鸛草、兒茶、胡黃連、木鱉子、小茴香、淫羊藿、紫蘇乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長［1］。青蒿對(duì)8種致病性淺部真菌有明顯抑制作用［3］，其水煎劑對(duì)馬拉色菌有明顯抑制作用（MIC：225mg/ml）［4］；烏梅、透骨草、生側(cè)柏、連翹、川槿皮乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制啤酒酵母(GL-7)生長［1］。

3選擇性弱、有明顯抗真菌作用的中草藥

奇蒿氯仿提取物對(duì)新型隱球菌、白色念珠菌的MIC分別為12．5、25mg/ml［11］。竹瀝對(duì)新生隱球菌、煙曲霉菌、白色念珠菌均有明顯的抑菌作用，其MIC分別為26．9μg/ml，53．8μg/ml，26．9μg/ml［12］。檳榔、蘇木乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，對(duì)威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)有強(qiáng)大抑制作用，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用［1］。七葉一枝花對(duì)白色念珠菌和新生隱球菌的最低抑菌濃度為10、17mg/ml［6］。木通、麻黃、秦皮、扁蓄、赤芍乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，明顯抑制白色念珠菌、威克海姆原藻生長；白花蛇舌草乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，明顯抑制白色念珠菌、啤酒酵母(GL-7)生長［1］。秦皮對(duì)8種致病性淺部真菌有明顯抑制作用［3］，其水煎劑對(duì)馬拉色菌的MIC為350mg/ml［8］。斑蝥乙醇提取物對(duì)白色念珠菌、石膏樣毛癬菌、紅色毛癬菌有抑制作用，MIC分別為80mg/ml、5mg/ml、1mg/ml［13］。川椒乙醇提取物(100mg/ml)對(duì)白色念珠菌、石膏樣毛癬菌、紅色毛癬菌有抑制作用，MIC分別為100mg/ml、5mg/ml、1mg/ml［13］。大蒜乙醇提取物(100mg/ml)對(duì)白色念珠菌、石膏樣毛癬菌、紅色毛癬菌有抑制作用，MIC分別為100mg/ml、50mg/ml、4mg/ml［9］。土大黃、血竭、秦艽、苦參乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，對(duì)威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)有明顯抑制作用［1］。山胡椒果水蒸氣蒸餾部分對(duì)新型隱球菌等四種皮膚致病真菌的MIC為0．03～0．05ml/L，對(duì)黑曲霉等五種污染霉菌的MIC為1．0～1．5ml/L［14］。射干對(duì)8種致病性淺部真菌有明顯抑制作用［3］，其水煎劑對(duì)馬拉色菌有抑制作用（MIC：350mg/ml）［7］。山蒼子油對(duì)白念珠菌等5種標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC在14～76μg/ml之間［15］。龍血竭抗白色念珠菌等6種真菌的MIC50為0．17～5.00mg/ml［16］。銀杏外種皮提取物能明顯抑制13種實(shí)驗(yàn)真菌生長，濃度為5%時(shí)的抑制有效率為92．3%。1．5g銀杏外種皮總提取物對(duì)真菌生長的抑菌抑制效果相當(dāng)于0．5g克霉唑［17］。

1體外抗真菌活性

臨床報(bào)道，較多的中藥方劑對(duì)真菌感染性疾病顯示出良好的治療作用［7-11］。通過實(shí)驗(yàn)研究亦發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方制劑具有良好的體外抗真菌活性。目前體外抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)方法主要為瓊脂稀釋法、瓊脂擴(kuò)散法及美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（CLSI）的M27-A、M38-A方案。瓊脂稀釋法是目前較為廣泛應(yīng)用的初篩方法，其方法是在瓊脂平板內(nèi)摻入不同濃度的抗真菌藥物，以多點(diǎn)接種法將相同量的待測(cè)真菌接種于瓊脂表面，以菌不生長的最低濃度定為該藥對(duì)真菌的最小抑菌濃度(MIC)。多數(shù)研究者在試管內(nèi)或在平皿內(nèi)進(jìn)行,此方法適合于大量菌株測(cè)定實(shí)驗(yàn)。胡圣愛等［12］應(yīng)用固體培養(yǎng)基試管內(nèi)藥基法測(cè)定了膚癬消搽劑（連翹、苦參、大風(fēng)子、鴉膽子、黃柏、蛇床子等）對(duì)石膏樣小孢子菌有抑制作用,其MIC為1:100倍。楊志波等［13］采用沙氏培養(yǎng)基試管內(nèi)藥基法觀察到復(fù)方二礬浸液（枯礬、皂礬、兒茶、側(cè)柏葉、地骨皮、土槿皮、黃精、公丁香、血竭、食醋）對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、石膏樣小孢子菌的最小抑菌濃度分別是0.25%、0.5%、0.5%。謝淑霞等［14］采用沙氏培養(yǎng)基試管內(nèi)藥基法觀察到祛癬洗劑（白蘚皮、苦參、地膚子、土槿皮、羌活、紫地榆、黃柏、椒目、百部、蛇床子等）對(duì)我國南方常見的9種致病真菌均有抑制作用，其最小抑菌濃度6.25％～50％，對(duì)癬菌的抑制作用優(yōu)于白念珠菌。盧全德等［15］報(bào)道采用試管內(nèi)藥基法測(cè)得膚疾安噴霧劑（金銀花、野菊花、苦參、血竭、薄荷腦等）對(duì)絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌的MIC為0.39mg/ml，對(duì)須癬毛癬菌、羊毛狀小孢子菌的MIC為0.78mg/ml，對(duì)白念珠菌、青霉菌為1.56mg/ml。陳超等［16］以瓊脂稀釋法觀察到復(fù)方黃連皮康酊（黃連100g、苦楝皮50g、海桐皮50、藁本30g、檳榔50g、大風(fēng)子15g、郁金30g、白礬30g、蘆薈30g、地膚子50g、蕪荑30g組方制成酊劑）對(duì)皮膚癬菌（紅色毛癬菌、須癬毛癬菌和絮狀表皮癬菌）及深部真菌（白念珠菌）均有明顯的抗菌作用，使菌落縮小，與克霉唑癬藥水差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，并且得出復(fù)方黃連皮康酊對(duì)表皮真菌的抗菌作用大于對(duì)深部真菌（白念珠菌）的結(jié)論。魏蓉［17］用試管瓊脂稀釋法觀察到祛癬止癢洗劑（丁香、黃精、龍膽草、明礬、百部、藿香、黃連、土槿皮、薄荷腦、冰片水煎液）對(duì)9種真菌均有抑制作用，抑菌濃度分別為0.39%(紅色毛癬菌)、0.195%(須癬毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌、紫色毛癬菌、許蘭毛癬菌、羊毛狀小孢子癬菌、絮狀表皮癬菌)、0.75%(石膏樣小孢子菌)、1.56%(白念珠菌)。張玲等［18］采用試管稀釋法，進(jìn)行蟹黃膚寧軟膏對(duì)犬小孢子菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌的體外藥效學(xué)研究，結(jié)果蟹黃膚寧軟膏對(duì)8株淺部毛癬菌屬的MIC均在0.03125～0.25mg/mL之間，顯示了蟹黃膚寧軟膏較好的體外抗真菌活性。瓊脂擴(kuò)散法是通過測(cè)量真菌生長被抑制的范圍大小來確定抗真菌活性，也是一種簡單、易行的初篩方法。楊國晶等［19］用瓊脂擴(kuò)散法觀察了復(fù)方苦槿霜（苦參150g、土槿皮150g、黃柏150g、白蘚皮150g、地膚子150g、川芎150g、兒茶100g）及其原料藥對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、犬小孢子癬菌、白念珠菌的抑菌作用，結(jié)果10%、20%復(fù)方苦槿霜及10%、20%原料藥抑菌效果相同，與達(dá)克寧相當(dāng)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，明顯優(yōu)于5%復(fù)方苦槿霜及5%原料藥的抑菌效果，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。何定淑等［20］采用紙片濃度梯度法研究硝礬散（枯礬、芒硝）對(duì)紅色毛癬菌和須癬毛癬菌株的體外抑菌作用，結(jié)果2%硝礬散對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌的MIC范圍分別為0.0625～0.125mg/ml、0.03125～0.125mg/ml。林靜瑜等［21］采用打孔藥物瓊脂擴(kuò)散法觀察到癬藥膏(由丁香、蜂房等8味中藥組成)5%濃度以上對(duì)須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌均有明顯的抗菌作用，1%濃度僅對(duì)須癬毛癬菌有抗菌作用，但各濃度均對(duì)白念珠菌感染無效。曾嶸等［22］采用管蝶法對(duì)玉陰潔沖洗劑進(jìn)行了藥效學(xué)研究，結(jié)果表明，1g生藥/ml玉陰潔洗劑體外對(duì)白念珠菌有一定的抑制作用，抑菌圈為(20.0±0.8)mm，MIC為12.5%(1:8稀釋度)。徐文躍等［23］采用改良的平皿挖洞灌藥法觀察到白蓮洗劑(由白頭翁、半邊蓮、蛇床子、黃連、黃柏、百部、地膚子等組成)對(duì)白念珠菌有明顯抑制作用，其作用強(qiáng)度與潔爾陰相當(dāng)。瓊脂稀釋法和瓊脂擴(kuò)散法的試驗(yàn)結(jié)果受許多因素的影響，包括菌接種液的濃度及準(zhǔn)備、培養(yǎng)基成分及pH值，孵育時(shí)間和溫度及不同的終點(diǎn)判定方法等，重復(fù)性差，不利于各實(shí)驗(yàn)室之間的比較，美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（CLSI）在1997年、1998年和2003年先后提出了酵母菌的液基稀釋法抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)方案（M27-A）、產(chǎn)孢絲狀真菌的抗真菌藥敏試驗(yàn)倡導(dǎo)方案（M38-P）和M38-A方案，這些方案準(zhǔn)確性好、重復(fù)性高，實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的一致性可與抗細(xì)菌的藥物敏感試驗(yàn)相媲美。鄭瑋清等［24］參照CLSIM38-A液基試管法進(jìn)行改良，觀察甲癬中藥洗劑（龍膽草40g、黃連30g、射干20g、半枝蓮30g、地膚子50g、紫草10g和花椒10g）蒸餾水提取液和乙醇提取液對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、羊毛狀小孢子菌、絮狀表皮癬菌和白念珠菌的抗真菌作用。結(jié)果甲癬中藥洗劑對(duì)皮膚癬菌的敏感性較好，而對(duì)白念珠菌的敏感性較差，同時(shí)可明顯看出，醇提液的MIC值低于水提液的MIC值，說明中藥的抗真菌藥物成分不僅包括水溶性物質(zhì)，而且包括脂溶性物質(zhì)。尤力都孜·買買提等［25］采用CLSIM-38P方案測(cè)定維藥雅麗蔓制劑對(duì)臨床常見皮膚癬菌的抗菌作用，結(jié)果，對(duì)須癬毛癬菌的MIC90為190.46μg/ml(平均MIC128μg/ml)，對(duì)紅色毛癬菌的MIC90為148.57μg/ml(平均MIC93.42μg/ml)，對(duì)絮狀表皮癬菌的MIC90為311.27μg/ml(平均MIC128μg/ml)，對(duì)石膏樣小孢子菌的MIC90為429.54μg/ml(平均MIC194.01μg/ml)。雅麗蔓制劑對(duì)真菌中不同菌種的MIC90值范圍為148～429μg/ml，表明雅麗蔓制劑對(duì)臨床常見皮膚癬菌具有顯著的抗真菌作用。鄭瑋清等［26］以美國CLSIM27-A液基法并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行改良，檢測(cè)硝礬洗劑（硼砂、芒硝、明礬1:1水溶液）及其單味藥物對(duì)紅色毛癬菌15株、須癬毛癬菌9株的MFC和MIC，結(jié)果硝礬洗劑的MFC為1.25～20mg/ml(平均為5.26mg/ml)，低于芒硝的MIC和明礬的MFC值。

2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

部分學(xué)者利用動(dòng)物真菌病模型進(jìn)行了抗真菌中藥的研究，相比僅在試管內(nèi)進(jìn)行抗真菌試驗(yàn)得到的結(jié)果應(yīng)更有意義。徐洪波等［27］用紅色毛癬菌制作豚鼠皮膚真菌感染模型，將25％藿黃散洗劑（藿香、黃精、苦參、茵陳、枯礬等）水煎液涂布感染皮膚，給藥2次/d，連續(xù)給藥21d。豚鼠在用藥6d后鱗屑減少，12d后鱗屑逐漸消失，呈淺紅色斑，真菌檢查均為陰性，18～21d皮膚外觀恢復(fù)正常。何定淑等［20］用2%和4%硝礬散溫水浸泡治療豚鼠須癬毛癬菌感染的足癬、體癬，1次/d，30min/次，共7d，顯示具有較好療效，與1%足光粉比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與蒸餾水組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。曾勇等［28］研究消炎抗癬霜(由升藥底、蛇床子、冰片、樟腦等中藥組成)對(duì)石膏樣小孢子菌、須癬毛癬菌導(dǎo)致的豚鼠體癬模型的治療作用，結(jié)果，2周后觀察到消炎抗癬霜能夠減輕真菌所致豚鼠皮膚病變程度，提高真菌鏡檢和真菌培養(yǎng)的轉(zhuǎn)陰率。楊小潔等［29］觀察了中藥真菌安膠囊對(duì)白念珠菌深部感染小鼠的治療作用，結(jié)果治療組、預(yù)防組深部真菌感染的小鼠病死率和血液內(nèi)的真菌數(shù)，與非治療組相比明顯降低，實(shí)驗(yàn)表明中藥真菌安膠囊有治療白念珠菌深部感染的作用。譚元生等［30］對(duì)復(fù)方苦參液的藥效學(xué)進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，復(fù)方苦參洗液具有較好的抗家兔陰道黏膜人工白念珠菌感染作用，其治療后陰道涂片、真菌學(xué)培養(yǎng)、病理切片檢查結(jié)果與潔爾陰組相比無差異。梁君兒等［31］制成大白兔白色念珠菌陰道炎模型，并使用香荷藥條(由黃連、黃柏、丁香、薄荷等7味藥組成)治療，實(shí)驗(yàn)表明香荷藥條能有效抑制白色念珠菌的生長，使大白兔陰道白色念珠菌的轉(zhuǎn)陰率與對(duì)照組達(dá)克寧栓無顯著性差異。

3中藥復(fù)方制劑與單味藥物的體外抗真菌活性比較

邱瑩等［32］觀察大風(fēng)子、皂角、川椒、百部、蛇床子、大黃、地骨皮、黃柏、苦參、白蘚皮、地膚子、紅花、桃仁、姜黃、藿香、芒硝、明礬、硼砂、荊芥、防風(fēng)20種中藥水煎液及根據(jù)單味中藥抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果選取的6種（大風(fēng)子、皂角、川椒、明礬、藿香、地骨皮）抑菌效果最好的中藥組成的復(fù)方水煎液對(duì)皮膚癬菌和白念珠菌的抑菌作用，結(jié)果復(fù)方抑皮膚癬菌MIC:0.625%,對(duì)白念珠菌MIC:2.5%，抑菌強(qiáng)度好于單味藥，說明這些藥物之間有協(xié)同作用。鄭瑋清等［26］檢測(cè)硝礬洗劑（硼砂、芒硝、明礬1:1水溶液）及其單味藥物對(duì)紅色毛癬菌和須癬毛癬菌MIC，結(jié)果硝礬洗劑、硼砂、芒硝、明礬的平均MIC（或MFC）分別為5.26mg/ml、2.313mg/ml、20.19mg/ml、12.13mg/ml，硝礬洗劑的抗真菌活性強(qiáng)于芒硝組和明礬組，弱于硼砂組。黃寧等［33］觀察方劑1（白蘚皮、生姜、大蒜、川椒、斑蟊、丁香即復(fù)方白蘚皮）、方劑2為復(fù)方白蘚皮的拆方（丁香、白蘚皮、斑蝥、川椒）和復(fù)方白蘚皮的各單味中藥的醇提液對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、白念珠菌、短帚菌5種甲真菌病常見致病菌的MIC，結(jié)果方劑2的抑菌效果明顯優(yōu)于方劑1及各單味中藥(P<0.05)。作者認(rèn)為這可能復(fù)方白蘚皮酊中各組分藥物間還存在一定相互拮抗的作用，因此拆方后表現(xiàn)出更優(yōu)的抗真菌作用，但因部分中藥抗真菌機(jī)制多樣性，有的可能通過增強(qiáng)機(jī)體免疫力而抗真菌，故復(fù)方白蘚皮酊的臨床效果也很顯著，這有待在臨床中做進(jìn)一步的研究。中藥復(fù)方制劑藥物之間具有相互協(xié)同、提高單味中藥的抗真菌活性，或是相互拮抗、降低抗菌作用，或是中藥在體內(nèi)通過其他途徑發(fā)揮抗真菌作用，如提高機(jī)體免疫力，這也需今后進(jìn)一步的研究。

【關(guān)鍵詞】,抗真菌

關(guān)鍵詞：中草藥；抗真菌；回顧

近年來，由于廣譜抗生素、激素、化療和免疫抑制劑的普遍應(yīng)用，真菌感染的發(fā)病率日益增加。但目前臨床上應(yīng)用的西藥抗真菌藥物，均存在著療效差、毒性大等缺點(diǎn)。尋找廣譜、高效、低毒的抗真菌新藥已成為藥物研究的熱點(diǎn)。特別是從植物中尋找抗真菌藥物，已成為公認(rèn)的重要研究方向。我國科學(xué)家經(jīng)過幾十年的探索，發(fā)現(xiàn)了許多中藥具有抗真菌作用，分離得到了多種有效化學(xué)成分，對(duì)這些成分的作用機(jī)理作出了初步研究，這些工作為開發(fā)抗真菌新藥和中藥用于臨床抗真菌，奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。本文對(duì)1995年至2004年十年間，中草藥抗真菌的研究文獻(xiàn)，作一綜述。

十年間，有關(guān)中草藥抗真菌試驗(yàn)研究中文文獻(xiàn)約有96篇，對(duì)187味中藥進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，有162味中草藥具肯定的抗真菌作用。

1選擇性弱（指對(duì)兩種以上真菌有作用）、具有殺滅真菌作用的中草藥

有些中草藥，表現(xiàn)出對(duì)多種真菌的強(qiáng)大抑制或殺滅作用。土槿皮、高良姜、牡丹皮乙醇提取物在較低濃度（1mg/ml）時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。肉豆蔻、肉桂、丁香、防己、桂枝、黃柏、急性子、萆解、知母、黃連、菖蒲，乙醇提取物1～10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。紫苑、徐長卿、藿香、黃芩、鶴虱、丹參［1］、川芎［2］乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。蛇床子、莪術(shù)、鵝不食草、地骨皮、補(bǔ)骨脂、威靈仙、木香乙醇提取物1～10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長；夜交藤、生地榆乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、啤酒酵母(GL-7)的生長；訶子、白術(shù)、紫草、青木香、甘草、當(dāng)歸乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用。細(xì)辛、馬齒莧、紅花、海桐皮、茜草、蒿本、白芷、白蘚皮、羌活、魚腥草、紫花地丁乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用［1］。5%羌活水提物對(duì)8種致病性淺部真菌有明顯抑制作用，平均MIC為11．88%［3］。茵陳蒿、郁金、獨(dú)活乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長，對(duì)啤酒酵母(GL-7)有強(qiáng)大抑制作用。姜黃、大黃乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制啤酒酵母(GL-7)生長，對(duì)白色念珠菌、威克海姆原藻，有明顯抑制作用［1］。姜黃揮發(fā)油和姜黃水浸出液對(duì)13種常見致病真菌最低抑菌濃度為1．50～0．08%和2．50～0．16%［4］。大黃的抗真菌作用僅表現(xiàn)在抗皮膚癬菌方面，MIC較高(50～100mg/ml)［5］，對(duì)白色念珠菌和新生隱球菌的MIC為100．0、25．0mg/ml［6］，其水煎劑對(duì)馬拉色菌的MIC為250mg/ml［7］。東北刺人參揮發(fā)油對(duì)紅色毛癬菌、犬小孢子菌、須癬毛癬菌、紫色毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌等常見皮膚癬菌的MIC為0．06%～0．13%，MF(最低殺菌濃度)為0．13%～0．25%［8］。生姜乙醇提取物對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬菌，MIC為0．06%～0．13%，MFC為0．13%～0．25%［9］。五倍子乙醇提取物1mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌生長，對(duì)威克海姆原藻有明顯抑制作用［1］。蒼術(shù)萃取浸出液對(duì)斷發(fā)癬菌等10種不同真菌的MIC和MFC（50％藥物浸出液乳劑體積／100ml）在1．0～4．0之間［10］。

【關(guān)鍵詞】抗真菌藥；,,多烯類；,,三唑類；,,棘白菌素類

摘要：近20多年來，隨著大量廣譜抗生素的應(yīng)用、骨髓和臟器的移植、皮質(zhì)激素及免疫抑制劑的應(yīng)用、艾滋病發(fā)病率的增加、各種導(dǎo)管的介入和真菌檢測(cè)技術(shù)的提高，念珠菌血癥和系統(tǒng)性曲霉感染逐漸增多。北京協(xié)和醫(yī)院報(bào)道在四個(gè)不同年代敗血癥血培養(yǎng)的結(jié)果顯示，1994～1995年真菌發(fā)生率為81%；2000年為67%。20年149例真菌感染的分析顯示，真菌感染呈逐年上升的趨勢(shì)。臨床上已有耐氟康唑的念珠菌和耐兩性霉素B的曲霉存在。因此需要新的抗真菌藥物。目前即將推出和已上市的新藥有：多烯類的制霉菌素脂質(zhì)體、兩性霉素B脂質(zhì)體劑型AmBisome、兩性霉素B脂質(zhì)體復(fù)合物Abelect、兩性霉素B膠樣分散體Amphotec、伊曲康唑口服液和注射劑、伏立康唑注射劑和口服片劑以及卡泊芬凈注射劑。各種新藥均有其特點(diǎn)與不良反應(yīng)，但總的是新藥的開發(fā)和臨床應(yīng)用，將會(huì)對(duì)侵性真菌感染提供有力的治療措施，真菌感染的治療前景將會(huì)有進(jìn)一步的改觀。

關(guān)鍵詞：抗真菌藥；多烯類；三唑類；棘白菌素類

在過去的二十年里，隨著大量廣譜抗生素的應(yīng)用、骨髓器官移植的開展、糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑的應(yīng)用，導(dǎo)管介入治療，特別是艾滋病的流行，念珠菌血癥和系統(tǒng)性曲霉病等系統(tǒng)性真菌感染逐漸增多。資料顯示，上述人群中深部真菌感染發(fā)生率約為11%～40%，病死率為40%［1～3］。北京協(xié)和醫(yī)院四個(gè)不同年代敗血癥培養(yǎng)的結(jié)果顯示，1994～1995年真菌敗血癥的發(fā)生率高達(dá)81%［4］；2000年真菌敗血癥的發(fā)生率達(dá)67%。20年149例真菌感染的分析顯示，真菌感染呈逐年上升趨勢(shì)［5］。去氧膽酸兩性霉素B(AMB)作為治療系統(tǒng)性真菌感染的廣譜抗真菌藥已成為治療真菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于不良反應(yīng)限制了其廣泛應(yīng)用。臨床上已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有耐氟康唑的念珠菌和耐兩性霉素B的曲霉存在，因此近年來一些新的抗真菌藥物包括三唑類、棘白菌素類以及毒性較小的兩性霉素B衍生制劑不斷出現(xiàn)，應(yīng)用于臨床取得顯著療效［6］。治療系統(tǒng)性真菌感染的藥物現(xiàn)共有多烯類(兩性霉素B及其衍生物)、三唑類(如氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑等)、嘧啶類(如氟胞嘧啶)、棘白菌素類(如卡泊芬凈)、復(fù)方磺胺甲口惡唑等。第一個(gè)治療系統(tǒng)性真菌感染的抗真菌藥物制霉菌素由于毒性大而逐漸被停用；1959年兩性霉素B產(chǎn)生，在20世紀(jì)70年代早期和80年代分別研究出氟胞嘧啶和酮康唑，隨著氟胞嘧啶的臨床應(yīng)用很快出現(xiàn)對(duì)氟胞嘧啶耐藥現(xiàn)象，而酮康唑的毒性也使其臨床應(yīng)用受到很大的限制。20世紀(jì)90年代三唑類如氟康唑、伊曲康唑由于療效確定且不良反應(yīng)較少，迅速廣泛用于臨床治療系統(tǒng)性真菌感染。自1990年至今的14年中，先后上市并應(yīng)用于臨床的藥物有氟康唑、伊曲康唑、兩性霉素B的不同劑型［包括兩性霉素B脂質(zhì)體(LAMB)、兩性霉素B膠體分散體(ABCD)、兩性霉素B脂質(zhì)復(fù)合物(ABLC)］，卡泊芬凈(caspofungin)及伏立康唑等。不久還有其它更多的藥物將應(yīng)用于臨床如普沙康唑(posaconazole)、拉夫康唑(ravuconazole)、制霉菌素脂質(zhì)體(liposomalnystatin,nystatinLF,商品名：Nyotran)以及micafungin(FK463)這些藥物不但毒副作用少，而且在某種程度上比兩性霉素B效果還好［6］。

1多烯類藥物

(1)制霉菌素脂質(zhì)體制霉菌素屬多烯類抗真菌藥，具有廣譜抗真菌作用，對(duì)新型隱球菌、念珠菌屬、曲霉等均有良好作用，經(jīng)皮膚黏膜用藥不吸收，口服幾乎全部自糞便排出對(duì)深部真菌感染無治療作用，注射用藥腎毒性大。臨床上僅限于局部治療口咽部、胃腸道及陰道真菌感染。Aronex公司將游離制霉菌素包裹在多層脂質(zhì)中，研制出注射用制霉菌素脂質(zhì)體(liposomalnystatin,NystatinLF，現(xiàn)進(jìn)入注冊(cè)階段)。其抗菌活性和抗菌譜與制霉菌素相仿，對(duì)念珠菌屬、新型隱球菌、曲霉、根霉、鐮孢霉、毛霉、梨頭霉和球孢子菌屬等均有抗菌活性。本品體外不但對(duì)白念珠菌有效包括對(duì)部分耐兩性霉素B的白念珠菌亦具有良好活性，而且對(duì)非白念珠菌如克柔念珠菌、光滑念珠菌、滑念珠菌和熱帶念珠菌均具有活性，但不及對(duì)白念珠菌。能有效抑制全部受試曲霉株包括伊曲康唑耐藥株；對(duì)黃曲霉的抗菌活性略優(yōu)于兩性霉素含脂復(fù)合制劑，但不及兩性霉素B和伊曲康唑［7］。本品對(duì)臨床常見真菌分離株的最小殺菌濃度(MFC)和最小抑菌濃度(MIC)相差不大，在人體內(nèi)呈非線性藥動(dòng)學(xué)，藥物終末半衰期隨給藥劑量增加相應(yīng)延長，給藥劑量范圍在025～075mg/kg時(shí)，AUC呈線性增長；劑量增加至075～10mg/kg，AUC不再改變，代謝達(dá)飽和狀態(tài)［8］。本品易于和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)結(jié)合，在肺、肝、脾組織中達(dá)到較高濃度，由于本品主要經(jīng)腎臟排泄，因此腎組織中也有較高的濃度。本品表現(xiàn)出良好的安全性，主要的不良反應(yīng)有低鉀血癥(約占25%)、腎功能損害(每日劑量6mg/kg以上時(shí)可能發(fā)生)；快速靜脈點(diǎn)滴可能出現(xiàn)寒戰(zhàn)、發(fā)熱、呼吸困難，偶有皮疹、肝功能損害，但不影響治療，無需停藥。(2)兩性霉素B及其不同劑型為多烯類抗真菌藥，與真菌細(xì)胞膜麥角固醇結(jié)合，膜滲透性改變導(dǎo)致真菌死亡。該藥抗菌譜廣，幾乎對(duì)所有的真菌都有較強(qiáng)的抗菌作用，對(duì)某些嚴(yán)重的深部真菌病如新生隱球菌腦膜炎、侵襲性曲霉病，特別是對(duì)免疫缺陷或嚴(yán)重粒細(xì)胞缺乏的患者的治療以及某些地方性真菌病如球孢子菌病、組織胞漿菌病、皮炎芽生菌病等仍需應(yīng)用兩性霉素B，因此迄今仍是許多危重深部真菌感染治療的首選藥物?，F(xiàn)已有三種不同的脂質(zhì)體劑型問世，它們由兩性霉素B用脂質(zhì)或脂質(zhì)體包裹或交織而成，使之能迅速被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)所攝取，減少與蛋白質(zhì)的結(jié)合，從而改善兩性霉素B的體內(nèi)過程和毒理學(xué)特性，具有與兩性霉素B相等的臨床療效，且發(fā)生的與輸注相關(guān)的毒性反應(yīng)和腎毒性明顯減少。①兩性霉素B脂質(zhì)體劑型(AMBisome)，是用脂質(zhì)體將兩性霉素B包裹而成；②兩性霉素B脂質(zhì)體復(fù)合物(ABLC)，商品名Abelect，是脂質(zhì)體與兩性霉素B交織而成；③兩性霉素膠樣分散體(ABCD)，商品名Amphocil和Amphotec是用膽固醇硫酸酯與等量的兩性霉素B混合包裹而成。

近年來，由于廣譜抗生素、激素、化療和免疫抑制劑的普遍應(yīng)用，真菌感染的發(fā)病率日益增加。但目前臨床上應(yīng)用的西藥抗真菌藥物，均存在著療效差、毒性大等缺點(diǎn)。尋找廣譜、高效、低毒的抗真菌新藥已成為藥物研究的熱點(diǎn)。特別是從植物中尋找抗真菌藥物，已成為公認(rèn)的重要研究方向。我國科學(xué)家經(jīng)過幾十年的探索，發(fā)現(xiàn)了許多中藥具有抗真菌作用，分離得到了多種有效化學(xué)成分，對(duì)這些成分的作用機(jī)理作出了初步研究，這些工作為開發(fā)抗真菌新藥和中藥用于臨床抗真菌，奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。本文對(duì)1995年至2004年十年間，中草藥抗真菌的研究文獻(xiàn)，作一綜述。

十年間，有關(guān)中草藥抗真菌試驗(yàn)研究中文文獻(xiàn)約有96篇，對(duì)187味中藥進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，有162味中草藥具肯定的抗真菌作用。

1選擇性弱（指對(duì)兩種以上真菌有作用）、具有殺滅真菌作用的中草藥

有些中草藥，表現(xiàn)出對(duì)多種真菌的強(qiáng)大抑制或殺滅作用。土槿皮、高良姜、牡丹皮乙醇提取物在較低濃度（1mg/ml）時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。肉豆蔻、肉桂、丁香、防己、桂枝、黃柏、急性子、萆解、知母、黃連、菖蒲，乙醇提取物1～10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。紫苑、徐長卿、藿香、黃芩、鶴虱、丹參［1］、川芎［2］乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。蛇床子、莪術(shù)、鵝不食草、地骨皮、補(bǔ)骨脂、威靈仙、木香乙醇提取物1～10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長；夜交藤、生地榆乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、啤酒酵母(GL-7)的生長；訶子、白術(shù)、紫草、青木香、甘草、當(dāng)歸乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用。細(xì)辛、馬齒莧、紅花、海桐皮、茜草、蒿本、白芷、白蘚皮、羌活、魚腥草、紫花地丁乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用［1］。5%羌活水提物對(duì)8種致病性淺部真菌有明顯抑制作用，平均MIC為11．88%［3］。茵陳蒿、郁金、獨(dú)活乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長，對(duì)啤酒酵母(GL-7)有強(qiáng)大抑制作用。姜黃、大黃乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制啤酒酵母(GL-7)生長，對(duì)白色念珠菌、威克海姆原藻，有明顯抑制作用［1］。姜黃揮發(fā)油和姜黃水浸出液對(duì)13種常見致病真菌最低抑菌濃度為1．50～0．08%和2．50～0．16%［4］。大黃的抗真菌作用僅表現(xiàn)在抗皮膚癬菌方面，MIC較高(50～100mg/ml)［5］，對(duì)白色念珠菌和新生隱球菌的MIC為100．0、25．0mg/ml［6］，其水煎劑對(duì)馬拉色菌的MIC為250mg/ml［7］。東北刺人參揮發(fā)油對(duì)紅色毛癬菌、犬小孢子菌、須癬毛癬菌、紫色毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌等常見皮膚癬菌的MIC為0．06%～0．13%，MF(最低殺菌濃度)為0．13%～0．25%［8］。生姜乙醇提取物對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬菌，MIC為0．06%～0．13%，MFC為0．13%～0．25%［9］。五倍子乙醇提取物1mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌生長，對(duì)威克海姆原藻有明顯抑制作用［1］。蒼術(shù)萃取浸出液對(duì)斷發(fā)癬菌等10種不同真菌的MIC和MFC（50％藥物浸出液乳劑體積／100ml）在1．0～4．0之間［10］。

2選擇性強(qiáng)（指僅對(duì)一種真菌有作用）、具有殺滅真菌作用的中草藥

八角茴香乙醇提取物1mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長；野菊花、忍冬藤、青蒿、蘆薈、骨碎補(bǔ)、萊菔子、老鸛草、兒茶、胡黃連、木鱉子、小茴香、淫羊藿、紫蘇乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長［1］。青蒿對(duì)8種致病性淺部真菌有明顯抑制作用［3］，其水煎劑對(duì)馬拉色菌有明顯抑制作用（MIC：225mg/ml）［4］；烏梅、透骨草、生側(cè)柏、連翹、川槿皮乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制啤酒酵母(GL-7)生長［1］。

【關(guān)鍵詞】,抗真菌

關(guān)鍵詞：中草藥；抗真菌；回顧

近年來，由于廣譜抗生素、激素、化療和免疫抑制劑的普遍應(yīng)用，真菌感染的發(fā)病率日益增加。但目前臨床上應(yīng)用的西藥抗真菌藥物，均存在著療效差、毒性大等缺點(diǎn)。尋找廣譜、高效、低毒的抗真菌新藥已成為藥物研究的熱點(diǎn)。特別是從植物中尋找抗真菌藥物，已成為公認(rèn)的重要研究方向。我國科學(xué)家經(jīng)過幾十年的探索，發(fā)現(xiàn)了許多中藥具有抗真菌作用，分離得到了多種有效化學(xué)成分，對(duì)這些成分的作用機(jī)理作出了初步研究，這些工作為開發(fā)抗真菌新藥和中藥用于臨床抗真菌，奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。本文對(duì)1995年至2004年十年間，中草藥抗真菌的研究文獻(xiàn)，作一綜述。

十年間，有關(guān)中草藥抗真菌試驗(yàn)研究中文文獻(xiàn)約有96篇，對(duì)187味中藥進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，有162味中草藥具肯定的抗真菌作用。

1選擇性弱（指對(duì)兩種以上真菌有作用）、具有殺滅真菌作用的中草藥

有些中草藥，表現(xiàn)出對(duì)多種真菌的強(qiáng)大抑制或殺滅作用。土槿皮、高良姜、牡丹皮乙醇提取物在較低濃度（1mg/ml）時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。肉豆蔻、肉桂、丁香、防己、桂枝、黃柏、急性子、萆解、知母、黃連、菖蒲，乙醇提取物1～10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。紫苑、徐長卿、藿香、黃芩、鶴虱、丹參［1］、川芎［2］乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長。蛇床子、莪術(shù)、鵝不食草、地骨皮、補(bǔ)骨脂、威靈仙、木香乙醇提取物1～10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長；夜交藤、生地榆乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌、啤酒酵母(GL-7)的生長；訶子、白術(shù)、紫草、青木香、甘草、當(dāng)歸乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻、啤酒酵母(GL-7)生長，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用。細(xì)辛、馬齒莧、紅花、海桐皮、茜草、蒿本、白芷、白蘚皮、羌活、魚腥草、紫花地丁乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長，對(duì)白色念珠菌有明顯抑制作用［1］。5%羌活水提物對(duì)8種致病性淺部真菌有明顯抑制作用，平均MIC為11．88%［3］。茵陳蒿、郁金、獨(dú)活乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制威克海姆原藻生長，對(duì)啤酒酵母(GL-7)有強(qiáng)大抑制作用。姜黃、大黃乙醇提取物10mg/ml濃度時(shí)，完全抑制啤酒酵母(GL-7)生長，對(duì)白色念珠菌、威克海姆原藻，有明顯抑制作用［1］。姜黃揮發(fā)油和姜黃水浸出液對(duì)13種常見致病真菌最低抑菌濃度為1．50～0．08%和2．50～0．16%［4］。大黃的抗真菌作用僅表現(xiàn)在抗皮膚癬菌方面，MIC較高(50～100mg/ml)［5］，對(duì)白色念珠菌和新生隱球菌的MIC為100．0、25．0mg/ml［6］，其水煎劑對(duì)馬拉色菌的MIC為250mg/ml［7］。東北刺人參揮發(fā)油對(duì)紅色毛癬菌、犬小孢子菌、須癬毛癬菌、紫色毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌等常見皮膚癬菌的MIC為0．06%～0．13%，MF(最低殺菌濃度)為0．13%～0．25%［8］。生姜乙醇提取物對(duì)紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌、絮狀表皮癬菌，MIC為0．06%～0．13%，MFC為0．13%～0．25%［9］。五倍子乙醇提取物1mg/ml濃度時(shí)，完全抑制白色念珠菌生長，對(duì)威克海姆原藻有明顯抑制作用［1］。蒼術(shù)萃取浸出液對(duì)斷發(fā)癬菌等10種不同真菌的MIC和MFC（50％藥物浸出液乳劑體積／100ml）在1．0～4．0之間［10］。

【摘要】目的研究捷安肽素的抗真菌作用機(jī)理。方法采用形態(tài)學(xué)方法和同位素標(biāo)記法。顯微形態(tài)觀察經(jīng)捷安肽素處理后的供試真菌的形態(tài)學(xué)變化。進(jìn)一步采用14C同位素標(biāo)記的特異底物“尿苷二磷酸-（14C）-葡萄糖”示蹤，研究捷安肽素對(duì)真菌(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶活性反應(yīng)的影響。結(jié)果顯微形態(tài)觀察表明，經(jīng)捷安肽素處理后，供試真菌呈現(xiàn)球形膨脹，而且隨著捷安肽素作用強(qiáng)度增強(qiáng)，球形膨脹的程度和發(fā)生頻率也增加，提示捷安肽素的作用位點(diǎn)在真菌細(xì)胞壁。同位素標(biāo)記實(shí)驗(yàn)表明，捷安肽素可抑制（1,3）-β-D-葡聚糖合成酶的活性，降低真菌細(xì)胞壁合成過程中（1,3）-β-D-葡聚糖的放射性摻入，對(duì)疫霉菌和辣椒炭疽病菌（1,3）-β-D-葡聚糖合成酶的抑制率分別達(dá)到77.7%和77.5%。結(jié)論捷安肽素的抗真菌作用機(jī)理為：抑制細(xì)胞（1,3）-β-D-葡聚糖合成酶的活性，破壞真菌細(xì)胞壁的合成，造成真菌細(xì)胞壁組分（1,3）-β-D-葡聚糖的缺損和病原真菌生長抑制。

【關(guān)鍵詞】捷安肽素；抗真菌作用機(jī)理；（1,3）-β-D-葡聚糖合成酶

AResearchonMechanismofAntifungalPolypeptideJiean-peptide

DAIFu-ying1,ZHOUJin-yan2,TANHong2

（1.DepartmentofPathogenicBiology,ChengduMedicalCollege,Chengdu610083；2.ChengduInstituteofBiology,CAS,Chengdu610041）

Abstract：ObjectiveToinvestigatetheantifungalmechanismofJiean-peptide.MethodsThemodeofactionofJiean-peptideagainst4phytopathogenicfilamentousfungiassociatedwithphytopathy:Phytophthorasp.,Colletotrichumgossypii,SouthwBotrytiscinereaandFusariumoxysporumf.sp.vasinfectumwasinvestigatedbythemethodofmorphologyandisotopelabelling.The(1,3)-β-D-glucansynthaseassaywasprocessedusingisotopelabelledsubstrate—urdinediphosphate(14C)glucosetostudytheeffectofJiean-peptideonfungal(1,3)-β-D-glucansynthase.ResultsMicrographicobservationrevealedthattheJiean-peptidemadethehyphalexpandedandglobular.The(1,3)-β-D-glucansynthaseassayshowedJiean-peptidecouldinhibittheactivityof(1,3)-β-D-glucansynthaseandreducetheradioactivityincorporationof(1,3)-β-D-glucan.TheinhibitionpercentagesofJiean-peptideagainstPhytophthorasp.andColletotrichumgossypiiSouthwwere77.7%and77.5%respectively.ConclusionTheantifungalmechanismofJiean-peptidewastheinhibitionofenzymeactivityof(1,3)-β-D-glucansynthase.

摘要：侵襲性真菌感染(IFI)又稱深部真菌感染或系統(tǒng)性真菌感染。近年來，隨著大劑量免疫抑制劑、化療藥物以及廣譜抗生素的應(yīng)用，IFI的發(fā)病率顯著上升。引起IFI的病原菌譜也發(fā)生了變化，以往常見的白念珠菌感染呈下降趨勢(shì)，而非白念珠菌、曲霉以及其他的少見真菌呈上升趨勢(shì)，且耐藥率逐年增加[1]。此外，IFI的診斷、預(yù)防和治療均存在局限性，因而其患病率與致死率逐年增加[2，3]，已經(jīng)成為臨床上面臨的重要課題。

關(guān)鍵詞：真菌感染;診斷;抗真菌藥物;綜述文獻(xiàn)

一、實(shí)驗(yàn)室診斷

1.1常規(guī)診斷方法

真菌感染的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)診斷包括顯微鏡涂片檢查、真菌培養(yǎng)檢查和組織病理學(xué)檢查等。顯微鏡檢查是最簡單和實(shí)用的真菌學(xué)診斷方法，可以反映真菌在組織中的寄生形態(tài)，但無法確定病原菌種類。真菌培養(yǎng)可提高病原體檢出的陽性率，并依據(jù)其對(duì)藥物的敏感性而選擇適宜的治療藥物，但培養(yǎng)檢查要結(jié)合直接鏡檢的結(jié)果，必要時(shí)應(yīng)多次重復(fù)檢查。組織病理學(xué)檢查對(duì)于確定致病菌在組織內(nèi)寄生的情況并了解宿主的反應(yīng)十分重要，一旦在組織切片中發(fā)現(xiàn)真菌菌絲和(或)孢子，即為診斷的有力證據(jù)，但其敏感性有待進(jìn)一步提高[4]。

1.2非培養(yǎng)診斷方法

血液系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)病率正在逐年上升，隨著血液病大劑量化療等治療手段的普遍應(yīng)用，許多血液病的療效得到明顯提高。由于疾病本身導(dǎo)致體內(nèi)白細(xì)胞的質(zhì)和量發(fā)生變化，以及大劑量化療引起的粒細(xì)胞缺乏，常常繼發(fā)侵襲性真菌感染，成為此類患者病情加重甚至死亡的主要原因之一[1]。及時(shí)判斷危險(xiǎn)因素，結(jié)合患者病情合理選用抗真菌藥物治療，對(duì)于延長患者的生存期至關(guān)重要。本文通過對(duì)1例白血病合并侵襲性肺部真菌感染患者的藥學(xué)監(jiān)護(hù)，從抗真菌治療方案制訂、化療方案和抗真菌藥物不良反應(yīng)監(jiān)護(hù)等方面入手，探討臨床藥師在血液系統(tǒng)惡性腫瘤患者的藥學(xué)監(jiān)護(hù)切入點(diǎn)。

1病例概況

患者，男，48歲，因確診急性淋巴細(xì)胞白血病2個(gè)月于2011年8月21日入院化療?；颊?個(gè)月前無明顯誘因出現(xiàn)頭暈、乏力、高熱，診斷為：急性淋巴細(xì)胞白血病（B細(xì)胞型）。2011年6月5日開始予VILP方案誘導(dǎo)化療，化療過程中出現(xiàn)骨髓抑制、肺部真菌感染、肺炎克雷伯氏菌敗血癥等，患者嚴(yán)重中性粒細(xì)胞減少持續(xù)1月余，予粒細(xì)胞集落刺激因子升白細(xì)胞，加用伏立康唑、美羅培南、替考拉寧控制感染，上述并發(fā)癥好轉(zhuǎn)。2011年7月18日開始予Hyper-CVAD-B方案化療，輔以護(hù)心、護(hù)肝、護(hù)胃、止吐等支持治療。出院后因咳嗽、咳痰，予伏立康唑抗菌治療效果不佳，更換為兩性霉素B注射劑抗真菌治療，8月13日復(fù)查CT示：雙下肺感染病灶加重，雙側(cè)胸腔積液增多。改兩性霉素B注射劑為卡泊芬凈抗真菌處理，患者癥狀改善。8月22日骨髓細(xì)胞學(xué)檢查回報(bào)：骨髓增生活躍（+），原幼稚淋巴細(xì)胞占57%。入院體格檢查示：T36.0℃，P78次•min-1，R18次•min-1，BP122/75mmHg（1mmHg=0.133kPa）。雙肺呼吸音粗，未及明顯啰音。心音有力。腹軟，肝、脾捫及欠滿意。雙下肢無浮腫。血常規(guī)示：PLT207×109•L-1，HGB93g•L-1，RBC3.31×1012•L-1，Neu1.22×109•L-1，WBC2.12×109•L-1。血生化：ALT20IU•L-1，AST20IU•L-1，Cr95μmol•L-1，BUN4.8mmol•L-1。C反應(yīng)蛋白1.1mg•L-1。入院診斷為：1）急性淋巴細(xì)胞性白血病（B細(xì)胞型）；2）侵襲性肺部真菌感染。

2主要治療經(jīng)過和藥學(xué)監(jiān)護(hù)

患者于8月23日行Hyper-CVAD-A方案（環(huán)磷酰胺1.0g第1~3天，長春地辛4mg第1、8天，吡柔比星70mg第4天，地塞米松40mg第1~4天,第8~11天）化療。8月25日肺部CT示：右肺上葉尖段及下葉炎癥；右肺下葉背段、左肺上葉舌段炎癥基本同前；左肺下葉炎癥范圍較前擴(kuò)大；心包積液較前明顯增多；雙側(cè)胸腔少量積液基本同前。8月26日給予米卡芬凈150mg聯(lián)合兩性霉素B從第1天10mg，第2天25mg至第3天50mg維持治療。9月5日血常規(guī)示：WBC0.62×109•L-1，Neu0.04×109•L-1，HGB81g•L-1，PLT46×109•L-1；肝腎功能：ALT121IU•L-1，Cr155μmol•L-1，BUN10.1mmol•L-1，K+2.86mmol•L-1。給予升白、補(bǔ)鉀、護(hù)肝等對(duì)癥治療。9月6日復(fù)查肺部CT回報(bào)：雙肺炎癥較前明顯吸收；心包積液較前減少；雙側(cè)胸腔少量積液吸收?；颊咭话闱闆r好轉(zhuǎn)，出院。

2.1藥學(xué)監(jiān)護(hù)點(diǎn)1：抗真菌治療方案的制訂該患者已經(jīng)行VILP方案和Hyper-CVAD-B方案化療，但是復(fù)查骨髓細(xì)胞學(xué)結(jié)果發(fā)現(xiàn)患者經(jīng)化療后仍未緩解，考慮為難治性急性淋巴細(xì)胞白血病。本次入院化療后第3天肺部CT發(fā)現(xiàn)肺部真菌感染無改善，左下肺葉炎癥范圍較前擴(kuò)大，因此患者的抗真菌治療難度較大。該患者存在眾多高危因素包括：血液惡性腫瘤；既往嚴(yán)重的中性粒細(xì)胞減少時(shí)間持續(xù)1月余；本次化療為Hyper-CVAD-A方案，化療強(qiáng)度大；患者曾接受廣譜抗菌藥物美羅培南、替考拉寧控制感染；患者存在肺部侵襲性真菌感染，化療可致感染加重；化療方案中含有地塞米松40mg，且使用時(shí)間長達(dá)8d。該患者的生存率受以上眾多高危因素的影響，聯(lián)合使用抗真菌藥物治療非常必要。歐洲白血病感染會(huì)議的《Europeanguidelinesforantifungalmanagementinleukemiaandhematopoieticstemcelltransplantrecipients:theECIL3--2009update》（以下簡稱ECIL2009）推薦聯(lián)合抗真菌方案用于侵襲性曲霉菌感染的補(bǔ)救治療，其中推薦藥物有卡泊芬凈+兩性霉素B或卡泊芬凈+伏立康唑[2]。患者既往曾使用伏立康唑作為初始治療，第二次化療時(shí)繼續(xù)使用伏立康唑無效，提示對(duì)伏立康唑耐藥。根據(jù)《Treatmentofaspergillosis:clinicalpracticeguidelinesoftheinfectiousdiseasessocietyofAmerica2008》（以下簡稱《曲霉菌IDSA指南》），對(duì)在唑類藥物預(yù)防或抑制治療過程中出現(xiàn)突破性侵襲性曲霉菌病時(shí)，應(yīng)換用另一類藥物[3]。因此，臨床藥師推薦使用兩性霉素B注射劑聯(lián)合米卡芬凈進(jìn)行抗真菌治療。

【摘要】目的綜合考察各種因素(不同的培養(yǎng)基、培養(yǎng)基的pH值、真菌接種濃度等)對(duì)AmB抑制白色念珠菌作用的影響,為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。方法液體稀釋法。結(jié)果在不同的培養(yǎng)基中,AmB對(duì)白色念珠菌的MIC值不同,隨著pH的增高及真菌接種菌液濃度增加,其MIC值增加。結(jié)論AmB對(duì)白色念珠菌的MIC值會(huì)受到多種因素的影響,所以,進(jìn)行藥物的抗菌活性研究時(shí)應(yīng)制定并嚴(yán)格執(zhí)行統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。

【關(guān)鍵詞】兩性霉素B;白色念珠菌;抑制

【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofvariousfactors,suchasthetypeofmedium,Phofmedium,sizeofinoculumontheactivityofamphotericinB(AMB)againstCandidaalbicans,soastoprovideevidencesforrationaluseofthedrug.MethodsThebrothdilutiontestwasexamined.ResultsTheactivityofAmBagainstCandidaalbicanswasinfluencedbythetypeofmedium.Theminimuminhibitionconcentrations(MIC)increasedwiththeincreaseofpHandinoculumconcentration.ConclusionThestudyofantifungalactivitymustestablishandstrictlyimplementunifiedstandard.

【Keywords】amphotericinB;Candidaalbicans;inhibition

藥物的抗真菌活性受到多種因素的影響,例如,不同的培養(yǎng)基、培養(yǎng)基的pH值、培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)溫度、真菌接種濃度、真菌形態(tài)、血清、有氧與厭氧環(huán)境等。兩性霉素B是目前臨床上應(yīng)用的抗真菌藥物,本研究是綜合考察各種因素對(duì)其抑制白色念珠菌作用的影響,為臨床合理用藥及進(jìn)一步藥用價(jià)值的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1實(shí)驗(yàn)材料