導(dǎo)語：如何才能寫好一篇肝纖維化，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

肝纖維化的治療分兩方面:一是針對原發(fā)病的病因治療,二是特異性抗肝纖維化治療。目前多數(shù)治療方法仍處于實(shí)驗(yàn)研究階段。

去除病因

針對不同病因,如肝炎病毒、慢性腸道感染、酒精、藥物、自身免疫、代謝綜合征等進(jìn)行相應(yīng)的治療。非酒精性脂肪肝患者要制定合理的能量攝入以及飲食結(jié)構(gòu)調(diào)整,適當(dāng)?shù)倪\(yùn)動與鍛練,糾正不良的生活方式,避免加重肝損害的因素,如高脂飲食、肥胖、糖尿病、酒精、藥物等。體質(zhì)指數(shù)(BMI)>25的患者應(yīng)給予控制飲食和減肥措施。由肝炎病毒所致者酌情給予抗病毒治療。

特異性抗肝纖維化治療

1.保護(hù)肝細(xì)胞:包括①抗氧化劑谷胱苷肽、S-腺苷蛋氨酸(思美泰)、水飛薊素、維生素E和維生素C;②脂氧酶抑制劑前列腺素E1、前列腺素E2和其類似物(米索前列醇、二甲基前列腺素E2);③鈣通道阻斷劑尼群地平等;④其他如甘草甜素和熊去氧膽酸等。

2.抑制肝臟炎癥:體內(nèi)應(yīng)用白介素(IL)-1受體拮抗劑、可溶性腫瘤壞死因子(TNF)α抗體、IL-10等,可明顯減輕肝內(nèi)炎癥。

3.抑制肝星狀細(xì)胞(HSC)活化:干擾素(IFN)γ具有比IFNα更大的抗肝纖維化作用。許多試驗(yàn)和臨床研究證實(shí)氧化苦參堿有抗肝纖維化作用,并已在臨床應(yīng)用。其他包括奧曲肽、C型利鈉多肽、雌激素、抗甲狀腺功能藥物、胰島素樣生長因子-I、前列腺素E2、cAMP、小柴胡湯、己酮可可堿、鹵呋酮、多不飽和卵磷脂、甘草甜素、丹參、西利馬林、雷帕霉素、核心蛋白聚糖等,但其確切作用有待更大范圍的臨床研究來證實(shí)。

4.促進(jìn)HSC凋亡:TGFβ1在抑制HSC增殖的同時也抑制HSC凋亡,抗TGFβ1治療可望使活化的HSC發(fā)生凋亡。

5.中醫(yī)中藥:丹參、桃仁、苦參素、冬蟲夏草、柴胡、黃芪、葫蘆素B、甘草甜酸、苦味葉下珠、水飛薊等單味中藥已被證實(shí)具有抗肝纖維化作用。臨床上常用的中草藥復(fù)方制劑有復(fù)方861、小柴胡湯、復(fù)方鱉甲軟肝片、大黃蟄蟲丸、強(qiáng)肝軟堅(jiān)湯等。

6.藥物靶向治療和基因治療:靶向治療的關(guān)鍵是尋找高選擇性的載體,目前已發(fā)現(xiàn)幾種對肝臟內(nèi)HSC有高度選擇的載體,但仍需進(jìn)一步驗(yàn)證。

篇2

肝纖維化的發(fā)生機(jī)制是個復(fù)雜的過程，眾多因素（外界刺激、紫外線、缺氧等）引起機(jī)體釋放大量炎性因子（TNF-a、IL-6、IL-1、PDGF等）激活了各種致纖維化通路（TGF-β1、CTGF、MAPK等)活化了肝星狀細(xì)胞，上調(diào)細(xì)胞外基質(zhì)的合成和分泌，并使其降解減少，最終導(dǎo)致ECM積聚而發(fā)生肝纖維化乃至肝硬化。有絲分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)是所有真核生物細(xì)胞將信號從感受器傳遞到細(xì)胞的主要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。本文就MAPK通路與肝纖維化的發(fā)生作一綜述。

1 有絲分裂原活化蛋白激酶家族

MAPK是細(xì)胞漿內(nèi)一類高度保守的絲氨酸蛋白激酶［1］，哺乳動物細(xì)胞中MAPK主要包括細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal regulated protein kinase，ERK)、C-Jun氨基末端激酶(C-Jun amino-terminal kinase，JNK)、P38MAPK和ERK5／BMK1(big MAPK1)四個亞族。真核細(xì)胞內(nèi)已確定4條MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，即細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1／2(ERK1／2)通路、c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路、p38MAPK通路以及細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶5(BMK1／ERK5)通路［2］。介導(dǎo)細(xì)胞生長、發(fā)育、增殖、分化、老化及死亡全過程等多種生理過程。MAPK 家族級聯(lián)反應(yīng)包括順序激活的MAPKKK(MAPK Kinase Kinase)，MAPKK(MAPK Kinase)和MAPK。MAPK／ERK信號通路中發(fā)揮MAPKKKK作用的H-ras表達(dá)始終處于較高水平，A-raf(MAPKKK)、MEK2(MAPKK)、ERK1(MAPK)等上下游激酶的轉(zhuǎn)錄也顯著上調(diào)，相應(yīng)的抑制因子(ras抑制物)mRNA則大幅度減少。MAPKKK對MAPKK的絲氨酸、蘇氨酸雙位點(diǎn)磷酸化而將其活化；進(jìn)而MAPKK對MAPK進(jìn)行蘇氨酸、絲氨酸雙位點(diǎn)磷酸化活化，活化后的蛋白激酶轉(zhuǎn)移至核內(nèi)激活相應(yīng)的基因受體，進(jìn)而促進(jìn)相應(yīng)基因的表達(dá)。

1．1 ERKl／2通路

ERK1／2信號通路(RasRafMEK1∕2ERK1／2)是經(jīng)典的MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，能被生長因子、血清及佛波酯等外界刺激激活。在MAPK／ERK信號通路中，Raf與Ras等上游分子結(jié)合，選擇性激活MEK?；罨腗EK識別“Thr-X-Thr”模序而激活ERK。ERK轉(zhuǎn)入核內(nèi)，進(jìn)一步激活核因子NF-KB、c-Myc、c-Jun、c-Fos、Etsl、Elk1、Sap、Tal、CREB和Stat等轉(zhuǎn)錄因子，抑制Myb、過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)，催化雌激素受體(ER)、表皮生長因子受體(EGFR)的磷酸化，使細(xì)胞從GO期進(jìn)入G1期，從而調(diào)控發(fā)育、分化、凋亡及細(xì)胞功能同步化，尤其對細(xì)胞增殖具有關(guān)鍵意義［3］。

1.2 JNK通路

c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)家族，屬于進(jìn)化上保守的絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶。以JNK為中心的JNK信號通路可被細(xì)胞因子、生長因子、應(yīng)激(如電離輻射、滲透壓、熱休克和氧化損傷)等多種因素激活. 激活MAPKKs的MAPKKKs目前確認(rèn)的有MEKKs，混合連接激酶(mixed lineage kinases，MLKS)，凋亡信號調(diào)節(jié)激酶(apoptoSis Signa1 regulating kinases，ASKs)和TGF-B激活的蛋白激酶(TGF-B activated protein kinase，TAK)等，其他一些可能與JNK信號通路相關(guān)的MAPKKKs及其上游分子仍有待進(jìn)一步研究證明［4］。JNKs的直接上游激酶MAPKKs目前確認(rèn)的只有MKK4和MKK7. JNK最初被發(fā)現(xiàn)是一種特異性磷酸化核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子c-Jun的激酶，并因此被命名為c-Jun氨基末端激酶，隨后發(fā)現(xiàn)其他一些核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子也是其下游底物，如Elk-1、ATF2、DPC4、NFAT4以及ets-2等.大量實(shí)驗(yàn)提示JNK信號通路在細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡、應(yīng)激反應(yīng)以及多種人類疾病的發(fā)生與發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用，因此JNK信號通路是正常與疾病狀態(tài)時細(xì)胞的一個重要調(diào)節(jié)靶點(diǎn)。

1.3 p38MAPK通路

P38MAPK通路在MAPK信號通路中起著重要作用［5］。 p38MAPK途徑由紫外線、滲透壓變化、細(xì)胞因子和生理應(yīng)激等激活. P38MAPK上游激活物為MKK3、MKK6。P38 MAPK被磷酸化激活后移位人核，作用于細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的目標(biāo)，可激活下游底物誘發(fā)特定基因的表達(dá)，包括多種前炎性細(xì)胞因子、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、E-選擇素、血管細(xì)胞粘附分子-1等。在細(xì)胞的炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡等各種反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)等過程中起重要作用［6］。

1.4 BMK1／ERK5通路

BMK1／ERK5是MAPK家族中最晚發(fā)現(xiàn)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。其可被高糖、低氧、血流切應(yīng)力、活性氧簇(ROS)、滲透壓以及各種絲裂原如內(nèi)皮生長因子、神經(jīng)生長因子等激活。MAPK 家族級聯(lián)反應(yīng)包括3個相應(yīng)順序激活的成分：BMK1／ERK5的級聯(lián)反應(yīng)同樣包含3個相應(yīng)順序激活的成分：MEKK2／3 (MAPK／ERK Kinase Kinase 2／3)，MEK5(MAPK／ERK Kinase 5)和BMK1／ERK5。MEKK2／3是MAPKKK家族的成員，它被G-蛋白偶聯(lián)受體激活后，能夠激活MEK5；MEK5屬于MAPKK家族的成員，免疫共沉淀法顯示，MEK5是BMK1／ERK5唯一且特異性上游激酶［7］。BMK1／ERK5生物學(xué)效應(yīng)使細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)，凋亡減少，出現(xiàn)增殖與凋亡失平衡現(xiàn)象。

2 肝纖維化的發(fā)生機(jī)制

肝纖維化和肝硬化是同一病理過程的不同發(fā)展階段，肝纖維化是發(fā)展成為肝硬化乃至肝癌的重要中間環(huán)節(jié)。經(jīng)過大量的研究證明，肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的［8］。肝纖維化(hepatic fibrosis)是肝臟對各種慢性肝損傷的代償反應(yīng)所形成的一種肝臟疤痕組織，并導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)、細(xì)胞群和細(xì)胞因子的復(fù)雜改變［9］。早在20世紀(jì)8O年代，即有體外實(shí)驗(yàn)報(bào)道肝星狀細(xì)胞是主要的肝基質(zhì)膠原生成細(xì)胞［10］。其在肝纖維化的發(fā)生和發(fā)展中起主導(dǎo)作用，在各種致病因素的作用下，靜止期HSC被激活并增殖形成的肌成纖維樣細(xì)胞，肌成纖維樣細(xì)胞不僅能合成幾乎所有的ECM，而且具有多種功能，通過多條途徑參與肝纖維化的發(fā)生與發(fā)展：(1)產(chǎn)生細(xì)胞因子和趨化因子：通過自分泌途徑促進(jìn)肌成纖維樣細(xì)胞增殖及合成ECM，通過旁分泌途徑直接激活未活化的HSC，通過進(jìn)一步損傷肝細(xì)胞間接激活HSC。(2)增殖：通過增加肌成纖維樣細(xì)胞的數(shù)量增加肝臟ECM含量。(3)基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑合成異常：基質(zhì)金屬蛋白酶合成減少，基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑合成增加，導(dǎo)致ECM 降解下降［11］。最終導(dǎo)致ECM積聚而發(fā)生肝纖維化乃至肝硬化。

3 MAPK通路與HSC

肝星狀細(xì)胞是肝臟的一種間質(zhì)細(xì)胞，位于Disse間隙，肝臟HSC 的數(shù)目很少與肝細(xì)胞數(shù)量之比為1：20．其總體積占肝體積的1．4％。HSC主要具有以下功能：(1)儲存和代謝維生素A。(2)合成和分泌少量的ECM。（3）對內(nèi)皮細(xì)胞起支撐作用，并有調(diào)節(jié)肝竇大小的作用。(4)合成非膠原糖蛋白和蛋白多糖等功能。細(xì)胞內(nèi)、外產(chǎn)生的多種氧化因素(如活性氧)和細(xì)胞因子(如PDGF、TGF-b、MMP、TNF-a、ET-1)，可以激活MAPK通路?；罨腗APK將信號轉(zhuǎn)導(dǎo)人HSC核內(nèi) ，能使多種轉(zhuǎn)錄因子磷酸化，隨后發(fā)生一系列的細(xì)胞反應(yīng)，包括細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)化以及調(diào)節(jié)一些特異性的代謝途徑［12］。細(xì)胞因子PDGF誘導(dǎo)Ras活化，使激活ERK轉(zhuǎn)導(dǎo)入HSC核內(nèi)，磷酸化轉(zhuǎn)錄因子Elk-1和SAP，可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白D1和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(Cyclin dependent kinase，CDK)，使HSC激活、增殖。細(xì)胞因子如TNF-a、IL-1、細(xì)胞毒性藥物以及活性氧都能增加HSC中JNK的活性，活化的JNK進(jìn)入HSC核內(nèi)可以和轉(zhuǎn)錄因子AP-1復(fù)合物c-Jun和轉(zhuǎn)錄活化因子-2(Activating transcription factor-2，ATF-2)的氨基末端區(qū)域結(jié)合，使轉(zhuǎn)錄因子的活性區(qū)域發(fā)生磷酸化。這些轉(zhuǎn)錄因子能結(jié)合相應(yīng)基因的啟動子啟動基因的表達(dá)。JNK通路也是促進(jìn)HSC增殖的重要通道。各種細(xì)胞外刺激包括紫外線、熱休克、滲透壓休克、內(nèi)毒素、細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素-1(IL-1)、腫瘤壞死因子(TNF)和G蛋白偶聯(lián)受體等的激活作用下， 相繼磷酸化激活TAK/ASK/NLK， MKK3/MKK6， 激活的p38進(jìn)入HSC核內(nèi)可磷酸化轉(zhuǎn)錄因子ATF-2、Elk-1［13-15］， 導(dǎo)致他們的轉(zhuǎn)錄活性的升高， 調(diào)節(jié)目的基因的表達(dá)， 使HSC增殖并活化，從而可能由此參與了大鼠HF形成［16］。

4 MAPK通路與肝纖維化

MAPK信號傳導(dǎo)通路是經(jīng)典的有絲分裂通路， 是信號從細(xì)胞表面?zhèn)鲗?dǎo)到細(xì)胞核內(nèi)部的重要傳遞者。 近期的研究表明， MAPK信號通路與人體多種臟器纖維化的發(fā)生，發(fā)展密切相關(guān)［17-19］。 MAPK信號通路可以通過對肝星狀細(xì)胞活化、增殖、凋亡的調(diào)控參與肝纖維化的形成。炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子等不同的刺激因素作用于肝星狀細(xì)胞的相關(guān)受體激活了MAPK信號通路中的ERK、JNK兩大信號途徑，現(xiàn)研究表明它們對HSC的激活是正性調(diào)節(jié)，但至肝纖維化逆轉(zhuǎn)錄過程中，H-ras、A-raf．MAPKK2、ERK1，表達(dá)水平明顯升高［20］。

5 展 望

肝纖維化是繼發(fā)于肝臟炎癥或損傷后修復(fù)過程中的炎癥反應(yīng)，ECM在肝內(nèi)過量沉積，最終導(dǎo)致肝硬化。肝纖維化的形成機(jī)制非常復(fù)雜，確切機(jī)制尚不清楚。MAPK信號通路是肝纖維化形成的重要通路之一，MAPK信號通路與肝纖維化的發(fā)生有著密切的關(guān)系， MAPK信號通路中的ERK、JNK、P38MAPK三大信號途徑與HSC之間的相互作用關(guān)系至今還不明確。ERK、JNK通路傾向是對肝星狀細(xì)胞的活化和增值為正向調(diào)節(jié)，加劇了肝纖維化的形成。P38MAPK信號對肝星狀細(xì)胞的調(diào)節(jié)還不明確有待進(jìn)一步證實(shí)。隨著對MAPK信號通路理解的不斷深入， 其在肝纖維化發(fā)生的分子機(jī)制中的作用會越來越多地引起人們的關(guān)注。

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篇3

關(guān)鍵詞：肝纖維化 恩替卡韋 氧化苦參堿 細(xì)胞因子

The therapeutic value of entecavir combined with oxymatrine in the treatment of liver fibrosis and its effect on the expression of cytokines

WANG Guang-na WANG Guang-yu ZHANG Shao-hua

Department of hepatobiliary surgery,the Seventh People's Hospital of Hebei Province; Static distribution center, the Seventh People's Hospital of Hebei Province; Department of internal medicine, the Seventh People's Hospital of Hebei Province of Hebei geriatric hospital;

Abstract：Objective:To explore the therapeutic value of entecavir combined with oxymatrine in patients with liver fibrosis and the effect on the expression of cytokines.Methods:From January 2018 to December 2019, 98 patients with liver fibrosis in the Department of Gastroenterology of our hospital were selected. The patients were divided into the combined treatment group and entecavir group with 49 cases in each group. Both groups were given routine treatment. Entecavir group was treated with entecavir. The combined treatment group was treated with entecavir combined with oxymatrine. The improvement time of liver function, liver fibrosis and inflammation indexes were observed. The levels of IL-6, IL-8, IL-2, IL-10, TGF-β1, IFN-γ and TNF-α were detected by ELISA.Total bilirubin(TBIL), aspartate aminotransferase(ASL), alanine aminotransferase(ALT), albumin/globulin(ALB/GLB) were detected by automatic biochemical analyzer. Procollagen type Ⅲ(PC Ⅲ), collagen type Ⅳ(Ⅳ-C), hyaluronic acid(HA) and laminin(LN) were detected by radioimmunoassay. Statistical treatment effect and adverse reactions were observed. Results:Compared with entecavir group, the improvement time of liver function, liver fibrosis, inflammatory indexes, IL-6, IL-8, IL-10, TGF-β1, IFN-γ,TNF-α, liver function indexes and liver fibrosis indexes in the combined treatment group were significantly lower than those in the entecavir group(P<0.05). Compared with entecavir group, the level of IL-2 in combined treatment group was significantly decreased(P<0.05). Compared with entecavir group, the total effective rate of combined treatment group was higher(P<0.05). Compared with entecavir group, the total adverse reactions of combined treatment group were higher(P>0.05). Conclusion:Entecavir and Oxymatrine can effectively reduce the levels of IL-6, IL-8, and IL-10, and improve liver function and degree of liver fibrosis.

Keyword：entecavir; oxymatrine; hepatic fibrosis; cytokines;

肝纖維化是由于肝細(xì)胞壞死和炎癥刺激導(dǎo)致，使肝臟內(nèi)膠原等細(xì)胞外基質(zhì)的增殖和降解失去平衡，導(dǎo)致肝內(nèi)纖維結(jié)締組織異常沉積的病理過程[1-4]。有研究表明，肝纖維化的病理過程是可逆的，早期診斷和及時有效的治療可預(yù)防肝纖維化的發(fā)展，但目前尚無特別有效的藥物。我們采用恩替卡韋聯(lián)合氧化苦參堿治療慢性乙型肝炎肝纖維化患者，取得較好療效，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年12月在我院消化科住院的患者98例，診斷均符合《肝纖維化中西醫(yī)結(jié)合診療指南(2019年版)》中慢性乙型肝炎肝纖維化的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5],分為恩替卡韋組和聯(lián)合治療組各49例。恩替卡韋組患者中男32例，女17例；年齡23～56歲，平均(37.53±15.67)歲。聯(lián)合治療組患者中男28例，女21例；年齡26～52歲，平均(37.05±16.15)歲。排除伴有嚴(yán)重心腎功能障礙、失代償期肝硬化、肝性腦病者、肝癌進(jìn)展期、其他原因引起肝纖維化者，妊娠及哺乳期婦女。兩組患者在性別、年齡、病情等一般資料方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),有可比性。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者及家屬對本研究知情，并簽署知情同意書。

1.2 治療方法

兩組患者均進(jìn)行常規(guī)保肝對癥治療，恩替卡韋組患者在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上口服恩替卡韋(蘇州工業(yè)園區(qū)藥科大新藥開發(fā)中心有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字：H20133073,規(guī)格：0.5 mg/片)治療， 1片/次， 1次/d。聯(lián)合治療組患者在恩替卡韋組治療的基礎(chǔ)上口服氧化苦參堿(正大天晴藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字：H20010763,規(guī)格：0.1 g/粒),3粒/次，3次/d, 3個月為1療程。

1.3 觀察指標(biāo)

①觀察兩組患者治療前后肝功能的變化，采用全自動生化儀羅氏P800檢測。②觀察兩組患者治療前后肝纖維化指標(biāo)(PCⅢ、Ⅳ-C、HA、LN)的變化，采用放射免疫法檢測。③觀察兩組患者治療前后炎癥指標(biāo)(IL-6、IL-8、IL-2、IL-10、TGF-β1、IFN-γ、TNF-α)的變化，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA法)檢測。④觀察兩組患者治療前后不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 臨床療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

顯效：肝纖維化、肝功能指標(biāo)改善90%以上，患者臨床體征完全消失，生活正常。有效：肝纖維化、肝功能指標(biāo)等改善50%～90%,患者臨床體征好轉(zhuǎn)，可以進(jìn)行日常工作。無效：肝纖維化、肝功能指標(biāo)改善的幅度低于50%,與治療前相比，患者臨床體征沒有改善，甚至加重，生活無法自理?？傆行?(顯效數(shù)+有效數(shù))/總例數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用spss 20.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)分析處理。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(xˉ±s)描述，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用%表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者肝功能、肝纖維化、炎癥指標(biāo)好轉(zhuǎn)時間比較

見表1。

表1 兩組患者肝功能、肝纖維化、炎癥指標(biāo)好轉(zhuǎn)時間比較(xˉ±s,周)

2.2 兩組患者治療前后炎癥指標(biāo)的變化

見表2、3。

2.3 兩組患者治療前后肝功能的變化

見表4。

2.4 兩組患者治療前后血清肝纖維化指標(biāo)的變化

見表5。

表2 兩組患者治療前后IL-6、IL-8、IL-2、IL-10水平比較(xˉ±s,pg/ml)

表3 兩組患者治療前后TGF-β1、IFN-γ、TNF-α水平比較(xˉ±s,pg/ml)

表4 兩組患者治療前后肝功能指標(biāo)比較(xˉ±s)

表5 兩組患者治療前后肝纖維化指標(biāo)比較[xˉ±s,(μg/L)]

2.5 兩組患者臨床療效比較

見表6。

表6 兩組患者臨床療效比較 [n(%)]

2.6 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

見表7。

表7 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 [n(%)]

3 討論

肝纖維化是指肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生，以門管區(qū)及肝小葉內(nèi)纖維組織的異常增生和沉積為特征，導(dǎo)致肝臟結(jié)構(gòu)變形，進(jìn)一步加重肝功能損害[6]。肝纖維化的形成主要是由膠原蛋白、蛋白多糖、糖胺多糖等細(xì)胞外基質(zhì)的異常增殖引起的，這是許多慢性肝病發(fā)展為肝硬化的必要病理過程[7]。肝纖維化是所有慢性肝病的共同病理基礎(chǔ)，病毒性肝炎、代謝紊亂和營養(yǎng)紊亂、膽汁淤積、自身免疫性損害等因素可引起肝纖維化。病毒性肝炎在中國比較普遍，是導(dǎo)致肝纖維化的主要疾病。肝纖維化繼續(xù)發(fā)展，25%～40%的患者最終會發(fā)展成肝硬化。在肝硬化之前，肝纖維化可以逆轉(zhuǎn)[8,9]。肝纖維化是慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌之間的關(guān)鍵中間環(huán)節(jié)，是慢性乙型肝炎發(fā)展為終末期肝硬化的必要病理過程[10]。本文研究顯示，恩替卡韋聯(lián)合氧化苦參堿可有效降低肝纖維化患者IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β1、IFN-γ水平。

恩替卡韋是一種選擇性抑制HBV逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶的脫氧鳥嘌呤核苷類藥物，具有安全、方便、耐藥低等優(yōu)點(diǎn)?？诜罂稍诟渭?xì)胞中轉(zhuǎn)化為活性三磷酸鹽，通過與天然底物三磷酸脫氧鳥嘌呤競爭，抑制HBV-DNA聚合酶活性，干擾HBV復(fù)制過程[11]。恩替卡韋通過抑制HBV復(fù)制，降低肝臟炎癥程度，逆轉(zhuǎn)假小葉性肝硬化的形成，促進(jìn)肝功能恢復(fù)。氧化苦參堿是以苦參堿和苦參根中提取的苦參次堿-15-酮為基本結(jié)構(gòu)的化合物?？鄥A具有抗過敏作用，能抑制炎癥介質(zhì)的釋放，降低毛細(xì)血管的通透性，抑制肉芽組織的增殖，其抗炎作用與氫化可的松相似，見效快、作用持久[12]。本文研究顯示，與恩替卡韋組相比，聯(lián)合治療組患者肝功能、肝纖維化、炎癥指標(biāo)好轉(zhuǎn)時間顯著縮短，表明應(yīng)用恩替卡韋聯(lián)合氧化苦參堿治療肝纖維化患者效果更顯著。

IL-2是一種重要的細(xì)胞因子，在人體免疫系統(tǒng)中起調(diào)節(jié)作用，具有增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤、抗感染等生物活性，可治療惡性腫瘤、肝炎等疾病[13]。IL-6水平升高可促進(jìn)肝臟炎癥反應(yīng)，刺激肝纖維化，加重肝硬化[14]。IL-10也稱為細(xì)胞因子合成抑制因子，是一種多效性細(xì)胞因子，在多種類型細(xì)胞中發(fā)揮免疫抑制或免疫刺激的作用[15]。IL-8是趨化因子家族的一種細(xì)胞因子，在參與和調(diào)節(jié)人類生殖生理和病理過程的作用已得到肯定，其作用機(jī)制之一就是與其特異性受體結(jié)合而發(fā)揮作用[16]。TGF-β1是一種纖維性因子，促進(jìn)肝細(xì)胞損傷、壞死、甚至凋亡。它對肝細(xì)胞有影響并促進(jìn)它們轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞[17]。TNF-α是一種腫瘤壞死因子，是一種能直接殺傷腫瘤細(xì)胞而對正常細(xì)胞沒有明顯毒性的細(xì)胞因子[18]。本文研究顯示，調(diào)控IL-2、IL-8、IL-6、IL-10、IFN-γ、TGF-β1、TNF-α的水平，可減輕肝組織的炎性反應(yīng)，減輕肝臟的毒性損傷。

ALT主要存在于各種細(xì)胞中，尤以肝細(xì)胞為最多，整個肝臟的轉(zhuǎn)氨酶含量大約是血液中的100倍[19]。TBil是直接膽紅素和間接膽紅素的總和，間接膽紅素是指不與葡糖醛酸結(jié)合的膽紅素[20]。AST分布在心肌、肝臟、骨骼肌、腎臟中[10]。Alb/Glb在肝臟中產(chǎn)生，當(dāng)肝功能受損時，白蛋白產(chǎn)生降低，減少程度與肝炎的嚴(yán)重程度平行，白蛋白有滋養(yǎng)細(xì)胞和維持血管滲透壓的作用。Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN是常見的肝纖維化指標(biāo)，其表達(dá)與肝纖維的程度呈正比，通過檢測肝纖維化指標(biāo)含量，可以準(zhǔn)確顯示出肝纖維化的嚴(yán)重程度[21]。本次研究顯示，與恩替卡韋組患者相比，聯(lián)合治療組患者ALT、TBil、AST、Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN水平顯著降低，臨床可根據(jù)ALT、TBil、AST、Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN水平的高低評估肝纖維化患者病情進(jìn)展情況。

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篇4

【關(guān)鍵詞】 干細(xì)胞；肝纖維化

文章編號：1004-7484（2013）-12-7122-02

肝纖維化是各種致病因子所致正常肝結(jié)構(gòu)被破壞，肝結(jié)節(jié)的再生和細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過度沉積的病理過程。最近的研究成果顯示，干細(xì)胞可以減少肝纖維化，激活肝前體細(xì)胞（HPC），促進(jìn)肝實(shí)質(zhì)再生[1]，可以在一定程度上可以逆轉(zhuǎn)和延緩肝纖維化并補(bǔ)充纖維化過程中損傷的肝細(xì)胞，為臨床終末期肝病治療提供新的思路。

1 干細(xì)胞

干細(xì)胞是一類具有自我更新、高度增生和多向分化的多潛能的細(xì)胞，根據(jù)其發(fā)生學(xué)來源和細(xì)胞發(fā)育階段不同，可將干細(xì)胞分為胚胎干細(xì)胞（embryonic stem cells，ESCs）和成體干細(xì)胞（adult stem cells，ASCs），而成體干細(xì)胞中的骨髓干細(xì)胞又可進(jìn)一步分為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）和造血干細(xì)胞（haematopoietic stem cells，HSCs）。

1.1 胚胎干細(xì)胞 胚胎干細(xì)胞具有自我復(fù)制、更新以及產(chǎn)生子代的能力，并能在原始未分化狀態(tài)無限繁殖，在特定條件下可分化為人體多種細(xì)胞類型，并可構(gòu)建成任何類型的組織和器官。Martin Evans早在1970年就已從小鼠體內(nèi)分離出胚胎干細(xì)胞，并在體外成功培養(yǎng)。但是由于倫理及安全性等問題，ESC在臨床應(yīng)用中很受限。

1.2 成體干細(xì)胞 成體干細(xì)胞是指存在于各種組織和臟器中的未分化細(xì)胞，具有特定的優(yōu)勢：①免疫原性低，避免免疫排斥反應(yīng)；②成體干細(xì)胞的分化潛能相對比較局限，易誘導(dǎo)向特定的組織細(xì)胞分化，也可直接用于體內(nèi)組織的原位修復(fù)；③獲取、分離、增殖較為容易，無倫理學(xué)問題，更易于臨床應(yīng)用。故成體干細(xì)胞成為當(dāng)前該領(lǐng)域主要的研究方向。用于治療肝臟疾病的成體干細(xì)胞主要為骨髓干細(xì)胞，而骨髓來源的MSC和HSC在獲取、分離、培養(yǎng)方面具有優(yōu)勢，成為當(dāng)前該領(lǐng)域主要的研究方向。

1.2.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞一群中胚層來源的具有自我更新和多向分化潛能的多能干細(xì)胞，間充質(zhì)干細(xì)胞遺傳背景穩(wěn)定，可體外擴(kuò)增成肝細(xì)胞、成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成肌細(xì)胞等。呂素莉[2]等人通過四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化動物模型研究表明，BMSC移植能抑制大鼠肝纖維化發(fā)展，部分逆轉(zhuǎn)肝纖維化進(jìn)程，有效改善肝臟功能，為臨床自體BMSC移植治療肝臟疾病提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。臨床研究顯示，將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植入受損的肝臟后，可以改善肝臟的微環(huán)境，在一定程度上預(yù)防肝纖維化的發(fā)生[3]。以上表明，間充質(zhì)細(xì)胞會非常適合治療肝臟疾病涉及的纖維化。

1.2.2 造血干細(xì)胞 目前研究認(rèn)為造血干細(xì)胞具有自我更新能力，極高的增殖潛能和分化為各系血細(xì)胞潛能的組織特異性干細(xì)胞，不僅能分化為血液系統(tǒng)細(xì)胞，HSC在適當(dāng)?shù)臈l件下也能分化成其他非造血組織細(xì)胞，如腎臟細(xì)胞、肝臟細(xì)胞、肺泡細(xì)胞等。自體骨髓干細(xì)胞（BMSC，包含HSC和MSC）作為一種肝干細(xì)胞已用于臨床，目前常用的移植方法是經(jīng)股動脈穿刺插管于肝固有動脈并造影，觀察肝內(nèi)血管情況及有無占位性病變。有研究表明將自體骨髓干細(xì)胞從肝動脈注射入患者體內(nèi)，移植后檢測體內(nèi)白蛋白水平升高，Child-Pugh評分改善?？梢姽撬韪杉?xì)胞移植可在一定程度上使肝硬化患者肝功能恢復(fù)，提高了患者生存率，但目前對移植細(xì)胞在體內(nèi)的歸巢定植、分化過程，功能重建、具體療效仍然需要更深入的研究分析。

2 干細(xì)胞治療存在的問題

大量實(shí)驗(yàn)表明干細(xì)胞在肝硬化的治療中可以減輕肝臟纖維化程。然而有研究表明骨髓干細(xì)胞能促進(jìn)肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cell，HSC）的形成，而HSC具有瘢痕形成的功能。最近研究顯示，BMSCs移植入肝硬化小鼠體內(nèi)，骨髓源性肝細(xì)胞不到肝組織細(xì)胞總數(shù)的0.006，而骨髓源性肝星狀細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞則分別高達(dá)68%和70%。以上研究提示我們在進(jìn)行骨髓干細(xì)胞的臨床應(yīng)用轉(zhuǎn)化時要做更深入的思考與研究。

3 結(jié) 論

大量實(shí)驗(yàn)表明，功能肝樣細(xì)胞可以由不同源性干細(xì)胞定向分化而來，這就為臨床治療肝臟疾病提供了明確的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。但是，由于肝內(nèi)微環(huán)境會影響干細(xì)胞的分化，使分化具有不確定性。我們需要進(jìn)一步提高分離純化出高特異性干細(xì)胞的方法，進(jìn)一步完善培養(yǎng)擴(kuò)增干細(xì)胞并保持其特性的方法。在干細(xì)胞移植要求的細(xì)胞數(shù)量、活性以及移植途徑選擇等應(yīng)用層面的進(jìn)一步優(yōu)化，并需進(jìn)一步觀察研究應(yīng)用遠(yuǎn)期的安全性。干細(xì)胞治療對于肝纖維化的患者來說，既令人興奮也具有挑戰(zhàn)性，針對全球普遍存在的人供體器官嚴(yán)重缺乏和免疫排斥的問題，干細(xì)胞開辟一種新的研究思路。相信在不久的將來，隨著研究的不斷深入，干細(xì)胞必將在肝纖維化的治療中發(fā)揮更加重要的作用。

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篇5

肝纖維化（Hepatic fibrosis，HF）是各種慢性肝病向肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段，是所有慢性肝病的共同病理基礎(chǔ)。正常肝臟細(xì)胞含有肝細(xì)胞、庫普弗細(xì)胞、肝竇內(nèi)皮細(xì)胞、肝星形細(xì)胞（HSC）。在病毒性肝炎、鐵銅代謝異常、自身免疫疾病等因素作用下，相關(guān)細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，如轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factor，TGF)、血小板衍生生長因子(platelet derived growth factor，PDGF )、腫瘤壞死因子 -α( tumor necrosis factorα，TNF-α)、白細(xì)胞介素-1（interleukin-1，IL-1）、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)等，這些細(xì)胞因子首先與 HSC膜上受體結(jié)合 ，然后通過不同或相同的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)（JNK/MAPK信號通路、JAK/STAT通路、TGF-β和PDGF介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等）傳遞，在某些轉(zhuǎn)錄因子的作用下，轉(zhuǎn)導(dǎo)信號入核，從而啟動 DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄及翻譯表達(dá)過程，實(shí)現(xiàn) HSC活化、增殖、轉(zhuǎn)型并分泌細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），最終導(dǎo)致肝纖維化的發(fā)生［1，2，3］。其特點(diǎn)表現(xiàn)為：以膠原蛋白為主的細(xì)胞外基質(zhì)各成分合成增多，降解相對不足，過多沉積在肝內(nèi)。肝纖維化進(jìn)一步發(fā)展引起肝小葉改建、假小葉和結(jié)節(jié)形成，最終致肝硬化。Safadi等［4］ 研究表明肝纖維化在去除損傷因素后尚有逆轉(zhuǎn)的可能。目前，學(xué)者們普遍認(rèn)為HSC是肝臟合成ECM 的主要細(xì)胞［5］，HSC的活化與增殖是肝纖維化形成的中心環(huán)節(jié)［6，7］，該環(huán)節(jié)包括細(xì)胞增生并合成 ECM、釋放膠原酶及其抑制物等過程。

1 HSC的一般性質(zhì)和功能［8］

1876年德國Von Kupffer首次描述星形細(xì)胞，肝星形細(xì)胞又稱肝貯脂細(xì)胞(fat-storing cells，F(xiàn)SCs)、脂細(xì)胞(1ipocyte)、維生素A貯存細(xì)胞(vitaminA-storing cells)、竇周細(xì)胞(pericyte)和伊東細(xì)胞(Ito cel1)等，是肝臟的一種非實(shí)質(zhì)細(xì)胞，位于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞與肝細(xì)胞之間的竇周間隙(Disse間隙)內(nèi)。正常情況下，HSC約占肝細(xì)胞總數(shù)的8%～13％，占非實(shí)質(zhì)細(xì)胞的33％。其形態(tài)不規(guī)則，胞體呈卵圓形或不規(guī)則形，常伸出數(shù)個樹枝狀突起包圍竇壁，其星形偽足包繞5～6個肝細(xì)胞，因此得名為肝星形細(xì)胞。HSC胞質(zhì)內(nèi)有 1～14個直徑為 1 μm ～2μm的富含維生素 A和三酰甘油的脂滴。

正常情況下，HSC具有以下生理功能：1） 儲存脂肪，為肝細(xì)胞提供能源；2） 儲存和代謝維生素A，儲存體內(nèi)80％左右的維生素A，對體內(nèi)維生素A的穩(wěn)定起著重要調(diào)節(jié)作用；3） 合成和分泌膠原、蛋白多糖、中間絲、結(jié)蛋白 、細(xì)胞因子和生長因子等成分；4）合成基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)及其組織抑制劑(tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP)；5） 調(diào)節(jié)肝竇內(nèi)微循環(huán)。

2 HSC的活化

正常情況下HSC處于靜止?fàn)顟B(tài)。在各種肝損傷因素刺激下，HSC可經(jīng)歷從靜止HSC到具有增殖性、成纖維性和收縮性的肌成纖維樣細(xì)胞(MF)的轉(zhuǎn)化過程。當(dāng)肝臟受到炎癥或機(jī)械刺激等損傷時，鄰近的細(xì)胞如肝細(xì)胞、庫普弗細(xì)胞、竇內(nèi)皮細(xì)胞和血小板等通過旁分泌作用可分泌多種細(xì)胞因子，如TNF-α、TGF-β、IGF-1 (胰島素生長因子)、HGF (肝細(xì)胞生長因子)、PDGF、ET-1 (內(nèi)皮素-1)等。使HSC出現(xiàn)肌成纖維母細(xì)胞樣表型轉(zhuǎn)化，激活并導(dǎo)致細(xì)胞增殖、ECM合成增加。激活后的HSC可自分泌TGF、PDGF、ET等細(xì)胞因子使活化得以持續(xù)，此時即使除去原發(fā)因素，其纖維化過程仍會持續(xù)。

細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)、ECM成分、過氧化物、乙醛等與相應(yīng)HSC膜受體結(jié)合，激活效應(yīng)細(xì)胞內(nèi)信號傳遞分子，最終導(dǎo)致基因表達(dá)所發(fā)生的變化是多條細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)通路控制的結(jié)果。其中促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPK)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類特殊的細(xì)胞信號傳導(dǎo)蛋白。經(jīng)上游激酶作用后發(fā)生蘇氨酸、絲氨酸雙位點(diǎn)磷酸化而激活［6，9］ ， MAPK信號傳導(dǎo)通路被認(rèn)為是許多信號通路的共同通道，其活化與HSC的增殖密切相關(guān)。PDGF是HSC最強(qiáng)烈的有絲分裂原，通過PDGF受體酪氨酸激酶介導(dǎo)的信號細(xì)胞傳導(dǎo)作用促進(jìn)HSC增殖。瘦素（Leptin）能通過激活JAK/STAT通路及H2O2依賴的ERK1/2通路激活HSC，并產(chǎn)生大量TIMP-1，促進(jìn)纖維化進(jìn)程。

活化后的HSC其特征發(fā)生一系列改變：1) 形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為脂滴消失，胞體增大，伸出細(xì)長的偽足，呈現(xiàn)星形外觀。胞質(zhì)中儲存的脂滴和維生素A 減少或消失。胞質(zhì)內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增加、高爾基體發(fā)達(dá)，具有旺盛的蛋白質(zhì)合成能力；2) 增生頻率增加，細(xì)胞大量增生，并且向肝損傷部位遷徙；3) 表達(dá)α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）、波形蛋白及結(jié)蛋白。Niki等［10］采用免疫印跡法研究發(fā)現(xiàn)，波形蛋白及結(jié)蛋白在HSC原代培養(yǎng)的第2～6d開始表達(dá)，α-SMA在原代培養(yǎng)的13 d內(nèi)其表達(dá)持續(xù)增加；4) 收縮性增強(qiáng)。HSC收縮與內(nèi)皮素(ET)和P物質(zhì)等收縮因子有關(guān)，舒張與一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)等舒張因子有關(guān)。肝臟損傷時內(nèi)皮細(xì)胞及活化的HSC合成ET增加，作用于HSC表面的特異性內(nèi)皮素受體(ETR)，引起細(xì)胞收縮，使肝竇血管阻力升高，致肝硬化門靜脈高壓進(jìn)一步發(fā)展； 5) 細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生增多?；罨腍SC可分泌I、Ⅲ、Ⅳ型膠原，板層素（LM），纖維連接蛋白(FN)，層連蛋白(LN)，腱蛋白(tenascin)和粗纖維調(diào)理素（undulin）等糖蛋白成分以及硫酸皮素、硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸(HA)等蛋白多糖，這些蛋白多糖是生成ECM 的主要物質(zhì)；6)分泌趨化因子及細(xì)胞因子，參與炎癥反應(yīng)及趨化作用?；罨腍SC生成單核細(xì)胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractantprotein-1，MCP-1)、肝細(xì)胞生長因子 (hepatocyte growth factor， HGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast growth factor，F(xiàn)GF)和表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)、結(jié)締組織生長因子 (connective tissue growth factor，CTGF)、胰島素樣生長因子(insulin-1ike growth factor，IGF)及IL-6、IL-10等。同時表達(dá)多種受體：如TGF-β及其 I 型受體；PDGF及其受體；內(nèi)皮素(ET)及其受體等［11］。上述細(xì)胞因子和受體構(gòu)成細(xì)胞因子的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控(network of cytokines)系統(tǒng)；7) TIMP合成和分泌增加?；罨腍SC是MMP及TIMP的主要來源細(xì)胞。HSC激活后所分泌的TIMP-1、TIMP-2增加，抑制了MMP對ECM的降解；8) 分泌基質(zhì)降解素及明膠酶，降解基底膜，破壞肝血竇；同時，肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔消失，導(dǎo)致肝竇毛細(xì)血管化。

3 HSC在HF恢復(fù)期的作用

在HF的恢復(fù)階段，活化HSC的數(shù)目減少導(dǎo)致TIMP-1、TIMP-2下降［12，13］，從而使MMP的活性恢復(fù)，ECM 降解多于沉積。此外，包繞在活化HSC周圍的整合素ανβ3配體的降解，可降低與活化HSC表面整合素ανβ3的連結(jié)作用，抑制HSC的增殖，促進(jìn)HSC的凋亡，并誘導(dǎo)一種可溶性的、分泌MMP的HSC表型出現(xiàn)［14］ 。隨著活化HSC的凋亡，與活化HSC相關(guān)的系列事件也將改善，HF由此逐漸趨向恢復(fù)。

4 HSC的凋亡及其調(diào)控

在肝纖維化的逆轉(zhuǎn)過程中，隨著肝組織結(jié)構(gòu)完整性的恢復(fù)，激活的HSC數(shù)量會減少。導(dǎo)致HSC數(shù)量減少有兩種可能：一是由激活表型轉(zhuǎn)化為靜止表型。二是發(fā)生細(xì)胞凋亡而死亡。研究表明［15］ ，在肝纖維化恢復(fù)階段，主要是表現(xiàn)為激活狀態(tài)的HSC凋亡而不是表型的轉(zhuǎn)化。

4.1 Fas(CD95／Apo-1)／Fas-L(CD95L／Apo-1-L)介導(dǎo)

HSC凋亡主要通過死亡因子(FasL)及其相應(yīng)的死亡因子受體(Fas，又稱CD95)介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑實(shí)現(xiàn)。Saile等［16］在對星形細(xì)胞的凋亡及其調(diào)控的研究中發(fā)現(xiàn)，在HSC活化過程中有凋亡出現(xiàn)，并且隨著活化過程的進(jìn)展其表達(dá)Fas和FasL的量不斷增加。CD95(Fas)拮抗抗體能完全阻斷HSC的凋亡；而 CD95(Fas)激動抗體可誘使高達(dá) 95％的活化 HSC進(jìn)入凋亡狀態(tài)并表達(dá) p53。表明HSC的凋亡是通過Fas／FasL途徑啟動的。Gong［17］等的體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，外源性FasL可使原代培養(yǎng)晚期或傳代培養(yǎng)的HSC發(fā)生凋亡。在HSC的活化過程中，凋亡的調(diào)控蛋白bcl-2和P53均有升高，此二者啟動細(xì)胞凋亡信號。

4.2 p75／NGF（神經(jīng)生長因子）介導(dǎo)

人和大鼠的HSC表達(dá)低親和性的神經(jīng)生長因子受體p75 (NGF-R)。p75是腫瘤壞死因子(TNF)受體超家族成員，也是神經(jīng)營養(yǎng)肽家族的一種受體。NGF是它的典型配體。Trim［18］等發(fā)現(xiàn)在靜止?fàn)顟B(tài)下培養(yǎng)的大鼠其HSC不表達(dá) p75，在活化(7 d)和高度活化 (14 d)狀態(tài)下則能檢測到p75的表達(dá)，且表達(dá)數(shù)量呈進(jìn)行性增加。Oakley等［19］采用原位雜交和免疫組織化學(xué)法所進(jìn)行的研究表明，在四氯化碳(CCL4)誘導(dǎo)肝臟損傷48 h后肝臟表達(dá)NGF出現(xiàn)峰值，與HSC出現(xiàn)最大凋亡率的時間相一致，并且HSC的凋亡程度對NGF重組過程呈現(xiàn)劑量依賴性增加。表明肝臟發(fā)生纖維化損傷時所表達(dá)的NGF通過與位于HSC表面的低親和力神經(jīng)生長因子受體(Low affinity nerve growth factor receptor，LNGFR)P75結(jié)合，發(fā)揮調(diào)控活化HSC凋亡數(shù)量的功能。

4.3 PBR(外周苯二氮卓類受體)／PBR-L介導(dǎo)

線粒體滲透性轉(zhuǎn)換孔道(permeability transitionlmre，PTP)包括PBR。PBR的相對分子質(zhì)量為18000，位于線粒體外膜上。靜止的HSC不表達(dá)PBR，HSC活化后開始表達(dá) PBR，活化第7～9 d表達(dá)達(dá)到高峰，HSC的凋亡也達(dá)到高峰，3w后檢測不到 PBR的表達(dá)，HSC因凋亡而大量消失。PBR選擇性配體 1-(2-chloropheny1)-N-methyl-N(1-methylpropy1)-3-isoquinolinecarboxamide(PKIII-95)和 4'-chlorodiazazepam(Ro5-4864)呈劑量依賴性地誘導(dǎo) HSC凋亡。Fischer等［20］研究表明，用選擇性PBR配體PKIII95和Ro5-4864可競爭性結(jié)合PBR。PKIII95可誘導(dǎo)蛋白激酶 B／Akt、Bad的去磷酸化反應(yīng)，并能下調(diào)凋亡抑制基因 Bcl-2水平，促進(jìn) HSC凋亡。

4.4 整合素對 HSC凋亡的調(diào)控

整合素(integrin)是一類位于細(xì)胞表面的糖蛋白受體分子家族，是介導(dǎo)ECM 和HSC相互作用的主要黏附受體。Iwarmto等［21］研究發(fā)現(xiàn)，可溶性整合素識別序列五肽GRGt-(Gly-Arg-Gly-asp-Ser)可拮抗整合素調(diào)節(jié)的原代培養(yǎng)的小鼠H細(xì)胞間的黏附作用，從而干擾整合素介導(dǎo)的HSC與ECM的相互作用，使HSC表達(dá)D53的量增加，bcl-2／bax的量下降，促使HSC發(fā)生凋亡。

4.5 相關(guān)蛋白、促凋亡物質(zhì)和細(xì)胞因子對 HSC凋亡的調(diào)控［22］

肝臟損傷過程中產(chǎn)生的某些細(xì)胞因子參與凋亡的調(diào)控，如TNF-α和TGF-β可通過下調(diào)CD95L和p53的表達(dá)及上調(diào)bcl-xL和p21WAF1的表達(dá)減少活化星形細(xì)胞的凋亡。γ-干擾素(IFN-γ) 可抑制 HSC合成膠原和非膠原基質(zhì)，還可通過熱休克蛋白70(HSP70)依賴通道促進(jìn) HSC的凋亡。實(shí)驗(yàn)表明，TIMP-1能直接抑制激活的HSC凋亡。此作用是通過抑制MMP實(shí)現(xiàn)的?；罨?HSC可通過自分泌IL-10抑制I型膠原轉(zhuǎn)錄過程并刺激產(chǎn)生膠原酶而對HF產(chǎn)生負(fù)調(diào)控作用。此外，IL-10可通過上調(diào) FasL和Bax的表達(dá)、下調(diào) Bcl-2的表達(dá)促進(jìn) HSC的凋亡。肝細(xì)胞生長因子(HGF)通過減少膠原蛋白表達(dá)抑制HF。其機(jī)制可能為 HGF直接作用于HSC，使纖維化肝臟 中 HSC的結(jié)蛋白和 α-SMA mRNA表達(dá)減少。研究證實(shí)［23］，CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白(C／EBPs) 與 HSC向脂肪細(xì)胞分化及去分化過程關(guān)系密切。并且該基因表達(dá)的改變與 HSC的激活有因果關(guān)系。過氧化物酶體增殖因子活化受體 (PPARγ) 在正常肝臟的靜止 HSC中呈高表達(dá)，但在體內(nèi)、外 HSC激活過程中呈低表達(dá)。用PPARγ 的特異激動劑(配體)15 脫氧-12，l4前列腺素J2(15 PGJ2)增強(qiáng) PPARγ 的活性可以抑制體內(nèi)、外HSC的增殖和 α1 (I)膠原的表達(dá)。這種抑制作用可被 PPARγ 的拮抗劑 GW9662所消除。此外，Bcl -2 家族蛋白、cyt-c、凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)等都在HSC凋亡和調(diào)控中發(fā)揮著作用。

Lang等［24］研究顯示，核因子κB(NF-κB)只表達(dá)于激活的HSC，能夠抑制TNF-α 介導(dǎo)的活化 HSC所發(fā)生的凋亡， NF-κB的抗凋亡作用可能與其直接上調(diào)凋亡抑制因子、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1、2(TRAF1、2)、鋅指蛋白A20、超氧化物歧化酶等抗凋亡基因的表達(dá)相關(guān)。近年來的大量研究發(fā)現(xiàn)，活性氧(reactive oxygen species，ROS)與細(xì)胞凋亡關(guān)系密切。

Thirunavukkarasu等［25］研究發(fā)現(xiàn)，過氧化物可誘導(dǎo)大鼠HSC凋亡，并認(rèn)為這種作用與其促進(jìn)細(xì)胞色素C釋放、使bax表達(dá)上調(diào)及增加細(xì)胞凋亡蛋白酶活性相關(guān)，其誘導(dǎo)的HSC凋亡可被細(xì)胞凋亡蛋白酶抑制劑DEVD-fmk、抗氧化劑維生素E和過氧化物歧化酶等所抑制。

潘勤等［26］采用熒光染色 、流式細(xì)胞術(shù) 、原位末端標(biāo)記法、透射電鏡技術(shù)對原代 HSC的觀察表明 ，一定濃度的生長抑素(somatostatin， SST)可促進(jìn)活化的 HSC凋亡，且呈明顯量效關(guān)系 。

瘦素基因小干擾RNA（siRNA）表達(dá)載體可減少瘦素表達(dá)，抑制HSC增殖并誘導(dǎo)其凋亡。

上述各種研究引起的凋亡機(jī)制可有效清除活化增殖的HSC，減少ECM合成，有助于肝組織結(jié)構(gòu)恢復(fù)到正常狀態(tài)。

5 目前針對HSC的抗肝纖維化治療

HSC增殖和凋亡在肝纖維化的形成和逆轉(zhuǎn)過程中起關(guān)鍵作用，抑制 HSC增殖、誘導(dǎo)其凋亡是抗纖維化的重要策略。由于激活的HSC是肝纖維化時ECM的主要來源細(xì)胞，以HSC為靶標(biāo)的治療措施逐漸成為抗肝纖維化的重要方法，其中主要包括抑制 HSC活化、增殖，誘導(dǎo) HSC凋亡以及調(diào)節(jié)膠原合成和降解等方法。目前，抗氧化劑（如半胱氨酸、維生素E、蓬莪術(shù)酮、 碘昔芬、S-腺昔甲硫氨酸 、 硫氧還蛋白、卵磷脂等）、TGF-β拮抗劑、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑、干擾素等可抑制 HSC活化的藥物已應(yīng)用于臨床或處于試驗(yàn)階段。在多靶點(diǎn)抑制 HSC活化的某些抗氧化劑（如腺苷蛋氨酸、小柴胡湯、水飛薊素、復(fù)方861等）可能比單靶點(diǎn)藥物更加有效。研究表明，α-干擾素能抑制HSC增殖和膠原合成，下調(diào)I、Ⅲ型膠原基因表達(dá)，減少I、Ⅲ型膠原沉積，但是其對膠原酶無影響。Lu等［27］的研究表明，α-干擾素可抑制HSC激活，從而達(dá)到減輕肝纖維化的目的。卡莫司他甲磺酸鹽為一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，通過減少潛在TGF-β結(jié)合蛋白的連接，促進(jìn)活性TGF-β的釋放，抑制HSC活化與增殖。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)能通過抑制酪氨酸磷酸化作用而抑制HSC增殖與膠原合成［6］。

中醫(yī)中藥治療慢性肝炎、肝纖維化主要以活血化瘀為主，療效顯著，毒性小，顯示出良好趨勢。草藥復(fù)方861可呈劑量依賴性地有效抑制人HSC增殖，減少星形細(xì)胞中α-SMAmRNA的表達(dá)，表明其對肝纖維化具有一定的治療作用［28］。鱉甲煎口服液亦可通過抑制HSC的增殖達(dá)到抗肝纖維化作用［29］。研究已證實(shí)“益肝康 ”不僅有抑制HSC活化、增殖及促HSC凋亡的作用，還可通過抑制PDGF、TGF等促纖維化細(xì)胞因子的表達(dá)和加強(qiáng)抗脂質(zhì)過氧化、促進(jìn)膠原降解等作用發(fā)揮其抗肝纖維化功效［30］。Zhao等［31］研究表明，粉防己堿可抑制星形細(xì)胞激活，減少膠原累積，并可通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡蛋白酶活性增加HSC凋亡數(shù)量。銀杏葉提取物可通過抑制TIMP-1的表達(dá)及促進(jìn)HSC的凋亡減輕CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化。劉成等［32］研究證實(shí)“中藥血清”能明顯抑制損傷肝庫普弗細(xì)胞對HSC的增殖與I型膠原產(chǎn)生的影響 。楊玲等［33］采用 RT-PCR法發(fā)現(xiàn)“抗纖軟肝沖劑藥物血清”能顯著抑制肝星形細(xì)胞的 TGFβ1mRNA的表達(dá)。王海南等［34］研究發(fā)現(xiàn)，“肝纖維化大鼠藥物血清”能降低TGFβ1活性。

雖然研究人員在抗肝纖維化方面做了大量的工作，已經(jīng)研制了許多抗肝纖維化的藥物，但多數(shù)藥物研究仍局限于動物實(shí)驗(yàn)或細(xì)胞水平 ，應(yīng)用于肝纖維化臨床治療依然任重道遠(yuǎn)。

6 展望

肝纖維化是繼發(fā)于肝臟炎癥或損傷后修復(fù)過程中的炎癥反應(yīng)， ECM在肝內(nèi)過量沉積，最終導(dǎo)致肝硬化。肝纖維化的形成機(jī)制非常復(fù)雜，確切機(jī)制尚不清楚。HSC作為肝纖維化發(fā)病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)正在受到廣泛關(guān)注。隨著對肝纖維化細(xì)胞分子生物學(xué)機(jī)制的進(jìn)一步研究，以HSC為靶標(biāo)的治療措施逐漸成為抗肝纖維化的重要方法。作者認(rèn)為目前HSC活化、增殖引起肝纖維化以及肝纖維化的逆轉(zhuǎn)機(jī)理仍未明確。深入開展肝纖維化時細(xì)胞因子、趨化因子、轉(zhuǎn)錄因子等對HSC調(diào)控作用機(jī)制的研究，尋找HSC激活過程中的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，研制抑制HSC活化促進(jìn)其凋亡的藥物，對于預(yù)防、延緩乃至中斷肝纖維化的進(jìn)程具有良好前景 。

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篇6

【血吸蟲病，日本；肝硬化；維生素E；氧化性應(yīng)激；肝星狀細(xì)胞；膠原I型

日本血吸蟲病是我國危害最大的寄生蟲病之一，而肝纖維化是日本血吸蟲病致死和形成嚴(yán)重并發(fā)癥最重要的原因.探究表明，在血吸蟲病肝纖維化形成過程中，氧化應(yīng)激發(fā)揮重要功能，參和血吸蟲對宿主的損傷，自由基可能是血吸蟲病主要的致病因素［1］.VitE作為機(jī)體防御氧化應(yīng)激損傷的重要抗氧化劑，已應(yīng)用于治療肝纖維化，但有關(guān)VitE抗日本血吸蟲病肝纖維化功能的探究國內(nèi)外報(bào)道甚少，而VitE治療血吸蟲病肝纖維化的功能機(jī)制尚未見文獻(xiàn)報(bào)道.我們觀察VitE抗日本血吸蟲病肝纖維化功能，探索其機(jī)制如下.

1材料和方法

1.1材料健康雄性昆明小鼠(18～22)g及日本血吸蟲尾蚴陽性釘螺(湖北省血吸蟲病防治探究所)，皮膚敷貼法感染日本血吸蟲尾蚴（20±1）條/只，于感染后8,10,12wk末分別處死6只小鼠后取肝組織進(jìn)行病理學(xué)檢查，以肝纖維化達(dá)Ⅱ級或Ⅱ級以上作為VitE開始治療的標(biāo)志，即在12wk末開始給予VitE治療.32只感染小鼠分為4組，每組8只摘要：1組，模型組；2組，VitE高劑量組(VitE每日150mg/kg)；3組，中劑量組(50mg/kg)；4組，低劑量組(5mg/kg).VitE膠丸由廈門魚肝油廠生產(chǎn)，剪破膠丸，用蒸餾水配制所需濃度的混懸液，灌胃給藥每日1次，連續(xù)8wk.另取同一批健康小鼠10只作為正常對照組.丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶（SOD）測定試劑盒(南京建成生物工程探究所)，免疫組化所用試劑(北京博奧申生物技術(shù)有限公司)，TRIzol(美國Invitrogen)，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(美國Promega)，Taq酶(Gibco公司).α1(I)型前膠原引物序列參照GenBank，上游序列摘要:5′GAGCGGAGAGTACTGGATCG3′，下游序列摘要:5′TGCTGTAGGTGAAGCGACTG3′，擴(kuò)增片段為419bp；內(nèi)參照βactin引物上游序列摘要:5′TGTCACCAACTGGGACGATA3′，下游序列摘要:5′AGGTCTTTACGGATGTCAACG3′，擴(kuò)增片段為654bp，引物由北京奧科生物技術(shù)有限公司合成.

1.2方法斷頸處死小鼠，取肝右葉相同部位肝組織2塊，1塊于-70℃保存，測定肝組織勻漿MDA含量、SOD活性及肝臟α1(I)型前膠原基因表達(dá)；1塊固定于100mL/L中性甲醛，石蠟包埋，行HE和VG及αSMA免疫組化染色.

1.2.1肝組織病理學(xué)及纖維化評分常規(guī)行HE和VG染色，光鏡下觀察肝小葉病理變化及肝纖維化程度分級摘要：0級20=1，正常；Ⅰ級21=2，膠原纖維包繞蟲卵肉芽腫四周；Ⅱ級22=4，匯管區(qū)有大量纖維，小葉間僅有少量纖維；Ⅲ級23=8，纖維組織大量延伸至肝小葉間.應(yīng)用HPIAS1000高清楚度彩色病理圖文分析系統(tǒng)，每組每次測量20～30個由單個成熟蟲卵形成的肉芽腫兩個直角相交直徑，以(最大橫徑+最大縱徑)/2為平均值，并計(jì)算各組均值；測定VG染色切片膠原纖維灰度面積(S)和視野總面積(T)，用S/T比值表示膠原含量.

1.2.2肝組織勻漿MDA含量和SOD活性測定硫代巴比妥酸比色法測定肝臟MDA含量，黃嘌呤氧化法測定SOD活性，按試劑盒說明書要求操作.

1.2.3肝臟αSMA免疫組化采用SP法，兔抗鼠αSMA抗體稀釋度1∶100，用已知陽性片做陽性對照，PBS液代替一抗做陰性對照，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞.應(yīng)用HPIAS1000高清楚度彩色病理圖文分析系統(tǒng)對αSMA免疫組化切片進(jìn)行平均吸光度值檢測.

1.2.4肝臟α1(I)型前膠原基因表達(dá)應(yīng)用TRIzol試劑盒，參照說明提取肝組織總RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，采用20μL反應(yīng)體系.PCR反應(yīng)條件摘要：95℃變性5min,94℃30s,94℃30s,52.7℃退火30s,72℃延伸30s，循環(huán)30次，最后72℃終止10min，以βactin為內(nèi)參照.PCR產(chǎn)物分析摘要：PCR產(chǎn)物經(jīng)2kg/L瓊脂糖凝膠2μL電泳檢測，結(jié)果照相并存入凝膠分析系統(tǒng)，以βactin光密度值標(biāo)化α1(I)型前型膠原基因光密度值，得到α1(I)型前膠原基因相對含量.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理摘要：采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)均采用x±s表示，采用方差分析進(jìn)行比較，P%26lt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.多組均數(shù)間的多重比較采用LSD法.

2結(jié)果

2.1肝臟病理學(xué)變化對照組無明顯組織學(xué)異常.1組摘要：HE和VG染色示小鼠血吸蟲病肝纖維化模型建立成功.血吸蟲感染后8wk，蟲卵肉芽腫大小和數(shù)量達(dá)到高峰，大量炎性細(xì)胞浸潤；隨感染時間延長，肉芽腫逐漸縮小，肝細(xì)胞變性、壞死和炎性細(xì)胞浸潤明顯減輕，膠原纖維逐漸增多.至20wk，膠原纖維由最初的細(xì)線狀變?yōu)闂l索狀或網(wǎng)狀分布在匯管區(qū)、蟲卵肉芽腫四周并延伸至肝小葉間(圖1A，B).VitE組肉芽腫大小和1組比較無顯著差異(P%26gt;0.05)，對肝細(xì)胞變性、壞死和炎性細(xì)胞浸潤程度影響不明顯；2，3組雖有不同程度肝纖維化，但纖維帶變細(xì)、窄、短，膠原纖維局限于匯管區(qū)和肉芽腫內(nèi)及四周，肝小葉間很少有膠原沉積(圖1C)，和1組比較，肝纖維化程度分級差異有顯著性(P%26lt;0.05).4組和1組比較無明顯差異(表1).

2.2肝臟MDA含量和SOD活性和對照組比較，1組SOD活性下降(P%26lt;0.05)，MDA含量增多(P%26lt;0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.2,3組SOD活性和1組比較升高(P%26lt;0.05)，但和對照組比較仍相差甚遠(yuǎn)(P%26lt;0.05)；2,3組MDA含量和1組比較減少(P%26lt;0.05)，2組和對照組比較無顯著性差異(P%26gt;0.05)；4組和1組比較無明顯差異(表1).

A摘要:模型組×100;B摘要:模型組×200;C摘要:VitE組×100.

圖1肝臟膠原纖維分布VG

2.3肝臟αSMA表達(dá)對照組肝臟血管壁、膽管壁平滑肌有少許αSMA陽性表達(dá)，匯管區(qū)及肝竇內(nèi)基本無αSMA陽性表達(dá)；1組匯管區(qū)、蟲卵肉芽腫內(nèi)及四周膠原纖維沉積處可見大量索狀αSMA陽性表達(dá)細(xì)胞，肝竇內(nèi)可見多量αSMA陽性表達(dá)細(xì)胞(圖2A,B)；2,3組αSMA陽性細(xì)胞數(shù)目減少(P%26lt;0.05)，局限在匯管區(qū)、纖細(xì)的纖維隔及肉芽腫內(nèi)及四周，肝竇內(nèi)表達(dá)減少(圖2C)；4組和1組比較無明顯差異(表1).

A摘要:模型組×100;B摘要:模型組×200;C摘要:VitE組×100.表1VitE對蟲卵肉芽腫直徑、MAD含量、SOD活性、αSMA平均吸光度值及肝纖維程度的影響

2.4肝臟α1(I)型前膠原基因表達(dá)和膠原含量1組(即感染20wk末)α1(I)型前膠原mRNA和膠原含量高于感染12wk時(P%26lt;0.05和P%26lt;0.05)和對照組(P%26lt;0.05和P%26lt;0.05).2,3組α1(I)型前膠原mRNA和膠原含量和1組比較差異有顯著性(P%26lt;0.05和P%26lt;0.05)；2組α1(I)型前膠原mRNA和膠原含量和感染12wk時比較有顯著性差異(P%26lt;0.05和P%26lt;0.05)，而3組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P%26gt;0.05)；4組和1組比較無明顯差異(圖3，表2).

M摘要:marker;1摘要:模型組;2摘要:感染12wk;3摘要:VitE高劑量組;4摘要:VitE中劑量組;5摘要:VitE低劑量組.

圖3RTPCR分析各組α1(I)型前膠原mRNA表達(dá)表2VitE對膠原含量和α1(I)型前膠原基因表達(dá)的影響

3討論

氧化應(yīng)激是多種病因所致肝纖維化發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)節(jié)之一［2］.VitE作為體內(nèi)一個重要的抗氧化劑，有抗肝纖維化［3-5］、抗腫瘤、抗衰老等功能.宗道明等［5］探究表明，VitE可降低血吸蟲病肝纖維化患者血清肝纖維化各項(xiàng)指標(biāo)，對肝纖維化組織形態(tài)學(xué)的好轉(zhuǎn)有積極功能，治療血吸蟲病肝纖維化療效顯著.但目前有關(guān)VitE抗血吸蟲病肝纖維化機(jī)制少見文獻(xiàn)報(bào)道.

Chojkier等［6］探究表明，VitE抑制HSCα1(I)型膠原基因表達(dá).我們發(fā)現(xiàn)，VitE降低肝臟α1(I)型前膠原基因表達(dá)、膠原含量及肝纖維化程度分級；2組α1(I)型前膠原mRNA和膠原含量顯著低于感染12wk時.可見VitE可延緩血吸蟲病肝纖維化進(jìn)程，減輕肝纖維化程度.本探究中，1組MDA含量增加，SOD活性下降，說明日本血吸蟲病肝纖維化之肝臟發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化損傷，和文獻(xiàn)［1］報(bào)道一致，而VitE能夠不同程度地逆轉(zhuǎn)這些改變，對此具有一定的治療功能；并且VitE抑制HSC活化和增殖.VitE可能通過抑制肝臟脂質(zhì)過氧化功能和由此產(chǎn)生的活性醛，如MDA和4羥化壬烯(4HNE)，從而抑制MDA和4HNE蛋白加合物形成，該加合物是實(shí)驗(yàn)性肝損傷和肝纖維化聯(lián)系的樞紐［7］，進(jìn)而抑制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的HSCα1(I)型前型膠原基因表達(dá)和蛋白合成［8］.我們發(fā)現(xiàn)VitE尚不能完全逆轉(zhuǎn)SOD活性，故對其劑量、療程以及和其它藥物的聯(lián)合應(yīng)用有待于進(jìn)一步的探究.

總之，VitE可延緩血吸蟲病肝纖維化進(jìn)程，減輕肝纖維化程度，其機(jī)制和抗脂質(zhì)過氧化功能、抑制HSC活化和增殖、降低α1(I)型前膠原基因表達(dá)和膠原合成有關(guān)，適當(dāng)補(bǔ)充VitE進(jìn)行抗纖維化治療是一種可行的手段，有望成為一種廉價(jià)、不良反應(yīng)少、療效顯著的臨床用藥.

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篇7

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對肝纖維化發(fā)生機(jī)理已有更突破性的認(rèn)識，傳統(tǒng)的“肝纖維化不可逆轉(zhuǎn)”的觀點(diǎn)已被，可惜目前國際上還沒有針對肝纖維化的有效西藥應(yīng)用于肝病臨床。在我國，通過長期中醫(yī)藥臨床實(shí)踐尤其是近20多年的中西醫(yī)結(jié)合研究，已證明中醫(yī)藥可有效阻止和逆轉(zhuǎn)肝纖維化，現(xiàn)已有抗肝纖維化的國家中藥新藥陸續(xù)上市，如扶正化瘀膠囊、鱉甲軟肝片等。

“雙管齊下”的治療方案

引起慢性肝損傷、肝纖維化的最常見的病因有乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒感染，酗酒，血吸蟲感染等。

去除病因具有“釜底抽薪”的積極治療意義，十分關(guān)鍵。如病毒性肝炎的抗病毒治療、酗酒者戒酒、血吸蟲感染的殺蟲治療。有效的病因治療，也可減輕肝纖維化的發(fā)生和進(jìn)一步的加重。如臨床研究發(fā)現(xiàn)，用賀普丁抗病毒治療后，也有部分患者纖維化程度減輕。但從臨床實(shí)際看，有半年以上病程的慢性病毒性肝炎患者，肝活檢發(fā)現(xiàn)大多數(shù)有不同程度的肝纖維化存在，甚至有些患者，發(fā)現(xiàn)肝病時即被診斷為早期肝硬化。這種情況下，纖維化的病理變化和病因(病毒)共同存在，因此抗肝纖維化治療和抗病毒治療“雙管齊下”是一合理的治療方案。

此外，某些情況下，即使去除了病因，如酒精性肝纖維化患者戒了酒，纖維化仍可繼續(xù)發(fā)展，因此，抗肝纖維化治療也是有積極意義的。

何時進(jìn)行抗肝纖維化治療

慢性肝損傷伴有肝纖維化時，應(yīng)積極進(jìn)行抗肝損傷和抗肝纖維化治療。我們曾在“扶正化瘀膠囊抗慢性乙型肝炎肝纖維化的研究”中發(fā)現(xiàn)，炎癥活動明顯的患者，治療后纖維化發(fā)生逆轉(zhuǎn)的概率反而高，提示炎癥活動也是抗肝纖維化的有利時機(jī)。

臨床上，也常有患者問，肝硬化可以或需要抗肝纖維化治療嗎？通常回答是肯定的?，F(xiàn)國際公認(rèn)肝纖維化可以逆轉(zhuǎn)，但纖維化發(fā)展形成肝硬化后，則逆轉(zhuǎn)困難。早期肝硬化能否逆轉(zhuǎn)是一個有待科學(xué)研究的問題，目前尚無定論。

我們曾在有關(guān)臨床研究中發(fā)現(xiàn)，個別通過肝穿刺病理檢查診斷早期肝硬化的患者，在治療6個月后肝組織病理變化出現(xiàn)改善，但尚不能就此得出結(jié)論?？傊M(jìn)行抗肝纖維化治療，對肝硬化尤其是早期是有積極意義的。當(dāng)然，對于失代償性肝硬化，出現(xiàn)腹水、肝性腦病等并發(fā)癥時，對癥治療更為重要，這是輕重緩急的辨證問題。

如何運(yùn)用中醫(yī)藥抗肝纖維化

“肝纖維化”是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的一個病理學(xué)名稱，雖然傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)對其缺乏明確認(rèn)識，但在長期醫(yī)療實(shí)踐中有較豐富的經(jīng)驗(yàn)積累和相關(guān)理論闡述，認(rèn)為肝硬化與“血瘀”和“正虛”等有關(guān)。近年來的中西醫(yī)結(jié)合研究，發(fā)現(xiàn)了一些活血化瘀中藥如丹參、桃仁、川芎等，扶正補(bǔ)虛藥物蟲草、黃芪等及其有效成分有不同程度的抗肝纖維化作用，初步論證了“活血”和“扶正”理論在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中的重要地位。目前上市的抗肝纖維化中成藥寓有其基本的治療原則。也就是說，中成藥抗肝纖維化，是“病和證”結(jié)合，是針對矛盾的普遍性而言，打個比方說，就像不同企業(yè)生產(chǎn)的“均碼”服裝，不適合全部人群，但能滿足大多數(shù)人的需要。大家可以注意到，藥物說明書中，除注明“抗肝纖維化”外，還有相應(yīng)的適應(yīng)“證”。

篇8

近年來對肝炎后肝硬化發(fā)病機(jī)制的研究有了長足進(jìn)展，尤其在對肝細(xì)胞外基質(zhì)的研究方面，膠原纖維合成（ fibrogenesis）和纖維溶解（ fibrogenolysis）維持動態(tài)平衡，例如對與膠原合成酶相對抗的多種基質(zhì)金屬蛋白酶（ matrixmetalloproteinnase， mMP）以及組織分泌的抑制 mMP的酶金屬蛋白酶組織抑制劑（ tIMP）等。這些研究不僅提出了多種檢測肝纖維化的方法，還進(jìn)一步在動物實(shí)驗(yàn)中利用膠原合成酶的拮抗物、抗體以及對膠原合成酶的 mRNA進(jìn)行基因療法等的探索。然而肝纖維化和體內(nèi)其他部位的纖維化一樣，都被認(rèn)為是機(jī)體對損傷的一種修復(fù)作用，即使可以用基因療法或其他方法可以徹底消除纖維化，但人體對抑制或消除纖維化后將產(chǎn)生何種反應(yīng)及后果迄今尚無任何實(shí)驗(yàn)可以預(yù)言，正是在這種情況下近年對肝纖維化的發(fā)生機(jī)制進(jìn)行著深入的探討［1］。

一、肝纖維化時肝內(nèi)的三個基本現(xiàn)象

肝炎后肝纖維化的病因一般認(rèn)為是肝細(xì)胞壞死及凋亡所引起的，是組織壞死、凋亡時血流中血小板釋放對纖維化有促進(jìn)作用的因子———血小板衍生生長因子（ platetetderivedgrowthfactor， pDGF）所致。然而在其他組織損傷時血流中也出現(xiàn) pDGF，卻未見肝發(fā)生纖維化，說明 pDGF可能不是肝纖維化的主要原因。肝臟發(fā)生纖維化時有三個基本現(xiàn)象值得重視：（1）肝細(xì)胞外基質(zhì)的增加；（2）星狀細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榧±w維母細(xì)胞；（3）星狀細(xì)胞胞漿內(nèi)視黃醇減少。這三個現(xiàn)象都與星狀細(xì)胞有關(guān)，因之星狀細(xì)胞開始被認(rèn)為是引起肝纖維化的主要細(xì)胞［2］。

二、星狀細(xì)胞

肝星狀細(xì)胞曾經(jīng)有過多種不同名稱：如儲脂細(xì)胞、 ito細(xì)胞、肝竇周邊細(xì)胞等。早在1876年德國學(xué)者 kupffer即報(bào)道在肝竇的內(nèi)皮細(xì)胞近血流側(cè)存在枯否細(xì)胞，而在肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的近肝細(xì)胞一側(cè)即狄氏（ disse）腔有星狀或紡錘狀細(xì)胞，其功能不明，當(dāng)時就命名之為星狀細(xì)胞。以后學(xué)者們曾給予各種名稱，但隨著對纖維化機(jī)制的認(rèn)識，1996年為了紀(jì)念 kupffer的貢獻(xiàn)采用了 sternzellen的英譯名即 stellatecells（星狀細(xì)胞）［3］。靜止時或非活化時的星狀細(xì)胞在其核周圍有多數(shù)脂滴（即視黃醇脂滴），對脂滴的功能曾有多種推測，近年 okuno等［4］在動物實(shí)驗(yàn)中證明，視黃醇是星狀細(xì)胞未被激活的標(biāo)志，當(dāng)星狀細(xì)胞被激活時視黃醇即行消失而引起轉(zhuǎn)化生長因子β（ tGFβ）的分泌和細(xì)胞自身的活化。 tGFβ是使星狀細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌纖維母細(xì)胞并分泌膠原纖維的因子。然而星狀細(xì)胞首先被激活的因素又是什么呢？分泌的無生物活性的 tGFβ又經(jīng)什么因子被激活呢？目前尚不十分清楚。

三、轉(zhuǎn)化生長因子β

tGFβ存在于體內(nèi)多種細(xì)胞。在肝內(nèi)除了前述星狀細(xì)胞可以分泌 tGFβ外， tGFβ還存在于枯否細(xì)胞、肝竇內(nèi)皮細(xì)胞以及肝纖維化附近的炎性細(xì)胞中［5］。近年來不少學(xué)者，如 friedman、 gressner、 border等先后證明， tGFβ是肝纖維化、肝硬化發(fā)生中的主要細(xì)胞因子。 tGFβ在合成及分泌時都無生物活性，必需活化并與受體結(jié)合后才能發(fā)生作用。 tGFβ被活化后可能有三種亞型，即 tGFβ1、 tGFβ2及 tGFβ3，三者性能幾乎相同，其中 tGFβ1可能是生理狀況下分泌的，而 tGFβ2及 tGFβ3是在緊急狀況或病理狀態(tài)下才發(fā)揮作用。激活后的三種 tGFβ都具有使星狀細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肌纖維母細(xì)胞并分泌膠原纖維的作用，同時還有抑制星狀細(xì)胞產(chǎn)生肝細(xì)胞生長因子的作用，使肝細(xì)胞生長受到抑制［6］。當(dāng)星狀細(xì)胞中視黃醇脂滴減少時，肝纖維化即開始出現(xiàn)，但視黃醇脂滴的減少及代謝過程仍不很明了。有人認(rèn)為，在視黃醇減少前可能尚需要其他因子刺激，視黃醇只不過加速纖維化而已。

星狀細(xì)胞自身分泌的 tGFβ一方面使星狀細(xì)胞本身轉(zhuǎn)化為肌纖維母細(xì)胞并分泌膠原纖維，另一方面 tGFβ1又和肝細(xì)胞膜上 tGFβ受體（ tGFβ r）結(jié)合促使肝細(xì)胞凋亡，鑒于肝細(xì)胞凋亡、壞死和肝纖維化的關(guān)系密切，因之 tGFβ對肝纖維化的作用機(jī)制成為肝纖維化研究重點(diǎn)之一。

篇9

1整合素的結(jié)構(gòu)與功能（生物學(xué)特性）

整合素（integrin）是一類細(xì)胞膜表面糖蛋白受體家族分子，主要介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞之間及細(xì)胞與ECM之間的黏附。整合素分子是由α（120×103-185×103）和β（90×103-110×103）2個亞單位通過非共價(jià)鍵連接構(gòu)成的異二聚體分子。目前研究發(fā)現(xiàn)受體家族包括至少18個α亞單位和9個β亞單位，共同組成超過25種不同的整合素[3]，兩種亞基均由長的胞外段（氨基端）、跨膜段、短的胞內(nèi)段（竣基端）三部分組成。整合素與配體結(jié)合發(fā)揮其功能，整合素的配體包括纖維連接蛋白、層粘連蛋白、膠原蛋白、玻璃粘連蛋白等。整合素α亞基的胞外段識別ECM的RGD序列（Arg- Gly Asp，精氨酸-甘氨酸天冬氨酸）介導(dǎo)細(xì)胞與ECM之間的黏附，而β亞基的胞內(nèi)段與細(xì)胞骨架相連。

整合素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)特點(diǎn)：作為細(xì)胞表面受體，整合素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路具有雙向信號傳導(dǎo)的特點(diǎn)[4]，其內(nèi)信號傳遞（outside-insignaling）即為ECM成分通過整合素跨膜向內(nèi)傳遞信，調(diào)節(jié)真核細(xì)胞基因的表達(dá)。外向信號傳遞（inside-out signaling）即細(xì)胞內(nèi)信息經(jīng)整合素調(diào)節(jié)向外傳出，調(diào)節(jié)細(xì)胞與胞外基質(zhì)粘附的特異性和親合力。它主要介導(dǎo)細(xì)胞與ECM的黏附，使細(xì)胞內(nèi)骨架與細(xì)胞外ECM得以整合而形成整體，整合素參與構(gòu)成的ECM-整合素細(xì)胞骨架跨膜復(fù)合體，既可誘導(dǎo)細(xì)胞骨架重排，加固細(xì)胞間的機(jī)械聯(lián)系，同時參與細(xì)胞與細(xì)胞間的黏附和細(xì)胞內(nèi)外的信息傳遞，廣泛影響細(xì)胞的生長、生存、增殖、分化、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為。

2整合素與肝纖維化

肝纖維化以肝臟ECM大量增生沉積為特征，是肝臟的一種損傷愈合反應(yīng)，為一種病因?qū)е侣愿尾∷灿械?。肝纖維化時，不僅包括明顯的ECM增生沉積與重構(gòu)改建，也有顯著的肝臟細(xì)胞功能障礙、肝臟細(xì)胞病理生理變化影響肝ECM的數(shù)量及分布；而肝ECM變化又明顯影響肝臟細(xì)胞功能兩者相互作用， 肝星狀細(xì)胞是ECM的主要來源，肝竇內(nèi)皮細(xì)胞在肝纖維發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用，受損的肝細(xì)胞再生和膠原纖維的增生往往是并進(jìn)的，而整合素在其中起重要作用[4]。

2.1整合素與HSC

肝纖維化時， 肝星狀細(xì)胞是ECM的主要來源，而整合素在各種細(xì)胞都有改變，影響細(xì)胞功能及胞外基質(zhì)代謝。研究發(fā)現(xiàn)，大鼠肝纖維化早期就有明顯的LN竇周沉積，LN與其整合素受體結(jié)合后，活化FAK等信號通路，激活HSC，調(diào)節(jié)其增殖、粘附。HSC和ECM之間的相互作用主要經(jīng)整合素介導(dǎo)[5]，基礎(chǔ)研究表明，整合素與其相應(yīng)配基結(jié)合后，多個粘著斑激酶（FAK）分子聚集在粘著斑（FAP）處，使FAK N-端區(qū)的酪氨酸磷酸化而被激活，通過Ras途徑，產(chǎn)生級聯(lián)反應(yīng)，影響細(xì)胞效應(yīng)。

2.2整合素與肝竇內(nèi)皮細(xì)胞

肝竇內(nèi)皮細(xì)胞在肝纖維發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用，它主要通過表達(dá)相關(guān)細(xì)胞因子、介導(dǎo)肝臟炎癥反應(yīng)、活化星狀細(xì)胞、參與細(xì)胞外基質(zhì)的生成與降解、參與肝竇毛細(xì)血管化、調(diào)節(jié)肝臟血管等參與肝纖維化。Anne等[6]報(bào)道肝竇毛細(xì)血管化與整合素家族表達(dá)上升相關(guān)。肝竇毛細(xì)血管化時LN在內(nèi)皮下沉積形成基底膜，而LN通過其受體發(fā)揮生物學(xué)功能，整合素是其最重要的受體與LN結(jié)合的整合素大多含β亞基，已確立有4種。α為特異的LN- R正常肝竇內(nèi)皮細(xì)胞上高水平表達(dá)。在硬變肝臟中，肝竇發(fā)生毛細(xì)血管化，除原有內(nèi)皮細(xì)胞上整合素表達(dá)增強(qiáng)外，還出現(xiàn)LN受體。α6β1和α2β1的表達(dá)，劉小菁等[7]發(fā)現(xiàn)肝纖維化大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞與正常相比，不但α6β1整合素表達(dá)明顯增強(qiáng)，而且肝竇內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)FAK活性亦明顯高于正常，推測肝臟整合素及FAK活性增加對肝竇內(nèi)皮細(xì)胞失窗孔化及肝纖維化形成有重要意義。

2.3整合素與肝細(xì)胞

正常人肝細(xì)胞上有整合素α1β1，整合素α5β1，α9β1，在慢性活動性肝炎和肝硬化中，肝細(xì)胞中原有的整合素表達(dá)上調(diào)，且出現(xiàn)自他整合素受體的誘導(dǎo)表達(dá)。肝細(xì)胞中整合素表達(dá)上調(diào)及類型增加不僅是對纖維化時肝臟微環(huán)境變化的適應(yīng)性應(yīng)答，還可能通過其粘附作用參與肝纖維化發(fā)生發(fā)展。

綜上所述，肝纖維化是肝臟對慢性損傷的動態(tài)、可逆性修復(fù)反應(yīng)，肝損傷時發(fā)生的早期ECM變化是HSC及其纖維化活動的重要原因，整合素在其中起重要橋梁作用。防治肝損傷時ECM變化及其對HSC激活作用是肝纖維化及慢性肝病防治的重要措施，因此選擇性干預(yù)病變ECM與受體（整合素）結(jié)合及其細(xì)胞內(nèi)信號傳遞與生物學(xué)作用發(fā)揮具有極其重要的抗肝纖維化治療學(xué)意義。

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篇10

【關(guān)鍵詞】 血吸蟲病； 肝纖維化； 吡喹酮

Clinical Research of Praziquantel in the Treatment of Hepatic Fibrosis of Schistosomiasis/LIU Lie-quan，ZHU Li，TIAN Yue-xiao，et al.//Medical Innovation of China，2016，13（27）：123-126

【Abstract】 Objective：To explore the effect of Praziquantel in the treatment of hepatic fibrosis of schistosomiasis.Method：From March 2015 to January 2016，120 patients with hepatic fibrosis of schistosomiasis in our hospital were randomly divided into the treatment group（60 cases）and the control group（60 cases）.Changes of liver B ultrasonic，serum hyaluronic acid（HA），procollagen type Ⅲ（PC-Ⅲ），laminin（LN），collagen type Ⅳ（CL-Ⅳ），matrix metalloproteinases（MMPS），tissue inhibitor of metalloproteinases（TIMPS） and TGF-β1 of two groups were observed.Result：After treatment，HA，CL-Ⅳ，PC-Ⅲ，LN，TIMP1 and TIMP2 and TGF-β1 of the treatment group significantly decreased，MMP2 and MMP9 rose，the differences were statistically significant（P

【Key words】 Schistosomiasis； Hepatic fibrosis； Praziquantel

First-author’s address：The Third People’s Hospital of Jingzhou City，Jingzhou 434000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.27.033

日本血吸蟲病是我國危害最大的寄生蟲病之一，而肝纖維化是日本血吸蟲病致死和形成嚴(yán)重并發(fā)癥最重要的原因，部分患者經(jīng)病原學(xué)治療，血吸蟲免疫學(xué)檢查已轉(zhuǎn)陰，但還是不能阻止或逆轉(zhuǎn)了肝纖維化病理過程，如何治愈慢性血吸蟲病肝纖維化，目前還沒有理想的抗肝纖維化藥物。探尋防治血吸蟲病肝纖維化的有效藥物是醫(yī)務(wù)工作者長期而艱巨的任務(wù)。吡喹酮可使蟲卵肉芽腫明顯變小或直接導(dǎo)致肉芽腫的消退[1]，所以可以認(rèn)為是吡喹酮直接抑制了蟲卵肉芽腫的作用。本院2015年3月-2016年

1月，應(yīng)用吡奎酮對血吸蟲病肝纖維化患者進(jìn)行了臨床研究，取得了較好的效果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2015年3月-2016年

1月收治的日本血吸蟲病肝纖維化患者120例。按照隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組和對照組，各60例。治療組男39例，女21例，年齡37～56歲，平均（42.58±6.26）歲，其中血吸蟲病肝纖維化Ⅱ級

35例，Ⅲ級25例；對照組男40例，女20例，年齡36～55歲，平均（42.36±6.38）歲，其中血吸蟲病肝纖維化Ⅱ級36例，Ⅲ級24例。血吸蟲病診斷標(biāo)準(zhǔn)按《中華人民共和國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS261-206》。血吸蟲免疫學(xué)檢查蟲卵抗體及循環(huán)抗原均陰性，肝實(shí)質(zhì)受損B超分級達(dá)到Ⅱ、Ⅲ級的患者作為研究對象[2-3]。其他原因所致的肝纖維化，心、肝、腎功能明顯異常，血吸蟲免疫學(xué)檢查陽性，合并肝炎病毒感染及其他可能影響治療的疾病除外。研究方案報(bào)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)并征得患者同意后開始實(shí)施。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 治療組患者口服肌苷片、維生素E、螺內(nèi)酯等護(hù)肝藥治療70 d，分別于療程的4～5 d、34～35 d和64～65 d口服吡喹酮3次，每次按總量60 mg/kg，分2 d服完。對照組服用安慰劑、護(hù)肝治療同治療組。

1.3 觀察指標(biāo) （1）B超檢查采用雙盲法觀察：選取肝表面平整度、肝臟邊緣形態(tài)、肝臟回聲強(qiáng)度、肝靜脈清晰度、脾臟面積（以經(jīng)過脾門脾臟上下極的最大距離為長徑，從脾門垂直于此長徑至脾表面的距離為厚度，二者乘積的一半為標(biāo)準(zhǔn)）、門靜脈主干內(nèi)徑、門靜脈左支矢狀部內(nèi)徑、膽囊壁厚度等參數(shù)，按表1標(biāo)準(zhǔn)對上述指標(biāo)進(jìn)行半定量評分[4]。（2）纖維化指標(biāo)：各組均在治療前1 d和療程結(jié)束后1周內(nèi)檢查血清肝纖維化6項(xiàng)指標(biāo)[血清透明質(zhì)酸（HA）、Ⅲ型前膠原（PC-Ⅲ）、層黏連蛋白（LN）、Ⅳ型膠原（CL-Ⅳ）、間質(zhì)金屬蛋白酶（MMPS）、間質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子（TIMPS）]。（3）轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測。（4）常規(guī)監(jiān)測血常規(guī)、肝腎功能、心電圖等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，比較采用

t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)，以P

2 結(jié)果

2.1 兩組B超檢查積分比較 治療組治療前B超檢查積分（8.62±1.21）分，治療后（7.12±1.1）分；

對照組治療前（8.59±1.31）分，治療后（8.38±1.42）分。兩組患者治療前B超檢查積分比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后治療組B超積分下降率明顯低于對照組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.2 兩組血清肝纖維化6項(xiàng)指標(biāo)比較 治療前兩組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后治療組HA、CL-Ⅳ較治療前顯著下降，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.3 兩組TGF-β1比較 治療前對照組和治療組分別為（19.66±3.24）ng/mL和（20.12±3.41）ng/mL，

兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；治療后對照組和治療組分別為（19.87±3.14）ng/mL和（13.49±2.84）ng/mL，治療組明顯低于對照組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.4 不良反應(yīng) 所有患者均無明顯肝腎功能變化，心電圖無明顯異常改變，僅有部分患者出現(xiàn)頭暈、乏力、腹脹、惡心及心悸不適，均完成了治療。

3 討論

血吸蟲病肝纖維化實(shí)質(zhì)是一種由血吸蟲蟲卵在肝臟沉積引起的慢性肝損傷的傷口愈合反應(yīng)[5]，其形成的主要原因?yàn)樗拗鳈C(jī)體長期處于對血吸蟲蟲卵抗原的免疫應(yīng)答狀態(tài)，肝星狀細(xì)胞（HSC）異常激活轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞并大量增殖，產(chǎn)生大量細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），超過了機(jī)體降解能力，致ECM在肝內(nèi)過量沉積[6-7]，而肝星狀細(xì)胞（HSC）的激活在血吸蟲病肝纖維化的形成和發(fā)展過程中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用，是主要的促進(jìn)ECM生成細(xì)胞[8]?；罨腍SC增生合成ECM，不僅表達(dá)多種基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPS），還能合成金屬蛋白酶抑制因子（TIMPS）和纖溶酶原激活物抑制劑-I等，其中MMPS和TIMPS對于小鼠和人類血吸蟲病過程了中纖維組織的重塑發(fā)揮了重要作用[9]。肝臟ECM的代謝主要由MMPS及TIPMS調(diào)節(jié)，MMPS可降解多種ECM成分[10]。當(dāng)MMPS/TIPMS下降，產(chǎn)生大量細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）超過了機(jī)體降解能力，致ECM在肝內(nèi)過量沉積。肝巨噬細(xì)胞是另一種參與血吸蟲病肝纖維化的細(xì)胞替代途徑活化巨噬細(xì)胞（AAM）。其中AAM與纖維化關(guān)系密切.由Th2反應(yīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生。AAM分泌TGF-α、TGF-1和PDGF等成纖維因子，使HSC增值活化，進(jìn)而合成ECM，TGF-β1是一種多功能細(xì)胞因子，其過度表達(dá)可激活Smad蛋白，進(jìn)而促進(jìn)膠原的合成，導(dǎo)致嚴(yán)重的肝纖維化[11-12]。吡喹酮為廣譜抗吸蟲和絳蟲藥物，是臨床血吸蟲病治療的常用藥物。近年來有研究提出吡喹酮有明顯的治療肝纖維化作用，吡喹酮治療可改善肝纖維化、脾腫大、肝功能及肝門脈高壓，并可抑制肝星狀細(xì)胞中Col3α1、α-SMA、TGF-β、MMP9和TIMP1 mRNA的表達(dá)水平[13]，徐會娟等[14]探討了日本血吸蟲感染宿主不同階段吡喹酮治療對肝纖維化的影響，發(fā)現(xiàn)吡喹酮在血吸蟲感染急性期的療效優(yōu)于慢性期和晚期，且有預(yù)防肝纖維化形成的作用。吡喹酮對日本血吸蟲卵周圍的炎細(xì)胞反應(yīng)具有細(xì)胞免疫抑制作用，所以可以認(rèn)為是吡喹酮直接抑制了蟲卵肉芽腫，而抑制蟲卵肉芽腫的機(jī)制很可能是對宿主免疫功能的調(diào)控[15]。吡喹酮不僅能降低血吸蟲感染宿主血清中和組織表達(dá)的MMP-2及TGF-β1[16]，還能抑制肝星狀細(xì)胞中TGF-β1及MMP9的表達(dá)[13]TGF-β1降低可抑制纖維化細(xì)胞因子TIMPl表達(dá)，促進(jìn)抗纖維化因子MMP-2表達(dá)從而發(fā)揮治療血吸蟲肝纖維的作用[17]。在菲律賓萊特（Leyte）血吸蟲病?？漆t(yī)院，對102例血吸蟲感染患者采用吡喹酮總劑量60 mg/kg治療后，并對其中的52例患者進(jìn)行了為期17個月、每3個月一次隨訪，治療后

6個月隨訪調(diào)查發(fā)現(xiàn)，患者門靜脈壁增厚程度改善、回聲帶密度降低、脾腫大程度下降、血清總膽汁酸含量顯著下降，但因長期血吸蟲感染而導(dǎo)致患有嚴(yán)重肝纖維化的患者中未能檢測到明顯超聲影像學(xué)改變[18-19]。Cai等[20]對經(jīng)吡喹酮治療1年后的日本血吸蟲病患者肝臟超聲圖像和2項(xiàng)血清生化指標(biāo)與治療前進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)在吡喹酮治療1年后，患者肝左葉和脾長度顯著縮短，肝門靜脈第二分支外、內(nèi)徑比例顯著下降，透明質(zhì)酸（HA）和Ⅲ型前膠原不正常比例顯著降低，但門靜脈內(nèi)徑未見顯著改變；文獻(xiàn)[21-22]認(rèn)為吡喹酮可通過降低血吸蟲病肝纖維化小鼠血清TNF-α含量、提高IFN-γ含量和降低肝臟TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型膠原含量，從而發(fā)揮抗肝纖維化作用。本文血吸蟲肝纖維化患者經(jīng)吡喹酮治療后HA、CL-Ⅳ、PC-Ⅲ、LN、TIMP1、TIMP2及TGF-β1明顯降低，而MMP2及MMP9上升，B超顯示肝纖維化積分降低，臨床觀察無明顯副作用發(fā)生，提示吡喹酮治療血吸蟲病肝纖維化安全有效。本研究病例有限，對于吡喹酮的劑量、療程、給藥間期、治療時機(jī)的選擇有待進(jìn)一步研究探索。

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