體液免疫范文

時(shí)間:2023-03-15 15:39:54

導(dǎo)語(yǔ):如何才能寫(xiě)好一篇體液免疫,這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn),歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文,供你借鑒。

篇1

關(guān)鍵詞: 異體輸血;自體輸血;腫瘤;免疫

腫瘤患者因其自身疾病的特殊性,圍手術(shù)期常須輸血治療,而輸血對(duì)免疫功能的影響在臨床上一直頗有爭(zhēng)議?,F(xiàn)有的自體輸血方法可有效的減少圍手術(shù)期輸血量,但其對(duì)腫瘤患者的體液免疫功能影響研究較少。本研究通過(guò)觀察異體和自體輸血對(duì)腫瘤患者體液免疫功能的影響,旨在進(jìn)一步探討自體輸血的臨床價(jià)值及意義,為腫瘤患者圍手術(shù)期合理用血提供指導(dǎo)。

1資料與方法

1.1一般資料 經(jīng)醫(yī)院倫理管理委員會(huì)批準(zhǔn),患者及家屬知情同意并簽署知情同意書(shū)后,選擇擇期行胃腸腫瘤根治術(shù)患者80例,男44例,女36例,年齡38 69歲,體重40~78kg,ASA分級(jí)為Ⅰ~Ⅱ級(jí),其中胃癌26例,結(jié)腸癌24例,直腸癌30例。病例入選標(biāo)準(zhǔn):術(shù)前經(jīng)胃腸鏡檢查病理確診為胃腸道惡性腫瘤患者,患者術(shù)前無(wú)嚴(yán)重的心、肺、肝、腎及內(nèi)分泌疾病,無(wú)手術(shù)治療、放療、化療、近期使用免疫抑制劑、嚴(yán)重感染、血源性傳播疾病、凝血功能、血小板功能異常及輸血病史,患者術(shù)前血紅蛋白大于110g/L,紅細(xì)胞比容不低于0.33。

1.2方法 患者術(shù)前禁食12h,禁飲6h。所有患者均不使用術(shù)前藥,患者入室后常規(guī)監(jiān)測(cè)血壓(Bp)、心率(HR)、心電圖(ECG)、血氧飽和度(SpO2),開(kāi)放上肢靜脈,在局麻下行橈動(dòng)脈穿刺和頸內(nèi)靜脈穿刺置管行有創(chuàng)檢測(cè),常規(guī)麻醉誘導(dǎo):咪唑安定0.05 mg/ kg、芬太尼4~5μg/ kg、丙泊酚1~2 mg/ kg、羅庫(kù)溴銨0.6mg/ kg,快速誘導(dǎo)插管后接Blease-8500麻醉機(jī)行機(jī)械通氣,吸入氧濃度為100%,氧流量為1.5~2.0L/min,潮氣量為8~10ml/kg,呼吸頻率為12bpm,吸呼比(I/E)為1:2,保持呼氣末CO2(PETCO2)濃度為35~45mHg。術(shù)中采用丙泊酚6~8mg·kg-1·h-1、瑞芬太尼0.1~0.25μg·kg-1·h-1,順式阿曲庫(kù)銨2~3μg· kg-1·min-1維持麻醉和肌肉松弛。

1.3輸血方法 根據(jù)術(shù)中是否輸血及不同血液保護(hù)方案將患者分為四組,C組為空白對(duì)照組(Control),患者術(shù)中出血較少未輸血,也未有任何血液保護(hù)措施。A組為異體輸血組(Allogeneic blood transfusion),視手術(shù)出血量和患者身體情況(如術(shù)中Hb

1.4監(jiān)測(cè)指標(biāo) 四組患者分別于入室時(shí)(T0)、術(shù)畢即刻(T1)、手術(shù)后24h(T2)、術(shù)后3d(T3)、術(shù)后7d(T4)抽取靜脈血2ml送生化分析室,以3000r/min離心后取上清液至全自動(dòng)生化分析儀用免疫透射比濁法檢測(cè)血清免疫球蛋白IgG、IgA和IgM含量。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所得數(shù)據(jù)計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,正態(tài)分布采用方差分析,非正態(tài)分布資料采用秩和檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,P

2結(jié)果

2.1各組患者一般資料的比較 各組患者性別比、年齡、體重、手術(shù)時(shí)間及病例構(gòu)成比組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2各組患者免疫球蛋白的變化 與T0時(shí)比較,四組患者術(shù)后T1時(shí)IgG、IgA都較術(shù)前降低(P0.05);T2、T3時(shí)僅A組患者IgG、IgA降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。組間比較,四組患者T0、T1、T4時(shí)IgG、IgA、IgM各組間比較無(wú)明顯差異(P>0.05),T2、T3時(shí)A組IgG、IgA水平較其他三組降低明顯(P0.05)。(見(jiàn)表2)。

3討論

人體免疫球蛋白是B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的糖蛋白,是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子,其通過(guò)與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合發(fā)揮體液免疫功能。因此,測(cè)定腫瘤患者免疫球蛋白水平,可以有效評(píng)價(jià)其體液免疫功能。

本研究結(jié)果顯示,術(shù)前四組患者術(shù)前血漿IgA、IgG、IgM濃度各組間比較并無(wú)明顯差異,具有可比性,術(shù)畢即刻四組患者血漿IgA、IgG濃度都有所下降,分析原因可能是因?yàn)樾g(shù)中為了維持有效血容量,大量補(bǔ)充晶體和膠體液,血液中有形成分稀釋而引起的;至術(shù)后第1d,空白對(duì)照組、血液稀釋組和聯(lián)合組血漿IgA、IgG濃度迅速恢復(fù)至術(shù)前水平,而異體輸血組則持續(xù)下降,直至術(shù)后第7d才恢復(fù),研究結(jié)果表明,常規(guī)輸液和稀釋式自體輸血對(duì)腫瘤患者體液免疫功能影響輕微,而異體紅細(xì)胞輸注可顯著抑制腫瘤患者術(shù)后免疫球蛋白水平。盡管這種抑制是一過(guò)性的,但是對(duì)腫瘤患者術(shù)后抗感染治療和預(yù)防術(shù)后并發(fā)癥都是十分不利的。本研究中血漿IgM濃度變化不明顯可能是IgM本身在血漿中的含量較低,從而統(tǒng)計(jì)學(xué)上表現(xiàn)為無(wú)差異性。邱姬[1]等在觀察自體輸血和異體輸血對(duì)骨科患者免疫影響時(shí)也發(fā)現(xiàn),異體輸血可顯著抑制患者術(shù)后免疫球蛋白水平,而自體輸血?jiǎng)t無(wú)明顯改變,其分析認(rèn)為可能是血液在保存過(guò)程中庫(kù)血紅細(xì)胞老化,血細(xì)胞產(chǎn)生的各種抗原物質(zhì)及免疫復(fù)合物過(guò)多,紅細(xì)胞負(fù)擔(dān)過(guò)重有關(guān)系。

結(jié)合本研究結(jié)果,我們綜合分析認(rèn)為不同輸血方法對(duì)腫瘤患者術(shù)后免疫球蛋白影響可能有以下兩個(gè)方面原因:一方面可能是異體輸血后可降低機(jī)體T細(xì)胞免疫功能,T細(xì)胞可以提供B細(xì)胞活化的第二信號(hào),導(dǎo)致B細(xì)胞分化成熟障礙[2~4],從而導(dǎo)致B細(xì)胞的終末產(chǎn)物漿細(xì)胞產(chǎn)生減少,分泌免疫球蛋白降低,而自體輸血對(duì)T淋巴細(xì)胞的免疫功能影響較小,所以對(duì)免疫球蛋白分泌的影響不明顯。另一方面異體輸血后,異體紅細(xì)胞及其降解產(chǎn)物可被視作抗原[5,6],產(chǎn)生抗原-抗體反應(yīng),從而大量消耗體內(nèi)的免疫球蛋白,而自體輸血一般存貯時(shí)間較短,代謝產(chǎn)物較少,且輸入的是自身血,所以對(duì)免疫球蛋白分泌的影響輕微。

總之,圍術(shù)期異體輸血可使腫瘤患者術(shù)后體液免疫功能紊亂,從而可能導(dǎo)致腫瘤患者預(yù)后不良,而自體輸血對(duì)腫瘤患者免疫功能影響輕微,因此,腫瘤患者圍術(shù)期應(yīng)嚴(yán)格限制異體輸血,必須輸血時(shí)應(yīng)首選自體輸血,從而減輕輸血對(duì)患者術(shù)后免疫功能的影響。

參考文獻(xiàn):

[1]邱姬,金阿榮,郭曉秀.圍手術(shù)期自體輸血對(duì)血清炎癥性因子及免疫球蛋白的影響[J].中國(guó)輸血雜志,2005,18(1):39-40.

[2]Yang C P, Shittu E, Bell E B. Specific B cell tolerance is induced by cyclosporine A plus donor-specific blood transfusion pretreatment:prolonged survival of MHC class I diaparate caredac allagrafts[J]. J Immunol, 2000, 164 (5): 242-247.

[3]Sawye G J,F(xiàn)abre J W. Indirect T-cell allorecognition and the mechanisms of immuno-suppression by allogeneic blood transfusions[J]. Traspl Int, 1997,10 (4):276-283.

[4]Ettinger R, Sims G P, Fairhurst A M, et al. IL-2 induces differentiation of human naive and memory B cells into antibody-secreting plasma cells[J]. J Immunol, 2005,175(12):7867-7879.

篇2

【關(guān)鍵詞】  2型糖尿?。幻庖咔虻鞍?;補(bǔ)體

近年研究認(rèn)為,免疫調(diào)節(jié)異??赡茉?型糖尿病(t2dm)的發(fā)生發(fā)展中起核心作用〔1〕。糖尿病患者在持續(xù)的高糖狀態(tài)下易發(fā)生心、腦、腎損傷等多器官并發(fā)癥和各種感染,誘發(fā)酮癥酸中毒,增加糖尿病病死率,這些均與糖尿病患者免疫功能低下密切相關(guān)。免疫球蛋白(ig)和補(bǔ)體是特異性免疫和非特異性免疫共同的效應(yīng)分子,可代表機(jī)體體液免疫狀態(tài),在機(jī)體抗感染、免疫調(diào)節(jié)、免疫監(jiān)視中發(fā)揮重要作用。評(píng)價(jià)t2dm患者的體液免疫狀態(tài),對(duì)于臨床估計(jì)患者接受治療的可能性、制定治療策略及判斷預(yù)后均具有重要意義。

1  資料與方法

1.1  研究對(duì)象及分組  選擇2007年3月至2008年12月本院內(nèi)分泌科住院的t2dm患者72例為研究對(duì)象。其中男43例,女29例,年齡61~79 歲,平均(69.8±10.5)歲,病程2月~31年,平均(7.7±6.3)年,空腹血糖(fpg)3.12~20.80 mmol/l,平均(10.90±3.20)mmol/l。健康對(duì)照組55例,男29例,女26例,年齡 58~78 歲,平均(67.7±11.4)歲,fpg(3.9±1.8)mmol/l,均為我院門(mén)診健康體檢者,性別和年齡與患者相匹配。t2dm患者中根據(jù)是否患有合并癥分為合并感染組12例;合并微血管病變組29例(合并視網(wǎng)膜病變9例,腎臟病變12例,8例同時(shí)合并視網(wǎng)膜及腎臟病變);31例為不合并感染或微血管病變的單純組。再根據(jù)病程分為組1:0~5年病程,33例;組2:6~10年病程,21例;組3:10年以上病程,18例。

1.2  病例排除標(biāo)準(zhǔn)  (1)惡性腫瘤、自身免疫性疾病。(2)其他腎臟疾病如高血壓腎病、腎小球腎炎。(3) 各種外傷、手術(shù)等應(yīng)激情況。(4)糖尿病組和對(duì)照組1月內(nèi)均未用過(guò)抗生素和免疫抑制劑。

1.3  檢測(cè)方法  空腹8 h以上采肘靜脈血,分離血清后分裝待用。(1)采用葡萄糖氧化酶法測(cè)量空腹血糖(fpg)及餐后2 h血糖(pbg2 h)。(2)iga、igg、igm及補(bǔ)體c3、c4均采用美國(guó)beckman coulter immage 800免疫濃度分析儀利用速率散射免疫比濁法測(cè)定。

1.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法  使用ssps13.0軟件分析,計(jì)量資料用x±s表示,采用t檢驗(yàn)分析。

2  結(jié)果

2.1  t2dm組與健康對(duì)照組免疫指標(biāo)比較  與健康對(duì)照組比較,t2dm組血清igg水平明顯下降(p<0.05),iga、補(bǔ)體c3、c4水平明顯升高(p<0.01,p<0.05)。血清igm水平無(wú)顯著變化(p>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2  單純組、感染組及微血管病變組免疫指標(biāo)比較  與單純組比較,感染組血清iga、補(bǔ)體c3水平明顯升高(p<0.01,p<0.05)。igg,igm,c4水平變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。微血管病變組血清igg水平明顯下降(p<0.05)。iga,補(bǔ)體c3、c4水平明顯升高(p<0.01,p<0.05)。igm水平變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。見(jiàn)表2。

表1  t2dm組與對(duì)照組免疫指標(biāo)測(cè)定值的比較(略)

與對(duì)照組比較:1)p<0.05,2)p<0.01

2.3  不同病程t2dm患者免疫指標(biāo)比較  t2dm不同病程組比較,病程6~10年組患者血清igg水平較0~5年組明顯下降(p<0.05)。補(bǔ)體c3水平明顯升高(p<0.05)。iga、igm、c4水平變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。病程10年以上組患者血清igg水平較0~5年組明顯下降(p<0.01),iga、補(bǔ)體c3、c4水平升高(p<0.05,p<0.01),igm水平變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。病程10年以上組患者與病程6~10年組患者5項(xiàng)免疫指標(biāo)比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。見(jiàn)表3。

表2  感染組、微血管病變組與單純組免疫指標(biāo)測(cè)定值的比較(略)

與單純組比較:1)p<0.05,2)p<0.01

表3  t2dm不同病程組免疫指標(biāo)比較(略)

與組1比較:1)p<0.05,2)p<0.01

3  討論

   

通過(guò)對(duì)t2dm患者體液中ig分子水平的研究可測(cè)評(píng)其體液免疫系統(tǒng)的狀態(tài)。本研究中t2dm組較對(duì)照組、合并微血管病變組較單純糖尿病組血清igg水平均下降,iga水平升高,而血清igm水平無(wú)顯著變化。t2dm患者免疫功能的改變,考慮可能因患者處于長(zhǎng)期高血糖狀態(tài),白細(xì)胞的趨化性、吞噬作用以及殺菌能力降低,以致免疫力下降〔1〕。微血管病變組igg顯著下降可能是糖尿病患者發(fā)生微血管病變后,引起血液循環(huán)障礙,血流量減少,白細(xì)胞代謝減弱,抗體產(chǎn)生減少所致〔2〕。感染組iga明顯升高,說(shuō)明了t2dm患者存在黏膜局部免疫系統(tǒng)的增強(qiáng)(由于黏膜的長(zhǎng)期亞臨床感染)或可能是一種代償性增高而致〔3〕。而spooren等〔4〕認(rèn)為iga升高是由于高糖、感染等因素使大量淋巴細(xì)胞長(zhǎng)期處于有絲分裂期所致。t2dm患者的免疫功能失衡,與長(zhǎng)期高血糖狀態(tài)下多形核白細(xì)胞和b淋巴細(xì)胞功能受損有關(guān)〔5〕,與血管病變和感染的關(guān)系是互動(dòng)式的。

   

補(bǔ)體活化產(chǎn)物是特異性免疫和非特異性免疫共同的效應(yīng)分子,在機(jī)體抗感染、免疫調(diào)節(jié)、免疫監(jiān)視中發(fā)揮重要作用,特定情況下也可以導(dǎo)致組織損傷。補(bǔ)體成分c3、c4與免疫復(fù)合物的共價(jià)結(jié)合能抑制免疫復(fù)合物相互結(jié)合形成大的網(wǎng)格而易于在組織中沉積,組織免疫復(fù)合物激活補(bǔ)體而誘發(fā)一系列的病理?yè)p傷,也可破壞免疫復(fù)合物的空間結(jié)構(gòu)而使其溶解。本研究中,t2dm組較對(duì)照組,微血管病變組較單純糖尿病組c3、c4水平顯著升高,感染組中c3水平較單純糖尿病組明顯升高。補(bǔ)體水平變化的機(jī)制考慮與胰島素抵抗(ir)、t2dm患者脂代謝異常有關(guān)。yang等〔6〕研究認(rèn)為,單純糖尿病會(huì)導(dǎo)致c3水平升高,而且c3參與了ir,以致最終引起t2dm的整個(gè)過(guò)程是一個(gè)慢性炎癥的發(fā)展過(guò)程,它刺激先天免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,引起炎性細(xì)胞釋放包括c3在內(nèi)的炎性因子。 fernandereal 等〔7〕的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí),在t2dm患者的體內(nèi)c3 、tnfα、il6 及crp水平均增高。目前已經(jīng)證實(shí)了c3 mrna表達(dá)因 tnfα及 il6 而上調(diào),這 3 種因素均參與了ir的形成,且產(chǎn)生的c3可直接或間接影響胰島素信號(hào)的級(jí)聯(lián)傳遞最終導(dǎo)致ir,但c3與胰島功能之間的關(guān)系還需進(jìn)一步深入研究。koistinen等〔8〕認(rèn)為脂代謝紊亂肥胖是t2dm c3、c4升高的重要原因:基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),乳糜微??纱碳ぶ炯?xì)胞分泌c3,c3的裂解片段乙酞化刺激蛋白(acylation stimulating protein,asp)能加強(qiáng)脂肪酸的再酯化,促進(jìn)脂肪細(xì)胞、成纖維細(xì)胞合成tg,清除血液中的自由脂肪酸,使肝臟 vldl生成減少而降低血脂。因此,c3的升高可能是機(jī)體對(duì)異常血脂的一種自我調(diào)節(jié)反應(yīng)。糖尿病微血管損傷的病理過(guò)程是微血栓形成、白細(xì)胞淤滯及血管細(xì)胞的加速凋亡,補(bǔ)體活化后的級(jí)聯(lián)反應(yīng)可以伴隨并加劇上述的病理過(guò)程。一方面,微血栓和白細(xì)胞淤滯可引起缺血再灌注損傷,通過(guò)補(bǔ)體經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體,凋亡的內(nèi)皮細(xì)胞也能啟動(dòng)補(bǔ)體替代途徑;另一方面,補(bǔ)體活化后具有促凝、促炎和促凋亡作用,從而形成惡性循環(huán),加速微血管病變的發(fā)展。

   

本組研究中,不同病程體液免疫變化以10年以上組與0~5年組差異性最大,6~10年組與0~5年組igg、c3的變化有意義,其余指標(biāo)兩組間變化不明顯。提示病程與糖尿病患者的ig及補(bǔ)體水平相關(guān),總體趨勢(shì)是隨著病程延長(zhǎng),各指標(biāo)變化更顯著。考慮隨著病程的延長(zhǎng),除長(zhǎng)期高血糖因素外,患者合并血管病變、感染的幾率亦相應(yīng)增加,勢(shì)必會(huì)加重體液免疫失衡。

【參考文獻(xiàn)】

   1 張 丹,宮曉紅,韓美君.niddm合并肺部感染患者的免疫功能變化研究〔j〕.大連大學(xué)學(xué)報(bào),2003;24(6):924.

2 潘繼豹,盧學(xué)勉,葉家鶴,等.2型糖尿病患者血清免疫球蛋白及igg亞類的觀察〔j〕.浙江醫(yī)學(xué),2000;22(3):1489.

3 eguchi k,yagame m,suzuki d,et al.significance of high level of serum iga and igaclass circulating immune complexes( igacic ) in patients with noninsulindependent diabetes mellitus〔j〕.j diabetes complications,1995;9(1):428.

4 spooren p,vermes i,soons h.similar alterations of lymphocyte subpopulations in type ⅰand type ⅱ diabetes〔j〕.neth j med,1993;42(56):163 7.

5 alexiewicz jm,smogorzewski m,klin m,et al.effect of treatment of hemodialysis patients with nifedipine on metabolism and function of polymor phonuclear leukocytes〔j〕.am j kidey dis,1995;25(3):4404.

6 yang y,lu hl,zhang j,et al.relationships among acylation stimulating protein,adiponectin and complement c3 in lean vs obese type 2 diabetes〔j〕.int j obes,2006;30(3):43946.

篇3

[關(guān)鍵詞] 體液免疫;病情轉(zhuǎn)歸;手足口??;T細(xì)胞亞群

[中圖分類號(hào)] R725.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742(2014)10(a)-0108-03

手足口病(HFMD)是臨床常見(jiàn)的嬰幼兒傳染性疾病[1]。發(fā)病人群多為5歲以下兒童,臨床癥狀主要有手、足、口腔等部位的皰疹或者是破潰性潰瘍等,少數(shù)患兒可引發(fā)腦膜炎、心肌炎以及肺水腫等并發(fā)癥。近幾年來(lái),HFMD的發(fā)病率逐年升高,如何在發(fā)病早期進(jìn)行有效評(píng)估并對(duì)重癥患兒危險(xiǎn)性給予及時(shí)干預(yù),改善患兒病情預(yù)后,一直的臨床研究的重點(diǎn)[2]。目前實(shí)驗(yàn)室T細(xì)胞亞群及免疫球蛋白等免疫學(xué)檢測(cè)指標(biāo),在一定程度上可有效反映HFMD患兒的機(jī)體免疫狀態(tài)[3]。該次研究抽選2010年7月―2014年5月175例HFMD患兒,對(duì)其不同病程患兒血清免疫球蛋白指標(biāo)及T細(xì)胞亞群相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行分析,并與健康患兒進(jìn)行對(duì)比,旨在探討HFMD患兒病情進(jìn)展與細(xì)胞及體液免疫水平的關(guān)系,以及機(jī)體免疫水平在HFMD患兒病情進(jìn)展中的作用,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)抽選該院收治的175例HFMD患兒,診斷均符合《手足口病診療指南》[4]的診斷標(biāo)準(zhǔn),其中男92例,女83例,年齡5個(gè)月~8歲,平均(2.85±1.07)歲;根據(jù)臨床表現(xiàn)和病情發(fā)展分型:輕癥型63例,其中男42例,女21例,年齡5個(gè)月~7歲,平均(2.79±1.09)歲;重型60例,其中男32例,女28例,年齡6個(gè)月~8歲,平均(2.83±1.05)歲;危重型52例,其中男18例,女34例,年齡5個(gè)月~7歲,平均(2.80±1.11)歲;所有患者均未合并其他慢性疾病史,輕癥型組均治愈好轉(zhuǎn),重型組病例中死亡3例,危重型組死亡6例。同時(shí)抽選同期131例健康體檢兒為對(duì)照組,其中男75例,女60例,年齡4個(gè)月~7歲,平均(2.88±1.06)歲;各組間性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 重型及危重型HFMD患兒臨床特性

重癥均有如單純腦炎、腦炎合并肺炎及其他上呼吸道感染等并發(fā)癥。重型組指有發(fā)熱、皮疹以及神經(jīng)系統(tǒng)受累癥狀,表現(xiàn)為嗜睡、肢顫、陣發(fā)性抽搞、易驚嚇等。危重型組臨床表現(xiàn)為持續(xù)性高熱(基礎(chǔ)體溫≥39.0℃),持續(xù)時(shí)間大約為2~7 d;病情危重,頻繁抽搐以及有嚴(yán)重意識(shí)障礙,亦有循環(huán)、呼吸系統(tǒng)受累癥狀。

1.3 檢測(cè)方法

各組患兒入院后2 h內(nèi)(未進(jìn)行治療前)抽取靜脈血送檢。采用免疫比濁法、HITACHI7600全自動(dòng)特定蛋白分析儀檢測(cè)IgM、IgG、IgA等體液免疫功能,試劑從ORION DIAGNOSTICA公司(芬蘭)選購(gòu),采用BD FACSCalihur型號(hào)的流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)CD3+、CD4+、CD8+等細(xì)胞免疫功能指標(biāo),取肝素抗凝新鮮全血1 mL, 然后再50 μL的樣品試管中分別加入10 μL劑量的相應(yīng)單克隆抗體,充分混勻后室溫避光放置15 min,采用PACS做溶血,F(xiàn)CM分>10 000個(gè)細(xì)胞,儀器和試劑購(gòu)自BD Biosciences公司(美國(guó))。

1.4 觀察指標(biāo)

包括各組患兒臨床一般情況、表現(xiàn)、病情變化、體液免疫(IgM、IgG、IgA)及細(xì)胞免疫(CD3+、CD4+、CD8+)結(jié)果,判斷疾病預(yù)后。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以(x±s)表示,兩組間采用t值檢驗(yàn),3組均數(shù)采用F值檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 HFMD患兒與健康對(duì)照組各免疫指標(biāo)比較

HFMD患兒細(xì)胞免疫(CD3+、CD4+、CD8+等T細(xì)胞亞群)水平均顯著低于健康對(duì)照組(P

2.2 HFMD患兒不同病情程度各免疫指標(biāo)比較

隨著病情嚴(yán)重程度的加重,輕癥型、重型、危重型患兒的CD3+、CD4+、CD8+水平不斷降低,IgM、IgG、IgA水平升高,3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

3 討論

手足口?。℉FMD)是因感染腸道2病毒而導(dǎo)致的一種傳染性疾病,可引發(fā)HFMD的腸道病毒多達(dá)20多種類型,其中以CoxA16及EV71最為常見(jiàn)。多數(shù)患兒感染HFMD后預(yù)后良好,有少部分重癥患兒可并發(fā)腦膜炎、心肌炎以及肺水腫等并發(fā)癥,個(gè)別重癥患兒由于病情發(fā)展快速,搶救無(wú)效而發(fā)生死亡。有學(xué)者[5]認(rèn)為HFMD的病情轉(zhuǎn)歸與人體免疫功能可能存在重要相關(guān)性。

目前,臨床通常采用T細(xì)胞亞群測(cè)定來(lái)準(zhǔn)確判斷病人機(jī)體細(xì)胞免疫功能。越來(lái)越多的研究[6-7]表明,T細(xì)胞在人體腸道病毒感染后起著重要的免疫介導(dǎo)作用,可釋放出多種細(xì)胞因子,在機(jī)體抗感染、抗病毒感染免疫應(yīng)答機(jī)制中發(fā)揮重要作用。CD4+、CD8+能夠調(diào)節(jié)T細(xì)胞的免疫功能,其中CD4+對(duì)B淋巴細(xì)胞分化功能具有調(diào)節(jié)作用,刺激產(chǎn)生抗體;而CD8+對(duì)抗體合成以及分泌具有抑制作用,同時(shí)可抑制T細(xì)胞增殖,兩者的協(xié)調(diào)作用使機(jī)體免疫應(yīng)答維持正常。T細(xì)胞亞群中的CD3+表達(dá)水平代表外周血成熟T細(xì)胞總數(shù),CD3+可通過(guò)向T細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)TCR雙識(shí)別信號(hào)而促進(jìn)T細(xì)胞活化,分布于所有活化T細(xì)胞表面。CD4+又稱為T(mén)h細(xì)胞,是一種輔助誘導(dǎo)性T細(xì)胞亞群,CD4+上的TCR能夠識(shí)別出抗原肽-II類分子復(fù)合物,從而參與Th2細(xì)胞激活。CD8+是一種抑制性(Ts)以及細(xì)胞毒性(Tc)細(xì)胞亞群,可識(shí)別并結(jié)合抗原肽-II類分子,激活細(xì)胞毒性T細(xì)胞。CD4+與CD8+的比值能夠反映出Th與Tc功能間的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài),是機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一項(xiàng)最重要的監(jiān)測(cè)指標(biāo),其比值下降,則表示機(jī)體免疫力下降[8]。該研究HFMD患兒細(xì)胞免疫(CD3+、CD4+、CD8+等T細(xì)胞亞群)水平均顯著低于健康對(duì)照組(P

免疫球蛋白可使體液免疫增強(qiáng),IgA、IgG能夠增強(qiáng)巨噬及NK細(xì)胞的免疫吞噬功能,IgA通過(guò)經(jīng)典途徑還能對(duì)補(bǔ)體系統(tǒng)產(chǎn)生激活作用,使得機(jī)體免疫應(yīng)答反應(yīng)明顯增強(qiáng)。有研究顯示,HFMD患兒體液免疫亢進(jìn),并且同病情程度存在相關(guān)相關(guān)性,重癥患兒體液免疫亢進(jìn)表現(xiàn)更為明顯,可能與HFMD患兒機(jī)體防御有關(guān)。本研究中,HFMD患兒體液免疫(IgM、IgG、IgA)水平明顯高于健康對(duì)照組(P

綜上所述,HFMD患兒尤其是有腦炎合并癥的重癥患兒會(huì)出現(xiàn)顯著的細(xì)胞及體液免疫功能低下及調(diào)節(jié)紊亂,與疾病嚴(yán)重程度存在相關(guān)性。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 周杰林.不同病程的手足口病患兒體液免疫狀況分析[J].現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué),2012,24(8):883-885.

[2] 熊金鳳,王云芬,楊興林,等.手足口病患兒免疫球蛋自檢測(cè)結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(7):837-838.

[3] 亞敏,王春妍,宋立文,等.手足口病患兒體液免疫檢測(cè)分析[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,8(8):73-74.

[4] 胡淑琴,李娜,王緒韶,等.手足口病患兒免疫球蛋自及補(bǔ)體檢測(cè)的臨床意義[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合兒科雜志,2012,4(5):433-434.

[5] 李振華,周濤.手足口病患兒體液免疫功能與病情轉(zhuǎn)歸的關(guān)系[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué),2010,2(6):510-511.

[6] 田健美,李健琴,孔小行,等. 144例手足口病患兒細(xì)胞和體液免疫變化及意義[J].床兒科雜志,2011,29(12):1156-1158.

[7] 劉國(guó)軍,彭倩,鄭雪芳,等. 手足口病患兒細(xì)胞免疫水平臨床分析[J]. 中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué), 2013,13(11): 1413-1414.

篇4

摘要 :目的 檢測(cè)新生兒缺氧缺血性腦?。℉IE)患兒血清IgG、IgA、IgM的變化,以了解HIE患兒體液免疫功能的變化。 方法 67例HIE患兒根據(jù)出生后的日齡和病情輕重分為1~3天組32例,其中輕度HIE14例,中重度HIE18例;4~6天組35例,其中輕度HIE16例,中重度HIE19例。對(duì)照組30例新生兒為同期我院產(chǎn)科出生的正常新生兒。采用散射免疫擴(kuò)散法對(duì)HIE患兒和對(duì)照組進(jìn)行體液免疫指標(biāo)IgG、IgA、IgM的檢測(cè),相關(guān)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 在1~3天組,IgG、IgA、IgM在對(duì)照組、輕度HIE組和中重度HIE組3組間比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。在4~6天組,IgG、IgA、IgM在對(duì)照組、輕度HIE組和中重度HIE組3組間比較亦無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論 HIE患兒體液免疫功能無(wú)明顯變化。

關(guān)鍵詞 :缺氧缺血性腦病;新生兒;體液免疫

Abstract:Objiective To detect the changes of serum IgG,IgA and IgM in neonates with hypoxic ischemic encephalopa-thy(HIE).Methods Sixty-seven neonates with HIE and thirty normal full-term infants were recruited in the study.Ac-cording to the characteristics of immunological function and the degree of HIE,the neonates were pided into1-3day group(n=32)and4-6day group(n=35),and each of them was further pided into a mild group and a moderate-severe group.The immunoglobulin(Ig)in serum was examined by radial immunodiffusion assay with Behring Nephelometer100Ana-lyzer.Results In the1-3day group,the levels of IgG,IgA and IgM in HIE group were not obviously different from that in the control group(P>0.05).In the4-6day group,these levels did not differ from the control either(P>0.05).Conclu-sion The levels of IgG,IgA and IgM in serum are not obviously affected by HIE in neonates.

Key words:hypoxic ischemic encephalopathy;newborn;fluid immunity

新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic ischemic en-cephalopathy,HIE)大多由圍生期窒息引起,仍然是當(dāng)今新生兒研究領(lǐng)域的熱點(diǎn),其對(duì)全身各個(gè)系統(tǒng)的損害國(guó)內(nèi)國(guó)外都有許多報(bào)道,已為大多數(shù)人所熟知。隨著B(niǎo)esedovsky[1] 神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)學(xué)說(shuō)的提出,人們?cè)絹?lái)越關(guān)注神經(jīng)系統(tǒng)疾病對(duì)免疫功能的影響。HIE是否伴有機(jī)體免疫系統(tǒng)受損從而使免疫功能處于抑制或低下?tīng)顟B(tài),導(dǎo)致抗病能力降低,對(duì)感染易感性增加?為此,本研究檢測(cè)了67例HIE患兒血清IgG、IgA、IgM,以了解HIE患兒體液免疫功能的變化,總結(jié)報(bào)道如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象和分組 67例均系我院1999年9月―2001年4月收治的HIE患兒,診斷標(biāo)準(zhǔn)符合1996年10月杭州第4屆全國(guó)新生兒學(xué)術(shù)會(huì)議所修訂的HIE的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2] 。其中男38例,女29例,均為足月產(chǎn)兒,胎齡為37~42周,平均(38.43±2.25)周,出生體重為2500~4000g,平均(3293±386)g。根據(jù)出生后的日齡分為1~3天組(n=32),其中輕度HIE14例,中重度HIE18例;4~6天組(n=35),其中輕度HIE16例,中重度HIE19例。對(duì)照組30例新生兒為我院產(chǎn)科同期分娩的正常足月順產(chǎn)新生兒,胎齡為37~42周,出生體重為2500~4000g,平均(3395±358)g。所有檢測(cè)對(duì)象之母親均無(wú)自身免疫性疾病及其他可影響嬰兒免疫功能的疾病,患兒住院期間均未使用任何可影響其免疫功能的藥物。

1.2 方法 分別采外周血4ml,當(dāng)日測(cè)定。采用散射免疫擴(kuò)散法(radial immunodiffusion,RI)測(cè)定血清IgG、IgA、IgM??谷薎gG、IgA、IgM血清、樣本稀釋液、IgG、IgA、IgM標(biāo)準(zhǔn)血清、Behring Nepherlometer100An-alyzer均由美國(guó)DADE-BEHERING配套提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)以ˉx±s表示,采用PEMS2.00軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。所有數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后,進(jìn)行單因素方差分析,組間比較采用q檢驗(yàn)(Newman-Keuls法),P

2 結(jié)果

2.1 1~3天組IgG、IgA、IgM測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表1。IgG、IgA、IgM在對(duì)照組、輕度HIE組、中重度HIE組3組間比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

2.2 4~6天組IgG、IgA、IgM測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表2。IgG、IgA、IgM在對(duì)照組、輕度HIE組、中重度HIE組3組間比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表1 1~3天組IgG、IgA、IgM、測(cè)定結(jié)果(略)

表2 4~6天組IgG、IgA、IgM、測(cè)定結(jié)果(略)

3 討論

在體內(nèi)有2種免疫應(yīng)答類型,一種是遇病原體后,首先并迅速起防衛(wèi)作用的,稱為固有性免疫應(yīng)答,包括皮膚黏膜的物理作用、吞噬細(xì)胞、補(bǔ)體等。另一種是適應(yīng)性免疫應(yīng)答,其執(zhí)行者是B及T淋巴細(xì)胞,B及T淋巴細(xì)胞識(shí)別病原體成分后被活化,活化后并不是即刻表現(xiàn)防衛(wèi)功能,而是經(jīng)過(guò)免疫應(yīng)答過(guò)程,約4~5天后才生成效應(yīng)細(xì)胞,對(duì)已被識(shí)別的病原體施加殺傷清除作用。神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)是維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定的重要調(diào)節(jié)系統(tǒng),當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激或感染后,這兩個(gè)系統(tǒng)相互作用,免疫系統(tǒng)通過(guò)細(xì)胞因子對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮者特殊的調(diào)節(jié)作用[3] 。窒息缺氧可引起免疫功能紊亂[4] ,而免疫功 能異常又進(jìn)一步導(dǎo)致和加重新生兒缺氧缺血腦損傷[5] 。免疫球蛋白(Ig)是體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮免疫功能最重要的免疫分子,具有特異性結(jié)合抗原、活化補(bǔ)體、結(jié)合Fc受體等生物學(xué)活性。但本組資料顯示HIE患兒體液免疫無(wú)明顯改變,是否與我們?cè)缙谑褂每股胤乐胃腥荆缙谧钄嗔瞬≡w對(duì)機(jī)體的刺激,減少了B及T淋巴細(xì)胞對(duì)病原體的識(shí)別,使B及T淋巴細(xì)胞活化、效應(yīng)減少等因素有關(guān),值得進(jìn)一步研究。 轉(zhuǎn)貼于

IgG于生后3個(gè)月開(kāi)始合成,3~5歲接近成人水平,是血清中含量最高的Ig,其占血清總Ig的75%~80%,其中IgG含量最多。IgG半衰期約20~23天,為再次免疫應(yīng)答的主要抗體。新生兒的血清IgG絕大多數(shù)為通過(guò)胎盤(pán)的來(lái)自母親的IgG,自身合成的各類IgG量很少,甚至測(cè)不出。由于母體轉(zhuǎn)移到胎兒IgG的時(shí)期大多在胎齡32周以后,新生兒的IgG含量受母體的IgG水平和胎齡影響較大,新生兒本身的影響較小。本組患兒其母親均為健康人,血清IgG水平變化不大,HIE患兒IgG水平變化也不大可能與此有關(guān)。

IgM是分子量最大的Ig,占血清Ig含量的5%~10%。由于記憶B細(xì)胞并不大量分泌IgM,所以IgM的升高表示近期有抗原出現(xiàn)。IgM不僅是初次免疫應(yīng)答的重要組成部分,而且像IgA一樣,通過(guò)pIgR(多聚Ig受體)橫過(guò)上皮在黏膜表面作為重要的分泌性免疫球蛋白。由于在母乳中也存在免疫球蛋白,IgM也能保護(hù)新生兒免受腸內(nèi)病原菌感染直到嬰兒的免疫系統(tǒng)完善。IgM不能通過(guò)胎盤(pán),是初次體液免疫反應(yīng)早期階段產(chǎn)生的主要免疫球蛋白,本組所有的患兒在入院后都早期使用抗生素防治感染,減少了抗原的刺激,因此,與對(duì)照組比較差異不顯著。也可能研究對(duì)象為生后1周的初生嬰兒,因來(lái)自母體的抗體有抑制作用,抑制性T細(xì)胞(Ts即CD8)數(shù)高可抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,免疫系統(tǒng)不成熟,易產(chǎn)生免疫耐受等,使機(jī)體產(chǎn)生抗體能力較弱、較慢有關(guān)。

IgA分2型,包括分泌型和血清型IgA。分泌型IgA合成和分泌的部位在呼吸道、泌尿道、胃腸道、乳腺組織的特定部位的漿細(xì)胞。血清型IgA由骨髓、淋巴結(jié)、脾內(nèi)漿細(xì)胞合成入血。IgA是外分泌體液(如唾液、黏液、汗液、胃液、淚液)中最主要的Ig,也是初乳及乳汁中主要的Ig,它在維持嬰兒消化道對(duì)病原體免疫功能中起作用,被認(rèn)為是機(jī)體防御病原體通過(guò)黏膜層的第一道防線。IgA不引發(fā)明顯的炎癥反應(yīng),一般認(rèn)為主要通過(guò)隔離、結(jié)合以及交聯(lián)病原體從而組織病原體穿過(guò)上皮并促進(jìn)黏膜對(duì)病原體的清除,同時(shí)IgA有經(jīng)旁路途徑激活補(bǔ)體的能力,還能調(diào)整巨嗜、單核、中性粒細(xì)胞對(duì)抗原的胞吞作用。IgA分子量較大,不能通過(guò)胎盤(pán),開(kāi)始合成的時(shí)間是生后4~6個(gè)月,新生兒IgA主要是從初乳及乳汁中獲得,量很少,這也是新生兒易患呼吸道、胃腸道感染的原因之一。HIE患兒IgA水平與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異可能與新生兒期IgA基礎(chǔ)水平低下有關(guān)。本研究結(jié)果顯示新生兒缺氧缺血性腦病患兒體液免疫功能變化不顯著,與劉敬[6] 、李志奇[7] 等報(bào)道的結(jié)果不同,有待于大樣本、多中心進(jìn)一步觀察研究。

參考文獻(xiàn) :

[1] Besedovsky HO,del Rey A,Sorkin E,et al.Immunoregulation mediated by the sympatheic nervous system[J].Cell Immunol,1979,48(2):346-355.

[2] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)會(huì)新生兒學(xué)組.新生兒缺氧缺血性腦病診斷依據(jù)和臨床分度[J].中華兒科雜志,1997,35(2):99-100.

[3] 鐘 敏,招偉賢,曾因明.神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)與神經(jīng)病理性疼痛[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)?麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè),2005,26(5):275-277.

[4] Hargitai B,Szabo V,Cziniel M,et al.Human brain of preterm infants after hypoxic ischemic injuries:no evidence of a substantial role for ap-optosis by using a fine-tuned ultrasond-guided neuropathological analysis[J].Brain Dev,2004,26(1):30-36.

[5] 王 健,陸 勤.新生兒缺氧缺血性腦病外周血T細(xì)胞亞群和膜白介素-2受體表達(dá)及臨床意義[J].中國(guó)實(shí)用兒科雜志,2005,20(10):608-610.

篇5

目的: 研究?jī)?nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào)分子低分子量透明質(zhì)酸作為天然佐劑對(duì)hav抗原誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響。方法: 將icr小鼠分成9組, 分別設(shè)生理鹽水對(duì)照組、 hav抗原組、 hav抗原+鋁佐劑組、 hav抗原+低分子量透明質(zhì)酸50 μg組、 hav抗原+低分子量透明質(zhì)酸100 μg、 hav抗原+低分子量透明質(zhì)酸200 μg、 hav抗原+低分子量透明質(zhì)酸300 μg、 hav抗原+低分子量透明質(zhì)酸500 μg、 hav抗原+低分子量透明質(zhì)酸1 mg組, 皮下免疫小鼠。分別在4、 8、 12 、 16周用elisa法檢測(cè)小鼠血清抗hav igg水平。結(jié)果: (1)空白對(duì)照組在4、 8、 12 和16周未見(jiàn)抗hav ig生; 各實(shí)驗(yàn)組抗hav igg水平在8周時(shí)達(dá)到最高; 12周和16周時(shí)各免疫組的抗hav igg水平逐漸下降, 尤以鋁佐劑組下降明顯; (2)與hav抗原組相比, 低分子量透明質(zhì)酸各免疫組小鼠血清抗hav igg水平明顯升高(p<0.05); 與鋁佐劑組相比, 低分子量透明質(zhì)酸免疫組明顯增強(qiáng)特異性抗hav igg水平(p<0.05或p>0.05); (3)低分子量透明質(zhì)酸安全無(wú)毒, 無(wú)過(guò)敏反應(yīng)。結(jié)論: 低分子量透明質(zhì)酸能夠明顯增強(qiáng)滅活hav抗原的體液免疫應(yīng)答, 具有強(qiáng)的免疫佐劑作用。其免疫佐劑效應(yīng)優(yōu)于鋁佐劑。

【關(guān)鍵詞】  透明質(zhì)酸 危險(xiǎn)信號(hào) 佐劑

免疫佐劑對(duì)輔助抗原誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生持久高水平的免疫應(yīng)答十分重要[1], 透明質(zhì)酸(hyalouronan acid, ha)是從動(dòng)物組織提取的一種黏多糖, 由(1β4)d葡糖醛酸和(1 β3)n乙?;瞕氨基葡糖雙糖單位重復(fù)連接組成。透明質(zhì)酸是細(xì)胞外基質(zhì)的重要成分而廣泛分布于細(xì)胞外基質(zhì), 它是構(gòu)成皮膚、 玻璃體、 關(guān)節(jié)滑液和軟骨組織的重要成分, 具有獨(dú)特的理化性質(zhì)和生物學(xué)功能。近年研究表明, 低分子量透明質(zhì)酸是免疫系統(tǒng)的一種重要內(nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào), 與tlr2作用后, 以依賴于myd88、 il1r相關(guān)激酶、 tnfr相關(guān)因子6、 蛋白激酶cζ、 nfκb的方式進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo), 激活機(jī)體的天然免疫應(yīng)答[2]。因此我們推測(cè)低分子量透明質(zhì)酸可能具有免疫佐劑的特性。本研究中以低分子量透明質(zhì)酸作為疫苗佐劑, 與hav抗原混合后皮下免疫接種小鼠, 觀察內(nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào)分子低分子量透明質(zhì)酸對(duì)hav抗原誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響, 以探討低分子量透明質(zhì)酸作為疫苗佐劑的可行性。

1  材料和方法

1.1  材料  icr健康小鼠(spf級(jí), 雌性, 6~8周齡, 質(zhì)量18~20 g), 由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所靈長(zhǎng)類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供, 并按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心的方法飼養(yǎng)。酶標(biāo)儀(biorad microplate reader model 550)購(gòu)自美國(guó)biorad公司。抗hav igg elisa檢測(cè)試劑盒購(gòu)自kpl公司, 酶標(biāo)板購(gòu)自美國(guó)ebioscienc公司。滅活hav抗原和al(oh)3佐劑均由本室保存。低分子量透明質(zhì)酸(相對(duì)分子量(mr)為10000以下)購(gòu)自江蘇鎮(zhèn)江東元生物科技有限公司。

1.2  方法

1.2.1  低分子量透明質(zhì)酸的制備  用電子天平稱取適量低分子量透明質(zhì)酸, 用蒸餾水溶解配制成濃度為5 μg/l。

1.2.2  免疫動(dòng)物  將icr雌性小鼠隨機(jī)分成9組, 分別設(shè)生理鹽水空白對(duì)照組、 hav抗原200 μg免疫組(hav)、 hav抗原200 μg+300 μg鋁佐劑免疫組(haval)、 hav抗原200 μg+50 μg透明質(zhì)酸免疫組(havha1)、 hav抗原200 μg +100 μg透明質(zhì)酸免疫組(havha2)、 hav抗原200 μg +200μg透明質(zhì)酸免疫組(havha3)、 hav抗原200μg +300μg透明質(zhì)酸免疫組(havha4)、 hav抗原200 μg +500 μg透明質(zhì)酸免疫組(havha5)和hav抗原200 μg +1 mg透明質(zhì)酸免疫組(havha6), 每組6只。免疫途徑為皮下免疫, 共免疫1次。

1.2.3  血清抗hav igg水平檢測(cè)  分別于免疫后4、 8、 12和16周對(duì)小鼠尾靜脈采血, 血樣37℃放置1 h后, 4℃過(guò)夜, 分離血清, 用elisa試劑盒檢測(cè)抗hav的特異性igg水平, 具體操作方法按照試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.2.4  低分子量透明質(zhì)酸安全性檢測(cè)  (1)低分子量透明質(zhì)酸的異常毒性試驗(yàn): 實(shí)驗(yàn)組選用icr小鼠10只, 雌雄各1半, 每只小鼠皮下注射5 mg低分子量透明質(zhì)酸, 同時(shí)設(shè)立生理鹽水對(duì)照組, 連續(xù)觀察7 d。(2)低分子量透明質(zhì)酸的刺激性試驗(yàn): 取icr小鼠2只,   分別在一側(cè)后肢股四頭肌注射低分子量透明質(zhì)酸(5 μg/l) 1 ml, 另一側(cè)注射等量生理鹽水。另取icr小鼠2只, 分別在一側(cè)后肢腳掌注射低分子量透明質(zhì)酸(5 μg/l) 1 ml, 另一只注射等量生理鹽水。48 h后處死, 解剖觀察局部組織變化。(3)低分子量透明質(zhì)酸的過(guò)敏試驗(yàn):  取icr小鼠10只, 雌雄各1半, 皮下注射50 μg低分子量透明質(zhì)酸, 2周后再尾靜脈注射50 μg低分子量透明質(zhì)酸, 立即觀察有無(wú)過(guò)敏反應(yīng)。

1.2.5  統(tǒng)計(jì)學(xué)分析  采用spss11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析, 并進(jìn)行l(wèi)evene方差齊性檢驗(yàn), 如方差齊, 則進(jìn)行單因素方差分析; 而方差不齊則采用kruskalwallis h test, p<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2  結(jié)果

2.1  低分子量透明質(zhì)酸安全性  (1)低分子量透明質(zhì)酸的異常毒性試驗(yàn): 試驗(yàn)期內(nèi)所有動(dòng)物均未出現(xiàn)松毛、 縮團(tuán)、 發(fā)抖等異常反應(yīng); 進(jìn)食、 飲水、 糞便和精神等均正常。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后所有動(dòng)物均健在且質(zhì)量增加, 說(shuō)明低分子量透明質(zhì)酸安全無(wú)毒。(2)低分子量透明質(zhì)酸的刺激性試驗(yàn): 在小鼠股四頭肌注射低分子量透明質(zhì)酸48 h后解剖觀察局部組織無(wú)充血、 水腫及硬結(jié)等異常變化; 小鼠后掌注射48 h后解剖觀察局部也無(wú)異常變化。表明低分子量透明質(zhì)酸劑量為5 mg時(shí)安全無(wú)毒性。(3)低分子量透明質(zhì)酸的過(guò)敏反應(yīng): 小鼠在過(guò)敏試驗(yàn)中未出現(xiàn)蜷縮、 豎毛、 流淚、 噴嚏、 搔鼻、 抽搐、 痙攣、 呼吸困難、 水腫及休克等過(guò)敏反應(yīng)。

2.2  不同劑量低分子量透明質(zhì)酸免疫增強(qiáng)效應(yīng)  初免后4、 8、 12、 16周檢測(cè)抗hav igg水平, 結(jié)果顯示生理鹽水空白對(duì)照組檢測(cè)不到抗hav igg, 各實(shí)驗(yàn)組小鼠在4周內(nèi)均產(chǎn)生抗hav igg; 隨著時(shí)間推移呈上升趨勢(shì), 到第8周達(dá)到抗體滴度的峰值, 此后逐漸下降; 但是不同劑量透明質(zhì)酸免疫組的抗體水平仍然明顯高于hav單獨(dú)抗原免疫組以及鋁佐劑組。不同劑量低分子量透明質(zhì)酸免疫組在同一時(shí)間的抗體水平不同, havha4、 havha5和havha6組在8周時(shí)產(chǎn)生的抗hav igg的水平較高, 分別為1∶(359.19±2.25)、 1∶(320±3.46)、 和1∶(285.09±3.10); 且havha5和havha6組的抗體水平能夠長(zhǎng)時(shí)間維持在較高水平, 至16周時(shí)兩組的抗hav igg水平分別為1∶(160±1.55)和1∶(113.13±2.25), 而其他實(shí)驗(yàn)組抗hav igg水平均已明顯下降。提示低分子量透明質(zhì)酸的免疫增強(qiáng)效應(yīng)在一定范圍內(nèi)可能與免疫劑量成量效依賴性。

   

各低分子量透明質(zhì)酸免疫組的免疫效應(yīng)與hav抗原單獨(dú)免疫組的免疫效應(yīng)相比較, 結(jié)果顯示, 4周、 8周、 12周和16周時(shí)結(jié)果顯示不同劑量低分子量透明質(zhì)酸免疫組的抗hav igg水平均明顯高于hav抗原單獨(dú)免疫組, 在4周時(shí)havh6免疫組的抗hav igg水平最高, 為1∶(201.59±3.10), 約為hav抗原單獨(dú)免疫組的7倍, 二者相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。8周時(shí)havha1組、 havha4組、 havha5組、 havha6組與hav抗原單獨(dú)免疫組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05, 圖1)。至12周和16周時(shí), 所有劑量的低分子量透明質(zhì)酸免疫組的抗hav igg水平與hav抗原單獨(dú)免疫組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05, 圖1)。這些結(jié)果表明, 低分子量透明質(zhì)酸能夠增強(qiáng)hav抗原的特異性體液免疫應(yīng)答, 具有免疫佐劑效應(yīng)。

   

各低分子量透明質(zhì)酸免疫組的免疫效應(yīng)與鋁佐劑組的免疫效應(yīng)相比較, 結(jié)果顯示, 除havh3免疫組的抗hav igg水平在4周時(shí)低于鋁佐劑免疫組以外, 其他各低分子量透明質(zhì)酸免疫組的抗hav igg水平在4、 8、 12和16周時(shí)均要明顯高于鋁佐劑組。雖然在4周和8周時(shí)各低分子量透明質(zhì)酸免疫組的抗體水平明顯高于鋁佐劑免疫組, 但是無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在12周時(shí)結(jié)果顯示, havha1組、 havha4組、 havha5組和havha6組與鋁佐劑組的抗hav igg水平相比, 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05, 圖1); 而havha2免疫組、 havha3免疫組的抗hav igg水平與鋁佐劑組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。至16周時(shí), havha2組、 havha3組和havha5組與鋁佐劑組的抗hav igg水平相比, 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05); 而其余低分子量透明質(zhì)酸免疫組的抗hav igg水平與鋁佐劑組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這表明低分子量透明質(zhì)酸不僅具有免疫佐劑作用, 增強(qiáng)特異性的抗hav igg水平, 而且其佐劑效應(yīng)在一定劑量范圍內(nèi)和一定時(shí)間內(nèi)優(yōu)于鋁佐劑。

圖1  不同時(shí)間小鼠血清抗hav igg水平(略)

ap<0.05與hav組; cp<0.05與haval組.

3  討論

   

目前鋁佐劑是惟一批準(zhǔn)應(yīng)用于人的疫苗佐劑, 但是鋁佐劑存在誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答, 而細(xì)胞免疫很弱, 與ige型過(guò)敏性疾病有關(guān)等弊端等[3]。理想疫苗佐劑應(yīng)該是既能增強(qiáng)體液免疫應(yīng)答, 又能誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答, 且無(wú)毒副作用[1]。因此, 研究開(kāi)發(fā)新型疫苗佐劑, 以替代鋁佐劑成為疫苗佐劑的研究熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn), 細(xì)胞損傷釋放的內(nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào)分子具有刺激樹(shù)突狀細(xì)胞成熟, 增加共刺激分子如cd86和cd83等的表達(dá), 促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌; 介導(dǎo)t細(xì)胞免疫應(yīng)答的作用[4, 5]。提示內(nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào)分子可能作為有效的內(nèi)源性免疫佐劑, 增強(qiáng)t淋巴細(xì)胞對(duì)外來(lái)抗原的免疫應(yīng)答。

   

為了探討內(nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào)分子低分子量透明質(zhì)酸作為疫苗佐劑的可行性, 本研究中采用滅活hav抗原和低分子量透明質(zhì)酸進(jìn)行不同劑量配比, 通過(guò)免疫小鼠觀察了抗hav igg水平的變化, 并對(duì)低分子量透明質(zhì)酸作為佐劑與鋁佐劑的效應(yīng)比較進(jìn)行了初步探討。研究證實(shí), 低分子量透明質(zhì)酸聯(lián)合滅活hav抗原進(jìn)行免疫, 有效地誘導(dǎo)了抗hav igg的產(chǎn)生。與單獨(dú)滅活hav抗原組相比, 不同劑量低分子量透明質(zhì)酸免疫組其產(chǎn)生的特異性抗體水平均明顯高于hav抗原單獨(dú)免疫組, 其差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05), 提示低分子量透明質(zhì)酸具有免疫佐劑效應(yīng); 與鋁佐劑組相比, 不同劑量的低分子量透明質(zhì)酸免疫組其誘導(dǎo)產(chǎn)生的免疫增強(qiáng)效應(yīng)在不同時(shí)期顯示優(yōu)于鋁佐劑或與鋁佐劑相當(dāng); 且本研究結(jié)果還提示在一定范圍內(nèi)隨著低分子量透明質(zhì)酸的劑量的增加, 抗hav igg的水平逐漸增高, 即其抗hav igg水平與低分子量透明質(zhì)酸在一定范圍內(nèi)可能呈量效依賴性。低分子量透明質(zhì)酸是細(xì)胞外基質(zhì)成分, 屬于內(nèi)源性危險(xiǎn)信號(hào)分子, 具有無(wú)毒安全性高、 結(jié)構(gòu)明確、 易于生產(chǎn)和價(jià)格便宜等特點(diǎn), 符合理想疫苗佐劑的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證實(shí)了低分子量透明質(zhì)酸安全無(wú)毒。

   

綜上所述, 本實(shí)驗(yàn)以低分子量透明質(zhì)酸作為新型疫苗佐劑,能夠有效地增強(qiáng)滅活hav抗原的體液免疫應(yīng)答, 而且不同劑量低分子量透明質(zhì)酸免疫增強(qiáng)效應(yīng)顯示相當(dāng)于或優(yōu)于鋁佐劑, 且低分子量透明質(zhì)酸的免疫增強(qiáng)作用持續(xù)時(shí)間要長(zhǎng)于鋁佐劑。因此, 通過(guò)本研究提示, 低分子量透明質(zhì)酸可以作為一種潛在的新型人用疫苗佐劑。同時(shí), 隨著許多重大疾病如hbv、 hiv、 腫瘤等嚴(yán)重危害著人類的健康, 開(kāi)發(fā)新型治療性疫苗迫在眉睫, 而尋找一種佐劑能夠協(xié)同疫苗抗原誘導(dǎo)產(chǎn)生ctl免疫效應(yīng), 達(dá)到治療疾病的作用是一種非常有潛力的策略。因此, 我們下一步的工作將進(jìn)一步研究低分子量透明質(zhì)酸是否能夠誘導(dǎo)強(qiáng)的ctl免疫反應(yīng)。

【參考文獻(xiàn)】

 

[1] 周 伊, 齊 旭, 肖菊香, 等. 新型佐劑swzy對(duì)弱免疫原性小鼠黑色素瘤瘤苗的免疫增強(qiáng)作用[j]. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志, 2006, 22(4): 526-529.

[2] scheibner ka, lutz ma, boodoo s, et al. hyaluronan fragments act as an endogenous danger signal by engaging tlr2[j]. j immunol, 2006, 177(2): 1272-1281.

[3] 王 健, 冷 靜, 王啟輝. lps輔佐hbsag誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體的機(jī)制[j]. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志, 2007, 23(6): 559-561.

[4] shi y, evans je, rock kl. molecular identification of a danger signal that alerts the immune system to dying cell[j]. nature, 2003, 425(6957): 516-521.

篇6

關(guān)鍵詞: 免疫力; 竹蓀; 砷中毒; 體重; 補(bǔ)體溶血活性測(cè)定; 淋巴細(xì)胞; 巨噬細(xì)胞; 吞噬作用

    地方性砷中毒是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病,可以引起神經(jīng)、泌尿、消化、心血管、免疫、內(nèi)分泌等多系統(tǒng)、多器官的損傷,甚至可以引起腫瘤的發(fā)生[1,2]。竹蓀是一種食、藥兩用真菌,有學(xué)者觀察到竹蓀托蓋液對(duì)輻射損傷大鼠免疫系統(tǒng)有一定的修復(fù)作用[3],但對(duì)砷引起的免疫損傷是否具有保護(hù)作用卻未見(jiàn)報(bào)道。在既往竹蓀提取液抗突變和抗氧化損傷研究的基礎(chǔ)上[4,5],本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究竹蓀提取液對(duì)急性砷中毒小鼠免疫系統(tǒng)的損傷是否具有保護(hù)作用,為地方性砷中毒的防治提供依據(jù)。

1  材料與方法

1.1  主要儀器

酶標(biāo)儀MQX200(美國(guó)BiO-TEK公司)、CO2培養(yǎng)箱(日本三洋公司)、TGLL-18臺(tái)式高速離心機(jī)(北京長(zhǎng)源實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠)、HH-8恒溫水浴箱(上海申化儀表自控公司)。

1.2  主要試劑

As2O3(AR)由公共衛(wèi)生學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室提供,溶血素由浙江省玉環(huán)縣南方試劑廠生產(chǎn),小牛血清由杭州四季青有限公司生產(chǎn),細(xì)胞培養(yǎng)液RPMI1640由Hyclome公司生產(chǎn)。

1.3  竹蓀提取液竹蓀干品由貴州省野生資源開(kāi)發(fā)保護(hù)研究中心生產(chǎn)。準(zhǔn)確稱取竹蓀干品50 g加500 ml雙蒸水浸泡3 h,制成勻漿,煮沸30 min后用200目濾篩過(guò)濾,將濾液濃縮至200 ml,所得竹蓀提取液濃度為0.25 g/ml,4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4  動(dòng)物及分組健康昆明種小鼠180只,雌雄各半,體重28~32 g,由貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。平均分為3批,每批60只,每批隨機(jī)分為6組,每組10只;每批分組及劑量均相同。正常對(duì)照組,竹蓀高劑量、低劑量組(10 g/kg、5 g/kg),砷中毒模型組(As2O3 5 mg/kg),竹蓀治療高劑量和低劑量組(竹蓀10 g/kg、5 g/kg)。砷中毒模型組和竹蓀治療組用As2O3按5 mg/kg標(biāo)準(zhǔn)造模,1次/d,連續(xù)7 d;竹蓀治療組在造模的每天下午給竹蓀治療,灌胃量0.02 ml/g。

1.5  實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑的配制

1.5.1  綿羊紅細(xì)胞懸液(SRBC)

 

健康成年綿羊頸靜脈處局部消毒采血,加入等體積阿氏細(xì)胞保存液(Alsever's),4 ℃保存。臨用前用巴比妥緩沖液洗滌3次,2 000 r/min離心5 min,棄上清液。

1.5.2  巴比妥緩沖液(BBS)

準(zhǔn)確稱取NaCl 85 g、巴比妥 5.75 g、巴比妥鈉 3.75 g、MgCl21.017 g、無(wú)水CaCl2  20.066 g,將巴比妥鈉溶于雙蒸餾水中,依次溶解上述試劑,雙蒸餾水定容至1 000 ml,高壓蒸氣滅菌20 min,4 ℃冰箱中保存。

1.5.3  營(yíng)養(yǎng)肉湯及6%淀粉肉湯配制

牛肉浸膏0.3 g、蛋白胨1.0 g、NaCl 0.5 g,加入100 ml雙蒸餾水中,微火加熱溶解,高壓蒸汽滅菌20 min,4℃冰箱中保存。在營(yíng)養(yǎng)肉湯中加入可溶性淀粉6 g。

1.6  觀察指標(biāo) 

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)準(zhǔn)確稱量實(shí)驗(yàn)小鼠體重,頸椎脫臼法處死小鼠,取肝臟、腎臟、脾臟并稱重,計(jì)算臟器指數(shù)。用分光光度比色法檢測(cè)CH50活性,四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞的增殖功能,顯微計(jì)數(shù)法檢測(cè)并計(jì)算巨噬細(xì)胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)。

1.7  統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果用(x±s)表示,采用方差分析及t檢驗(yàn)。

2  結(jié)果

2.1  小鼠體重和臟器指數(shù)各組小鼠的體重、肝臟、脾臟和腎臟指數(shù)均無(wú)顯著性差異。見(jiàn)表1。表1  各組上鼠小鼠體重及臟器指數(shù)比較(略)注:臟器指數(shù)=[臟器重量(g)/小鼠體重(g)]×100%。

2.2  CH50淋巴細(xì)胞增殖、吞噬率及吞噬指數(shù)

由表2可見(jiàn),與正常對(duì)照組相比,砷中毒組CH50顯著降低,差異具有顯著性(t =3.345,P=0.032<0.05);竹蓀5 g、10 g組CH50與正常組比較差異無(wú)顯著性。與砷中毒組相比,竹蓀治療5 g組CH50有升高趨勢(shì),但無(wú)顯著性差異;竹蓀治療10 g組CH50顯著升高,差異具有顯著性(F=4.923,P<0.01)。與正常對(duì)照組相比,砷中毒組淋巴細(xì)胞增殖功能顯著降低,差異有顯著性(t=2.150,P<0.05);竹蓀5 g、10 g組淋巴細(xì)胞增殖功能與正常對(duì)照組比較差異無(wú)顯著性。竹蓀治療5 g組淋巴細(xì)胞增殖功能與砷中毒組相比,差異無(wú)顯著性;竹蓀治療10 g組淋巴細(xì)胞增殖功能與砷中毒組比較明顯升高,差異具有顯著性(F=2.703,P<0.05)。與正常對(duì)照組相比,砷中毒組吞噬率顯著降低,差異有顯著性(t =3.170,P≦0.05);吞噬指數(shù)顯著降低,差異有顯著性(t =4.009,P=0.01)。竹蓀5 g、10 g組吞噬率和吞噬指數(shù)與正常對(duì)照組比較差異無(wú)顯著性。與砷中毒組相比,竹蓀治療5 g組和竹蓀治療10 g組吞噬率明顯升高,差異有顯著性(F=23.005,P<0.01,P≤0.01);吞噬指數(shù)明顯升高,差異有顯著性(F=27.175, P<0.01)。表2  各組小鼠CH50、淋巴細(xì)胞增殖功能、巨噬細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)比較(略)注:A,吸光度值的差值,反映淋巴細(xì)胞增殖功能;與正常對(duì)照組比較(1)P<0.05,  (2)P<0.01;與砷中毒組比較(3)P<0.05,(4)P<0.01。

篇7

關(guān)鍵詞:林企;水電移民;應(yīng)對(duì);補(bǔ)償

中圖分類號(hào):D632.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):16749944(2013)08013702

1基本現(xiàn)狀

四川省雅礱江木材水運(yùn)局隸屬四川省林業(yè)廳,是四川省國(guó)有大型林業(yè)企業(yè)之一,在1998年以前是以木材水運(yùn)收貯及銷售為主業(yè)的林業(yè)企業(yè),有在崗職工6000余人、離退休職工4000余人,其流送江段自四川省甘孜州境內(nèi)新龍縣的沙堆和爐霍縣的泥巴溝口大橋,途經(jīng)鮮水河、扎楚河、雅礱江、金沙江、長(zhǎng)江,地跨川、滇、渝、鄂4省市,全長(zhǎng)3075km,沿江修建了收漂工程34處,驛道297.8km,公路149.24km,建有職工生產(chǎn)生活房屋33.78萬(wàn)m2,在攀枝花市、宜賓市形成了木材收貯、轉(zhuǎn)運(yùn)和銷售基地。

1998年7月二灘水電站蓄水發(fā)電,木材水運(yùn)過(guò)壩成了問(wèn)題,加之國(guó)家林業(yè)政策的長(zhǎng)期調(diào)整,木材水運(yùn)企業(yè)借助國(guó)家政策開(kāi)始產(chǎn)業(yè)調(diào)整,整體轉(zhuǎn)制,就地就近實(shí)施國(guó)家“天然林保護(hù)工程”,但隨著雅礱江、金沙江水電基地的梯級(jí)開(kāi)發(fā),錦屏電站、官地電站、桐梓林電站、溪洛渡電站及向家壩電站的相繼開(kāi)工建設(shè),還有即將上馬的白鶴灘和烏東德水電站,給林企帶來(lái)了大量的移民搬遷以及林業(yè)產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移問(wèn)題,涉及移民搬遷職工和家屬累計(jì)達(dá)3000余人,受影響的沿江職工生產(chǎn)生活房屋達(dá)6.5萬(wàn)m2、土地230畝,造成大量的水運(yùn)工程設(shè)施設(shè)備閑置被淹。

2問(wèn)題分析

2.1人員搬遷、生產(chǎn)生活安置問(wèn)題

企事業(yè)單位的職工、家屬生產(chǎn)生活移民安置目前均交由本單位自行安置,以支持國(guó)家大中型工程項(xiàng)目建設(shè),但人員搬遷、生產(chǎn)生活安置費(fèi)用過(guò)低,本是政府應(yīng)做的事都交由企業(yè)自身解決,由于企業(yè)跨區(qū)域較廣,自身存在的實(shí)際困難也較多,不可能將職工統(tǒng)一安置在條件較好的地方,地域差造成了安置條件較大差異。如:溪洛渡水電站建設(shè)移民林企職工和家屬分散安置在四川省涼山彝族自治州的雷波縣和金陽(yáng)縣境內(nèi),安置環(huán)境較差;桐梓林水電站建設(shè)移民林企職工和家屬集中安置在攀枝花市米易縣城內(nèi),安置環(huán)境較好。同樣都是一個(gè)林企的職工,但安置后的生產(chǎn)生活條件差異卻很大,由此產(chǎn)生的企業(yè)內(nèi)部矛盾是職工隊(duì)伍不穩(wěn)定的因素之一。

2.2水電移民補(bǔ)償方式不盡合理

2.2.1土地產(chǎn)權(quán)制度存在缺陷

林業(yè)企業(yè)用地絕大多數(shù)是國(guó)有劃撥土地,沒(méi)有所有權(quán),只有使用權(quán),在面臨水電站建設(shè)征地時(shí),無(wú)法獲得被征土地足額的補(bǔ)償,若需異地遷建,落實(shí)土地就是一個(gè)難題,各地政府劃撥用地首先考慮是國(guó)家重點(diǎn)企業(yè)和當(dāng)?shù)仄笫聵I(yè)單位,通常不會(huì)考慮異地的林業(yè)企業(yè),要想取得條件較好的地塊必須有足夠的購(gòu)置土地費(fèi)用,然而過(guò)去的國(guó)有劃撥用地?zé)o法獲得相應(yīng)補(bǔ)償,因此異地遷建土地的落實(shí)就成了頭等大事。

2.2.2補(bǔ)償方式局限林企發(fā)展

目前水電站建設(shè)征地針對(duì)林企補(bǔ)償方式主要采取現(xiàn)金補(bǔ)償和隨集鎮(zhèn)后靠遷建,獨(dú)立選址遷建因土地落實(shí)困難大多沒(méi)有選擇。由于過(guò)去水運(yùn)企業(yè)的房屋資產(chǎn)大多數(shù)都處在較偏遠(yuǎn)的江邊,后靠安置的地方當(dāng)然也就較為偏遠(yuǎn),并不利于林企現(xiàn)從事的工作和今后的生存發(fā)展,后靠安置后企業(yè)資產(chǎn)就會(huì)面臨閑置,因此很多時(shí)候迫使企業(yè)不得不選擇貨幣補(bǔ)償方式,由企業(yè)自行安置。如溪洛渡水電站建設(shè)涉及林企的雷波和金陽(yáng)兩個(gè)林場(chǎng),后靠安置地均處在較為偏遠(yuǎn)的鄉(xiāng)鎮(zhèn),并不利于林企的生存和發(fā)展,因此被迫選擇貨幣補(bǔ)償方式,自行安置。

2.2.3水電建設(shè)征地移民貨幣補(bǔ)償費(fèi)用偏低

首先現(xiàn)行的補(bǔ)償標(biāo)準(zhǔn)低,以溪洛渡水電站補(bǔ)償企業(yè)實(shí)物資產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)為例,房屋磚混結(jié)構(gòu)為813元/ m2、磚木結(jié)構(gòu)為567元/ m2,土木結(jié)構(gòu)442元/ m2 ,基礎(chǔ)設(shè)施費(fèi)按房屋總造價(jià)的40%~60%進(jìn)行補(bǔ)償,企業(yè)選擇貨幣補(bǔ)償自行遷建的話,按目前國(guó)家現(xiàn)行的抗震建設(shè)要求,不可能再重建土木結(jié)構(gòu)和磚木結(jié)構(gòu)房屋,因此無(wú)法按原規(guī)模實(shí)施重建。

2.3實(shí)物指標(biāo)登記權(quán)屬爭(zhēng)議問(wèn)題

2.3.1房屋、土地及附屬設(shè)施權(quán)屬爭(zhēng)議

木材水運(yùn)企業(yè)在1998年底整體轉(zhuǎn)制后,主要從事“天然林保護(hù)”工程,原有的沿江生產(chǎn)生活點(diǎn)房很多已不能有效利用,有的留守職工看守,有的租賃給當(dāng)?shù)卣蛘?qǐng)人看守,由于長(zhǎng)時(shí)間企業(yè)沒(méi)有收回利用,當(dāng)?shù)卣跊](méi)有征得企業(yè)同意的情況下,將原企業(yè)用地重新劃撥給當(dāng)?shù)仄笫聵I(yè)單位,致使在水電站建設(shè)征地時(shí)對(duì)實(shí)物指標(biāo)調(diào)查登記過(guò)程中,將權(quán)屬登記到目前使用人的頭上,造成了權(quán)屬爭(zhēng)議。如2011年白鶴灘水電站建設(shè)征地實(shí)物指標(biāo)調(diào)查登記時(shí),將原雅水局位于云南省的東川漂木管理站所有實(shí)物指標(biāo)登記到了東川區(qū)海事處的名下,造成的權(quán)屬爭(zhēng)議至今未能徹底解決。

2.3.2造林地權(quán)屬問(wèn)題

木材水運(yùn)企業(yè)轉(zhuǎn)制實(shí)施“天?!惫こ毯?,按照國(guó)家下達(dá)的生產(chǎn)任務(wù),沿雅礱江、金沙江河谷實(shí)施了30余萬(wàn)畝的人工造林,大多數(shù)是生態(tài)公益林,也有部分是與地方合作造林的經(jīng)濟(jì)林,企業(yè)都沒(méi)能擁有林權(quán),水電站建設(shè)征地影響的林地調(diào)查登記又以林權(quán)為準(zhǔn),無(wú)法登記到林企名下,今后的林地征用補(bǔ)償也歸林權(quán)所有人,林業(yè)企業(yè)卻無(wú)法獲得相應(yīng)補(bǔ)償,林企的產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移和產(chǎn)業(yè)升級(jí)將無(wú)法獲得相應(yīng)資金支持。如烏東德水電站建設(shè)征地所涉及林企與地方合作造林地4590畝,2011年實(shí)物指標(biāo)調(diào)查時(shí)都登記在當(dāng)?shù)亓謾?quán)人頭上,林企與地方面臨造林地今后的補(bǔ)償爭(zhēng)議。

3應(yīng)對(duì)策略3.1集中統(tǒng)一安置搬遷職工及家屬

由于水運(yùn)企業(yè)沿江分布點(diǎn)多面廣,大多地處偏遠(yuǎn)村、社,交通極不方便,職工生產(chǎn)、生活條件差,在移民補(bǔ)償方式上應(yīng)多考慮集中遷建,與當(dāng)?shù)卣退婇_(kāi)發(fā)業(yè)主多溝通協(xié)商,將企業(yè)發(fā)展和職工利益有機(jī)結(jié)合,選擇最適當(dāng)?shù)倪w建地點(diǎn),最好是在縣城或是縣城周邊,將所涉及移民搬遷各場(chǎng)、段集中遷建一處,交由當(dāng)?shù)卣烷_(kāi)發(fā)業(yè)主統(tǒng)一規(guī)劃、統(tǒng)一建設(shè),這樣不僅能充分改善職工的生產(chǎn)、生活條件,同時(shí)也能保證林企有一個(gè)較好的生存發(fā)展環(huán)境,可以有效避免林企職工因自行安置差異引起的內(nèi)部矛盾,有效解決因異地遷建土地劃撥困難的問(wèn)題。

3.2有效解決實(shí)物指標(biāo)權(quán)屬爭(zhēng)議

(1)水運(yùn)企業(yè)由于受國(guó)家產(chǎn)業(yè)政策調(diào)整及沿江水電站的相繼開(kāi)發(fā)建設(shè)影響,沿江水運(yùn)資產(chǎn)閑置較多,管理困難,租賃或請(qǐng)人看守時(shí)間過(guò)長(zhǎng),很多房屋資產(chǎn)年久失修,對(duì)方在使用過(guò)程中,在沒(méi)有通知權(quán)屬人的情況下對(duì)其進(jìn)行了改擴(kuò)建或維修,發(fā)生權(quán)屬爭(zhēng)議,在爭(zhēng)議過(guò)程中企業(yè)往往處于下風(fēng)。鑒于此類問(wèn)題,要有不放棄、不拋棄的精神,認(rèn)真查找相關(guān)原始資料,據(jù)理力爭(zhēng),依據(jù)《中華人民共和國(guó)企業(yè)國(guó)有資產(chǎn)法》、《中華人民共和國(guó)物權(quán)法》等相關(guān)法律法規(guī),通過(guò)與當(dāng)?shù)卣嚓P(guān)部門(mén)友好協(xié)商,本著尊重歷史,面對(duì)現(xiàn)實(shí)的原則,努力達(dá)成共識(shí),必要時(shí)通過(guò)法律手段解決爭(zhēng)議,確保國(guó)有資產(chǎn)不流失。

(2)對(duì)于林企產(chǎn)業(yè)調(diào)整后與地方村組的合作造林地,在林改時(shí)雖然當(dāng)?shù)卮褰M辦理了林權(quán),但根據(jù)《中華人民共和國(guó)森林法》以及《中華人民共和國(guó)物權(quán)法》等相關(guān)法律規(guī)定,按照合作造林雙方簽署的合同約定,如果合作造林地因水電站建設(shè)征地影響,林企作為入股投資方有權(quán)獲得相應(yīng)股份比例的補(bǔ)償。因此,林企應(yīng)積極與當(dāng)?shù)亓謽I(yè)、移民等相關(guān)部門(mén)聯(lián)系,提供合作造林合同等相關(guān)資料,爭(zhēng)取林業(yè)主管部門(mén)支持,避免因林地權(quán)屬問(wèn)題引發(fā)的補(bǔ)償爭(zhēng)議,按照合作造林合同約定的利益分配比例獲得相應(yīng)的補(bǔ)償,減少林企在產(chǎn)業(yè)建設(shè)過(guò)程中因水電建設(shè)征地造成的損失。

3.3爭(zhēng)取搬遷補(bǔ)償標(biāo)準(zhǔn)合理調(diào)整

水電站建設(shè)征地移民搬遷補(bǔ)償標(biāo)準(zhǔn)特別是對(duì)林企能否成功實(shí)施異地遷建至關(guān)重要,各項(xiàng)補(bǔ)償單價(jià)應(yīng)能夠按國(guó)家建設(shè)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)要求建成房屋及配套相應(yīng)附屬設(shè)施設(shè)備后,并略有盈余,才能達(dá)到搬得出、穩(wěn)得住、能發(fā)展的目標(biāo)。在水電移民補(bǔ)償標(biāo)準(zhǔn)偏低的情況下,林企應(yīng)積極向國(guó)家、省相關(guān)主管部門(mén)專題報(bào)告林企在水電移民搬遷過(guò)程中遇到的各種問(wèn)題,爭(zhēng)取到林企在水電移民搬遷的一些特殊補(bǔ)助政策,彌補(bǔ)因現(xiàn)行水電站建設(shè)征地移民搬遷補(bǔ)償標(biāo)準(zhǔn)偏低帶來(lái)的一系列問(wèn)題,以便林企在移民搬遷過(guò)程中獲得發(fā)展空間。

3.4合理安排使用搬遷補(bǔ)償資金

原木材水運(yùn)企業(yè)沿江水運(yùn)工程和生產(chǎn)生活房屋等水運(yùn)資產(chǎn)在獲取因水電站建設(shè)補(bǔ)償資金后,應(yīng)首先確保林企職工和家屬的順利安置,使其在搬遷后的生產(chǎn)生活環(huán)境大為改善,同時(shí)也要保證企業(yè)的正常運(yùn)轉(zhuǎn)和今后一個(gè)時(shí)期的發(fā)展,抓住水電站建設(shè)征地補(bǔ)償這一契機(jī),使原有的林企水運(yùn)資產(chǎn)獲得足額補(bǔ)償,以便成功實(shí)施林企的產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移和升級(jí),打造好林企發(fā)展平臺(tái),改變林企職工收入偏低的現(xiàn)狀,為國(guó)家生態(tài)文明建設(shè)做出更大貢獻(xiàn)。參考文獻(xiàn):

篇8

1、面粉發(fā)酵一般在四個(gè)小時(shí)以內(nèi),不宜放置一晚長(zhǎng)時(shí)間發(fā)酵。

2、若面團(tuán)的發(fā)酵程度不夠,蒸出的饅頭就會(huì)變成開(kāi)花饅頭,蒸出的包子也會(huì)顯得又小又死;而如果面團(tuán)發(fā)酵過(guò)度,則成品表面又會(huì)起層或出現(xiàn)皺皮。鑒別面團(tuán)是否發(fā)酵好用手指輕輕插入面團(tuán)頂部,將手指抽出后,四周不向凹處塌陷且凹處也沒(méi)有快速恢復(fù)原狀,這就表明面團(tuán)發(fā)好了。

(來(lái)源:文章屋網(wǎng) )

篇9

關(guān)鍵詞:物業(yè)公司;管理;目標(biāo);措施

Abstract: Entering a period of rapid growth in the property management; same time, the constant improvement of the relevant state laws and regulations, the market competition is becoming increasingly fierce, property management companies bring opportunities and challenges, and how to regulate the internal management, the establishment owners to serve rationalize the internal and external working relationship-oriented operation mechanism, expand service model, enhance core competitiveness, all property management companies are facing a major issue. This article made ​​some useful discussions on the current property management companies how to improve their management capabilities, the establishment of modern enterprise management mechanisms for market-oriented public welfare and enterprise customers.Key words: Property Company; management; objectives; measures

中圖分類號(hào): F570.6 文章標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):

一、制定發(fā)展戰(zhàn)略目標(biāo)

清晰而切實(shí)可行的戰(zhàn)略規(guī)劃,是建立在對(duì)宏觀環(huán)境、行業(yè)特征、競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手和自身實(shí)力的充分理解基礎(chǔ)上的。通過(guò)明確企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略,可以使物業(yè)管理公司確定發(fā)展目標(biāo),充分挖掘自身潛力,刻意提升企業(yè)核心競(jìng)爭(zhēng)能力,制定相應(yīng)的提升服務(wù)質(zhì)量和品牌策劃戰(zhàn)略,拓展服務(wù)理念戰(zhàn)略,并通過(guò)有效的戰(zhàn)略實(shí)施手段,進(jìn)行戰(zhàn)略目標(biāo)分解,為公司的內(nèi)部管理制定行動(dòng)綱領(lǐng)和理論基礎(chǔ),在此基礎(chǔ)上再細(xì)化制定戰(zhàn)略實(shí)施措施,以具體工作開(kāi)展來(lái)保證戰(zhàn)略目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)。

二、健全組織結(jié)構(gòu)

物業(yè)管理公司兼顧物業(yè)經(jīng)營(yíng)和物業(yè)管理服務(wù)兩大業(yè)務(wù)內(nèi)容,因此,健全的組織機(jī)構(gòu)和崗位管理體系是必不可少的。在滿足企業(yè)資質(zhì)的前提下,對(duì)于管理社區(qū),要根據(jù)社區(qū)的實(shí)際情況配備充足的小區(qū)管理人員和專業(yè)技術(shù)人員,提升物業(yè)服務(wù)等級(jí)和質(zhì)量;對(duì)于管理公司,也要根據(jù)企業(yè)發(fā)展的需要配備足夠的職能管理人員和經(jīng)營(yíng)人員,這是因?yàn)?,沒(méi)有足夠的管理人員幫助企業(yè)領(lǐng)導(dǎo)承擔(dān)起日常事務(wù)的管理工作,沒(méi)有足夠的參謀人員能夠幫助企業(yè)領(lǐng)導(dǎo)進(jìn)行經(jīng)營(yíng)策劃,必將導(dǎo)致企業(yè)領(lǐng)導(dǎo)整天忙于應(yīng)付各種瑣碎事件,陷入日常管理的泥潭,難以集中精力站在高端思考公司未來(lái)的發(fā)展方向和發(fā)展策略,常此以往,公司必然始終在出現(xiàn)問(wèn)題-解決問(wèn)題-再出現(xiàn)-再解決的低層次狀態(tài)下循環(huán),不可能實(shí)現(xiàn)企業(yè)高效快速的發(fā)展,這在國(guó)內(nèi)的很多物業(yè)管理公司非常普遍。因此,作為物業(yè)管理,必須強(qiáng)化公司,加強(qiáng)集中管理能力,統(tǒng)一經(jīng)營(yíng)策劃、設(shè)施維修服務(wù)管理、財(cái)務(wù)管理、人力資源管理和品牌宣傳等核心職能,將公司的管理提升到一個(gè)新的高度。

三、開(kāi)發(fā)業(yè)務(wù)項(xiàng)目

物業(yè)管理公司在提供房屋、設(shè)備設(shè)施的維修、維護(hù)和保養(yǎng),環(huán)境衛(wèi)生、安全消防、清潔綠化等的基本服務(wù)以外,還可進(jìn)行一些增值服務(wù)或綜合服務(wù),以整合和充分利用社會(huì)資源和社會(huì)服務(wù)供應(yīng)來(lái)提高公司的服務(wù)能力和品牌效益,常見(jiàn)的一般包括:

①便民服務(wù):提供方便居民入住前裝修裝飾材料、五金水暖以及日用百貨銷售場(chǎng)所,建立超市、菜市場(chǎng)、幼兒園、社區(qū)醫(yī)療所、警務(wù)治安室等。

②文化娛樂(lè):開(kāi)辦特色老年學(xué)校、健身運(yùn)動(dòng)協(xié)會(huì)、文化娛樂(lè)場(chǎng)所等。

③業(yè)主投訴協(xié)調(diào):設(shè)立社區(qū)調(diào)度指揮中心,協(xié)調(diào)解決居民投訴問(wèn)題。

④推出中介服務(wù):如房屋出租、出賣中介,家政服務(wù)中介等;

四、創(chuàng)建品牌服務(wù)

物業(yè)管理的實(shí)質(zhì)就是提供高效便捷的服務(wù),品牌和口碑是物業(yè)公司服務(wù)的核心,因此,物業(yè)管理公司應(yīng)該根據(jù)社區(qū)資源、小區(qū)特點(diǎn)、外部經(jīng)營(yíng)和內(nèi)部提升的不同需要,提供有針對(duì)性的應(yīng)對(duì)措施,致力于提升品牌的社區(qū)美譽(yù)度和業(yè)主認(rèn)知度,具體方式可考慮以下幾項(xiàng):

①政府與社區(qū)的銜接:建立與政府機(jī)關(guān)的良好關(guān)系,發(fā)展學(xué)校、銀行、商店、網(wǎng)絡(luò)通訊、飲食等公共服務(wù)部門(mén),企業(yè)機(jī)關(guān)的外包后勤服務(wù)業(yè)務(wù)。

②未改造的舊小區(qū)服務(wù):對(duì)現(xiàn)有的維持小區(qū),可以大力宣傳物業(yè)公司作為誠(chéng)信企業(yè),其企業(yè)經(jīng)營(yíng)的重點(diǎn)不是以賺錢為目的地,而是以社區(qū)和業(yè)主為中心,樹(shù)立物業(yè)公司負(fù)責(zé)任的外部形象。

③新建小區(qū)服務(wù):通過(guò)規(guī)范管理大力提高服務(wù)質(zhì)量,健全便民服務(wù)措施,建立良好社區(qū)文化,提升物業(yè)公司的品牌知名度。

④資質(zhì)注冊(cè)與質(zhì)量體系認(rèn)證方面:通過(guò)注冊(cè)高級(jí)別資質(zhì)和進(jìn)行iso9000質(zhì)量體系認(rèn)證,增強(qiáng)公司的宣傳力量,提高業(yè)主的信任度,提升品牌認(rèn)知度。

五、成本控制體系

建立嚴(yán)格的成本控制體系加強(qiáng)成本控制,節(jié)省費(fèi)用支出,建立目標(biāo)成本體系,使得企業(yè)在不影響所提供的服務(wù)質(zhì)量的前提下,達(dá)到成本的持續(xù)降低,是規(guī)范公司內(nèi)部管理,降低消耗,增效節(jié)支的重要工作內(nèi)容;因此,物業(yè)管理公司必須建立嚴(yán)格的成本控制和預(yù)算管理體系,通過(guò)對(duì)工作流程的精細(xì)梳理和權(quán)責(zé)體系的明確界定,對(duì)公司的采購(gòu)成本、營(yíng)銷成本、人力成本、管理成本以及財(cái)務(wù)成本等進(jìn)行嚴(yán)格的規(guī)劃、評(píng)審和優(yōu)化工作,在事先、事中和事后進(jìn)行全方位的成本管理,最終達(dá)到持續(xù)降低成本的目的。

六、規(guī)范業(yè)務(wù)流程

流程是公司創(chuàng)造價(jià)值的機(jī)制,對(duì)企業(yè)的業(yè)務(wù)流程進(jìn)行根本性再思考和徹底性再設(shè)計(jì),理順公司內(nèi)外關(guān)系和工作銜接,從而獲得在成本、質(zhì)量、服務(wù)和速度等方面業(yè)績(jī)的巨大改善,使得企業(yè)能最大限度地適應(yīng)以‘顧客、競(jìng)爭(zhēng)和變化’ 為特征的現(xiàn)代企業(yè)經(jīng)營(yíng)環(huán)境,對(duì)于物業(yè)管理公司這類服務(wù)型企業(yè)至關(guān)重要。

通常意義上,物業(yè)管理的全流程如下:

對(duì)于每一項(xiàng)工作流程,都應(yīng)該明確其工作目標(biāo)、適用范圍、相關(guān)術(shù)語(yǔ)與定義、涉及的部門(mén)與崗位以及其負(fù)有的權(quán)責(zé)、工作程序、關(guān)鍵控制點(diǎn)和核心重要輸入輸出,并配以相應(yīng)的操作性表單,保證工作內(nèi)容無(wú)縫銜接、工作人員克盡職守,最終實(shí)現(xiàn)工作任務(wù)的圓滿完成和企業(yè)發(fā)展目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)。

七、健全人力資源管理體系

物業(yè)管理公司必須建立科學(xué)的人力資源規(guī)劃、嚴(yán)格的績(jī)效考核體系和市場(chǎng)化的薪酬管理體系為核心內(nèi)容的人力資源管理體系,充分調(diào)動(dòng)優(yōu)秀員工的工作積極性和企業(yè)認(rèn)同感,為企業(yè)發(fā)展目標(biāo)提供根本保障。

人力資源規(guī)劃——按現(xiàn)代企業(yè)管理原則編制企業(yè)的人力資源規(guī)劃,包括企業(yè)的人員編制計(jì)劃、人才的職業(yè)生涯規(guī)劃、人才更換和人才儲(chǔ)備計(jì)劃以及員工的培訓(xùn)與教育制度與計(jì)劃等。

績(jī)效考核——建立基于安全指標(biāo)、環(huán)境指標(biāo)、綠化指標(biāo)、設(shè)備指標(biāo)、房管指標(biāo)、客服指標(biāo)、培訓(xùn)指標(biāo)、內(nèi)審指標(biāo)、滿意工程指標(biāo)等九大模塊的kpi指標(biāo)(KPI(Key Performance Indicators)意為關(guān)鍵績(jī)效指標(biāo),來(lái)自美國(guó)哈佛商學(xué)院教授羅伯.柯普朗(Robert S. Kaplan)和管理大師戴維.諾頓(David P. Norton)的“平衡計(jì)分卡”(Balanced Scorecard)體系),設(shè)計(jì)考核制度和管理辦法,設(shè)計(jì)考核應(yīng)用表單,指導(dǎo)考核工作開(kāi)展。

薪酬體系——規(guī)劃公司的薪酬、福利政策等方面的制度,按現(xiàn)代企業(yè)制度規(guī)劃公司工資及福利方案,使其具有競(jìng)爭(zhēng)力、公平性,并解決員工的后顧之憂,針對(duì)公司發(fā)展需要和不同層次的人員設(shè)計(jì)利益激勵(lì)機(jī)制。

八、建立服務(wù)質(zhì)量管理體系

篇10

關(guān)鍵詞: 棉紡織; 涉稅; 審計(jì)方法

中圖分類號(hào): F426 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A 文章編號(hào): 1009-8631(2012)08-0018-02

棉紡織行業(yè)作為紡織產(chǎn)業(yè)的基礎(chǔ)性行業(yè),是印染、色織、針織、服裝行業(yè)的上游行業(yè),其進(jìn)步和健康發(fā)展直接影響并帶動(dòng)著整個(gè)紡織行業(yè)的進(jìn)步。針對(duì)棉紡織行業(yè)出現(xiàn)的混淆抵扣標(biāo)準(zhǔn),虛開(kāi)發(fā)票,虛列成本;應(yīng)稅與非應(yīng)稅項(xiàng)目劃分不清,多抵扣增值稅;部分半成品直接銷售不計(jì)收入;次品成本轉(zhuǎn)嫁;賬外經(jīng)營(yíng),偷逃稅款等涉稅問(wèn)題,本文從收入的確定、產(chǎn)品成本的核算、固定資產(chǎn)的管理、期間費(fèi)用的確認(rèn)四個(gè)方面,談?wù)勏鄳?yīng)的審計(jì)方法。

一、棉紡織行業(yè)存在的涉稅問(wèn)題

(一)收入的確認(rèn)

1.涉稅問(wèn)題一:以產(chǎn)品抵換加工費(fèi),不作銷售處理

棉紡織行業(yè)發(fā)外加工現(xiàn)象比較普遍,企業(yè)為了實(shí)現(xiàn)資金利用最大化,往往采取以產(chǎn)品抵加工費(fèi)的現(xiàn)象,而加工企業(yè)一般將所抵產(chǎn)品直接銷售給批發(fā)市場(chǎng)不開(kāi)發(fā)票,從而導(dǎo)致加工費(fèi)和所抵產(chǎn)品增值稅流失。

2.涉稅問(wèn)題二:半成品銷售不入賬,偷逃稅款

棉紡織企業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中,會(huì)形成精梳棉、紗等半成品,企業(yè)往往不入庫(kù)而直接銷售,不入賬,導(dǎo)致稅收流失。

3.涉稅問(wèn)題三:廢料、刀口布、材料包裝物等銷售不入賬

棉紡織企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生棉籽、廢棉、刀口布以及材料包裝廢料等,部分棉紡織企業(yè)將其銷售后不入賬,而收入直接納入小金庫(kù)或長(zhǎng)期虛掛往來(lái)賬戶。

4.涉稅問(wèn)題四:現(xiàn)金交易銷售收入不入賬

由于棉紡織行業(yè)屬于生產(chǎn)技術(shù)要求低,勞動(dòng)密集型行業(yè),這些年來(lái),一些規(guī)模小、生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)不規(guī)范的加工型棉紡織企業(yè)不斷涌現(xiàn),由此形成的棉紡織企業(yè)委外加工和現(xiàn)金交易情況比較普遍,且存在瞞報(bào)銷售偷逃稅款的現(xiàn)象。

(二)產(chǎn)品成本核算

1.涉稅問(wèn)題一:成本轉(zhuǎn)嫁

棉紡織企業(yè)在生產(chǎn)過(guò)程中,會(huì)積壓一部分次品布和廢布,對(duì)于企業(yè)來(lái)說(shuō),這部分產(chǎn)品的市場(chǎng)價(jià)值一般來(lái)說(shuō)要低于成本價(jià),企業(yè)往往把這部分次品布和廢布的成本轉(zhuǎn)嫁到實(shí)現(xiàn)銷售的合格品的成本中,從而調(diào)減利潤(rùn)。

2.涉稅問(wèn)題二:改變存貨計(jì)價(jià)方法多結(jié)轉(zhuǎn)成本

一些棉紡織企業(yè),為了調(diào)節(jié)利潤(rùn)而在各年度之間或年度內(nèi)改變存貨計(jì)價(jià)方法。

3.涉稅問(wèn)題三:計(jì)劃成本核算不規(guī)范

棉紡織企業(yè)為了在成本核算時(shí),應(yīng)對(duì)棉花市場(chǎng)價(jià)格的經(jīng)常性波動(dòng),采用計(jì)劃成本法進(jìn)行核算。按照現(xiàn)行有關(guān)規(guī)范,利用計(jì)劃成本法進(jìn)行存貨核算時(shí),企業(yè)對(duì)存貨的計(jì)劃成本和實(shí)際成本之間的差異應(yīng)當(dāng)單獨(dú)核算,按期結(jié)轉(zhuǎn)應(yīng)負(fù)擔(dān)的成本差異,將計(jì)劃成本調(diào)整為實(shí)際成本。而企業(yè)為了人為調(diào)節(jié)成本,通過(guò)頻繁調(diào)控計(jì)劃成本和年終一次性結(jié)轉(zhuǎn)成本差異等方法,降低企業(yè)利潤(rùn)。

4.涉稅問(wèn)題四:食堂、浴室領(lǐng)用煤、耗汽進(jìn)項(xiàng)不轉(zhuǎn)出,成本直接在制造費(fèi)用中列支

棉紡織行業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中需要用蒸汽,一般有兩種來(lái)源方式:一是通過(guò)自用煤鍋爐生產(chǎn)蒸汽,二是購(gòu)買熱電廠的管道蒸汽。企業(yè)食堂、浴室等福利部門(mén)耗用的煤和蒸汽,往往不單獨(dú)核算,而是一并作為生產(chǎn)用輔助材料計(jì)入生產(chǎn)成本,并抵扣稅金。

(三)固定資產(chǎn)的管理

棉紡織企業(yè)由于面臨設(shè)備和技術(shù)的更新,一批技術(shù)先進(jìn)的紡織設(shè)備逐漸替代了老設(shè)備。為了加快老設(shè)備的淘汰,企業(yè)改變折舊方法或減少折舊年限,而不向稅務(wù)機(jī)關(guān)備案,導(dǎo)致折舊成本增加。主要涉稅問(wèn)題是:任意改變折舊方法或折舊年限,多結(jié)轉(zhuǎn)成本。

(四)期間費(fèi)用的確認(rèn)

1.涉稅問(wèn)題一:利息資本化問(wèn)題

棉紡織企業(yè)為了增強(qiáng)公司的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力,不斷擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模,購(gòu)建固定資產(chǎn)的借款利息一般允許計(jì)入相關(guān)資產(chǎn)的成本,即所謂的利息資本化。但有些企業(yè)則將應(yīng)資本化的利息全部記入當(dāng)期費(fèi)用,從而減少當(dāng)期利潤(rùn)。

2.涉稅問(wèn)題二:外幣業(yè)務(wù)核算不規(guī)范

棉紡織企業(yè)引進(jìn)國(guó)外先進(jìn)設(shè)備時(shí),往往涉及到外幣業(yè)務(wù)核算,部分企業(yè)在將外幣金額折算為記帳本位幣時(shí),選用的方法不規(guī)范,其匯兌損益,往往在設(shè)備安裝竣工前后,全部計(jì)入當(dāng)期損益,未計(jì)入相關(guān)固定資產(chǎn)的成本。

二、棉紡織行業(yè)涉稅的審計(jì)方法

(一)收入的確認(rèn)

1.涉稅問(wèn)題一:以產(chǎn)品抵換加工費(fèi),不作銷售處理

審計(jì)方法:

審計(jì)人員可以查核企業(yè)委托加工材料明細(xì)賬、發(fā)外加工記錄表和加工合同,根據(jù)投入產(chǎn)出率或加工合同注明損耗率、成品率,核對(duì)發(fā)外數(shù)量和加工收回?cái)?shù)量是否匹配,從而確定以產(chǎn)品抵換加工費(fèi)數(shù)量和金額,據(jù)以補(bǔ)稅。

2.涉稅問(wèn)題二:半成品銷售不入賬,偷逃稅款

審計(jì)方法:

(1)掌握棉紡織企業(yè)生產(chǎn)工藝流程,核對(duì)生產(chǎn)流程記錄(車間原始記錄)、入庫(kù)單和出庫(kù)單,對(duì)生產(chǎn)環(huán)節(jié)各項(xiàng)制度進(jìn)行內(nèi)控測(cè)試;

(2)必要時(shí)可以向車間統(tǒng)計(jì)人員進(jìn)行詢問(wèn)調(diào)查,根據(jù)投入產(chǎn)出法測(cè)算企業(yè)產(chǎn)品數(shù)量,并與企業(yè)賬面數(shù)據(jù)核對(duì),確定是否存在賬外銷售行為。

3.涉稅問(wèn)題三:廢料、刀口布、材料包裝物等銷售不入賬

審計(jì)方法:

(1)對(duì)生產(chǎn)環(huán)節(jié)的內(nèi)部控制制度進(jìn)行測(cè)試;

(2)詢問(wèn)車間管理人員,對(duì)廢料的處理方式,查看相關(guān)廢料處理臺(tái)賬和有關(guān)記錄,如果廢料通過(guò)倉(cāng)庫(kù)處理,還必須查看倉(cāng)庫(kù)相關(guān)臺(tái)賬和記錄,并與財(cái)務(wù)上其他業(yè)務(wù)收入賬戶進(jìn)行核對(duì),如有差異,應(yīng)作補(bǔ)稅處理。

(3)對(duì)一些長(zhǎng)期掛賬的其他應(yīng)付款科目,要查明原因,必要時(shí)可以通過(guò)函證或?qū)嵉卣{(diào)查的形式進(jìn)行核實(shí)。

(4)還可以對(duì)企業(yè)的保險(xiǎn)箱等進(jìn)行突擊檢查,以防企業(yè)私設(shè)小金庫(kù)

4.涉稅問(wèn)題四:現(xiàn)金交易銷售收入不入賬

審計(jì)方法:

(1)審計(jì)人員可以根據(jù)企業(yè)實(shí)際情況,對(duì)企業(yè)的投入產(chǎn)出、能耗率等數(shù)據(jù)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)算;

(2)將企業(yè)出庫(kù)單(發(fā)運(yùn)記錄)、送貨單、銷售合同與財(cái)務(wù)賬冊(cè)反映的往來(lái)客戶信息進(jìn)行核對(duì),根據(jù)倉(cāng)庫(kù)明細(xì)賬和盤(pán)點(diǎn)表等原始資料對(duì)存貨內(nèi)容進(jìn)行真實(shí)性測(cè)試,以確認(rèn)是否存在未及時(shí)開(kāi)票申報(bào)收入或產(chǎn)品發(fā)出未做銷售的行為;

(3)也可結(jié)合“其他應(yīng)付款”貸方科目、“預(yù)收賬款”“其他應(yīng)收款”貸方科目對(duì)預(yù)收款項(xiàng)目進(jìn)行跟蹤審計(jì)。

(4)對(duì)于發(fā)外加工業(yè)務(wù),可參照產(chǎn)品抵換加工費(fèi)審計(jì)方法

(二)產(chǎn)品成本核算

1.涉稅問(wèn)題一:成本轉(zhuǎn)嫁

審計(jì)方法:

審計(jì)人員可以對(duì)企業(yè)產(chǎn)成品明細(xì)賬進(jìn)行比較分析,將不同型號(hào)產(chǎn)成品的期初單位成本余額與當(dāng)期入庫(kù)的產(chǎn)成品單位成本進(jìn)行比對(duì),差異較大的且屬于成本轉(zhuǎn)嫁性質(zhì)的,應(yīng)重新進(jìn)行正確的成本核算。

2.涉稅問(wèn)題二:改變存貨計(jì)價(jià)方法多結(jié)轉(zhuǎn)成本

審計(jì)方法:

審計(jì)人員可以通過(guò)遵行性測(cè)試,審計(jì)企業(yè)選擇存貨計(jì)價(jià)方法的依據(jù)以及前后各期的一貫性。對(duì)企業(yè)銷售成本率年度或月度間有明顯異常的,應(yīng)該進(jìn)行重點(diǎn)測(cè)試,以確定企業(yè)是否存在人為改變存貨計(jì)價(jià)方法的情況。

3.涉稅問(wèn)題三:計(jì)劃成本核算不規(guī)范

審計(jì)方法:

(1)檢查企業(yè)有沒(méi)有制定各種存貨的計(jì)劃成本目錄。檢查存貨的分類、各種存貨的名稱、規(guī)格、編號(hào)、單位和計(jì)劃單位成本。除一些特殊情況外,計(jì)劃單位成本在年度內(nèi)一般不作調(diào)整。如果進(jìn)行了調(diào)整,應(yīng)考慮到是否進(jìn)行利潤(rùn)調(diào)控。同時(shí)應(yīng)關(guān)注計(jì)劃成本制定的合理性,可與同行業(yè)水平進(jìn)行比較。

(2)檢查收到存貨時(shí),有沒(méi)有按計(jì)劃單位成本計(jì)算收到存貨的計(jì)劃成本并填入收料單內(nèi),將實(shí)際成本與計(jì)劃成本的差額作為“材料成本差異”分類登記。

(3)發(fā)出存貨負(fù)擔(dān)的成本差異必須按月分?jǐn)?,不得在季末或年末一次分?jǐn)?。檢查企業(yè)在核算過(guò)程是否存在違規(guī)的會(huì)計(jì)處理。

4.涉稅問(wèn)題四:食堂、浴室領(lǐng)用煤、耗汽進(jìn)項(xiàng)不轉(zhuǎn)出,成本直接在制造費(fèi)用中列支

審計(jì)方法:

(1)獲取企業(yè)領(lǐng)料單,核實(shí)各部門(mén)領(lǐng)用煤的數(shù)量,對(duì)照企業(yè)賬務(wù)處理情況,確定企業(yè)福利用煤實(shí)際數(shù)量,據(jù)以補(bǔ)交增值稅,同時(shí)調(diào)整成本項(xiàng)目;

(2)對(duì)于外購(gòu)蒸汽,通過(guò)實(shí)地查核企業(yè)蒸汽計(jì)量總表和分表,根據(jù)企業(yè)浴室、食堂計(jì)量表分表上記錄的用汽量來(lái)作為企業(yè)進(jìn)項(xiàng)稅金未轉(zhuǎn)出計(jì)稅依據(jù),同時(shí)調(diào)整成本項(xiàng)目。

(三)固定資產(chǎn)的管理

涉稅問(wèn)題一:任意改變折舊方法或折舊年限,多結(jié)轉(zhuǎn)成本。

審計(jì)方法:

審計(jì)人員在對(duì)固定資產(chǎn)和累計(jì)折舊項(xiàng)目進(jìn)行審計(jì)時(shí),對(duì)照企業(yè)固定資產(chǎn)和累計(jì)折舊明細(xì)賬,核實(shí)企業(yè)折舊年限和折舊率是否正確,折舊方法是否遵守一貫性原則。

(四)期間費(fèi)用的確認(rèn)

1.涉稅問(wèn)題一:利息資本化問(wèn)題

審計(jì)方法:

關(guān)注借款合同是否與購(gòu)建的固定資產(chǎn)有關(guān),結(jié)合固定資產(chǎn)交付使用記錄及質(zhì)檢、消防等相關(guān)部門(mén)的驗(yàn)收記錄,確定應(yīng)資本化的利息是否合理。

2.涉稅問(wèn)題二:外幣業(yè)務(wù)核算不規(guī)范

審計(jì)方法:

查核企業(yè)外幣業(yè)務(wù)的核算是否與制度規(guī)定相符,前后各期采用的折算方法是否一致,對(duì)匯兌損益的處理方法是否符合規(guī)定。

我國(guó)是世界產(chǎn)棉大國(guó),棉紡織行業(yè)得到了快速發(fā)展,并對(duì)世界棉紡織業(yè)的原料供應(yīng)、產(chǎn)能水平、加工貿(mào)易的發(fā)展都已起到了舉足輕重的影響。通過(guò)一定的審計(jì)方法,客觀地獲取和評(píng)價(jià)有關(guān)涉稅事項(xiàng)認(rèn)定的證據(jù),能夠有效地起著財(cái)政監(jiān)督的作用。

參考文獻(xiàn):

[1] 解忠艷.稅收審計(jì)式稽查的有關(guān)問(wèn)題研究[J].天津經(jīng)濟(jì),2011.

[2] 何媛.淺談?dòng)?jì)算機(jī)輔助審計(jì)在稅收征管審計(jì)中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代審計(jì)與經(jīng)濟(jì),2010,6.

[3] 羅濤.深化稅收審計(jì)推動(dòng)稅制改革和體制機(jī)制創(chuàng)新[J].中國(guó)審計(jì),2010,2.